Nghiên cứu bệnh nấm hại một số cây rau họ bầu bí (cucurbitaceae) tại hà nội và vùng phụ cận năm 2013 - 2014

3.5.3 Nghiên cứu, xác định phạm vi ký chủ của nấm Erysiphe cichoracearum hại một số cây rau họ bầu bí 27 3.5.4 Khảo sát hiệu lực phòng trừ bệnh phấn trắng và bệnh giả sương mai 4.1 Điều

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

*************************

PHẠM LÊ HÀ

NGHIÊN CỨU BỆNH NẤM HẠI MỘT SỐ CÂY RAU

HỌ BẦU BÍ (CUCURBITACEAE) TẠI HÀ NỘI

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan rằng công trình này là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các kết quả nghiên cứu nêu trong luận văn là trung thực, chưa từng được sử dụng cho một báo cáo luận văn nào và chưa được sử dụng bảo vệ học vị nào Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho tôi thực hiện luận văn này đã được cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đã được chỉ rõ nguồn gốc

Hà Nội, ngày 12 tháng 9 năm 2014

Tác giả luận văn

Phạm Lê Hà

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin bày tỏ sự cảm ơn sâu sắc nhất tới PGS.TS Đỗ Tấn Dũng - Bộ môn Bệnh cây - Khoa Nông học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam người đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ và động viên tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn tốt nghiệp

Tôi cũng xin trân trọng cảm ơn các thầy, cô giáo khoa Nông học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam

Tôi xin chân thành cảm ơn tới gia đình, những người thân, bạn bè và đồng nghiệp đã tạo điều kiện về mọi mặt cho tôi trong quá trình thực hiện đề tài này

Một lần nữa tôi xin trân trọng cảm ơn!

Hà Nội, ngày 12 tháng 9 năm 2014

Tác giả luận văn

Phạm Lê Hà

2.1 Tình hình sản xuất cây rau họ bầu bí trên thế giới và ở Việt Nam 3 2.1.1 Tình hình sản xuất cây rau họ bầu bí trên thế giới 3 2.1.2 Tình hình sản xuất cây rau họ bầu bí tại Việt Nam 5 2.2 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí trên thế giới

2.2.1 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí trên thế giới 6 2.2.2 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm hại bầu bí tại Việt Nam 15

3.5.3 Nghiên cứu, xác định phạm vi ký chủ của nấm Erysiphe

cichoracearum hại một số cây rau họ bầu bí 27 3.5.4 Khảo sát hiệu lực phòng trừ bệnh phấn trắng và bệnh giả sương mai

4.1 Điều tra thành phần bệnh nấm hại một số cây rau họ bầu bí tại Hà

4.2 Điều tra diễn biến một số bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí tại Hà

4.2.1 Điều tra diễn biến bệnh giả sương mai Pseudoperonospora

cubensis hại cây dưa chuột tại xã Văn Đức, Gia Lâm vụ xuân hè

4.2.2 Điều tra diễn biến bệnh giả sương mai Pseudoperonospora

cubensis hại dưa chuột tại xã Nam Hồng, Đông Anh vụ xuân hè

4.2.3 Điều tra diễn biến bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa

chuột tại xã Văn Đức, Gia Lâm vụ xuân hè năm 2014 43

4.2.4 Điều tra diễn biến bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa

chuột tại xã Nam Hồng, Đông Anh vụ xuân hè năm 2014 45

4.2.5 Điều tra diễn biến bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp

đắng tại xã Văn Đức, Gia Lâm vụ xuân hè năm 2014 46

4.2.6 Điều tra diễn biến bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp

4.2.7 Điều tra diễn biến bệnh thán thư Colletotrichum lagenarium và

bệnh đốm vòng Alternaria alternata hại bí đỏ tại xã Yên Mỹ,

4.2.8 Điều tra diễn biến bệnh lở cổ rễ Rhizoctonia solani hại dưa chuột

4.3 Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của các nấm hại cây rau họ

4.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển

4.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển

4.3.3 Nghiên cứu xác định phổ ký chủ của nấm gây bệnh phấn trắng hại

4.4 Khảo sát hiệu lực của một số thuốc hóa học phòng trừ bệnh phấn

trắng và giả sương mai hại dưa chuột ngoài đồng ruộng 59 4.4.1 Khảo sát hiệu lực của một số thuốc hóa học phòng trừ bệnh phấn

4.4.2 Khảo sát hiệu lực của một số thuốc hóa học phòng trừ bệnh giả

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

HLPH (%): Hiệu lực phòng trừ

E cichoracearum: Erysiphe cichoracearum

P cichoracearum: Pseudoperonospora cubensis

C lagenarium : Colletotrichum lagenarium

C citrullina: Cercospora citrullina

R solani: Rhizoctonia solani

A alternata: Alternaria alternata

DANH MỤC BẢNG

4.1 Thành phần bệnh nấm hại một số cây rau bầu bí tại Hà Nội vụ hè

4.2 Thành phần bệnh nấm hại một số cây rau bầu bí tại Hà Nội vụ xuân

4.3 Diễn biến bệnh giả sương mai Pseudoperonospora cubensis hại cây

dưa chuột tại xã Văn Đức, Gia Lâm vụ xuân hè năm 2014 40

4.4 Diễn biến bệnh giả sương mai Pseudoperonospora cubensis hại dưa

chuột tại xã Nam Hồng, Đông Anh vụ xuân hè năm 2014 41

4.5 Diễn biến bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa chuột

4.6 Diễn biến bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa chuột

tại xã Nam Hồng, Đông Anh vụ xuân hè năm 2014 45

4.7 Diễn biến bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp đắng tại xã

4.8 Diễn biến bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp đắng tại xã

4.9 Diễn biến bệnh thán thư Colletotrichum lagenarium và đốm vòng

Alternaria alternata hại cây bí đỏ tại xã Yên Mỹ, Thanh Trì vụ xuân

4.10 Diễn biến bệnh lở cổ rễ Rhizoctonia solani hại dưa chuột tại xã Văn

4.11 Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm

4.12 Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm

4.13 Kết quả lây nhiễm nhân tạo nấm Erysiphe cichoracearum trên cây

4.14 Kết quả lây nhiễm nhân tạo nấm Erysiphe cichoracearum trên cây bí đỏ 57

4.15 Kết quả lây nhiễm nấm Erysiphe cichoracearum trên cây mướp đắng 58

4.16 Hiệu lực phòng trừ bệnh phấn trắng hại dưa chuột của các thuốc

4.17 Hiệu lực phòng trừ bệnh giả sương mai hại dưa chuột của các thuốc

DANH MỤC HÌNH

4 1 Triệu chứng bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa chuột 32 4.2 Triệu chứng bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại bí đỏ 32

4.4 Triệu chứng bệnh giả sương mai Pseudoperonospora cubensis trên

4.5 Cành bào tử phân sinh và bào tử phân sinh nấm Pseudoperospora

4.6 Triệu chứng bệnh thán thư Colletotrichum lagenarium trên cây bí đỏ 35

4.8 Triệu chứng bệnh đốm vòng Alternaria alternata trên cây mướp đắng 37

4.10 Triệu chứng bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp đắng 38 4.11 Cành bào tử phân sinh và bào tử phân sinh nấm Cercospora citrullina 38

4.14 Đặc điểm tản nấm Alternaria alternata trên môi trường PGA 54 4.15 Đặc điểm tản nấm Alternaria alternata trên môi trường PCA 54 4.16 Triệu chứng lây nhiễm nấm Erysiphe cichoracearum trên lá dưa chuột 56 4.17 Lây nhiễm nấm Erysiphe cichoracearum trên lá bí đỏ có sát thương 58 4.18 Lây nhiễm nấm Erysiphe cichoracearum trên lá bí đỏ không sát thương 58

DANH MỤC ĐỒ THỊ

4.1 Diễn biến bệnh giả sương mai Pseudoperonospora cubensis hại cây

dưa chuột tại xã Văn Đức, Gia Lâm vụ xuân hè năm 2014 40 4.2 Diễn biến bệnh giả sương mai Pseudoperonospora cubensis hại dưa

chuột tại xã Nam Hồng, Đông Anh vụ xuân hè năm 2014 42 4.3 Diễn biến bệnh giả sương mai hại dưa chuột tại xã Nam Hồng,

Đông Anh và xã Văn Đức, Gia Lâm vụ xuân hè 2014 42 4.4 Diễn biến bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa chuột

4.5 Diễn biến bệnh phấn trắng Erysiphe cichoracearum hại dưa chuột

tại xã Nam Hồng, Đông Anh vụ xuân hè năm 2014 46 4.6 Diễn biến bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp đắng tại xã

4.7 Diễn biến bệnh đốm lá Cercospora citrullina hại mướp đắng tại xã

Vân Côn, Hoài Đức vụ xuân hè và vụ hè năm 2014 49 4.8 Diễn biến bệnh thán thư Colletotrichum lagenarium và đốm vòng

Alternaria alternata hại cây bí đỏ tại Yên Mỹ, Thanh Trì vụ xuân hè 2014 50

4.9 Diễn biến bệnh lở cổ rễ Rhizoctonia solani hại dưa chuột tại xã Văn

4.10 Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm

1 MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Rau xanh là cây thực phẩm có giá trị dinh dưỡng, kinh tế cao và không thể thiếu trong bữa ăn hàng ngày của con người Diện tích trồng rau ở nước ta đã không ngừng tăng lên trong những năm gần đây Năm 1997, diện tích trồng rau ở nước ta là 297,3 nghìn ha, năm 2000 là 340 nghìn ha, đến năm 2004 diện tích trồng rau đã lên tới 614,5 nghìn ha, chiếm xấp xỉ 7% đất sản xuất nông nghiệp và 10% đất trồng cây hàng năm (Trần Khắc Thi, 2005)

Trong các loại rau được gieo trồng, cây rau họ bầu bí được trồng phổ biến

ở các địa phương trên cả nước với diện tích lớn như: dưa chuột, bí xanh, bí đỏ, mướp, mướp đắng Ngoài việc tác dụng làm thực phẩm thì cây họ bầu bí còn

có tác dụng làm thuốc Đây cũng là một trong những mặt hàng xuất khẩu của nhiều nước trên thế giới

Canh tác cây rau họ bầu bí cũng như các cây rau khác ở Việt Nam gặp phải rất nhiều vấn đề ảnh hưởng tới năng suất và phẩm chất Do cây rau họ bầu

bí thích hợp trong điều kiện thời tiết nóng ẩm nhưng điều kiện này cũng thuận lợi cho các loại sâu bệnh phát triển Một số bệnh hại như phấn trắng, giả sương mai, đốm lá, khảm lá gây hại nặng ở tất cả các vùng trồng cây rau họ bầu bí, làm giảm năng suất, thậm chí gây thất thu Việc phòng chống bệnh hại cây họ bầu bí hiện nay gặp rất nhiều khó khăn Nhiều biện pháp phòng chống đã được đưa ra, nhưng cho đến nay biện pháp hóa học vẫn là chủ yếu

Từ nhiều năm qua, các nhà khoa học trên thế giới và Việt Nam đã nghiên cứu khá kỹ một số bệnh do nấm hại trên một vài cây rau họ bầu bí, tuy nhiên lại thiếu những nghiên cứu tổng hợp, đầy đủ các bệnh nấm hại các cây rau họ bầu bí Xuất phát từ thực tế sản xuất, được sự phân công của Khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam, dưới sự hướng dẫn của PGS.TS Đỗ Tấn Dũng chúng tôi

tiến hành đề tài: “Nghiên cứu bệnh nấm hại một số cây rau họ bầu bí (Cucurbitaceae) tại Hà Nội và vùng phụ cận năm 2013 - 2014”

1.2 Mục đích và yêu cầu của đề tài

1.2.1 Mục đích

Tìm hiểu tình hình bệnh nấm gây hại trên cây rau họ bầu bí tại Hà Nội và vùng phụ cận năm 2013 - 2014 Xác định nguyên nhân gây bệnh, nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái của một số bệnh nấm chính hại cây rau họ bầu bí và biện pháp phòng trừ

2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Tình hình sản xuất cây rau họ bầu bí trên thế giới và ở Việt Nam

2.1.1 Tình hình sản xuất cây rau họ bầu bí trên thế giới

Họ bầu bí (Cucurbitaceae) thuộc bộ Cucurbitales gồm khoảng 825 - 845 loài bao gồm những cây rau rất phổ biến trong sản xuất nông nghiệp hiện nay như: dưa

chuột (Cucumis sativus), bí đỏ (Cucurbita pepo, Cucurbita mixta, Cucurbita maxima, Cucurbita moschata), bí đao (Benincasa hispida), dưa hấu (Citrullus lanatus), mướp hương (Luffa aegyptiaca), mướp đắng (Momordica charantia)…

Phần lớn cây trong họ bầu bí đều có dạng thân leo, sống 1 năm (Wikipedia, 2013)

Cây dưa chuột (Cucumis sativus) có nguồn gốc ở Ấn Độ và đã được người

Ấn Độ trồng để sử dụng làm thực phẩm từ cách đây khoảng 3000 năm Từ Ấn

Độ dưa chuột được đưa đến Hy Lạp và Italia và nó nhanh chóng trở thành cây trồng chủ lực trong nền nông nghiệp của đế chế La Mã Từ Rome dưa chuột được lan truyền sang Trung Quốc và phía nam nước Nga sau đó được đưa ra khắp thế giới bởi chủ nghĩa thực dân và thương mại bản địa (Wikipedia, 2013) Theo thống kê của FAO (2013) diện tích trồng dưa chuột trên toàn thế giới đạt 2,1 triệu ha với sản lượng khoảng 65,3 triệu tấn Năng suất trung bình cũng tăng liên tục qua các năm, nếu như năng suất trung bình năm 2000 chỉ là 17 tấn/ha thì đến năm 2011 năng suất trung bình của dưa chuột trên thế giới đã đạt 31,3 tấn/ha

Cây bí đao (Benincasa hispida) là cây rau trong họ bầu bí được trồng làm

thực phẩm sớm nhất Có nhiều nghiên cứu chứng minh rằng cây bí đao được trồng ở Florida khoảng 10.000 năm trước công nguyên, ở nam Mexico khoảng

7000 năm trước công nguyên và cũng lan truyền ra khắp thế giới bằng con đường thương mại (Kuntal Ghosh et al., 2011) Ngoài tác dụng làm thực phẩm thì bí đao cũng được dùng như là một vị thuốc trong Đông y Bí đao có tác dụng kiện tỳ, ích khí, tiêu thủy Trường kỳ ăn bí đao có thể tiêu trừ nước thừa trong cơ thể, giảm cân, chống béo phì Bí đao thích hợp cho người bị khí hư tỳ yếu, béo bệu,

phù thũng cục bộ hoặc toàn thân Bí đao được ghi trong các phương thuốc bí truyền làm đẹp của các mỹ nhân, cung phi, ngoài ra bí đao có tác dụng giải khát, thanh tâm hư nhiệt phiền, tiêu úng thủy trướng và lợi thủy (Minh Phúc, 2012)

Cây dưa hấu (Citrullus lanatus) hoang dã phân bố rộng rãi ở châu Phi và

châu Á, nhưng có nguồn gốc từ tự nhiên ở Nam Phi, Namibia, Botswana, Zimbabwe, Mozambique, Zambia và Malawi Dưa hấu được được thuần hóa cách đây khoảng 4.000 năm Người dân bản địa Kalahari, chủ yếu sử dụng dưa hấu để lấy nước Từ đó dưa hấu lan truyền đến Địa Trung Hải và theo hướng Đông sang Ấn Độ Dưa hấu là cây có sản lượng cũng như giá trị kinh tế cao nhất trong các cây rau họ bầu bí trên thế giới Theo thống kê của FAO (2013), trong năm 2011 sản lượng dưa hấu trên thế giới đạt khoảng 104 triệu tấn với giá trị 11

tỷ USD với tổng diện tích gieo trồng khoảng 2,97 triệu ha, Trung Quốc là nước

có sản lượng lớn nhất khoảng 69,5 triệu tấn giá trị 7,5 tỷ USD Các nước có diện tích trồng dưa hấu hàng đầu trên thế giới là: Trung Quốc 1,8 triệu ha, Nga 160.000 ha, Thổ Nhĩ Kỳ 154.000 ha, Iran 143.000ha, Braxin 97.000 ha

Trên thế giới cây mướp đắng (Momordica charantia) được trồng rộng rãi

tại các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Châu Á, Châu Mỹ La Tinh, Châu Phi, các nước Trung Đông và vùng Caribe, các loại giống gieo trồng bao gồm cả các giống hoang dại và các giống đã được chọn tạo Tuy được trồng ở nhiều vùng trên thế giới nhưng mướp đắng được trồng nhiều nhất ở các nước Đông Nam Á

và Ấn Độ Một số nước sản xuất nhiều mướp đắng với sản lượng cao như Philippin đạt 18.000 tấn (năm 1992), Malaysia đạt 19.000 tấn (năm 1994), Trung Quốc cũng là nước sản xuất nhiều mướp đắng tuy nhiên chủ yếu để làm nguyên liệu cho y học (Trần Khắc Thi, 2007)

Theo trung tâm nghiên cứu và phát triển rau Châu Á AVRDC (2007), diện tích trồng mướp đắng của một số nước Đông Nam Á như sau: Philippin - 12.000

ha, Thái Lan - 3.000 ha, Indonesia - 8.000 ha Xu hướng chung trong chọn tạo giống mướp đắng trên thế giới là việc chọn tạo các giống có chất lượng vượt trội (quả ít đắng hơn), năng suất cao hơn và khả năng chống chịu sâu bệnh tốt hơn

2.1.2 Tình hình sản xuất cây rau họ bầu bí tại Việt Nam

Cũng như trên thế giới, cây rau họ bầu bí cùng với các cây trồng họ hòa thảo, họ đậu và họ cà là những cây trồng quan trọng nhất trong sản xuất nông nghiệp tại Việt Nam Các cây rau họ bầu bí được trồng phổ biến ở Việt Nam là: dưa chuột, dưa hấu, mướp hương, mướp đắng, bí ngô, bí xanh…

Dưa chuột là cây rau trong họ bầu bí được trồng với diện tích lớn nhất tại Việt Nam Năm 2009 diện tích trồng dưa chuột ở nước ta đạt 31.570 ha với năng suất trung bình khoảng 182,8 tạ/ha, cao hơn so với năng suất trung bình của toàn thế giới (Tổng cục thống kê, 2010) Dưa chuột được trồng ở tất cả các tỉnh phía Bắc và phía Nam, nhưng diện tích dưa chuột được trồng tập trung với diện tích lớn ở các tỉnh đồng bằng sông Hồng và đồng bằng sông Cửu Long Các vùng trồng dưa chuột tập trung như ở Vĩnh Phúc, Hưng Yên và Hà Nam đạt năng suất trên 230 tạ/ha cao hơn nhiều so với trung bình cả nước Hiện nay, ở các vùng trồng dưa chuột chỉ một phần diện tích được trồng bằng các giống dưa địa phương, còn lại hầu hết sử dụng các giống dưa chuột lai F1 được nhập nội, tuy có năng suất cao hơn nhưng khả năng kháng các loài dịch hại lại kém hơn so với các giống địa phương

Diện tích trồng dưa hấu ở Việt Nam tăng khá nhanh qua các năm, nếu như năm 2000 diện tích canh tác dưa hấu chỉ là 19.000 ha thì đến năm 2011 diện tích canh tác dưa hấu tại Việt Nam đã đạt 31.000 ha (FAO 2011), năng suất trung bình cũng tăng từ 10,5 tấn/ha năm 2000 tới 15,4 tấn/ha năm 2011 tuy nhiên năng suất này cũng chỉ bằng 50% của năng suất trung bình của toàn thế giới

Diện tích trồng mướp đắng ở Việt Nam theo AVRDC (năm 2007) là khoảng 12.000 ha Một số địa phương đang tích cực chuyển đổi cơ cấu cây trồng

từ trồng lúa sang trồng mướp đắng tại những vùng khô hạn không chủ động được nguồn nước Một số xã như: Sơn A, Thạch Lương, huyện Văn Chấn (Yên Bái) nhờ chuyển đổi từ trồng lúa sang mướp đắng đã góp phần cải thiện đáng kể thu nhập của nông dân Nếu chăm sóc tốt, phòng trừ sâu bệnh kịp thời thì 1 ha mướp đắng có thể cho thu nhập tới 80 triệu đồng (Nguyễn Viết Tôn, 2008)

Hiện nay, ở tỉnh Tiền Giang nông dân đang phát triển mô hình trồng

mướp đắng lấy hạt Theo người dân, trồng mướp đắng lấy hạt cho thu nhập cao hơn thu quả mướp đắng xanh (Đài phát thanh và truyền hình Tiền Giang, 2007)

2.2 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí trên thế giới và Việt Nam

2.2.1 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí trên thế giới

Cây rau họ bầu bí hầu hết sinh trưởng trong điều kiện khí hậu nóng, ẩm nên thuận lợi cho các bệnh nấm gây hại Ngày nay trên thế giới, đã xác định được thành phần bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí gồm khoảng 22 bệnh Các bệnh thường xuyên xuất hiện và gây hại trong quá trình canh tác các cây rau họ bầu bí là: bệnh phấn trắng, giả sương mai, đốm lá, đốm vòng, thán thư, lở cổ rễ (Martyn R D et al., 1993)

2.2.1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh phấn trắng

Trong các bệnh nấm gây hại trên cây rau họ bầu bí thì bệnh phấn trắng là một trong những bệnh nguy hiểm nhất, thường xuyên xuất hiện, làm giảm năng suất cũng như phẩm chất cây trồng Nguyên nhân gây bệnh phấn trắng trên cây

rau họ bầu bí là do nấm Erysiphe cichoracearum DC Giai đoạn sinh sản vô tính Oidium ambrosiae Thiimen Nấm Erysiphe cichoracearum ngoài khả năng gây

bệnh trên hầu hết các cây rau họ bầu bí như: dưa chuột, bí xanh, bí ngô, bầu… nấm còn gây hại trên hoa cúc, hoa hướng dương… (Amano K, 1986)

Bệnh phấn trắng gây hại cây rau họ bầu bí ngay từ giai đoạn cây con Triệu chứng bệnh trên lá ban đầu là những chòm nhỏ, bao phủ một lớp nấm trắng ở cả hai

bề mặt của lá Lá nhiễm bệnh bị cong nhẹ, giảm khả năng sinh trưởng, úa vàng và rụng Bệnh còn có thể gây hại cả thân, cành và hoa (Koike S T and Saenz G S, 1996)

Sợi nấm Erysiphe cichoracearum kích thước khoảng 50 - 90 × 2 - 10 µm

Sợi nấm tạo các vòi hút rộng 1 - 2 µm chọc vào lá để hút chất dinh dưỡng Cành bào tử phân sinh thẳng góc với sợi nấm Bào tử phân sinh hình trứng hoặc bầu dục Giai đoạn sinh sản hữu tính của nấm hình thành các quả thể kín hình cầu, màu đen, đường kính khoảng 80 - 160 µm Bên trong các quả thể chứa 5 - 25 túi, mỗi túi chứa 2 bào tử túi đơn bào, hình trứng, kích thước khoảng 8 - 30 × 11 - 20

µm (Braun U, 1987)

Nấm Erysiphe cichoracearum là nấm ký sinh chuyên tính, nấm hình thành

các vòi hút xâm nhập vào tế bào biểu bì của cây để hấp thu chất dinh dưỡng Bào

tử túi nảy mầm ở nhiệt độ 4° - 34°C, nhiệt độ tối thích 10° - 18°C Ống mầm được hình thành sau khi nảy mầm khoảng 2 giờ (Koike S T and Saenz G S, 1996)

Bào tử phân sinh nấm Erysiphe cichoracearum được hình thành cả ở trong

điều kiện thiếu ánh sáng Bào tử phân sinh nảy mầm ở nhiệt độ 7º - 32°C, nhiệt độ

tối thích 23° - 25°C, độ ẩm từ 60% - 80% Bào tử phân sinh nấm Erysiphe cichoracearum có thể tồn tại ở nhiệt độ -3ºC (Wankhade S V and Peshney

N L, 1992)

Nấm Erysiphe cichoracearum có thể phát tán nhờ gió, tàn dư thực vật và tồn tại trong đất Các bào tử túi của nấm Erysiphe cichoracearum rất hiếm khi có mặt

trong tự nhiên do đó ít có vai trò trong việc phát tán bệnh (Ivancia et al., 1992)

Để phòng trừ bệnh phấn trắng do nấm Erysiphe cichoracearum hại cây

rau họ bầu bí có thể sử dụng nhiều biện pháp khác nhau Biện pháp cơ giới: loại bảo tàn dư cây bệnh, vệ sinh đồng ruộng sạch sẽ, luân canh cây trồng, bón phân cân đối đặc biệt không bón thừa đạm (Ivancia et al., 1992) Biện pháp hóa học: có thể sử dụng các loại thuốc Flutriafol và carbendazim (Meeus and Wittouck, 1999), Flutriafol + carbendazim và benalaxyl + mancozeb (Vulsteke et al., 1996) Biện

pháp sinh học: có thể sử dụng một số loại nấm đối kháng như Macroilleis hauseri (Wu XB and Guo XL, 1987) và Ampelomyces quisqualis (Rankovic B, 1997) 2.2.1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh giả sương mai

Bệnh giả sương mai trên cây bầu bí được Berkeley và Curtis phát hiện và nghiên cứu đầu tiên ở Cuba vào năm 1868 (Berkeley MS and Curtis A, 1868) Tác

nhận gây bệnh là nấm Pseudoperonospora cubensis (Berk & M.A Curtis)

Rostovtzev 1903 Bệnh có thể được tìm thấy trong các khu vực ôn đới như Mỹ, châu

Âu, Nhật Bản, Australia và Nam Phi, vùng nhiệt đới và một số khu vực bán khô hạn như Trung Đông

Nấm Pseudoperonospora cubensis hầu như chỉ gây hại trên cây rau họ

bầu bí Nấm có thể gây hại trên 40 loài trong 20 chi của cây rau họ bầu bí như: dưa chuột, bí đao, bí ngô, dưa bở… (Palti and Cohen, 1980)

Celetti M and Roddy E (2010) nghiên cứu bệnh giả sương mai trên các cây rau họ bầu bí tại Ontario, Canada Kết quả nghiên cứu cho thấy nấm

Pseudoperonospora cubensis có 6 pathotype Nấm Pseudoperonospora cubensis

gây bệnh giả sương mai hại dưa chuột bao gồm các pathotype 1 đến pathotype 5, trên dưa hấu là pathotype 4 và pathotype 5, trên bí đao và bí ngô là pathotype 5, pathotype 6

Cappelli C and Buonaurio R (2003) đã tiến hành nghiên cứu bệnh giả sương mai trên cây bí đao tại các vùng trồng tại Italia Triệu chứng gây bệnh điển hình là xuất hiện những đốm vàng nằm ở mặt dưới lá Để xác định được

pathotype của nấm Pseudoperonospora cubensis gây giả bệnh sương mai tại

Italia tác giả đã tiến hành thu thập 10 mẫu nấm, tiến hành phân lập và xác định khả năng gây bệnh Qua nghiên cứu, Cappelli C và Buonaurio R đã kết luận pathotype 5 là chủng gây bệnh giả sương mai trên cây bí đao tại Italia

Khi cây rau họ bầu bí bị nhiễm bệnh giả sương mai thì lá là bộ phận bị hại chủ yếu Triệu chứng bệnh trên cây dưa bở là xuất hiện các đốm vàng, có hình dáng bất định, trung tâm vết bệnh có màu nâu đen; triệu chứng trên cây bí ngô là những đốm vàng nhạt; trên cây dưa chuột vết bệnh màu nhạt sau đó chuyển vàng

Lá bị nhiễm bệnh có thể cong lên Triệu chứng trên dưa hấu và bí ngô không phải

là triệu chứng điển hình như trên cây dưa chuột dưa chuột do đó dễ dàng nhầm lẫn với các bệnh khác như bệnh thán thư, bệnh đốm vòng (Palti and Cohen, 1980)

Quesada-Ocampo L M et al (2010) tiến hành nghiên cứu về cấu trúc gen

của 465 mẫu nấm Pseudoperonospora cubensis được thu thập từ 5 ký chủ phổ

biến của 13 quốc gia thuộc 3 châu lục trên thế giới Quesada-Ocampo L M sử dụng 6 clusters nhằm kiểm tra sự đa dạng cũng như phân bố của các chủng thu thập được Kết quả phân tích cho thấy các chủng nấm phân lập từ dưa chuột có mức độ đa dạng di truyền thấp hơn so với các chủng nấm phân lập từ các cây họ bầu bí khác Kết quả của nghiên cứu này có thể ứng dụng để xây dựng các công

cụ chuẩn đoán, phát triển các loại thuốc BVTV mới cũng như ứng dụng trong sử dụng và chọn tạo giống kháng

Salati M et al (2008) đã công bố những nghiên cứu về bệnh sương mai

trên cây mướp khía tại Malaysia Tác giả đã mô tả triệu chứng bệnh: xuất hiện vết đốm màu vàng sáng Kích thước của bào tử: dài 19 µm - 36 µm, chiều rộng 11µm - 23µm, cành bảo tử phân sinh dài 310 µm - 450 µm Salati M sử dụng kỹ thuật PCR với cặp mồi ITS5-P2 và ITS4 để kiểm tra tác nhân gây bệnh, kết quả

100% mẫu kiểm tra là nấm Pseudoperonospora cubensis (mã genbank

EU876603, EU876584 và AY198306)

Sợi nấm Pseudoperonospora cubensis hình ống, đơn bào, đường kính

khoảng 5,5 - 7,0 µm Sợi nấm được hình thành trong các tế bào vật chủ để hấp thu các chất dinh dưỡng Cành bào tử đơn bào, không màu, phân nhánh dạng cành cây, dài khoảng 80 - 400 µm, rộng 5 - 7 µm Các bọc bào tử được sinh ra đơn lẻ trên cành bào tử, hình trứng hoặc elip một đầu hơi nhú ra, kích thước 20 -

40 x 14 - 25 µm Bọc bào tử chứa 2 - 15 bào tử động, các bào tử động có hai lông roi, đường kính 10 - 13 µm (Waterhouse GM and Brothers MP, 1981)

Giai đoạn sinh sản hữu tính của nấm Pseudoperonospora cubensis tạo bào

tử trứng hình elip, màu vàng nhạt, đường kính 22 - 42 µm Tuy nhiên, hình thức sinh sản hữu tính của nấm ít khi xảy ra trong tự nhiên (Hiura and Kawada, 1933) Granke L L and Hausbeck M K (2011) nghiên cứu bệnh giả sương mai hại dưa chuột tại bang Michigan, Mỹ từ năm 2006 - 2009 Kết quả nghiên cứu cho thấy bào tử nấm bắt đầu xuất hiện từ tháng 6, và tăng dần mật độ đến tháng

9 Thời gian mật độ bào tử cao nhất trong ngày từ 9h - 13h Nồng độ bào tử trong không khí tỷ lệ thuận với nhiệt độ không khí và tỷ lệ nghịch với độ ẩm tương đối

Để phòng trừ bệnh giả sương mai do nấm Pseudoperonospora cubensis

hại cây rau họ bầu bí có hiệu quả cần sử dụng tổng hợp nhiều phương pháp như: biện pháp canh tác, sử dụng giống kháng, biện pháp sinh học, biện pháp hóa học Biện pháp canh tác: kiểm soát độ ẩm không khí trên ruộng sản xuất bằng cách giảm mật độ trồng, giảm hoạt động tưới phun, tăng cường cho không khí lưu thông, lựa chọn thời gian gieo trồng phù hợp (Cabi, 2013)

Biện pháp sử dụng giống kháng: khả năng kháng bệnh giả sương mai giữa các cây rau trong họ bầu bí là khác nhau Các giống dưa bở và dưa hấu có khả năng kháng bệnh thấp hơn dưa chuột Để tạo hiệu quả cao, người nông dân có thể

xử lý hạt giống trước khi trồng bằng các loại thuốc trừ nấm (Miller PR, Pollard

HL, 1976)

Biện pháp sinh học: hiện nay không có nhiều nghiên cứu về ứng dụng các

biện pháp sinh học quản lý nấm Pseudoperonospora cubensis trong điều kiện sản xuất ngoài đồng ruộng, tuy nhiên việc kiểm soát Pseudoperonospora cubensis bằng nấm đối kháng Trichoderma harzianum đã được thử nghiệm trong

điều kiện nhà kính (Elad Y et al., 2000)

Biện pháp hóa học: để phòng trừ nấm Pseudoperonospora cubensis có thể

sử dụng các loại thuốc hóa học có hoạt chất metalaxyl (Reuveni et al., 1980)

2.2.1.3 Tình hình nghiên cứu bệnh thán thư

Theo Thomas A Zitter (1987), bệnh thán thư hại cây rau họ bầu bí do

nấm Colletotrichum lagenarium (Pass.) Ellis & Halst gây ra Bệnh gây hại cây

rau họ bầu bí xảy ra trong điều kiện thời tiết nóng ẩm Trong quá trình sản xuất nếu không có biện pháp phòng trừ bệnh kịp thời thì bệnh sẽ gây hại nặng và có thể dẫn đến mất mùa cho cây rau họ bầu bí Bệnh phổ biến nhất ở miền Nam, miền Tây, và các tiểu bang miền Trung Tây nước Mỹ

Nấm Colletotrichum lagenarium (Pass.) Ellis & Halst gây hại trên dưa hấu, dưa thơm, dưa đỏ, bí mùa đông (Cucurbita maxima) và mướp đắng (Bitter

melon) ở Hawaii Tất cả các bộ phận của cây trên mặt đất đều bị ảnh hưởng Đầu tiên xuất hiện đốm lá màu vàng nhạt và mọng nước ở rìa, rồi chuyển sang màu nâu và trở nên giòn Trên cây dưa hấu vết đốm trên lá có màu đen Vết bệnh trên

cuống lá và thân cây kéo dài và có màu đen với một vết sáng ở giữa (Stephen A Ferreira, 1992)

Bệnh thán thư do nấm Colletotrichum lagenarium có thể hại nhiều cây rau trong họ bầu bí như: dưa hấu, dưa bở, dưa chuột, bí đao, bí ngồi… Nấm Colletotrichum lagenarium có thể gây hại trên lá, quả và thân của cây rau họ bầu

bí Triệu chứng bệnh trên lá xuất hiện những vết đốm (đường kính > 10 mm) màu vàng, rìa vết bệnh có chấm màu nâu hoặc đen Triệu chứng bệnh trên quả là

những vết đốm, đường kính 20 - 30 mm, hơi trũng xuống Đĩa cành nấm Colletotrichum lagenarium màu nâu sẫm Bào tử phân sinh hình trụ kích thước

10 - 15 x 4,5 - 6 µm (Sutton BC, 1980)

Thompson D C (1985) đã nghiên cứu sự ảnh hưởng của nhiệt độ, độ ẩm,

tính kháng ký chủ và kích thước vết bệnh đến sự hình thành bào tử của nấm Colletotrichum lagenarium Lượng bào tử sinh ra lớn nhất khi nhiệt độ khoảng

16ºC, độ ẩm > 85% Bào tử thường hình thành vào buổi sáng sớm và giảm dần theo thời gian trong ngày

Strobe N E (1995) cho rằng acifluorfen (C14H7ClF3NO5) , Sodium chlorate (NaClO3) có khả năng làm tăng sức đề kháng của dưa chuột với bệnh

thán thư do nấm Colletotrichum lagenarium gây ra

Biện pháp phòng trừ bệnh thán thư do nấm Colletotrichum lagenarium hại

cây rau họ bầu chưa được nghiên cứu sâu trên thế giới Tuy nhiên các biện pháp vẫn được khuyến cáo để phòng trừ là giảm mật độ trồng và sử dụng biện pháp

hóa học (Park et al., 1996) Các loại hoạt chất cho khả năng phòng trừ nấm Colletotrichum lagenarium cao là: benomyl, mancozeb và copper oxychloride (Madaan and Grover, 1979)

2.2.1.4 Tình hình nghiên cứu bệnh đốm lá

Bệnh đốm lá gây hại trên cây rau họ bầu bí do nấm Cercospora citrullina Cooke gây ra Nấm Cercospora citrullina Cooke còn có tên khoa học khác là Didymella bryoniae (Auersw.) hoặc Cercospora cucurbitae Ell & Ev Bệnh gây hại ở hầu hết các nước trên thế giới Nấm C.citrullina có thể gây hại nhiều cây

rau trong họ bầu bí như: dưa chuột, dưa bở, dưa hấu, bí đỏ, bí ngô, bí xanh…(Cabi, 2013)

Bệnh đốm lá hại cây rau họ bầu bí gây hại nhiều nhất cho dưa hấu, dưa chuột và các loại dưa khác Bệnh lan truyền nhờ gió hoặc theo nước mưa Chu kỳ bệnh bắt đầu khi bào tử tiếp xúc được lá hoặc cuống lá Bào tử hình thành và bắt đầu chu kỳ xâm nhiễm mới sau khoảng từ 7 đến 10 ngày trong điều kiện thời tiết

ấm áp, ẩm ướt (Howard F Schwartz and David H Gent, 2007)

Bệnh đốm lá hại cây rau họ bầu bí được đặc trưng bởi các vết đốm nâu nhạt, với các viền vết bệnh màu nâu sẫm trên cả hai mặt của lá Triệu chứng biểu hiện chủ yếu trên lá, cuống lá và thân cây Trên lá già, vết bệnh là những đốm nhỏ, tròn hoặc hình dạng bất định màu nâu nhạt Số lượng và kích thước của vết đốm tăng lên, cuối cùng lan ra toàn bộ lá làm rụng lá

Trên dưa hấu các đốm lá xảy ra đầu tiên trên lá nhỏ Vết bệnh ban đầu là các chấm nhỏ màu xám hoặc trắng, phần tiếp giáp giữa vết bệnh và mô khỏe của

lá có màu đen Cây bị nhiễm bệnh nặng thì các vết bệnh tăng dần tăng về số lượng và trải rộng trên bề mặt lá Vết bệnh hình thành trên lá non nhiều hơn trên

lá già Bệnh có thể làm giảm kích cỡ quả và chất lượng quả

Trên dưa chuột, dưa xạ hương và các loại bí, các vết bệnh lớn hơn, đường kính khoảng 0,5 - 10 mm, màu xám - màu vàng nâu Trung tâm của vết bệnh cuối cùng trở nên trong suốt và giòn

Cành bào tử thẳng hoặc hơi cong kích thước 3 - 5 × 50 - 300 µm, màu vàng nâu hoặc vàng nhạt Bào tử là đơn bào, trong pha lê, có 1 - 16 vách ngăn, kích thước 2,5 - 4 × 20 - 270 µm Bào tử nảy mầm tốt nhất trong khoảng nhiệt độ 22º - 32ºC với độ ẩm cao (Howard F Schwartz et al., 2007)

Nấm C.citrullina có khả năng lan truyền thông qua hạt giống, vì vậy biện

pháp kiểm soát hạt giống có vai trò quan trọng trong kiểm soát sự lan truyền của bệnh (Lee et al., 1984)

Biện pháp phòng trừ bệnh đốm vòng do nấm C.citrullina hại cây rau họ

bầu bí: vệ sinh đồng ruộng đồng ruộng, tiêu hủy các tàn dư cây bệnh, luân canh cây trồng, sử dụng các loại giống có khả năng kháng với bệnh (Lee et al., 1984)

2.2.1.5 Tình hình nghiên cứu bệnh đốm vòng

Nấm Alternaria alternata f sp cucurbitae gây hại trên bầu bí được mô tả

đầu tiên ở Hy Lạp, nơi nó gây ra thiệt hại nghiêm trọng dưa chuột (Cucumis sativus) trồng trong nhà kính Nấm cũng tấn công dưa bở (Cucumis melo) và dưa hấu (Citrullus lanatus) Bệnh hại chủ yếu trên lá và bắt đầu hại trên lá già và sau

đó phát triển trên lá ở phần giữa của tán Bệnh gây hại cho 3 - 20% diện tích lá (X G Zhou, 2008)

Nấm Alternaria alternata được ghi nhận gây đốm lá và các bệnh khác trên

hơn 380 loài thực vật, nấm có thể gây hại nhiều bộ phận của cây như: lá, thân, quả, rễ (CABI, 2013)

Trong thời gian từ 1979 - 1980, bệnh đốm lá do nấm Alternaria alternata gây hại nghiêm trọng trên dưa chuột (Cucumis sativus) trong khu vực Sitia,

Lasithi, Crete, dọc theo dải bờ biển giữa Koutsouras và Goudouras (Vakalounakis, 1989)

Các vết bệnh do nấm Alternaria alternata gây hại dần dần mở rộng và kết

hợp lại thành lớn, gần như tròn, hoặc hình dạng không đều kích thước có thể lên đến 3 cm Trung tâm vết bệnh có màu sáng, bao quanh bởi một vòng màu nâu sẫm và một quầng vàng, và có xu hướng chia thành các vòng tròn đồng tâm trong các giai đoạn phát triển sau này (X.G.Zhou, 2008)

Theo nghiên cứu của Vakalounakis (1989), các triệu chứng của bệnh do

nấm Alternaria alternata trên cây bí đỏ xuất hiện vào cuối mùa thu, chủ yếu ở

phần giữa của lá Đốm hoại tử, bao quanh bởi một quầng vàng, xuất hiện trên lá,

và mở rộng đến các điểm mà có thể hợp lại để tạo thành vết bệnh đường kính 5

cm hoặc lớn hơn Các vết đốm hình tròn và có màu nâu đen Lá nặng bị nhiễm trở thành màu vàng, lão hóa và dần dần chết

Bào tử phân sinh Alternaria alternata ngắn có mỏ, bào tử đa bào Bào tử

phân sinh hình quả lựu đạn, màu nâu hoặc nâu nhạt với nhiều vách ngăn ngang, chiều dài trung bình là 39 µm (khoảng 17 - 80 µm) và chiều rộng 14 µm (từ 7 -

20 µm) (X.G.Zhou, 2008)

Huang J S et al (2011), bào tử phân sinh nấm Alternaria alternata f sp

cucurbitae gây hại trên cây dưa bở tại Đài Loan có màu nâu, chiều dài từ 9,4 - 38,5 µm (trung bình 25,9 µm), chiều rộng 6,2 - 11,6 µm (trung bình 9,0 µm)

Bào tử có từ 1 - 4 vách ngăn ngang và 1 - 2 vách ngăn dọc

Theo Vakalounakis (2008), nấm Alternaria alternata phát triển tốt trên

môi trường PDA ở nhiệt độ từ 5°C - 40°C và bào tử nảy mầm xảy ra trong phạm

vi từ 10°C đến 37°C Nhiệt độ tối ưu là khoảng 26°C

Nấm Alternaria alternata có thể lan truyển theo hạt giống, do đó biện

pháp xử lý hạt giống trước khi trồng có ý nghĩa rất quan trọng Khi xử lý hạt giống với hỗn hợp thuốc Ekorast và Bordeaux có thể làm giảm sự gây hại của bệnh tới 33,8% (Seweta Srivastava, 2011); ngoài ra khi xử lý hạt giống với thuốc Ridomil gold cũng cho hiệu quả phòng trừ tốt (Shakoor et al., 2011)

2.2.1.6 Tình hình nghiên cứu bệnh lở cổ rễ

Nấm Rhizoctonia solani được xác định là tác nhân gây bệnh trên nhiều

loại cây trồng bao gồm cỏ linh lăng, lạc, đậu tương, đậu lima, dưa chuột, đu đủ,

cà tím, ngô, cây họ bầu bí, bệnh gây hại phổ biến ở trên tất cả các đảo của Hawaii

và trên toàn thế giới (Uchida Janice Y, 1992)

Nấm Rhizoctonia solani thuộc nhóm nấm Mycelia sterilia Nấm là nguyên nhân ngăn cản sự nảy mầm và gây bệnh ở cây con Sợi nấm của Rhizoctonia solani có màu vàng hoặc vàng nâu, sợi nấm nhiều nhân thường 4 - 8 nhân mỗi tế

bào Hạch nấm màu nâu với các hình dạng, với các kích cỡ khác nhau Hạch thường hình thành trên bề mặt kí chủ, các mô thực vật hay trên các bộ phận của cây trồng (Uchida Janice Y, 1992)

Nấm gây hại ở phần cổ rễ sát mặt đất, làm cổ rễ bị teo, khô thắt lại, cây bị héo và ngã rạp Đối với cây lớn, cây bị vàng, héo lá và chết Ở gốc cây, triệu chứng ban đầu là vết lõm màu nâu hoặc hơi nâu đỏ sát mặt đất, vết bệnh có thể

lan rộng quanh gốc thân và lan xuống rễ, gốc thân bị lở loét Nấm Rhizoctonia solani tồn tại trong nhiều loại đất ở dạng sợi, dạng hạch nấm Nấm có thể xâm

nhập vào tàn dư thực vật Khi điều kiện thích hợp và thuận lợi, nấm xâm nhập và gây bệnh hại cây Nấm hoạt động mạnh khi đất đủ ẩm Đất quá khô hoặc bão hòa nước sẽ ức chế sự phát triển của nấm Nấm dễ dàng xâm nhập qua vết thương, mặt khác nấm có khả năng trực tiếp xâm nhập vào mô thực vật non, mềm (Hennis et al., 1978)

Đây là một loại bệnh gây thiệt hại lớn cho các cây rau họ bầu bí và các cây trồng khác, vì vậy có nhiều tác giả đã đưa ra các biện pháp để phòng trừ bệnh hại như chọn tạo giống chống bệnh, biện pháp canh tác và sử dụng thuốc hóa học

Sử dụng giống chất lượng cao, xử lý mầm bệnh trước khi gieo trồng, lên luống và làm rãnh thoát nước cũng có tác dụng làm giảm sự gây hại của nấm

Rhizoctonia solani Các loại thuốc hóa học có hoạt chất Mancozeb và

Azoxystrobin cho hiệu quả phòng trừ tốt (Wharton, 2013)

2.2.2 Tình hình nghiên cứu bệnh nấm hại bầu bí tại Việt Nam

Theo Đường Hồng Dật (2002), thành phần bệnh nấm hại trên dưa chuột gồm có: bệnh thối rễ, phấn trắng, sương mai

Theo Nguyễn Vũ Dũng (2007), thành phần bệnh hại trên cây dưa hấu gồm: thán thư, cháy lá, lở cổ rễ, sương mai, khảm lá, khoang cổ, chạy dây Trong

đó các bệnh quan trọng do tác nhân là nấm là các bệnh: thán thư, sương mai, cháy lá

Theo Ngô Thị Xuyên và Nguyễn Văn Đĩnh (2006), điều tra thành phần bệnh hại trên cây dưa chuột trong nhà lưới thuỷ canh vụ thu đông năm 2004, các loại bệnh hại xuất hiện ít hơn so với ngoài sản xuất đại trà, bệnh phấn trắng

Erysiphe cichoracearum gây hại nặng vào cuối vụ thứ hai (từ 28/10 đến

03/12/2004) với tỷ lệ bệnh hại trung bình trên 12 giống dưa (Titan, Nova, Achituv, Romario, Sao xanh, Quang 3, Quang 4, Quang 7, Quang 2, Trung quốc

3, Trung quốc 4) là 4.11%, cao nhất là 7.5% trên giống Quang 3 Cùng thời điểm xuất hiện bệnh ngoài sản xuất, giai đoạn cuối tỷ lệ bệnh lên tới 60% trên các giống dưa chuột sản xuất đại trà vùng Hà Nội và phụ cận

Bệnh phấn trắng gây hại cây rau họ bầu bí ngay từ thời kỳ cây con Ban đầu trên lá xuất hiện những chòm nhỏ mất màu xanh hoá vàng dần, bao phủ một lớp nấm trắng xám dày đặc như bột phấn, bao trùm tất cả phiếm lá Lá bệnh chuyển dần từ màu xanh sang vàng, lá khô cháy và rất dễ rụng Bệnh nặng lớp phấn trắng xuất hiện trên cả thân, cành, hoa làm hoa khô và chết Cây bị bệnh sinh trưởng yếu, phẩm chất kém (giảm lượng đường và axit amin) và phải thu hoạch quả trước thời hạn, năng suất kém (Vũ Triệu Mân, 2007b)

Theo Ngô Thị Xuyên và CTV (2003), tỷ lệ bệnh phấn trắng gây hại trên cây bí ngô trong nhà lưới là 23,5% và ở ngoài đồng ruộng là 29, 5% Để giảm thiểu tác hại của bệnh cần trồng rau trên các giá thể đã xử lý nguồn bệnh, kết hợp

sử dụng hợp lý giữa phân hữu cơ và phân vô cơ, tăng cường sử dụng các chế phẩm sinh học trong sản xuất rau an toàn, hạn chế sử dụng thuốc hóa học

Lê Thị Tình (2008), nghiên cứu tình hình nhiễm sâu bệnh hại của 34 loại giống mướp đắng (14 giống thụ phấn tự do, 20 giống lai F1) Bệnh phấn trắng thường xuất hiện vào thời gian đầu sinh trưởng của cây trồng Vụ xuân hè thì mức độ phổ biến cũng như mức độ gây hại của bệnh phấn trắng nặng hơn so với

vụ thu đông

Theo Vũ Hải Yến (2013), bệnh phấn trắng gây hại trên cây dưa chuột bắt đầu xuất hiện từ đầu tháng 2, đến cuối thời kỳ sinh trưởng của cây bệnh gây hại mạnh Mật độ trồng và chế độ luân canh có ảnh hưởng trực tiếp tới sự phát sinh

và phát triển của bệnh Tác giả cũng nghiên cứu khả năng chống bệnh của một số loại dưa chuột thường được nông dân sản xuất trên thị trường Giống Xuân Yến

có khả năng chống bệnh tốt nhất, tỷ lệ bệnh sau khi kết thúc thu quả đạt 46,33 %, giống F1 Đài Loan là giống nhiễm bệnh phấn trắng, tỷ lệ bệnh sau khi kết thúc thu quả là 67,46 % Tác giả cũng nghiên cứu sự ảnh hưởng của mật độ trồng, chế

độ luân canh và phân bón tới sự phát sinh, phát triển của bệnh phấn trắng Theo

đó lượng phân bón tối ưu sử dụng cho 01 ha dưa chuột là 20 tấn phân chuống +

150 kg ure + 560 kg supe lân + 200 kg Kali, mật độ trồng khoảng 25.000 cây/ha

và để giảm thiểu nguồn bệnh nên canh tác dưa chuột trên đất luân canh với lúa

Vũ Hải Yến (2013) nghiên cứu khả năng phòng chống bệnh phấn trắng hại cây dưa chuột bằng sử dụng chất kích kháng và một số loại dịch chiết thực vât Theo đó khi xử lý bằng CuCl2 0,04 mM ở giai đoạn hạt giống, 2 lá mầm, 5 lá thật cho hiệu quả phòng trừ bệnh phấn trắng tương đối tốt Đối với các loại dịch chiết thực vật thì dịch chiết lá trầu không ở nồng độ 20% cho hiệu quả ức chế nấm bệnh tốt nhất Việc sử dụng các dịch chiết thực vật để phòng chống các loại nấm bệnh có ý nghĩa rất lớn trong canh tác nông nghiệp an toàn đặc biệt là trong sản xuất nông nghiệp theo hướng hữu cơ

Để phòng trừ bệnh phấn trắng hại cây rau họ bầu bí cần áp dụng các biện pháp kỹ thuật canh tác, đặc biệt chú ý dọn sạch tàn dư thân, lá bệnh, tiêu diệt cỏ dại và sử dụng các giống chống bệnh Phun thuốc phòng trừ kịp thời ngay sau khi phát hiện bệnh, dùng: Score 250EC (0.3 - 0.5l/ha); Benlate 50WP (0.06%); Bayleton 25WP (0.3 - 0.4 kg/ha) hay Anvil và các thuốc chứa lưu huỳnh (Vũ Triệu Mân, 2007b)

Bệnh giả sương mai gây hại phổ biến trên các vùng sản xuất dưa chuột ở nước ta Bệnh xuất hiện từ lúc cây được 3 lá thật đến cuối vụ Bệnh thường bắt đầu từ tầng lá phía dưới rồi lan dần lên trên Bệnh xuất phát từ mặt dưới lá, vết bệnh rải rác khắp mặt lá (Vũ Triệu Mân, 2007b)

Theo Vũ Hải Yến (2013), bệnh giả sương mai gây hại trên cây dưa chuột bắt đầu xuất hiện sau khi cây có 02 lá thật, đến cuối thời kỳ sinh trưởng của cây bệnh gây hại mạnh Bệnh phát triển mạnh ở độ ẩm cao (khoảng 90%), bệnh lan truyền nhanh trong điều kiện mưa nhiều Tác giả cũng nghiên cứu khả năng chống bệnh của một số loại dưa chuột thường được nông dân sản xuất trên thị trường Giống F1 Nhật Bản có khả năng chống bệnh tốt nhất, tỷ lệ bệnh sau khi kết thúc thu quả đạt 40,06 %, giống F1 Đài Loan là giống nhiễm bệnh nặng nhất,

tỷ lệ bệnh sau khi kết thúc thu quả là 52,78 %

Sợi nấm Pseudoperonospora cubensis hình ống, đơn bào, phân nhánh Cành

bào tử phân sinh dạng cành cây, phân nhánh kép không đều đặn, đơn bào, không màu Đỉnh nhánh nhọn, uốn cong hình cánh cung Bào tử phân sinh hình bầu dục hoặc hình trứng, đơn bào, không màu, vỏ mỏng với một núm nhỏ trên đỉnh Nấm lây lan chủ yếu do bào tử nấm lây truyền từ vụ này sang vụ khác, từ ruộng này sang ruộng khác Bệnh xảy ra nghiêm trọng và lây lan nhanh khi trời có nhiều sương (Vũ Triệu Mân, 2007b)

Giống như bệnh phấn trắng, mật độ trồng, chế độ luân canh và phân bón

có ảnh hưởng trực tiếp tới sự phát sinh, phát triển của bệnh giả sương mai Theo

đó lượng phân bón tối ưu sử dụng cho 01 ha dưa chuột là 20 tấn phân chuống +

150 kg ure + 560 kg supe lân + 200 kg Kali, mật độ trồng khoảng 25.000 cây/ha

và để giảm thiểu nguồn bệnh nên canh tác dưa chuột trên đất luân canh với lúa

Nguyễn Văn Khái (2010), nghiên cứu sự ảnh hưởng của các yếu tố phân

vi lượng tới sự phát sinh, phát triển của dịch hại trên cây dưa chuột bao tử Phun phân vi lượng Bo có tác dụng làm giảm mức độ bệnh giả sương mai, héo vàng, trong khi đó GA3 ít có ảnh hưởng đến sâu bệnh hại trên cây dưa chuột bao tử Vũ Hải Yến (2013)

Vũ Hải Yến (2013) nghiên cứu khả năng phòng chống bệnh giả sương mai trên cây dưa chuột bằng sử dụng chất kích kháng và một số loại dịch chiết thực vât Theo đó khi xử lý bằng CuCl2 0,04 mM ở giai đoạn 7, 12, 17, 22 ngàysau trồng cho hiệu quả phòng trừ bệnh giả sương mai tương đối tốt Đối với các loại dịch chiết thực vật thì dịch chiết lá trầu không ở nồng độ 20% cho hiệu quả ức chế nấm bệnh tốt nhất, hiệu lực phòng trừ 50,12% Việc sử dụng các dịch chiết thực vật để phòng chống các loại nấm bệnh có ý nghĩa rất lớn trong canh tác nông nghiệp an toàn đặc biệt là trong sản xuất nông nghiệp theo hướng hữu cơ

Để ngăn ngừa và phòng trừ bệnh này có thể sử dụng một số biện pháp như: vệ sinh đồng ruộng, ngắt bỏ lá bị bệnh thu gom đem tiêu hủy Lên luống cao, thoát nước tốt để tránh ẩm độ cao trên ruộng Trồng mật độ hợp lý, không trồng quá dày dễ làm cho bệnh gây hại nặng Chọn giống tốt, sạch, có khả năng kháng bệnh Dọn sạch tàn dư cây bệnh sau khi thu hoạch Xử lý hạt giống bằng những loại thuốc đặc hiệu cho từng loại bệnh trước khi trồng Có thể dùng một số loại thuốc bảo vệ thực vật để phun trừ khi bệnh chớm xuất hiện và gặp điều kiện thời tiết thuận lợi cho sự phát sinh gây hại của bệnh: Mataxyl, Aliette, Ridomil Gold, Agri-phos, Phosphonate

Bệnh thán thư do nấm Colletotrichum lagenarium thường xuyên xuất hiên

và gây hại các cây rau họ bầu bí Bệnh này thường xảy ra và đôi khi gây hại nặng Bệnh có thể tấn công tất cả các bộ phận trên mặt đất của cây

Theo Trần Thị Liên (2010) nấm gây bệnh thán thư trên cây trồng là một loài nấm đa thực Nó phát sinh và gây hại trên rất nhiều cây trồng (cây rau màu, cây ăn quả, cây công nghiệp, thậm chí còn hại cả cây cảnh) Khi nấm xâm nhập

và gây hại khiến cho cả thân, lá, quả cây trồng đều bị xâm nhập và thiệt hại đáng

kể (lá khô rụng, cành héo úa, quả thối hỏng )

Trên dưa hấu: bệnh do nấm Colletotrichum lagenarium gây hại thường

xuất hiện ở các lá già bên dưới trước Đốm bệnh là những đốm tròn không đều đặn, màu nâu hay nâu đen, kích thước khoảng 3 - 10 mm

Trên dưa chuột: ở giai đoạn cây con, hai lá mầm sẽ bị tấn công.Ở cây lớn hơn,

lá già cũng bị tấn công trước Đốm bệnh nhỏ, có hình hơi tròn hay bất dạng, màu trắng hơi vàng; sau đó, đốm rộng thêm ra (khoảng 1 - 3 cm), màu nâu hơi xám

Trong vết bệnh có thể thấy các đĩa cành của nấm như những đầu kim gút màu đen Bệnh làm lá bị khô cháy Bệnh nặng, vết bệnh liên kết với nhau tạo thành các vết loét ăn sâu vào trong thịt trái, gây thối trái, nhũn nước, ảnh hưởng rất lớn đến chất lượng quả

Nấm Colletotrichum lagenarium có giai đọan sinh sản hữu tính là Glomerella lagenaria Watanake và Tamura hoặc G lagenarium Stevens Đĩa

cành có những lông cứng (setae) màu nâu Trong đĩa cành có các cành bào tử và bào tử Cành bảo tử chỉ gồm 1 tế bào hình trụ dài không màu và có kích thước khoảng 20 - 25 x 2,5 - 3 µm Bào tử cũng gồm chỉ 1 tế bào hình trụ dài hay hình thoi dài, không màu và kích thước khoảng 14 - 20 x 5 - 6 µm

Thời tiết vụ hè thu (nhiệt độ cao, mưa nhiều) là điều kiện thích hợp cho nấm phát sinh phát triển và gây hại rau màu Mặt khác, nấm lại có khả năng kháng thuốc cao Vì vậy, khi phát triển các cây rau màu vụ hè thu, nông dân cần chú ý phòng ngừa và chữa trị cho tốt loại bệnh hại này (Trần Thị Liên, 2010) Nấm bệnh tồn tại trong đất trồng, hạt giống và tàn dư cây bệnh Bệnh phát tán nhờ gió, mưa và côn trùng Trên những chân ruộng thoát nước kém hoặc bón phân không cân đối( bón thừa đạm) sẽ làm cho bệnh dễ phát sinh và gây hại nhiều hơn

Theo Đỗ Tấn Dũng (2013), bệnh lở cổ rễ phát sinh gây hại trên nhiều loài cây trồng khác nhau thuộc họ cà, học đậu, họ bầu bí,v.v như cà chua, đậu tương, dưa chuột, đậu đũa, lạc

Kết quả điều tra bệnh lở cổ rễ trên các loài cây trồng vùng Hà Nội năm

2011 - 2012 cho thấy bệnh phát sinh phát triển và gây hại trên các cây ký chủ là khác nhau và tỷ lệ bệnh cao nhất trên cây cà chua (2,80%), lạc (4,55%), đậu

tương (6,17%), dưa chuột (7,61%) và đậu đũa (7,46%)

Nấm Rhizoctonia solani thuộc nhóm nấm Mycelia sterilia Nấm Rhizoctonia solani có sợi nấm kí sinh màu vàng, khi già chuyển sang nâu Sợi

nấm mảnh dài 4-12 µm Sợi nấm phân nhánh góc phải và có ngăn ngang ở đốt cuối cùng Hạch nấm dạng hạt dẻ, màu nâu, sau chuyển sang nâu đen

Nấm Trichoderma viride có hiệu lực rất cao trong phòng chống nấm Rhizoctonia solani Chế phẩm sinh học nấm đối kháng T.viride có hiệu lực đối

kháng cao trên môi trường nhân tạo đạt tới 79,1% với nấm gây bệnh lở cổ rễ cây

cà chua và 79,8% với nấm gây bệnh lở cổ rễ cây dưa chuột Hiệu lực phòng trừ

của chế phẩm sinh học nấm đối kháng T.viride với bệnh lở cổ rễ trên cà chua đạt

73,3% và bệnh lở cổ rễ cây dưa chuột là 76,3% trong điều kiện thí nghiệm trên chậu vại (Đỗ Tấn Dũng, 2013)

Nguyễn Văn Hùng (2010), nấm Trichoderma viride có hiệu lực đối kháng với nấm Rhizoctonia solani xử lý nấm Trichoderma viride trước 01 ngày Khi so sánh khả năng phòng trừ nấm Rhizoctonia solani của 02 chủng nấm Trichoderma viride và Trichoderma harziarum thì hiệu lực của nấm T.harziarum

thấp hơn Nghiên cứu ảnh hưởng của các loại dịch chiết thực vật từ tỏi, xoan, gừng thì dịch chiết từ gừng (nồng độ 25g/100ml) cho hiệu quả ức chế nấm

Rhizoctonia solani tốt nhất Tuy nhiên xử lý hạt giống bằng các loại dịch chiết

này hầu như không có tác dụng, cần xử lý vào đất để các loại dịch chiết này phát huy được hiệu quả

Để phòng trừ bệnh lở cổ rễ gây hại cây trồng có hiệu quả cao, có thể áp dụng biện pháp luân canh cây rau màu với cây lúa nước hoặc những cây trồng không phải là ký chủ của nấm gây bệnh

Những nghiên cứu cho thấy rằng để phòng trừ bệnh lở cổ rễ hại dưa chuột

có thể sử dụng các biện pháp như biện pháp canh tác (luân canh cây trồng khác

họ, sử dụng giống kháng, xử lý hạt giống bằng nước nóng 50ºC trong 25 phút, bón vôi trước khi trồng, dùng phân hữu cơ hoai mục, có nhiều vi sinh vật đối kháng làm hạn chế nguồn bệnh, bón phân cân đối để cây khỏe), biện pháp cơ giới

vật lý (nhổ bỏ cây bị bệnh), biện pháp sinh học (dùng các chế phẩm Trichoderma

bón vào đất trước khi trồng, biện pháp hóa học (khi bệnh xuất hiện và phát triển

có thể sử dụng các loại thuốc như Rovral 50WP, Ridomil MZ…) Chế phẩm sinh

học Tân tiến BTN cũng đã được sử dụng để phòng trừ bệnh héo rũ Fusarium

dưa chuột, nhưng hiệu quả phòng trừ chỉ đạt khoảng 38% Vi-ĐK là chế phẩm

sinh học có tác dụng đối kháng với các nấm bệnh có trong đất như: Fusarium sp, Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora palmivora, Pythium sp Vi-

ĐK còn kích thích sự sinh trưởng và phát triển của cây trồng nhờ sự phân huỷ cellulose các chất hữu cơ có trong đất làm tăng chất dinh dưỡng dưới dạng dễ hấp thụ cho cây trồng Chế phẩm sinh học BIMA cũng có tác dụng hạn chế một

số nấm bệnh như Fusarium solani, Rhizoctonia solani, Phytophthora spp., Sclerotium rolfsii (Phí Thị Cẩm Uyên, 2013)

3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Đối tượng nghiên cứu

Bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí tại Hà Nội và vùng phụ cận năm 2013

-2014

3.2 Vật liệu nghiên cứu

Cây ký chủ: Cây dưa chuột (giống VL 112, Dưa 103, Hai mũi tên), bí đỏ (giống F1 125), mướp hương (giống F1 TN 260), mướp đắng (giống Hưng

Nông), bí đao (giống F1 HD 68)

Mẫu bệnh thu thập tại Nam Hồng, Đông Anh, Văn Đức , Gia Lâm, Vân Côn, Hoài Đức, Yên Mỹ, Thanh Trì

Hạt giống dưa chuột (giống Hai mũi tên), bí đỏ (giống F1 125, mướp đắng (giống Hưng Nông)

Môi trường nuôi cấy và phân lập nấm bệnh: WA, PDA, PCA

Dụng cụ thí nghiệm gồm các dụng cụ cần thiết trong phòng thí nghiệm như: Dao mổ, kéo, panh, que cấy nấm, đèn cồn, giấy thấm vô trùng, bình tam giác, ống nghiệm, đĩa petri, que khều nấm, lò vi sóng, tủ lạnh, tủ định ôn, nồi hấp, bếp điện và các hóa chất khử trùng …

Dụng cụ, vật tư phục vụ điều tra và thu thập mẫu bệnh

Đất trồng cây: Đất phù sa được hấp khử trùng ở 121ºC; 1,5atm trong thời gian 45 - 60 phút

3.2 Địa điểm nghiên cứu

Địa điểm nghiên cứu: Một số huyện ngoại thành Hà Nội như Gia Lâm, Đông Anh, Thanh Trì Bộ môn Bệnh cây, nhà lưới khoa Nông học, Học viện nông nghiệp Việt Nam

3.3 Thời gian nghiên cứu

Từ 01/06/2013 đến 31/05/2014

3.4 Nội dung nghiên cứu

Điều tra, xác định thành phần bệnh nấm hại cây rau họ bầu bí tại Hà Nội

và vùng phụ cận vụ thu đông năm 2013 và vụ xuân hè năm 2014

Điều tra diễn biến một số bệnh nấm chính hại cây rau họ bầu bí tại Hà Nội

và vùng phụ cận vụ xuân hè năm 2014

Nghiên cứu, xác định đặc tính sinh học của một số loài nấm hại cây rau họ bầu bí và xác định được phạm vi ký chủ của nấm gây bệnh phấn trắng hại dưa chuột

Thử nghiệm phòng trừ bệnh phấn trắng và bệnh giả sương mai hại dưa chuột bằng biện pháp sử dụng thuốc hóa học

3.5 Phương pháp nghiên cứu

3.5.1 Phương pháp điều tra ngoài đồng ruộng

- Phương pháp điều tra thành phần bệnh nấm hại một số cây rau họ bầu

bí (dưa chuột, bí đao, bí đỏ, mướp hương, mướp đắng)

Điều tra định kỳ 7 ngày/lần Chọn ruộng đại diện về: giống, giai đoạn sinh trưởng, thời vụ Ruộng điều tra không quá gần đường quốc lộ

Điều tra 10 điểm theo đường chéo góc, mỗi điểm điều tra 1 m2 Quan sát

kỹ các bộ phận của cây: thân, lá, hoa, quả và gốc cây Theo dõi triệu chứng của bệnh hại, tỷ lệ bệnh của các loại bệnh do nấm gây ra trên cây rau họ bầu bí Điều tra thành phần bệnh nấm hại trên các cây rau họ bầu bí: Cây dưa chuột, bí đỏ, mướp hương, mướp đắng, bí đao

Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ bệnh (%)

- Phương pháp điều tra diễn biến bệnh nấm hại lá một số cây rau họ bầu bí

Phương pháp điều tra: theo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia QCVN 01 - 38:2010/BNNPTNT

Chọn ruộng điều tra: ruộng điều tra phải đại diện theo giống, thời vụ, giai đoạn sinh trưởng cây trồng cho khu vực

Mỗi ruộng điều tra 10 điểm ngẫu nhiên nằm trên đường chéo của khu vực điều tra Mỗi điểm điều tra 1m2 Điểm điều tra phải cách bờ ít nhất 2 m Điều tra định kỳ 7 ngày một lần

Điều tra diễn biến bệnh phấn trắng, giả sương mai, lở cổ rễ trên cây dưa chuột (giống Dưa 103, Hai mũi tên, VL 112), bệnh đốm lá trên cây mướp đắng

(giống Hưng Nông), bệnh thán thư và bệnh đốm vòng trên cây bí đỏ (giống F1 125)

Chỉ tiêu theo dõi:

- Tỷ lệ bệnh (TLB) %

- Chỉ số bệnh (CSB)%

Phương pháp điều tra bệnh nấm hại rễ, thân cây rau họ bầu bí

Phương pháp điều tra: Chọn ruộng đại diện giống, thời vụ, giai đoạn sinh trưởng cây trồng cho khu vực điều tra theo phương pháp 5 điểm chéo góc, cố định điểm điều tra, mỗi điểm điều tra 50 cây, điểm điều tra cách bờ ít nhất 2m, đếm số cây bị bệnh, tính tỷ lệ bệnh (%), điều tra định kì 7 ngày một lần

Cây trồng điều tra: Cây dưa chuột (giống VL 112 và Dưa 103)

Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ bệnh (TLB) %

N1: là số lá bị bệnh ở cấp 1

N2: là số lá bị bệnh ở cấp 2

Nn: là số lá bị bệnh ở cấp n

n: Tổng số lá điều tra

k: là cấp bệnh cao nhất của thang cấp bệnh

Bảng phân cấp bệnh hại trên lá:

3.5.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng

3.5.2.1 Phương pháp phân lập và giám định nấm gây bệnh

Sau khi thu thập mẫu bệnh nấm trên cây rau họ bầu bí có triệu chứng điển hình, tiến hành rửa sạch mẫu, sau đó rửa lại bằng nước cất vô trùng và dùng giấy thấm vô trùng lau khô mẫu bệnh Cắt mô bệnh kích thước 1 - 2 mm × 1 - 2 mm (cắt phần ranh giới giữa mô bệnh và mô khỏe), sát trùng bằng cồn 70ºC trong 3 -

5 giây, rồi nhúng vào nước cất vô trùng, thấm khô bằng giấy thấm vô trùng Dùng que cấy đã khử trùng cấy mô bệnh vào môi trường WA và để ở điều kiện nhiệt độ, ánh sáng thích hợp Khi sợi nấm mọc thì cấy truyền sang môi trường PGA Đối với hạch nấm, dùng que cấy đã khử trùng cấy hạch nấm vào môi trường PGA và để ở điều kiện nhiệt độ, ánh sáng thích hợp Khi sợi nấm mọc cách mô bệnh 1- 2 cm thì dùng que cấy đã khử trùng cắt phần đầu sợi nấm chuyển sang PGA mới, cấy truyền liên tục cho đến khi nhận được nấm thuần

Kiểm tra dưới kính hiển vi để xác định nấm gây bệnh, dựa vào đặc điểm hình thái sợi, màu sắc tản nấm hoặc tiến hành lây bệnh nhân tạo nhằm xác định chính xác nguyên nhân gây bệnh Toàn bộ quá trình phân lập được thực hiện trong điều kiện vô trùng và cách ly trong buồng cấy

Quy trình cấy truyền nấm

+ Kiểm tra các đĩa cấy hàng ngày dưới kính lúp soi nổi và đánh giá sự phát triển của sợi nấm từ các miếng cấy

+ Cấy truyền khi sợi nấm mọc được khoảng 5mm từ miếng cấy

+ Cắt một miếng thạch nhỏ (2×2 mm) từ ra mỗi tản nấm và cấy sang môi trường PGA hoặc một môi trường PCA

3.5.2.2 Phương pháp điều chế môi trường

Trong quá trình nghiên cứu chúng tôi đã sử dụng các loại môi trường nhân tạo PGA, PCA, WA

Môi trường WA (Water agar)

Thành phần: Nước cất: 1000ml

Agar: 20 g

Cách điều chế:

Đun sôi nước cất sau đó cho Agar vào quấy đều cho tan hết rồi đổ vào trong bình tam giác sạch, bịt kín miệng bằng giấy bạc Sau đó đem hấp khử trùng

ở 121ºC (1,5atm) trong thờ gian 45 phút, để nguội 55º - 60ºC trước khi rót vào đĩa peptri đã được khử trùng

Môi trườngWA là môi trường nghèo dinh dưỡng do vậy được sử dụng để phân lập nấm thuần

Môi trường PGA - Potato Glucose Agar

Thành phần: Khoai tây: 200 gam

Glucose: 20 gam

Agar: 20 gam

Nước: 1000ml

Cách điều chế:

Chọn củ khoai tây sạch bệnh, rửa sạch, gọt sạch vỏ , thái nhỏ kích thước

1 x 2 x 1 cm cho vào nồi chứa 1000ml nước cất đun sôi, sau khi đun sôi được 30 phút thì lọc lấy phần nước, bổ sung thêm nước cho đủ 1000ml Cho từ từ 20g đường glucose và 20g agar vào dung dịch nước trên Môi trường được cho vào bình tam giác sau đó hấp khử trùng ở 121ºC trong thời gian 45 phút, để nguội 55º

- 60ºC trước khi rót vào đĩa peptri đã được khử trùng

Công dụng: Môi trường PGA dùng để nuôi cấy nấm phân lập được từ môi trường WA, làm thuần nấm và để nghiên cứu các đặc điểm hình thái, sinh học của nấm

Môi trường PCA: (Potato Carrot Agar)

Thành phần: Khoai tây: 100g

Agar: 20g

Cà rốt: 100g

Nước cất: 1000ml

Cách chế tạo (1000ml): tương tự như môi trường PGA

3.5.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm Alternaria alternata, Rhizoctonia solani

Nguồn nấm: Nấm Alternaria alternata gây bệnh đốm vòng trên cây bí đỏ,

nấm Rhizoctonia solani gây bệnh lở cổ rễ trên cây dưa chuột Các loại nấm đã

được phân lập trên môi trường WA

Thí nghiệm gồm 2 công thức, mỗi công thức nhắc lại 3 lần, mỗi lần nhắc lại 3 hộp petri Thời gian theo dõi: 7 ngày

CT1: Cấy trên môi trường PGA

CT2: Cấy trên môi trường PCA

Chỉ tiêu theo dõi:

đất phù sa đã được khử trùng Thí nghiệm gồm 3 công thức được thiết kế theo khối ngẫu nhiên đầy đủ, mỗi công thức 5 cây (5 chậu) nhắc lại 3 lần, mỗi cây lây

2 lá, mỗi lá lây 5 vết Tổng số vết lây bệnh mỗi công thức: 150

Công thức 1: Có sát thương

Công thức 2: Không sát thương

Công thức 3: Đối chứng

Nguồn nấm: Nấm phấn trắng hại trên dưa chuột

Cây ký chủ làm thí nghiệm: Cây dưa chuột, bí đỏ, mướp đắng

Phương pháp bố trí thí nghiệm trên cây dưa chuột:

Cây ký chủ: Cây dưa chuột sau trồng khoảng 20 ngày, lây nấm trên lá non

Nguồn bệnh: Thu mẫu bệnh phấn trắng do nấm Erysiphe cichoracearum

hại trên dưa chuột Để ẩm để nấm phát triển và hình thành bào tử trên vết bệnh Dùng kim mũi mác gạt trên bề mặt vết bệnh để thu sợi nấm Các sợi nấm này cho vào nước cất vô trùng để mang đi lây bệnh nhân tạo cho dưa chuột trong chậu vại tại nhà lưới

Phương pháp lây bệnh: Dùng panh gắp bông nhúng vào dung dịch bào tử

nấm rồi xoa lên các điểm đã đánh dấu trên bề mặt lá Đối với công thức có sát thương lá thì dùng que cấy nấm tạo vết thương trên bề mặt lá, sau đó tiến hành lây bệnh Các vết lây được đánh dấu bằng bút dạ

Chỉ tiêu theo dõi:

+ Quan sát triệu chứng biểu hiện trên lá

+ Thời kỳ tiềm dục của bệnh

+ Tỷ lệ phát bệnh

Phương pháp bố trí thí nghiệm lây bệnh phấn trắng nhân tạo trên cây bí đỏ

và cây mướp đắng: tương tự như trên cây dưa chuột

3.5.4 Khảo sát hiệu lực phòng trừ bệnh phấn trắng và bệnh giả sương mai hại dưa chuột bằng sử dụng thuốc hóa học

Khảo sát hiệu lực của một số thuốc hóa học phòng trừ bệnh phấn trắng hại dưa chuột ngoài đồng ruộng

Thí nghiệm được bố trí theo phương pháp khảo nghiệm thuốc BVTV đồng ruộng diện hẹp do ngành BVTV quy định Mỗi công thức thí nghiệm bố trí 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc có diện tích 30m2 Thí nghiệm được bố trí theo kiểu khối ngẫu nhiên đầy đủ RCB

+ Công thức 5: Đối chứng, xử lý bằng nước lã

Cây trồng thí nghiệm: Cây dưa chuột (giống VL 112)sau trồng khoảng 45 ngày Phương pháp điều tra theo dõi:

Điều tra tỷ lệ bệnh, chỉ số bệnh các công thức thí nghiệm trước phun 1 ngày và sau phun 3, 7, 10 ngày

Mỗi ô thí nghiệm điều tra 5 điểm theo đường chéo góc, mỗi điểm điều tra

1 m2

Chỉ tiêu theo dõi:

- Hiệu lực phòng trừ của các loại thuốc hóa học thử nghiệm sau phun 3,

+ Công thức 4: TP-zep 18 EC, nồng độ xử lý 0,125%

+ Công thức 5: Đối chứng, xử lý bằng nước lã

Cây trồng: Cây dưa chuột (giống Dưa 103) sau trồng khoảng 45 ngày Phương pháp bố trí thí nghiệm khảo sát hiệu lực phòng trừ bệnh giả sương mai hại dưa chuột của một số loại thuốc hóa hoc: tương tự như thí nghiệm khảo sát hiệu lực của một số thuốc hóa học phòng trừ bệnh phấn trắng

Chỉ tiêu theo dõi:

- Hiệu lực phòng trừ của các loại thuốc hóa học thử nghiệm sau phun 3,

Tb: Tỷ lệ bệnh (hoặc chỉ số bệnh) ở công thức xử lý trước phun Ca: Tỷ lệ bệnh (hoặc chỉ số bệnh) đối chứng sau phun

Cb: Tỷ lệ bệnh (hoặc chỉ số bệnh) đối chứng trước phun