nghiên cứu thành phần hóa học phân đoạn không phân cực từ cây tắc kè đá (drynaria bonii christ )

MỤC LỤC  MỞ ĐẦU 1 Chương 1 TỔNG QUAN 2 1.1 VÀI NÉT VỀ CHI DRYNARIA 2 1.2 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 2 1.2.1 Đặc điểm hình thái 2 1.2.2 Phân bố sinh thái, thu hái và định danh 3 1.3 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÁC CÂY CÙNG CHI 3 1.3.1 Cây Drynaria propinqua 3 1.3.2 Cây Drynaria quercifolia 4 1.3.3 Cây Drynaria fortunei 6 1.4 CÔNG DỤNG VÀ DƯỢC LÝ 14 Chương 2 THỰC NGHIỆM 17 2.1 HÓA CHẤT – THIẾT BỊ PHƯƠNG PHÁP 17 2.1.1 Hoá chất 17 2.1.2 Thiết bị 17 2.1.3 Phương pháp tiến hành 17 2.1.3.1 Phương pháp phân lập các hợp chất 17 2.1.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học các hợp chất 18 2.1.3.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học 18 2.1.3.3.1 Phương pháp thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 18 2.1.3.3.2 Phương pháp thử hoạt tính chống oxi hóa 21 2.3 THỰC NGHIỆM 24 2.3.1 Thu hái nguyên liệu 24 2.3.2 Xử lý mẫu nguyên liệu 24 2.3.3 Phân lập các chất từ cao thô 24 2.3.3.1 Cao nhexane (DBH) 25 2.3.3.1.1 Phân lập các chất từ cao H3 26 2.3.3.1.2 Khảo sát phân đoạn 4 (H34) 27 2.3.3.1.3 Khảo sát phân đoạn 2 (H32) 27 2.3.3.1.4 Khảo sát phân đoạn H345 29 2.3.3.2 Cao chloroform (DBC) 30 2.3.3.2.1 Khảo sát phân đoạn C3 30 2.3.3.2.2 Khảo sát phân đoạn C4 31 Chương 3 KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 34 3.1 HẰNG SỐ VẬT LÝ VÀ CÁC SỐ LIỆU PHỔ NGHIỆM 34 3.1.1 Hợp chất DBH1 (Chrysophanol) 34 3.1.2 Hợp chất DBH2 (αTocopherol) 34 3.1.3 Hợp chất DBH3 (24Methylenecycloartan3βol) 35 3.1.4 Hợp chất DBH4 (Cyclolaudenol) 35 3.1.5 Hợp chất DBC2 (Nobiletin) 36 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT 36 3.2.1 Xác định cấu trúc hợp chất DBH1 36 3.2.2 Xác định cấu trúc hợp chất DBH2 40 3.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất DBH3 45 3.2.4 Xác định cấu trúc hợp chất DBH4 50 3.2.5 Xác định cấu trúc hợp chất DBC2 54 3.3 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC 58 Chương 4 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 4.1 Kết luận 60 4.2 Kiến nghị 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62

   Đầu tiên tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến GS.TSKH Nguyễn Công Hào, người Thầy luôn gắn bó với khoa học, trực tiếp giảng dạy và hướng dẫn tôi trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu thực hiện đề tài này. Thầy đã tận tình truyền đạt những tri thức khoa học uyên bác, đồng thời đã luôn động viên và an ủi tôi để vượt qua những khó khăn trở ngại trong suốt thời gian làm đề tài. Cảm ơn các thầy cô khoa Khoa học Tự nhiên – Trường Đại học Cần Thơ và các thầy cô công tác tại Viện Công nghệ Hóa học – Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam đã truyền đạt những kiến thức quý báu và tận tình hướng dẫn tôi suốt khóa đào tạo vừa qua. Tôi xin cảm ơn TS.Lê Tiến Dũng, TS.Mai Đình Trị, NCS Phạm Thị Nhật Trinh đang công tác tại phòng Hoạt tính sinh học – Viện Công nghệ Hóa học đã nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành luận văn này. Cảm ơn các anh chị Cao học Hóa khóa 16 – Trường Đại học Cần Thơ cùng các bạn bè của tôi đã động viên và giúp đỡ tôi trong quá trình học tập cũng như làm luận văn. Sau cùng, tôi vô cùng cảm ơn gia đình và người thân đã cổ vũ, động viên tôi, luôn là chỗ dựa tinh thần vững chắc cho tôi vượt qua mọi khó khăn để hoàn thành tốt khóa học Xin chân thành cảm ơn! BÙI THỊ THIÊN HƯƠNG   MỤC LỤC    !"# $%& '()*+,+  -./01  234567"89 7":;8<3=>49 ? @:"ABC"89D8E9FG4H"IJ"? ?'@KL,M% ? ?:;*N;"JNJONPO"QEJ? ?:;*N;"JNJQERN3SPTJU ??:;*N;"JNJSPN8E"RV UW%*X%'*YZ[0?\1 U  !"#] /%^] _`abc@Y%@K@ ] P93d8] e8AHf ?@ !"#O9O8e"G"f ?/%^ ? ?E9"#E;g"ThE? ?ijTk6lE"#E;g"ThE? ??@:"TmO3933d88n3JP8oU    !"#??? pa&'b^?? ?q%r['Kr^@$%^ ?? ?sO3d8*btN;CPOJ"PTu?? ?sO3d8*btvP3PORNPTu?U ??sO3d8*b?tUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTu?U ?UsO3d8*bUt;3TPTJEIR"PTu?U ?VsO3d8*btPATR8"u?V ?iKc_+xKZ@_ ?V ?i934H"3dE8Ny3sO3d8*b?V 7"pE"#J"8NJQE"P"R ?] 7"?@zb3{J*b ?| 7"U !"#QEJ"b3{J*b ?| ?i934H"3dE8Ny3sO3d8*bU 7"V@zb3{JsO3d8*b U 7"] !"#QEJ"b3{JsO3d8*b U ??i934H"3dE8Ny3sO3d8*b?UU 7"fpE"#3;3TPJN8J" UV 7"| !"#QEJ"b3{JF}"# U] 7"\ !"#QEJ"b3{J*b? Uf ?Ui934H"3dE8Ny3sO3d8*bUU\ 7" !"#QEJ"b3{J*bU V ?Vi934H"3dE8Ny3sO3d8*bV 7"pE"#STJFP"PI V? 7" !"#QEJ"b3{J393ONP8P" !"#O !"#3{J*b VU 7"? !"#QEJ"b3{J393"~6`•?3{J*b VU   ??pa&€•• V]  !"#UV| pa'pa%cV| Upe8TEm" V| Upe""#H V\ '^p•] F  DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU & DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ANC bNPJIC"#TR8 ‚4!"Nƒ"# ? + JNAP"?E3TRJNJ#"R83 @z  3ƒ"#   „"#  8n  …8  ":" +RCP"J"3R 3JNAP"? I *PEATR8 ‚4o II *PEATRPSIPEATR8 ‚4o4o † †TR38NP"ONJ;P"‡J8P" @z  =B  T s"#  OE"  6ˆ  4h" JCCOR38NE6 8j b R8RNP"E3TRJNET8OTRbP"I @z8 !"#893IH":"QEJ PRNR"3R "‰ETg"=e8 @ #ORNSPN6R"8TQEI <3=ŠT‹"#hE"Œ"#3JP 3NP6J8P#NJO; & R8RNP"E3TRJN"#TR&EJ"8E6 @z8 !"#893IH":"QEJ PNNRTJ8P" 6ƒ8Tg"=e8  + @NP8P"E3TRJNJ#"R83 @z3ƒ"# „"#8n…8":" +RCP"J"3R ONP8P"  "TJ;RN3NP6J8P#NJO;<3=kT•O6‹"# 6 ET8OTR8 ‚4J 6O RT8"#@P"8 563Ž; OO6 @JN8ORN6TTP" ƒ8O•"6ƒ88NhE F  C "#TR8 ‚4!" 8 NOTR8 ‚AJ • R63JTCS8 ƒIH33E;5"P9‘3 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU  ? • ?  3R8P"R  ?  3R8P"8NTR T ? TPNPSPN6 @ o"#8’3O:"8j *•d 6 *6R8;TCETSP“Id 6 †8• †8J"PT † †8;TJ3R8J8R  n-R“J"R # %J6 ” •"#CB#–O32O 6# T#J6 ‡ R#JRN8‡ R• R8J"PT p <3=k3ƒ8 p <3=kT•O6‹"# F  DANH MỤC CÁC BẢNG  bŽ"#pe8QEŽC<3=k3ƒ83JP?] bŽ"#pe8QEŽC<3=k3ƒ83JP\ bŽ"#?pe8QEŽC<3=k3ƒ83JPU? bŽ"#UPC9"Oz+FG?+F•N;CPOJ"PTFG8 !"#QEJ"b 3{J*b8NP"#IE"#6oJ3R8P"I]01?| bŽ"#VPC9"Oz+FG?+3{J*bF•v8P3PORNPTFG8 !"# QEJ"b3{J*b8NP"#IE"#6o*T?U bŽ"#]PC9"Oz+FG?+3{J*b?F•U6R8;TR"R3;3TPJN8J" ?wPTFG8 !"#QEJ"b8NP"#IE"#6o*T?Uf bŽ"#fPC9"Oz+FG?+3{J*bUF•3;3TPTJEIR"PTFG8 !"# QEJ"b3{J*bU8NP"#IE"#6o*T?V bŽ"#|PC9"+FG?+3{J*bF•PATR8"FG8 !"#QEJ" b8NP"#IE"#6oJ3R8P"I]VV bŽ"#\pe8QEŽ8jP…88Š"3B"#P“~JV] bŽ"#pe8QEŽ8jP…88Š"=9"#FC"Fm8=564H"Vf F  DANH MỤC CÁC HÌNH  F  DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC  @—T—3@z  +3{JN;CPOJ"PTt*bu @—T—3@z ? +3{JN;CPOJ"PTt*bu @—T—3?@z*†@\FG?V3{JN;CPOJ"PTt*bu @—T—3U@z&3{JN;CPOJ"PTt*bu @—T—3V@zb3{JN;CPOJ"PTt*bu @—T—3]@z†3{JN;CPOJ"PTt*bu @—T—3f@z  +3{JvP3PORNPTt*bu @—T—3|@z ? +3{JvP3PORNPTt*bu @—T—3\@z*†@\FG?V3{JvP3PORNPTt*bu @—T—3@z&3{JvP3PORNPTt*bu @—T—3@zb3{JvP3PORNPTt*bu @—T—3@z†3{JvP3PORNPTt*bu @—T—3?@z  3{JUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTt*b?u @—T—3U@z ? 3{JUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTt*b?u @—T—3V@z*†@\FG?V3{JUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTt*b?u @—T—3]@z&3{JUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTt*b?u @—T—3f@zb3{JUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTt*b?u @—T—3|@z†3{JUR8;TR"R3;3TPJN8J"?wPTt*b?u @—T—3\@z  +3{J;3TPTJEIR"PTt*bUu @—T—3@z ? +3{J;3TPTJEIR"PTt*bUu @—T—3@z*†@\FG?V3{J;3TPTJEIR"PTt*bUu @—T—3@z&3{J;3TPTJEIR"PTt*bUu “  @—T—3?@zb3{J;3TPTJEIR"PTt*bUu @—T—3U@z†3{J;3TPTJEIR"PTt*bUu @—T—3V@z  +3{JPATR8"t*bu @—T—3]@z ? +3{JPATR8"t*bu @—T—3f@z*†@\FG?V3{JPATR8"t*bu @—T—3|@z&3{JPATR8"t*bu @—T—3\@zb3{JPATR8"t*bu @—T—3?@z†3{JPATR8"t*bu @—T—3?pe8QEŽ8jP…88Š"C"‘3 “ [...]... trình nghiên cứu về loại thảo dược quý này Từ những dược tính đã biết đến trong dân gian có thể tắc kè đá vẫn còn ẩn chứa những công dụng hữu ích khác mà chúng ta chưa biết đến Nhằm góp phần tìm hiểu về cây tắc kè đá, chúng tôi tiến hành nghiên cứu thành phần hóa học phân đoạn không phân cực từ cây tắc kè đá (Drynaria bonii Christ. ) Mục tiêu của đề tài Tách chiết và phân lập một số hợp chất từ phân đoạn. .. của quá trình nghiên cứu Tắc kè đá (hay còn gọi là ráng đuôi phụng, tổ rồng, ) - tên khoa học Drynaria bonii Christ - là một loại thảo dược từ lâu được nhân dân dùng để trị các bệnh về xương khớp, bong gân, Trên thế giới cũng như ở Việt Nam có nhiều công trình nghiên cứu về thành phần hóa học cây bổ cốt toái (Drynaria fortunei J.Sm) - cây cùng chi với tắc kè đá, tuy nhiên với cây tắc kè đá thì chưa... VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC 2011 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ - - Sơ đồ 1 Quy trình điều chế các cao thô từ cây tắc kè đá 25 Sơ đồ 2 Quy trình điều chế các phân đoạn từ cao n-hexane 25 Sơ đồ 3 Phân lập hợp chất DBH1 từ cao H34 27 Sơ đồ 4 Phân lập hợp chất DBH2 từ cao H32 28 Sơ đồ 5 Phân lập hợp chất DBH3 và DBH4 từ cao H345 29 Sơ đồ 6 Phân lập hợp chất DBC1 từ cao C3 31 Sơ đồ 7 Phân lập hợp chất DBC2 từ cao C4... Chí Minh 1.3 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÁC CÂY CÙNG CHI 1.3.1 Cây Drynaria propinqua Năm 1992 Lii SQ và cộng sự tại Đại học Dược Trung quốc đã phân lập được ( -)- epiafzelechin-3-O-β-allopyranoside ( 1) ; 4-O-β-D-allopyranosyl caffeat ( 2) ; β-sitosterol-3-O-D-glucopyranoside từ toàn cây Dynaria propinqua.21 BÙI THỊ THIÊN HƯƠNG 3 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC 2011 OH HO O H HO O OH OH H H O H OH H OH ( -)- Epiafzelechin-3-O-β-D-allopyranoside... THẠC SĨ HÓA HỌC 2011 - Phân biệt: Ngoài ra, người ta còn dùng cả thân rễ cây tắc kè đá Drynaria bonii Christ với cùng công dụng như cây trên Về hình thái cây này gần giống như cây trên, chỉ khác một số chi tiết sau: các túi bao tử xếp lộn xộn khắp dưới mặt lá, lá không sinh sản có mép lá uốn lượn nông Cần phân biệt với cây tô phượng (Aglaomorpha corocons Cop, hoặc Rseudo drynaria coronans Ching) rất... nhân (NMR): 1H-NMR (500 MHz) và 13C-NMR (125 MHz) đo trên máy Bruker AM500 FT-NMR Spectrometer, Viện Hóa học, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, 18 Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội 2.1.3.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học Việc thử nghiệm các hoạt tính sinh học của các hợp chất được phân lập từ cây tắc kè đá nhằm tìm kiếm những hợp chất có hoạt tính làm cơ sở cho những nghiên cứu định hướng... HÓA HỌC 2011 Năm 2003, Chang EJ đã phân lập từ dịch chiết MeOH rễ cây bổ cốt toái 8 hợp chất flavonoid: epiafzelechin (1 1); epiafzelechin-3-O-β-D-allopyranoside (1 2); epiafzelechin-3-O-(6′′-O-acetyl)-β-D-allopyranoside (1 3); 4β-carboxymethyl-( -)- epiafzelechin methyl ester (1 4); 4β-carboxymethyl-( -)- epiafzelechin (1 5); naringin; epiafzelechin-(4β-> 8)- 4β-carboxymethylepiafzelechin methyl ester (1 6). .. đoạn không phân cực cây tắc kè đá Xác định cấu trúc các chất phân lập được Khảo sát hoạt tính sinh học các chất trên BÙI THỊ THIÊN HƯƠNG 1 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC 2011 Chương 1 TỔNG QUAN - - 1.1 VÀI NÉT VỀ CHI DRYNARIA Chi Drynaria có từ 15 đến 19 loài, sống và phân bố ở Châu Phi, Châu Á đến Châu Úc, trong đó có phổ biến và nhiều nhất ở Trung Quốc Năm 2004 được T.Janssen và H.Schneider phân. .. hoặc Rseudo drynaria coronans Ching) rất giống cây tắc kè đá, cũng là loại cây mọc bám ở các vách đá hoặc trên các cây to, cần chú ý phân biệt khi thu hái Cây này chỉ có 1 loại lá mọc sát gốc, phía trên chia thùy không đều, phía gốc phình to, các túi bào tử nhỏ phân bố đều đặn thành một hàng ở khe các gân phụ, thân rễ ngắn Chương 2 THỰC NGHIỆM - - 2.1 HÓA CHẤT – THIẾT BỊ - PHƯƠNG PHÁP 2.1.1 Hoá... chiratone được tách ra từ cao petroleum ether 38 OH H 26 9 10 4 20 21 18 H 22 11 25 5 H H H 28 8 27 H 24 29 O 13 14 30 H 23 Chiratone (2 8) BÙI THỊ THIÊN HƯƠNG Fern-9(1 1)- ene (2 9) 10 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC 2011 H H H H CH2OAc H H H H Dryocrassol acetate (3 0) H H Hop-22(2 9)- ene (3 1) H CH2OH H O H H H H Dryocrassol (3 2) Isoglaucanone (3 3) Năm 2010 Xin-Luan Wang và cộng sự đã phân lập từ thân rễ cốt toái . thuận lợi để tôi hoàn thành luận văn này. Cảm ơn các anh chị Cao học Hóa khóa 16 – Trường Đại học Cần Thơ cùng các bạn bè của tôi đã động viên và giúp đỡ tôi trong quá trình học tập cũng như làm luận. s38E9„E;h" G6Em"J6D8¦""Em" H"IJ"•8…NE"#8:6:6FG* s3hE@˜Š" 1.3 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÁC CÂY CÙNG CHI 1.3.1 Cây Drynaria propinqua Œ6\&FG3ƒ"#C™8……‘3* s3NE"#QEB34šO:"TmO4. s3  SNRIRT" (3)D  ROSNRIRT"PT (4)D wJ6;N" (5)D  wC8PC8RNPT (6)D wC8PC8RNPT?w*#TE3PO;NJ"PCIR( 7) FG"JN"#"( 8) *H33e8R•3~=Ž"Œ"# ’33e3{"#F=EŸ"  H 3 C CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 H CH 3 H CH 3 H 3 C O H CH 3 OH H H H H H Friedelin