phân tích vi sinh thực phẩm thực khuẩn thể điều hòa quá trình chọn lọc vi khuẩn và ảnh hưởng đến sự hiện diện của vi khuẩn vibrio cholerae tuýp el tor

Tiểu luận PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨMThực khuẩn thể điều hòa quá trình chọn lọc vi khuẩn và ảnh hưởng đến sự hiện diện của vi khuẩn Vibrio cholerae tuýp El Tor... Thực khuẩn thể  Là v

Tiểu luận PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨM

Thực khuẩn thể điều hòa quá trình chọn lọc vi khuẩn và ảnh hưởng đến sự hiện diện của vi khuẩn Vibrio cholerae

tuýp El Tor

Nội dung tiểu luận

Phần 1: Giới thiệu về bài báo

Phần 2: Tổng quan về nghiên cứu

Phần 3: Hoàn cảnh, mục tiêu nghiên cứu

Phần 4: Phương pháp nghiên cứu

Phần 5: Vật liệu nghiên cứu

Phần 6: Quá trình tiến hành nghiên cứu

Phần 7: Bàn luận về nghiên cứu

Giới thiệu về bài báo

Tác giả

 M Shamim Hasan Zahid ; Zaved Waise ; M

Kamruzzaman ; AN Ghosh; G Balakrish Nair; S.A.M Khairul Bashar; John J Mekalanos;Shah

Tổng quan về nghiên cứu

Vi

khuẩn

Vibrio

cholerae

 Phẩy khuẩn gram âm

 Không sinh nha bào

 Thuộc loài vi khuẩn kị khí tùy tiện

 Kích thước 0,5 – 3 micromet

 Di động rất nhanh nhờ tiên mao

 Phân loại theo đặc điểm kiểu hình, gồm 2 tuýp sinh học:

 V cholerae cổ điển

 V cholerae El Tor

Bệnh tả

 Là bệnh truyền nhiễm cấp tính

 Bệnh gây ra do nước bẩn và thực phẩm bị nhiễm trùng

 Bệnh lây truyền qua đường tiêu hóa

 Thời gian ủ bệnh từ 1 – 4 ngày

 Khởi phát đột ngột với các biểu hiện:

Tiêu chảy và nôn nhiều lần

Co thắt cơ bụng

Hạ huyết áp, trụy tim mạch

Bệnh tả

X â Cơ chế gây bệnh của V cholerae:

m

X â m

V ư ợ t

V ư ợ t

K ế t

K ế t

T i ế t

T i ế t

Phát sinh tại Indonesia vào năm 1961.

Là đợt dịch có thời gian kéo dài và phạm vi lan rộng nhất

Nguyên nhân gây bệnh là V cholerae tuýp El Tor

Thực

khuẩn

thể

 Là virus của vi khuẩn

 Sống kí sinh trên vi khuẩn

 Gây bệnh và tiêu diệt vi khuẩn

 Cấu tạo hóa học chủ yếu là ADN và protein

 Có cấu tạo kháng nguyên đặc hiệu và riêng cho từng loại

 Chỉ nhân lên khi ký sinh vào các tế bào vi khuẩn

Hoàn cảnh và mục tiêu

nghiên cứu

 Trong các đại dịch tả trước , vi khuẩn gây bệnh

là V.cholerae tuýp cổ điển

 Trong đại dịch tả lần thứ 7, V cholerae tuýp El Tor đã thay thế V cholerae tuýp cổ điển

 Thực khuẩn thể JSF9 có thể là một nguyên nhân gây ra sự việc trên

Phương pháp nghiên cứu

• Những thử nghiệm về tính cạnh

tranh giữa các tuýp của V cholerae được thực hiện trên chuột thí nghiệm với quy mô nhỏ, trong điều kiện có hoặc không có sự hiện diện của thực khuẩn thể JSF9.

• Những thử nghiệm về tính cạnh

tranh giữa các tuýp của V cholerae được thực hiện trên chuột thí nghiệm với quy mô nhỏ, trong điều kiện có hoặc không có sự hiện diện của thực khuẩn thể JSF9.

Vật liệu nghiên cứu

Các giống vi khuẩn Vibrio cholerae

Từ bộ sưu tập nuôi cấy các thể phân lập của ICDDR, B

Phân lập và ước lượng thực khuẩn thể

Kết quả:

 Thực khuẩn thể hình thành 108 pfu/ml

 Khuẩn lạc thực khuẩn thể có đặc điểm:

Là những mảng rõ rệt có đường kính 1mm

Nổi trên bề mặt canh trường

Trong vùng xuất hiện của V cholerae S224

Quá trình nghiên cứu

Kết quả

 Thuộc hình thái của họ Podoviridae

 Hình thái gồm 1 đầu hình lục giác (45nm) và 1 đuôi ngắn (5nm)

 Gen gồm 1 mạch DNA kép, thẳng, hai đầu dính, khối lượng phân tử 25x106 dalton

 Hấp phụ và xâm nhập: Nhờ đuôi

3 Xác định liều gây bệnh (ID50) ở chuột

3 Xác định liều gây bệnh (ID50) ở chuột

Ruột non của chuột bạch

Ruột non của chuột bạch

Cấy trên đĩa thạch

taurocholate tellurite gelatin

Cấy trên đĩa thạch

taurocholate tellurite gelatin

Kết quả

Dựa vào số khuẩn lạc vi khuẩn đếm được

Xác định tỉ lệ những con chuột bị nhiễm

bệnh tại một liều lượng nhất định

4 Thử nghiệm tính cạnh tranh giữa

10 6 pfu thực khuẩn thể JSF9

Pha loãng 100 lần

(ống 1)

50 microlit

ống 1 Nhóm chuột 1

Ruột non của chuột bạch

Ruột non của chuột bạch

ống 2

Môi trường dinh dưỡng agar

Thuốc kháng sinh thích hợp

Môi trường dinh dưỡng agar

Thuốc kháng sinh thích hợp

50 microlit

ống 2 Nhóm chuột 2

ống 3

Môi trường dinh dưỡng agar

Thuốc kháng sinh thích hợp

Môi trường dinh dưỡng agar

Thuốc kháng sinh thích hợp

Các giống V.cholerae được phân biệt bằng cách dựa vào sức đề kháng của chúng với thuốc kháng

5 Quy trình đột biến gen

E Coli

V Cholerae tuýp cổ điển

V Cholerae

Gen pSC137

Bàn luận về nghiên cứu

 Mặc dù trong điều kiện không có thực khuẩn thể JSF9, các giống thuộc tuýp cổ điển có thể cạnh tranh với các giống thuộc tuýp E1 Tor, nhưng với

sự hiện diện của thực khuẩn thể JSF9 sẽ dẫn đến việc các chủng E1 Tor loại chủng cổ điển khỏi cuộc cạnh tranh sinh tồn

yếu tố khác, đã gây ảnh hưởng đáng kể đến sự đa dạng của chủng E1 Tor và loại bỏ các chủng cổ điển

 Các yếu tố về di truyền và sinh thái dẫn đến việc loại bỏ tuýp cổ điển và thúc đẩy việc xuất hiện

tuýp EI Tor của V cholerae vẫn chưa được giải thích đầy đủ

 Hai nhóm gen của tuýp El Tor gây ra đại dịch lần thứ 7 (VSP-1 và VSP-2) được nhận diện Tuy

nhiên chức năng chính xác của các gen vẫn chưa được khám phá