phân tích phân tử trong chẩn đoán lâm sàng

PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TP.HCM KHOA KHOA HỌC ỨNG DUNG NGÀNH VẬT LÝ KỸ THUẬT NHÓM THỰC HIỆN ĐẶNG NGUYỄN NGỌC AN NGUYỄN LÊ Ấn NGUYỂN LÊ HÒANG ANH NGUYỄN XUÂN HÒA NGUYỄN QUỐC PHONG PHẠM NGUYỄN MẠNH CƯỜNG PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  N I DUNG:Ộ 1. Nh c l i m t s khái ni mắ ạ ộ ố ệ 2. Các ph ng pháp đoươ 3. Các l ai máy dùng trong phân tích lâm sàngọ 4. M t s v n đ c n quan tâmộ ố ấ ề ầ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG 1.khái ni m:ệ  Tr ng thái bão hòa c a oxyạ ủ  Bilirubin  Lactate  Creatine  ure  Glucose PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  Tr ng thái bão hòa c a oxy (SOạ ủ 2 ) là t s gi a ỷ ố ữ l ng oxy c p cho máu v i l ng oxy c p vào ượ ấ ớ ượ ấ  Bilirubin:C3H36N4O6 có trong m t ,máu ,n c ậ ướ ti u,nó là ch t đ c t o thành khi h ng c u đ c ể ấ ượ ạ ồ ấ ượ thay th .ế  Lactate :Lactate là m t l oi ion đ c t o ra do ộ ạ ượ ạ axit lactic có trong máu.Axít lactic là ch t trung ấ gian đ c chuy n hóa có liên quan đ n nhi u ượ ể ế ề ph n ng hóa sinhả ứ  Creatine: là s n ph m c a ph n ng th y phân Phosphocreatineả ẩ ủ ả ứ ủ Phosphocreatine->ADP->ATP+creatine->phosphocreatine  Ure : là m t h p ch t ch a Nit ,là s n ph m t o thành trong ph n ộ ợ ấ ứ ơ ả ẩ ạ ả ng phá v protêinứ ỡ  Glucoselà ngu n g c c a s h at đ ng c a t t cà các c quang ồ ố ủ ự ọ ộ ủ ấ ơ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG 2. Các ph ng pháp phân tích :ươ  Ph ng pháp đi n hóaươ ệ  Ph ng pháp đi n c c đ đo đ PH và COươ ệ ự ể ộ 2  Ph ng pháp đi n tr c quangươ ệ ắ  o [OĐ 2 ] b ng ph h ng ng aiằ ổ ồ ọ  o [N] b ng máy đo ph háp thĐ ằ ổ ụ  B ng máy đo hùynh quang và máy đ n s cằ ơ ắ  Hi n t ng đi n chuy nệ ượ ệ ể PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG  Ph ng pháp đi n hóaươ ệ Phương pháp này để đo dòng điện chạy trong pin điện hóa khi đặt một điện thế ở một điện cực.Điện cực clark là một cảm biến điện để đo áp suất riêng phần của oxi có trong hợp chất PO2 .Điện cực clark thực chất là một pin điện hóa bao gồm 2 điện cực ,catot được bao phủ bởi platin còn anot thì được bao phủ bằng AgCl .Anot AgCl được nhúng vào trong dung dòch đệm phosphate chứa KCl để làm chatá đệm cho ion H+ được tạo ra ở catot . PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  Ph ng pháp i n c c o PH và COươ đ ệ ự để đ độ 2 i n c c ch n l c ion đ c s d ng đ đo đ ho t đ ng c a Đ ệ ự ọ ọ ượ ử ụ ể ộ ạ ộ ủ ion đ c tr ng trong m t nu n ho c DD.M t đi n c c ch n ặ ư ộ ồ ặ ộ ệ ự ọ l c ion có ch a m t màn có kh n ng th m th u các cation ọ ứ ộ ả ă ẩ ấ hay các anion đ c tr ng .V i s có m t c a các ion đ c ặ ư ớ ự ặ ủ ặ tr ng,màn s t o ra m t hi u đi n th t l v i đ ho t ư ẽ ạ ộ ệ ệ ế ỷ ệ ớ ộ ạ đ ngc a ion.ộ ủ Vi c đo pH s s d ng đi n c c ch n l c ion(ISE)v i màn ệ ẽ ử ụ ệ ự ọ ọ ớ th y tinh. ng n c n nh ng sai sót trong quá trình đo pH ủ Để ă ả ữ do nh h ng c a các ion khác gây ra,thì l ng ion ch n l c ả ưở ủ ượ ọ ọ qua màng th y ph i l n.M t lo i màn hay s d ng là màn ủ ả ớ ộ ạ ử ụ thu tinh composite g m các thành ph n : silicon dioxide, liti ỷ ồ ầ oxide,và canxi oxide v i các t l t ng ng 68:25:7(Burtis ớ ỷ ệ ươ ứ and Ashwood,1994). PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG _ Màn thu tinh phân tách DD ki m tra m t 2 v i DD tham kh o ỷ ể ở ặ ớ ả (th ng là DD HCl đã bi t đ pH) m t 2.Khi pH c a DD1 và DD 2 ườ ế ộ ở ặ ủ khác nhau ,thì m t hi u đi n th thong qua màn s hình thành V=V1 ộ ệ ệ ế ẽ -V2 . i n th c a DD1(HCl) đ c ghi nh n l i b i m t đi n Đ ệ ế ủ ượ ậ ạ ở ộ ệ c c tham kh o nh là Ag/AgCl. i n th c a DD2 có th đ c ụư ả ư Đ ệ ế ủ ể ượ ghi nh n l i v i m t đi n c c calomel.Th c t , đi n c c pH tuân ậ ạ ớ ộ ệ ự ự ế ệ ự theo ph ng trình c a Nernstươ ủ V i E : đi n thớ ệ ế R: h ng s khí ph bi nằ ố ổ ế F: h ng s Faraday(=96487 C/mol)ằ ố T: nhi t đ tuy t đ iệ ộ ệ ố Z: đi n tích c a ionệ ủ ai : đ ho t đ ng c a ionộ ạ ộ ủ K :h ng s ,ph thu c các ngu n khác nhauằ ố ụ ộ ồ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  Ph ng pháp i n tr c quangươ đ ệ ắ _L a tr c quang,m t ph n c a vi c ki m tra s ph n x ánh sáng ,là m t k ử ắ ộ ầ ủ ệ ể ự ả ạ ộ ỹ thu t ph bi n dùng đ đ nh l ng n ng đ Na, K, và Liti trong máu. ó là ậ ổ ế ể ị ượ ồ ộ Đ m t k thu t phù h p đ đ nh l ng nh ng nguyên t này,b i vì so v i Ca ộ ỹ ậ ợ ể ị ượ ữ ố ở ớ và Mg,chúng có n ng l ng kích thích th p h n .ă ượ ấ ơ _M ch đích c a l a là cung c p n ng l ng cho các nguyên t này đ nh ng ụ ủ ử ấ ă ượ ố ể ữ đi n t l p v ngoài cùng b kích thích t m c c b n nh y lên m c ệ ử ở ớ ỏ ị ừ ứ ơ ả ả ứ n ng l ng cao h n.Các đi n t m c n ng l ng kích thích này có ă ượ ơ ệ ử ở ứ ă ượ tr ng thái không b n nên s chuy n v m c n ng l ng c b n đ ng ạ ề ẽ ể ề ứ ă ượ ơ ả ồ th i phát ra m t phát x photon có b c sóng đ c tr ng . B c sóng c a ánh ờ ộ ạ ướ ặ ư ướ ủ sáng phát x c a m t nguyên t s đ c tr ng cho nguyên t đó. Khi K, Na, ạ ủ ộ ố ẽ ặ ư ố Liti trong dung d ch (có n c) s t n t i d i d ng cation và đ c r i ở ị ướ ẽ ồ ạ ướ ạ ượ ọ sáng b i đèn ,thì ở Na s phát ra ánh sáng màu vàngẽ ,K phát ra ánh sáng màu tím,và Liti là màu đỏ.C ng đ c a ánh sáng phát ra s t l v i l ng photon phát x .ườ ộ ủ ẽ ỷ ệ ớ ượ ạ [...]...PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG  Đo [O2] bằng phổ hồng ngọai PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG  Đo [N] bằng máy đo phổ háp thụ Gas Chromatography-Mass Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) Spectrometry (GC-MS) PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG Bằng máy đo hùynh quang và máy đơn sắc  _Sự phát huỳnh... hoặc máu PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG Máy GC Hình 3.16 Máy sắc ký khí Bao gồm bình chứa khíbộ phận kiểm sóat áp suất bình-thiết bò bơm-ống trạng thái-máy đo áp suất khi qua cột-đầu thu PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG KẾT HP GIŨA GC VÀ MS _ GC tách các hợp chất hữu cơ dễ bay hơi,kết hợp với máy phân tích khí với máy phân tích phổ khối (MS) tạo thành một máy phân tích phổ Gas... PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG MÁY PHÂN TÍCH CHẤT LỎNG Máy phân tích chất lỏng là lọai máy quang phổ sử dụng tính nhớt của dung dòch (lớp phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) động) PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG Máy phân tích chất lỏng Hình 3.18 giải thích cấu tạo của máy phân tích chất lỏng dưới dạng HPLC, chất lỏng được máy bơm áp suất cao bơm vào ống,sau đó mẫu cần phân. .. sáng phát ra khi điện tử từ trạng thái kích thích về trạng thái ban đầu (trạng thái cơ bản) PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG  Cấu tạo: 1 Nguồn kích thích 2 Tấm lọc sơ cấp 3 Tấm lọc thứ cấp 4 Mẫu vật 5 Đầu thu 6 Bộ đọc và xử lý 3.15 Sơ đồ máy đo hùynh quang PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG      Ứng dụng : máy được sử dụng để đo lường các thuốc sử dụng trong chữa bệnh như: Phenobarbital... lọai sắc tố trong mật) PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG  Máy phân tích phổ khí (GC-gas chromatography) _ Máy phân tích phổ khí là là một lọai của máy sắc ký ,sử dụng khí trơ ở phase động.GC sử dụng việc tách rời các thành phần của hợp chất khí bằng cách cho bay hơi nhiệt độ .Trong cột của máy sắc ký,các hỗn hợp khí trơ thường là những phân tử hữu co nhỏ nhưu các lọai hợp chất có trong các thuốc... (GC-MS) PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG Ưu điểm _ Những lọai máy phát hầu hết là ứng dụng dựa trên sự kết hợp 2 phương pháp GC/MS,nó có thể cho ra 90% cường độ ánh sáng khí (heli) đi qua Khuyết: _ Cả 2 phương pháp điều dựa trên kỹ thuật phân tích micro đối với chất khí,máy phân tích phổ khối họat động ở áp suất khí quyển.Phổ của máy quang phổ khối thì phụ thuộc vào độ chân không PHÂN TÍCH PHÂN... _ Hiện tượng điện chuyển là kỹ thuật sử dụng những phân tử tích điện riêng biệt trong chất lỏng trung gian trong trường điện Nó được sử dụng rộng rãi trong việc tách những protein trong huyết thanh ,trong nước tiễu,xác đònh trọng lượng protein, chuỗi DNA, chuẩn đoán Hình 3.19: Trong hệ thống điện chuyển , bệnh di ng phân, tử tích điệnsánh chuỗi DNA trong nhữ truyền và sự so di chuyển xuyên điềuqua chất... bơm vào ống,sau đó mẫu cần phân tích đưa vào bộ trộn, được đưa lên cột bởi hệ thống bơm với áp suất cao.Máy thu ghi lại sự có mặt của vật chất có trong dung dịch ,và có thể thay đổi góc khúc xạ, hấp thụ ánh sáng cực tím UV,và ánh sáng hùynh quang Giống như máy phổ khí ,thì HPLC giúp ta phân tích các hợp chất được trộn lẫn vào nhau PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐĨAN LÂM SÀNG  Hiện tượng điện chuyển _ . a t t cà các c quang ồ ố ủ ự ọ ộ ủ ấ ơ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG 2. Các ph ng pháp phân tích :ươ  Ph ng pháp đi n hóaươ ệ  Ph. ề ầ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG 1.khái ni m:ệ  Tr ng thái bão hòa c a oxyạ ủ  Bilirubin  Lactate  Creatine  ure  Glucose PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  Tr. photon phát x .ườ ộ ủ ẽ ỷ ệ ớ ượ ạ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  o [OĐ 2 ] b ng ph h ng ng aiằ ổ ồ ọ PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG  o [N] b ng máy đo ph háp thĐ