KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS COMM. EX LAM. VÀ HYDROCOTYLE VUGARIS L.(APIACEAE)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ------ TÔN NỮ LN HƯƠNG TÔN NỮ LIÊN HƯƠNG KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

- -

TÔN NỮ LN HƯƠNG TÔN NỮ LIÊN HƯƠNG

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ

HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG HAI CÂY RAU MÁ

LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS COMM EX LAM

Công trình được hoàn thành tại Bộ môn Hóa HC, Khoa Hóa

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - HCM

Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Ngọc Sương

Phản biện 1: GS.TS Nguyễn Minh Đức

Phản biện 2: PGS.TS Tr n Công Luận

Phản biện 3: PGS.TS Nguyễn Cửu Khoa

Phản biện ĐL 1: PGS.TS Nguyễn Mạnh Cường

Phản biện ĐL 2: TS Tr n Thị Minh

Luận án được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án Tiến sĩ cấp CSĐT Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia TP HCM vào hồi

giờ ngày tháng năm

Có thể tìm hiểu luận án tại:

- Thư viện Khoa học Tổng hợp TP HCM ;

- Thư viện Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên - ĐHQG TP HCM

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ CÔNG BỐ

LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

1 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Chemical examination of Hydrocotyle bonariensis (L.), family of Apiaceae, Tạp

chí Hóa học, 47(5), 542-546, 2009

2 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Contribution to the study on chemical constituents of Hydrocotyle vulgaris (L.),

Apiaceae, Tạp chí Phát triển Khoa Học & Công Nghệ, NXB Đại học quốc gia,

TPHCM, 12(10), 29-32, 2009

3 Tôn Nữ Liên Hương, Lê Hoàng Ngoan, Nguyễn Kim Phi Phụng,

Nguyễn Ngọc Sương, Thành phần hóa học của các cây rau má lá sen Hydrocotyle

bonariensis và Hydrocotyle vulgaris, họ Ngò (Apiaceae), ở tỉnh Tiền giang và

thành phố Cần thơ, Tạp chí Khoa học Đại học Cần Thơ, 22b, 190-199, 2012

4 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Study on bioactivities and chemical constituents of Hydrocotyle bonariensis (L.),

family Apiaceae, Tạp chí Hóa học, 50(4A), 187-190, 2012

5 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Góp phần tìm hiểu thành phần hóa học của cây Rau má lá sen Hydrocotyle

bonariensis L họ Apiaceae, Tuyển tập Hội nghị Khoa học lần thứ 5 Trường ĐH

KHTN TPHCM 11 / 2006

6 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Bá Vi, Nguyễn

Ngọc Sương, Poster No 52, Chemical constituents of volatile oil and organic

extract from Hydrocotyle bonariensis L (Apiaceae), Intensive Course

“Medicinal Chemistry” EU-ASIA LINK Medicinal Chemistry, 2006

7 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Paper (p.68-70) and Oral presentation, Contribution to the study on chemical

constituents of Hydrocotyle vulgaris (L.), family Apiaceae, The 7th Japan Joint Seminar on Collarboration in Advanced Science and Technology, Organized by University of Science, VNU-HCMC, Kyoto Institute of Technology, March 6-7, 2009

Vietnam-8 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Poster 57, Isolation of some phenolic and glycosidic compounds from

Hydrocotyle bonariensis L & Hydrocotyle vulgaris L family Apiaceae, Tóm tắt

Tuyển tập Hội nghị Khoa học lần thứ 7 Trường ĐHKHTN TPHCM, 2010

9 Tôn Nữ Liên Hương, Nguyễn Kim Phi Phụng, Nguyễn Ngọc Sương,

Poster, Contribution to the study on the bioactivities of Hydrocotyle bonariensis

L & Hydrocotyle vulgaris L., family Apiaceae, Hội nghị Khoa học lần thứ 7

1 GIỚI THIỆU LUẬN ÁN 1.1 Đặt vấn đề

Các cây thuộc chi Hydrocotyle mọc dễ nơi ẩm mát và còn được trồng phổ biến

làm rau ăn không những ở nước ta và ở nhiều nước khác cùng có khí hậu nhiệt đới, nóng ẩm Một số cây thuộc chi này vừa là thực phẩm vừa là dược phẩm - không chỉ theo các tài liệu y học cổ truyền mà cả trong các y văn hiện đại Trong những năm gần đây, ở vùng đồng bằng sông Cửu Long có các loài rau

má lá tròn gần giống lá sen, có hương thơm, vị đắng, thường được trồng làm kiểng, sử dụng lá làm rau ăn, được gọi là rau má lá sen Các loài này có tên

khoa học là Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam và Hydrocotyle vulgaris L., chưa được nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học

Luận án chọn thực hiện khảo sát thành phần hóa học các cây rau má lá sen,

Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam và Hydrocotyle vulgaris L nhằm

góp phần tìm hiểu về chi thực vật gần gũi với cuộc sống, chi Hydrocotyle, họ

Ngò (Apiaceae)

1.2 Nhiệm vụ chính của luận án:

- Cô lập, tinh chế, xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất thiên nhiên từ

cây Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam và Hydrocotyle vulgaris L

- Trích ly tinh dầu từ các bộ phận của mỗi cây, xác định thành phần hóa học

- Khảo sát hoạt tính sinh học của hai cây rau má lá sen này

1.3 Ý nghĩa khoa học và đóng góp mới của luận án

1.3.1 Ý nghĩa khoa học

- Luận án là công trình đầu tiên thực hiện các nghiên cứu hóa học trên cây

Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam và bổ sung thêm hai nhóm hợp chất

hóa học mới được cô lập từ cây Hydrocotyle vulgaris L

- Thử nghiệm hoạt tính gây độc trên một vài dòng tế bào ung thư, tính kháng

khuẩn, kháng oxy hóa và khảo sát khả năng làm lành vết thương (in vivo) của

các cao, tinh dầu và một vài hợp chất cô lập được từ hai cây rau má lá sen này

1.3.2 Đóng góp mới của luận án

Hình 1 Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam Hydrocotyle vulgaris L

Luận án đã đóng góp những kết quả mới về thành phần hóa học của hai cây

Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam và Hydrocotyle vulgaris L như sau:

 Đã cô lập được 24 hợp chất tinh khiết, và 4 hỗn hợp, trong đó, có 1 hợp chất mới đã được kiểm tra bằng phần mềm Scifinder vào tháng 08 năm 2012

Hợp chất tự nhiên có cấu trúc mới là:

●1-O-(β-D-galactopyranosyl)-(2S,3S,4R,9′E)-2-(hexadeca-9′-enoylamino)

octadecane-1,3,4-triol

Các nhóm hợp chất được cô lập lần đầu tiên từ Hydrocotyle bonariensis:

 Alkaloid: tetrahydropalmatine, (-)-(S)-xylopinine

 Cerebroside: hydroxynonadecanoylamino]tricosa-18-ene-1,3,4-triol;

1-O-(β-D-galactopyranosyl)-(2S,3S,4R,18E)-2-[(2′R)-2′-Hỗn hợp 1-O-(β-D-galactopyranosyl)-(2S,3S,4R,8E)-2-(14’-methyl pentadecanoylamino)tricosa-8-ene-1,3,4-triol và 1-O-(β-D-galacto

pyranosyl)-(2S,3S,4R,8E)-2-[(2′R)-2′-hydroxyhexadecanoylamino]

docosa-8-ene-1,3,4-triol và 1 hỗn hợp các đồng đẳng cerebroside

 Lignan: hinokinin và savinin (tỷ lệ 1:3)

 Flavonoid: quercetin, quercetin 3-O-β-D-galactopyranoside, kaempferol, kaempferol 3-O-β-D-glucopyranoside

 Triterpene: acid ursolic, lupeol, squalene

 Steroid: dioscin, stigmastan-3,6-dione, β-sitosterol 3-O-β-D-gluco pyranoside, stigmasterol 3-O-β-D-glucopyranoside và spinasterol 3-O-

β-D-glucopyranoside (tỷ lệ 1:1), 3 hợp chất sterol tương ứng

 Các hợp chất khác: acid hexadecanoic, esculetin, sucrose, methylphenyl)-1,3-dioxolane

2-(4′-Các nhóm hợp chất mới được cô lập từ Hydrocotyle vulgaris là:

 Lignan: hinokinin

 Flavanoid: hesperidin

 Đã xác định thành phần hóa học của tinh dầu các bộ phận hoa, lá, thân, rễ của mỗi cây

 Từ kết quả thử nghiệm gây độc trên một vài dòng tế bào ung thư người, tính

kháng khuẩn và khả năng làm lành vết thương (in vivo) cho thấy các cao chiết

và tinh dầu của hai cây rau má lá sen có hoạt tính, trong đó các nhóm hợp chất

của cây Hydrocotyle bonariensis cho kết quả nổi trội hơn

2 BỐ CỤC LUẬN ÁN

3

Luận án gồm phần mở đầu 2 trang, 138 trang nội dung với 4 chương, 86 tài liệu tham khảo, 2 trang danh mục công trình và phần phụ lục các phổ Nội dung gồm có tổng quan 21 trang, thực nghiệm 30 trang, kết quả và biện luận

83 trang, kết luận và kiến nghị 4 trang

NỘI DUNG LUẬN ÁN 2.1 Chương 1 Tổng quan

Tổng hợp các tài liệu nghiên cứu về mô tả thực vật, thành phần hóa học và

hoạt tính sinh học của cây Hydrocotyle bonariensis Comm ex Lam.,

Hydrocotyle vulgaris L và các cây trong cùng chi Hydrocotyle

vulgaris được thu hái tại phường An Hòa, thành phố Cần Thơ Mẫu cây được

nhận danh bởi Dược sĩ Phan Đức Bình công tác trong ban biên tập tạp chí Thuốc và sức khỏe – thành phố Hồ Chí Minh, và Thạc sĩ Nguyễn Thị Kim Huê, bộ môn Sinh học, khoa Khoa Học Tự Nhiên, trường Đại Học Cần Thơ 2.1.1.2 Hóa chất và thiết bị

Trong thực nghiệm, chúng tôi đã sử dụng các hóa chất, thiết bị thường được các nhà hóa thực vật dùng để chiết tách hợp chất thiên nhiên

2.2.2 Phương pháp nghiên cứu

2.2.2.1 Điều chế các loại cao

Trích nóng 2,2 kg bột khô lá cây Hydrocotyle bonariensis với ethanol,

nhiều lần đến kiệt, lọc và cô quay ở áp suất thấp, thu được 145 gam cao

ethanol ở dạng sệt Tương tự, trích nóng 2,3 kg bột khô lá cây Hydrocotyle

vulgaris với ethanol, lọc và cô quay ở áp suất thấp, thu được 158 gam cao

ethanol ở dạng sệt Phần cao thô ethanol được hòa tan bằng nước, sau đó chiết lỏng-lỏng lần lượt với dung môi petroleum ether, chloroform, ethyl acetate và

n-butanol Dịch chiết được làm khan, cô quay dưới áp suất thấp, thu được các

cao tương ứng Các loại cao từ lá cây Hydrocotyle bonariensis gồm cao ether

dầu hỏa PE, 40 g), cao chloroform C, 12,2 g), cao ethyl acetate

(Hb-E, 11,6 g), và cao butanol (Hb-B, 21 g) Các loại cao từ lá cây Hydrocotyle

vulgaris gồm cao ether dầu hỏa (Hv-PE, 47 g), cao chloroform (Hv-C, 14,1 g),

cao ethyl acetate (Hv-E, 13,8 g), và cao butanol (Hv-B, 23,1 g)

Ngoài ra, ngâm dầm (nhiệt độ phòng) 6,7 kg bột khô toàn cây

Hydrocotyle bonariensis với ethanol (nhiều lần, trích kiệt), lọc và cô quay

dung dịch ở áp suất thấp, thu được 560 gam cao ethanol ở dạng sệt Cao thô ethanol được trích pha rắn với silica gel, dung môi giải ly đầu tiên là ether dầu

oC) rồi đến chloroform, ethyl acetate, sau cùng là methanol Các dung dịch giải ly được thu hồi dung môi dưới áp suất thấp, cho ra các cao tương ứng: cao ether dầu hỏa (Hbon-PE, 180 g), cao chloroform (Hbon-C, 30 g), cao ethyl acetate (Hbon-E, 37 g) và cao methanol (Hbon-M, 200 g)

2.2.2.2 Trích ly, cô lập các hợp chất hữu cơ

* Việc cô lập hợp chất hữu cơ được thực hiện bằng sắc ký cột hở với silica gel pha thường hoặc pha đảo RP-18, kết hợp với sắc ký bản mỏng và HPLC

* Cây tươi mỗi loài được phân chia thành các bộ phận: lá, hoa, thân, rễ và trích

ly tinh dầu mỗi bộ phận bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước 2.2.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất được cô lập, thành phần tinh dầu

Việc xác định cấu trúc được thực hiện bằng các phương pháp phân tích phổ nghiệm như 1

H-NMR, 13C-NMR, DEPT, COSY, HSQC, HMBC, HR-ESI-MS, FT-MS và so sánh với số liệu phổ từ tài liệu tham khảo Xác định cấu trúc cerebroside bằng cách thủy phân, oxy hóa mạch carbon và xác định thành phần của các dịch trích sau khi thủy phân, khi oxy hóa này bằng phương pháp GC-

MS, LC-MS Xác định thành phần của tinh dầu bằng phương pháp GC-MS 2.2.4 Thử nghiệm hoạt tính sinh học

Thử nghiệm Brine-shrimp xác định độc tính với ấu trùng Artemia salina (Artemia nauplius) nhằm sơ bộ đánh giá độc tính của mẫu cao hoặc hợp chất

cô lập được, được thực hiện tại phòng thí nghiệm Hóa hữu cơ, khoa KHTN, trường ĐH Cần Thơ

5

Thử nghiệm in vitro gây độc tế bào ung thư, kháng vi sinh vật kiểm định và

kháng oxy hóa: gửi mẫu thử tại phòng Sinh học thực nghiệm, viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên, Viện Khoa học - Công nghệ Việt Nam

Thử nghiệm in vivo hoạt tính làm lành vết thương: tại khoa Khoa học tự nhiên,

Trường Đại học Cần thơ, thực hiện qui trình chữa phỏng cho chuột dựa theo tài liệu đã công bố của Shukla Y.N và cộng sự nghiên cứu hoạt tính làm lành

vết thương của asiaticoside cô lập từ cây cùng chi Hydrocotyle asiatica

2.3 Chương 3 Kết quả và biện luận

2.3.1 Khảo sát cấu trúc hóa học các hợp chất cô lập được

Từ dịch chiết ethanol của cây Hydrocotyle bonariensis, đã cô lập được 22 hợp

chất hữu cơ tinh khiết và ba hỗn hợp gồm hai đồng phân Từ dịch chiết ethanol

của cây Hydrocotyle vulgaris đã cô lập được 7 hợp chất hữu cơ

Trong phần này, chúng tôi chỉ trình bày tóm tắt những điểm mới của luận án

2.3.1.1 Khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất Hb-Ea5

Hợp chất Hb–Ea5 (15 mg) cô lập được từ cao ethyl acetate của toàn cây

H bonariensis (cao Hbon-E), có những đặc điểm như sau:

 Tinh thể dạng phiến, màu trắng Nhiệt độ nóng chảy 139–140 C

 Năng lực triền quang [α]D = + 6,43 (c 0,014 g/ml, MeOH)

 Phổ HR-ESI–MS cho mũi ion phân tử giả với m/z 866,6719 [M+Na]+

 Phổ đồ LC-MS cho thấy mẫu có 1 peak chính với thời gian lưu là 16,5

 Biện luận cấu trúc

Trong phổ 1H–NMR có các tín hiệu của proton olefin tại δH 5,41–5,42, proton của carbon liên kết với oxygen trong vùng δH 3,10–4,30, các proton methylene trong vùng δH 1,30–2,30 và các proton của hai nhóm –CH3 cuối mạch dài, tại δH 0,90 (t) và 0,91 (t)

Phổ C kết hợp phổ DEPT–NMR cho thấy hợp chất này có 1 carbon tứ

cấp amide >C=O (δC 177,1), 2 carbon HC=CH (δC 131,4; 131,9), 7 carbon loại

>CH-O (δC 70,1–79,0), 2 carbon loại –O–CH2– (δC 62,7 và 69,9), các nhóm

methylene (δC 23,0–39,9) và carbon methyl cuối mạch dài (δC 14,4) Ngoài ra,

thông qua phổ HSQC, còn xác định được một carbon dạng >CH-N (δC 51,7)

và carbon anomer (δC 104,7)

Phổ 1H–NMR và HSQC cho thấy có một proton anomer tại δH 4,31 (1H;

1H COSY đến tín hiệu H–2″ tại δH 3,20 Ngoài ra, cũng xác định các tín hiệu H–3″/ H–4″/ H–5″/ H–6″ trong vùng δH 3,20–4,10 dựa vào tương quan 1H–1H COSY, chỉ rõ sự hiện diện của phần đường pyranose trong phân tử

Các dữ liệu phổ 1D-NMR của Hb-Ea5 cho thấy sự hiện diện của 1 phân

tử đường liên kết glycosid với mạch béo, 1 nối amide giữa mạch aminoalcol với mạch béo và có tất cả 4 nhóm –OH trong mạch hở của phân tử, phù hợp với cấu trúc cerebroside tự nhiên

Căn cứ vào phổ HMBC, xác định được 1 nhóm –CHOH có tương quan với nhóm >C=O trong mạch acid béo, 3 nhóm hydroxyl còn lại là thuộc về mạch aminoalcol, tại các vị trí 2, 3 và 4 Thông thường các cerebroside tự

nhiên có cấu trúc mạch aminoalcol với cấu hình 2S, 3S, 4R, và là hợp chất hữu

triền, (phần acid béo có thể có hoặc không có nhóm –OH) Hợp chất Hb-Ea5 cũng hữu triền, năng lực triền quang [α]D = + 6,43 (c 0,014 g/ml; MeOH),

tương tự các cerebroside có các carbon thủ tính với cấu hình 2S, 3S, 4R, 2′R

(như thí dụ trong hình 3.1), nên có thể đề nghị cấu hình cho các carbon thủ

OH

OH

OH

1 3 2

22'

20 18

19

1' 2' 14

14 34

OH

OH

OH

1 3 2

24'

18 12

13

1' 2'16

4

Mucusoside

O OH HO

OH HO

C48H93O10N

Hình 2 Cấu trúc hóa học và năng lực triền quang của leucocerebroside-Lb4và

của mucusoside

7

(Lb1–Lb7) với phần đường trong các hợp chất này là β–D–galactopyranose

Trong hợp chất Hb-Ea5 vừa cô lập được từ cây H bonariensis này, xác định

được tín hiệu proton của đường H–4″ và H–5″ là mũi đôi-đôi có J < 5,0 Hz,

nên đề nghị phần đường của hợp chất Hb-Ea5 là β–D–galactopyranose

Phổ HR-ESI–MS cho mũi ion phân tử giả ở m/z 866,6719 [M+Na]+ phù hợp với công thức phân tử C48H93O10N (tính toán lý thuyết: 866,6692)

Mặt khác, từ phổ FT-MS (ghi nhận ion dương) của phân tử Hb-Ea5

ngoài mũi ion phân tử giả ở m/z 866,7 [M+Na]+

còn có các mũi của mảnh ion:

Việc thủy phân để xác định độ dài mỗi mạch carbon hai bên nhóm amide, và thực hiện oxy hóa để xác định vị trí liên kết đôi trong phân tử chưa thực hiện được vì mẫu chất không đủ nhiều

O

NH O

HO

OH

1 3 2

18 19' 1'

2'

15

13

4 18'

19 23

3 O

OH HO

OH OH

Bảng 1 Số liệu phổ NMR của hợp chất Hb–Ea5 so sánh với cerebroside (2) có cùng

CTPT (C 48 H 93 O 10N) và với leucocerebroside-Lb 4 (C 49 H 95 O 10 N) có cùng gốc đường

Ghi chú (a) Hợp chất leucocerebroside-Lb 4 có liên kết đôi vị trí không được xác định

trên mạch acid béo dài 20 carbon

đôi giữa C-10 và C-11 trên mạch acid béo dài 18 carbon

9

Theo tài liệuYamada K nhận định rằng: thông thường tín hiệu carbon

bên cạnh nối đôi cis sẽ xuất hiện ở δC 27-28, trong khi carbon liền kề nối đôi

của các carbon liền kề nối đôi thuộc vùng δC 32-33, nên đề nghị nối đôi có cấu

hình trans

Việc phân tích dữ liệu phổ NMR của Hb–Ea5 và so sánh với số liệu

của các hợp chất cerebroside trong cây Hydrocotyle leucocephalacơ bản giống nhau Tuy nhiên, khối phổ ESI-MS của Hb–Ea5 phù hợp với CTPT C48H93O10N nhưng trong cây H leucocephala không có hợp chất nào có cùng

công thức phân tử này nên chúng tôi còn chọn hợp chất cerebroside 2 có cùng

phân tử khối nhưng khác cấu trúc mạch carbon, đã được cô lập từ cây Cucumis

sativus L., để so sánh với phổ của hợp chất Hb-Ea5 Kết quả so sánh được

trình bày trong Bảng 1 cho thấy có sự tương đồng

Hợp chất Hb-Ea5 được đề nghị là (2S,3S,4R,18E)-2-[(2′R)-2′-hydroxynonadecanoylamino]tricosa-18-ene-

1-O-(β-D-galactopyranosyl)-1,3,4-triol

Đây là hợp chất mới, đã được kiểm tra trên phần mềm Scifinder, tại Trường Đại học Leuven, Bỉ, tháng 8/2012, tuy nhiên cần phân tích thêm cấu trúc của hợp chất này ngoài phân tích FT-MS đã nêu

2.3.1.2 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất Hb–Ea6

Hợp chất Hb–Ea6 (18 mg) thu được từ cao ethyl acetate của toàn cây H

bonariensis, có những đặc điểm như sau:

 Chất bột vô định hình, màu trắng

 Năng lực triền quang [α]D = + 5,71 (c 0,014 g/ml; MeOH)

 Phổ HR–ESI–MS: cho mũi ion phân tử giả ở m/z 738,5506 [M+Na]+

 Phổ UV kèm theo, có hấp thu cực đại vùng 200 nm

 Phổ IR (KBr)  cm-1: 3440 (N–H), 1715 (C=O) và 1453 (C–C)

O NH O

OH

OH

1 3 2

18 19' 1'

3

O OH HO

OH OH