Khảo sát thành phần hóa học của lá sen được thu hái ở huyện điện bàn, tỉnh quảng nam

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HĨA  VĂN QUỐC HỒNG Đề tài: KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ SEN ĐƯỢC THU HÁI Ở HUYỆN ĐIỆN BÀN, TỈNH QUẢNG NAM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SƯ PHẠM ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐHSP Đôc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA *** *** NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Văn Quốc Hoàng Lớp: 08SHH Tên đề tài: “Khảo sát thành phần hóa học sen thu hái huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam” Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị: - - Nguyên liệu: sen lấy huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam Dụng cụ thiết bị: Máy đo quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS, máy đo sắc kí lỏng kết hợp khối phổ LC-MS, máy đo sắc kí khí kết hợp khối phổ GC-MS Nội dung nghiên cứu: khảo sát thành phần hóa học sen với dung môi nhexane, ethyl acetate, methanol Giáo viên hướng dẫn: Ths Giang Thị Kim Liên Ngày giao đề tài: 01/08/2011 Ngày hoàn thành: 20/05/2012 Chủ nhiệm khoa Giáo viên hướng dẫn Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho khoa ngày tháng năm 2012 Kết đánh giá: Ngày tháng năm 2012 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cám ơn thầy cô giáo khoa tạo điều kiện giúp đỡ để em hoàn thành luận văn Em xin cám ơn Cô Giang Thị Kim Liên người trực tiếp hướng dẫn em trình nghiên cứu đề tài Em xin chân thành cám ơn thầy quản lý phòng thí nghiệm tạo điều kiện cho em phòng thí nghiệm, dụng cụ trình làm thực nghiệm Em mong muốn tiếp tục nhận giúp đỡ cô Giang Thị Kim Liên thầy khoa q trình học tập nghiên cứu sau Đà Nẵng, tháng năm 2012 Sinh viên thực Văn Quốc Hoàng MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu sen 1.2 Các hợp chất hóa học có sen 1.3 Một số ứng dụng sen y học dân gian 1.4 Tình hình nghiên cứu lồi sen giới CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu, dụng cụ hóa chất 2.1.1 Nguyên liệu 2.1.2 Xử lí nguyên liệu 2.1.3 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 2.2 Xác định số hóa lí 2.2.1 Các phương pháp xử lí mẫu 2.2.2 Xác định độ ẩm 2.2.3 Xác định hàm lượng hữu tổng phương pháp tro hóa mẫu 2.2.4 Xác định hàm lượng kim loại phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 2.3 Phương pháp ngâm chiết 2.4 Phương pháp sắc kí lỏng – khối phổ 2.4.1 Sắc kí lỏng (LC-Liquid Chromatography) 2.4.2 Khối phổ (MS2.4.3 Sắc kí lỏng ghép khối phổ (LC/MSmass spectrometry) 2.5 Phương pháp sắc kí khí – khối phổ 2.5.1 Sắc ký khí (GC - Gas Chromatography) 2.5.2 Sắc kí khí ghép khối phổ (GC/MS_Gas Chromatography Mass Spectometry) CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Quy trình nghiên cứu 3.2 Kết xác định số tiêu hóa lí sen 3.2.1 Độ ẩm 3.2.2 Hàm lượng hữu 3.3 Xác định hàm lượng kim loại có sen phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS 3.4 Kết nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết sen 3.4.1 Thành phần hóa học dịch chiết sen n-hexane 3.4.2 Thành phần hóa học dịch chiết sen ethyl acetate 3.4.3 Thành phần hóa học dịch chiết sen methanol 3.5 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẢO Hiệu suất chiết DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử GC Sắc ký khí LC Sắc ký lỏng MS Khối phổ GC-MS Sắc ký khí-khối phổ liên hợp LC-MS Sắc ký lỏng – khối phổ liên hợp LSH Dịch chiết sen n-hexane LSE Dịch chiết sen ethyl acetate LSM Dịch chiết sen methanol TR Thời gian lưu CTPT Công thức phân tử DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Lá sen Hình 1.2 Hoa sen Hình 1.3 Nhị sen Hình 1.4 Quả sen Hình 1.5 Hạt sen Hình 2.1 Sơ đồ cấu tạo máy quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS Hình 3.1.Sơ đồ quy trình nghiên cứu Hình 3.2 Máy quang phổ hấp thụ ngun tử AAS Hình 3.3 Sắc kí đồ dịch chiết sen dung môi n-hexan Hình 3.4 Phổ khối LSH1 Hình 3.5 Phổ khối LSH2 Hình 3.6 Phổ khối LSH3 Hình 3.7 Phổ khối LSH4 Hình 3.8 Phổ khối LSH5 Hình 3.9 Phổ khối LSH6 Hình 3.10 Sắc kí đồ dịch chiết sen etyl axetat Hình 3.11 Phổ khối leucocyanidin Hình 3.12 Sắc kí đồ dịch chiết sen methanol Hình 3.13 Dịch chiết sen với dung môi n-hexane, ethyl acetate, methanol DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Kết khảo sát độ ẩm Bảng 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro Bảng 3.3 Kết khảo sát hàm lượng kim loại Bảng 3.4 Thành phần hóa học dịch chiết với dung môi n-hexane Bảng 3.5 Thành phần hóa học dịch chiết với dung mơi ethyl acetate Bảng 3.6 Thành phần hóa học dịch chiết với dung môi methanol Bảng 3.7 Kết xác định hiệu suất chiết MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Sen loài quen thuộc với người Việt Nam Sen biểu tượng tinh thần dân tộc Việt : “Gần bùn mà chẳng mùi bùn” Cây sen thuộc lồi Nelumbo nucifera Gaertn, ngành Ngọc Lan (magno liophyta), lớp Ngọc Lan (magno liopsida), phân lớp Sen (Nelumbonidae), Sen (Nelumbonales), họ Sen (nelumbonaceae), chi Nelumbo Adans Ngồi có tên khác như: Liên, Ngậu (Tày) Tên khoa học: Nelumbo nuciferagaertn Tên nước ngoài: sacred lotus, chinese water-lily, Indian lotus, Egypian bean Khơng đẹp, hương thơm mà sen có nhiều cơng dụng, tác dụng q báu Hải Thượng Lãn Ông viết sen sau: “cây sen mọc bùn đen mà không ô nhiễm mùi bùn, đượm khí thơm lành đất trời; nên củ, lá, hoa, tua, vỏ, quả, ruột thuốc hay” Nhưng từ trước đến nay, người ta ý đến sử dụng hạt sen (liên nhục) để nấu chè, tâm sen (liên tâm) làm thuốc an thần, tua sen (liên tu) dùng ướp chè, ngó sen (liên ngẫu) làm thực phẩm Còn sen dùng để gói thức ăn, người nghĩ sen có nhiều tác dụng quý để chữa bệnh Ngày nay, nhờ công nghệ đại, nhà khoa học phát chất đặc biệt sen, chất nuciferine có tác dụng chống viêm, giảm đau, trị béo phì, hạ cholesterol máu hoạt tính chống lại serotonin Lá sen chứa nhiều nuciferine Nuciferine chiết từ sen có cơng dụng kéo dài giấc ngủ Ngồi ra, sen chứa nhiều vitamin C, alkaloid tác dụng an thần mạnh tâm sen Về hóa học, sen chứa 0,2-0,3% tanin, 0,77-0,84% alkaloid có nuciferine, nor-nuciferine, roemerine, anonain, liriodenin, pro-nuciferine, O-nornuciferine, armeparin, N-nor-amepavin, metyl-coclaurin, nepherin, dehydro roemerine, dehydro nuciferine, dehydro anonain, N-metyl lisococlaurin, Trong đó, nuciferine alkaloid [1] 39 3.5 Hiệu suất chiết Các dịch chiết thu đem cô quay đuổi dung môi, ta thu cặn chiết Các dịch chiết thu có màu sắc hình 3.13 Hình 3.13 Dịch chiết sen với dung môi n-hexane, ethyl acetate methanol Hiệu suất chiết tính theo cơng thức Hiệu suất chiết = Trong đó: mC: Khối lượng cặn khơ tính theo gam mM: Khối lượng mẫu khơ tính theo gam Kết xác định hiệu suất chiết dung môi n-hexane, ethyl acetate, methanol trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7 kết xác định hiệu xuất chiết 40 n-hexane ethyl acetate methanol Từ bảng cho thấy hiệu suất chiết dung môi n-hexane thấp 1.84%, dung mơi methanol cao 6.00% Từ dự đốn thành phần hóa học sen chứa lượng lớn chất tương đối phân cực phân cực KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ I Kết luận Qua trình nghiên cứu thực nghiệm rút số kết luận sau: Kết xác định số tiêu hóa lí sen - Độ ẩm: 71,47% 41 - Hàm lượng tro vô cơ: 1,95% Hàm lượng kim loại nặng không nhiều nằm giới hạn cho phép y tế rau sấy khơ - Khảo sát thành phần hóa học dịch chiết sen n-hexane Dịch chiết n-hexane: thu hợp chất 9,12,15-Octadecatrienoic acid, methyl ester ( 2.06%), Phytol ( 6.96%), nuciferine ( 45.9%) Dịch chiết ethyl acetate: thu chất (LSE1) leucocyanidin flavonoid, có nhiều ứng dụng quan trọng y học - Dịch chiết methanol: thành phần dịch chiết methanol ta thu hợp chất nuciferine, hợp chất có tác dụng kéo dài giấc ngủ, dùng làm thuốc an thần II Kiến nghị Do thời gian điều kiện có hạn nên kết nghiên cứu kết khảo sát bước đầu thành phần hố học sen, thời gian tới tiếp tục nghiên cứu để cung cấp thêm thông tin khoa học sen ứng dụng sen lĩnh vực y học Tách nghiên cứu sâu thành phần dịch chiết từ sen Thăm dò hoạt tính thú vị dịch chiết từ sen hợp chất phân lập từ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt [1] Đỗ Tất Lợi (2001), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, nhà xuất Y học [2] Hồ Viết Quý (1998), Các phương pháp phân tích đại ứng dụng hóa học, NXB Đại học Quốc gia, Hà Nội [3] Lê Thị Mùi (2009), Giáo trình hóa phân tích, Đại học sư phạm – Đại học Đà Nẵng 42 [4] Nguyễn Đình Triệu (2001), Các phương pháp phân tích vật lý hóa lý, NXB [5] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Các phương pháp cô lập hợp chất tự nhiên, NXB [6] Sách đỏ Việt Nam, Phần thực vật, Nhà xuất khoa học giáo dục Hà Nội [7] Từ Văn Mặc, Phân tích hóa lí – Phương pháp phổ nghiệm nghiên cứu cấu trúc phân tử, 2003 [8] Võ Văn Chi, Phương Đức Tiến, Phân loại thực vật – thực vật bậc cao, Nhà xuất đại học trung học chuyên nghiệp Hà Nội Tiếng anh [9] Harborne J B., Williams C A Advances in flavonoid research since 1992 Phytochemistry 55, 481 - 504 (2000) [10] Huang CF, Chen YW, Yang CY, Lin HY, Way TD, Chiang W Liu SH(2011), Extract of lotus leaf ( Nelumbo nucifera ) and its active constituent catechin with insulin secretagogue activity, Journal of Agricultural and Food Chemítry [11] Lin HY, Kuo YH, Lin YL Chiang W (2009), Antioxidative effect and active components from leaves of Lotus ( Nelumbo nucifera ), Graduate Institute of Food Science and Technology [12] Ohkoshi E , Miyazaki H , K Shindo , Watanabe H , Yoshida A Yajima H (2007), Constituents from the Leaves of Nelumbo nucifera Stimulate Lipolysis in the White Adipose Tissue of Mice, planta medica [13] Takefumi Sagara, Naoyoshi Nishibori, Manami Sawaguchi, Takara Hiro, Mari Itoh, Song Her, Kyoji Morita (2012), Lotus root (Nelumbo nucifera rhizome) extract causes protective effect against iron-induced toxic damage to C6 glioma cell, Inforesights Publishing UK, 179-189 43 [14] You M, Wickramaratne DB, Silva GL, Chai H, Chagwedera TE, Farnsworth NR, Cordell GA, Kinghorn AD, Pezzuto JM (1995), (-)-Roemerine, an aporphine alkaloid from Annona senegalensis that reverses the multidrugresistance phenotype with cultured cells [15] Zeng-Xiang Dong, Xin Zhao, Dong-Fang Gu, Yuan-Qi Shi, Jia Zhang, Xing-Xia Hu, Mei-Qin Hu, Bao-Feng Yang, Bao-Xin Li (2012), Comparative Effects of Liensinine and Neferine on the Human Ether-a-go-go-related Gene Potassium Channel and Pharmacological Activity Analysis Internet [16]http://www.hoahocngaynay.com/vi/hoa-hoc-va-doi-song/hoa-thuc-pham/251cong-dung-cua-flavonoid.html [17]http://thucphamvadoisong.vn/thuc-pham-doi-song/104-thuc-pham-cua-tuonglai/539 cay-sen-nguon-nguyen-lieu-san-xuat-thuc-pham-chuc-nang-va-thuoc.html [18] http://www.hoalinhthoai.com/forum/showthread.php?t=8219 [19] http://www.naturalwellbeing.com/learning-center/Phytol 44 PHỤ LỤC 45 Phụ lục Phổ khối LSE2 46 Phụ lục Phổ khối LSE3 47 Phụ lục Phổ khối LSE4 48 Phụ lục Phổ khối LSE5 49 Phụ lục Phổ khối LSE6 50 Phụ lục Phổ khối LSM1 51 Phụ lục phổ khối LSM3 52 Phụ lục phổ khối LSM4 ... 08SHH Tên đề tài: Khảo sát thành phần hóa học sen thu hái huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị: - - Nguyên liệu: sen lấy huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam Dụng cụ thiết... Khảo sát thành phần hóa học sen thu hái huyện Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam làm đề tài khoá luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm Hố học Mục đích nghiên cứu Xác định số tiêu hóa lý sen khảo sát thành phần. .. Thành phần hóa học dịch chiết sen n-hexane 3.4.2 Thành phần hóa học dịch chiết sen ethyl acetate 3.4.3 Thành phần hóa học dịch chiết sen methanol 3.5 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẢO Hiệu