báo cáo thực tập tại trung tâm công nghệ sinh học đà nẵng
Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học LỜI CẢM ƠN Trong quá trình thực tập tại Trung tâm Công Nghệ Sinh Học Đà Nẵng em đã được các anh chị hướng dẫn, chỉ bảo tận tình giúp chúng em hoàn thành nhiệm vụ nhà trường giao cho. Em xin chân thành cảm ơn trung tâm rất nhiều, đặc biệt là chị Nguyễn Thị Minh Quyên (người hướng dẫn trực tiếp) và anh Võ Quốc Bảo – Trưởng phòng Công nghệ tế bào thực vật, cùng với tất cả các anh chị trong Trung tâm. Trung tâm Công nghệ sinh học đã tạo điều kiện cho chúng em có cơ hội làm việc thực tế qua đó cũng cố lại những kiến thức lý thuyết đã học giúp chúng em hiểu thêm về ngành học của mình. Trong một tháng thực tập, em không tránh khỏi những sai lầm và thiếu sót mong các anh chị thông cảm và bỏ qua cho em. Em xin chân thành cảm ơn. Đà Nẵng, ngày 10 tháng 1 năm 2012. Sv: Nguyễn Lương Bằng SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 1 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học 1.1. Lịch sử, bộ phận chức năng và tình hình hoạt động của Trung tâm Công nghệ Sinh học Đà Nẵng: 5 1.2. Chức năng, nhiệm vụ phòng Công nghệ Tế bào Thực vật: 5 1.3. Bố trí tổng mặt bằng trung tâm 6 1.3.1. Phòng rửa, sản xuất nước khử ion, hấp môi trường: 6 1.3.2. Phòng chuẩn bị môi trường: 8 1.3.3. Phòng nuôi mẫu cấy: 10 2.1. Thành phần chính của môi trường 11 2.1.1. Đường 11 2.1.2. Các muối khoáng đa lượng 11 2.1.3. Các muối khoáng vi lượng: 12 2.1.4. Các vitamin 13 2.1.5. Các chất điều khiển sinh trưởng: 13 2.1.6. Các chất hữu cơ khác 14 2.2. Vấn đề lựa chọn môi trường 15 2.3. Chuẩn bị các dung dịch làm việc 16 3.1. Nguồn gốc phân bố. 21 3.2. Phân loại. 21 3.3. Đặc điểm hình thái 21 3.4. Một số tác động ảnh hưởng đến Dendrobium. 22 3.5. Các giai đoạn phát triển của lan. 23 3.5.1. Giai đoạn nảy mầm của hạt. 23 3.5.2. Giai đoạn cây con. 23 3.5.3. Giai đoạn trưởng thành 23 3.5.4. Giai đoạn mang hoa, đậu trái, tạo hột. 24 3.6. Phương pháp nhân giống lan. 24 3.6.1. Phương pháp nhân giống lan cổ truyền 24 3.6.2. Phương pháp nuôi cấy mô. 24 3.7. Quy trình nuôi trồng Lan Dendrobium. 24 SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 2 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học 3.7.1. Qui trình nuôi trồng 24 3.7.2. Thuyết minh quy trình 25 3.7.3. Môi trường nuôi cấy 27 MỞ ĐẦU Trên thế giới hiện nay, công nghệ sinh học được coi là một trong những ngành khoa học mũi nhọn của thế kỷ 21. Công nghệ sinh học đã và đang làm thay đổi dần cuộc sống của các dân tộc trên thế giới trong các lĩnh vực y tế (nhất là dược phẩm) công nghệ vi sinh, sinh học, nông nghiệp (giống cây, giống con). Có rất nhiều khám phá và ứng dụng từ các thành tựu công nghệ sinh học đã dược loài người thừa hưởng. Năm 2000 thị trường về các sản phẩm mới của công nghệ sinh học đạt khoảng 400 tỷ USD. Trong đó, các sản phẩm phục vụ y dược 29 tỷ đồng, phục vụ công nghiệp thực SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 3 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học phẩm 12,66 tỷ đồng, phục vụ công nghiệp năng lượng 104,7 tỷ đồng, phục vụ công nghiệp hóa phẩm 13,53 tỷ đồng, axit amin 4,5 tỷ đồng, sản phẩm phục vụ nông nghiệp 218,7 tỷ đồng. Các sản phẩm phục vụ riêng cho tạo giống cây trồng, vật nuôi là 210 tỷ đồng, các cây cố định đạm 8,7 tỷ đồng, dịch đường Fructose thay saccharose 5,4 tỷ đồng [1] Một trong những thành tựu nổi bật của công nghệ sinh học là lĩnh vực nhân giống và phục tráng giống cây trồng bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật, tạo ra công nghệ nhân nhanh các giống cây lương thực, rau quả, cây hoa cảnh, cây công nghiệp và cây rừng có năng suất chất lượng tốt và tính chống chịu cao đối với các điều kiện ngoại cảnh bất lợi cũng như sâu bệnh, phục vụ phát triển nông – lâm nghiệp và phủ xanh đất trống đồi núi trọc. Đối với một nước đang phát triển như nước ta hiện nay thì công nghệ sinh học chỉ bước đầu hình thành và phát triển thì việc đi sâu vào nghiên cứu cũng như ứng dụng những nghiên cứu đó vào thực tế sản xuất để nâng cao năng suất cây trồng, vật nuôi là việc làm cần thiết. Vì thế là sinh viên ngành công nghệ sinh học thì việc thực tập thực tế để hiểu về quá trình sản xuất thực tế ngành nuôi cấy mô và qua đó cũng cố lại những kiến thức lý thuyết đã học là việc không thể thiếu. Đó cũng là mục đích của việc thực tập tại Trung tâm Công nghệ Sinh học Đà Nẵng lần này. SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 4 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học II. TỔNG QUAN VỀ TRUNG TÂM CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐÀ NẴNG 1.1. Lịch sử, bộ phận chức năng và tình hình hoạt động của Trung tâm Công nghệ Sinh học Đà Nẵng: - Lịch sử Trung tâm: Được tách ra từ Trung Tâm Công Nghệ Sinh Học và Ứng Dụng Khoa Học Công Nghệ Đà Nẵng theo quyết định số 8725/QD-UBND ngày 12 tháng 11 năm 2010 và chính thức trở thành Trung tâm Công nghệ Sinh học Đà Nẵng ngày 01.01.2011. - Các bộ phận chức năng: + Ban giám đốc + Phòng Tổng hợp Hành chính + Phòng Công nghệ Tế bào Thực vật + Phòng Công nghệ Vi sinh + Trạm sản xuất 1.2. Chức năng, nhiệm vụ phòng Công nghệ Tế bào Thực vật: - Nghiên cứu và ứng dụng công nghệ tế bào thực vật nhằm sản xuất giống cây trồng chất lượng cao phục vụ các vùng trồng trọt, các nhà vườn, hộ nông dân trên địa bàn thành phố Đà Nẵng và các vùng lân cận - Tham mưu cho Ban lãnh đạo Trung tâm trong sự phát triển ngành Công nghệ Tế bào Thực vật phục vụ công tác bảo tồn và nhân nhanh các giống cây trồng, nguồn gen thực vật quý, hiếm. - Đề xuất, nghiên cứu và triển khai các chương trình ứng dụng khoa học công nghệ, các đề tài, dự án thuộc các cấp. - Thực hiện công tác đào tạo, chuyển giao công nghệ tế bào thực vật cho các cá nhân, tổ chức có nhu cầu. SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 5 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học 1.3. Bố trí tổng mặt bằng trung tâm 1.3.1. Phòng rửa, sản xuất nước khử ion, hấp môi trường: - Dụng cụ, chai lọ thuỷ tinh được rửa bằng nước sạch. - Sau đó được úp trên kệ đựng chai lọ hoặc úp lên rổ để khô. - Chai lọ thuỷ tinh khô được cất vào thùng giấy. - Sử dụng nước cất để pha môi trường. - Môi trường sau khi nấu được rót vào các bình thuỷ tinh, đậy nắp rồi đưa vào nồi hấp trong 25 phút, ở 120 – 121 o C, P = 1 – 1,1 at. SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 6 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 7 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Nồi hấp môi trường Thông số kỹ thuật của nồi hấp môi trường: - Nhiệt độ: max = 370 o C. - Áp suất: max = 4 kpa - Dung tích 110 lít. 1.3.2. Phòng chuẩn bị môi trường: Gồm có tủ đựng hoá chất và các máy sau: pH meter SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 8 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Cân kỹ thuật Cân phân tích - Độ chính xác 10 -3 g. - Độ chính xác 10 - 4 g. - max = 320 g. - max = 210 g. SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 9 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Phòng cấy vô trùng: Phòng cấy vô trùng, sàn được lát gạch men, tường được sơn, trên tường có gắn đèn UV để khử trùng phòng. Cửa phòng cấy là cửa kính. Trong phòng cấy có các kệ thép được sơn trắng để đựng bình môi trường. Có 2 loại tủ cấy : tủ cấy đơn và tủ cấy đôi. Trong tủ cấy có đèn trắng để dễ làm việc và đèn UV để khử trùng trước khi làm việc. Ngoài ra, trong phòng cấy còn có bình chữa lửa để có thể dập tắt lửa kịp thời khi gặp sự cố như cháy đèn cồn Tủ cấy đơn 1.3.3. Phòng nuôi mẫu cấy: - Có 2 phòng nuôi có diện tích 4 x 5 m. - Tường phòng nuôi được sơn màu trắng. Các giá đèn được lắp đèn huỳnh quang để chiếu sáng. - Phòng nuôi có nhiệt độ 15 – 30 o C tuỳ theo mẫu cấy và mục đích thí nghiệm. - Biên độ độ ẩm điều chỉnh được từ 20 – 98 o C. - Phòng có gắn các máy kiểm tra chính xác nhiệt độ và độ ẩm. - Trong phòng có các giá bằng gỗ hoặc bằng thép được sơn trắng để bình nuôi cấy. - Các giàn đèn huỳnh quang nhiều ngăn, có độ chiếu sáng ở chổ để bình nuôi cấy từ 2000 – 3000 lux. - Phòng có máy điều hoà nhiệt độ. SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 10 [...]... Trang 27 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học IV KẾT LUẬN Qua đợt thực tập tại “ Trung Tâm Công Nghệ Sinh Học Đà Nẵng ” đã giúp cho em có thể tiếp cận thực tế và được làm việc với phòng kỹ thuật nuôi cấy mô nhiều hơn Đồng thời, thông qua đợt thực tập này đã cũng cố và giúp em hiểu rõ hơn về những kiến thức bộ môn: “ Công nghệ nuôi cấy mô và tế bào thực vật ” mà em đã được học tại trường... http://docs.4share.vn/docs/4179/Ky_thuat_thuc_hanh_nuoi_cay_mo.html SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 29 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Nhận xét của đơn vị thực tập SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 30 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Đà Nẵng, ngày…….tháng…….năm 2012 Xác nhận của trung tâm SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 31 ... giữa thực tế sản xuất và lý thuyết được học tại trường.Thông qua đó giúp em có cách nhìn tổng quát hơn về những kiến thức nuôi cấy mô và tế bào đã học Cuối cùng em xin chân thành cảm ơn quý trung tâm đã tạo cho em điều kiện được hoàn thành tốt đợt thực tập vừa qua SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 28 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học TÀI LIỆU THAM KHẢO 1 http://niemtin.free.fr/congnghesinhhoc.htm... Trang 18 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Chuẩn bị môi trường nuôi cấy protoplast - Môi trường phân lập (Protoplast Isolation medium –PI) Bảng 2.7 Thành phần môi trường phân lập PI [2] Stt Thành phần Nồng độ (mg/L) 1 CaCl2.H2O 1480 2 KH2PO4 27,2 3 KNO3 101 4 MgSO4.7H2O 246 5 CuSO4.5H2O 0,025 6 KI 0,16 pH môi trường 5,8 SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 19 Báo cáo thực tập tốt... Lương Bằng Trang 20 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học III NUÔI CẤY IN VITRO LAN DENDROBIUM 3.1 Nguồn gốc phân bố Giống lan này được Olf Swartz đặt tên vào năm 1799 Giống Dendrobium có khoảng 16000 loài và được tạo thêm nhiều loại mới Tên Dendrobium có nguồn gốc từ chữ Hy Lạp “Dendro”- có nghĩa là gỗ, “bios”- có nghĩa là sống Dendrobium hầu hết là thực vật biểu sinh, sống bám trên... quản được từ 2 đến 3 tháng IAA cần pha lại hàng tháng để đảm bảo hoạt tính SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 13 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Bảng 2.4 Chữ viết tắt của một số chất kích thích sinh trưởng Chữ viết tắt Chữ Chất kích thích sinh viết trưởng tắt Chất kích trưởng BA Benzyladenin KIN Kinetin BAP Benzyladeninpurine NAA Naphthaleneacetic acid... nhu cầu cần thiết cho phản ứng quang hợp ở lan cần phải được quan tâm Nước và muối khoáng cần cung cấp trong môi trường nuôi cấy, ánh sáng của bóng đèn để thay thế ánh sáng mặt trời nhưng không lớn hơn giai đoạn trưởng thành 3.5.3 Giai đoạn trưởng thành SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 23 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Giai đoạn này cây lan ra rễ, nảy chồi, ra lá cho nên nhu cầu... rửa lại bằng nước cất vô trùng đến sạch - Cắt bỏ nhũng phần trắng do javel, tách bẹ, cắt tách đỉnh sinh trưởng ( khoảng 2- 4mm) rồi cấy vào môi trường vô mẫu, để mẫu trong tối SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 25 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học 3.6.2.2 Tạo protocorm like bodies (PLBs) và nhân PLBs - Sau 4-6 tuần thì mẫu tạo PLBs - Ta tiếp tục cấy... được bảo quản dài ngày trong tủ lạnh thường hoặc tủ lạnh sâu Nếu chuẩn bị môi trường tốt thì sẽ giảm một số thời gian đáng kể cho công tác nuôi cấy SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 16 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học Chuẩn bị môi trường Murashige-Skoog (MS, 1962), Chia làm 5 phần: Bảng 2.5 Thành phần môi trường MS [2] Dung dịch stock MS1: Nồng độ (mg/L).. .Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học III MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY Hầu hết tất cả những môi trường nuôi cấy bao giờ cũng gồm năm thành phần chính: - Đường cung cấp nguồn carbon - Các muối khoáng đa lượng - Các muối khoáng vi lượng - Các vitamin - Các chất điều khiển sinh trưởng Ngoài ra, tùy từng tác giả có thể . việc thực tập tại Trung tâm Công nghệ Sinh học Đà Nẵng lần này. SVTT: Nguyễn Lương Bằng Trang 4 Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học II. TỔNG QUAN VỀ TRUNG TÂM CÔNG NGHỆ SINH HỌC. Báo cáo thực tập tốt nghiệp Ngành: Công Nghệ Sinh Học LỜI CẢM ƠN Trong quá trình thực tập tại Trung tâm Công Nghệ Sinh Học Đà Nẵng em đã được các anh chị hướng. HỌC ĐÀ NẴNG 1.1. Lịch sử, bộ phận chức năng và tình hình hoạt động của Trung tâm Công nghệ Sinh học Đà Nẵng: - Lịch sử Trung tâm: Được tách ra từ Trung Tâm Công Nghệ Sinh Học và Ứng Dụng Khoa Học