tìm hiểu vai trò gây bệnh của malassezia.sp bằng phương pháp xét nghiệm trực tiếp parker+ koh

ĐẶT VẤN ĐỀ Nhiễm nấm là một trong những bệnh khá phổ biến trên thế giới. Nấm tồn tại ở khắp mọi nơi: môi trường đất, nước, không khí, ở thực vật, động vật và trên cả cơ thể người. Khi gặp điều kiện thuận lợi như nóng ẩm, sang chấn, sức đề kháng suy giảm…nấm sẽ phát triển và gây bệnh. Bệnh do nấm gây ra gặp nhiều ở các nước nhiệt đới và ôn đới. Bệnh có thể gặp cả người lớn và trẻ em [18]. Việt Nam nằm trong vùng nhiệt đới gió mùa có nhiệt độ và độ ẩm cao là điều kiện thuận lợi cho vi nấm phát triển và dễ dàng gây nhiễm nấm ở người. Những năm gần đây, tỷ lệ nhiễm nấm thông thường do ý thức kém và điều kiện vệ sinh thiếu thốn đã giảm nhiều. Tuy nhiên, do sự xuất hiện đại dịch HIV/AIDS cùng với việc ứng dụng những thành tựu mới của y học hiện đại như: Ghép tạng, dùng thuốc ức chế miễn dịch, hoá trị, xạ trị điều trị ung thư, sử dụng kháng sinh hoạt phổ rộng, corticoid kéo dài, các bệnh rối loạn chuyển hoá Thực tế nghiên cứu cho thấy tỷ lệ nhiễm nấm da trong các bệnh ngoài da trong cộng đồng chiếm tỷ lệ khá cao. Ở Đông Nam Á bệnh da do nấm chiếm 40-60% tổng số bệnh da [39]. Ở Việt Nam, bệnh nấm da đứng hàng thứ 2 trong các bệnh da sau chàm [33]. Trong đó, nhóm nấm men gây bệnh ở da chiếm tỷ lệ khá cao, đặc biệt trong thời gian gần đây người ta đề cập nhiều đến chủng nấm men Malassezia.sp. Nghiên cứu năm 2003 tại Iran, tỷ lệ nhiễm nấm Malassezia.sp chiếm 6% trong số các bệnh da nói chung và 30% bệnh da do vi nấm nói riêng (?). Tại bệnh viện Da liễu TW số bệnh nhân đến khám và làm xét nghiệm tìm nấm rất đông và đa dạng. Trong đó, vi nấm Malassezia. sp gây bệnh ngoài da chiếm tỷ lệ khá cao. Bệnh do rất nhiều loài Malassezia khác nhau gây nên, vì vậy lâm sàng cũng rất đa dạng. Bệnh biểu hiện các triệu chứng lâm sàng không đặc hiệu như: Ngứa, đỏ da, bong vẩy,…Thương tổn có thể gặp bất kỳ vùng nào trên cơ thể nhưng thông thường khu trú vùng tiết nhiều bã nhờn như: da đầu, lưng, ngực, mặt. Ngoài ra, có thể gặp ở nếp kẽ, nang lông, vùng móng…thậm chí vi nấm xâm nhập các cơ quan, bộ phận gây nhiễm nấm nội tạng, khuẩn nấm huyết…Nhiều khi Malassezia.sp 1 là căn nguyên gây bệnh, nhưng đôi khi chỉ phối hợp làm nặng thêm tình trạng bệnh. Do đó, những trường hợp điển hình thường thuận lợi cho chẩn đoán. Còn những trường hợp không điển hình, nếu thiếu điều kiện xét nghiệm dễ dẫn đến chẩn đoán nhầm và bỏ sót không điều trị.(xem DT vân). Bệnh da do nhiễm Malassezia.sp không tử vong, nhưng gây nhiều phiền toái ảnh hưởng đến chất lượng cuộc sống của bệnh nhân, đặc biệt nếu không điều trị đúng và kịp thời sẽ diễn biến dai dẳng, tiến triển nặng nề. Ở Việt Nam còn rất ít nghiên cứu đầy đủ và hệ thống về đặc tính vi nấm, đặc điểm lâm sàng các bệnh biểu hiện ngoài da do nấm Malassezia.sp gây nên. Chính vì lý do trên chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài này với hai mục tiêu: 1. Nghiên cứu tình hình một số biểu hiện ngoài da do vi nấm Malassezia.sp gây nên. 2. Tìm hiểu một số đặc điểm cận lâm sàng thông qua xét nghiệm trực tiếp tìm (hình thái và mật độ tập trung trên kính hiển vi) vi nấm Malssezia.sp Hoặc 1.1. Đánh giá vai trò gây bệnh của Ma thông qua các xét nghiệm trực tiếp tìm vi nấm 2.2 Tìm hiểu vai trò gây bệnh của Malassezia.sp bằng phương pháp xét nghiệm trực tiếp: Parker+ KOH 2 CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm nấm gây bệnh người 1.1.1. Đặc điểm chung ( 1,2, 3,4,5,6) - Nấm (Fungi, Mycetes), là những sinh vật dị dưỡng, thuộc Giới nấm, có cấu tạo đơn bào hoặc đa bào. Nấm không có diệp lục tố nên không tự tổng hợp được chất dinh dưỡng từ ánh sáng mặt trời. Nấm sống hoại sinh trên những cá thể đã chết hoặc ký sinh trên những phần cá thể sống khác. Một số loài có thể sống theo cả hai cách trên. [7, 4]. - Đặc điểm sinh thái + Nấm phát triển cần hai điều kiên không thể thiếu là nhiệt độ và độ ẩm thích hợp. Với nhiệt độ tối ưu để nấm phát triển là 28- 37ºC và độ ẩm môi trường cao, khoảng >70%. + Nấm có thể phát triển môi trường nghèo dinh dưỡng, vì vậy việc phòng tránh nấm gặp nhiều khóa khăn + Nấm sinh sản nhanh, nhiều và dễ dàng nên việc điều trị nấm phải tận gốc + pH: nấm phát triển dải pH rộng (3-10), nhưng thường ưa môi trường kiềm hơn. Tốt nhất là môi trường có pH= 6-6,5. Ở môi trường trung tính hoặc kiềm nhẹ, vi khuẩn phát triển mạnh hơn nấm. Đăc điểm dinh dưỡng + Nấm đòi hỏi chất hữu cơ sẵn có từ môi trường, chúng tiết các men đặc biệt giúp phân giải các chất hữu cơ đó thành những hợp chất đơn giản để hấp thu. + Phần lớn phát triển môi trường đơn giản không cần vitamin, nhưng một số cần thiamine, biotin… để phát triển. 3 Nấm có khả năng gây bệnh cho người và động vật. Đặc biệt ở người nấm gây nhiều bệnh rất nguy hiểm và khó điều trị. Nấm có thể gây bệnh bất kỳ vị trí nào trên cơ thể từ da, lông tóc, móng, thậm chí xâm nhập vào các cơ quan, các mô trong cơ thể. 1.1.2 Đặc điểm cấu trúc và sinh sản nấm 1.1.2.1 Bộ phận sinh dưỡng - Nấm men: cấu tạo đơn bào, sinh sản hình thức nảy chồi, hình tròn hoặc bầu dục, kích thước 3-15mn - Nấm sợi: cấu tạo đa bào, có vách ngăn hoặc không. Chúng chia nhánh và xen kẽ với nhau thành từng khúm nấm. Nấm Malassezia khi ký sinh cũng có thể tạo sợi nấm thô ngắn. 1.1.2.2 Bộ phận sinh sản - Lớp Actinomycetes không có bộ phận sinh sản. Các lớp nấm khác có bộ phân sinh sản vô tính hoặc hữu tính. + Phương thức sinh sản vô tính: phân chia không có sự phối hợp nhân, đó là loại bào tử vô tính, thường do sợi nấm sinh ra, có nhiệm vụ phát triển hoặc/và dự trữ. + Phương thức sinh sản hữu tính: phân chia có sự phối hợp nhân, đó là bào tử nang, bào tử tiếp hợp, bào tử noãn, bào tử đảm. - Nấm men sinh sản theo phương thức nảy chồi. Từ một cực của tế bào nấm mọc một chồi nhỏ, phát triển lớn dần và tách khỏi tế bào mẹ. Một số loài nấm men hình thành sợi giả. Malassezia là một chi nấm men, sinh sản theo phương thức vô tính. 1.1.1.3 Phân loại nấm và bệnh do nấm gây ra [5 6,12,9] 1.1.1.3.1 Phân loại nấm Nấm nói chung có trên một triệu loài, trong đó vi nấm có hàng ngàn trăm loài và có khoảng trên ba trăm loài gây bệnh ở người. Vi nấm gây bệnh được chia làm ba loại là nấm sợi, nấm men và nấm lưỡng hình. Bảng phân loại vi nấm Tg 9 H 4 1.1.1.3.2 Phân loại bệnh do nấm gây ra - Nấm có thể gây ra 4 loại bệnh + Dị ứng với nấm (Hypersensitivity): là phản ứng quá mẫn đối với nấm mốc và bào tử nấm. + Nhiễm độc nấm (Mycotoxicoses): người hoặc động vật ăn phải thức ăn nhiễm nấm sinh ra các độc tố gây nhiễm độc. + Ngộ độc nấm ( Mycetismus): ăn phải nấm độc gây ngộ độc cấp, có thể dẫn tới tử vong. + Nhiễm nấm (Infection): Hầu hết các loại nấm gây ra nhiễm nấm không sinh ra các độc tố nhưng chúng có khả năng gây ra các rối loạn sinh lý như làm tăng chuyển hóa biến đổi cấu trúc màng. - Trong thực tế việc phân lập nấm còn nhiều tranh cãi, nhưng có một số phương pháp thường được áp dụng trong thực tiễn lâm sàng [9] + Bệnh nấm nông(superficial mycose) gây bệnh ngoài da + Bệnh nấm dưới da ( subcuntaneous mycoses) gây các bệnh khu trú vùng dưới da thường chỉ liên quan đến chi dưới, rất ít lan rông… - Ngoài ra dựa và vị trí gây bệnh chia làm hai loại [6] + Nhiễm nấm nông: gồm các loại nấm da và dưới da 1-2 mm + Nhiễm nấm sâu: nấm xâm nhập vào các mô của cơ thể như các loại nấm nội tạng, nấm não, nhiễm nấm máu - Nhiễm nấm phân chia theo căn nguyên + Căn nguyên nội sinh: Nấm Malassezia thường sống ký sinh trên đường tiêu hóa và âm đạo, khi sức đề kháng giảm sút hoặc điều kiện sống tại chỗ thay đổi như: mất cân bằng vi hệ, thay đổi pH da…thì chúng gây bệnh ở vùng này. + Căn nguyên ngoại sinh: khi hít phải các bào tử nấm trong không khí hoặc ăn phải các thức ăn có nhiễm nấm, gây ra các bệnh nấm đường hô hấp, tiêu hóa… 5 1.2. Tình hình nhiễm vi nấm Malassezia.sp Bệnh nấm da mô tả rất sớm trong lịch sử loài người. Năm 1800, Gruby đã nuôi cấy nấm gây bệnh thực nghiệm trên vùng da ẩm ướt. Năm 1910, Sabouraud là người đầu tiên đưa ra bảng định danh loài, đặc điểm lâm sàng và phương pháp điều trị. Với công sức này ông được coi là cha đẻ nghành nấm y học hiện đại. Khâm, huong. [25, 26]. Bệnh do nấm Malassezia đã được mô tả trong y văn thế giới khá lâu. Năm 1846, Eichstedt ghi nhận vai trò nấm gây bệnh da. Raymond Sabouraud đã xác định vi sinh vật gây hiện tương gầu da đầu là: Pityrosporum. Cuối thế kỷ 19, Louis- Charler mô tả vi nấm Malassezia. Giữa thế kỷ 20 các nhà khoa học đã tìm được 3 loài nấm. Trong đó có hai loài nấm men ưa lipid gây bệnh ở người là P. oval & P.orbiculair. Còn một loại , không ưa Lipid thường gây bệnh cho động vật đó là P.pachydermatis.[27] Ban đầu một số nhà khoa học cho rằng hình thái Malassezia là tồn tại dạng sợi nấm, còn Pityrosporum là hình thái nấm men. Nhưng sau đó một thời gian không lâu, Sabouraud khẳng định rằng thực chất đó chỉ là sự phân chia biến đổi trong vòng đời nấm men. Năm 1995- 1996, nhiều thành tựu khoa học công nghệ phát triển nhanh chóng đã ứng dụng thành công trong việc giải mã trình tự bộ gen và đã tìm được 7 loài Malassezia.sp [28]. Năm 2004 các nhà khoa học Nhật Bản tiếp tục tìm ra thêm 4 loài mới nữa. [29].Từ đó các nhà khoa học đã thống nhất dưới tên gọi vi nấm là Malassezia.sp. Các loài này đóng vai trò rất quan trọng trong căn nguyên sinh bệnh của: lang ben, viêm da tiết bã, viêm da cơ địa, viêm nang lông. [30] Trong các báo cáo ở Mexico, Trung và Nam Mỹ gặp tỷ lệ bệnh là 50%. Ở Thái Lan lang ben chiếm 4% trong tổng số bệnh nhân khám Da liễu tại bệnh viện Ramathibodi. Ở Ý chiếm 45 % trong số các bệnh nấm nông. Nhiễm vi nấm Malassezia có thể gặp mọi vùng địa lý, khí hậu và mọi lứa tuổi. Một nghiên cứu ở bệnh viện nhi khoa Sal-PaoLo (Brasil) cho biết tỷ lệ trẻ nhiễm Malassezia.sp chiếm 23% (độ tuổi 0-18 tháng tuổi), 28% ( 11-15 tuổi). Tại Tây Ban Nha Martinez - Roig và cộng sự nghiên cứu trên 1000 bệnh nhi ở độ tuổi từ 2 tháng đến 7 tuổi thấy tỷ lệ 6 nhiễm Malassezia chiếm khoảng 34,5% trong số bệnh da. Một nghiên cứu khác ở Thụy Sỹ cho biết tỷ lệ nhiễm Malassezia chiếm 87% ở nhóm trẻ em độ tuổi 2 tháng đến 15 tuổi. Nhưng cũng có một nghiên cứu ở Israell lại kết luận là không tìm thấy vi nấm Malassezia ở nhóm trẻ em độ tuổi 2 tháng đến 15 tuổi [31] Trên thế giới, tuỳ theo số liệu nghiên cứu của từng tác giả cho thấy viêm da dầu chiếm khoảng 1-3-5% dân số [35], [39], [40]. Tajima và cs (2008) nghiên cứu trên 31 bệnh nhân VDD cho thấy ở vùng da bị tổn thương 93,5% có số lượng Malassezia cao gấp 3 lần so với ở vùng da lành 61,3% [41]. Ở người nhiễm HIV/AIDS, tỷ lệ mắc bệnh viêm da dầu rất cao. Theo Betty Anne Johnson tỷ lệ này là 85% [43]. Cũng theo Betty Anne Johnson, ở những bệnh nhân suy giảm miễn dịch, bệnh thường nặng, dai dẳng và kém đáp ứng với các phương pháp điều trị. Gần đây các nhà khoa học phát hiện ra rằng M. globosa là nguyên nhân của hầu hết các trường hợp của gàuGầu da đầu không chỉ ảnh hưởng tới người bệnh ở góc độ bệnh lý như bong vẩy gầu nhiều, ngứa ngáy, khó chịu mà còn ảnh hưởng tâm lý, không tự tin trong giao tiếp sinh hoạt, ảnh hưởng trực tiếp đến chất lượng cuộc sống.[41, 40]. Một báo cáo năm 2008 từ Trung Quốc trích dẫn có khoảng 1,5% các bệnh nhân da liễu đã được chẩn đoán viêm nang lông do vi nấm Malassezia. Hầu hết trong số họ khỏe mạnh là nam giới và ở độ tuổi trung niên. [45]. Một nghiên cứu khác ở Philippines cho biêt có khoảng 16% bệnh nhân viêm nang long do Malassezia trong tổng số bệnh lý nang long. [46]. Ngoài ra, vi nấm Malassezia còn gây viêm tai giữa, nấm móng, đôi khi phối hợp với các viêm nhiễm do virus ở dạng u nhú. Có nhiều báo cáo về tình trạng nhiễm Malassezia.sp ở máu và nội tạng, năm …báo cáo về nhiễm Ma ở máu trẻ sơ sinh khi đang truyền máu. [47] Từ tháng 7 năm 1996 đến tháng 12 năm 1999, một nghiên cứu trên 588 bệnh nhân có thương tổn móng tay với chẩn đoán nấm móng tại các Phòng khám Da liễu và vi khuẩn học EPM \ UNIFESP, Brazil. Cùng thời gain đó ở Chile, V.Silva cũng 7 cũng có những báo cáo về các trường hợp nhiễm nấm móng. Qua các xét nghiệm soi tươi và nuôi cấy định loại, các nghiên cứu đều đã khẳng đinh M.furfur là căn nguyên gây nấm móng ( 48,49) Việt Nam là nước có nguy cơ mắc các bệnh do nấm rất cao. Bởi nơi này có những đặc điểm tự nhiên, địa lý là nằm trong vùng nhiệt đới gió mùa nên có nhiệt độ và độ ẩm cao. Đồng thời, cùng với sự phát triển của nền văn minh lúa nước chủ yếu làm nông nghiệp nên đa phần ý thức còn kém trong việc thực hiện đúng nguyên tắc vệ sinh. Bên cạnh đó, việc sử dụng thuốc một cách bừa bãi, thiếu kiểm soát, kèm theo một số bệnh lý gây suy giảm miễn dịch như: nhiễm HIV/AIDS, ung thư, nhóm bệnh chuyển hóa… [63, 50] Vì malassezia thuộc vi hệ nên có mặt khắp nơi Viêm da cơ địa + bệnh NTN, hiện nay ĐT? Và + Mal làm trầm trọng thêm tình trạng bệnh(TL thư viện VDCD) + loài thương gặp - Trứng cá thông thường + Sự tham gia của vi nấm malassezia.sp vào quá trình gây bệnh + Sự tham gia của vi nấm malassezia.sp vào quá trình gây bệnh đã được Lê Kinh Duệ đề cập đến. Nhưng theo tác giả vai trò của vi nấm là rất nhỏ so với vi khuẩn Propioni bacterium acnes trong sinh bệnh học của trứng cá. [67]. - U nhú thể mảng - Bạch biến Việt Nam theo số liệu Trần Lan Anh và Cs điều tra ở một xã thuộc ngoại thành Hà Nội thì Lang ben chiếm 3,1% trong số 513 người được khám [67]. Nghiên cứu Lê Anh Tuấn năm 2006 viêm da dầu chiếm tỷ lệ khoảng 1,51% số bệnh nhân đến khám tại Bệnh viện Da liễu TW [11].Nghiên cứu Nguyễn Thị 8 Phượng năm 2009 khoảng 2,13%. Tại một phòng khám ở Việt Nam ghi nhận rằng có khoảng 16% bệnh nhân nhiễm vi nấm Malassezia ở nang lông. [19] VDD, lang ben … * Đặc điểm Malassezia (16,18,36, 58) Là nấm men ưa lipid. Ngoại trừ một số loài như: M.pachydermatis, một số loài gây bệnh móng và ở một số loài khác gây bệnh cơ quan, hệ thống. Malassezia có cấu tạo đơn bào và sinh sản hình thức nảy chồi. Tuy nhiên, một số loài có cấu tạo đa bào như: M.globosa, loài này có phương thức sinh sản hữu tính tức là chúng có khả năng giao phối kết hợp đực cái. Chúng thích nghi, sinh trưởng phát triển và sinh sản hàng loạt. Đồng thời di truyền những đặc tính của loài qua các thế hệ. Vì vậy, thế hệ sau luôn mang nhiều đặc tính về khả năng thích nghi và đề kháng với các yếu tố đào thải nấm từ chính cơ thể hoặc từ môi trường tự nhiên. Do đó, loài M.globosa mang tính chọn lọc tự nhiên cao. Nấm Malassezia.sp thuộc vi hệ trên da của người và động vật máu nóng. Nhiều nghiên cứu cho thấy, có khoảng 70-90% vi nấm Malassezia.sp có mặt trên da người khỏe mạnh. [24]. Tuy nhiên, vi hệ này cũng không bền vững đôi khi cũng thay đổi. Ngay từ khi mới sinh, vi nấm đã xuất hiện và có mặt ở nhiều vị trí trên cơ thể. Nhưng chúng phát triển nhiều ở tuổi vị thành niên, bởi lứa tuổi này tuyến bã hoạt động mạnh và thải nhiều chất bã nhất… Bên cạnh đó, vi nấm cũng có thể đồng nhiễm với một số vi khuẩn và vi nấm khác cũng thuộc vi hệ. Và do đó, chúng có thể căn nguyên gây bệnh hoặc bội nhiễm. Ngoài ra, chúng còn gây bệnh cơ hội khi có điều kiện thuận lợi. 1.1.4 Cơ chế gây bệnh [51, 27, 50] Hầu hết các loại nấm thường sống hoại sinh và phát triển trên thực vật hoặc trong đất, ít khi hích ứng trên cơ thể người. Do đó, người khỏe mạnh ít khi bị mắc nấm. Khi xâm nhập vào cơ thể, nấm gây ra sự đáp ứng với cơ thể vật chủ. 9 Sự xâm nhập diễn ra khi một bào tử nấm nhiễm vào cơ thể ở trạng thái nghỉ không hoạt động, nhưng sau đó chuyển hóa trong cơ thể vật chủ, nẩy mầm và lớn lên, sau đó sinh sản xâm nhập vào mô. Sợi nấm, bào tử nấm hoặc tế bào nấm men có tính kháng nguyên đặc trưng khác nhau. Nó sẽ có hai cơ chế bảo vệ: MDDT và MMDTB(C. Khâm) Trong quá trình TĐC vì lý do nào đó è thiếu hụt gen mã hóa Enzym tổng hợp axit béoèkhông tự tổng hợp ABènguồn AB từ bên ngoài - Xu hướng tìm vùng giàu chất bã nhờn: da đầu, mặt, lưng, ngực… Malassezia.spp tiết 8 loại Lipase và 3 loại Photpholipase è Thủy phân axit béo trung tính è AB tự do è phản ứng trung gian tế bào è kích hoạt con đường viêm.(GuehoT3) - Khả năng né tránh và chống lại quá trình thực bào do + Lớp lipid dày bao quanh tế bào nấm + Tính đa kháng nguyên và thay đổi thành phần 1.3. Một số yếu tố thuận lợi [52, 27, 63, 67] Bệnh do nấm Malassezia thường có nguồn gốc nội sinh do các loài Malassezia phát triển quá mức gây bệnh, đặc biệt khi có điều kiện thuận lợi Các yếu tố thuận lợi hay gặp là: * Yếu tố bên trong: - Sinh lý: phụ nữ có thai, trẻ sơ sinh - Bệnh lý toàn thân: Nhiễm trùng cấp và mạn tính, bệnh chuyển hóa, béo phì…Các bệnh lý như bỏng, ung thư,Hodking, nhiễm HIV/AIDS… - Bệnh lý tại chỗ: làm thay đỏi tính chất da: VDCD, Rụng tóc, Bạch biến… - Sử dụng hóa chất: Dùng kháng sinh phổ rộng, kéo dài làm thay đổi sự cân bằng vi hệ… * Yếu tố bên ngoài: 10 [...]... nấm Malassezia.sp bằng phương pháp xét nghiệm trực tiếp: Parker ink + KOH - Xét nghiệm trực tiếp: + Chúng tôi tiến hành cùng lúc lấy mẫu bệnh phẩm ở các vị trí được chỉ định có nghi ngờ nhiễm nấm Malassezia.sp Và một vị trí khác bình thường ở vùng da tiết nhiều bã nhờn nhưng không bị bệnh của chính bệnh nhân đó + Sau đó, thực hiện cùng phương pháp soi tươi với hóa chất Parker Ink + KOH + Mục đích: So... nấm Malassezia.sp ở một số bệnh ngoài da: Khám theo mẫu bệnh án nghiên cứu (Phụ lục) - Tỷ lệ mật độ tâp trung có khả năng gây bệnh của vi nấm: Xét nghiệm trực tiếp bằng phương pháp Parker ink + KOH 22 Sơ đồ 3: Quy trình thu thập số liệu Bệnh nhân viêm da Khám lâm sàng Xét nghiệm (-) (+) Loại nghiên cứu Tỷ lệ Malassezia.sp GB? Mật độ tập trung vi nấm Tỷ lệ nhiễm Malassezia sp 2.3.3.5 Kỹ thuật xét nghiệm. .. thuật xét nghiệm trực tiếp tìm Malassezia.sp + Bệnh phẩm: Vẩy da, chất bã + Hóa chất: Parker Ink + KOH 20% + Lấy mẫu bệnh phẩm: Sử dụng một trong hai phương pháp sau Nhưng lưu ý trên mỗi bệnh nhân chỉ nên lựa chọn sử dụng một phương pháp cũng như một hóa chất xét nghiệm để giúp cho việc so sánh, đánh giá kết quả chính xác • Cạo vẩy da bằng dao cùn • Phương pháp Scott: Nên dùng băng dính lấy bệnh phẩm trong... ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Đối tương nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng - Tất cả các bệnh nhân nghi nhiễm nấm Malassezia.sp đến khám tại phòng khám bệnh viện Da liễu TW Và có xét nghiệm trực tiếp tìm nấm dương tính - Địa điểm: Khoa Khám bệnh và khoa Xét nghiệm BVDLTW - Thời gian: Từ tháng 02 đến tháng 10 năm 2012 2.1.2 Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh nhân nghi nhiễm nấm Malassezia.sp. .. tích cực bị nhiễm Malassezia.sp huyết Trong khi đi tìm nguồn lây người ta lại phát hiện móng tay của người chăm sóc y tế bị nhiễm Malassezia.sp đó [36], người ta cho rằng bắt buộc bệnh nhân được điều trị ức chế miễn dịch nên được đánh giá cẩn thận để phát hiện ngay từ ban đầu những viêm nhiễm ở móng tay của bệnh nhân bằng các xét nghiệm soi tươi và nuôi cấy nấm Vai trò bệnh nguyên của Malassezia furfur... đích: So sánh mật độ tập trung của vi nấm ở các vị trí da lành (vùng da tiết nhiều bã nhờn và vùng da nghi nhiễm bệnh nhằm đánh giá: Có hay không vai trò gây bệnh của Malassezia.sp hay chúng chỉ thuộc vi hệ mà không gây bệnh trong một số bệnh da thường gặp Qua đó khuyến cáo với lâm sàng về căn nguyên gây bệnh hay chỉ ra đó là nhiễm nấm cơ hôi, làm trầm trọng thêm tình trang bệnh Vì vậy, giúp các bác sỹ... thái vi nấm Malassezia.sp theo tiêu chuẩn chẩn đoán trên kính hiển vi của Zaidi và cộng sự  Bệnh nhân đồng ý tham gia nghiên cứu 20 2.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ  Bệnh nhân nghi nhiễm nấm Malassezia.sp Nhưng có xét nghiệm trực tiếp tìm nấm âm tính  Bệnh nhân không đồng ý tham gia nghiên cứu 2.2 Vật liệu, dụng cụ nghiên cứu 2.3.1 Dụng cụ thăm khám 2.3.2 Vật liệu để lấy bệnh phẩm 2.3 Phương pháp nghiên... n=385 bệnh nhân 2.3.3.3 Biến số nghiên cứu  Nghiên cứu tình hình nhiễm Malassezia.sp: Tỷ lệ nhiễm Malassezia.sp - Khám và làm bệnh án theo mẫu + Tổng số BN đến khám + Số BN nhiễm nấm da 21 + Số BN có các biểu hiên lâm sàng như trên mà xét nghiệm có nấm Malassezia.sp gây bệnh (theo tiêu chuẩn Zaidi và CS) + Tuổi + Giới + Nghề nghiệp + Địa dư + Các mùa trong năm Đánh giá vai trò gây bệnh vi nấm Malassezia.sp. .. loài gây bệnh hệ thống hay gặp: M.pachydermatis chiếm khoảng 46% và M.furfur chiếm 63% [47] - Theo nghiên cứu CDC (1984) nhận thấy gây bệnh nhieu nơi khi người ta lấy các mẫu bệnh phẩm máu, nước tiểu, đờm, phân đều có thể phân lập được Malassezia.sp với tỷ lệ khá cao [58, 11] 1.4.1 Chẩn đoán bệnh do nấm Malassezia - Triệu chứng lâm sàng - Cận lâm sàng + Xét nghiệm trực tiếp Hóa chất: KOH2 0% or KOH+ Parker... lệ (%) bệnh nhân nhiễm nấm Malassezia.sp, tỷ lệ (%) bệnh do Malassezia gây nên, tỷ lệ (%) mật độ tập trung (>20 tế bào/vi trường) của tế bào nấm men trên KHV 2.4.5 Đạo đức trong nghiêm cứu - Nghiên cứu được sự đồng ý BGD BV DL TW - Bệnh nhân được giải thích đầy đủ khi thăm khám, làm xét nghiệm - Bệnh nhân đồng ý tham gia nghiên cứu CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Tỷ lệ bệnh da do nhiễm nấm Malassezia.sp . 1.1. Đánh giá vai trò gây bệnh của Ma thông qua các xét nghiệm trực tiếp tìm vi nấm 2.2 Tìm hiểu vai trò gây bệnh của Malassezia. sp bằng phương pháp xét nghiệm trực tiếp: Parker+ KOH 2 CHƯƠNG. Malassezia. sp với tỷ lệ khá cao. [58, 11]. 1.4.1 Chẩn đoán bệnh do nấm Malassezia - Triệu chứng lâm sàng - Cận lâm sàng + Xét nghiệm trực tiếp . Hóa chất: KOH2 0% or KOH+ Parker Ink . Phương pháp: . trạng bệnh( TL thư viện VDCD) + loài thương gặp - Trứng cá thông thường + Sự tham gia của vi nấm malassezia. sp vào quá trình gây bệnh + Sự tham gia của vi nấm malassezia. sp vào quá trình gây bệnh