Dendrobium aduncum hay còn gọi là Hồng câu hay Thạch hộc móc, Hoàng thảo thân gãy,…Đây là loài lan rừng có hoa nhỏ mọc thành chùm, một loài lan trong chi Lan Hoàng Thảo.Lan Dendrobium aduncum hay phong lan nói chung hiện đang được nhiều người ưa chuộng trong nước cũng như trên thế giới.
ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA HÓA - BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC Đề tài: Nghiên cứu nhân giống vô tính in vitro giống lan Dendrobium Aduncum SVTH: Trần Thị Mơ GVHD: Nguyễn Hoàng Trung Hiếu ĐẠI HỌC BÁCH KHOA KHOA HÓA - BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC Đề tài: Nghiên cứu nhân giống vô tính in vitro giống lan Dendrobium Aduncum SVTH: Trần Thị Mơ GVHD: Nguyễn Hoàng Trung Hiếu Tổng quan tài liệu Kết quả và thảo luận Kết luận & định hướng NỘI DUNG Đối tương & phương pháp nghiên cứu 1 2 3 4 Dendrobium aduncum hay còn gọi là Hồng câu hay Thạch hộc móc, Hoàng thảo thân gãy,… Đây là loài lan rừng có hoa nhỏ mọc thành chùm, một loài lan trong chi Lan Hoàng Thảo. Lan Dendrobium aduncum hay phong lan nói chung hiện đang được nhiều người ưa chuộng trong nước cũng như trên thế giới. Hình 2.1: Lan Dendrobium Aduncum TỔNG QUAN TÀI LIỆU Quy trình nhân giống in vitro cây lan Dendrobium Aduncum 4 - 8 tuần 4 - 8 tuần 4 - 8 tuần4 - 8 tuần 4 -8 tuần (Nguồn vật liệu tự nhiên) (Chồi phát sinh từ protocorm) (Protocorm) (Nhân chồi) (Cây hoàn chỉnh) (Vườn ươm) ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu trong thí nghiệm này là nguồn mẫu invitro giống lan Dendrobium Aduncum có sẵn trung tâm nuôi cấy mô tế bào thực vật tại trường ĐH Bách Khoa Đà Nẵng. Hình 2.1: Nguồn mẫu Dendrobium Aduncum invitro ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2 Phương pháp nghiên cứu Môi trường MS có bổ sung 2% đường + 0,8% agar+ AC + CW + CĐHST (Nuôi cấy ở 25 0 C ± 2, ánh sáng 2000-3000 lux) Thí nghiệm1: Nhân nhanh protocorm Thí nghiệm2: Nhân nhanh chồi Thí nghiệm 3: Tạo cây hoàn chỉnh KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh protocorm. Bảng 3.1: Kết quả nhân nhanh protocorm sau 4 tuần nuôi cấy Ghi chú: 0 : protocorm không phát triển mà biệt hóa thành chồi + : protocorm phát triển chậm ++ : protocorm phát triển vừa +++ : protocorm phát triển tốt 3.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh protocorm. Nhận xét: - Môi trường thích hợp nhất cho sự phát triển và nhân protocorm MS + 0,5mg/l BA + 0,5mg/l NAA + 15% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar. - Khi nồng độ cytokinin/auxin cao thì protocorm có xu hướng chuyển sang dạng chồi mạnh. a dc b Hình 3.1: Protocorm sau 4 tuân nuôi cấy a. Protocorm trên môi trường T2; b. Protocorm trên môi trường T3; c. Protocorm trên môi trường T4; d. Protocorm trên môi trường T1(ĐC) 3.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh chồi lan. Bảng 3.2: Kết quả của việc nhân nhanh chồi sau 4 tuần nuôi cấy Nhận xét: Tất cả các môi trường đều có sự nhân chồi. - Môi trường thích hợp nhất cho sự nhân chồi là môi trường P4 có công thức môi trường: MS + 1,5mg/l BA + 0,1mg/l NAA + 10% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar. 3.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp với NAA đến sự nhân nhanh chồi lan. Hình 3.2: Chồi lan sau 4 tuần nuôi cấy a. Môi trường 1,5 mg/l BA + 0,1mg/l NAA; b. Môi trường 2 mg/l BA + 0,1mg/l NAA a b [...]... 3.3: Rễ lan sau 4 tuần nuôi cấy a Môi trường 0,7 mg/l NAA + 0,1 mg/l BA; b Môi trường 0,9 mg/l NAA + 0,1 mg/l BA b 3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ IAA và Kin đến khả năng hình thành rễ lan 3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ IAA và Kin đến khả năng hình thành rễ lan 3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ IAA và Kin đến khả năng hình thành rễ lan Nhận... NAA và BA đến khả năng hình thành rễ của cây lan 3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ NAA và BA đến khả năng hình thành rễ của cây lan Nhận xét: - Khi cố định nồng độ BA ở mức 0,1 mg/l, sự phát triển rễ của các môi trường chứa nồng độ NAA khác nhau là khác nhau - Môi trường thích hợp cho việc tạo cây hoàn chỉnh cho giống lan Dendrobium aduncum là: MS + 0,9mg/l NAA + 0,1mg/l BA + 10%... khi sử dụng kết hợp IAA với Kin là môi trường M7: MS + 1,5mg/l IAA + 0,1mg/l Kin + 10% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar a b Hình 3.6: Rễ lan phát triển sau 4 tuần nuôi cấy a Môi trường 1,5 mg/l IAA b Môi trường 1,5 mg/l IAA + 0,1 mg/l Kin KẾT LUẬN 1 Giai đoạn nhân nhanh protocorm MS + 0,5mg/l BA + 0,5mg/l NAA + 15% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar 2 Giai đoạn nhân nhanh chồi MS có bổ sung... Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh MS + 0,9mg/l NAA + 0,1mg/l BA + 10% CW + 0,5 % AC + 2% đường + 0,8% agar ĐỊNH HƯỚNG 1 Tiếp tục khảo sát ảnh hưởng của một số chất ĐHST đến sự nhân nhanh chồi lan 2 Xây dựng quy trình chuyển cây lan in vitro ra đất 3 Thử nghiệm sản xuất trên đồng ruộng, trồng và chăm sóc hoa thương phẩm