Nghiên cứu nhân giống lan trầm tím (dendrobium nestor) bằng phương pháp nuôi cấy in vitro

LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đƣợc đề tài nghiên cứu cố gắng nỗ lực thân em nhận đƣợc nhiều giúp đỡ từ thầy giáo, gia đình bạn bè Em chân thành cảm ơn ban lãnh đạo nhà trƣờng, thầy cô giáo Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp cho phép tạo điều kiện thuận lợi để em đƣợc thực đề tài nghiên cứu khoa học Em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới Th.S Nguyễn Thị Thơ - Bộ môn Tài nguyên thực vật rừng, Viện Công nghệ sinh học lâm nghiệp, trƣờng Đại học Lâm Nghiệp Viêt Nam, ngƣời thầy tận tình trực tiếp hƣớng dẫn giúp đỡ em hồn thành nghiên cứu Trong q trình thực nghiên cứu, em thực tập làm việc phịng thí nghiệm Bảo tồn nguồn gen thực vật, Viện Công nghệ sinh học lâm nghiệp, Trƣờng Đại học Lâm Nghiệp Việt Nam Em xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới thầy cô môn thƣờng xuyên giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi thời gian em thực nghiên cứu Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè thƣờng xuyên động viên, giúp đỡ chỗ dựa vững cho em trình học tập, nghiên cứu thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn! Xuân Mai, ngày 15 tháng 05 năm 2018 Sinh viên thực Tạ Thu Trang i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung họ lan 1.1.1.Đặc điểm hình thái chung họ lan 1.1.2.Giá trị kinh tế giá trị sử dụng lan 1.2.1 Vị trí phân loại 1.2.2 Đặc điểm sinh học 1.2.3 Phân bố 1.3 Tình hình nghiên cứu ni cấy mô tế bào hoa lan 1.3.1 Trên giới 1.3.2 Ở Việt Nam………………………………………………………………10 1.4 Những nghiên cứu nuôi cấy in vitro chi Dendrobium 10 1.4.1 Trên giới 10 1.4.2 Ở Việt Nam 12 PHẦN MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 15 2.1.1 Mục tiêu chung 15 2.1.2 Mục tiêu cụ thể 15 2.2.Nội dung nghiên cứu 16 2.3.Đối tƣợng, vật liệu, thời gian địa điểm nghiên cứu 16 2.4.Phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.4.1 Phƣơng pháp luận 17 2.4.2 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm cụ thể 17 ii 2.5 Phƣơng pháp thu thập sử lý số liệu 23 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 25 3.1 Tạo mẫu in vitro 25 3.2 Nghiên cứu khả nhân nhanh thể chồi lan trầ tím 27 3.2.1 Ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến khả nhân nhanh thể chồi lam trầm tím 27 3.2.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím 29 3.2.3: Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím 31 3.3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 37 3.4 Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tạo phát triển rễ lan trầm tím in vitro 39 PHẦN KẾT LUẬN - TỒN TẠI - KIẾN NGHỊ 42 4.1 Kết luận 42 4.2.Tồn 42 4.3 Kiến nghị 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT CHỮ VIẾT TẮT CHỮ ĐẦY ĐỦ BAP 6-benzylamino purine Kinetin 6-furfurylamino purine NAA Naphthyl acetic acid KC Knudson C B5 Gamborg’ B5 medium MS Murashige Skoog (1962) ĐC Đối chứng TN Thí nghiệm ĐHST Điều hịa sinh trƣởng 10 CT Cơng thức 11 TB Trung bình 12 CTTN Cơng thức thí nghiệm 13 cs Cộng 14 VW Vacin Went 15 PLB Protocorm iv DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu tạo mẫu lan trầm tím 18 Bảng 2.2: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến khả nhân nhanh thể chồi 18 Bảng 2.3: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím 19 Bảng 2.4: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím 20 Bảng 2.5: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 20 Bảng 2.6: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 21 Bảng 2.7: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 22 Bảng 2.8: Bố trí thí nghiệm thu thập số liệu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tạo phát triển rễ lan trầm tím in vitro 23 Bảng 3.1: Kết mẫu lan trầm tím 26 Bảng 3.2: Kết ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến khả nhân nhanh thể chồi 28 Bảng 3.3: kết ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím 30 Bảng 3.4: Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím 31 Bảng 3.5: Kết ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 33 Bảng 3.6: kết ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 35 Bảng 3.7: Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến sinh trƣởng chồi lan trầm tím 37 Bảng 3.8: Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tạo phát triển rễ lan trầm tím in vitro 39 v DANH MỤC HÌNH Hình 1: Lan Trầm tím (Dendrobium nestor) Hình 2: Hạt lan sau khử trùng (A) hạt lan phát triển sau tháng (B) 27 Hình 3: Thể chồi cấy (A), môi trƣờng MS (B), KnudsonsC (C) môi trƣờng B5 (D) 28 Hình 4: Thể chồi nhân nhanh mơi trƣờng TT4 (A) TT3 (B) sau tuần nuôi cấy 30 Hình Thể chồi mơi trƣờng CT8 (A) CT5 (B) sau tuần nuôi cấy 32 Hình 6: Chồi lan trầm tím cấy ban đầu (A) môi trƣờng B5 (B), MS (C) KnudsonsC (D) 34 Hình 7: Chồi môi trƣờng TT3 (A), TT4 (B) TT1 (C) 36 Hình 8: Chồi mơi trƣờng CT2 (A) va CT5(B) 38 Hình 9: Chồi lan trầm tím cấy mơi trƣờng rễ RR5 (A) RR3 (B) 40 vi ĐẶT VẤN ĐỀ Lan trầm tím (Dendrobium nestor) lồi hoa q Trầm rừng hoa có màu tím hồng thơm nhẹ nhàng dễ chịu nhƣ hƣơng trầm Hoa lan Trầm bền, sống khỏe, phù hợp với thời tiết miền Lan trầm rừng phát triển tự nhiên mọc với số lƣợng hạt lan có chất dinh dƣỡng dự trữ, khơng có nội nhũ, ngồi tự nhiên nảy mầm nhƣng khơng phát triển khơng có tác động nấm Mycorrhizal Hiện nay, tự nhiên lan trầm rừng cịn bị săn lùng nhiều vẻ đẹp chúng Vì vậy, cần phát triển nhân giống loài lan Một biện pháp hữu hiệu để phát triển loài lan nhân giống kỹ thuật nuôi cấy in vitro Hơn nữa, với việc phát triển quy mơ lớn lồi lan mang đến tiềm kinh tế vơ lớn.Các nƣớc có truyền thống sản xuất hoa lan nhƣ: Anh, Pháp, Mỹ, Thái Lan, Đài Loan…, hàng năm thu đƣợc hàng chục triệu đô la từ nguồn xuất lồi hoa Kỹ thuật ni cấy in vitro phƣơng pháp hiệu với ƣu điểm nhƣ tạo đƣợc trẻ hóa bệnh nên tiềm sinh trƣởng, phát triển suất cao khắc phục đƣợc nhƣợc điểm phƣơng pháp nhân giống truyền thống Do chúng tơi thực đề tài: “Nhân giống lan trầm tím (Dendrobium nestor) kĩ thuật ni cấy in vitro” CHƢƠNG TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung họ lan Họ Lan (danh pháp khoa học: Orchidaceae) họ thực vật có hoa, thuộc Lan Orchidales, lớp thực vật mầm Đây họ lớn thực vật, chúng phân bổ nhiều nơi giới Vƣờn thực vật hoàng gia Kew liệt kê 880 chi gần 22.000 loài đƣợc chấp nhận, nhƣng số lƣợng xác khơng rõ (có thể nhiều tới 25.000 loài) tranh chấp phân loại học Số lƣợng loài lan cao gấp lần số lƣợng lồi động vật có vú hay lần số lƣợng lồi chim Nó chiếm khoảng 6–11% số lƣợng lồi thực vật có hoa Khoảng 800 lồi lan đƣợc bổ sung thêm năm Các chi lớn loài), Epidendrum (khoảng 1.500 Bulbophyllum (khoảng loài), Dendrobium (khoảng 1.400 2.000 loài) Pleurothallis (khoảng 1.000 loài) Họ bao gồm chi Vanilla (chi chứa loài vani), Orchis (chi điển hình) nhiều lồi đƣợc trồng phổ biến nhƣ Phalaenopsis hay Cattleya Ngoài ra, kể từ du nhập loài từ khu vực nhiệt đới vào kỷ 19 nhà làm vƣờn châu Âu Bắc Mỹ bổ sung thêm khoảng 100.000 loại lai ghép giống trồng Hoa lan đƣợc ngƣời tiêu dùng ƣa chuộng vẻ đẹp đặc sắc hình thức đa dạng chúng Cũng giống nhƣ lan, hoa lan hầu nhƣ có tất màu cầu vồng kết hợp màu Hoa lan nhỏ hạt gạo hoa lan lớn có đƣờng kính khoảng m Đa số loại hoa lan đƣợc bán rộng rãi thị trƣờng thƣờng khơng có hƣơng thơm nhƣng tự nhiên có nhiều loại hoa lan có mùi thơm đặc trƣng Vanilla loại hoa lan mà hƣơng thơm đƣợc dùng loại ẩm thực giới có nguồn gốc từ México; có loại hoa lan tỏa mùi nhƣ thịt bị hỏng để hấp dẫn trùng 1.1.1.Đặc điểm hình thái chung họ lan Rễ lan - Lan họ sống phụ (bì sinh) bám, treo lơ lửng thân gỗ khác Các dạng thân gỗ nạc dài, ngắn, mập hay mảnh mai đƣa thể bò xa hay chụm lại thành bụi dày - Rễ làm nhiệm vụ hấp thu chất dinh dƣỡng, chúng đƣợc bao bỡi lớp mô hút dày, ẩm bao gồm lớp tế bào chết chứa đầy khơng khí, ánh lên màu xám bạc Với lớp mơ xốp đó, rễ có khả hấp thu nƣớc mƣa chảy dọc dài vỏ cây, lấy nƣớc lơ lửng khơng khí Thân lan Lan có loại thân: đa thân đơn thân Ở lồi lan sống phụ có nhiều đoạn phình lớn thành củ giả (giả hành) Đó phận dự trữ nƣớc chất dinh dƣỡng để nuôi điều kiện khô hạn sống bám cao Củ giả đa dạng: Hình cầu hình thn dài xếp sát hay rải rác đặn hình trụ xếp chồng chất lên thành thân giả Cấu tạo củ giả: Gồm nhiều mô mềm chứa đầy dịch nhầy, phía ngồi lớp biểu bì với vách tế bào dày, nhẵn bóng bảo vệ, tránh nƣớc mặt trời hun nóng Đa số củ giả có màu xanh bóng, nên với làm nhiệm vụ quang hợp Lá lan Hầu hết loài phong lan tự dƣỡng, phát triển đầy đủ hệ thống Hình dạng thay đổi nhiều, từ loại mọng nƣớc đến loại phiến mỏng Phiến trải rộng hay gấp lại theo gân vòng cung hay gấp lại theo gân hình chữ V Màu sắc thƣờng xanh bóng, nhƣng có trƣờng hợp2 mặt khác Thƣờng mặt dƣới có màu xanh đậm hay tía, mặt lại khảm nhiều màu sặc sỡ Hoa lan Hoa lan có nhiều hình dạng tùy theo loại nhƣng đa số hoa lan có hình dạng sau: Hoa đối xứng qua mặt phẳng Bên ngồi có cánh hoa, cánh ngồi cánh đài, thƣờng có màu sắc kích thƣớc giống Một cánh đài nằm phía hay phía sau hoa gọi cánh đài lý, hai cánh đài nằm bên gọi cánh đài cạnh Nằm kề bên xen kẽ với cánh đài cánh hoa, chúng giống hình dạng, kích thƣớc, màu sắc Cánh cịn lại nằm phía hay phía dƣới, có hình dạng màu sắc khác hẳn với cánh lại gọi cánh môi Cánh môi định giá trị thẩm mỹ hoa lan Ở hoa có trụ lên, phận sinh dục cây, giúp trì nịi giống.Trụ gồm nhị nhuỵ Sau thụ phấn, cánh hoa héo, cuống hoa hình thành lan Quả hạt lan Quả lan thuộc nang, nở theo - đƣờng nứt dọc có dạng cải dài đến hình trụ ngắn phình Khi chín, nở mảnh vỏ cịn dính lại với phía đỉnh phía gốc Hạt lan nhiều, hạt liti Hạt cấu tạo bỡi lớp chƣa phân hoá, mạng lƣới nhỏ, xốp, chứa đầy khơng khí Hạt trƣởng thành sau - 18 tháng 1.1.2 Giá trị kinh tế giá trị sử dụng lan Giá trị sử dụng Hoa lan đƣợc mệnh danh trang sức đẹp mà thiên nhiên ƣu đãi ban tặng cho loài ngƣời Hoa lan đƣợc nhiều ngƣời ƣa thích lẽ hoa lan có cấu trúc kiêu kì phức tạp với trạm trổ tinh vi Nhất phận hoa môi làm nhiều nhà điêu khắc phải than phục Hoa lan có nhiều màu sắc, đƣợc pha trộn cách hài hịa, cân đối lên nét tƣơng phản rõ nét, chìm lắng cách lặng lẽ (Ngơ Quang Vũ, 2002; Chí Thiện, 2004) Chính lẽ đó, hoa lan mang lại nhiều giá trị sử dụng cho ngƣời mặt tinh thần Hội họa, điêu khắc, văn học, âm nhạc, kiến trúc từ lâu sử dụng lan làm ý tƣởng cho nhiều hình ảnh nghệ thuật đặc biệt (Nguyễn Thiện Tịch tác giả, 1996) Ngồi vẻ đẹp kì ảo, hƣơng thơm đặc biệt, hoa lan đƣợc dùng làm dƣợc liệu Trong cuốn: “Dƣợc thảo phƣơng pháp dƣỡng sinh” tác giả PHỤ BIỂU Phụ biểu 1: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng cơng thức khử trùng đến khả tạo mẫu lan Trầm tím Case Processing Summary Cases Valid N Missing Percent CTTN * mausach 288 N 100.0% Total Percent N Percent 0.0% 288 100.0% CTTN * mausach Crosstabulation mausach maunhiem Count Total mausach 44 28 72 61.1% 38.9% 100.0% 26 44 70 37.1% 62.9% 100.0% 73 76 3.9% 96.1% 100.0% 66 70 5.7% 94.3% 100.0% 77 211 288 26.7% 73.3% 100.0% T1 % within CTTN Count T2 % within CTTN CTTN Count T3 % within CTTN Count T4 % within CTTN Count Total % within CTTN Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2sided) a 000 Likelihood Ratio 89.910 000 Linear-by-Linear Association 73.057 000 Pearson Chi-Square N of Valid Cases 83.246 288 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 18.72 Phụ biểu 2: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng công thức khử trùng đến khả tái sinh chồi lan Trầm tím Case Processing Summary Cases Valid N CTTN * mautaisinh Missing Percent 288 N Total Percent 100.0% N 0.0% Percent 288 100.0% CTTN * mautaisinh Crosstabulation mautaisinh khongtaisinh Count Total taisinh 46 26 72 63.9% 36.1% 100.0% 29 41 70 41.4% 58.6% 100.0% 69 76 9.2% 90.8% 100.0% 18 52 70 25.7% 74.3% 100.0% 100 188 288 34.7% 65.3% 100.0% T1 % within CTTN Count T2 % within CTTN CTTN Count T3 % within CTTN Count T4 % within CTTN Count Total % within CTTN Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2sided) a 000 Likelihood Ratio 56.243 000 Linear-by-Linear Association 34.691 000 Pearson Chi-Square N of Valid Cases 52.741 288 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 24.31 Phụ biểu 3: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng tới khả nhân nhanh thể chồi lan Trầm tím Descriptives sothechoi N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Minimum Maximum Upper Bound DC 1.9733 03786 02186 1.8793 2.0674 1.93 2.00 MS 6.2433 12014 06936 5.9449 6.5418 6.12 6.36 KC 7.9533 05859 03383 7.8078 8.0989 7.91 8.02 3.4400 11136 06429 3.1634 3.7166 3.32 3.54 12 4.9025 2.44087 70462 3.3516 6.4534 1.93 8.02 B5 Total Test of Homogeneity of Variances sothechoi Levene Statistic df1 1.084 df2 Sig 409 ANOVA sothechoi Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 65.473 21.824 063 008 65.536 11 F 2753.860 Sig .000 Phụ biểu 4: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng tới khả nhân nhanh thể chồi lan Trầm tím Descriptives sothechoi N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Minimum Maximum Upper Bound DC 1.9733 03786 02186 1.8793 2.0674 1.93 2.00 TT1 4.4233 13204 07623 4.0953 4.7513 4.28 4.54 TT2 7.9667 10017 05783 7.7178 8.2155 7.89 8.08 TT3 9.4933 09866 05696 9.2483 9.7384 9.38 9.56 TT4 3.2450 20255 11694 2.7418 3.7482 3.05 3.45 Total 15 5.4203 2.95444 76283 3.7842 7.0565 1.93 9.56 Test of Homogeneity of Variances sothechoi Levene Statistic df1 1.164 df2 Sig 10 383 ANOVA sothechoi Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 122.043 30.511 159 10 016 122.202 14 F 1915.103 Sig .000 Phụ biểu 5: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng tới khả nhân nhanh thể chồi lan Trầm tím Descriptives sothechoi N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Minimum Maximum Mean Lower Bound Upper Bound DC 1.9733 03786 02186 1.8793 2.0674 1.93 2.00 CT1 3.2383 11295 06521 2.9577 3.5189 3.12 3.35 CT2 9.3767 06658 03844 9.2113 9.5421 9.32 9.45 CT3 5.6433 13051 07535 5.3191 5.9675 5.52 5.78 CT4 4.0367 08021 04631 3.8374 4.2359 3.96 4.12 CT5 12.4500 08185 04726 12.2467 12.6533 12.38 12.54 CT6 6.9600 07550 04359 6.7725 7.1475 6.89 7.04 CT7 5.9533 05859 03383 5.8078 6.0989 5.91 6.02 CT8 2.4783 04805 02774 2.3590 2.5977 2.44 2.53 Total 27 5.7900 3.28978 63312 4.4886 7.0914 1.93 12.54 Test of Homogeneity of Variances sothechoi Levene Statistic df1 731 df2 Sig 18 664 ANOVA sothechoi Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 281.268 35.159 120 18 007 281.389 26 F 5253.352 Sig .000 Phụ biểu 6: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng tới khả nhân nhanh chồi lan Trầm tím Descriptives sochoi N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum DC 1.5467 06807 03930 1.3776 1.7158 1.47 1.60 MS 3.1433 05132 02963 3.0159 3.2708 3.10 3.20 B5 2.8667 09074 05239 2.6413 3.0921 2.80 2.97 KC 2.4333 11930 06888 2.1370 2.7297 2.30 2.53 Total 12 2.4975 63563 18349 2.0936 2.9014 1.47 3.20 Test of Homogeneity of Variances sochoi Levene Statistic df1 df2 Sig 1.255 353 ANOVA sochoi Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 4.385 1.462 196.626 000 Within Groups 059 007 Total 4.444 11 Phụ biểu7: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng tới khả sinh trƣởng chồi lan Trầm tím Descriptives chieucao N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum DC 5600 03464 02000 4739 6461 52 58 MS 2.0767 15044 08686 1.7029 2.4504 1.98 2.25 B5 1.2467 07234 04177 1.0670 1.4264 1.20 1.33 KC 1.5667 09074 05239 1.3413 1.7921 1.50 1.67 Total 12 1.3625 58013 16747 9939 1.7311 52 2.25 Test of Homogeneity of Variances chieucao Levene Statistic df1 df2 Sig 3.697 062 ANOVA chieucao Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 3.627 1.209 129.667 000 Within Groups 075 009 Total 3.702 11 Phụ biểu 8: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng tới khả nhân nhanh chồi lan Trầm tím Descriptives sochoi N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum DC 1.5467 06807 03930 1.3776 1.7158 1.47 1.60 TT1 2.8433 08083 04667 2.6425 3.0441 2.77 2.93 TT2 3.1533 09713 05608 2.9121 3.3946 3.07 3.26 TT3 3.9533 08622 04978 3.7392 4.1675 3.86 4.03 TT4 2.8500 10149 05859 2.5979 3.1021 2.76 2.96 Total 15 2.8693 80602 20811 2.4230 3.3157 1.47 4.03 Test of Homogeneity of Variances sochoi Levene Statistic df1 df2 Sig .161 10 953 ANOVA sochoi Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 9.019 2.255 294.086 000 Within Groups 077 10 008 Total 9.095 14 Phụ biểu 9: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng tới khả sinh trƣởng chồi lan Trầm tím Descriptives chieucaotang N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum DC 5600 03464 02000 4739 6461 52 58 TT1 1.8300 11533 06658 1.5435 2.1165 1.72 1.95 TT2 2.0767 13614 07860 1.7385 2.4149 1.97 2.23 TT3 2.0667 08505 04910 1.8554 2.2779 1.98 2.15 TT4 2.9500 08660 05000 2.7349 3.1651 2.90 3.05 Total 15 1.8967 80095 20680 1.4531 2.3402 52 3.05 Test of Homogeneity of Variances chieucaotang Levene Statistic df1 df2 Sig 1.200 10 369 ANOVA chieucaotang Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 8.886 2.221 232.531 000 Within Groups 096 10 010 Total 8.981 14 Phụ biểu 10: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng tới khả nhân nhanh chồi lan Trầm tím Descriptives sochoi N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum DC 1.5467 06807 03930 1.3776 1.7158 1.47 1.60 CT1 2.5433 11150 06438 2.2663 2.8203 2.46 2.67 CT2 2.9400 10149 05859 2.6879 3.1921 2.83 3.03 CT3 3.2333 08505 04910 3.0221 3.4446 3.17 3.33 CT4 3.4800 06245 03606 3.3249 3.6351 3.43 3.55 CT5 2.4633 06506 03756 2.3017 2.6250 2.40 2.53 CT6 3.1867 15308 08838 2.8064 3.5669 3.07 3.36 CT7 2.9433 06110 03528 2.7916 3.0951 2.89 3.01 CT8 2.7733 05132 02963 2.6459 2.9008 2.73 2.83 Total 27 2.7900 55172 10618 2.5717 3.0083 1.47 3.55 Test of Homogeneity of Variances sochoi Levene Statistic df1 df2 Sig 1.393 18 265 ANOVA sochoi Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 7.769 971 120.500 000 Within Groups 145 18 008 Total 7.914 26 Phụ biểu 11: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng tới khả sinh trƣởng chồi lan Trầm tím Descriptives chieucaotang N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum DC 5600 03464 02000 4739 6461 52 58 CT1 1.8700 08185 04726 1.6667 2.0733 1.80 1.96 CT2 2.9633 09609 05548 2.7246 3.2020 2.86 3.05 CT3 1.6600 06557 03786 1.4971 1.8229 1.60 1.73 CT4 1.3033 04933 02848 1.1808 1.4259 1.27 1.36 CT5 9267 13013 07513 6034 1.2499 80 1.06 CT6 1.9200 13528 07810 1.5840 2.2560 1.78 2.05 CT7 1.5667 07638 04410 1.3769 1.7564 1.50 1.65 CT8 1.5500 09849 05686 1.3053 1.7947 1.47 1.66 Total 27 1.5911 65456 12597 1.3322 1.8500 52 3.05 Test of Homogeneity of Variances chieucaotang Levene Statistic df1 df2 Sig .747 18 651 ANOVA chieucaotang Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 10.990 1.374 165.666 000 Within Groups 149 18 008 Total 11.140 26 Phụ biểu 12: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng đến khả rễ lan Trầm tím Descriptives sore N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Minimum Maximum Upper Bound DC 1.6567 08083 04667 1.4559 1.8575 1.57 1.73 RR1 2.8533 06807 03930 2.6842 3.0224 2.80 2.93 RR2 4.5833 09074 05239 4.3579 4.8087 4.50 4.68 RR3 7.6433 15044 08686 7.2696 8.0171 7.50 7.80 RR4 5.1200 04583 02646 5.0062 5.2338 5.07 5.16 RR5 1.8667 18230 10525 1.4138 2.3195 1.67 2.03 RR6 6.9567 10263 05925 6.7017 7.2116 6.87 7.07 RR7 4.2633 09504 05487 4.0272 4.4994 4.17 4.36 RR8 3.0867 06658 03844 2.9213 3.2521 3.03 3.16 Total 27 4.2256 2.02335 38939 3.4251 5.0260 1.57 7.80 Test of Homogeneity of Variances sore Levene Statistic df1 1.027 df2 Sig 18 452 ANOVA sore Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 106.240 13.280 203 18 011 106.442 26 F 1179.083 Sig .000 Phụ biểu 13: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng đến chiều dài rễ lan Trầm tím Descriptives chieudaire N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Minimum Maximum Upper Bound DC 1.8500 02000 01155 1.8003 1.8997 1.83 1.87 RR1 3.7433 09018 05207 3.5193 3.9674 3.65 3.83 RR2 3.3650 20019 11558 2.8677 3.8623 3.16 3.56 RR3 3.7300 16093 09292 3.3302 4.1298 3.58 3.90 RR4 2.2367 11590 06692 1.9487 2.5246 2.13 2.36 RR5 2.7167 14012 08090 2.3686 3.0647 2.58 2.86 RR6 2.1367 08145 04702 1.9343 2.3390 2.08 2.23 RR7 4.1767 16862 09735 3.7578 4.5955 4.06 4.37 RR8 3.5367 10066 05812 3.2866 3.7867 3.43 3.63 Total 27 3.0546 81077 15603 2.7339 3.3754 1.83 4.37 Test of Homogeneity of Variances chieudaire Levene Statistic df1 1.076 df2 Sig 18 421 ANOVA chieudaire Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 16.785 2.098 306 18 017 17.091 26 F 123.605 Sig .000 Phụ biểu 14: phân tích phƣơng sai nhân tố ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng đến khả sinh trƣởng chồi lan Trầm tím Descriptives chieucaocaytangthem N Mean Std Deviation Std Error 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Minimum Maximum Upper Bound DC 5233 04509 02603 4113 6353 48 57 RR1 2.1933 07767 04485 2.0004 2.3863 2.13 2.28 RR2 2.4600 09000 05196 2.2364 2.6836 2.37 2.55 RR3 2.7367 06658 03844 2.5713 2.9021 2.68 2.81 RR4 7733 08737 05044 5563 9904 70 87 RR5 2.4567 07506 04333 2.2702 2.6431 2.38 2.53 RR6 6600 07550 04359 4725 8475 58 73 RR7 2.7467 07234 04177 2.5670 2.9264 2.70 2.83 RR8 2.6733 05508 03180 2.5365 2.8101 2.62 2.73 Total 27 1.9137 92758 17851 1.5468 2.2806 48 2.83 Test of Homogeneity of Variances chieucaocaytangthem Levene Statistic df1 274 df2 Sig 18 966 ANOVA chieucaocaytangthem Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 22.275 2.784 096 18 005 22.370 26 F 523.884 Sig .000 ... triển rễ lan trầm tím 2.2 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu kĩ thuật tạo mẫu lan trầm tím; - Nghiên cứu khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím;  Ảnh hƣởng môi trƣờng dinh dƣỡng đến khả nhân nhanh... trầm tím;  Nghiên cứu ảnh hƣởng hàm lƣợng đƣờng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím  Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh thể chồi lan trầm tím; - Nghiên cứu. .. chúng tơi thực đề tài: ? ?Nhân giống lan trầm tím (Dendrobium nestor) kĩ thuật nuôi cấy in vitro? ?? CHƢƠNG TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung họ lan Họ Lan (danh pháp khoa học: Orchidaceae)