Nghiên cứu nhân giống cây lan trầm tím (dendrobium nestor) bằng phương pháp nuôi cấy in vitro

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT TRƢỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP VŨ THỊ PHAN NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY LAN TRẦM TÍM (DENDROBIUM NESTOR) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY IN VITRO LUẬN VĂN THẠC SỸ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hà Nội, 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT TRƢỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP VŨ THỊ PHAN NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY LAN TRẦM TÍM (DENDROBIUM NESTOR) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NI CẤY IN VITRO CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC MÃ SỐ: 8420201 LUẬN VĂN THẠC SỸ CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS KHUẤT THỊ HẢI NINH Hà Nội, 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan, đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu nhân giống lan Trầm tím (Dendrobium nestor) phƣơng pháp ni cấy in vitro” tơi nhóm nghiên cứu thực hiện, chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Nếu nội dung nghiên cứu tơi trùng lặp với công nghiên cứu cơng bố, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm tuân thủ kết luận đánh giá luận văn Hội đồng khoa học Hà Nội, ngày 25 tháng 10 năm 2018 Ngƣời cam đoan Vũ Thị Phan ii LỜI CÁM ƠN Luận văn đƣợc thực Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp – Trƣờng Đại học Lâm nghiệp Việt Nam, có đƣợc kết ngồi nỗ lực thân tơi cịn nhận đƣợc giúp đỡ của sở đào tạo Trƣờng Đại học Lâm nghiệp Việt Nam, Viện công nghệ sinh học Lâm nghiệp - đơn vị trực tiếp hỗ trợ nguồn lực, sở vật chất trang thiết bị, Bộ môn Tài nguyên Thực vật rừng nơi công tác sinh hoạt chuyên môn, xin chân thành cảm ơn quan tâm giúp đỡ q báu Qua đây, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban lãnh đạo viện tạo điều kiện để công việc chuyên môn đề tài đƣợc tiến hành thuận lợi Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc kính trọng đến TS Khuất Thị Hải Ninh ngƣời Cô hƣớng dẫn khoa học dành nhiều thời gian, công sức giúp đỡ tơi hồn thành luận văn năm qua Tơi xin chân thành cảm ơn góp ý, chia sẻ kinh nghiệm ThS.Nguyễn Thị Thơ tập thể cán Viện Công nghệ sinh học Lâm nghiệp giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho q trình thực đề tài Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè, đồng nghiệp, ngƣời thân bên tôi, động lực để tơi vƣợt qua khó khăn để hoàn thành luận văn Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Học viên Vũ Thị Phan iii BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƢỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN NHẬN XÉT Của ngƣời hƣớng dẫn luận văn thạc sĩ Họ tên người hướng dẫn: TS Khuất Thị Hải Ninh Họ tên học viên: Vũ Thị Phan Chun ngành: Cơng nghệ sinh học Khóa học: K24B- CNSH Nội dung nhận xét: Tinh thần, thái độ làm việc, ý thức tổ chức kỷ luật: ……… Về lực trình độ chun mơn: Về trình thực đề tài kết luận văn: Đồng ý cho học viên bảo vệ luận văn trƣớc Hội đồng: Có Khơng Hà Nội, ngày……tháng….năm… Người nhận xét iv MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA LỜI CAM ĐOAN i LỜI CÁM ƠN ii BẢN NHẬN XÉT iii Mục Lục iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ ix DANH MỤC CÁC HÌNH x ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu lan Trầm tím (Dendrobium nestor) 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Đặc điểm sinh học 1.1.4 Phân bố 1.1.5 Giá trị lan Trầm tím 1.2 Yêu cầu ngoại cảnh họ lan 1.2.1 Ánh sáng 1.2.2 Nhiệt độ 1.2.3 Độ ẩm 1.2.4 Dinh dƣỡng 1.3 Lịch sử nghiên cứu thành tựu nghiên cứu nhân giống Lan in vitro 1.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc 11 v 1.4 Tình hình nghiên cứu sử dụng ánh sáng đèn LED nuôi cấy invitro.18 1.4.1 Đèn LED ứng dụng đèn LED nhân giống trồng đèn LED 18 1.4.2 Tình hình nghiên cứu giới 22 1.4.3 Tình hình nghiên cứu nƣớc 23 Chƣơng MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU26 2.1 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 2.1.1 Nghiên cứu ảnh hƣởng phƣơng pháp khử trùng đến khả tạo mẫu nảy mầm hạt 26 2.1.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng ánh sáng đến khả nhân nhanh thể chồi 26 2.1.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng chất hữu bổ sung ánh sáng đến khả kích thích tăng trƣởng chồi 27 2.1.4 Nghiên cứu ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng ánh sáng đến khả rễ chồi lan in vitro 28 2.1.5 Nghiên cứu ảnh hƣởng loại giá thể trồng phân bón đến khả sống sinh trƣởng mô giai đoạn vƣờn ƣơm 29 2.1.6 Phƣơng pháp xử lý số liệu 29 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Ảnh hƣởng phƣơng pháp khử trùng đến khả tạo mẫu nảy mầm hạt 33 3.2 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng ánh sáng đến khả nhân nhanh thể chồi 34 3.2.1 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng 34 3.2.2 Ảnh hƣởng ánh sáng 37 3.3 Ảnh hƣởng chất hữu bổ sung ánh sáng đến kích thích tăng trƣởng chồi lan Trầm tím 39 vi 3.3.1 Ảnh hƣởng chất hữu bổ sung 39 3.3.2 Ảnh hƣởng loại ánh sáng 42 3.4 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng ánh sáng đến khả rễ.45 3.4.1 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng 45 3.4.2 Ảnh hƣởng ánh sáng 47 3.5 Ảnh hƣởng loại giá thể trồng phân bón đến khả sống sinh trƣởng mô giai đoạn vƣờn ƣơm 50 3.5.1 Ảnh hƣởng loại giá thể 50 3.5.2 Ảnh hƣởng loại phân bón 52 KẾT LUẬN - KIẾN NGHỊ VÀ TỒN TẠI 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ BIỂU vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT CHỮ ĐẦY ĐỦ CHỮ VIẾT TẮT BAP 6-benzylamino purine CT Công thức CTTN Cơng thức thí nghiệm cs Cộng ĐC Đối chứng ĐHST Điều hòa sinh trƣởng Kinetin 6-furfurylamino purine 11 NAA Naphthyl acetic acid 12 MS Murashige and skoog (1962) 13 TN Thí nghiệm 14 TB Trung bình 15 Sig Mức ý nghĩa (Significant) viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Ảnh hƣởng phƣơng pháp khử trùng đến khả tạo mẫu tỷ lệ nảy mầm hạt 33 Bảng 3.2 Kết ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh thể chồi (sau tuần nuôi cấy) 35 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng loại ánh sáng đến khả nhân nhanh thể chồi 38 (sau tuần nuôi cấy) 38 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng hàm lƣợng khoai tây chuối đến khả kích thích tăng trƣởng chồi Lan Trầm tím 40 (sau tuần nuôi cấy) 40 Bảng 3.5 Kết ảnh hƣởng loại ánh sáng khác đến khả kích thích tăng trƣởng chồi lan in vitro (sau tuần nuôi cấy) 43 Bảng 3.6 Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng đến khả rễ Lan Trầm tím (sau tuần ni cấy) 45 Bảng 3.7 Bảng kết nghiên cứu ảnh hƣởng loại ánh sáng 48 đến khả rễ chồi lan in vitro 48 Bảng 3.8 Ảnh hƣởng loại giá thể trồng đến khả sống sinh trƣởng mô giai đoạn vƣờn ƣơm (sau tuần ngôi) 51 Bảng 3.9 Ảnh hƣởng loại phân bón đến khả sống sinh trƣởng giai đoạn vƣờn ƣơm (sau tuần bón phân) 53 (Chrysanthemum morifolium) ni cấy in vitro, tạp chí Cơng nghệ sinh học, số 7(1): 93- 100 17 Dƣơng Tấn Nhựt, Nguyễn Bá Nam (2014) Đèn LED (Lightemitinhdiode) – nguồn sáng nhân tạo ni cấy mơ tế bào thực vật Tạp chí Công nghệ Sinhhọc 12(3): 393-407 18 Dƣơng Tấn Nhựt,Vũ Quốc Luận, Trịnh Thị Hƣơng, Nguyễn Phúc Huy, Đỗ Khắc Thịnh, (2014) “Ảnh hƣởng chất bổ sung hữu lên trình sinh trƣởng phát triển chồi lan Vân hài (paphiopedilum callosum) ni cấy in vitro“.Tạp chí Khoa học Công nghệ 52 (1) 19 Nguyễn Công Nghiệp (2014) Trồng hoa lan In lần Tp HCM, NXB trẻ 20 Phùng Văn Phê, Nguyễn Thị Hồng Gấm, Nguyễn Trung Thành (2010) “Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi In vitro loài Lan kim tuyến Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.”, Tạp chí khoa học ĐHQGHN, Khoa học tự nhiên Công nghệ 26 21 Nguyễn Thanh Phƣơng, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Hồng Thắm (2014) “Ảnh hƣởng số loại đèn chiếu sáng bình ni cấy đến sinh trƣởng, phát triển giống Cẩm chƣớng Hồng Hạc cấy mơ”, Tạp chí khoa học phát triển 12(7): 1015-1022 22 Nguyễn Thanh Sang, Nguyễn Bá Nam, Hoàng Thanh Tùng, Nguyễn PhúcHuy, Nguyễn Thị Kim Loan, Nguyễn Ngọc Thảo, Vũ Đức Trung, Nguyễn Văn An, Trần Thị Minh Loan, Nguyễn Văn Kết, Dƣơng Tấn Nhựt (2014) Sinh trƣởng phát triển hàm lƣợng chlorophyll chồi cúc (ChrysanthemumMorifolium Ramat CV Jimba) nuôi cấy in vitro dƣới ánh sáng LED Tạp chí Cơng nghệ Sinh học 12(2): 339347 23 Nguyễn Thị Sơn, Nguyễn Thị Lý Anh, Vũ Ngọc Lan, Trần Mai (2011) “Nhân giống in vitro lồi lan Dendrobium fimbriatum Hook”, Tạp chí khoa học phát triển 2012, tập (2):263-271 24 Nguyễn Văn Song, Trƣơng Thị Bích Phƣợng (2011) “Nhân nhanh in vitro lan kim điệp (Dendrobium chrysotoxum) – loại lan rừng có nguy tuyệt chủng”, tạp chí khoa học Đại học Huế 25 Lê Thị Thúy, Trần Thị Anh Thoa (2017) “Ảnh hƣởng cuả đèn Led lên sinh trƣởng Dendrobium lituiflorum Lindl Dendrobium Shavin White” Tạp chí Khoa học công nghệ Thực phẩm, 13 (1) 68-73 26 Nguyễn Thiện Tịch (1996), Kỹ thuật nuôi trồng hoa lan, Nhà xuất Nơng nghiệp Thành Phố Hồ Chí Minh 27 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật – nghiên cứu ứng dụng, Nhà xuất nông nghiệp 28 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Hồng Gấm (2007) “Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống lan Ngọc điểm Đai Châu (Rhychostylis gigantiea) phƣơng pháp nuôi cấy in vitro”.Báo cáo khoa học, trƣờng Đại học Lâm Nghiệp 29 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Hoàng Thị Nga, Nguyễn Xuân Trƣờng, Đỗ Vịnh (2003) “Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống ni trồng lan Hồ điệp (Phalaenopsis)”, báo cáo Khoa học hội nghị CNSH toàn quốc Hà Nội, NXB Khoa học kỹ thuật, tr.850-855 30 Nguyễn Quỳnh Trang, Vũ Thị Huệ, Khuất Thị Hải Ninh, Nguyễn Thị Thơ (2013) Nhân giống invitro Lan Phi Điệp Tím (Dendrobium anosmum), Tạp chí khoa học công nghệ Lâm Nghiệp số (Kỳ I) – 2013 31 Nguyễn Thanh Tùng cộng (2010) “ Phương pháp nuôi cấy lát mỏng tế bào nhân giống in vitro lan hoàng thảo thân gãy (Dendrobium aduncum)”, đề tài nghiên cứu 32 Nguyễn Văn Việt (2017) “Ứng dụng kĩ thuật nuôi cấy in vitro nhân giống lan hồng thảo kèn (Dendrobium lituiflorum Lindley) Tạp chí khoa học công nghệ Lâm nghiệp số 33 Ngô Quang Vũ (2002) “ Những số hấp dẫn thị trƣờng lan cắt cành giới”, Hoa cảnh, tr 10 34 Đào Thị Thanh Vân, Đặng Thị Tố Nga (2008) Giáo trình hoa lan NXB Nơng nghiệp, Hà Nội Tài liệu tiếng anh 35 Ajchara – Boonrote (1987) Efect of glucose, hydroquinoline sulfate, silve nitrat, silve thiosuffate on vase life of Dendrobium Padeewan cut flowers in Thai Land, Bangkok” 36 Edy Setiti Wida Utami, Sucipto Hariyanto,Yosephine Sri Wulan Manuhara, (2017) In vitro propagation of the endangered medicinal orchid, Dendrobium lasianthera J.J.Sm through mature seed culture Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, (5), Pages 406-410 37 Huimin Li, Canming Tang, Zhigang Xu, Xiaoying Liu, Xuelin Han (2012) Effects of Different Light Sources on the Growth of Nonheading Chinese Cabbage (Brassica campestris L.) Journal of Agricultural Science Vol 4: 262 38 Nhut D.T., Hong L.T.A., Watanabe H., Goi M., Tanaka M, (2000) Growthof banana plantlets cultured in vitro under red and blue light emitting diode (LED) irradiation source, In: R.A Drew (Ed.), Proceedings of the International Symposium on Tropical and Subtropical Fruits, Cairns, 117-124 39 Nhut DT, Takamura T, Watanabe H, Okamoto K, Tanaka M (2003a), “Responses of strawberry plantlets cultured in vitrounder superbright red and blue lightemitting diodes (LEDs)”, Plant Cell Tiss Org 73: 4352 40 Luo JP, Wang Y, Zha XQ, Huang L (2008) Micropropagation of Dendrobium densiflorum Lindl ex Wall through protocorm-like bodies: effects of plant growth regulators and lanthanoids Plant Cell, Tissue and Organ Culture pp:333–340 41 Nasiruddin K.M., Begun R., and Yasmin S., (2003) Protocorm like Bodies and Plantlet Regeneration from Dendrobium formosum Leaf Callus Asian Journal of Plant Sciences (13): 955 - 957 42 Paul S, Kumaria S, Tandon P., (2012) An effective nutrient medium for asymbiotic seed germination and large-scale in vitro regeneration of Dendrobium hookerianum, a threatened orchid of northeast India: plr032 43 Prakash Lakshmanan, Chiang-Shiong Loh, Chong-Jin Goh (1995) An in vitromethod for rapid regeneration of a monopodial orchid hybrid Aranda Deborah using thin section culture Plant Cell Reports, Volume 14, pp 510–514 44 Ricardo T de Faria; Fabiana N Rodrigues; Luciana VR Oliveira; Clasudio Müller (2004) In vitro Dendrobium nobile plant growth and rooting indifferent sucrose concentrations 45 Scott L Stewart, Michael E Kane (2004) Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development Habenariamacroceratiti (Orchidaceae), a rare Florida terrestrial orchid Journal of Plant Biotechnology, Volume 86, Issue 2, pp 147–158 46 Selvaraju Parthibhan, Mandali Venkateswara Rao, Thiruppathi Senthil Kumar (2015) “In vitroregeneration from protocorms in Dendrobium aqueum Lindley – An imperiled orchid” Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, Pages 227-233 47 Sheelavantmath, H.N Murthy, A.N Pyati, H.G Ashok Kumar & B.V Ravishankar (2000) In vitro propagation of the endangered orchid, Geodorum densiflorum (Lam.) Schltr through rhizome section culture, Journal of Plant Biotechnology, pp 151–154 48 Stefanello S., Karsten J., Müller T.S., Tomczak A.P., Bonett L.P and Schuelter A.R (2009) In vitro conversion of Miltonia flavescens Lindl Roots and leaf tip cells in protocorm like bodies and plant regeneration Cieencia & Agrotecnologia, Lavras, 33(1): 53 - 59 49 Sunitibala H and Kishor R (2009) Micropropagation of Dendrobium transparens L from axenic pseudobulb segments Ind J Biotechnol., 8: 448 - 452 50 Stefanello S., Silveira E.V., Oliveira L.K., Besson J.C.F and Dutra G.M.N (2009) Efficiency of substrates on acclimatization of in vitro propagated Miltonia flavescens Lindl Revista em Agronegoscios e Meio Ambiente, 2(3): 467 - 476 51 Talukder S.K., Nasiruddin K.M., Yasmin S., Hassan L., and Begum R., (2003) Shoot Proliferation of Dendrobium Orchid with BAP and NAA Journal of Biological Sciences 52 Tanaka M, Takamura T, Watanabe H, Endo M, Panagi T, Okamoto K (1998) Invitro growth of Cymbidium plantlets cultured under superbright red and blue light-enmitting diodes J Hortic Sci Biotech 73: 39-44 53 Wang W.R., Zhang H.X., Zhao B., Zuan X.F (2001) Improved growth of Artemisiaannua L hairy roots and artemisinin production under red light conditions” Biotechnol Lett., 23, pp: 1971-1973 54 Yamakami J.K., Faria R.T and Stenzel N.M.C (2009) Vegetative development of Brassocattleya pastoral “Rosa” and Miltonia regnelli Rchb.f X Oncidium crispum L (Orchidaceae) in substrates alternative to xaxim (tree fern fiber) Cientisfica, 37(1): 32 - 38 55 Yamamoto L.Y., Sorace M., Faria R.T., Takahashi L.S and Schnitzer J.A (2009) Alternative substrates to substitute xaxim in the cultivation of the primary hybrid Miltonia regnellii Rchb f X Oncidium concolor Hook (Orchidaceae) Cieencias Agrasrias, 30(1): 1035 - 1042 56 Zhao P, Wang W, Feng FS, Wu F, Yang ZQ, Wang WJ (2007).”Highfrequency shoot regeneration through transverse thin cell layer culture in Dendrobium Candidum Wall Ex Lindl” Plant Cell Tiss Organ Cult 90:131-139 57 Vandita Billore, Monica Jain and Penna Suprasanna (2017) Monochromicradiation through light - emitting diode (LED) positively augments in vitro shootregeneration in Orchid (Dendrobium sonia) Billore cs., Can J Biotech1(2):50-58 PHỤ BIỂU Phụ biểu Kết kiểm tra ảnh hƣởng phƣơng pháp khử trùng đến khả tạo mẫu nảy mầm hạt 1.Tỉ lệ bình mẫu nảy mầm Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2sided) a ,000 310,070 ,000 Linear-by-Linear Association 8,667 ,003 N of Valid Cases 1518 Pearson Chi-Square 317,910 Likelihood Ratio a cells (0,0%) have expected count less than The minimum expected count is 44,89 2.Tỉ lệ bình mẫu nảy mầm Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2sided) Pearson Chi-Square Likelihood Ratio Linear-by-Linear Association N of Valid Cases a ,000 201,932 ,000 16,863 ,000 190,232 1518 a cells (0,0%) have expected count less than The minimum expected count is 71,10 Phụ biểu Kết kiểm tra ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng đến khả nhân nhanh thể chồi Test of Homogeneity of Variances Hesonhanchoi Levene Statistic 2,832 df1 df2 18 Sig ,032 ANOVA Hesonhanchoi Between Groups Sum of Squares 58,846 Within Groups Total Mean Square 7,356 ,044 18 ,002 58,891 26 df F 2995,578 Sig ,000 Phụ biểu Kết kiểm tra ảnh hƣởng hàm lƣợng chuối xanh khoai tây đến kích thích tăng trƣởng chồi lan Trầm tím in vitro ANOVA Chieucaocay Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 9,772 Mean Square 1,086 ,036 20 ,002 9,808 29 df F 610,002 Sig ,000 F 680,615 Sig ,000 ANOVA Hesonhan Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 11,822 Mean Square 1,314 ,039 20 ,002 11,861 29 df Phụ biểu Kết qủa ảnh hƣởng chất điều hoà sinh trƣởng đến khả rễ lan Trầm tím in – vitro SoreTB Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 17,684 Mean Square 2,947 ,010 14 ,001 17,694 20 df F 4298,292 Sig ,000 Phụ biểu Kết kiểm tra phần mềm spss ảnh hƣởng loại ánh sáng khác đến nhân nhanh thể chồi lan Trầm tím in – vitro Test of Homogeneity of Variances TC Levene Statistic 2,402 df1 df2 Sig ,143 ANOVA TC Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 9,179 Mean Square 3,060 ,034 ,004 9,212 11 df F 728,476 Sig ,000 Phụ biểu Kết kiểm tra phần mềm spss ảnh hƣởng loại ánh sáng khác đến kích thích tăng trƣởng chồi lan Trầm tím in – vitro Test of Homogeneity of Variances HSN Levene Statistic df1 2,017 df2 Sig ,190 ANOVA HSN Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square F 1,660 ,553 ,014 ,002 1,674 11 311,775 Sig ,000 Test of Homogeneity of Variances H.CAY Levene Statistic df1 1,286 df2 Sig ,344 ANOVA H.CAY Sum of Squares df Mean Square Between Groups ,111 ,037 Within Groups ,008 ,001 Total ,119 11 F 35,119 Sig ,000 Phụ biểu Kết kiểm tra phần mềm spss ảnh hƣởng loại ánh sáng khác đến khả rễ lan Trầm tím in vitro Số rễ TB/ chồi Test of Homogeneity of Variances TB.R Levene Statistic df1 2,059 df2 Sig ,184 ANOVA TB.R Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square F 3,054 1,018 ,035 ,004 3,089 11 234,046 Sig ,000 Chiều dài TB/rễ Test of Homogeneity of Variances H Levene Statistic df1 ,267 df2 Sig ,848 ANOVA H Sum of Squares df Mean Square Between Groups ,364 ,121 Within Groups ,004 ,000 Total ,368 11 F 255,737 Sig ,000 Phụ biểu Kết kiểm tra phần mềm spss ảnh hƣởng giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển lan Trầm tím in vitro ngồi vƣờn ƣơm Case Processing Summary Cases Valid N CT * CAYSONG 810 Missing Percent 100,0% N Total Percent 0,0% N 810 CT * CAYSONG Crosstabulation CAYSONG 00 CT CT1 Count % within CT CT2 Count % within CT CT3 Count % within CT Total Count % within CT 63 1.00 207 Total 270 23,3% 76,7% 100,0% 27 243 270 10,0% 90,0% 100,0% 18 252 270 6,7% 93,3% 100,0% 108 702 810 13,3% 86,7% 100,0% Chi-Square Tests Pearson Chi-Square Value a 36.346 Asymp Sig (2sided) ,000 df Likelihood Ratio 34,958 ,000 Linear-byLinear Association 32,412 ,000 N of Valid Cases 810 a cells (0.0%) have expected count less than The minimum expected count is 36.00 Percent 100,0% Phụ biểu Kết kiểm tra phần mềm spss ảnh hƣởng loại phân bón khác đến khả sinh trƣởng phát triển lan Trầm tím in vitro ngồi vƣờn ƣơm Tỷ lệ số Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2sided) a ,000 28,818 ,000 Linear-by-Linear Association 7,809 ,005 N of Valid Cases 1080 Pearson Chi-Square 29,703 Likelihood Ratio a cells (0,0%) have expected count less than The minimum expected count is 42,75 Tỷ lệ rễ Chi-Square Tests Value df Asymp Sig (2sided) a ,000 Likelihood Ratio 33,470 ,000 Linear-by-Linear Association 19,712 ,000 Pearson Chi-Square 31,815 N of Valid Cases 1080 a cells (0,0%) have expected count less than The minimum expected count is 43,50 Chiều dài rễ ANOVA Chieudaire Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 1,971 ,657 ,020 ,002 1,990 11 F 268,122 Sig ,000 Phụ biểu 10 Thành phần môi trƣờng MS (Murashige Skoog, 1962) Dung dịch Stock MS I (Muối đa lƣợng) MS II (Muối đa lƣợng) MS III (Sắt) MS IV (Muối vi lƣợng) MS V (Vitamin) Hóa chất Nồng độ mg/L KNO3 1900 NH4NO3 1650 MgSO4.7H2O 370 KH2PO4 170 CaCl2 332,2 FeSO4.7H2O 27,84 Na2EDTA 37,24 MnSO4 16,9 ZnSO4 8,6 H3BO3 6,2 Na2MoO4 0,25 CuSO4 0,025 CoCl2 0,025 KI 0,83 Thiamin HCl 0,1 Pyridocine HCl 0,5 Nicotinic acid 0,5 Glycine 2,0 Myo-Inositol 100 ... trình nghiên cứu nhân giống in - vitro lồi lan Trầm tím cịn hạn chế.Vì vậy, chúng tơi thực đề tài: ? ?Nghiên cứu nhân giống lan Trầm tím (Dendrobium nestor) phương pháp nuôi cấy in vitro? ?? Mục tiêu nghiên. .. thuật nhân giống in vitro lan Trầm tím dẫn liệu khoa học ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến sinh trƣởng phát triển lan Trầm tím Nhân nhanh thành cơng Trầm tím phƣơng pháp ni cấy in vitro. .. VŨ THỊ PHAN NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY LAN TRẦM TÍM (DENDROBIUM NESTOR) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY IN VITRO CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC MÃ SỐ: 8420201 LUẬN VĂN THẠC SỸ CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƢỜI