Sử dụng nguồn dược liệu thiên nhiên để bào chế một số chế phẩm phòng trị bệnh đường ruột, đường hô hấp và kích thích tăng trưởng heo

Bộ nông nghiệp phát triển nông thôn Viện khkt nông nghiệp miền nam Báo cáo tổng kết đề tài nhánh Sử dụng nguồn dợc liệu thiên nhiên để bào chế số chế phẩm phòng trị bệnh đờng ruột, đờng hô hấp kích thích tăng trởng heo _ thc ®Ị tài cấp nhà nớc mà số kc 06.06 nghiên cứu số giải pháp khoa học công nghệ thị trờng nhằm đẩy mạnh xuất thịt lợn Chủ nhiệm đề tài: ts đỗ văn quang 6482-8 27/8/2007 hà néi - 2007 BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN BÁO CÁO SƠ KẾT ĐỀ TÀI CẤP NHÀ NƯỚC Tên đề tài nhánh: Sử dụng nguồn dược liệu thiên nhiên để bào chế số chế phẩm phòng trị bệnh đường ruột,đường hô hấp kích thích tăng trưởng heo Mã số KHCN : KC 0606 –NN… Thời gian thực 12 tháng (Từ tháng 5/2002 đến tháng 6/2003) Chủ nhiệm đtn : Lã Văn Kính Lê Văn Lăng Học hàm -Học vị: Tiến sỹ Thạc sỹ Chức danh kh.h: Nghiên cứu viên Giảng viên Cơ quan: Viện KHKTNN Miền Nam Trường ĐH Y Dược TP HCM Thuộc đề tài : Nghiên cứu số giải pháp khoa học công nghệ thị trường nhằm đẩy mạnh xuất thịt lợn Mã số KHCN : KC 0606 –NN Chủ nhiệm đề tài: TS Đỗ Văn Quang Chức vụ-Cơ quan: Trưởng phòng nghiên cứu- Viện KHKT NN Miền Nam Cơ quan chủ trì : VIỆN KHOA HỌC KỸ THUẬT NÔNG NGHIỆP MIỀN NAM Năm thực : 2002 – 2003 MỤC LỤC PHẦN 1-ĐẶT VẤN ĐỀ: …… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… PHẦN 2- MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI: …………………………………………………………………………………………………………… …… 2-1: MỤC TIÊU TỔNG QUÁT…………………………………………………………………………………………………………… …………………… 2-2: MỤC TIÊU CHUYÊN BIỆT …………………………………………………………………………………………………………… ………………….5 PHẦN 3-NỘI DUNG NGHIÊN CỨU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : ……………………………………… ………………5 3-1: NỘI DUNG NGHIÊN CỨU………………………………………………………………………………………………… 3.1.1:NGHIÊN CỨU CÁC DƯC LIỆU …………………………………………………………………………………… 3.1.2: NGHIÊN CỨU CÁC CHẾ PHẨM …………………………………………………………………………………… 3.1.3: NGHIÊN CỨU DƯC LÝ VÀ SINH HỌC ĐỘC TÍNH …………………………………………………… …… 3.1.4 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG TRÊN LN ………………………………………………………………………… 3.2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : ……………………………………………………………………………………… PHẦN – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU : …………………………………………………………………………………… 4.1: CHẾ PHẨM PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG RUỘT - KÝ HIỆU R ……………………………………… 4.1.1:-NGHIÊN CỨU DƯC LIỆU: …………………………………………………………………………………………………………………………… 4.1.2:-BÀO CHẾ CÁC CAO THUỐC VÀ DẠNG THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT= R ……………………… 4.1.2.1:-CHẾ BIẾN DƯC LIỆU VÀ BÀO CHẾ CÁC CAO THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT……………… 4.1.2.2:-BÀO CHẾ CÁC DẠNG THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT………………………………………………………… 10 4.1.3:-TÁC DỤNG VI SINH HỌC VÀ SINH HỌC ĐỘC TÍNH CỦA THUỐC - R ………………………………………… 11 4.1.3.1:-TÁC DỤNG VI SINH HỌC CỦA THUỐC – R………………………………………………………………………………………… 11 4.1.3.2:-TÁC DỤNG SINH HỌC ĐỘC TÍNH CỦA THUỐC -R ……………………………………………………………………… 11 4.1.4 KẾT LUẬN VỀ THUỐC PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG RUỘT- R…………………………………… 12 4.2: CHẾ PHẨM PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG HÔ HẤP- KÝ HIỆU H ………………………… 12 4.2.1:- NGHIÊN CỨU CÁC DƯC LIỆU –H ………………………………………………………………………………………………………….12 4.2.2:- BÀO CHẾ CÁC CAO THUỐC VÀ DẠNG THUỐC –H ………………………………………………………………………… .13 4.2.2.1:-CHẾ BIẾN DƯC LIỆU VÀ BÀO CHẾ CÁC CAO THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG HÔ HẤP………… 13 4.2.2.2:-BÀO CHẾ CÁC DẠNG THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT HÔ HẤP…… ……………………………… 13 4.2.3:-TÁC DỤNG VI SINH HỌC VÀ SINH HỌC ĐỘC TÍNH CỦA THUỐC -H …… ………………………………………14 4.2.3.1:-TÁC DỤNG VI SINH HỌC CỦA CÁC CHẾ PHẨM H ………………………………… ………………………………………14 4.2.3.2:-QUY TRÌNH BÀO CHẾ THUỐC SÁT KHUẨN,PHÒNG TRỊ BỆNH ĐƯỜNG HÔ HẤP……………………… 14 4.2.3.3:-TÁC DỤNG SINH HỌC ĐỘC TÍNH CỦA THUỐC H ………………………………… …………………………………… …15 4.2.4 KẾT LUẬN VỀ THUỐC PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG HÔ HẤP………………………………………15 4.3: CHẾ PHẨM KÍCH THÍCH TĂNG TRƯỞNG,TĂNG TRỌNG LN – KY ÙHIỆU T ………… ………………………… 15 4.3.1:- NGHIÊN CỨU DƯC LIỆU BỔ DƯỢNG,TĂNG TRỌNG…………………………………… ………………………………………15 4.3.2:-CHẾ BIẾN DƯC LIỆU VÀ BÀO CHẾ CÁC DẠNG THUỐC TĂNG TRỌNG T …… …………………………… 16 4.3.3:-TÁC DỤNG SINH HỌC VÀ ĐỘC TÍNH CỦA THUỐC BỔ T1 VÀ T2…… ………………………………………………….18 4.3.3.1-THỬ NGHIỆM TÁC DỤNG TĂNG TRỌNG TRÊN SÚC VẬT TRONG KỲ TĂNG TRƯỞNG….…………… 18 4.3.3.2-THỬ NGHIỆM TÁC DỤNG TĂNG TRỌNG TRÊN SÚC VẬT BỊ SUY DINH DƯỢNG ………………………… 21 4.3.4:-KẾT LUẬN VỀ CHẾ PHẨM BỔ DƯỢNG,TĂNG TRỌNG-T …… ………………………………………………………………22 PHẦN 5- KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ …… …………………………………………………………………………………………………………………23 5-1 -KẾT LUẬN …… ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….23 5-2 - ĐỀ NGHỊ …… …………………………………………………………………………………………………………………………………………………23 TÀI LIỆU THAM KHẢO …… ……………………………………………………………………………………………………………………………24 -25 PHỤ LỤC : TIÊU CHUẨN DƯC LIỆU, NGUYÊN LIỆU,CHẾ PHẨM ,HÌNH ẢNH… (Đangbiên soạn, báo cáo bổ sung vào tháng năm 2003 ) 1- ĐẶT VẤN ĐỀ: Việc sử dụng kháng sinh chăn nuôi gia súc, gia cầm phổ biến từ năm 1960 giảm bệnh tật, tăng trọng nhanh, hiệu kinh tế cao Song mặt trái vấn đề đề kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn phổ biến,có nguy lây lan gây bệnh cho người gia súc Đồng thời sử dụng kháng sinh không quy trình dễ dẫn đến tồn dư kháng sinh thịt, không đáp ứng tiêu chuẩn “thịt sạch” theo qui định Do việc cấm sử dụng số loại kháng sinh Avoparcin, Bacitracin Zin , Carbadox, Spiramycin…và giảm thiểu dùng số kháng sinh khác khuyến cáo Châu Âu, Châu Mỹ Việc cấm hạn chế dùng kháng sinh dẫn đến suất thịt hơn, lợi nhuận người chăn nuôi giảm khoảng 10%, cần phải có giải pháp khăc phục phù hợp Một giải pháp coi hướng tương lai sử dụng chất kháng khuẩn thiên nhiên nguồn gốc thảo mộc thay cho kháng sinh hành Đan Mạch nước tiên phong vấn đề dự đoán tương lai gần thức ăn chăn nuôi có trộn kháng sinh thảo mộc chiếm 35% thị trường nước này.Các nước: Mỹ,Trung quốc, tiến hành nghiên cứu thích hợp để giải quyêt vấn đề theo hứơng Như giải pháp mà số nước tiên tiến nghiên cứu áp dụng có ý nghóa cần thiết nhiều nước, nước có nguồn dược liệu thiên nhiên phong phú Việt Nam nước sử dụng kháng sinh thức ăn chăn nuôi lợn phổ biến khó kiểm soát nên gây nhiều bất lợi.Nhiều vi khuẩn gây bệnh cho heo đường hô hấp,đường ruột,đã đề kháng kháng sinh 100% mẫu E coli phân lập từ bệnh phẩm heo tiêu chảy đã“lờn”Bactrim,Cephalexin,Cefriaxone…( Nguyễn Ngọc Hải,Tô Minh Châu, Đh Nông lâm Tp HCM-2001) Đặc biệt tồn dư kháng sinh thịt heo chiếm 75%, gan heo chiếm 66,7% số mẫu nghiên cứu, lượng tồn dư từ 3,67 – 122 ppm,cao gấp hàng chục đến hàng chục nghìn lần tiêu chuẩn quốc tế (Nghiên cứu nhóm Lã Văn Kính & CTV 1996 – 2001) Vì thịt lợn tiêu dùng nước ta dễ nhiễm thuốc kháng sinh gây khó khăn cho xuất không đạt tiêu chuẩn “thịt sạch” tồn dư kháng sinh nguyên nhân quan trọng Để khắc phục cần phải sử dụng kháng sinh cách khoa học, hợp lý cần có giải pháp thay bước Dù có giải pháp hạn chế kháng sinh biện pháp vệ sinh,dinh dưỡng,dùng số acid hữu enzyme trộn thức ăn… kết không chắn Ở nước ta có nhiều thuốc có tính kháng khuấn dùng để chữa bệnh cho người có hiệu cao,nhưng chưa có đủ nghiên cứu sâu rộng để sản xuất chế phẩm cung cấp cho ngành chăn nuôi nhằm thay phần thuốc kháng sinh chăn nuôi lợn xu hướng có giới Mặt khác nhiều cỏ có tác dụng kích thích tăng trọng tăng trưởng dùng Y học cổ truyền dùng để hạn chế tăng trọng heo việc hạn chế không dùng thuốc kháng sinh gây ra.Do vậy,nghiên cứu áp dụng kinh nghiệm y học chữa bệnh cho người với việc dùng thảo mộc có tính kháng khuẩn thay kháng sinh kích thích tăng trọng tăng trưởng chăn nuôi lợn hướng có triển vọng nước ta 2- MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI: 2-1: MỤC TIÊU TỔNG QUÁT Áp dụng kinh nghiệm sử dụng dược liệu thiên nhiên chữa bệnh cho người vào chăn nuôi lợn (heo), giúp phòng trị số bệnh nhiễm khuẩn đường ruột, đường hô hấp thường gặp heo, không dùng hạn chế dùng kháng sinh, thuốc hóa học chăn nuôi; kích thích heo ăn khỏe, tăng trưởng tốt, giảm giá thành đáp ứng yêu cầu “thịt sạch” để xuất 2-2: MỤC TIÊU CHUYÊN BIỆT Nghiên cứu bào chế chế phẩm mới, gồm : * chế phẩm có tác dụng kháng khuẩn đường ruột chủ yếu tác dụng E.Coli, Shigella,Salmonella sp Vibrio cholerae… thay số thuốc kháng sinh thuốc gốc tổng hợp hay dùng để phòng trị bệnh nhiễm trùng đường ruột, gây tiêu chảy triệu chứng bệnh liên quan lợn *1 chế phẩm có tác dụng khàng khuẩn chủ yếu tác dụng Staphylococcus haemolyticus, Streptococcus aureus, Klebsiella sp chủng kháng Methicillin Staphylococcus aureus mrsa,thay số thuốc kháng sinh thuốc gốc tổng hợp hay dùng để phòng trị bệnh nhiễm trùng đường hô hấp triệu chứng bệnh liên quan lợn * chế phẩm kích thích tiêu hóa, bổ dưỡng, tăng cường miễn dịch giúp lợn hay ăn, tăng trưởng tốt Các chế phẩm nghiên cứu thử nghiệm chứng minh hiệu qủa invitro, invivo có khả triển khai sản xuất công nghiệp với giá thành chấp nhận 3-NỘI DUNG NGHIÊN CỨU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : 3-1: NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Nghiên cứu dược liệu thiên nhiên có tính kháng khuẩn, thường dùng trị bệnh đường hô hấp, đường ruột số dược liệu kích thích ăn uống sử dụng số dược phẩm chữa bệnh cho người Từ nguyên liệu bào chế số chế phẩm phù hợp với mục tiêu đề 3.1.1: NGHIÊN CỨU CÁC DƯC LIỆU - Các thuốc trị nhiễm trùng đường ruột, tiêu chảy, rối loạn tiêu hóa ≈ 58 cây, chọn lọc số thích hợp để nghiên cứu: hoàng bá, hoàng đằng, cỏ sữa, mộc hoa trắng v.v… - Các dược liệu trị bệnh đường hô hấp ≈25 cây,sẽ chọn lọc số thích hợp để nghiên cứu: tinh dầu tràm,bạch đàn,nghệ, sâm đại hành, tỏi,tô mộc,xuyên tâm liên, v.v… - Các thuốc thông mật, lợi mật kích thích tiêu hóa,bổ dưỡng,tăng cường miễn dịch: ≈ 87 cây, chọn lọc số thích hợp để nghiên cứu: hoàng bá, trần bì, mộc hương,thần khúc, men rượu-bia, dứa, đu đủ, tảo Spirulina, v v 3.1.2: Nghiên cứu chế phẩm Dự tính nhóm chế phẩm có công thức để nghiên cứu chọn công thức, trình thử nghiệm thấy công thức tốt Cụ thể gồm : Chế phẩm trị bệnh nhiễm trùng đường ruột; Ký hiệu R Chế phẩm trị bệnh nhiễm trùng đường hô hấp; Ký hiệu H Chế phẩm bổ dưỡng kích thích tiêu hóa,giúp lợn tăng trưởng tốt; Kýhiệu T 3.1.3: Nghiên cứu dược lý sinh học, độc tính - Nghiên cứu tác dụng kháng sinh chế phẩm số vi khuẩn tiêu biểu thường gặp bệnh đường ruột đường hô hấp heo Vi khuẩn đường ruột: E.coli ,Salmonella,Shigella,… vi khuẩn đường hô hấp Streptococcus spp, Klebsiella, …………………… Tác dụng kháng sinh chế phẩm xác định kháng sinh đồ so với số mẫu kháng sinh chuẩn: Ampicillin, Chloramphenicol, - Nghiên cứu tác dụng kích thích ăn uống tăng trưởng chuột nhắt để xác định tác dụng thuốc chọn công thích thích hợp - Nghiên cứu độc tính theo phương pháp thử độc tính bất thường Dược Điển Việt Nam để xác định liều lượng độ an toàn chế phẩm trước dùng heo 3.1.4 Nghiên cứu tác dụng heo - Nghiên cứu tác dụng trị bệnh nhiễm trùng đường ruột, tiêu chảy heo, với số mẫu (heo) tương đương 20.000kg thể trọng - Nghiên cứu trị bệnh nhiễm trùng đường hô hấp heo với số mẫu (heo) tương đương 20.000kg thể trọng - Nghiên cứu tác dụng kích thích ăn uống giúp tăng trọng heo, số mẫu (heo) khoảng 5000kg thể trọng Nghiên cứu ý đến đặc điểm tuổi heo: sau cai sữa, kỳ tăng trưởng, kỳ vỗ béo - Nghiên cứu phối hợp phòng bệnh nhóm thuốc kháng khuẩn đường ruột đường hô hấp với thuốc kích thích ăn uống giúp heo tăng trọng Số mẫu trích từ số heo nghiên cứu Tập hợp thí nghiệm để đánh giá hiệu thuốc phác đồ sử dụng chế phẩm hợp lý 3.2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : Các phương pháp nghiên cứu sau áp dụng : -Phương pháp thống kê,chọn lọc dược liệu thiên nhiên có triển vọng theo tiêu chí riêng để phucï vụ mục tiêu đề tài -Phương pháp thực nghiệm labo: Thực hành chiết xuất làm giàu hoạt chất để chế dịch chiết cao dược liệu, giữ hoạt chất ổn định, đảm bảo cao thuốc có tác dụng tương đương với tác dụng sinh học thực có thảo mộc Xây dựng quy trình công nghệ thích hợp để bào chế số chế phẩm ổn định, tiện dụng lợn uống trộn vào thức ăn cho lợn/heo ăn .Phương pháp sinh học vi sinh học: Để nghiên cứu độc tính, xác định tác dụng hoạt lực kháng sinh kích thích tăng trọng định liều lượng mô hình thích hợp dùng chuột thí nghiệm để áp dụng lợn sau – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU : 4.1: CHẾ PHẨM PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG RUỘT - KÝ HIỆU R 4.1.1:-NGHIÊN CỨU DƯC LIỆU Các thuốc trị nhiễm trùng đường ruột, tiêu chảy, rối loạn tiêu hóa có tới 58 cây,nên phải đưa tiêu chí lựa chọn thích hợp để nghiên cứu Tiêu chí lựa chọn thang điểm 10 gồm: Hoạt chất : Chưa chứng minh = 1đ, Được chứng minh hỗn hợp nhiều chất =2đ, Được chứng minh đơn chất =3đ Tác dụng, Độc tính :Tác dụng yếu,chữa triệu chứng, dược liệu phụ tác dụng độc =1đ,Tác dụng trung bình =2đ, Tác dụng mạnh,ít độc =3đ Tác dụng mạnh,ít độc thay kháng sinh tổng hợp =4đ Ứng dụng thực tế : Dùng dân gian =1đ, Dùng sản xuất, nguồn nguyên liệu, giá mua bị hạn chế, =2đ,Dùng sản xuất,nguồn nguyên liệu dễ thu mua,tái sinh,có nhiều thay =3đ Bảng điểm lựa chọn thuốc trị nhiễm trùng đường ruột : Sốtt Tên thuốc/Điểm Hoạt chất Tác dụng/ Độc tính Bảng Ứng dụng Cỏ sữa lớn/ Cỏ sữa nhỏ (Lỵ Amib, Shigella) Vàng đắng,Hoàng bá Hoàngliên (Shigella,Vibrio, Salmonella, E coli) 3 Gừng Măng cụt/Chiều liêu Rau sam 6 1(Trị triệu chứng) ( Lỵ Amib,Shigella, không đặc hiệu ) ( Lỵ Amib, Shigella) (Trị triệu chứng) Tiêu (hạt) (Shigella,Vibrio, Tô mộc Salmonella, E coli) ( Lỵ Amib, Sầu đâu rừng Shigella) Độc (Lỵ Amib ) Mức hoa trắng 10 Tỏi,Xoan,……… ( Lỵ Amib,Shigella, không đặc hiệu ) Nhận xét: Vàng đắng, Hoàng bá,Hoàng liên ( điểm) nhóm thuốc có điểm số cao nhất,nhóm nhiều khác thay thế.Đặc biệt Vàng đắng, Hoàng bá có nhóm hoạt chất Berberin sử dụng nhiều thực tế nên trọng tâm cùa nghiên cứu này.Các thuốc phối hợp Cò sữa,Tô mộc, Gừng,Hạt tiêu,Rau sam,Vỏ măng cụt,Chiều liêu 4.1.2:-BÀO CHẾ CÁC CAO THUỐC VÀ DẠNG THUỐC KHÁNG KHUẨN R Nguyên tắc thiết kế công thức - Ba nguyên tắc chi phối là: +Phối hợp dược liệu nhằm cộng lực tăng tác dụng: tính kháng sinh(phytoncide) /sát khuẩn hoạt chất thuốc nói chung thấp (MIC ≥ 100ppm), không so sánh với kháng sinh (antibiotics) Do đó, việc phải phối hợp với nhiều thuốc để tăng hoạt lực kháng khuẩn conø phải dùng thêm vị thuốc giúp hạn chế triệu chứng bệnh kèm theo rối loạn tiêu hoá,tiêu chảy nước, nhiễm độc.Điều tương tự lý luận Quân Thần Tá Sứ Đông Y +Công thức thiết kế lựa chọn sở công thức có thực tế thử nghiệm tìm Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) số vi khuẩn gây bệnh +Công thức phải dễ thực hiện, triển khai công nghiệp giá hợp lý tiện dụng cho người chăn nuôi 4.1.2.1:-CHẾ BIẾN DƯC LIỆU VÀ BÀO CHẾ CÁC CAO THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT Các cao thuốc hay hoạt chất toàn phần chế phẩm cô đặc chiết từ dược liệu phương pháp thích hợp,có tác dụng sinh học tương đng cho lượng hoạt chất dược liệu mà thay thế.Do cao thuốc phải tiêu chuẩn hoá tiêu quan trọng hàm lượng hoạt chất với cao thuốc biết rõ hoạt chất lựơng dược liệu tương đương với gam cao Đối với nghiên cứu tìm MIC invtro, cao thuốâc giúp cho việc nghiên cứu dễ dàng nhiều dùng dược liêu thô +Cao khô Hoàng bá Vàng đắng:Tỷ lệ dược liệu - cao = 20-1,hàm lượng hoạt chất tính theo Berberin ≥ 30%,hàm ẩm ≤ 5% Quy trình:Dược liệu xay bột Φ≈1,5mm,tẩm acid hydrocloric10% đủ ẩm(≈20% khối dược liệu),ủ trong24 giờ.Chiết với nước nóng 850C đến hết vết alcaloid dược liệu Trung hoà dịch chiết=natri hydroxid 10% đến pH6,5.Cô đặc cao,định lượng hàm lượng hoạt chất,cô dến cao khô.Xay bột rây φ =1 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Berberin HCl : Bột màu vàng,chứa berberin ≥ 97% Chiết từ hoàng bá, vàng đắng dược liệu thay thích hợp Quy trình: Cao lỏng hoàng bá vàng đắng acid hoá =hydrocloric10% đến pH3, kết tủa nhiều lần nhiệt độ lạnh 50C.Thu tủa,ly tâm rửa vết Cl- nước cất.Sấy khô Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao Cỏ sữa lớn Euphorbia hirta, họ Euphorbiaceae :Tỷ lệ dược liệu - cao =10 1,tỷ lệ chất khô ≥ 25% Quy trình:Dược liệu cắt nhỏ ≈1,5cm.Chiết với nước nóng gấp12 dược liệu theo cách sắc thuốc đến hết vết Tanin dược liệu.Cô đặc.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao vỏ Măng cụt:Chiết từ vỏ măng cụt Garcinia mangostrana L.,họ Clusiaceae.Tỷ lệ dược liệu - cao =10 -1,tỷ lệ chất khô ≥ 20% Quy trình:Dược liệu cắt nhỏ ≈ 2cm.Chiết với nước nóng gấp dược liệu theo cách sắc thuốc đến hết vết Tanin dược liệu.Cô đặc.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao Tô mộc :Chiết từ gỗ tô mộc Caesalpinia sappan L.,họ Fabaceae.Tỷ lệ dược liệu - cao = 10-1,tỷ lệ chất khô ≥ 15% Quy trình:Dược liệu cắt phiến ≈ × 5cm.Chiết với nước nóng gấp 10 dược liệu theo cách sắc thuốc đến hết vết màu đỏ đặc trưng dược liệu.Cô đặc.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Bột Hồ tiêu :Chế từ hồ tiêu Piper nigrum L.,họ Piperaceae.Bột mịn ≈ 0,15mm ,tỷ lệ tinh dầu ≥ 1%,độ ẩm ≤ 11% Quy trình:Dược liệu xay qua rây mịn.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao Gừng :Cao đặc chiết từ củ gừng khô Zingiber officinale Rosc.,họ Zingiberaceae.Tỷ lệ dược liệu - cao = 4-1,tỷ lệ chất khô ≥ 40% Quy trình:Dược liệu cắt phiến ≈ × 5cm.Chiết với nước nóng gấp 10 lần dược liệu theo cách ngâm chiết phân đoạn,đến hết vị cay đặc trưng dược liệu.Cô đặc nhiệt độ thấp≈ 500C.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao Rau sam : Cao lỏng chiết từ Rau sam Portulaca oleracea L.,họ Portulacaceae.Tỷ lệ dược liệu – cao 5-1,tỷ lệ chất khô 20% Quy trình:Dược liệu khô cắt nhỏ ≈ 5cm.Chiết với nước nóng gấp 7lần dược liệu theo cách sắc,ép bã thu gom dich chiết,lọc trong.Cô đặc nhiệt độ ≈ 800C.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát 4.1.2.2:-BÀO CHẾ CÁC DẠNG THUỐC KHÁNG KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT *Thăm dò tác dụng kháng khuẩn Cao khô Hoàng bá/ Vàng đắng Berberin : Berberin kháng sinh thực vật mẫu dùng làm tiêu chuẩn đánh gía chất lượng chế phẩm chứa Cao khô Hoàng bá/ Vàng đắng giá trị MIC Berberin giúp xác định lượng cao Hoàng bá/ Vàng đắng công thức dự kiến MIC Berberin xác định phương pháp pha loãng thạch vi khuẩn mẫu gây bệnh đường ruột sử dụng Kết quả: MIC Berberin =10 ppm tương đương với liều tối thiểu =50 mg/ 50kg thể trọng hay để trì nồng độ tối thiểu thuốc thường định liều lần ngày tương đương 150mg Berberin≈ 0,5 gam Cao khô Vàng đắng/ Hoàng bá chứa ≥ 30%Berberin Liều sở để thiết kế công thức khác có thay đổi phối hợp dược liệu.Sau công thức thiết kế để so sánh với Berberin thử nghiệm MIC Để độc lập khâu nghiên cứu công thức mã hoá ngẫu nhiên từ R0 đến R5 +Công thức A – Ký hiệu R0 : Liều cho 50kg thể trọng/24 giờ: 1.Vàng đắng (Cao khô chứa alcaloid tính theo Berberin≥ 30%) 0,5 gam 2.Cỏ sữa lớn (Cao nước 10: 1)………………………………………… …… gam 3.Tô mộc (Cao nước 10: 1)…………………………………………………………… 0,5 gam 4.Vỏ măng cụt (Cao Tanin 10: ) ……………………………………………….1 gam +Công thức B – Ký hiệu R1 - Liều cho 50kg thể trọng/24 giờ: 1.Vàng đắng (Cao khô chứa alc Berberin≥ 30%, )…… ……………… 0,5 gam Cỏ sữa lớn (Cao nước 10: 1) ………………………………………… gam Vỏ măng cụt(Cao Tanin 10: 1) ………………… ………………… gam +Công thức C – Ký hiệu R2 - Liều cho 50kg thể trọng /24 giờ: Hoàng bá( Cao khô chứa alc Berberin≥ 30%, )…… …………… 0,5 gam Cỏ sữa lớn (Cao nước 10: 1) ………………………………………… gam Vỏ măng cụt(Cao Tanin 10: 1) ………………… ………………… gam +Công thức D - Ký hiệu R3: Berberin 97%,chiết từ Vàng đắng/Hoàng đằng +Công thức E - Ký hiệu R4 1.Vàng đắng (Cao khô chứa alc Berberin≥ 30%, )…… …………… 0,25 gam Gừng (Cao nước : 1) ………………………………………… .0,5 gam Hồ tiêu bột ……………………………………………………………………………… 0,5 gam Vỏ măng cụt(Cao Tanin 10: 1) ………………… ………………… gam +Công thức F– Ký hiệu R5- Liều cho 50kg thể trọng /24 giờ: Vàng đắng( Cao khô chứa alc.Berberin≥ 30%, )…… …………………0,25 gam Rau sam (Cao nước 5:1) …………………………………… ………… gam Gừng (Cao nước : 1) ………………………………………… 0,5 gam Vỏ măng cụt(Cao Tanin 10: 1) ………………… ………………… gam *Nhận xét:+Các công thức chứa Berberin hoạt chất kháng khuẩn cao Vỏ măng cụt hoạt chất phụ,chữa triệu chứng bệnh giải,hạn chế tiêu chảy +Các công thức R1 R2 tìm hiểu thay Vàng đắng Hoàng bá, vị thuốc chứa hoạt chất Berberin +Các vị Cỏ sữa lớn,Tô mộc,Gừng, Hồ tiêu Rau sam có tính kháng khuẩn hoạt chất phụ thay phần Berberin 4.1.3:-Tác dụng vi sinh học sinh học độc tính : 4.1.3.1:-Tác dụng vi sinh học MIC Berberin chế phẩm xác định phương pháp pha loãng thạch vi khuẩn mẫu gây bệnh đường ruột hay gặp người sử dụng * Kết quả: Hoatï tính kháng khuẩn MIC tính ppm mẫu R Bảng:2 Chủng vi khuẩn Mẫu R0 Maãu R1 Maãu R2 MaãuR3=Berberin Maãu R4 Maãu R5 Escherichia coli 10 20 20 10 40 40 Shigella dysenteriae 10 10 2,5 20 10 Vibrio cholerae 10 10 1,5 20 * Nhận xét kết quả: Mẫu R0 tác dụng kháng khuẩn đường ruột tốt chọn để nghiên cứu 10 4.1.3.2:- QUY TRÌNH BÀO CHẾ THUỐC SÁT KHUẨN PHÒNG TRỊ BỆNH ĐƯỜNG RUỘT - R +Công thức : – Ký hiệu R0: Vàng đắng (Cao Alcaloid chứa Berberin)…… ……………………… 0,5 gam Cỏ sữa lớn (Cao nước 10: ) ………………………………………… gam 3.Tô mộc (Cao nước 10: 1)…………………………………………………………… 0,5 gam 4.Vỏ măng cụt (Cao Tanin 10: ) …………………………………………… gam 5.Chất phụ (tinh bột, talc, magiesi stearat, lactose )….vừa đủ gam +Dạng trình bày : Cốm khô đóng gói giấy nhôm , gam / gói (đơn liều) chai 100 gam(đa liều) +Quy trình bào chế : Cân nguyên liệu Cao Vàng đắng,Cao Cỏ sữa lớn, Cao Tô mộc,Cao Vỏ măng cụt,Lactose,Tinh bột→Trộn đều(Máy trộn) →Thêm từ từ dịch Hồ tinh bột 5% vừa đủ ẩm (Máy xát hạt ướt).Xát hạt qua lưới φ = mm,rải khay →Sấy 500C hàm ẩm ≤ 5%→Sưả hạt qua lưới φ = mm Cân hạt.Tính lượng chất phụ(Bột Talc,Magiesi stearat =4,5% so với khối lượng thành phẩm) →Trộn nhẹ nhàng bột vào hạt →Đóng hạt bao giấy nhôm chống ẩm(Máy đóng gói)liều gam/gói (đơn liều)hoặc kín chai lọ kín 100 gam(đa liều).In ,dán nhãn Bảo quản nơi mát 4.1.3.3:-Tác dụng sinh học độc tính Khảo sát độc tính bất thường mẫu R chuột nhắt cách uống liều thuốc nhất.Quan sát nhận xét sau 48 theo hướng dẫn Dược điển Việt nam,năm 2002 Số chuột : chuột Liều thuốc: uống liều g/kg tức 100 gam thuốc R/ 50 kg thể trọng,gấp 20 lần liều tối thiểu Kết quả: 48 sau uống chuột lô thí nghiệm không chết, biểu bất thường mặt hành vi thể trạng 4.1.4 KẾT LUẬN VỀ CHẾ PHẨM PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG RUỘT +Các nghiên cứu vi khuẩn thường gây bệnh đường ruột người cho thấy mẫu thuốc R0 có khả tác dụng tốt thử nghiệm lợn +Công thức thuốc R dựa liều lượng thuốc cổ truyền thể tính an toàn sử dụng cho người theo hướng dẫn Dược điển Việt nam độc tính bất thường, kết nghiên cứu thể hiên tính an toan thuốc 11 4.2: CHẾ PHẨM PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG HÔ HẤP- KÝ HIỆU H 4.2.1: - NGHIÊN CỨU DƯC LIỆU Các dược liệu trị bệnh đường hô hấp trị ho,long đờm có nhiều,nhưng có tính sát khuẩn lại không nhiều: tinh dầu bạc hà, tràm, long não, tỏi, nghệ, cánh kiến trắng, bọ mắm, xuyên tâm liên, sâm đại hành, v.v…Trong bật tràm cho tinh dầu với hoạt chất Cineol =Eucalytol.Tinh dầu tràm dùng kháng sinh thực vật tiêu biểu có tác dụng phòng trị bệnh nhiễm trùng đường hô hấp thông dụng.Do nghiên cứu coi Tinh dầu tràm hoạt chất để phối hơpï với dược liệu khác 4.2.2:- BÀO CHẾ CÁC CHẾ PHẨM H Đã tiến hành thử công thức ký hiệu H1 H2 ….H5 việc có Tinh dầu tràm công thức khiến cho việc ổn định dạng bào chế trở lên khó khăn.Một mặt phải phân tán tinh dầu vào thuốc để trộn vào thức ăn cho lợn đồng thời phải có giá rẻ.Do có công thức bào chế ổn định để nghiên cứu bước sau +Công thức – Ký hiệu H1 - Liều cho 50kg thể trọng /24 giờ: 1- Tinh dầu tràm(Cineol 50%)……………………………………0,3 g 2-Tỏi ( tươi)………………………………………………………………………10 g 3- Nghệ………………………………………………………………………………2 g 4- Chất phụ …………………….vừa đủ,trộn tạo dạng bột – đóng chai +Công thức – Ký hiệu H2 - Liều cho 50kg thể trọng/24 giờ: 1- Tinh dầu tràm(Cineol 50%)……………….……………… 0,3 g 2- Sâm đại hành ………………………………………………………….10 g 4- Chất phụ …………………… …vừa đủ,trộn để tạo dạng bột – đóng chai +Công thức : – Ký hiệu H5 : Tinh dầu tràm (Cineol 50%)………………………………….0,3 gam Xuyên tâm liên (Cao nước : 10 ) …………………… gam 3.Gừng (Bột mịn )……………………… ……………………………… gam 4.Chất phụ………………………………………vừa đủ,trộn để tạo dạng bột – đóng chai Các quy trình bào chế : +Tinh dầu tràm :Lá tràm Melaleuca sp dùng tươi,chưng cất lôi kéo = nước→Tinh dầu thô→ Chưng cất phân đoạn→ Tinh dầu chứa Cineol 50 % + Sâm đại hành = Sâm cau :Thân Eleutherine subaphylla ,Họ Iridaceae Thu hái trồng năm, rửa phơi khô sấy 500C hàm ẩm ≤ 10% Xay rây qua rây mịn φ = 0,25 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát + Nghệ vàng Curcuma longa, Họ Zingiberaceae : 12 Củ nghệ rửa sạch,thái lát mỏng,phơi khôâ, tiếp sấy 800C hàm ẩm ≤ 10% Xay rây qua rây mịn φ = 0,15 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao Gừng :Cao đặc chiết từ củ gừng khô Zingiber officinale Rosc.,họ Zingiberaceae.Tỷ lệ dược liệu - cao = 4-1,tỷ lệ chất khô ≥ 40% Quy trình:Dược liệu cắt phiến ≈ × 5cm.Chiết với nước nóng gấp 10 lần dược liệu theo cách ngâm chiết phân đoạn,đến hết vị cay đặc trưng dược liệu.Cô đặc nhiệt độ thấp≈ 500C.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Bột Tỏi: Bào chế từ củ tỏi Allium sativum L, họ Alliaceae Quy trình:Dược liệu ngâm rửa nước,bóc vỏ cắt phiến mỏng ≈1mm.Cho vào ngâm với dung dịch ổn định 15 phút.Vớt để ráo,phơi phòng lạnh có khử ẩm,thông gió bề mặt se khô lại.Sấy 550C độ ẩm ≤ 5% Xay rây qua rây mịn φ = 0,15 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao Xuyên tâm liên :Cao đặc chiết từ khô Xuyên tâm liên Andrographis paniculata,họ Acanthaceae.Tỷ lệ dược liệu - cao =10-1,tỷ lệ chất khô ≥ 30% Quy trình:Dược liệu cắt phiến ≈ 5cm.Chiết với nước nóng gấp lần dược liệu theo cách chiết phân đoạn với nước sôi,đến hết vị đắng đặc trưng dược liệu.Cô đặc nhiệt độ ≈ 70-1000C.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát 4.2.3:-TÁC DỤNG VI SINH HỌC VÀ SINH HỌC ĐỘC TÍNH CỦA CÁC CHẾ PHẨM H 4.2.3.1:-TÁC DỤNG VI SINH HỌC CỦA CÁC CHẾ PHẨM H MIC Cineol 95% chế phẩm xác định phương pháp pha loãng thạch vi khuẩn mẫu gây bệnh đường ruột hay gặp người sử dụng * Kết quả: Hoatï tính kháng khuẩn MIC tính ppm mẫu H Bảng:3 Chủng vi khuẩn *H0 H1 H2 H5 Không rõ Streptococcushaemolyticus 17,92 8,96 Staphylococcus aureus 8,96 17,92 4,48 Klebsiella sp 8,96 17,92 4,48 Staphylococcus aureus MASA** 8,96 17,92 4,48 Ghi chuù: *H0 = Cineol 95% hoạt chất mẫu để so sánh thử nghiệm ** = MASA chủng vi khuẩn Staphylococcus aureus kháng Methicillin * Nhận xét kết quả: Mẫu H5 tác dụng kháng khuẩn đường hô hấp tốt chọn để nghiên cứu 4.2.3.2:-QUY TRÌNH BÀO CHẾ THUỐC SÁT KHUẨN,PHÒNG TRỊ BỆNH ĐƯỜNG HÔ HẤP -H +Công thức : – Ký hiệu H5: Tinh dầu tràm (Cineol 50%)………………………………….0,3 gam 13 Xuyên tâm liên (Cao nước : 10 ) …………………… gam 3.Gừng (Bột mịn )……………………… ……………………………… gam 4.Chất phụ (tinh bột, talc, magiesi stearat, lactose )….vừa đủ gam +Dạng trình bày : Cốm khô đóng gói giấy nhôm ,5 gam / gói chai 100 gam (đa liều) +Quy trình bào chế : Cân nguyên liệu Cao Xuyên tâm liên,Bột Gừng,Lactose,Tinh bột →Trộn đều(Máy trộn) →Thêm từ từ dịch Hồ tinh bột 5% vừa đủ ẩm (Máy xát hạt ướt).Xát hạt qua lưới φ = mm,rải khay →Sấy 500C hàm ẩm ≤ 5%→Sưả hạt qua lướiφ =1mm.Cân hạt.Để hạt phòng lạnh 50C/120 phút.Tính cân lượng chất phụ(Bột Talc,Magiesi stearat =4,5% so với khối lượng thành phẩm) →Trộn nhẹ nhàng tinh dầu vào hạt phòng điều nhiệt 200C Tiếp trộn bộtTalc,Magiesistearat vào hạt →Đóng hạt bao giấy nhôm chống ẩm(Máy đóng gói)liều gam/gói (đơn liều)hoặc kín chai lọ kín 100 gam(đa liều).In ,dán nhãn Bảo quản nơi mát 4.2.3.3:-TÁC DỤNG SINH HỌC ĐỘC TÍNH CỦA CHẾ PHẨM H Khảo sát độc tính bất thường mẫu H chuột cách uống liều thuốc nhất.Quan sát nhận xét sau 48 theo hướng dẫn Dược điển Việt nam,năm 2002 Số chuột : chuột Liều thuốc: uống liều g/kg tức 100 gam thuốcH cho 50 kg thể trọng ,gấp 20 lần liều tối thiểu Kết quả: 48 sau uống chuột lô thí nghiệm không chết, biểu bất thường mặt hành vi thể trạng 4.2.4 KẾT LUẬN VỀ THUỐC PHÒNG TRỊ BỆNH NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG HÔ HẤP +Các nghiên cứu vi khuẩn thường gây bệnh đường ruột người cho thấy mẫu thuốc H5 có khả tác dụng tốt thử nghiệm lợn +Công thức thuốc H dựa liều lượng thuốc cổ truyền thể tính an toàn sử dụng cho người theo hướng dẫn Dược điển Việt nam độc tính bất thường, kết nghiên cứu thể tính an toàn thuốc +Đặc biệt thuốc có tác động chủng vi khuẩn Staphylococcus aureus MASA đềkháng Methicillin,một chủng“lờn” kháng sinh tổng hợp Đây điều hy vọng góp phần vào thực tốt mục tiêu đề tài đăït 14 4.3: CHẾ PHẨM KÍCH THÍCH TĂNG TRƯỞNG,TĂNG TRỌNG – KY ÙHIỆU T 4.3.1:- NGHIÊN CỨU DƯC LIỆU *Theo Y Dïc đại chế phẩm kích thích tăng trưởng,tăng trọng dạng thuốc bổ dưỡng thường chứa nhóm hoạt chất sau: Vitamin : Vitamin A, Protamin A,B1, B2 B6 B12 ,Vita.C, Acid Amin vaø Protein : Lysin, Methionin,… Khoáng vi lượng : Đồng, Kẽm, Coban, Chất tăng cường miễn dịch, yếu tố tăng trưởng(Growth Factor):AND, Tinh chất Nhân sâm,Nấm vân chi Coriolus,Tảo Spirulina, Chlorella,Dibencoside,Hormon tăng trưởng, *Theo Y Dïc cổ truyền- Đông y chế phẩm kích thích tăng trưởng,tăng trọng thường dạng thuốc bổ dưỡng trị suy dinh dưỡng trẻ em (Phì nhi Cam tích), công thức có nhóm dược liệu chính: Bổ khí huyết Tiêu độc trừ hàn, kích thích tiêu hoá: +Dược liệu Bổ khí huyết: Có tác dụng tăng sinh huyết,tăng số lượng hồng cầu;sinh cơ, phát triển khung xương tăng cường sức mạnh bắp chức vận động.Dược liệu thuộc nhóm gồm:Nhân sâm,Bạch truật,Phục linh,Cam thảo (Tứ quân bổ khí),Đương quy, Bạch thược,Thục địa,Xuyên khung (Tư ùvật bổ huyết) Ngoài dùng:Sâm đại hành, Đảng sâm,Bạch biển đậu, Mật ong,Mạch nha,Bã men bia, Bột thịt cóc,Bột, cao xương động vật +Dược liệu Tiêu độc trừ hàn, kích thích tiêu hoá,thông mật, lợi mật kích thích ăn uống, tăng cường hấp thu dưỡng chất: Hạt cau, Sử quân tử,Hạt bí ngô, Ô mai,Vỏ lựu (tẩy giun sán);Thần khúc, Men rượu-bia,Nghệ, Hoàng bá, Trần bì, Mộc hương,Sa nhân,Mật lợn, v.v… Từ dược liệu nhiều dược phẩm sản xuất lưu hành thị trường :Phì nhi cam tích, Phì nhi hoàn,Thuốc cam Hàng Bạc, *Nhận xét:Thuốc đông y thường chế phẩm nhiều vị thuốc 7→18 vị , tác dụng không mạnh, nói chung chưa có số liệu lâm sàng chứng minh, liều uống lớn 10→20 gam/ngày/ 50 kg cân nặng.Tuy nhiên liều lượng lớn sử dụng cho lợn không trở ngại trộn vào thức ăn vốn lớn chúng p dụng kinh nghiệm Đông dược hướng đắn, song nên sử dụng dược liệu biết rõ hoạt chất,hoặc có uy tín, đồng thời áp dụng phương pháp thiết kế công thức theo Y Dïc phát huy tác dụng dược lý tối đa dược liệu chọn đảm bảo giá thành rẻ Do vị thuốc chọn để nghiên cứu gồm: Nghệ, Mật động vật,Trần bì,Hạt cau, Thần khúc, Mộc hương, Bột xương động vật (mai mực),Sâm đại hành, 4.3.2:-CHẾ BIẾN DƯC LIỆU VÀ BÀO CHẾ CÁC DẠNG THUỐC TĂNG TRỌNG T 15 Đã nghiên cứu công thức từ thực tế:Thuốc cam XX, Phì nhi cam tích Hải phòng, Phì nhi hoàn Dược điển Việt nam,Thuốc cam Lam sơn Enalac Trung tâm dinh dưỡng trẻ em TPHCM.Trên sở lựa chọn dược liệu, thành phần chất phụ để thiết kế công thức T1,T2 để thử nghiệm thức *Thiết kế công thức :Ký hiệu T1,T2 + Công thức – Ký hiệu T1 - Liều cho 50kg thể trọng / 24 Nghệ vàng ( Curcuma longa) …… ……….1,5 gam Trần bì (Bột mịn )……………………… ………0,5 gam Mật động vật (Cao nước 2: ) ……………1 ml Thần khúc (Bột mịn )……………………… ……0,25 gam Chất phụ (tinh bột, magiesi stearat, vi lượng khoáng )….vừa đủ 3,5 gam • Bào chế thành hạt/cốm khô,đóng gói bao giấy nhôm chống ẩm +Công thức – Ký hiệu T2 - Liều cho 50kg thể trọng / 24 • 1- Thần khúc …………………… ……………… 1,5g • 2- Mộc hương …………………… ………………0,15g • 3- Mật động vật (Cao nước : ) … ml • 4- Sâm đại hành ………………………… 0,25 g • 5- Chất phụ (tinh bột, magiesi stearat, vi lượng khoáng)….vừa đủ 3,5 gam • Bào chế thành hạt/cốm khô,đóng gói bao giấy nhôm chống ẩm *Chế biến dược liệu : + Nghệ vàng: Rễ củ Curcuma longa L, Họ Zingiberaceae Củ nghệ rửa sạch,thái lát mỏng,phơi khô.Tiếp cho nghệ vào xô nhựa tẩm dung dịch Amoniac 10%( lượng dùng khoảng 1/5 khối lượng dược liệu), đậy kín,để ngày.Sau lấy thông gió cho khô, tiếp sấy 800C hàm ẩm ≤ 10% Xay rây qua rây mịn φ = 0,25 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát + Trần bì :Vỏ quýt Citrus reticulata,Họ Rutaceae Vỏ phơi khô,tẩm nước cho mềm,thái nhỏ.Phơi bóng râm, thông gió đến hàm ẩm ≤ 13% Xay rây qua rây mịn φ = 0,25 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát + Thần khúc : Massa medicata fermentata Chonï loại thần khúc chế từ có vị thuốc (Lục thần khúc)gồm Ké đầu ngựa,Thanh hao, Ngải cứu, Rau nghể,Quế chi,Hương phụ),lên men theo quy trình chế biến cổ truyền Thần khúc phải bánh có màu vàng nhạt với sợi nấm men bề mặt có mùi thơm đặc trưng.Trước xay bột,Thần khúc ủ với nước gừng tươi (khoảng 1/ 20 khối dược liệu),sao thơm,đạt hàm ẩm ≤ 7%.Bột đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát 16 + Mộc hương: Rễ Mộc hương Saussurea lappa Thổ mộc hương Inula sp Họ Asteraceae Mộc hương thái lát, phơi khô,sấy nhẹ, đạt hàm ẩm ≤ 15% Xay rây qua rây mịn φ = 0,25 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát + Sâm đại hành = Sâm cau :Thân Eleutherine subaphylla ,Họ Iridaceae Thu hái trồng năm, rửa phơi khô sấy 500C hàm ẩm ≤ 10% Xay rây qua rây mịn φ = 0,25 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát +Cao mật động vật :Mel sp Chế biến từ mật trâu, bò mật lợn Thu mật mổ thịt vật.Các túi mật rửa nươcù,để nước.Tiếp nhúng vào cồn ethylic 90%trong phút,lấy để bay cồn.Đăït túi mật lên rây mịn có mắt lưới # 0,1 mm Nylon,cắt ép cho mật chảy vào chậu hứng.Thêm vào mật lượng muối Natri clorit 1% thể tích mật, khuấy cho tan, để yên giờ.Vớt váng mặt khối mật có,tiếp lọc qua vải lọc mịn.Cô cách thuỷ mật cho bốc khoảng ½ thể tích ban đầu hay cao đạt hàm lượng chất khô ≥ 20%.Rót vào chai lọ nóng,nút kín, bảo quản nơi mát + Bột mai mực:Khoáng chất chế từ mai cá mực( Ô tặc cốt Kim ô tăïc cốt) Mai mực tươi phơi sấy 1200C hàm ẩm ≤ 5% Xay rây qua rây mịn φ = 0,10 mm.Đóng gói bao bì kín, bảo quản nơi mát *Bào chế dạng thuốc: +Quy trình bào chế thuốc T1 : Cân nguyên liệu Nghệ vàng,Trần bì,Thần khúc →Trộn đều(Máy trộn) →Thêm từ từ Cao Mật động vật(Máy xát hạt ướt),bổ sung dịch Hồ tinh bột 5% vừa đủ ẩm.Xát hạt qua lưới φ = mm,rải khay →Sấy 500C hàm ẩm ≤ 5%→Sưả hạt qua lưới φ = mm Cân hạt.Tính lươnïg Bột mai mực(3% so với khối lượng thành phẩm)và Chất phụ (tinh bột, magiesi stearat)vừa đủ theo công thức→Trộn nhẹ nhàng bột vào hạt →Đóng hạt bao giấy nhôm chống ẩm(Máy đóng gói)liều 3,5 gam/gói (đơn liều)hoặc kín chai lọ kín 100 gam (đa liều).In ,dán nhãn Bảo quản nơi mát +Quy trình bào chế thuốc T2 : Cân nguyên liệu Thần khúc,Mộc hương,Sâm đại hành →Trộn đều(Máy trộn) →Thêm từ từ Cao Mật động vật(Máy xát hạt ướt),bổ sung dịch Hồ tinh bột 5% vừa đủ ẩm.Xát hạt qua lưới φ = mm,rải khay →Sấy 500C hàm ẩm ≤ 5%→Sưả hạt qua lưới φ = mm Cân hạt.Tính lươnïg Bột mai mực(3% so với khối lượng thành phẩm)và Chất phụ (tinh bột, magiesi stearat)vừa đủ theo công thức→Trộn nhẹ nhàng bột vào hạt →Đóng hạt bao giấy nhôm chống 17 ẩm(Máy đóng gói)liều 3,5 gam/gói (đơn liều)hoặc kín chai lọ kín 100 gam(đa liều).In ,dán nhãn Bảo quản nơi mát 4.3.3:-TÁC DỤNG SINH HỌC VÀ ĐỘC TÍNH CỦA THUỐC BỔ T1 VÀ T2 4.3.3.1-TÁC DỤNG TĂNG THỂ TRỌNG TRÊN SÚC VẬT TRONG KỲ TĂNG TRƯỞNG +Mục đích : 1) Theo dõi tăng thể trọng thú thử nghiệm 2)Theo dõi mức độ tiêu thụ thức ăn thú thử nghiệm 3)Theo dõi độc tính mẫu nghiên cứu +Mẫu nghiên cứu: 1)Thuốc bổ T1, T2 2)Thuốc đối chứng:Thuốc Cam XX thuốc cổ truyền lưu hành từ lâu thị trường nước ta.Việc dùngThuốc Cam XX không ph nghiên cứu lại loại thuốc này, mà xem thuốc có tác động mô hình nghiên cứu không,nếu có dùng để so sánh riêng nghiên cứu này.Do tên thật thuốc mã hoá không công bố rọâng rãi 3)Tinh bột:tá dược độn thuốc,không chứa hoạt chất,như Placebo +Phương pháp thử nghiệm: Thú thử nghiệm chuột nhắt trắng chủng ddY có trọng lượng trung bình 20 ± gam kỳ tăng trưởng, uống thuốc 20 ngày theo dõi tiêu theo yêu cầu thử nghiệm KẾT QUẢ: Í)Sự tăng thể trọng chuột thử nghiệm sau 20 ngày uống thuốc Lô chứng (n = 9): uống tinh bột,là tá dược độn trongT1,T2 ,không chứa hoạt chất,vai trò Placebo, liều 50 mg/kg/24 Lô thử (n = 10): uống mẫu T1 liều 50 mg/kg/ 24 Lô thử (n = 10): uống mẫu T2 liều 50 mg/kg/24 giờ- Lô thử (n = 10): uống Thuốc Cam XX(Lô SX 01062002, hạn dùng 01062003 ),liều 960 mg/ kg/24 giờ,vì theo dẫn nhãn thuốc có liều dùng tới 50 g/ 50 kg trọng lượng/ 24 Xem Biểu đồ 1: 18 *Nhận xét: - Khi cho chuột uống thuốc bổ T1 T2 vòng 21 ngày, thể trọng chuột lô tăng có ý nghóa thống kê so với lô chứng uống tá dược độn Tuy nhiên, tác dụng tăng trọng mẫu T1 T2 thể rõ vòng tuần sau uống thuốc, sau độ tăng trọng giảm dần (thể trọng chuột thí nghiệm giữ mức đạt đươc Điều gợi ý chế độ liều lượng thời gian dùng thuốc khoảng tuần với mục đích trị liệu nhằm tăng trọng Thuốc Cam XX liều 960 mg/kg/24 tác động làm tăng thể trọng chuột - Một điểm cần lưu ý khác chuột thử nghiệm tất lô trạng thái bình thường 2) Mức độ tiêu thụ thức ăn hàng ngày chuột thử nghiệm -Xem Biểu đồ : 19 *Nhận xét: +Tổng lượng thức ăn tiêu thụ/ngày lô chuột đo lường Kết cho thấy khác biệt rõ rệt mức độ tiêu thụ thức ăn lô.Tuy nhiên mức tiêu tụ thuốc bổ T1 có cao va øphù hợp với tốc độ tăng trọng Do điều kiện phòng thí nghiệm theo dõi mức độ tiêu thụ thức ăn cá thể chuột thí nghiệm,nên có thí nghiệm kiểu cho kết luận xác +Ở liều lượng 50 mg/kg/24 qua đường uống, thuốc bổ mẫu T1 T2 có tác dụng làm tăng thể trọng chuột khoảng thời gian tuần Việc kéo dài thời gian sử dụng thuốc thời gian không tác dụng trì tốc độ tăng thể trọng,nhưngsự trì thể trọng có tốt +Thuốc Cam XX liều 960 mg/kg/24 tác dụng làm tăng thể trọng điều kiện thí nghiệm 4.2.3.2-THỬ NGHIỆM TÁC DỤNG TĂNG THỂ TRỌNG TRÊN SÚC VẬT SUY DINH DƯỢNG *Mục đích : 1) Theo dõi tăng thể trọng thú thử nghiệm bị suy dinh dưỡng đánh giá tác dụng bổ dưỡng, nâng cao thể trọng thể thể trường hợp suy dinh dưỡng suy nhược thể 2)Theo dõi mức độ tiêu thụ thức ăn thú thử nghiệm 3)Theo dõi độc tính mẫu nghiên cứu *Mẫu nghiên cứu: mẫu 2) -Thuốc đối chứng:Thuốc Cam XX 1)Thuốc bổ T1, T2 *Phương pháp thời gian thử nghiệm: +Súc vật: chuột nhắt trắng Mus musculus,sau tuần tuổi gây suy dinh dưỡng tuần,trọng lượng tuần tuổi thứ so với chuột bình thường giảm 40% → 50% +Thời gian thử nghiệm: Gồm tuần, cho chuột uống thuốc tuần tuần sau ngưng thuốc +Lô thí nghiệm Liều thử nghiệm: Chuột chia ngẫu nhiên lô, lô 20 (n = 20) Lô thử thuốc T1: uống 5mg thuốc /0,3ml nước cất/con x 20 Lô thử thuốc T2 :uống 6mg thuốc /0,3ml nước cất/con x 20 Lô thuốc đối chứng :uống thuốc Cam XX,liều 32mg/0,3ml nước cất/con x 20 Lô chứng: uống 0,3ml nước cất/ x 20 20 Đưa thuốc thẳng vào dày chuột kim đầu tù theo kỹ thuật chung *Chỉ tiêu theo dõi Lượng thức ăn tiêu thụ lô Theo dõi trọng lượng, sắc lông, mức độ hoạt động (nhanh nhẹn hay chậm chạp) Mức độ đáp ứng cá thể lô tiêu có đồng hay phân tán *Kết : Bảng kết theo dõi trọng lượng chuột Bảng Tuần Lô chứng (g) Lô thuốc đối chứng (g) Lô thử T1 (g) Lô thử T2 (g) 8.86 ± 0.42 8.9 ± 0.3 8.8 ± 0.3 8.8 ± 0.3 11.3 ± 0.3 11.2 ± 0.5 12.2 ± 0.5 12.2 ± 0.6 14.5 ± 0.43 12.2 ± 0.54 14.8 ± 0.64 15.2 ± 0.8 17.8 ± 1.15 17.4 ± 0.7 18.4 ± 0.8 17.5 ± 0.8 19.75 ± 1.3 19.4 ± 0.6 20.6 ± 0.9 19.3 ± 0.9 21.12 ± 1.3 21.5 ± 0.7 22.0 ± 0.8 20.9 ± 0.9 23.8 ± 1.4 23.1 ± 0.9 23.5 ± 0.8 23.2 ± 0.8 Theo bảng kết theo dõi trọng lượng nhận thấy: + Lô T1 tăng trọng ổn định, hợp lý đồng so với lô khác, thuốc T1 có tác dụng tốt Thuốc Cam XX thuốc Đông y cổ truyền dùng phòng chống suy dinh dưỡng cho trẻ tiếng, đặc biệt liều dùng mẫu thuốc T1,T2 nhỏ bằng1/6 so với thuốc đối chứng +Cả lô có tăng trọng nuôi bình thường, điều thường xảy mô hình chuột suy dinh dưỡng bị bỏ đói,không giống bệnh suy dinh dưỡng bệnh tật gây Nhưng lô dùng thuốc mức độ tăng trọng cá thể tương đối đồng so với lô chứng độ lệch chuẩn (Sd) phân tán +Khi dùng thuốc sau ngưng thuốc cho thấy lô chuột dùng thuốc có tăng trọng ổn định phân tán so với lô chứng.Chuột ăn nhanh nhẹn, hoạt động linh hoạt cho thấy an toàn không độc thuốc điều kiện thử nghiệm 21 +Lượng thức ăn lô thử đối chứng so với lô chứng, ảnh hưởng lượng thuốc bơm vào dày, sức chứa dày chuột nhắt nhỏ Kết luận đề nghị: Tăng trọng mô hình chuột suy dinh dưỡng kết đánh giá sơ để thăm dò tác dụng thuốc Để đánh giá cụ thể cần có nhiều súc vật bổ sung tiêu xét nghiệm huyết học, sinh hóa… Các nghiên cứu ứng dụng lợn thực thử nghiệm đầy đủ bổ sung cho nghiên cứu mang tính thăm dò có kết luận thức 4.3.4-KẾT LUẬN VỀ CHẾ PHẨM BỔ DƯỢNG,TĂNG TRƯỞNG TĂNG TRỌNG T + Thuốc T1 có tác dụng chống suy dinh dưỡng nhỉnh Thuốc Cam XX.+ Thuốc T1 có tác dụng kích thích ăn uống,tiêu thụ thức ăn tăng trọng tăng trưởng rõ với độ tin cậy >95% + Thuốc T1 dùng với liều nhỏ 2,5 -3 gam/ngày, điều cho thấy thuốc tác dụng mạnh thuốc Tây đại Do mẫu thuốc T1 chọn làm thuốc bổ dưỡng, kích thích ăn uống,nâng cao hiệu hấp thu thức ăn giúp tăng trưởng tăng trọng dùng cho lợn nghiên cứu 5- KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5-1 KẾT LUẬN Đã nghiên cứu nội dungchính sau : 1-Nghiên cứu bào chế chế phẩm Trên sở 25 / thuốc 17 bán thành phẩm (cao/ bột dược liệu) bào chế thử 17 chế phẩm chọn 12 chế phẩm để thử tác dụng dược lý invitro độc tính, gồm : Nhóm kháng khuẩn trị bệnh đường hô hấp chế phẩm : H0, H1H2, H5, chế phẩm đối chiếu H0 Nhóm kháng khuẩn trị bệnh đường ruột chế phẩm : R0, R1, R2, R4, R5, chế phẩm đối chiếu R3 Nhóm kích thích tăng trưởng T gồm chế phẩm: T1 T2, chọn để thử tác dụng dược lý - sinh học Thuốc cam XX –một chế phẩm cổ truyền lưu hành thị trường Đặc điểm chế phẩm : chế phẩm bào chế dươí dạng cốm / hạt khô để đóng gói máy vào túi nhôm/nhựa ép kín chai Đồng thời cốm dễ trộn vào thức ăn gia súc, dễ phân tán nước để thuốc hấp thu tốt uống 2-Thư û dược lý : + Tác dụng kháng khuẩn invitro : 22 >Nhóm kháng khuẩn trị bệnh đường hô hấp : công thức H5 tác dụng kháng khuẩn invitro tốt so với công thức nhóm chủng vi khuẩn thử nghiệm: Staphylococcus haemolyticus, Streptococcus aureus, Klebsiella sp chủng kháng Methicillin Staphylococcus aureus mrsa >Nhóm kháng khuẩn trị bệnh đường ruột : công thức R0 tác dụng kháng khuẩn invitro tốt so với công thức nhóm chủng vi khuẩn thử nghiệm: E coli, Shigella dysenteriae Vibrio cholerae + Tác dụng tăng trưởng tăng trọng chuột : Công thức T1 tác dụng tốt nhất, chọn để nghiên cứu tiếp lợn -Thử độc tính : Thuốc tăng trưởng tăng trọng T : Khi dùng chuột từ 3-7 tuần cho thấy thuốc không gây độc liều lượng thuốc định Thuốc kháng khuẩn đường ruột R Thuốc kháng khuẩn đường hô hấp H: Thử nghiệm độc tính bất thường theo hướng dẫn Dược điển Việt nam năm 2002 cho thấy thuốc không gây độc –Bào chế thử chế phẩm quy mô pilot: Bào chế lượng thuốc đủ thử nghiệm heo với dự tính : +Mẫu thuốc kháng khuẩn phòng trị bệnh đường ruột R: cho 20.000 Kg thể trọng lợn ≈ 3250 liều/ gói gam +Mẫu thuốc kháng khuẩn phòng trị bệnh đường hô hấp H: cho 20.000 Kg thể trọng lợn ≈ 3500 liều/ gói gam +Mẫu thuốc tăng trưởng tăng trọng T: cho 5000 Kg thể trọng lợn ≈ 2150 liều/ gói gam 5-2 ĐỀ NGHỊ + Triển khai thử nghiệm lợn để đánh giá hiệu thuốc + Nghiên cứu khảo sát độ ổn định xây dựng tiêu chuẩn cho dược liệu,nguyên liệu chế phẩm bào chế + Tập hợp kết thử nghiệm lợn để có điều chỉnh phù hợp nhằm hoàn thiện chế phẩm báo cáo tổng kết đề tài nhằm đưa kết phục vụ nhu cầu thực tế 23 TÀI LIỆU THAM KHẢO 1-BỘ Y TẾ – HỘI ĐỒNG DƯC ĐIỂN VIỆT NAM : Dược điển Việt nam, Tập – Năm 2002 Nhà xb Y học Hà nội, Tr PL 181-194; 368; 423; 473;492;502; 2-BỘ Y TẾ – VIỆN DƯC LIỆU : Tạp chí Dược liệu Số tháng12-2001 & tháng 1-2002 : Các thuốc có berberin Việt nam giới Cây thuốc Việt nam – 1990 Tài nguyên thuốc Việt nam –1993 3-BỘ NÔNG NGHIỆP & … Thuốc nam trị bệnh gia súc –Cục thú y, Nhà xb Nông thôn -1969 Thuốc nam trị bệnh gia súc gia cầm – Viện thú y quốc gia, Nhà xb Nông nghiệp -1994, tác giả Trần Minh Hùng 4-DENIXOV (Nga) : Sản xuất,sử dụng thức ăn hỗn hợp cho gia súc–Bản dịch tiếng Việt –Nxb1971 5-ĐỖ TẤT LI : Những thuốc vị thuốc Việt nam – Nhà xb Khoa học kỹ thuật, 1999, tr 179 – 501 6-FDA-USA 2000-2002 …… (Internet) Poultry antibiotic……… pp 14 - 21 7-KAMEL C : Feed mix-The int j on Feed, Nutrition and Technology N= Special 2000,pp 1921 8-NGUYỄN ĐỨC MINH : Thuốc chữa bệnh nhiễm khuẩn từ cỏ nước Nhà xb Y học – 1995 9-PHẠM SỸ LĂNG- TRƯƠNG VĂN DUNG : Một số bệnh vi khuẩn Mycoplasma gia súc, gia cầm Nhà xb Nông nghiệp -2002 10-TRẦN THỊ AN TƯỜNG -ĐỖ MINH- PHẠM NGỌC BÙNG- CHU THỊ LỘC : Tìm hiểu hiệu lực kháng khuẩn của…lá xuyên tâm liên Tạp chí Dược học , số 1993, tr 15- 20 11-TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯC KHOA HÀ NỘI - TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y - DƯC TP HỒ CHÍ MINH : Bài giảng dược liệu – 1998 ,taäp 1- tr 384-401; taäp 2- tr 87-89,… 24 ... NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN BÁO CÁO SƠ KẾT ĐỀ TÀI CẤP NHÀ NƯỚC Tên đề tài nhánh: Sử dụng nguồn dược liệu thiên nhiên để bào chế số chế phẩm phòng trị bệnh đường ruột ,đường hô hấp kích thích tăng. .. cứu dược liệu thiên nhiên có tính kháng khuẩn, thường dùng trị bệnh đường hô hấp, đường ruột số dược liệu kích thích ăn uống sử dụng số dược phẩm chữa bệnh cho người Từ nguyên liệu bào chế số chế. .. người vào chăn nuôi lợn (heo) , giúp phòng trị số bệnh nhiễm khuẩn đường ruột, đường hô hấp thường gặp heo, không dùng hạn chế dùng kháng sinh, thuốc hóa học chăn nuôi; kích thích heo ăn khỏe, tăng