báo cáo y học: "ứNG DụNG DUNG MôI CO2 SIêU TớI HạN đIềU CHế LIPOSOM CHứA ARBUTIN Sử DụNG TRONG Mỹ PHẩM NANO" ppsx

ứNG DụNG DUNG MôI CO 2 SIêU TớI HạN đIềU CHế LIPOSOM CHứA ARBUTIN Sử DụNG TRONG Mỹ PHẩM NANO Hoàng Văn Lương* Vũ Bình Dương * Nguyễn Văn Long * Đào Văn Đôn * TãM T¾T Liposom chứa ar

ứNG DụNG DUNG MôI CO 2 SIêU TớI HạN

đIềU CHế LIPOSOM CHứA ARBUTIN Sử DụNG TRONG

Mỹ PHẩM NANO

Hoàng Văn Lương*

Vũ Bình Dương * Nguyễn Văn Long * Đào Văn Đôn *

TãM T¾T

Liposom chứa arbutin được điều chế theo phương pháp bốc hơi đảo pha và sử dụng dung môi CO2 siêu tới hạn Kết quả đã tìm được điều kiện phù hợp cho quá trình tạo liposom là: nhiệt độ 600C, áp suất 200 bar Liposom thu được theo phương pháp này có kích thước, hiệu suất liposom hóa và hàm lượng

arbutin cao hơn so với phương pháp truyền thống của Bangham

* Từ khóa: Liposom; Arbutin, Siêu tới hạn; Mỹ phẩm nano

STUDy OF APPLYING SUPERCRITICAL CARBON DIOXIED PREPARES ARBUTIN LIPOSOME USED IN NANOCOSMETICS

Hoang Van Luong

Vu Binh Duong Nguyen Van Long Dao Van Don

SuMMARY

Preparation of liposome containing arbutin was

evaporation method without organic solvent The most suitable critical conditions for making liposome were found that: the pressure was 200bar; temprature was 60 0 C The particles of liposome and liposomzation capicity followed this method was better than Bangham’s method

* Key words: Liposome; Arbutin; Supercritical;

tố trên da do tác dụng ức chế enzym tyrosinase tạo thành hắc tố da Vì vậy

nó được sử dụng phổ biển làm chất trắng da trong mỹ phẩm Muốn

tạo được tác dụng,

arbutin phải thấm

qua được lớp biểu bì và

phân bố giữa lớp tế bào

da

* Häc viÖn Qu©n y

Ph¶n biÖn khoa häc: PGS TS NguyÔn V¨n Minh

Hình 1: Cấu trúc hóa

học của arbutin

Trên thế giới đã có

nhiều phương pháp bào

chế liposom như phương

pháp của Bamhang dùng

dung môi hữu cơ để hòa

tan phospholid, sau đó

phân tán dưîc chất và bốc

hơi dung môi Tuy nhiên,

phương pháp này hiệu suất tạo được liposom thấp Ngoài ra còn tồn dư các dung môi hữu cơ độc hại trong sản phẩm Phương pháp sử dụng chất lỏng CO2 siêu tới hạn làm dung môi trong chế tạo liposom có nhiều

ưu điểm như: hiệu suất cao, kích thước tiểu phân nhỏ, không độc hại, rẻ tiền [2] Vì vậy trong nghiên cứu này, chúng tôi ứng dụng dung môi

CO2 siêu tới hạn để bào chế liposom chứa arbutin

của áp suất siêu tới hạn

đến hiệu quả liposom

- Nhật Bản) và các hóa chất khác

- Thiết bị chiết suất siêu tới hạn Thai.cor

2000 (Mỹ), có bộ phận đặc biệt để bốc hơi dung môi CO2; máy đo kích thước tiểu phân nano NICOMP 370 (Santar Barbara - Mỹ); hệ thống sắc kí lỏng cao áp Water

200, 250; 300; 350, 400 bar trong thời gian 30 phút Bốc hơi dung môi

CO2 bằng cách mở van

xả với tốc độ 1 ml/phút cho tới khi áp suất trong bình về 0 bar Hỗn dịch liposom được lọc lần lượt qua các màng lọc có kích thước 3; 1,2; 0,6; 0,4 và 0,22 µm Dịch lọc liposom bảo quản ở 40C

- Chế tạo liposome theo phương pháp của Bangham Cân và hòa

tan hoàn toàn lecitin

trong cloroform trong

bình kín, bốc hơi dung

môi dưới điều kiện áp

suất giảm cho tới khi thu

được màng lecitin mỏng

Cân và hòa tan arbutin

trong nước, sau đó phân

2.2 Phương pháp phân tích kích thước tiểu phân:

Pha loãng mẫu liposom

400 lần với nước cất Sau

đó chuyển vào tế bào đo của hệ thống máy xác định kích thước tiểu phân nano NICOMP 370 Kết quả xác định kích thưíc tiểu phân được xử l í trên máy tính Mỗi mẫu làm lặp lại 6 lần

đoạn Đo kh¶ năng hấp

thụ tử ngoại của các phân

85, thể tích bơm mẫu 20µl, tốc độ dòng 1ml/phút, detector UV ở bước sóng 280 nm Phần trăm arbutin được liposom hóa tính theo công thức sau:

Clipo x Vlipo

E (%) =

x 100 (Clipo x Vlipo) + (Ctdo x

Vtdo) Trong đó: Clipo ; Ctdo là

nồng độ arbutin trong

liposom và ở dạng tự do

KÕt qu¶ nghiªn cøu

1 Kết quả nghiên cứu

tạo liposom

Theo phương pháp

SCRPE, quá trình tạo

liposom trải qua 4 bước

sau: trước hết tạo dung

dịch đồng nhất của lecitin và cồn trong CO2siêu tới hạn (a), sau đó phân tán dung dịch arbutin vào trong dung dịch lecitin tạo thành nhũ tương ở trạng thái siêu tới hạn CO2/N (b), ở điều kiện có khuấy trộn các lecitin sẽ sắp xếp đầu không phân cực hướng ra hai bên và đầu phân cực hướng vào trong, trong qu¸ trình đó bao lấy các tiểu phân arbutin vào phần phân cực của lớp phospholipid (c), khi

giảm áp suất và nhiệt độ

CO2 chuyển từ trạng thái

siêu tới hạn sang trạng

thái khí, lúc đó các

liposom được hình thành liên tục tạo thành hỗn

dịch trong nước (hình 2)

Hình 2: Quá trình tạo liposom theo phương pháp

SCRPE

2 Kết quả khảo sát khả năng ảnh hưởng của áp suất đến khả năng tạo liposome

Bảng 1: Kích thước và hiệu suất tạo liposom ở các điều kiện áp suất khác nhau

om hãa (%)

hµm l-îng arbuti

n trong liposo

m (µg/mg)

* Ở các điều kiện áp suất khác nhau, kích thước

liposom và hiệu suất liposom hóa cũng khác nhau Khi áp suất càng tăng, kích thước tiểu phân càng giảm Tuy nhiên, nếu áp suất tăng trên 350 bar thì kích thước tiểu phân giảm nhưng không đáng kế (p > 0,05) Ở khoảng áp suất 200 - 250 bar, kích thước tiểu phân đạt nhỏ nhất là 117 - 121 nm

Hiệu suất liposom hóa ở các mức áp suất khác nhau cũng cho kết quả không giống nhau Khi áp suất tăng cao, hiệu suất liposom hóa có xu thế giảm Tuy nhiên, nếu tiếp tục tăng áp suất trên 250 bar thi tỷ lệ

liposom hóa sẽ ổn định khoảng 15% Hiệu suất liposom hóa cao nhất ở áp suất 200 bar đạt 21,6%

3 Kết quả so sánh tạo thành liposom giữa 2 phương pháp

Điều chế liposom theo phương pháp SCRPE ở

600C; 200 bar và phương pháp của Bamhang

Bảng 2: Kết quả so sánh KTTP liposom theo hai

1 125,2 ±

21,7

189,8 ± 25,4

2 131,6 ± 197,1 ±

16,7 27,3

3 121,2 ±

21,7

207,2 ± 24,5

4 117,6 ±

14,8

195,8 ± 29,4

5 126,3 ±

17,1

214,1 ± 27,3

6 114,8 ±

34,5

221,2 ± 14,5

P1-2 < 0,05

* Kích thước tiểu phân liposom điều chế theo phương pháp SCRPE nhỏ hơn so với phương pháp Bangham Sự khác biệt này có nghĩa thống kê (p <

0,05) Khi kích thước tiểu phân nhỏ, liposom sẽ bền vững hơn các liposom có kích thước lớn

Bảng 3: Kết quả so sánh hiệu suất liposom hóa theo

ng arbutin tron

g

Hi

ệu suấ

t (%

)

Hà

m lượ

ng arbutin tron

g

liposom (µg/

mg)

liposo

m (µg/mg) (1) (2) (3) (4)

5,4

± 1,0

17,1

± 1,5

P1-3 <

0,05

P2-4 <

0,05

* Hiệu suất arbutin được liposom hóa trong phương

pháp SCRPE đạt 22,7%, trong khi phương pháp của Bangham chỉ đạt 5,4% Hàm lượng arbutin trong liposom điều chế theo phương pháp SCRPE đạt cao hơn so với phương pháp Bangham (p < 0,05)

4 Độ ổn định của liposom

Liposom sau khi được điều chế, bảo quản ở nhiệt

độ phũng, theo dừi độ ổn định trong vũng 30 ngày Quan sỏt sự tỏch lớp của liposom

Bảng 4: Kết quả độ ổn định của liposom điều

chế theo 2 ph-ơng pháp

độ ổn định

khi điều chế

Sau

6 giờ

Sau

14 ngày

Sau

30 ngày

SCRPE

Ghi chú: (-): không tách lớp; (+) tách lớp không rõ ràng; (++) tách lớp rõ ràng

* Sau 6 giờ, liposom điều chế theo phương phỏp

của Bangham đó tỏch lớp, trong khi đú liposom sản xuất theo phương phỏp SCRPE sau 30 ngày mới thấy

cú hiện tượng tỏch lớp, nhưng mức độ chưa rừ ràng Nguyờn nhõn do liposom sản xuất theo phương phỏp của Bangham cú kớch thước tiểu phõn lớn hơn, tỉ trọng cao nờn tốc độ lắng nhanh hơn so với liposom điều chế theo phương phỏp SCRPE

BÀN LUẬN

Arbutin chế tạo dưới dạng liposom để cải thiện tớnh thấm qua da và phỏt huy tốt hơn hiệu quả gõy

trắng da Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng phương pháp bốc hơi dung môi siêu tới hạn đảo pha điều chế liposom, phương pháp nµy có ưu điểm là không sử dụng dung môi hữu cơ độc hại Kết quả cho thấy liposom sản xuất theo phương pháp này có kích thước nhỏ và hiệu suất dược chất được liposom hóa cao hơn so với phương pháp truyền thống Vì vậy, độ

ổn định của liposom cũng kéo dài hơn Trong phương pháp SCRPE các yếu tố ảnh hưởng bao gồm: nhiệt

độ, áp suất tới hạn và tỷ trọng của CO2 Kết quả khảo sát cho thấy áp suất thích hợp nhất cho điều chế liposom là 200 bar

KẾT LUẬN

Đã điều chế được liposom chứa arbutin từ lecitin bằng phương pháp SCRPE Liposom có kích thước khoảng 120 nm với hiệu suất liposom hoá đạt khoảng 23% Áp suất phù hợp cho quá trình liposom hóa là

200 bar Hàm lượng arbutin trong liposom là 28,2% Liposom bảo quản ở nhiệt độ phòng sau 30 ngày mới xuất hiện hiÖn tượng sa lắng

Tµi liÖu tham kh¶o

1 Võ Xuân Minh Các dạng bào chế hiện đại, Nhà

36, N05, pp 299-304

4 Ai Heu Wen, Min Koo Choi, Dea Duk Kim

Formulation of liposome for topical delivery of

arbutin Arch Pharm Res, 2006, Vol 29, No12, pp 1187-1192