KIỂM NGHIỆM DƯỢC PHẨM - PHẦN 6 potx

Chơng Độ ổn định tuổi thọ thuốc Mục tiêu học tập Trình bày đợc mục tiêu tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định thuốc Giải thích đợc nguyên tắc xác định độ ổn định cách tính tuổi thọ thuốc Một yêu cầu quan trọng thuốc phòng chữa bệnh độ ổn định chất lợng suốt trình bảo quản từ xuất xởng đến hết hạn dùng Độ ổn định thuốc liên quan đến trình sản xuất, phân phối bảo quản thuốc Khi nghiên cứu triển khai thuốc hoàn thiện nâng cao hiệu lực thuốc đà đợc xử dụng lâm sàng, nhà sản xuất cần đánh giá độ ổn định thuốc điều kiện bảo quản xác định, từ tính tuổi thọ Ngời phân phối, lu giữ thuốc phải trì đợc điều kiện bảo quản thuốc đà qui định để đảm bảo hạn dùng thuốc Việc nghiên cứu độ ổn định thuốc trình hoàn thiện phơng pháp gần đây, Tổ chức Y tế giới (WHO) có văn thức hớng dẫn nghiên cứu độ ổn định thuốc Dợc điển số nớc đà có chuyên luận vấn đề 6.1 Quá trình phát triển nghiên cứu độ ổn định Ngời ta đà có ghi nhận ban đầu liên quan đến độ bền vững cđa thc Mét sè chÕ phÈm khã b¶o qu¶n , dƠ ph©n hđy nh− aspirin, procain, mét sè vitamin nh− A, C Ngợc lại, số chế phẩm khác lại bền vững nh sulfonamid Từ khái niệm độ ổn định thuốc đợc hình thành Năm 1948, tạp chí Công nghệ Dợc Mỹ phẩm Mỹ đăng kết nghiên cứu lý thú vitamin A: bảo quản vitamin A tuần lễ 420C cho lợng vitamin bị phân huỷ tơng đơng nh bảo quản hai năm nhiệt độ phòng Kết nghiên cứu đà gợi ý cách đánh giá độ ổn định E.R Garrett (1955) gọi phơng pháp thử nghiệm cấp tèc Cịng thêi gian nµy ng−êi ta tiÕn hµnh phép thử độ ổn định thuốc (gang - testing): Một năm ngời ta lấy mẫu ngẫu nhiên nhà thuốc chế phẩm đó, tiến hành định lợng hoạt chất, đánh giá suy giảm hàm lợng Trên sở kết nghiên cứu, nhà bào chế Mỹ đà khuyến cáo chế phẩm thuốc cần: 171 Ghi hạn sử dụng nhÃn thuốc, Đạt tiêu chuẩn dợc điển thời gian lu hành Đầu năm 70 Mỹ, ngời ta đà thực chơng trình nghiên cứu độ ổn định thuốc, có đánh giá thống kê xử lý số liệu Đến năm 1975 Dợc điển Mỹ có đa hạn dùng thuốc Tuy nhiên Dợc điển cha qui định phơng pháp xác định hạn dùng MÃi đến năm 1984, quan quản lý thuốc thực phẩm Mỹ (FDA) có văn thử độ ổn định thuốc Văn đợc bổ sung lần xuất thứ hai (1987) hoàn chỉnh lần xuất thứ ba (1994) Năm 1993 Hội nghị Quốc tế bàn hội nhập đà cho xuất tài liệu hớng dẫn chi tiết thử độ ổn định thuốc (Harmonized Tripative Guideline, Geneva) Văn hớng dẫn FDA xuất năm 1994 có nội dung tơng tự với văn hoà nhập 1993 Năm 1994, WHO xuất lần đầu tài liệu hớng dẫn nghiên cứu độ ổn định thuốc Tài liệu đợc bổ sung tái năm 1998 Một điều cần ghi nhận là: việc nghiên cứu độ ổn định thuốc ngày đợc đẩy mạnh thu đợc kết khả quan nhờ phơng pháp phân tích xác định hoạt chất tạp chất liên quan tạp chất phân huỷ có độ tin cậy cao trình sản xuất nh bảo quản lu thông thuốc Bớc đột phá xử dụng quang phổ UV-VIS để định lợng hoạt chất sắc ký lớp mỏng để phát tạp chất phân hủy Tiếp đến máy sắc ký khí máy sắc ký lỏng đời đà giúp nhà phân tích xác định đợc lợng chất dới ppm, phân tích định lợng đợc nhiều thành phần hỗn hợp, loại hình phân tích hay gặp nghiên cứu độ ổn định thuốc Gần việc áp dụng phơng pháp phân tích đại nh: nhiễu xạ tia X, nhiệt vi phân, đà tạo nhiều thuận lợi nghiên cứu độ ổn định Nội dung chơng đợc biên soạn dựa chủ yếu vào tài liệu hớng dẫn WHO năm 1998, có tham khảo thêm số Dợc điển vài tài liệu khác 6.2 Đại cơng độ ổn định thuốc 6.2.1 Định nghĩa Theo WHO, độ ổn định thuốc khả nguyên liệu chế phẩm đợc bảo quản điều kiện xác định giữ đợc đặc tính vốn có hoá lý, vi sinh, sinh dợc học giới hạn định Độ ổn định thuốc phụ thuộc vào nhiều yếu tố Có thể phân chia yếu tố hai nhóm: Các yếu tố liên quan đến môi trờng nh: nhiệt độ, độ ẩm, độ chiếu sáng, hàm lợng oxy yếu tố bên khác tác động lên thuốc Các yếu tố liên quan đến thuốc Đó là: 172 Tính chất lý hóa hoạt chất tá dợc đợc dùng để bào bào chế thuốc Ví dụ: dạng tinh thể, hàm lợng nớc, tạp chất nguyên liệu Dạng bào chế thuốc, Qui trình sản xuất thuốc Nguyên liệu cho đồ đựng, bao bì, đóng gói Nh độ ổn định thuốc phụ thuộc chủ yếu vào đặc điểm nguyên liệu, qui trình sản xuất điều kiện môi trờng Việc đa vào công thức bào chế chất làm tăng độ ổn định thuốc đợc chấp nhận trờng hợp hữu hạn phải đợc chứng minh mặt khoa học thực tế 6.2.2 Một số thuật ngữ liên quan Các tài liệu hớng dẫn nghiên cứu độ ổn định thuốc đề cập đến nhiều khái niệm thuật ngữ tóm tắt số thuật ngữ chính: Các phép thử độ ổn định (stability testings) Đó tập hợp phép thử đợc thiết kế nhằm thu đợc thông tin độ ổn định chế phẩm Trên sở định tuổi thọ, hạn dùng điều kiện đóng gói bảo quản xác định Phép thử độ ổn định dài hạn (long term (real time) stability testing) Đó nghiên cứu thực nghiệm đánh giá thay đổi tính chất hóa lý, sinh học, sinh dợc học chế phẩm thuốc trình bảo quản điều kiện xác định Trên sở kết nghiên cứu xác định hạn dùng khuyến cáo điều kiện bảo quản Phép thử độ ổn định cấp tốc (accelerated stability testing) Đây nghiên cứu thực nghiệm đợc bố trí để làm tăng tốc độ phân hủy hóa học thay đổi trạng thái vật lý cđa thc nhê sù thay ®ỉi cđa nhiƯt ®é, ®é ẩm, độ chiếu sáng, Thờng nghiên cứu đợc tiến hành nhiệt độ cao 35 400C, có tới 50 0C, độ ẩm tơng đối 80 - 90% Lô sản xuất (batch N0) Đó lợng xác định sản phẩm đợc sản xuất theo qui trình đợc coi đồng Trong trờng hợp sản xuất liên tục, lô tơng ứng với phần định trình sản xuất đợc đặc trng tính đồng sản phẩm Hạn dùng thuốc (expiration date) Đây thời điểm hết hạn xử dụng thuốc, có nghĩa sau thời điểm chế phẩm thuốc không giữ đợc tính chất nh đà đăng ký tiêu chuẩn chất lợng Hạn dùng đợc xác định theo lô sản xuất Hạn sản xuất (manufacture date) Đây thời điểm kết thúc trình sản xuất lô thuốc Hạn đợc ghi thành tháng năm cho lô sản phẩm Có thể tính hạn sản xuất thời 173 điểm thuốc đợc đa vào lu thông với điều kiện khoảng thời gian thời điểm bắt đầu sản xuất thời điểm đa vào lu thông không vợt 1/ 20 thời hạn bảo quản Thời hạn bảo quản (expiration dating period) Đó khoảng thời gian bảo quản thuốc điều kiện xác định mà thuốc giữ đợc tính chất đà đăng ký tiêu chuẩn chất lợng Dựa vào thời hạn bảo quản hạn sản xuất để tính hạn dïng cđa thc Ng−êi ta cịng dïng ti thä (shelf life) thuốc đồng nghĩa với thời hạn bảo quản thuốc Điều kiện bảo quản chuẩn hóa (controlled storage condition) Đó điều kiện bảo quản kho thoáng khí, nhiệt độ khoảng 15 - 250C Tuỳ vùng khí hậu nhiệt độ lên tới 300C Trong kho mùi lạ, chất ô nhiễm, ánh sáng trực tiếp chiếu vào Nhiệt độ động học trung bình - NĐT (mean kinetic temperature) Đây trị số nhiệt độ trung bình đợc tính toán cho vùng khí hậu dựa phân bố nhiệt độ theo thời gian NĐT đợc dùng để đánh giá tác động nhiệt độ lên động học trình phân huỷ hóa học làm giảm độ ổn định thuốc Trị số NĐT thờng lớn trị số trung bình số học 6.2.3 Mục tiêu đánh giá độ ổn định Theo hớng dẫn WHO, nghiên cứu độ ổn định thuốc nhằm mục tiêu (bảng 6.1) Giai đoạn phát triển sản phẩm giai đoạn này, phép thử cấp tốc đợc thực nhằm lựa chọn công thức bào chế thuốc, qui trình sản xuất đồ bao gói thích hợp Sau có sản phẩm nhà sản xuất tiếp tục dùng thử nghiệm cấp tốc để dự báo độ ổn định, sơ đánh giá tuổi thọ điều kiện bảo quản đà định Mặt khác thử nghiệm dài hạn bắt đầu đợc triển khai để phục vụ cho giai đoạn Bảng 6.1 Bốn mục tiêu cho nghiên cứu độ ổn định Phơng pháp nghiên cứu Giai đoạn áp dụng TT Mục tiêu Xây dựng công thức, kỹ thuật pha chế bao gói Thử nghiệm cấp tốc Phát triển sản phẩm Xác định tuổi thọ điều kiện bảo quản Thử cấp tốc dài hạn Phát triển sản phẩm lập hồ sơ đăng ký Khẳng định thực nghiệm tuổi thọ thuốc Thử dài hạn Lập hồ sơ đăng ký Thẩm định độ ổn định liên quan đến công thức qui trình sản xuât Thử cấp tốc dài hạn Thuốc lu hành thị trờng 174 Giai đoạn lập hồ sơ đăng ký Trên sở kết thực nghiệm cấp tốc dài hạn, nhà sản xuất xác định tuổi thọ hạn dùng thuốc điều kiện bảo quản bao gói thích hợp Các thông tin đợc ghi rõ nhÃn thuốc đồ bao gói Nhà sản xuất đệ trình với quan quản lý thuốc toàn hồ sơ khác xin phép lu hành thuốc thị trờng Giai đoạn thuốc lu hành thị trờng Khi thuốc đà lu hành thị trờng, nhà sản xuất tiếp tục theo dõi độ ổn định để khẳng định tuổi thọ thuốc điều kiện bảo quản đà đề xuất Để bảo đảm an toàn chất lợng thuốc lu hành thị trờng, quan quản lý theo dõi độ ổn định thuốc thông qua việc tra, kiểm tra qui trình sản xt, lÊy mÉu thc kiĨm nghiƯm §èi víi mét chÕ phẩm đà đợc cấp phép lu hành, có thay đổi công thức, qui trình sản xuất qui cách đóng gói, nhà sản xuất phải nghiên cứu bổ sung độ ổn định báo cáo với quan quản lý thuốc 6.2.4 Tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định Có tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định thuốc Độ ổn định hóa học Các tính chất hóa học (thành phần định tính định lợng) (các) hoạt chất có mặt chÕ phÈm n»m mét giíi h¹n cho phÐp theo tiêu chuẩn chất lợng Độ ổn định vật lý Các đặc điểm vật lý nguyên liệu làm thuốc nh: màu sắc, trạng thái tinh thể, độ tan, điểm chảy không thay đổi Các đặc điểm chế phẩm nh màu sắc, độ cứng, độ rÃ, độ hoà tan dao động khoảng giới hạn cho phép tiêu chuẩn chất lợng Độ ổn định vi sinh Độ vô trùng giới hạn nhiễm khuẩn chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu tiêu chuẩn Nếu chế phẩm có chứa chất kháng khuẩn hàm lợng không vợt giới hạn cho phép Độ ổn định điều trị Tác dụng điều trị chế phẩm không thay đổi Độ ổn định độc tính Độc tính chế phẩm không đợc tăng lên suốt trình bảo quản lu hành thị trờng 175 6.2.5 Phân vùng khí hậu Tuổi thọ cđa thc phơ thc vµo vïng khÝ hËu mµ thc lu hành Để nghiên cứu độ ổn định ngời ta chia thÕ giíi vïng khÝ hËu: − Vïng 1: Khí hậu ôn hoà Đó nớc bắc ¢u, Anh, Canada, Nga − Vïng 2: KhÝ hËu ¸ nhiƯt ®íi cã thĨ cã ®é Èm cao nh− Mü, Nhật bản, nớc nam Âu (Hy lạp, Bồ Đào Nha) − Vïng 3: KhÝ hËu nãng kh« nh− Iran, Irac, Sudan − Vïng 4: KhÝ hËu nãng Èm §ã số nớc nam Mỹ (Brazil, Nicaragua, ), Đông nam (Việt Nam, Philippin, Indonesia, ) Bảng 6.2 tóm tắt giá trị trung bình bốn thông số vùng khí hậu Bảng 6.3 cho ta điều kiện bảo quản chế phẩm nghiên cứu độ ổn định dài hạn Điều lu ý thông số nhiệt độ đợc chọn tối thiểu 210C vùng có nhiệt độ thấp trị số Bảng 6.2 Nhiệt ®é vµ ®é Èm cđa vïng khÝ hËu Vïng Trị số đo đợc trời Trị số đo đợc kho Nhiệt độ (0C) Độ ẩm (%) Nhiệt ®é (0C) §é Èm (%) 10,9 75 18,7 45 17,0 70 21,1 52 24,4 39 26,0 54 26,5 77 28,4 70 Bảng 6.3 Thông số khí hậu tính toán điều kiện bảo quản cho thử dài hạn Vùng Thông số khí hậu tính toán Điều kiện bảo quản Nhiệt độ NĐT Độ ẩm ** m bar * Nhiệt độ Độ ẩm ** 20,0 20,0 42 9,9 21 45 21,5 22,0 52 13,5 25 60 26,4 27,9 35 11,9 30 35 26,7 27,4 76 26,6 30 70 * áp suất nớc riêng phần khí ** Độ ẩm tơng đối tính % WHO khuyến cáo nhà sản xuất: Nếu chế phẩm đợc lu hành vùng nên nghiên cứu độ ổn định điều kiện bảo quản vùng Nếu chế phẩm đợc lu hành vùng vùng nên nghiên cứu độ ổn định điều kiện bảo quản vùng 176 Cần lu ý với số chế phẩm việc nghiên cứu độ ổn định phải đợc tiến hành nhiệt độ dới 00C, điều kiện lạnh (+20C đến 80C) Với số khác phải xem xét tác động ánh sáng 6.3 Động hóa học dung dịch Dới tác động điều kiện bên ngoài, nguyên liệu chế phẩm dẫn đến bị phân huỷ, hàm lợng hoạt chất giảm dần theo thời gian Quá trình phân huỷ động học phức tạp, vì: Nhiều yếu tố tác động đồng thời, Nhiều loại tơng tác diễn ra: tơng tác vật lý, phản ứng hóa học, trình sinh học, Chế phẩm tồn nhiều dạng khác nhau: dung dịch nớc, dung dịch dầu, nhũ dịch, hỗn dịch, bột rắn, Chế phẩm thờng có nhiều thành phần: nhiều hoạt chất, loại tá dợc Chính độ ổn định thuốc không đồng nghĩa với động hóa học Trong trình b¶o qu¶n cã thĨ cã mét sè ph¶n øng hãa học phân huỷ dợc chất đợc mô tả phơng pháp động hóa học Vì trớc nghiên cứu độ ổn định thuốc ôn tập vài vấn đề động hóa học dung dịch 6.3.1 Bậc phản ứng Tốc độ phản ứng đợc xác định ba thông số: Nồng độ chất phản ứng, Nhiệt độ xảy phản ứng, Sự có mặt chất xúc tác, Cho phản ứng: A+B P (6.1) Tốc độ v phản ứng đợc xác định theo định luật Van’t Hoff: v= dC = −k( m + n ) [ A]m [ B]n dt (6.2) C nồng độ chất nghiên cứu, móc vuông nồng ®é cđa A vµ B, k lµ h»ng sè tèc ®é (®éc lËp víi nång ®é C), n vµ m bậc riêng A B tơng ứng, n + m = p bậc tổng cộng phản ứng 177 Trong nghiên cứu độ ổn định ngời ta quan tâm đến bậc tổng cộng p Nó bậc không, bậc bậc hai 6.3.1.1 Phản øng bËc kh«ng v = dC = −k dt (6.3) Phơng trình tốc độ cho phản ứng bậc không Tích phân phơng trình ta đợc C = C0 k t (6.4) hc C0 (1 − a) = k0 ta (6.5) a phân số mol lại thời điểm ta thời điểm t1/ , tøc lµ Ct = 0,5C0 ta cã t t 1/2 = C0 2k (6.6) Thêi gian b¸n huỷ t1/2 phụ thuộc vào nồng độ ban đầu C0 Thứ nguyên số k mol/ đơn vị t Trong thực tế có phản ứng động hóa học bậc không 6.3.1.2 Phản ứng bậc dC dt = − k 1C ( ) Tèc độ phản ứng phụ thuộc vào nồng độ ln C = − k 1t C ( ) Dạng tích phân ln a = k t a ( ) Phân số mol a lại thời điểm ta Trong nghiên cứu động học phân huỷ thuốc bậc ngời ta lu tâm thêm thời điểm t0,9 Đó thời điểm mà tỷ số [C/ C0] = 0,9 kt1/2 = - 0,693 (6.10) kt0,9 = -0,105 (6.11) Thứ nguyên số k t -1 178 Khi nghiên cứu độ ổn định cần kiểm tra nồng độ hoạt chất tạp chất phân huỷ Nếu hệ có tạp chất phân hủy, việc xác định tỷ số C/ Co đơn giản Ngời ta xác định nồng độ hoạt chất tạp chất thời điểm t để tính số tốc độ Vấn đề trở nên phức tạp hệ tạo hai hay nhiều sản phẩm phân huỷ Hai trờng hợp sau gặp thực tế nghiên cứu độ ổn định Phản ứng bậc Có trờng hợp phản ứng phân huỷ ban đầu không ổn định Ta có sơ ®å ph¶n øng sau: A B k1 C (6.12) k2 Nếu ba chất hệ đợc xác định ë mäi thêi ®iĨm tỉng sè mol cđa ba chÊt số mol ban đầu A Các phản ứng diƠn theo qui lt ®éng häc bËc nhÊt, ta có phơng trình tốc độ: d[ A ] = − k 1[ A ] dt ( 13 ) d[ B ] = − k [ B ] + k 1[ A ] dt ( 14 ) d[C ] = k [B ] dt ( 15 ) Giải phơng trình vi phân nµy ta cã [A] = A0 exp(−k1t) [B] = A0 [k1/ (k2 − k1)][exp(−k1t) − exp(−k2t)] (6.16) (6.17) ⎤ ⎡ k2 k1 [ C ] = A ⎢1 − exp( − k t ) + exp( − k t ) ⎥ k − k1 k − k1 ⎦ ⎣ ( 18 ) A0 nồng độ mol ban đầu A Để tính C, nhiỊu tr−êng hỵp ng−êi ta tÝnh [C] ë thời điểm theo phơng trình [C] = A0 [A] [B] (6.19) Bảng 6.4 minh hoạ quang phân cefotaxim hai phản ứng bậc (Lerner 1988) 179 Bảng 6.4 Quang phân Cefotaxim Thêi gian (giê) Cefotaxim A (% mol) B (% mol) C (hiÖu sè) 0,00 100 0 0,25 82 10 0,50 70 15 15 0,75 55 18 27 1,00 43 19 38 1,50 28 18 54 2,00 20 15 65 3,00 10 10 80 4,00 5 90 Cét C cuối tính theo phơng trình (6.19) Phản ứng bậc song song Nếu A phân huỷ tạo hai sản phẩm đồng thời B C A B A k1 C (6.20) k2 Phơng trình tốc ®é cã d¹ng: d[A]/ dt = −k1[A] − k2[A] (6.21) ln[A/ A0] = −(k1 + k2)t (6.22) ë thêi ®iĨm tỷ lệ hai sản phẩm tạo thành B C không đổi [B] / [C] = k1/ k2 (6.23) Trong thực tế phản ứng song song diễn không đồng thời Trong dung dịch nớc muối Cefotaxim natri phân huỷ theo sơ đồ sau: Cefotaxim Lacton k2 Cefotaxim k3 sản phẩm cuối k1 180 sản phẩm cuối Kết nghiên cứu (Fabre 1984) ví dụ minh hoạ phức tạp nghiên cứu động học phân huỷ thuèc 6.3.1.3 Ph¶n øng bËc hai Cho ph¶n øng A + B C (6 24) Tốc độ phản ứng v = −d[A]/ dt = − k2[A][B] (6 25) NÕu nång độ ban đầu A B a b, lợng C tạo thành thời điểm t x th× − dx/ dt = −k2(a − x)(b − x) (6 26) dới dạng tích phân: ( a − b ) k t = ln (a − b)k t = ln b(a − x ) a (b − x ) ( 27 ) b a−x + ln bx a Rõ ràng thứ nguyên k2 (thời gian x nồng độ)-1 Nếu phản ứng diễn a>>b, lợng A tham gia phản ứng coi nh không đáng kể so với lợng ban đầu nên [A] coi nh không đổi phơng trình (6.25) có d¹ng v = −k2[A][B] = −k2’[B] (6 28) Trong tr−êng hợp này, ta gọi phản ứng bậc giả 6.3.2 ảnh hởng nhiệt độ Hằng số k phơng trình động học phụ thuộc vào nhiệt độ Khi nhiệt độ tăng, số k tăng theo Kết thực nghiệm cho thấy: nhiệt độ tăng lên 100C số tốc độ k tăng lên xấp xỉ lần Định luật Arrhenius Năm 1889 Arrhenius đà nhận thấy kết thực nghiệm đợc biểu diễn b»ng hÖ thøc kinh nghiÖm: ln k = C1 − C2/ T (6.29) 181 C1 vµ C2 lµ hai h»ng số C2 luôn dơng Phơng trình (6.29) giống phơng trình Vant Hoff dới dạng tích phân: ln k = C H0/ (RT) (6.30) H0 đại lợng không phụ thuộc vào nhiệt độ Đặt C2 = E0/ R, viết phơng trình Arrherius dới dạng ln k = C1 E0/ (RT) (6.31) E0 lợng hoạt hóa đợc xác định cách vẽ đồ thị ln k theo 1/T (T 0K = 0C + 273,15) Có thể viết phơng trình (6.31) dới dạng hµm sè mị k = A exp(−E0/ RT) (6 32) ln A = C1 6.4 Xác định độ ổn định thuốc Khi đánh giá độ ổn định cần xem xét đến yếu tố: Tính chất đặc điểm dợc chất chế phẩm, Vïng khÝ hËu cho thc l−u hµnh, − Tµi liƯu đà công bố liên quan đến độ ổn định thuốc cần nghiên cứu Những yếu tố định số mẫu thử, thời gian tần số thử nghiệm 6.4.1 Lấy mẫu Với dợc chất tơng đối ổn định, cần lấy hai mẫu hai lô sản xuất khác Nếu dợc chất bền có tài liệu đà công bố, cần lấy ba mẫu ba lô khác Các mẫu cần lấy đại diện cho qui trình sản xuất Đối với nghiên cứu độ ổn định cách liên tục qui mô công nghiệp việc lấy mẫu lô đợc tiến hành theo chơng trình đà định trớc, ví dụ: Với công thức ổn định, hai năm lấy mẫu lô Trong trờng hợp ngợc lại, năm lấy mẫu lô 182 Đối với công thức đà nghiên cứu xong độ ổn định, thờng đến năm kiểm tra lại độ ổn định lần 6.4.2 Phơng pháp thử cấp tốc Điều kiện thử Bảng 6.5 tóm tắt điều kiện thử cho vùng II vùng IV Bảng 6.5 §iỊu kiƯn thư cÊp tèc Vïng NhiƯt ®é (0C) §é Èm (%) Thêi gian thư (th¸ng) II 40 ± 75 ± IV 40 ± 75 ± Với chế phẩm có hoạt chất bền, có tài liệu nghiên cứu đợc công bố, thời gian thử kéo dài tháng so với qui định Ngời nghiên cứu lựa chọn nhiệt độ cao thời gian ngắn hơn, ví dụ 45 đến 500C tháng với độ ẩm 75% Nếu trình nghiên cứu, chế phẩm có thay đổi quan trọng cần thực phép thử nghiệm bổ sung điều kiện ôn hoà hơn, ví dụ 30 20C, độ ẩm (60 ± 5)% Nh÷ng dÊu hiƯu chøng tá cã sù thay đổi quan trọng là: Giảm hàm lợng hoạt chất từ 5% trở lên so với trị số ban đầu Có sản phẩm phân huỷ với lợng cao trị số cho phép pH nằm giới hạn qui định Tốc độ hoà tan 12 viên nén viên nang thấp giá trị tiêu chuẩn Thay đổi đặc tính vật lý thuốc nh: biến màu, tách pha, khó rÃ, Việc thử cấp tốc thờng đợc tiến hành buồng vi khí hậu kiểm soát đợc nhiệt độ ( 20C) độ ẩm ( 5%) Một số chế phẩm không thÝch hỵp víi thư nghiƯm cÊp tèc nh−: chÕ phÈm sinh học, thuốc đạn, thuốc trứng, Ví dụ: Nghiên cứu chế phẩm có hàm lợng theo công thøc lµ 100 mg Thư cÊp tèc thêi gian tháng ba nhiệt độ 350C, 450C 550C Kết có bảng 6.6 Tính số tốc độ tuổi thọ thuốc bảo quản 300C 183 Bảng 6.6 Sự thay đổi hàm lợng (mg) chế phẩm Hàm lợng Hàm lợng Thời gian 350C ë 450C Thêi gian ë 550C (th¸ng) (th¸ng) 105 105 105 103 102 102 102 100 99 101 97 97 99 94 94 91 Giải: Vẽ đồ thị lnCt − t(th¸ng) TÝnh håi qui bËc nhÊt, ta cã h»ng sè tèc ®é: - ë 350C: k35 = 0,00623 th¸ng -1 (r = 0,993) - ë 450C: k45 = 0,0123 th¸ng -1 (r = 0,997) - ë 550C: k55 = 0,0280 tháng -1 (r = 0,997) Để tính tuổi thọ nhiệt độ 300C cần tính k30 Vẽ đồ thị lnk 1/T (0K) theo phơng trình (6 31) NhiƯt ®é (0 C) k ln k (1/ T) 1000 35 0,0062 − 5,083 3,246 45 0,0123 − 4,398 3,145 55 0,0280 − 3,576 3,049 − TÝnh håi qui bËc nhÊt ln k = C1 − E0/ RT = 19,7 − 7642 / T − TÝnh h»ng sè k30 theo phơng trình (6.32) ln k30 = 19,7 7642 / (30 + 273,15) = − 5,52 k 30 = 0,00411 184 Tuổi thọ thuốc khoảng thời gian để hoạt chất lại 90% so với trị số ban đầu (phơng trình 6.11), nên: t 0,9 = 0,105/ k30 = 25,5 tháng Đây ví dụ thử độ ổn định cấp tốc để dự báo tuổi thọ thuốc Trị số cần đợc khẳng định phơng pháp thử dài hạn 6.4.3 Phơng pháp thử dài hạn Theo hớng dẫn WHO điều kiện thực nghiệm phơng pháp thử dài hạn phải gần với điều kiện bảo quản thực tế thuốc, tức vùng khí hậu mà thuốc dự kiến đợc lu hành (bảng 6.3) Tuy nhiên số tác giả đề xuất điều kiện thử dài hạn nhiệt độ 25 20C, độ ẩm tơng đối 60 5% Nghiên cứu độ ổn định dài hạn cần đợc tiến hành suốt thời hạn bảo quản thuốc Thời gian kiểm tra hàm lợng mẫu: Năm đầu thời điểm 0, 12 tháng, Từ năm thứ 2: lần cho năm Với công thức ổn định cần kiểm tra hai lần: lần đầu sau năm; lần thứ cuối hạn dùng Với chế phẩm ổn định, số lần kiểm tra nhiều hơn: Năm thứ nhất: tháng/ lần Năm thứ 2: tháng/ lần Từ năm thứ 3: 12 tháng/ lần Đối với chế phẩm có yêu cầu bảo quản đặc biệt nh: chế phẩm vaccin, hormon, thuốc có hoạt chất không ổn định, ngời nghiên cứu cần chọn điều kiện thích hợp Kết thực nghiệm đợc chấp nhận nếu: Không có thay đổi tính chất vật lý, hóa học, sinh học Chế phẩm đáp ứng yêu cầu tiêu chuẩn Phơng pháp thử dài hạn nhiỊu thêi gian, nh−ng cho kÕt qu¶ tin cËy PhÐp thử giúp ngời nghiên cứu khẳng định tuổi thọ đà dự báo theo phép thử cấp tốc 6.4.4 Phơng pháp phân tích đánh giá kết Lựa chọn phơng pháp phân tích Việc lựa chọn phơng pháp định lợng hoạt chất (hoặc) tạp chất phân huỷ phụ thuộc vào: 185 Tính chất lý hóa hoạt chất, tạp chất, Hàm lợng chúng chế phẩm, Yêu cầu thử nghiệm Các phơng pháp phân tích cần đợc thẩm định: kiểm tra độ đúng, độ lặp lại, độ tái hiện, giới hạn định lợng Riêng phơng pháp xác định tạp chất liên quan, tạp chất phân huỷ cần đợc kiểm tra tính đặc hiệu độ nhạy Xử lý số liệu Số liệu nghiên cứu cần đợc xử lý thống kê để thu đợc thời hạn bảo quản tạm thời Thời hạn đợc ngoại suy sở thử ổn định cấp tốc Một thời hạn bảo quản tạm thời 24 tháng đợc chấp nhận khi: Hoạt chất đợc coi ổn định, Thử nghiệm cấp tốc thay ®ỉi râ rƯt, − Sè liƯu hiƯn cã chøng minh công thức tơng tự có thời hạn bảo quản 24 tháng Nhà sản xuất tiến hành thử độ ổn định dài hạn trình bảo quản đà đề xuất Sau đánh giá độ ổn định, nhà sản xuất cần ghi rõ điều kiện bảo quản nhÃn thuốc: Bảo quản ®iỊu kiƯn th−êng, − B¶o qu¶n kho¶ng + 20C đến 80C (tủ lạnh), Bảo quản dới 80C (tủ lạnh), Bảo quản khoảng 50C đến 200C (tủ đá), Bảo quản dới 180C (tủ đá) Điều kiện thờng theo WHO là: nhiệt độ 15 đến 250C, đến 300C, khô ráo, ánh sáng trực tiếp chiếu vào Điều kiện thờng đợc qui định theo quốc gia Điều lu ý lời giải nh: bảo quản nơi khô ráo, bảo quản tránh ánh sáng không đợc sử dụng nhằm mục đích che dấu ổn định thuốc 6.5 Các dợc chất bền vững Năm 1986 WHO thực đề tài :Nghiên cứu độ ổn định cấp tốc dợc chất thờng dùng điều kiện nhiệt đới Điều kiện thử cấp tốc: Bảo quản 30 ngày 500C, độ ẩm 100% Nếu dấu hiệu phân huỷ: tăng nhiệt độ lên 700C thời gian đến ngày 186 Kết cho thấy khoảng 100 dợc chất cần đợc lu ý độ ổn định: chúng đợc coi chất bền vững (bảng 6.7) Bảng 6.7 Các dợc chất bền vững TT Tên dợc chất TT Tên dợc chất Acid acetyl salicylic 50 Hexyl resorcinol Acid ascorbic 51 Hydralazin, HCl Acid undecylenic 52 Hydrocortizon (Na succinat) Aminophyllin 53 Hyoscyamin sulfat Amitryptilin, HCl 54 Lidocain, HCl Amoni clorid 55 Melarsoprol Amphotericin 56 Metrifonat Ampicillin (muèi natri) 57 Naloxon, HCl Ampicillin trihydrat 58 Natri calci edetat 10 Antimon tartrat 59 Natri lactat 11 B¹c nitrat 60 Natri nitrit 12 Bacitracin 61 Natri p aminosalicylat 13 Bacitracin (muèi kÏm) 62 Natri stibogluconat 14 Benzathin benzylpenicillin 63 Neomycin sulfat 15 Benzylpenicillin (muèi Na, K) 64 Nystatin 16 Bephenium hydronaphtoat 65 Orciprenalin sulfat 17 Calci gluconat 66 Oxytetracyclin, HCl 18 Calci p.aminosalicylat 67 Paromomycin sulfat 19 Carbenicillin (muèi Na) 68 Penicillamin 20 Cephalexin 69 Pethidin, HCl 21 Cloral hydrat 70 Phenobarbital (muèi Na) 22 Cloramphenicol (Na succinat) 71 Phenoxymethyl penicillin (muèi Na hc K) 23 Clorphenamin hydrogeno- maleat 72 Phentolamin mesilat 24 Clorpromazin, HCl 73 Phenyl butazon 25 Clortetracyclin, HCl 74 Pilocarpin, HCl 26 Cloxacillin (muèi Na) 75 Pilocarpin nitrat 27 Codein phosphat 76 Procain amid, HCl 28 Colecalciferol 77 Procain benzyl penicillin 187 TT Tên dợc chất TT Tên dợc chất 29 Dapson 78 Procain, HCl 30 Dexametason (d¹ng Na phosphat) 79 Procarbazin, HCl 31 Dicloxacillin (muèi Na) 80 Promazin, HCl 32 Dietyl carbamazin citrat) 81 Prometazin, HCl 33 Doxycylin hydrat 82 Pyridoxin , HCl 34 Ephedrin 83 Quinin, bisulfat 35 Ephedrin sulfat 84 Quinin, 2HCl 36 Epinephrin 85 Retinol (vitamin A) 37 Epinephrin hydro-geno tartrat 86 Salbutamol sulfat 38 Ergocalciferol 87 Sulfacetamid (muèi Na) 39 Ergometrin hydrogenotartrat 88 Sulfadiazin (muèi Na) 40 Ergotamin maleat 89 Sulfadimidin (muèi Na) 41 Ergotamin tartrat 90 Tetracain , HCl 42 Etho suximid 91 Tetracyclin, HCl 43 Ethyl morphin, HCl 92 Thiamin, HCl 44 Fe(II) sulffat 93 Thiamin mononitrat 45 Fluphenazin decanoat 94 Thiopental (muèi Na) 46 Fluphenazin, HCl 95 Thuỷ ngân oxyd vàng 47 Formaldehyd dung dÞch 96 Tolbutamid 48 Gentamycin sulfat 97 Warfarin (muối Na) 49 Guanethidin sulfat (dihydrogeno tài liệu tham khảo Bureau of Food & Drug (1998) Training course drug and cosmetic quality control, Filinvest Corporate city, Philippines Carstensen J.T (1995) Drug stability Principles & Practices, 2nd edition, Marcel Dekker Inc , USA 188 Didier R : Chimie minerale Technique et Documentation, Lavoisier, Ve edition, Paris Bản dịch tiếng Việt, tập II, NXB Giáo dục, Hà nội 1997 OMS (1998) Assurance de la qualitÐ des produits pharmaceutiques, Vol 1, GenÌve Skoog D A , West D M , Holler F J (1988) Fundamental of Analytical Chemistry, 5th edition, chapter 22, pp 578- 597 Saunders College Publishing câu hỏi tự lợng giá 6.1 Tại cần đặt vấn đề đánh giá độ ổn định thuốc 6.2 Giải thích yếu tố tác động đến độ ổn định thuốc 6.3 Phân tích phép thử độ ổn định dài hạn độ ổn định cấp tốc Tại cần tiến hành hai phép thử đó? 6.4 Những chế phẩm không thích hợp với phép thử cấp tốc? Tại sao? 6.5 Tại phải phân thành vïng khÝ hËu nghiªn cøu ti thä cđa thuốc Theo anh (chị) vùng khí hậu ảnh hởng nhiều đến độ ổn định thuốc? 6.6 Giải thích vai trò động hóa học đánh giá tuổi thọ thuốc 6.7 Trình bày nguyên tắc sử dụng phơng trình Arrhenius để tính tuổi thọ thuốc phơng pháp thử cấp tốc 6.8 Những phản ứng thờng xảy làm giảm độ ổn định thuốc? Cho ví dụ 6.9 Khi xác định tuổi thọ thuốc dựa vào số liệu hàm lợng hoạt chất, cần thẩm định: độ đúng, độ xác giới hạn định lợng Giải thích? 6.10 Giải thích lý xác định tạp chất liên quan, tạp chất phân hủy cần kiểm tra tính đặc hiệu độ nhạy phơng pháp thực nghiệm? 6.11 Đánh giá vai trò kỹ thuật phân tích nghiên cứu độ ổn định thuốc 6.12 Ngời ta đánh giá độ ổn định chế phẩm viên nén hàm lợng 200 mg phơng pháp lÃo hóa cấp tốc thời hạn tháng hai nhiệt độ 400C 600C Số liệu thực nghiệm đợc trình bày bảng sau: 189 Hàm lợng (%) 400C 600C 102,1 102,1 101,5 101,6 101,1 101,1 100,6 99,5 100,1 98,9 99,5 98,3 98,8 97,6 Thêi gian (th¸ng) H·y tÝnh ti thä cđa viªn nÐn 200 mg 190 ... 45 21,5 22,0 52 13,5 25 60 26, 4 27,9 35 11,9 30 35 26, 7 27,4 76 26, 6 30 70 * áp suất nớc riêng phần khí ** Độ ẩm tơng đối tính % WHO khuyến cáo nhà sản xuất: Nếu chế phẩm đợc lu hành vùng nên... t0,9 Đó thời điểm mà tỷ số [C/ C0] = 0,9 kt1/2 = - 0 ,69 3 (6. 10) kt0,9 = -0 ,105 (6. 11) Thø nguyªn số k t -1 178 Khi nghiên cứu độ ổn định cần kiểm tra nồng độ hoạt chất tạp chất phân huỷ Nếu hệ... qui bËc nhÊt, ta cã h»ng sè tèc ®é: - ë 350C: k35 = 0,0 062 3 th¸ng -1 (r = 0,993) - ë 450C: k45 = 0,0123 th¸ng -1 (r = 0,997) - ë 550C: k55 = 0,0280 th¸ng -1 (r = 0,997) Để tính tuổi thọ nhiệt