Nghiên cứu đặc điểm sinh học và công nghệ nhân giống, nuôi trồng nấm Sò vua (pleurotus eryngii) và nấm Vân chi (trametes versicolor) ở Việt Nam

Nghiên cứu đặc điểm sinh học và công nghệ nhân giống, nuôi trồng nấm Sò vua (pleurotus eryngii) và nấm Vân chi (trametes versicolor) ở Việt Nam BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ BÍCH THÙY NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NHÂN GIỐNG, NUÔI TRỒNG NẤM SÒ VUA (PLEUROTUS ERYNGII) VÀ NẤM VÂN CHI (TRAMETES VERSICOLOR) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành : Khoa học cây trồng Mã số : 62.62.01.10 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Hà Nội 2014

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT

VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

Công trình được hoàn thành tại:

VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

Người hướng dẫn khoa học:

Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Viện họp tại

Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam/ Viện (ghi rõ nơi bảo vệ luận

án cấp Viện)

Vào hồi giờ phút, ngày tháng năm

Có thể tìm hiểu luận án tại thư Viện:

1 Thư Viện Quốc gia

2 Thư Viện Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam

3 Thư Viện (ghi tên các thư Viện nộp luận án)

MỞ ĐẦU

1 Tính cấp thiết của đề tài

Nấm Sò vua (Pleurotus eryngii (DC.) Quél) là loại nấm ăn ngon, giá trị dinh dưỡng và dược học cao Quả thể nấm Sò vua có kích thước lớn, hình

dạng đẹp, do những ưu điểm này mà nấm được gọi là “King Oyster mushroom” Nấm Vân chi (Trametes versicolor (L.) Pilat) là một loại nấm

dược liệu có giá trị dược liệu rất cao, đã và đang được người tiêu dùng ở các nước như Trung quốc, Nhật bản, các nước Châu Âu, châu Mỹ… ưa chuộng Trong nấm Vân chi có chứa các hợp chất polysaccharid liên kết với protein, gồm hai loại chính: PSP (polysaccharide peptide) và PSK (polysaccharide krestin) PSP và PSK có tác dụng ức chế nhiều loại tế bào ung thư như các tế bào ung thư biểu mô (carcinoma), các tế bào ung thư máu (leukemia), ung thư dạ dày, ung thư đại tràng, ung thư vòm họng, ung thư phổi và ung thư vú (P.M.Kidd, 2000)

Cùng với sự phát triển của xã hội, nhu cầu về thực phẩm của người dân không những ngon mà phải giàu dinh dưỡng, an toàn và có giá trị tăng cường sức khỏe Hiện nay trên thị trường có nhiều các loại nấm ăn và nấm dược liệu được nhập khẩu từ Trung Quốc vào Việt Nam với số lượng hàng trăm tấn/năm, theo nhiều con đường khác nhau, nấm không có nguồn gốc xuất xứ, thời gian vận chuyển lâu, sử dụng chất bảo quản, do đó gây tâm

lý không tốt cho người tiêu dùng Hiện nay, các loại nấm ăn - nấm dược liệu nuôi trồng tại Việt Nam, đ c biệt là nấm Sò vua và nấm Vân chi đang được nhiều người tiêu dùng quan tâm

Sản xuất nấm ăn - nấm dược liệu ngày càng phát triển mạnh, các cơ

sở nhân giống và nuôi trồng nấm ở nước ta đều đang áp dụng công nghệ nhân giống truyền thống (thể rắn), nên còn tồn tại một số nhược điểm như:

tỷ lệ giống nhiễm bệnh khá cao, thời gian nuôi cấy một cấp giống kéo dài trung bình từ 10 - 25 ngày, thời gian từ khi cấy giống vào nguyên liệu nuôi trồng đến khi thu hái nấm thương phẩm dài trong vòng 2 tháng, dẫn đến giá thành giống nấm và nấm thương phẩm cao Trong khi đó việc nghiên cứu và sản xuất giống dịch thể trên thế giới đã đạt được một số thành tựu đáng kể Việc ứng dụng sản xuất giống dịch thể có hiệu quả rõ rệt so với giống thể rắn như rút ngắn thời gian sinh trưởng chỉ còn 3 - 5 ngày một cấp giống, độ thuần cao, chất lượng tốt, tỷ lệ nhiễm giảm, thích hợp cho sản xuất giống nấm và nuôi trồng nấm theo qui mô công nghiệp

Nhằm góp phần khắc phục những hạn chế trên, tạo điều kiện cho nấm ăn

- nấm dược liệu nói chung và nấm Sò vua - nấm Vân chi nói riêng phát triển

có hiệu quả, chúng tôi đã tiến hành đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm sinh học và công nghệ nhân giống, nuôi trồng nấm Sò vua (Pleurotus eryngii) và nấm Vân chi (Trametes versicolor) ở Việt Nam”

2 Mục tiêu của đề tài

Nghiên cứu một số đ c điểm sinh học của các giống nấm Sò Vua và nấm Vân chi để xác định được chủng nấm sinh trưởng phát triển tốt nhất trong điều kiện khí hậu Việt nam, đồng thời xây dựng công nghệ nhân giống các chủng nấm trên ở dạng dịch thể nhằm nâng cao hiệu quả trong sản xuất nấm ăn và nấm dược liệu

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

3.1 Ý nghĩa khoa học

Kết quả nghiên cứu của đề tài đã cung cấp các dẫn liệu khoa học về

các chỉ tiêu sinh trưởng cơ bản của giống nấm Sò vua (P eryngii) và giống nấm Vân chi (T versicolor), cũng như nhu cầu về dinh dưỡng và

điều kiện ngoại cảnh tối ưu cho sinh trưởng, phát triển của hai giống nấm trên trong nuôi cấy dịch thể Chỉ ra sự khác biệt di truyền của các chủng nấm hiện đang lưu giữ và mối tương quan với các đ c điểm sinh học trong nuôi cấy, đồng thời cung cấp những dẫn liệu quan sát dưới kính hiển vi điện tử

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

Kết quả nghiên cứu của đề tài đã giới thiệu cho sản xuất giống nấm

Sò vua (P eryngii) và giống nấm Vân chi (T.versicolor) thích hợp với điều

kiện nuôi trồng ở Việt Nam; đồng thời xây dựng được công nghệ nhân giống dạng dịch thể của hai chủng nấm trên, cải thiện khả năng sinh trưởng của giống, rút ngắn thời gian nuôi cấy, tăng năng suất nấm thương phẩm Công nghệ này có tính khả thi cao, có khả năng ứng dụng trong sản xuất nấm ở qui mô công nghiệp

3.3 Tính mới của luận án

Đã nghiên cứu các đ c trưng hình thái bào tử đảm, chỉ ra các đ c điểm sinh trưởng phát triển của hệ sợi và quả thể nấm; đồng thời đánh giá tính khác biệt di truyền giữa các chủng nấm Sò vua và nấm Vân chi Trên

cơ sở đó tuyển chọn được các giống nấm ăn và nấm dược liệu thích ứng với điều kiện sản xuất của Việt Nam

Xây dựng thành công quy trình nhân giống nấm Sò vua và nấm Vân chi dạng dịch thể (từ nhân giống cấp 1 → giống trung gian → giống thương phẩm và sử dụng để nuôi trồng); thay thế cho công nghệ truyền thống, rút ngắn thời gian nuôi cấy, tăng năng suất nấm, nâng cao hiệu quả

kinh tế

4 Bố cục của luận án

Nội dung chính của luận án được thể hiện trong 134 trang (không kể tài liệu tham khảo và phụ lục) Mở đầu: 4 trang; Chương 1: Tổng quan tài liệu: 36 trang; Chương 2: Vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu: 17 trang; Chương 3: Kết quả nghiên cứu và thảo luận: 75 trang; Kết luận và

đề nghị: 2 trang Luận án gồm có 26 bảng số liệu, 65 hình, 18 tài liệu tiếng Việt, 78 tài liệu tiếng Anh Phần phụ lục gồm có: Sơ đồ qui trình; Bảng tính toán hiệu quả kinh tế công nghệ nhân giống nấm dạng dịch thể so với công nghệ truyền thống; hình ảnh giống nấm và quả thể nấm ở một số thí nghiệm; kết quả phân tích thống kê và xử lý số liệu thí nghiệm và các nội dung có liên quan đến luận án

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Tình hình nghiên cứu và sản xuất nấm trên thế giới và ở Việt Nam 1.1.1 Tình hình nghiên cứu và sản xuất nấm trên thế giới

1.1.1.1 Tình hình nghiên cứu nhân giống nấm dịch thể và nuôi trồng nấm

Sò vua và nấm Vân chi

Nấm Sò vua và nấm Vân chi là loại nấm có giá trị dược học cao nên

được rất nhiều nước trên thế quan tâm nghiên cứu Các nhà khoa học trên thế giới đã đi sâu nghiên cứu khả năng sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi từ ảnh hưởng của nguồn dinh dưỡng bổ sung như nguồn cacbon, nguồn đạm, nguồn muối khoáng cũng như hàm lượng bổ sung tối ưu nhất của chúng Các tác giả cũng nghiên cứu ảnh hưởng của pH, nhiệt độ, dinh dưỡng đến sinh trưởng của hệ sợi nấm Sò vua và nấm Vân chi Nguyên liệu nuôi trồng và thành phần dinh dưỡng bổ sung, hàm lượng dinh dưỡng cũng đã được đề cập đến

Phương pháp lên men nuôi dưỡng tầng sâu (nhân giống dạng dịch thể) được ứng dụng để sản xuất nhiều loại giống nấm ăn và nấm dược liệu

(Liu, 2010; Diamantopoulou P, 2012; Jonathan, 2009)

Hiện nay công nghệ nhân giống nấm dịch thể đã phát triển ở nhiều nước trên thế giới, đã có nhiều công trình nghiên cứu đưa ra thành phần dinh dưỡng bổ sung tối ưu, tốc độ sục khí, ảnh hưởng cả pH môi trường đến sinh trưởng của hệ sợi, thuận lợi và khó khăn của việc nhân giống nấm dịch thể

1.1.1.2 Nghiên cứu về đa dạng di truyền của một số chủng nấm

1.1.1.3 Tình hình sản xuất nấm trên thế giới

1.1.2 Tình hình nghiên cứu và sản xuất nấm trong nước

1.1.2.1 Nghiên cứu về đa dạng di truyền của một số chủng nấm

Ở Việt Nam, kỹ thuật RAPD được áp dụng khá nhiều trong phân tích di truyền của thực vật Một số tác giả đã sử dụng kỹ thuật RAPD để phân tích đa dạng di truyền ở các đối tượng khác nhau nhưng nghiên cứu đa dạng di truyền trên đối tượng nấm ăn và nấm dược liệu thì chưa nhiều

1.1.2.2 Tình hình nghiên cứu và sản xuất nấm ở Việt Nam

Trong những năm gần đây có nhiều công trình nghiên cứu của các tác giả như Trịnh Tam Kiệt, Nguyễn Thị Chính, Phan Huy Dục, Lê Xuân Thám, Lê Thị Hoàng Yến … các tác giả tập chung vào nghiên cứu các lĩnh vực khác nhau trên nhiều đối tượng khác nhau Có một số công trình nghiên cứu về giống nấm dịch thể nhưng chủ yếu ở trong phòng thí nghiệm với mục đích tách chiết sinh khối, chưa có công trình nào ứng dụng trong lĩnh vực nuôi trồng

Trung tâm nghiên cứu phát triển Nấm và sản phẩm sinh học - Công

ty TNHH Nấm linh chi đã sản xuất thành công nhiều sản phẩm có tác dụng phòng chữa bệnh, tập chung sâu vào các công trình nghiên cứu khoa học để tạo ra các sản phẩm chức năng Cùng với việc nghiên cứu về tác dụng của nấm Vân chi, công ty cũng đã nghiên cứu qui trình sản xuất các sản phẩm từ nấm Vân chi, có 2 dạng sản phẩm chính từ nấm Vân chi đó là bột sinh khối sợi và quả thể nấm Vân chi Hiện tại, hàng năm công ty đã cung cấp cho thị trường khoảng 10 tấn sinh khối/năm và 2-3 tấn quả thể/năm Việc nuôi trồng nấm Vân chi đang chuyển giao cho nhiều cơ sở sản xuất, nguyên liệu sử dụng nuôi trồng là mùn cưa có bổ sung dinh dưỡng, nhiệt độ thích hợp nhất để quả thể nấm sinh trưởng phát triển tử 20

- 250C, quả thể sinh trưởng thích hợp nhất vào tháng 2 đến tháng 5 dương lịch (Nguyễn Thị Chính, 2011)

Một số loài nấm ăn mới du nhập vào Việt Nam, trong đó có nấm Sò vua, hiện nay sản phẩm nấm tươi trên thị trường chủ yếu nhập từ Trung Quốc Nấm Sò vua còn được gọi là nấm Đùi gà, hiện nay đã được Trung tâm Công nghệ Sinh học Thực vật nghiên cứu nuôi trồng theo phương pháp truyền thống, với công thức phối trộn nguyên liệu nuôi trồng bao gồm: 43% bông phế loại + 43% mùn cưa + 6% bột ngô + 7 % cám gạo + 1% CaCO3 Các công đoạn của nuôi trồng nấm Sò vua đựoc mô tả chi tiết:

sử dụng bao bì là túi nilon kích thước 19 x 33cm, trọng lượng bịch nguyên

liệu 0,8 kg/bịch Các tác giả cũng đã xác định điều kiện ngoại cảnh thích hợp để nuôi trồng nấm Sò vua: nhiệt độ từ 12 -150C; cường độ chiếu sáng

từ 800 - 1200 lux; độ ẩm không khí 85 - 95%; điều kiện thông thoáng tốt Kết quả nghiên cứu ghi nhận, với các điều kiện nuôi trồng như trên năng suất thực thu của nấm Sò vua đạt 35-40% (Đinh Xuân Linh và Cộng sự, 2012) Nói chung, một số nhà khoa học ở nước ta tập trung nghiên cứu sâu

về nấm ăn, đ c biệt là nấm dược liệu (nấm Linh chi, Vân chi, Nhộng trùng thảo…), hướng nghiên cứu đó được thực hiện nuôi cấy trong môi trường dịch thể nhưng chuyên sâu về công nghệ tách chiết sinh khối sợi để tạo sản phẩm chức năng; việc nuôi trồng nấm để thu quả thể chủ yếu được sử dụng nguồn giống thể rắn (giống hạt) cho nên thời gian nuôi trồng thường kéo dài hơn

1.2 Giới thiệu chung về nấm Sò vua và nấm Vân chi

Nấm Sò vua (tên tiếng anh là King oyster mushroom) có tên khoa

học là Pleurotus eryngii (DC Fr.) Đây là loài nấm ăn có giá trị dinh

dưỡng và dược học cao

Nấm Vân chi có tên khoa học là Trametes versicolor (L.Fr.) Pilat, tên

tiếng Anh là Yunzhi ho c Turkey tails Trước đây còn có các tên khoa học

khác như Coriolus versicolor, Polyporus versicolor Nấm Vân chi là loại

nấm dược liệu được sử dụng ở nhiều nước châu Á

Trong quá trình sinh trưởng, phát triển, nấm sò Vua và nấm Vân chi chịu ảnh hưởng của rất nhiều yếu tố Các tác nhân ảnh hưởng đến sự hình thành quả thể của nấm có thể chia làm 3 loại đó là: Các yếu tố ngoại cảnh như nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng, độ pH, nồng độ CO2 và tốc độ gió cũng như vai trò của vi sinh vật khác cùng chung sống trong hệ sinh thái; các chất dinh dưỡng cần thiết

1.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng của nấm Sò vua và nấm Vân chi

Trong quá trình sinh trưởng, phát triển, nấm Sò vua và nấm Vân chi chịu ảnh hưởng của rất nhiều yếu tố Các tác nhân ảnh hưởng đến sự hình thành quả thể của nấm có thể chia làm 3 loại: Các yếu tố ngoại cảnh như nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng, độ pH, nồng độ CO2 và tốc độ gió cũng như vai trò của vi sinh vật khác cùng chung sống trong hệ sinh thái; các chất dinh dưỡng cần thiết

1.4 Vai trò của nấm Sò vua và nấm Vân chi

Nấm Sò vua và nấm Vân chi là 2 loại nấm có giá trị dinh dưỡng và dược học cao Đ c biệt là nấm Vân chi là loại nấm được nhiều nhà khoa học trên thế giới đi sâu nghiên cứu về dược tính của nó, có nhiều bài báo

đã công bố tác dụng của nấm Vân chi như: điều trị ung thư, tác dụng

chống virus HIV, tác dụng tăng cường miễn dịch… Ngoài ra, việc trồng nấm Sò vua và nấm Vân chi đã góp phần vào việc tận thu các phụ phẩm từ nông nghiệp, góp phần bảo vệ môi trường

CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Vật liệu nghiên cứu

2.1.1 Giống nấm: Gồm 6 giống nấm Sò vua và 2 giống nấm Vân chi có

xuất xứ khác nhau, hiện đang lưu giữ tại Trung tâm Công nghệ Sinh học

Thực vật - Viện Di truyền Nông nghiệp

2.1.2 Vật tư hóa chất

* Vật tư sử dụng trong tách chiết ADN

- 23 mồi RAPD được sử dụng trong nghiên cứu đa dạng sinh học của nấm Sò vua, 10 mồi RAPD được sử dụng cho nấm Vân chi

* Các hóa chất sử dụng trong thí nghiệm nhân giống cấp 1 và giống cấp trung gian

+ Glucose, CNM, pepton, MgSO4.7H2O, KH2PO4, vitamin B1,… xuất

+ Một số nguyên liệu như thóc tẻ, cám gạo, rơm rạ, mùn cưa

2.1.3 Các điều kiện, trang thiết bị sử dụng trong thí nghiệm

2.2 Nội dung nghiên cứu

2.2.1 Một số đặc tính sinh học của nấm Sò vua và nấm Vân chi

2.2.2 Đánh giá sự khác biệt di truyền của nấm Sò vua nấm Vân chi 2.2.3 Nhân giống nấm Sò vua và nấm Vân chi dạng dịch thể

2.2.4 Sử dụng giống dịch thể để nuôi trồng nấm Sò vua, nấm Vân chi

2.3 Phư ng pháp nghiên cứu

2.3.1 Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nấm Sò vua và nấm Vân chi

Thí nghiệm 1: Sinh trưởng phát triển của nấm Sò vua và nấm Vân chi

trong nuôi cấy thuần khiết

Thí nghiệm 2: Đánh giá sự sinh trưởng phát triển của nấm Sò vua và nấm Vân chi trên nguyên liệu nuôi trồng

2.3.2 Đánh giá sự khác biệt di truyền của nấm Sò vua và nấm Vân chi

2.3.2.1 Phương pháp tách chiết ADN

2.3.2.2 Phương pháp PCR

2.3.2.3 Phương pháp phân tích số liệu

2.3.3 Các thí nghiệm nghiên cứu nhân giống nấm Sò vua và nấm Vân chi dạng dịch thể

2.3.3.1 nghiên cứu nhân giống cấp 1 nấm Sò vua và nấm Vân chi dạng

dịch thể

Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sinh trưởng của giống nấm

Sò vua và nấm Vân chi trong môi trường dịch thể

Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng của pH đến sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi trong môi trường dịch thể

Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng của thành phần môi trường dịch thể tới sự sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi cấp 1

Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng của chế độ lắc đến sự sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi trong môi trường dịch thể

Thí nghiệm 7: Ảnh hưởng của tỷ lệ giống gốc đến sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi trong môi trường dịch thể

Thí nghiệm 8: Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy đến sinh trưởng của giống nấm Sò vua và Vân chi dạng dịch thể

2.3.3.2 Nghiên cứu nhân giống nấm Sò vua và giống nấm Vân chi dạng dịch thể cấp trung gian

Thí nghiệm 9: Ảnh hưởng chế độ sục khí tới sự sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi cấp trung gian

Thí nghiệm 10: Ảnh hưởng của tỷ lệ giống cấy tới sự sinh trưởng của giống nấm Sò vua và nấm Vân chi cấp trung gian

2.3.3.3 Nghiên cứu nhân giống nấm Sò vua và giống nấm Vân chi thương phẩm dạng dịch thể

Thí nghiệm 11: Ảnh hưởng của thành phần môi trường dịch thể tới sự

sinh trưởng của hệ sợi nấm Sò vua và nấm Vân chi thương phẩm

2.3.4 Các thí nghiệm sử dụng giống nấm dịch thể để nuôi trồng nấm Sò vua, nấm Vân chi

Thí nghiệm 12: Đánh giá ảnh hưởng của nguồn giống và nguyên liệu

nuôi trồng đến sinh trưởng của nấm Sò vua và nấm Vân chi

Thí nghiệm 13: Ảnh hưởng của tuổi giống dịch thể đến sinh trưởng của nấm Sò vua và nấm Vân chi trên nguyên liệu nuôi trồng

Thí nghiệm 14 : Ảnh hưởng của lượng giống thương phẩm đến sự sinh trưởng phát triển của nấm Sò vua và nấm Vân chi trên nguyên liệu nuôi trồng

2.4 Phư ng pháp chuẩn bị môi trường

2.5 Phư ng pháp bố trí thí nghiệm

- Các thí nghiệm được bố trí 3 lần nhắc lại và được tiến hành như sau: + Đối với giống cấp1: 5 bình tam giác 500ml/ công thức, mỗi bình tam giác chứa 200ml môi trường Tổng cộng 15 bình tam giác/1 công thức thí nghiệm + Đối với giống cấp trung gian: 5 bình duran 5000ml/công thức, mỗi bình duran chứa 3000 ml môi trường Tổng cộng 15 bình duran /1 công thức thí nghiệm

+ Đối với giống nấm thương phẩm: 30 lít môi trường/1 bioreator/ công thức

+ Trong giai đoạn nuôi trồng: mỗi công thức thí nghiệm bố trí 100 bịch Tổng số 300 bịch nguyên liệu/công thức thí nghiệm; theo dõi các chỉ tiêu sinh trưởng 50 bịch/công thức thí nghiệm, lấy mẫu theo 5 điểm của đường chéo, mỗi điểm 10 bịch

* Các chỉ tiêu theo dõi

- Theo dõi các đ c điểm sinh trưởng trong nuôi cấy thuần khiết

- Theo dõi các đ c điểm sinh trưởng trong giai đoạn giống dịch thể

+ Kích thước KLC( khuẩn lạc cầu)(mm)

+ Sinh khối sợi (g/1000ml)

- Theo dõi các đ c điểm sinh trưởng trong giai đoạn nuôi trồng

2.6 Phư ng pháp xử lý số liệu

Kết quả nghiên cứu được xử lý theo phương pháp thống kê sinh học bằng phần Excel và phần mềm IRRISTAT 4.0

2.7 Địa điểm và thời gian thí nghiệm

- Các thí nghiệm được tiến hành tại trung tâm Công nghệ sinh học thực vật, bộ môn kỹ thuật Di truyền - Viện Di truyền Nông nghiệp; viện

Vi sinh vật và Công nghệ sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội; Trung tâm nấm Văn Giang - Hưng Yên

- Thời gian thí nghiệm: từ năm 4/2008 - 4/2013

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nấm Sò vua và nấm Vân chi

3.1.1 Sự sinh trưởng và hình thành quả thể nấm Sò vua trong nuôi cấy thu n khiết

Trong nghiên cứu này, 6 chủng nấm Sò vua được nuôi cấy thuần khiết, ở các khoảng nhiệt độ khác nhau

Bảng 3.1 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sinh trưởng của hệ sợi nấm Sò

vua trong nuôi cấy thuần khiết Giống

*Ghi chú:

3 đơn vị độ dày: Hệ sợi rất dày

2,5 đơn vị độ dày: Hệ sợi dày

2 đơn vị độ dày: Hệ sợi trung bình 1,5 đơn vị độ dày: Hệ sợi mỏng

1 đơn vị: Hệ sợi rất mỏng

Kết quả cho thấy, 5 giống nấm Sò vua từ E1- E5 có nhiều đ c điểm giống nhau khi nuôi cấy trên môi trường thạch trong các khoảng nhiệt độ nghiên cứu Chủng E1 có tốc độ sinh trưởng của hệ sợi nhanh nhất, chủng E6 có đ c điểm khác biệt rõ ràng với 5 chủng trên về thời gian sinh trưởng, đ c điểm hệ sợi, sự hình thành quả thể

3.1.2 Sự sinh trưởng và hình thành quả thể nấm Sò vua trên nguyên liệu nuôi trồng

ảng ột số đặc đi m sinh trưởng của uả th các chủng nấm Sò vua Chủng

nấm ĐKcuống (mm)

ĐK mũ

(mm)

Chiều dài cuống

(mm)

Số quả bịch TB quả (g) K lượng Năng suất bịch (g)

Trên nguyên liệu nuôi trồng các chủng nấm Sò vua có sự khác biệt rất

rõ về qui luật sinh trưởng so với trong nuôi cấy thuần khiết

Trong 6 chủng nấm Sò vua cùng nghiên cứu thì chủng E1 cho trọng lượng quả/ bịch cao nhất (197,6 g/bịch) Các chủng cùng nghiên cứu khác đều cho trọng lượng quả thể/ bịch thấp hơn, chủng E6 thu được trọng lượng quả

thể/ bịch thấp hơn các chủng cùng nghiên cứu (144,7 gam/ bịch)

3.1.3 Đặc điểm bào tử nấm Sò vua

Bào tử của các chủng nấm được quan sát trên kính hiển vi điện tử quét có độ phóng đại từ 500 -15000 lần Ở độ phóng đại 7500 lần bào tử nấm Sò vua có hình trứng xếp gần nhau đính trên đảm hình chùy

3.1.4 Sự sinh trưởng và hình thành quả thể nấm Vân chi trong nuôi cấy thu n khiết

Sự sinh trưởng của hệ sợi nấm Vân chi trong nuôi cấy thuần khiết được ghi nhận ở hình 3.32

Hình 3.32 : Tốc độ sinh trưởng của hệ sợi nấm Vân chi

trong điều kiện nhiệt độ khác nhau

Trong các khoảng nhiệt độ nuôi khác nhau, tốc độ sinh trưởng của hệ sợi nấm Vân chi khác nhau, đ c điểm hệ sợi cũng có sự khác nhau Trong suốt cả

giai đoạn mọc và giai đoạn sau khi sợi phủ kín bề m t môi trường, dù để trong điều kiện nhiệt độ, điều kiện ánh sáng nào đều không thấy sự hình thành mầm mống quả thể trong nuôi cấy thuần khiết của cả 2 chủng nấm Vân chi

3.1.5 Nghiên cứu sự sinh trưởng và hình thành quả thể của nấm Vân chi trên nguyên liệu nuôi trồng

Kết quả cho thấy: tại thời điểm tháng 2 - tháng 4: Giai đoạn này hệ sợi và quả thể của 2 chủng nấm Vân chi đều sinh trưởng tốt, ít sâu bệnh Hai chủng nấm Vân chi Tra-1 và Tra-2 có rất nhiều đ c điểm giống nhau: thời gian mọc sợi, thời gian hình thành quả thể, kích thước, màu sắc, năng suất quả thể tươi của 2 chủng nấm Vân chi nghiên cứu trong từng thời điểm trong năm

Bảng 3.6: Ảnh hưởng của thời điểm nuôi trồng đến kích thước quả

thể và năng suất nấm Vân chi Giống Thời gian Chỉ tiêu

Trọng lượng nấm tư i bịch

3.1.6 Đặc điểm hiển vi bào tử nấm Vân chi

Trên kính hiển vi điện tử quét có độ phóng đại 2.000 lần, bào tử nấm Vân chi rất thưa Ở độ phóng đại 15.000 lần cả 2 chủng Tra-1 và Tra-2 chỉ có một ít đảm hình thành 4 tiểu bính trên đó có đính 4 đảm bào tử điển hình

3.2 Đánh giá sự khác biệt di truyền của các chủng nấm Sò vua và nấm Vân chi

3.2.1 Sự khác biệt di truyền của các chủng nấm Sò vua

Phân tích đa dạng di truyền