Luận văn thạc sĩ Bảo vệ thực vật: Nghiên cứu khả năng nhân nuôi sinh khối loài nhện nhỏ bắt mồi Amblyseius eharai (Acari: Phytoseiidae)

LỜI CAM ĐOANTôi cam đoan kết quả nghiên cứu trong luận văn này là một phần kết quả của dé tài: “Nhén bắt mdi Acari: Phytoseiidae: tác nhân tăng cường và kiểm soát sinhhọc các loại nhện h

BỘ GIÁO DỤC VÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

*w«kxw«t+%+%*% *% % % % %% % %%% % % %%%% %%

NGUYÊN TRUNG PHÚC

NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SINH KHOI LOAI

NHEN NHỎ BAT MOI Amblyseius eharai (ACARI:

PHYTOSEIIDAE)

LUAN VAN THAC Si KHOA HOC NONG NGHIEP

Thanh phố Hồ Chí Minh - Thang 11/ 2022

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

NGUYÊN TRUNG PHÚC

NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SINH KHOI LOÀI

NHEN NHỎ BAT MOI Amblyseius eharai (ACARI:

NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SINH KHOI LOÀI NHEN NHỎ

BAT MOI Amblyseius eharai (ACARI: PHYTOSEIIDAE)

NGUYEN TRUNG PHUC

Hội đồng chấm luận van:

1 Chủ tịch: TS TRÀN THANH TÙNG

Trung tâm KD & KN Thuốc BVTV phía Nam - Cục BVTV

2 Thư ký: TS NGUYÊN ĐỨC XUÂN CHƯƠNG

Trường Đại học Nông Lâm TP HCM

3 Phản biện 1: TS VŨ THỊNGA

Hội Bảo Vệ Thực Vật

4 Phản biện 2: TS PHUNG MINH LỘC

Trung tam KD & KN Thuốc BVTV phía Nam - Cục BVTV

5 Uỷ viên: TS LÊ THỊ DIỆU TRANG

Trường Đại học Nông Lâm TP HCM

từ năm 2009 cho đến nay.

Tháng 10 năm 2020 theo học Cao học ngành Bảo vệ thực vật tại trường Đạihọc Nông Lâm, Thủ Đức, thành phố Hồ Chí Minh

Dia chỉ liên lạc: Phòng Kỹ thuật — Nghiên cứu Phát triển, Công ty Cổ phanBảo Vệ Thực Vật Sài gòn Khu phố I, đường Nguyễn Văn Quỳ, phường Tân ThuậnĐông, quận 7, thành phố Hồ Chí Minh

Điện thoại: 0384008701.

Email: donggoran@gmail.com.

1

LỜI CAM ĐOAN

Tôi cam đoan kết quả nghiên cứu trong luận văn này là một phần kết quả của

dé tài: “Nhén bắt mdi (Acari: Phytoseiidae): tác nhân tăng cường và kiểm soát sinhhọc các loại nhện hại trên cây có múi”, mã số KHCBSS .01/20-22 thuộc “Chươngtrình phát triển khoa học cơ bản trong lĩnh vực Hóa học, Khoa học sự sống, Khoa họctrái đất và Khoa học biển giai đoạn 2017 — 2025” đo tôi thực hiện dưới sự hướng dẫncủa PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo (Chủ nhiệm đề tài) Các số liệu, kết quả nêutrong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kì công trình nào

Tác giả

Nguyễn Trung Phúc

1H

LỜI CẢM ƠN

Sau một thời gian học tập và nghiên cứu, đến nay tôi đã hoàn thành luận vănthạc sỹ với đề tài: “Nghiên cứu khả năng nhân nuôi sinh khối loài nhện nhỏ bắtmồi Amblyseius eharai (Acari: Phytoseiidae)”

Dé hoàn thành bản luận văn này, trước hết tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắcđến PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo đến đã tận tình dạy bảo, giúp đỡ và địnhhướng cho tôi trong quá trình học tập và thực hiện khóa luận này.

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn đến quý thầy giáo, cô giáo Trường Đại học NôngLâm TPHCM đã tận tình dạy bảo, hướng dẫn tôi học tập trong suốt thời gian từ năm

2020 đến nay

Tôi xin chân thành cảm ơn các anh chị phòng Công nghệ sinh học động vật,viện Sinh học nhiệt đới đã hỗ trợ, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn đến Ban lãnh đạo và đồng nghiệp tại Công ty Cổ

phần Bảo vệ Thực Vật Sài Gòn đã tạo điều kiện và giúp đỡ tôi trong quá trình học

TÓM TẮT

Đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu khả năng nhân nuôi sinh khối loàinhện nhỏ bắt mồi Amblyseius eharai (Acari: Phytoseiidae)” được tiến hành tạiViện Sinh học nhiệt đới, từ tháng 04/2022 đến tháng 11/2022 Mục tiêu nghiên cứulà: Xác định được khả năng nhân nuôi sinh khối loài của nhện bắt mỗi (NBM)Amblyseius eharai (Amitai & Swirski) dưới ảnh hưởng của các loại thức ăn khác nhau.

Khả năng phát triển quan thé của nhện bắt môi A eharai đối với 03 phươngpháp nuôi là tương đương nhau, khác biệt không có ý nghĩa thống kê Tuy nhiên mỗimôi trường lại có một ưu, khuyết điểm riêng Phương pháp nuôi với miếng xốp córào cản nước là môi trường phù hợp nhất đề tiễn hành các thí nghiệm nhân nuôi sinhkhối NBM 4 eharzi trong nghiên cứu này

Nhén bắt mỗi A eharai có thời gian hoàn thành vòng đời trên con mồi tự nhiên

(nhện đỏ hai chấm 7: urticae và nhện đỏ son P citri) ngắn hon so với vật môi thay

thé (trứng Artermia franciscana, phan hoa Typha latifolia và thức ăn nhân tạo), thờigian hoàn thành vòng đời ngắn nhất trên thức ăn là nhện đỏ son P citri (6,90 + 0,7ngày) Tuôi thọ con cái và khả năng đẻ trứng cao nhất trên con môi là nhện đỏ son P.citri (tuôi thọ 42,03 + 1,36 ngày, tổng số trứng đẻ 45,63 + 2,97 quả/con cái) Trênnguồn thức ăn thay thé là trứng Artermia franciscana NBM A eharai cũng đạt đượctuổi thọ và tỷ lệ tăng tự nhiên cao (tuổi tho 33,93 + 1,15 ngày, r = 0,242)

Tôn trữ con cái A eharai ở điều kiện nhiệt độ 5°C, 4m độ 95%, với thời giandưới 15 ngày cho hiệu quả tốt Khả năng sinh sản của con cái và chất lượng thế hệ F1sau tồn trữ không bị ảnh hưởng khi tồn trữ dưới 30 ngày

The research topic “Study on process of mass — rearing of predatory mite Amblyseius eharai (Acari: Phytoseiidae)” was realized at the Institute of Tropical Biology, from April to November 2022 The aim of the study is to determine the ability to grow the species biomass of the predatory mite (NBM) Amblyseius eharai

(Amitai & Swirski) under the influence of different foods.

The ability to develop the population of A eharai for the 03 farming methods

was similar and the difference is not statistically significant However, each arena had advantages and disadvantages The foam arena with a water barrier was the best suitable arena for rearing of the predatory mite - A eharai in this study.

The life cycle of A eharai when it fed on preys (two spotted spider mite Tetranychus urticae, Citrus red spider mite - Panonychus citri) was shorter than those

-fed on alternative foods (Typha latifolia L pollen, Artermia franciscana eggs,

artificial diet) The life cycle of A eharai was the shortest when fed on Panonychus citri (6,90 + 0,7 days) The female longevity and total number of eggs were the

highest fed on P citri (42,03 + 1,36 days; 45,63 + 2,97 eggs/female) On Artermia

jranciscana eggs, the female longevity and intrinsic rate of increase (r) of A eharai was high (33,93 + 1,15 days, r = 0,242).

Cold storage of the female A eharai at 5°C, 95% RH, and less than 15 days had good results The oviposition of poststoraged — female and the quality of progeny (F1) were no significant differences in the effects of cold storage less than 30 days.

VI

Chương 1 TONG QUAN TÀI LIỆU -. -2 5< s2s+seseevsetserzsecse 3

1:T INS Sie WTO AN sc s6 sibãtc4ccst2NgeEiskEBadzbdáGD-d0E46:BcanQisglggE0ibseiortidelfosgibiqzaok 31.1.1 Nhén nhỏ bắt mỗi Amblyseius Chard ccccccsesccessesssessesssessessessessesssessesseesses 31.1.2 Đặc điểm sinh học của Amblyseius €Ï@ffđi - 5c S-k + nsetsisiksirrirrrrreeree 41.1.2.1 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến đặc điểm sinh học 2-2 2+2z+z+zszzzzz+ 4

1.1.2.2 Ảnh hưởng của ẩm độ, 2-2 222222222E22E22E122112212212211271211221 221.22 ee 5

1.1.2.3 Ảnh hưởng của thức ăn đến đặc điểm sinh hoe - 2 s2=sz>s>s2 61.1.3 Amblyseius eharai trong quản lý sinh học ¿5< 55<c+cs+cssszerererrrxes i1.1.3.1 Amblyseius eharai kiêm soát nhện đỏ hai cham Tetranychus urticae 71.1.3.2 A eharai kiêm soát Aculops pelekassi (Keifer) (Acari: Eriophyidae) 81.1.3.3 Amblyseius eharai kiểm soát nhện đỏ son Panonychus citr1 - 81.1.3.4 Amblyseius eharai kiềm soát bọ tri c.ccccccssesessessessesseesessessessesseesessesseeseess 91,1¿4 GIá trị THƯƠNG HH nen e2 BAGESS0SE0L1923018021E4012ETSVSEESSESBEESGESEĐETEA0350S0909805250E8 101.1.5 Nghiên cứu về nhân nuôi hàng loạt 2- 2-22 22S222£2EE+2E2£++zxzzzzzzxz 10

VII

1.1.5.1 Nghiên cứu về hệ thống nưổi, sen S2.12102102122021221010,.e2 101.1.5.2 Nghiên cứu về nguồn thức ăn 2-22222222222E2EE2EE2EE2EE2EEerxrzrrrree 151.1.5.3 Một số ví du về nhân nuôi các loài nhện thuộc họ Phytoseiidae 161.1.5.4 Một số van đề khác của nhân nuôi nhện bắt mỗi họ Phytosetidae 17

1.6.2 Một số nghiên cứu trong nước 2- 2 22 +s+2++2E+2E+2E+EE+2E+2E+zEzEzxezxezxez 18

Chương 2 NOI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21

2.1 Thời gian và địa điểm -¿-©2-22222222E22212212112212711221211211211211211 1 tre 21

2.2 'YRt liệu, tụng cụ, GIẾt bị tl tu ÔN suceescseisiisiiieniDigSi040030015g00008860301482/603g38 HAI2.2.1 Nguồn nhện nhỏ bắt mỗi và các loại thức ăn của chúng - 212.2.2 Vat liéu nghién ctu khac 222.2.3 Dung cu, thiết bị thí nghi@m eo ccc ccseceeeeesesseseseseeseseeseeseseeeseeteaeeeenees 352.3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu - - + +52 *+2*+2££z£rzerserrerrrrree 2/2)

2.3.1 Đánh giá phương pháp nuôi phù hợp với A eharđï - - -=-c++ 222.3.2 Thí nghiệm đánh giá nguồn thức ăn nuôi phù hợp với A elarai 242.3.2.1 Thời gian sinh trưởng va phát triển của NBM trên 05 loại thức ăn 242.3.2.2 Khả năng sinh sản của nhện bắt mồi trên từng loại thức ăn 252.3.3 Khao sát điều kiện bao quan và tồn trữ A ehargi . -2 2-552575552 2]2.3.4 Khao sát khả năng ăn mồi của thé hệ tiếp theo sau bao quan và tồn trữ A eharai

¬ 28

Chương 3 KẾT QUÁ VÀ THẢO LUẬN se sissoviasiasennsinsscsnavaiasnnasnnssoincininieiins 293.1 Thí nghiệm đánh giá phương pháp nuôi phù hợp với A eharđi 293.2 Thí nghiệm đánh giá loại thức ăn phù hợp dé nhân nuôi 4 ehardi 333.2.1 Thời gian sinh trưởng va phát triển của A eharai trên các loại thức ăn khác

"i0 33

3.2.2 Kha năng sinh sản của A eharai trên các loại thức ăn khác nhau 343.3 Khao sát điều kiện bảo quan và tồn trữ A elarai -2-©22©5+cc+ccscczss2 403.3.1 Thời gian tồn trữ tối thích con cái 4 eharđi -22-522©52252z52+>csccs2 413.3.2 Kha năng tái sinh sản của A eharai ở các thời gian tồn trữ .- 433.3.3 Tỷ lệ trứng nở, tỷ lệ giới tính thế hệ sau của con cái qua tồn trữ 44

Vill

3.3.4 Khả năng ăn mỗi của thé sau của con cái sau tồn KẾT LUẬN VÀ BÊ NGH | ossessssssasossnssienssesisenisansonesonssenennesnsreseanssnnsoncssnsanenbesnnesnessTẤT LIỆU THUAN KHẢ ga ngan trnngtpgagraiiGiitGi0iShiNGEuiX9nG0i0906ã80 sg0E4g02

trữ -: 2 5-1X

DANH MỤC CÁC CHỮ VIET TAT

Từ viết tắt Nghĩa tiếng Việt

Cs Cộng sự

ĐBSCL Đồng bằng sông Cửu Long

Et al Những người khác

DANH MỤC CAC BANG

TrangBang 1.1 Nhiệt độ tối ưu, ngưỡng trên, ngưỡng dưới của A eharai và một số loài

nhện bắt TmÔ 2 + s+S<+S£SE+SE2EEEE9E1252121121111211211121121111112111 21111 11 x6 5Bảng 1.2 Con mồi chính của A eÖ4rđi -22-22-©2222222222222222E222E22E2EEczxzczve 9Bảng 3.1 Khả năng phát triển quan thé của A eharai trên 03 phương pháp nuôi 3 IBảng 3.2 Thời gian phát triển của A eharai khi ăn trên 5 loại thức ăn khác nhau 33Bảng 3.3 Kha năng sinh sản và tuổi thọ của A eharai trên 5 loại thức ăn 36Bang 3.4 Các chỉ số sinh học của A eharai trên năm loại thức ăn 38Bang 3.5 Tỉ lệ sống sót con cái A eharai sau tồn trỮ - 2-52 2z+2z+zz+zzzxez 42Bang 3.6 Kha năng sinh sản của A eharai ở các thời gian tồn trữ 43Bảng 3.7 Chất lượng trứng của con cái A eharai sau tồn trữ -: 2 5- 45Bảng 3.8 Khả năng ăn môi của thê hệ sau sinh ra bởi con cái A eharai sau tôn trữ

XI

DANH MỤC CÁC HÌNH

TrangHình 1.1 Mau sắc Amblyseius eharai thay đôi trong điều kiện thức ăn khác nhau 4Hình 1.2 Mô hình nuôi trên lá cây ký chủ (Overmeer 1985) -©+ 11Hình 1.3 Mô hình nuôi trong lồng kin (Overmeer 1985) -22522 5222222522 11Hình 1.4 Các vật liệu dùng lam lồng nuôi (Morales-Ramos và Rojas, 2014) 12Hình 1.5 Các bước làm lồng nuôi (Morales-Ramos và Rojas, 2014) 13Hình 1.6 Cách lắp ráp các bộ phận của lồng nuôi (Morales-Ramos và Rojas, 2014)

iS Sl wae ca Pom Ie I eer SR 13Hình 1.7 Cách nhân nuôi nhện nhỏ bat mỗi bang hệ thống lồng nuôi (Morales-

š 10084071020) 14 Hình 1.8 Hình thái trong và ngoài của con cái A #Ïaf4ï - -<+<5+ 19

Hình 2.1 Mô hình nuôi trên hộp plastic (Overmeer, 198Š5) -+-c++-<<<52 23Hình 2.2 Các bước tiến hành của phương pháp nuôi NBM trong hộp plastic với miếng

OP Đ.Đ.Đ.Đ 23Hình 3.1 Phương pháp nuôi hộp plastic với miếng xốp 2225525525522 29Hình 3.2 Phương pháp nuôi trên lá riêng biệt (a: đĩa petri có chứa nước, b: miếng

bông gòn, c: lá sạch có chưa vật môi và nhện nhỏ bat môi) 30Hình 3.3 Phương pháp nuôi trong lồng kín - 22 252222+22z+2z+2E+z£zzzzxzzez 30

Hình 3.4 Các bước thực hiện bằng phương pháp nuôi trong lồng kín 31

Hình 3.5 A.eharai trên 05 loại thức ăn khác nhau - 55 <5 5++<£++<s=+>e+zss 39 Hình 3.6 Trứng NBM 1.eharai trên sợi Ìen - - 5-5-2 S+c++c+scsserereerrrrrree 39Hình 3.7 NBM A.eharai đang giao phối 2-©22-522222222222Ezerxrerxrerrreree 40Hình 3.8 Các bước tiến hành trữ lạnh con cái A eharai 2-22 s+=z+sz=szsz 41Hình 3.9 4.earzi lay ra sau trữ lạnh - 2 2+ ©2222222E22EE22E2EE2EE22EE2EEcrErzrrrres 41

XI

GIỚI THIỆU

Đặt van đề

Hiện nay nền nông nghiệp nước ta đang chuyền sang hướng sản xuất an toàn

và bền vững cho nên việc áp dụng các biện pháp sinh học trong phòng chống dịch hạirất được chú trọng Tuy nhiên, việc sử dụng tính năng hữu ích của kẻ thù tự nhiên làchưa nhiều và không phổ biến ở nước ta, người dân chưa thật sự tin tưởng vào hiệuquả của việc sử dụng các loài thiên địch mà mới chỉ hạn chế sử dụng thuốc hóa học

và ưu tiên sử dụng các thuốc có nguồn gốc sinh học trong trong phòng trừ các loài

dịch hại.

Nhén nhỏ bắt mỗi họ Phytoseiidae là một trong những tác nhân kiểm soát sinhhọc quan trọng của các loại dịch hại khác nhau trong nhà kính, nhà lưới trên toàn thếgiới (Gerson và Weintraub, 2012) Thành công trong sử dụng tác nhân kiểm soát sinhhọc dé kiểm soát dịch hại phụ thuộc vao các yếu tố khác nhau như loài được sử dụng

để kiểm soát, nguồn thức ăn có sẵn, mật độ con mồi và các yếu tố phi sinh học khác(Danks, 2006).

Amblyseius eharai là loài nhện nhỏ bắt môi thuộc họ Phytoseiidae phổ biến ở

vùng Đông Á Chúng là tác nhân sinh học kiểm soát các loại ve nhện, bọ trĩ hại cây

trồng Mặc dù kha năng thích nghỉ trong điều kiện nhiệt độ thấp hơn, A eharai van

có thé là một tác nhân kiêm soát sinh học có giá trị do có khả năng thích nghi cao với

nhiều loài thực vật khác nhau (Young Gyun Park và cs., 2021)

Trong quá trình điêu tra tại các vườn bưởi tại Tiên Giang, nhóm nghiên cứu

đã phát hiện sự có mặt phổ biến của NBM A eharai Tuy nhiên hiện nay, tại ViệtNam chưa có báo cáo nghiên cứu nào công bồ về đặc điểm hình thái sinh học của loài

A eharai này Với hiệu quả phòng trừ các loài nhện, bọ trĩ và các loại dịch hại khác

ma A eharai mang lại trong phòng trừ sinh hoc trong nhà kính nhà lưới thì việcnghiên cứu về các đặc điểm sinh học, khả năng phòng trừ cũng như nghiên cứuphương pháp nhân nuôi sinh khối loài nhện nhỏ bắt mồi này đề chủ động phóng thảtrong phòng trừ sinh học là cần thiết Trên cơ sở đó đề tài: “Nghién cứu khả năng

nhân nuôi sinh khối loài nhện nhỏ bắt môi Amblyseius eharai (Acari:

Phytoseiidae)” được tiễn hành

Mục tiêu

Xác định được phương pháp nuôi, điều kiện bảo quản và khả năng nhân nuôisinh khối loài của nhện bắt môi A eharai (Amitai & Swirski) dưới ảnh hưởng củacác loại thức ăn khác nhau.

Chương 1

TONG QUAN TAI LIEU

1.1 Nghiên cứu nước ngoài

1.1.1 Nhện nhỏ bắt mồi Amblyseius eharai

Loài : Amblyseius eharai Amitai va Swirski

A eharai là một thiên địch phổ biến thường được sử dung dé quan lý nhện đỏPanonychus citri, nhện vàng Phyllocoptruta oleivora và bọ trĩ trên nhiều loại cây

trồng A eharai là động vật ăn thịt thuộc nhóm ITI (theo McMurtry và cộng sự 2013),

được đặt tên bởi Amitai và Swirski lần đầu tiên vào năm 1981

Phân bố

A eharai được tìm thấy tại Trung Quốc (Giang Tô, Chiết Giang, Giang Tây,

Hồ Bắc, Hồ Nam, Phúc Kiến, Quảng Đông, Quảng Tây, Hải Nam và Hồng Kông),

Đài Loan, Quan dao Matsu, Han Quéc, Nhat Ban (Akita, Miyagi, Yamagata,

Fukushima, Saitama, Ibaraki, Chiba, Tokyo, Kanagawa, Niigata, Toyama, Ishikawa,

Fukui, Nagano, Shizuoka, Gifu, Shiga, Kyoto, Mie, Nara, Wakayama, Hyogo,

Tottori, Shimane, Okayama, Hiroshima, Yamaguchi, Tokushima, Ehime, Kochi, Fukuoka, Oita, Nagasaki, Kumamoto, Miyazaki, Kagoshima, Okinawa), Dai Loan va Malaysia (Ho va cs., 2003).

1.1.2 Đặc điểm sinh học của Amblyseius eharai

A eharai là loài nhện nhỏ bắt mỗi có màu sắc cơ thé thay đổi theo chế độ

ăn khác nhau từ màu trắng - vàng, vàng - nâu và đỏ cam Kích thước cơ thê của 4.eharai cái (chiều dai tam chắn lưng: 0,352 mm) lớn hơn của con đực (chiều daitam chắn lưng: 0,266 mm) Những con A eharai cái khi bị bỏ đói hoặc ăn trứngdường như có ngoại hình tương tự nhau với màu cơ thé mờ và cơ thé hẹp chiềurộng hơn (Hình 1A và 1B), những con cái đã tiêu thụ ấu trùng thì có màu nâu dé

hỗ trợ tiêu hóa và cơ thể rộng hơn (Hình 1C) Cũng như hầu hết các loài thuộc họPhytoseiidae, A eharai có thời gian phát triển tương đối ngắn, nhưng mật số quanthê sẽ phụ thuộc vào chế độ ăn, nhiệt độ và ẩm độ

Tetranychus urticae trong 24h C: Trưởng thành cái ăn ấu trùng 7' urticae 24h1.1.2.1 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến đặc điểm sinh học

Nhiệt độ ảnh hưởng lớn tới vòng đời, khả năng sống sót, tuổi thọ, khả năngsinh san và khả năng ăn mồi của loài NBM này Nhiệt độ tối ưu cho sự phát triển quanthé của A eharai là 28,1°C, nhiệt độ đưới 12,5°C hoặc trên 33,2°C sẽ dẫn đến anh

hưởng tiêu cực tới sự phát triển quần thể, đây được xem là hai ngưỡng nhiệt độngưỡng đưới và ngưỡng trên của A eharai (Park và Lee, 2021) Nhiệt độ tối ưu cho

sự phát của A eharai là tương đối thấp hơn so với các loài nhện bắt mỗi khá nhưAmblwseius swirski (30,1 °C), Neoseiulus californicus (29,0 °C), Neoseiulus

longispinosus (32,0 °C), hay Neoseiulus womersleyi (30,5 °C) Điều nay có nghĩa là

loài săn mỗi này có thể đạt được hiệu suất tối đa nhanh hơn so với các loài phytosendkhác khi nhiệt độ thấp A eharai phù hợp với những vùng có nhiệt độ trung bìnhtrong nhà kính không vượt quá 30°C Do đó, A eharai sẽ có tiềm năng cao như mộttác nhân kiêm soát sinh học trong nhà kính

Bảng 1.1 Nhiệt độ tối ưu, ngưỡng trên, ngưỡng dưới của A eharai và một số loàinhện bắt môi.

: Nhiệt độ (°C) Loài Con môi ; ¬

Ngưỡng dưới Tôiuu Ngudng trên

A eharai Tetranychus urticae 12.5 28.1 33.2

A swirskii Phan hoa lã5 30.1 37.0

N californicus Panonychus ulmi 7.6 29.0 35.2

N longispinosus 1 etranychus urticae 13.3 32.0 38.2

N.womersleyi — Tetranychus urticae 12.5 30.5 38.9

(Nguon: Park va Lee, 2021)

1.1.2.2 Anh hưởng của Am độ

Kha năng chịu đựng đói hoặc độ âm thấp của nhện nhỏ bat mồi là rat quantrọng dé chúng duy trì quan thé trong môi trường không thuận lợi Độ âm thuận lợi

là yếu tố then chốt cho sự tồn tại của các loài thiên địch (McMurtry và Scriven, 1965).Theo kết quả nghiên cứu của Jie Ji và cs., 2013 thì hau hết trứng của A eharai khôngthé nở ở độ 4m tương đối (RH) thấp hơn 60% Độ âm tương đối (RH) trong khoảng70-100 %, tat cả trứng của A eharai đều phát triển thành con non Ngoài ra, thời giansống sót của A eharai trong điều kiện RH khoảng 60-80% ngắn hon so với trongđiều kiện RH từ 90-100% Hơn nữa, thời gian sống sót của A eharai trong điều kiện

RH khoảng 60-80% ngắn hơn so với khi RH trong khoảng 90—100% (Ji và cs., 2013)

1.1.2.3 Ảnh hưởng của thức ăn đến đặc điểm sinh học

Khả năng chịu đựng môi trường không thuận lợi là rất quan trọng đối với cácloài thiên địch dé duy trì quan thé va phát huy tác dụng của chúng dé kiểm soát sinhhọc (Greco và cs., 2006; Wei và cs., 1994; Chant và Fleschner 1960) A eharai có

khả năng sống sót trong thời gian lên đến 8,1 ngày mà không cần có con môi hoặc các

nguồn thức ăn khác (Ji và cs., 2014) Nếu một loài thiên địch có khả năng chiu đóimạnh hơn, nó sẽ tồn tại lâu hơn so với các loài thiên địch khác (Wei và cs., 1994).Khi thức ăn khan hiểm, A eharai bắt buộc phải ăn thịt đồng loại, chủ yếu là trưởngthành ăn nhện non, điều này sẽ ảnh hưởng làm giảm khả năng sinh sản, tuổi thọ vàkhả năng ăn môi Tuy nhiên rất khó xác định đồng loại mà chúng đang ăn còn sốnghay đã chết

Cũng theo Jie Ji và cs (2021) thời gian xử lý con môi của A eharai ngắn hơnđáng kế so với A swirskii (6 25°C), Neoseiulus californicus (ở 25, 30 và 35°C), N.longispinosus (ở 25 và 30°C), N womersleyi (ở 25, 30 va 35°C), Phytoseiuluspersimilis (6 25°C), và N californicus (ở 20 va 25°C) Ở một mức độ nào đó, thờigian xử lý ngắn hơn này có thé bù đắp cho tỷ lệ tan công của A eharai thấp hơn Do

đó, tỷ lệ tan công tối đa của A eharai cái đôi với trứng 7: urticae là cao nhất trong sốcác loài nhện bắt mỗi ho Phytoseid được so sánh, thậm chí cao hơn so với N.californicus, N longispinosus va N womersleyi ở 30 va 35°C.

Khi được cung cấp với số lượng lớn con môi là nhện kho Carpophagus lactis,quan thé cái A eharai đã tăng lên 209 + 6,1 (trung bình + SD) sau 24 ngày và dườngnhư đạt mức 6n định sau 20 ngày trong thí nghiệm 10 con cái Quan thé cái tăng songsong trong thí nghiệm 5 con cái và đã dat 87 + 30,1 sau 16 ngày ( Jie Ji va cs., 2014).

Cả con đực và con cái của A eharai đều có thé phát triển thành con trưởng thành vớicon môi C /acfis.

Khi cung cấp C Jactis làm con mồi, tổng số trứng của con cái A eharai là51,1 trứng/con cái, số lượng trứng đẻ hàng ngày là 2,5 trứng/con cai/ngay, tỷ lệ sinhsản thuần của nó (Ro = 33,849), tỷ số con cái (66,24%), trong khi tỷ lệ tăng tự nhiên

khá cao (tm = 0,253) Do đó, người ta cho rằng C Jactis là một con môi tiềm năngcho việc sản xuất hàng loạt A eharai (Jie Ji và cs., 2014).

1.1.3 Amblyseius eharai trong quản lý sinh học

Nhện nhỏ bắt mồi A eharai là một loài thiên dich của nhiều đối tượng dịchhại như bọ trĩ, nhện đỏ, nhện vàng được tìm thấy phổ biến trên một số loại cây có múinhư bưởi, cam, chanh hay trên một số loại cây trồng khác như chè, quất, kiểng, trenứa Đặc biệt, loài động vật ăn thịt này có thé dé dang thích nghi với vùng đất nôngnghiệp Đông Á - nơi nó là bản địa Tuy nhiên các nghiên cứu về nhện bắt mồi 4.eharai còn rat ít trên thé giới và mới chỉ tập trung vào sự phân bố của chúng (Jie Ji

và cs., 2014).

1.1.3.1 Amblyseius eharai kiểm soát nhện đỏ hai chấm Tetranychus urticae

Nhện đỏ 7efranychus urticae là một loài gây hại trên toàn thế giới có thé gâyhại nặng cho nhiều loại cây trồng trong nhà kính và ngoài đồng ruộng Chúng làmgiảm khả năng quang hợp của cây trồng bằng cách ăn các tế bào thực vật và rất khókiểm soát do tỷ lệ tăng dân số cao trên nhiều loại cây trồng và khả năng kháng thuốctrừ sâu nhanh chóng.

A eharai ăn được trứng và ấu trùng của 7: urticae Tỷ lệ săn mỗi của A eharaitrên trứng và âu trùng 7' urticae bi ảnh hưởng bởi mật độ con môi, giai đoạn bắt môi

và giới tính của A eharai Khi mật độ 7: urticae ban đầu tăng lên, tỷ lệ ăn mỗi của A

eharai cũng tăng lên A eharai cái ăn âu trùng 7: urticae cao hơn so với trứng của T

urticae và A eharai cái tiêu thụ nhiều T urticae hơn so với con đực (Park và Lee,2021).

So với các loài nhện bat môi họ Phytoseiidae khác đã được nghiên cứu trước

đây, khả năng ăn 7 urticae của A eharai dường như cao hơn A swirskii, N.californicus, N womersleyi và P persimilis trong các điều kiện tương tự Ngoài ra,khả năng săn mồi của A eharai có thé tăng lên theo tuổi trưởng thành Nhìn chung,

A eharai dường như có tiềm năng phát triển thương mại tốt như một loài thiên địch

mới dé tăng cường kiểm soát sinh học đối với 7: urticae (Park và Lee, 2021)

Cả con đực và con cái của A eharai đều tiêu thụ nhiều ấu trùng 7: urticae hơntrứng A eharai cái đã tiêu thụ 22,7 au trùng va 19,1 trứng 7' urticae trong suốt 24giờ A eharai đực tiêu thụ 11,8 ấu trùng và 7,8 trứng 7: urticae trong 24 giờ (Park vàLee, 2021).

1.1.3.2 A eharai kiém soat Aculops pelekassi (Keifer) (Acari: Eriophyidae)

Aculops pelekassi (Keifer), họ Eriophyoid, là loài nhện hai màu hồng gây hạinặng trên cây có múi như cam, chanh Mặc dù kích thước cơ thể của A pelekassi cực

kỳ nhỏ, chỉ từ 0,15 mm đến 0,17 mm, loài này là một trong những loài gây hại nghiêmtrọng trên cây có múi A pelekassi bám và gây hại trên lá, cành xanh và quả A.

pelekassi chích hút hại lá, cành xanh và quả Đặc biệt, chúng phát triển mạnh trên qua

từ thang 9 đến tháng 10 dẫn đến tổn thương vỏ qua và làm giảm năng suất và chatlượng qua (McCoy, 1996; Seki, 1975).

Mặc dù nhện hai Eriophyoid từ lâu đã được công nhận là con môi của nhệnbắt mỗi họ Phytoseiid, một số loài được báo cáo là không đủ thức ăn cho sự tồn tại

và sinh sản của một số lượng đáng kế các loài phytoseiid (Sabelis, 1996) TheoAshihara va cs (2004) con non của A eharai và N womersleyi không ăn A pelekassi

dé phat trién

1.1.3.3 Amblyseius eharai kiểm soát nhện đỏ son Panonychus citri

Nhện đỏ cam chanh P citri là một loài dich hại quan trọng hang đầu trên câyquả có múi Nhện đỏ P citri tan công trên lá va trái, chích cap va hút nhựa lá vàtrái Trên lá, vết cap và hút tạo thành những chấm nhỏ li ti trên mặt lá, khi bi nặng,vết chấm lan rộng, lá có màu ánh bạc, lá sau đó có thể bị khô và rụng Khi mật sốnhện cao, cả cành non cũng bị nhện tấn công, cảnh cũng trở nên khô và chết

Đề đánh giá hiệu quả của hai loài nhện bắt mỗi trong việc kiểm soát sinh học

P citri, lịch sử sông của A swirskii va A eharai với con môi P citri đã được nghiên

cứu ở 25 + 1°C Kết quả cho thay thời kỳ phát triển của giai đoạn âu trùng và toàn bộthế hệ của A swirskii ngắn hơn đáng kể so với A eharai, nhưng không có sự khácbiệt đáng ké về thời kỳ phát triển giữa hai loài này ở các giai đoạn khác Ngoài ra,con non của A swirskii có thé phát triển thành protonymph mà không cần con môi,nhưng con mồi là cần thiết cho sự phát triển của ấu trùng A eharai Khả năng sinhsan của con cái trưởng thành của A eharai cao hơn đáng ké so với A swirskii Hệ sốnhân thế hệ (Ro) của A eharai cao hơn A swirskii, tuy nhiên không có sự khác biệt

về ty lệ tăng tự nhiên (tm) giữa A eharai và A swirskii (H Kishimoto, 2014)

1.1.3.4 Amblyseius eharai kiểm soát bọ tri

A eharai thường xuất hiện đồng bộ với bọ tri Pseudodendrothrips mori hơn

là với nhện đỏ Tetranychus kanzawai trên ruộng dâu tam Tỷ lệ ăn môi trung bìnhmỗi ngày của một con cái trưởng thành A eharai đối với âu trùng P mori là 6,3 vàlớn hơn so với 7 kanzawai (trung bình = 1,2) hoặc trứng (trung bình = 4,3) Khi đượccung cấp đồng thời ấu trùng P mori và au trùng hoặc trứng 7: kanzawai, một con cáitrưởng thành A eharzi tiêu thụ nhiều P mori hơn là 7: kanzawai Như vậy, A eharai

có thể là một ứng cử viên tốt dé kiểm soát sinh học không chỉ nhện hại mà còn cả bọtrĩ (Masul và Katayama, 2019).

Bảng 1.2 Con mồi chính của A eharai

Con mồi Loài Nguồn tham khảo

Nhện eriophyid

(Acari: Eriophyidae) Aculops pelekassi (Keifer) Tsuchida va Masui (2020)

Nhén hai

(Acari: Tetranychidae) 7: urticae Park và Lee (2021)

Panonychus citri (McGregor) Ji và cs., (2013)

Phyllocoptruta oleivora (Ashmead) Ji và cs., (2013)

Tetranychus kanzawai Masui va Haruki (2019)

Bo tri

(Thysanoptera: Thripidae) Pseudodendrothrips Mori Masui va Haruki (2019)

1.1.4 Giá trị thương mại

Nhén bắt môi thuộc họ Phytoseiidae là một trong những loài thiên dich đượcthương mại hóa rộng rãi nhất và được ứng dụng thường xuyên dé tăng cường kiểmsoát sinh học trong nhà kính Trong số đó, các loài A swirskii (Athias-Henriot),Neoseiulus californicus (McGregor), và Phytoseiulus persimilis (Athias-Henriot) là

những loài được thương mai hóa rộng rãi Riêng loài A eharai chưa được thương maihóa rộng rãi trên thế giới có thể do chưa có nhiều nghiên cứu về đặc điểm sinh họccũng như phương pháp nhân nuôi hàng loạt loài nhện bắt mồi này

1.1.5 Nghiên cứu về nhân nuôi hàng loạt

1.15.1 Nghiên cứu về hệ thống nuôi

Overmeer (1985) đề cập tới 3 phương pháp nuôi nhện nhỏ bắt mdi họPhytoseiidae:

- Nuôi trên môi trường nhân tao: day là phương pháp đơn giản va hữu ich chonuôi nhện Phytoseiidae được phát triển bởi McMurtry và Scriven (1965) Phươngpháp được mô tả như sau: một miếng gỗ ép cứng mau đen kích thước 15x15cm đặttrên một khối nhựa xốp thấm nước day 1,5 cm và kích thước 16 x16 cm, được đặt

trong một khay day nước kích thước 20 x 20 cm Xung quanh viền của miếng gỗ ép

sử dụng giấy thấm viền xung quanh, một đầu giấy thắm chạm với phan nước trongkhay dé phần giấy thấm này có tác dụng vừa là rào chắn vừa là nơi cung cấp nướccho nhện Một số tác giả đã có cải tiến dựa trên mô hình này đề phù hợp với nghiêncứu của họ như về kích thước hoặc là chat liệu Khi tiễn hành nuôi, thả nhện bắt mỗilên miếng gỗ cùng với thức ăn (có thé là nhện hại hoặc là phan hoa)

- Nuôi trên lá cây ký chủ của nhện hại: sử dụng lá tươi (thường là lá cây ký chủcủa con môi) Sử dụng dia petri có đặt miếng bông gòn thấm nước vao trong đĩa (diệntích miếng bông bằng diện tích đĩa), đặt miếng lá lên trên miếng bông và nuôi nhệnbắt môi trên lá với thức ăn của chúng.

10

a miêng lá

b miêng bông gòn

c đĩa petri chứa nước

Hinh 1.2 Mô hình nuôi trên lá cây ký chủ (Overmeer 1985)

- Nuôi trong lồng nuôi: dựa theo mô hình của Tanigoshi và cs., (1975) gồm 2thùng làm bởi bìa các tông ( loại bìa dùng trong sản xuất hộp đựng kem) có nắp cóthé di chuyên và được kết nối giữa 2 thùng với nhau bằng một tắm chắn lưới mà nhện

có thé đi qua Lá có chứa nhện hại được cho vào phan thấp hơn cùng với nhện bắtmôi Lá mới chứa con mỗi được cho vào phan cao hơn đề nhện bắt môi di chuyên lêntìm con môi Toàn bộ hệ thống sẽ được lật ngược lại phan nơi có lá mới trong khinhững vật liệu cũ được thu dọn (Overmeer, 1985).

a nắp hộp caton

b hộp caton phía dưới

c màng ngăn giữa hai hộp

Hình 1.3 Mô hình nuôi trong lồng kín (Overmeer 1985)Phát triển từ hệ thống lồng nuôi của Overmeer (1985), Morales-Ramos vàRojas (2014) đã cải tiến và phát triển hệ thống quy mô hơn

11

Vật liệu bao gồm: A: ống fancol 50ml, B: phéu nhựa 250ml, C: hộp nhựaZiploc, D: hộp nhựa 120ml (hình 1.4)

Hình 1.4 Các vật liệu dùng làm lồng nuôi (Morales-Ramos và RoJas, 2014)Tiến hành các bước làm lồng nuôi như hình 1.5

A: Trên đáy hộp nhựa Ziploc cắt môt đường tròn đường kính bằng đườngkính nắp hộp nhựa 120ml, nắp hộp 120 ml được khoét rỗng, dùng keo silicon gắn cốđịnh nắp hộp 120ml vào đáy hộp ziploc

B: Gan phần có đường kính lớn nhất của phễu vào với nap của hộp Ziplocbằng keo silicon như hình Nắp hộp 120ml được khoét rỗng và gan có định vào phan

còn lại của phễu Cắt lay phần trên của ống fancol va gap tiếp vào phan trên cùng củaphéu 250ml

C: Cat lay phan trên của ống fancol, trên đáy hop 120ml cắt một đường tron

có đường kính bằng đường kính ống fancol Gắn phần trên của ống fancol vừa cắtvào đáy hộp 120ml.

D: Gắn phần lớn nhất của phéu vào nắp hộp Ziploc đã được khoét rỗng Phancòn lại của phéu gắn với phan trên của ống fancol đã cắt

Chit ý: ở mỗi bộ phân cắt những hình tròn nhỏ va dán lưới lên để tạo độ thoángcho nhện nhỏ bắt môi và con môi.

12

Hình 1.5 Các bước làm lồng nuôi (Morales-Ramos và Rojas, 2014)

Các phần được liên kết với nhau như hình 1.6 trong đó A: Các bộ phận củamột lồng nuôi B: Một lồng nuôi hoàn thiện C: Chi tiết của phần lồng thứ 2 đượcghép nối tiếp vào lồng 1 D: Hệ thống hai lồng nuôi hoàn thiện

Hình 1.6 Cách lắp ráp các bộ phận của lồng nuôi (Morales-Ramos và Rojas, 2014)

13

Chỉ tiết cách nuôi nhện nhỏ bắt mỗi bằng hệ thống được mô tả như sau:

A: Cho lá nhiễm nặng con môi vào hộp Ziploc lồng 1, cùng với nhện bắt mồiB: Lắp kín hệ thống lại hoàn chỉnh thành một lồng nuôi kín

C, D: Tiếp tục cho lá nhiễm con mỗi vào hộp 120ml, lắp hộp 120ml vào phíatrên hộp Ziploc lồng 1 dé nhện bat môi khi hết con mồi sẽ di chuyền lên phíatrên.

E, F: Tương tự lại cung cấp thêm con mỗi cho nhện nhỏ bắt mỗi bằng cách cho

lá vào hộp Ziploc lồng 2, ghép phan này vào với hệ thống lồng 1 (lưu ý mở nắplồng 1, và có thể cho luôn vào hộp Ziploc lồng 2 tránh thất lạc)

G, H, I, J: Lắp hoàn thiện lồng 2 vào hệ thống lồng nuôi

Cứ tiếp tục như thế cho đến khi thu được quần thể như mong muốn lưu ý cóthể thu don hệ thống lồng phía dưới khi nhện bắt mồi đã di chuyên hết lên phầnphía trên.

Hình 1.7 Cách nhân nuôi nhện nhỏ bắt môi bằng hệ thống lồng nuôi

(Morales-Ramos và Rojas 2014)

14

1.1.5.2 Nghiên cứu về nguồn thức ăn

Collyer (1964) là người đầu tiên sử dụng thuật ngữ thức ăn thay thế Khôngchỉ con mỗi ma phan hoa của một số loài thực vật cũng được xem như là thức ăn thaythế cho Phytoseiid (Tanigoshi, 1982) Theo Overmeer (1985), thuật ngữ thức ăn thaythé chỉ áp dụng cho những loại mà loài bắt môi có thé sống sót và sinh sản khi ănchúng.

Burrell và McCormick (1964) cho biết loài Zyphlodromus occidentalis Nesbitt

từ Washington ưa thích và phát triển nhanh hơn khi cho ăn Aculus schlechtendali(Nalepa) hơn khi ăn trên Tetranychidae Mặc dù hiệu quả quản lý của 7: occidentalistrên nhện hại Tetranychidae đã được chứng minh (Hoy, 1982), vì thé Aculusschlechtendali (Nalepa) được xem là con mồi thay thế cho Tetranychids của loài nhệnnhỏ bắt môi nay

Thức ăn thay thế đóng vai trò quan trọng trong mục đích nhân nuôi, nhưngkhông nhất thiết chúng phải có sẵn cho nhện bắt mồi trong điều kiện tự nhiên Ví dụAmblyseius potentillae (Garman) có thể nuôi trên phấn hoa của loài Vicia fabaLinnaeus (Overmeer, 1981), nhưng loại thức ăn này không có sẵn trên cây ăn quả(Overmeer, 1985) Thậm chí một số những thức ăn nhân tạo có thể coi là nguồn thức

ăn thay thế cho một vài loài nhện Phytoseiid (Kennett và Hamai, 1980)

Nhiều loài nhện Phytoseiid thuộc giống Typhlodromus và Amblyseius có thé

sử dụng nhện hại Eriophyid, Tydeid và Tarsonemid là con môi thay thế (Lindquist,1983) Trong báo cáo cấp bằng sáng chế của công ty Syngenta (2008), A swirskiiđược nhân nuôi hàng loạt trên hai loài nhện môi là C lactis và Thyreophagusentomophagus cho hiệu quả tốt

Ngoài ra, các loài nhện bắt mỗi họ Phytoseiidae còn được nuôi trên nguồn thức

ăn nhân tạo (van Lenteren và Tommasini, 2003; Mégevand và cs., 1993) Nhiềunghiên cứu chỉ ra rằng nhân nuôi hàng loạt NBM họ Phytoseiidae đạt hiệu qua tốttrên nguồn thức ăn nhân tạo (Nguyen và cs., 2014a,b) nhưng chưa có báo cáo về hệthống sản xuất Phytoseiids dựa hoàn toàn vào chế độ ăn nhân tạo

15

1.1.5.3 Một số ví dụ về nhân nuôi các loài nhện thuộc họ Phytoseiidae

Phytoseius pesimilis thường được dùng dé quản lý nhện hại trong nhà kínhtrên cây dưa leo (Koppert, 1980) Năm 1979, P pesimilis được nhân nuôi hàng loạt

dé quản lý sinh học 7: urticae cho 400 ha dưa leo trong nhà lưới tại Hà Lan Phuongpháp truyền thống dé nhân nuôi hàng loạt nhện nhỏ bắt mỗi này là nhân nuôi trực tiếp

trên các cây bị nhiễm Tetranychids (con môi trực tiếp của nhện nhỏ bắt môi)

(Bravenboer, 1975) Tuy nhiên, phương pháp này có những bat lợi là các yếu tố như

cây trồng, con mồi và thiên địch phải được kiểm soát cùng một lúc để có được số

lượng lớn thiên địch khi thu hoạch.

Một van đề khác trong nhân nuôi hàng loạt P pesimilis là tồn trữ Schliesske(1980) cho biết điều kiện tồn trữ tốt nhất đạt được tại 7 °C và độ âm 95 % Con noncủa P pesimilis được tồn trữ thành công ở những điều kiện trên trong 4 tuần Trongkhi điều kiện tốt nhất cho tồn trữ của trưởng thành cái không có thức ăn tại nhiệt độ

từ 5 — 10°C và độ âm 100%, hơn 50% sống sót hơn 25 ngày Giai đoan trứng khôngphù hợp cho tồn trữ (Hamamura và cs, 1978)

Hoy và cs (1982) miêu tả 2 phương pháp cho nuôi quy mô lớn 7}phlodromus occidentalis trên nhện đỏ hai châm T urticae.

Cách 1: việc nuôi được tiến hành trong 45 m? nhà kính trên cây đậu thận

(Phaseolus vulgaris L.) T urticae được nuôi hàng loạt trên cây đậu trong diện tích

35 x 28 cm Khi cây đậu có lá thật từ 2 - 4 ngày tiến hành dùng những lá có chứanhện đỏ hai cham dé phân bố lên các lá mới Một cây đậu bị nhiễm có thé lây nhện

đỏ hai chấm cho 4 - 8 cây đậu mới Trên những cây đâu được trồng riêng khác,Typhlodromus occidentalis và T urticae được tiễn hành nuôi cùng lúc Tỷ lệ lí tưởnggiữa nhện đỏ hai cham và nhện nhỏ bắt môi là 20 đến 40 nhện đỏ hai cham : 1 nhệnnhỏ bắt mồi dé các quan thé có thé tăng trưởng tốt nhất Nếu tỉ lệ trên cây ít hơn 20nhện hại : 1 nhện nhỏ bắt mi, tiến hành thêm nhện hại lên cây từ những cây nhiễm

1 urticae trước đó Có khoảng trên 1,5 triệu nhện nhỏ bắt mỗi nuôi được trong 3tháng.

16

Cách 2: nhân nuôi 7' occidentalis trên cây đậu nành trên cánh đồng 0,2 ha.

Typhlodromus occidentalis và T urticae được nhiễm lên cây đậu nành Mô hình nay

chỉ tiền hành trong mùa hè Khoảng 62 triệu con nhện nhỏ bắt mỗi được sản xuất sau

3 tháng.

Trong khi P pesimilis và T occidentalis được nhân nuôi hoàn toàn trên conmỗi là nhện hại 7 urticae thì một vài loài nhện nhỏ bắt mỗi bao gồm Amblyseiuswomersleyi lại được nhân nuôi hang loạt trên nguồn thức ăn thay thé là phan hoa kếthợp với nhện hại 7: urticae (Mégevand và cs, 1993) Mặc dù vậy không thé nuôi thaythế hoàn toàn bằng phan hoa, việc bé sung phan hoa trong quá trình nuôi chỉ có thélàm tăng sinh sản của những loài nhện bắt mỗi này (Shih va Shieh, 1979) Vì vậy,nguồn nhện hại phải luôn luôn có sẵn (Scriven va McMurtry, 1971) Tuy nhiên, một

vài loài Amblyseius có thé nuôi hoàn toàn trên phấn hoa như Amblyseius hibisci,

Amblydromalus limonicus, Amblyseius similoides, A swirski, Amblyseius largoensis, Amblyseius elongatus và Iphiseius degenrans (McMurtry va Scriven,1965) Đối với những nhện nhỏ bắt mỗi Phytoseiid có thé nhân nuôi trên phan hoa thi

sẽ tạo điều kiện cho sản xuất hàng loạt với một số tiền và công sức lao động tối thiểu

vì nó loại bỏ được giai đoạn nhân nuôi nhện hại - chiếm phần lớn thời gian của quá

trình nhân nuôi.

1.1.5.4 Một số van đề khác của nhân nuôi nhện bat mỗi họ Phytoseiidae

Công nghệ nhân nuôi hàng loạt có giá trị kinh tế rất lớn và rất nhiều nghiêncứu được đầu tư vào việc xác định thức ăn thay thé và phát triển hệ thống sản xuất

Đi kèm theo một điều quan trọng không thé thiếu là bằng sáng chế, nó là một phancủa ngành công nghiệp kiểm soát sinh học, một số công ty đã được cấp bằng sángchế cho công nghệ sản xuất một số loài họ Phytoseiidae và con mồi nhân tạo củachúng Vi dụ: bằng sáng chế cho hệ thống sản xuất của A swirskii trên con mỗi nhântạo là nhện Carpoglyphus lactis L (Blockmans và van Houten, 2006), Thyreophagus

entomophagus (Laboulbéne) (Fidgett và cs, 2010) và Suidasia medanensis (= S.pontifica) Oudemans (Smytheman, 2011) cấp cho lần lượt là Koppert BiologicalSystems BV, Syngenta Crop Protection va Certis Europe BV.

17

Giao phối cận huyết và trôi dat di truyền là một vấn đề khác của hệ thong nhan

nuôi hàng loạt như là quan thé đã quen với môi trường nuôi nhốt điều này gây ảnhhưởng tiêu cực tới hiệu quả phòng trừ trên đồng ruộng (Nunney, 2003) Khả năngsinh sản giảm và tỷ lệ trứng nở thấp sau nhiều thé hệ liên tiếp giao phối giữa các anhchị em đã xảy ra đối với nhện nhỏ bắt mỗi Neoseiulus fallacis (Garman) va P.persimilis (Poe và Enns, 1970) khi nuôi liên tục qua nhiều thế hệ Hoy (1977), tuynhiên đã báo cáo rằng sự giao phối cận huyết ít ảnh hưởng tới khả năng sinh sản, tuổithọ và khả năng ton tại của Metaseiulus occidentails (Nesbitt) sau chin thé hé giaophối cận huyết Sự anh hưởng tiêu cực của việc giao phối cận huyết trên các thông sốquan thé khác nhau có thé khác nhau giữa các loài nhưng bang cách dam bảo về độlớn của quan thé trong các đơn vị nuôi, điều mà dé dàng có được với hầu hết cac loàithuộc ho Phytoseiidae, các đột biến có hại và trôi dat di truyền có thé ngăn chăn được(Nunney, 2003) Ảnh hưởng của việc nuôi nhốt kéo đài với tới biểu hiện trên đồng

ruộng là chưa rõ.

1.6.2 Một số nghiên cứu trong nước

Tại Việt Nam có rất ít công trình nghiên cứu về nhện bắt mồi, đặc biệt là cácnghiên cứu về đặc điểm hình thái sinh học và nhân nuôi sinh khối hàng loạt

Trong nghiên cứu về đa dạng thành phần loài NBM của họ nhện Phytoseiidaetrên bưởi da xanh tại Tiền Giang, Nguyễn Thị Phương Thảo và Võ Lê Ngọc Trâm(2020) đã xác định và mô tả hình thái bốn loài nhện bắt mồi Trong đó loài A eharai

là loài phong phú nhất

Đặc điểm hình thái A eharai:

Mô tả: Manh lưng trơn, láng Manh lưng có 17 cặp lông: 6D, 2M, 9L, lông ở

vị trí L9 rất dai, lông L4 và M2 đài, lông D1 và L1 đài vừa phải, các lông còn lại thìngắn và nhỏ

Kích thước (được tính bằng pm): mảnh lưng dài 338-340, rộng 180- 197 j1dai 38-39 , j3 48-50 , j4 8-11 , j5 6-8 , j6 8-12, J2 10-12 , J5 9-11 , z2 12-16 , z4

18

10-14, z5 6-9 , Z1 10-12, Z4 106-115, Z5 300-305, s4 107—110, S2 13 -16, S4 10-—16, S5 14, r3 11-12 , R1 11-15; khoảng cách giữa Stl —St 365 , St2 -St 267—69

„ St5 -St 568-79.

Manh bung dai 113-116, rộng 58-65, hậu môn rộng 68-74; túi nhận tinh dài15-18; kiềm dai 25, Sge I 46-47 , Sge II 36-38 , Sge III 50-52 , Sti II 43-46 , St II33-35, Sge IV 152-160, Sti IV 113-121, St IV 66-70.

(Nguôn: N.T.P Thảo và V L N Trâm, 2020)

Hình 1.8 Hình thai trong và ngoài của con cái A eharai

19

(a) Mặt lưng (độ phóng đại 40x); (b) bộ phận sinh dục (độ phóng đại 100x); (c) túinhận tinh (độ phóng đại 100x); (d) chan thứ 4 (độ phóng đại 40x); (e) chân kiềm (độphóng đại 100x) và (f) hình thái ngoài.

20

Chương 2

NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Thời gian và địa điểm

- Thời gian: Đề tài được thực hiện từ tháng 04/2022 đến 11/2022

- Địa điểm: Phòng thí nghiệm côn trùng thuộc phòng Công nghệ sinh học độngvật - Viện Sinh học nhiệt đới.

2.2 Vật liệu, dụng cụ, thiết bị thí nghiệm

2.2.1 Nguồn nhện nhỏ bắt mỗi và các loại thức ăn của chúng

Đối tượng nghiên cứu

- Nhện nhỏ bắt mỗi A eharai (Amitai & Swirski)

- Nhện nhỏ bắt môi 4.eharai được thu thập tại vùng trồng cây có múi tại TiềnGiang, sau đó đưa về phòng thí nghiệm tiễn hành phân loại và nhân nuôi nguồn

Nguồn thức ăn:

- Nhén đỏ hai cham 7: urticae và nhện đỏ son P citri được thu thập ngoài tựnhiên, đem về nhân nuôi trên cây đậu thận trồng trong nhà lưới cách ly côn trùng tạiViện Sinh học nhiệt đới.

- Nguồn phan hoa Typha latifolia (công ty Biobest) được thu mua và trữ lạnhtại -18°C, trước khi tiễn hành các thí nghiệm thì phan hoa được rã đông va git trong

tủ lạnh ở nhiệt độ 5°C.

- Nguồn trứng Artermia franciscana được mua ở cửa hàng cá cảnh, đem về

phòng thí nghiệm xử lý diệt phôi dưới tia cực tím.

- Thức ăn nhân tạo Arp sản xuất theo công thức của Nguyễn Đức Tùng (2014):16.6% sucrose, 16,6 % tryptone, 16,6% men bia, 6,7% fructose, 16,6% bột lòng đỏ

trứng, 0,13% hỗn hợp vitamin và 20% bột trứng xay khô của Artermia franciscana

21

2.2.2 Vật liệu nghiên cứu khác

- Hạt giống đậu thận

- Các vật dụng đề làm luống trồng cây trong nhà lưới

- Các vat dụng phục vụ nhân nuôi (hộp nhựa, xốp, bông gòn, dia petri )

- Bịch đựng mẫu, kéo và giấy để làm nhãn

- Hóa chất cần thiết cho quá trình nhân nuôi và thí nghiệm trong phòng.2.2.3 Dụng cụ, thiết bị thí nghiệm

- Kính lap, kính lap soi nổi, Panh, cọ quét, giấy thắm

- Hệ thống kệ có các tang dùng dé nhân nuôi

- Hệ thống đèn chiếu sáng, máy lạnh

- Một số dung cụ khác: chậu, 16, hộp

2.3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu

2.3.1 Đánh giá phương pháp nuôi phù hợp với A eharai

Thí nghiệm được tiến hành trong điều kiện phòng thí nghiệm (27 + 2°C, am độ

75 +2% và thời gian chiếu sáng 16L:8D) tại Viện sinh học nhiệt đới

Thí nghiệm được tiến hành với 3 phương pháp nuôi:

- Nuôi trong hộp plastic với miếng xốp

Day là phương pháp được thiết kế bởi McMutry và Scriven (1965), được cảitiến bởi Overmeer và cs (1982) Sử dụng hộp nhựa có kích thước 8 x 15 cm, day 5

cm, bên trong đặt miếng xốp có đường kính 3 cm (có khả năng giữ nước), bên trênmiếng xốp đặt giấy chứa lá của cây ký chủ cùng với con môi, bên trên mỗi hộp đượcphủ bởi giấy lụa thấm nước, đầu kia giấy lụa tiếp xúc với nước trong hộp plastic déđảm bảo nhện và con môi không thoát ra ngoài.

22

a hộp nuôi chứa nước

b miếng xốp

c nap đậy bằng nhựa

d giấy thấm

e chấtdính

Hình 2.1 Mô hình nuôi trên hộp plastic (Overmeer, 1985)

Phương pháp tiễn hành như sau:

Dung cụ bao gồm : khăn giấy, xốp giữ nước, hộp nhựa nuôi (8 x 15 cm, dày

5 cm) Cắt miếng xốp (5 x 12 em, day 3 cm), cho vào hộp có chứa sẵn nước cất, chiềucao của nước là 2 cm Tiếp theo dùng giấy thấm phủ lên miếng xốp sao cho 4 mépcủa giấy thấm chạm vào mép nước Tiếp đến cắt miếng lá sạch kích thước 3 x 10 emđặt lên trên, trên lá có chứa con mồi của nhện bắt mdi (trong thí nghiệm con mồi là

bọ tri) Chuyên nhện bắt môi lên lá và tiến hành theo dõi Cuối cùng đậy nắp nhựa vàcho vào tủ nuôi.

miệng xôp

23

- Nuôi trên lá riêng biệt

Nhén bắt mỗi được nuôi trên lá bưởi có chứa con môi, lá bưởi được đặt trênmiếng bông âm trong đĩa petri (đường kính 8,5 cm, cao 1,5 em) Dia petri này đượcđặt trong hộp hình chén và bôi nhựa thông xung quanh hộp hình chén này để ngăncản nhện bắt môi và con mồi thoát ra ngoai

- _ Nuôi trong lồng nuôi kín

+ Tiến hành theo thiết kế của Morales-Ramos và Rojas (2014)

Đối với 3 phương pháp nuôi này tiễn hành với số lượng con mdi phong phúcủa nhện đỏ hai chấm và nhện đỏ son Cung cấp 2 ngày một lần

Mỗi môi trường bố trí 10 hộp nuôi, mỗi hộp nuôi sử dụng 10 con cái nhện bắtméi vừa ghép đôi giao phối

Chỉ tiêu theo dõi

+ Tổng số cá thé nhện bắt mồi có trong quan thé sau một tuần nuôi (trứng, nhện

non, nhện trưởng thành) ở mỗi phương pháp nuôi khác nhau

+ Tỷ lệ nhện bat môi non, trưởng thành ở mỗi phương pháp nuôi khác nhau

Bố trí và xử lý số liệu

+ Thí nghiệm bố trí theo kiểu đơn yếu tố, 3 nghiệm thức

+ Số liệu xử lý bằng phần mềm Sigma Plot 11.0

2.3.2 Thí nghiệm đánh giá nguồn thức ăn nuôi phù hợp với A eharai

2.3.2.1 Thời gian sinh trưởng và phát triển của NBM trên 05 loại thức ăn

5 loại thức ăn được sử dụng dé xác định loại thức ăn phù hợp cho việc nhânnuôi sinh khối nhện bắt môi là: nhện đỏ hai chấm 7: urticae non tuổi 1, nhện đỏ son

P citri non tuôi 1, trứng Artermia franciscana, phan hoa Typha latifolia và côngthức thức ăn nhân tạo ArP (16.6% sucrose, 16,6 % tryptone, 16,6% men bia, 6,7%

fructose, 16,6% bột lòng đỏ trứng, 0,13% hỗn hợp vitamin và 20% bột trứng xay khô

của Artermia franciscana) (Nguyen và cs, 2014), trong công thức thay thế men biabăng men rượu.

24

Thí nghiệm được tiến hành trong điều kiện phòng thí nghiệm (27 + 2°C, âm độ

75 +2% và thời gian chiếu sáng 16L:8D) tại Viện sinh học nhiệt đới

Tiến hành chuẩn bị 50 hộp nuôi riêng biệt, và đặt một trứng của nhện nhỏ bắtmôi vào trong mỗi hộp nuôi

Mỗi loại thức ăn được cung cấp cho mười hộp nuôi Các hộp nuôi được kiểmtra mỗi ngày và thời gian sinh trưởng phát triển của nhện bắt mồi được ghi nhận chođến giai đoạn trưởng thành Các hộp nuôi được vệ sinh và cung cấp thức ăn 2 ngày 1

Chỉ tiêu theo đõi

So sánh thời gian sinh trưởng, phát triển của nhện nhỏ bắt mỗi (nhện non 6

chân, nhện non 8 chân, trưởng thành; trứng — trưởng thành) ở 5 loại thức ăn khác nhau.

Bồ trí và xử lý số liệu

+ Bồ trí thí nghiệm: thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoan toản ngẫu nhiên

gồm 5 nghiệm thức với 3 lần lặp lại Sơ đồ bồ trí thí nghiệm như sau:

+ Số liệu được xử lý bằng phần mềm Sigma plot 11.0

2.3.2.2 Khả năng sinh sản của nhện bắt mồi trên từng loại thức ăn

Nhện bat mồi được nuôi trên các loại thức ăn khác nhau đến giai đoạn lột xáclần cuối hóa trưởng thành thì tách chúng ra khỏi hộp nuôi cho lên từng đĩa petri riêngbiệt Mỗi con cho tiếp xúc với một trưởng thành đực trong vòng 2 ngày, nguồn thức

222

ăn vẫn là thức ăn mà chúng đã sử dụng trong giai đoạn phát triển Kiểm tra hộp nuôimỗi ngày Theo dõi thời gian từ lột xác lần cuối tới đẻ quả trứng đầu tiên, thời gian

đẻ trứng, và sau đẻ trứng.

Kha năng đẻ trứng của từng con cái: số lượng trứng đẻ mỗi ngày, tổng số trứng

đẻ của từng con cái trên từng loại thức ăn.

Chỉ tiêu theo dõi

+ So sánh thời gian đẻ trứng, tổng số trứng được đẻ, tuổi thọ của trưởng

thành nhện nhỏ bắt môi trên 5 nguồn thức ăn khác nhau

+ Bố trí thí nghiệm và xử lý số liệu được tiến hành như phan 2.3.2.1

Tiêm năng sinh sản của nhện bắt môi trên từng loại thức ăn (thiết lập bảng sống)

+ Tỷ lệ sống (Ix) = số nhện cái sống sót/ Tông số nhện cái theo doi ở ngàytuổi x

+ Sức sinh sản (mx) = số nhện cái sống sót trung bình do một nhện mẹ đẻ

ra ở tuôi x trong một đơn vi thời gian

+ Hệ số nhân của một thế hệ (Ro) là tổng số nhện cái sống sót do một nhện

mẹ đẻ ra trong một thế hệ, được tính theo công thức:

+ Lay logarit nghich co số e của r ta có G, là giới hạn tự nhiên Giới hạn tự

nhiên cho biết số lần quan thé tăng trong một đơn vị thời gian, được tính theo côngthức:

G = antilog, r

26