Khóa luận tốt nghiệp Công nghệ sinh học: Nghiên cứu quy trình chế biến trà hoà tan từ dịch chiết Linh Chi (Ganoderma lucidum)

Các nghiên cứu khoa học cũng đã chứng minh các chế phẩm từ Linh chi có tác dụng làm tăng hệ thống miễn dịch, chống các tế bào lão hóa, khử các gốc oxy tự do, sửa chữa cấu trúc ADN bị hỏn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀOTẠO _TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

NGHIÊN CỨU QUY TRINH CHE BIEN TRA HOA TAN TỪ

DICH CHIET LINH CHI (Ganoderma lucidum)

Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌCSinh viên thực hiện: CHAU NGUYET TAM

Mã số sinh viên: 18126144Niên khóa: 2018 — 2022

TP Thu Đức, 8/2023

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP

NGHIÊN CỨU QUY TRINH CHE BIEN TRÀ HÒA TAN TỪ

DỊCH CHIET LINH CHI (Ganoderma lucidum)

Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực hiện

ThS Võ Thị Thúy Huệ

KS Nguyễn Minh Quang Châu Nguyệt Tâm

TP Thủ Đức, 08/2023

học được tại trường sẽ là hành trang quý báu cho em sau này.

Đề tài “ Nghiên cứu quy trình chế biến trà hoà tan từ dich chiết Linh chỉ ” là sự

nồ lực và kết qua của quá trình học tập va trao dồi kiến thức và kĩ năng trong những nămtháng vừa qua Em cũng xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến Cô ThS Võ Thị Thuý Huệ

và Thầy KS Nguyễn Minh Quang đã giúp đỡ, hỗ trợ, hướng dẫn và đồng hành cùng emtrong suốt thời gian em làm khóa luận Sự hỗ trợ của 2 Thầy Cô là điều quý báu đối với

em và góp phần vào sự thanh công của đề tài Bên cạnh đó, em/mình xin cảm ơn sự giúp

đỡ của các anh, chị và các bạn ở phòng thí nghiệm Sinh hoá và phòng thí nghiệm Nắm

ăn - Nam dược liệu ở Viện Nghiên cứu Công nghệ Sinh học và Môi trường, trường Đạihọc Nông Lâm TP.HCM đã đồng hành, giúp đỡ, chia sẻ trong suốt thời gian học và làm

đề tài Kính chúc quý Thay Cô, anh chị và các bạn déi dao sức khỏe và thành công trong

công việc.

XÁC NHAN VA CAM DOAN

Tôi tên Châu Nguyệt Tâm, MSSV: 18126144, Lớp: DH18SHB thuộc nganh

Công nghệ Sinh học Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh, xin cam đoan: Đây

là khóa luận tốt nghiệp do bản thân tôi trực tiếp thực hiện, các số liệu và thông tin trong

nghiên cứu là hoàn toàn trung thực và khách quan Tôi xin hoản toàn chịu trách nhiệm

trước hội đồng về những cam kết này

Tp Hỗ Chí Minh, ngày 31 tháng 07 năm 2023

Người viet cam đoan

Châu Nguyệt Tâm

1

TÓM TẮT

Đề tài “Nghiên cứu quy trình chế biến trà hoà tan từ dich chiết Linh chi (GanodermaLucidum)” được thực hiện nhằm khảo sát nhiệt độ, tỷ lệ nguyên liệu/dung môi, thời giantrích ly polysaccharides từ nắm Linh chi thích hợp và nghiên cứu chế biến tra hoà tan từdịch chiết Kết quả nghiên cứu cho thấy hàm lượng polysaccharides tốt nhất khi trích ly

ở thời gian 100 °C, tỷ lệ nguyên liệu/dung môi là 1/20 và trích ly trong 90 phút, trích lytrong điều kiện này, hàm lượng polysaccharides đạt được là 16,76 mg/g Dịch chiết sẽđược nghiên cứu chế biến thành trà hoà tan với công nghệ sấy thăng hoa Công thứcphối trộn sản phẩm nghiên cứu được là tỷ lệ địch chiết Linh chi: tỷ lệ địch chiết cỏ ngọt:

tỷ lệ mật ong là 10:10:1 (ml), với hàm lượng Maltodextrin bồ sung là 15 % Bột trathành phẩm đạt điểm cảm quan là 15,97, xếp loại khá theo TCVN 3215:79, sản phẩm

có hiệu suất thu hồi đạt 19,48 %, độ âm là 4,72 % và hàm lượng tro tổng sé đạt 3,59 %.Sản phẩm được tiến hành kiểm tra các chỉ tiêu về vi sinh và kim loại nặng Kết quả chothấy sản pham không có sự xuất hiện của coliform, salmonella sp., nắm men —nd4m mốc,tổng số vi khuẩn hiếu khí là 2,4 x 103 CFU/g, trong sản phẩm cũng không phát hiện kimloại cadmi (cd) và chi (pb), lượng thuỷ ngân trong sản phẩm là 0,011 mg/kg Từ các kếtquả trên, sản phẩm đạt các chỉ tiêu về độ am, tro tổng số, các chỉ tiêu về vi sinh và kimloại nặng phù hợp với tiêu chuẩn và quy chuẩn Việt Nam và sản phẩm có cơ sở déthương mại hoá sản phẩm

Từ khóa: Nắm Linh chi, dịch chiết Linh chi, trà hoa tan

11

The topic "Research on processing process of instant tea from Ganoderma lucidum extract" was carried out to investigate the appropriate temperature, the ratio of raw materials/solvent, extraction time of polysaccharides from Ganoderma lucidum and research on processing soluble tea from the extract Research results show that the polysaccharides content is best when extracted at 100 °C The material/solvent ratio is

1/20 and pulled in 90 minutes Removed under this condition, the polysaccharides

content is 16,76 mg/g The extract will be researched and processed into instant tea with sublimation drying technology The researched product mix formula is the ratio of Ganoderma extract: the ratio of stevia extract: honey is 10:10:1 (ml), with additional Maltodextrin content of 15 % The finished tea powder has an organoleptic score of 15,97, graded fairly according to TCVN 3215:79 The product has a recovery efficiency

of 19,48 %, moisture content of 4,72 % and total ash content of 3,59 % Products are

tested for microbiological criteria and heavy metals The results showed that the product did not have the presence of coliform, salmonella sp., yeast - mold, the total number of

aerobic bacteria was 2.4 x 10° CFU/g, the product also did not detect metal cadmium

(cd) and lead (pb), the amount of mercury in the product was 0,011 mg/kg From the above results, the product meets the moisture, total ash, microbiological and heavy metal criteria by Vietnamese standards and regulations, and the product has a basis for commercialization.

Keywords: Ganoderma lucidum, Lingzhi extract, instant tea.

iv

DANE 6208 DR XIẾT TAT sanse68g9Y:40008000060901030860080300130049510305/8008)5130130./804 vii

eh Soh! NI, se sseeesssieiobiikoitdsgEtSiRdfoiSEfAdiodjgftztagồ0i-dOSigi3ui7005g00S1gi0:14gi6200-0gẸÓ ixDANH SÁCH HÌNH -222222+2222222222222.11 22 re xCHUONG 1 MỞ ĐẦU -2222-222222222222222111222211 2 re 1

TT eee 3

2 AID, HAT, lO -saxsssasigxtEHGIGSEEEGIEENSERIEGGERGGGSEEENEISISGRRGISIEIRDSESERGIEGSNSNBLJSRSS9S039088058 32.1.2 Đặc điểm sinh hoc oo eccscescesssecsessesecsessesecsessesessssesseseseesecsssssessesatsessvsaeseseneaeeees 42.1.3 Thanh phan hoá học chính của nắm Linh chi -2-©52522222222E22E+2S222z2zz>s2 4

2.1.3.1: Cáo polysaccharides %ã:PEDLLdGB VY GBÍscáccc se sen B 121258 131414g043613kE1GG380933353863800008A ý S32 Mini Tố ốố ốc 8

2.1.3.3 Những thành phẫu Bho cscnnenconensnecussenerncsnenncanneeneeyeesneticenensanensennenenenes 92.1.4 Giá trị dược liệu của nam Linh chi 222 S29S2+S£SE£EE2E£EEEEEEEEEE2EE2E2E22E 2E re 9

2.1.4.1 Phong ngtra ung n6 10

2.1.4.2 Tăng cường kha năng miễn dich 2- ¿2+ 522222222E2E22E2ESEzxrrxerrrrrrxrrs 11

2.1.4.3 Khả năng chống oxy hoá ¿22 2222222222E22E122E122122312212212221271 21122122 ee ll2.1.4.4 Điều trị bệnh đái tháo đường cee eeeseesseeseesesseeseeseesessesseeseeneeseees 117.1.4.5 NIệt số Đắc dụng: Thiẩo ca icici nha kh, 005,0 28MEC.g.023812474800z2c0860 T82.1.5 Tỉnh hình nuôi trằng nắm ở Việt Nam cá S0 2210110211211 6e 122.1.6 Tình hình nuôi trồng trên thế giới - 22 ©22S+2E+2E22E2E£2E22E22E222222222222e2 132.2 Công nghệ chế biến trà hoà tan - 2-2 ©2222222E222E2EE222E2212232221221221222 xe 142.2.1 Nguén g0 6i bi ao 142.2.2 Quy trình sản xuất trà hoà tan 2: 2¿2222222E12EE2EE22E223E2212232211221E22.22.crev 152.2.3 Một số sản phẩm trà hoà tan trên thị trường 22-2 2+2222z+2zz2zzzzzz2 152.2.4 Các loại sản phâm từ nam Linh chi 2222 S222222S£2E2EE2EE2EE2ZEzEzzzzcrxs 16CHƯƠNG 3 VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHAP csccccsscssessesessessesesessesessestsnesesseeeees 183.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu +- 2222+22++22E22E2EEEExerExrrrrrrrrrrrrres 18

3.2 Vật liệu nghiên cứu va phương pháp nghiên cứu - +52 ++s++c+s++<ss2 18 3.2.1 Vật GSU coe eccceccsceccseesssecsssessssesssvessuecssuesssvessuesssuesssecssuesesuesssesssuesssiessusessuessseeeseeeesees 18

5.2.2 Dựng eu và thiết ĐĨ sececsssseesenersressreremusrenmnvnevianrenaseneenennceneeurnenannreven 1858/5 THH dế aneuenanursnnnsrintnttoiettonttsgNtstSVIGSSSBI090GI27801V3010005g0050Nn8ã0030000007090001036 193.32 HHữữŒØ pháp HPHISH Ct nce cre scnereceeeerer enero sien eee 193.3.1 Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly polysaccharides trongnắm Linh chi -+£+2©2++22E+++22EEY++22213112271112221112271112.2.112122 re 193.3.1.1 Đánh giá chất lượng nguyên liệu nam Linh chi -2- 2552552255222 193.3.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ trích ly đến hàm lượng polysaccharides 223.3.1.3 Nghiên cứu lựa chọn tỷ lệ nguyên liệu/dung môi trích ly ảnh hưởng đến hàmTWH S POL VSACEHALIAES q x cxccenensonscncscsnncesnestissieteasiiies on dstiicins salinnancantivn ane ienbinten lantnndsthnandeatinn’ 223.3.1.4 Nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian trích ly đến hàm lượng polysaccharides

—.— " " 22

3.3.2 Nghiên cứu chế tao sản phẩm tra hoà tan từ dịch chiết Linh chi 233.3.2.1 Phương pip phối trộn sản phẩm e se -S.2.001.10000 12010106562 23

VI

3.3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của tỷ lệ phối trộn chất mang đến độ ẩm, hiệu suất thuhồi sản phẩm sau sấy thăng hoa, giá trị cam quan của sản phẩm - 233.3.3 Đánh giá chất lượng tra thành phẩm - 2 2 2 2+22E2+EE2E+zEEzExzzxzzxzzed 253.3.3.1 Độ âm được xác định theo TCVN 9741:2013 -2 2¿©22+22222z22xc2zzzzxcex 253.3.3.2 Tro tong số được xác định theo TCVN 5253:1990 2: 222222z22z2czsze2 25

3.3.3.3 Chỉ tiêu vi sinh vật theo TCVN 7975:2008 - 5-2 Sc2+sxsrrrrrrrrrrrrrrree 26 3.3.3.4 Chỉ tiêu kim loại nặng theo TCVN 7975:2008 72c SScsccserrerrees 26

BBA XU DY ii iấáảaảâiii<w£+DỪẶŸ54A 26

CHUONG 4 KET QUA VA THẢO LUAN - 2 2522522E2E22E2E22E22E22E22Ex2xe2 374.1 Nghiên cứu quá trình trích ly polysaccharide từ nam Linh chi 274.1.1 Đánh giá chất lượng nguyên liệu nam Linh chi -22©22252z+25+252z=2 34.1.2 Nghiên cứu lựa chọn nhiệt độ trích ly polysaccharides 55555 + 27

4.1.3 Nghiên cứu lựa chon ty lệ nguyên liệu/dung môi trích ly polysaccharides 28 4.1.4 Nghiên cứu lựa chọn thời gian trích ly polysaccharides - 28

4.2 Nghiên cứu chế tạo sản phẩm trà hoà tan từ dich chiết Linh chi 2943.1; NghiEn cñu tế lý phối trên săn thatthe sesseinovisddSL000100L060 004 0160310006581806101g4 294.2.2 Ảnh hưởng của nồng độ chất mang đến hiệu suất thu hỏi, độ âm, gia tri cảm quancủa san phẩm sau sấy thang hoa 2-22 222222E22E22E22EE2222221223122122122212212222222 2e 314.3 Đánh giá chất lượng sản phẩm trà hoà tan 2: 2¿©22222z+22£2EEZ222z222zzzzzze 33CHƯƠNG 5 KET QUA VÀ THẢO LUẬN 2-52 2+222EE2E22EE2EE2EEeEEcrxrrrrred 36

Oe STs 36

IO BYE ed h 36TÀI LIEU THAM KHẢO 2: ©222S222E22E22EE22E22EEEEEEEeErrrrrrerrrrerrrrec 37

PHỤ LỤC

Vil

: Dược điển Việt Nam chương 5

: Ganoderma lucidum polysaccharide : Ganoderma lucidum peptidoglycan : Ganoderma lucidum — polysaccharide : Nghiệm thức

: Tiêu chuẩn Việt Nam

vill

DANH SÁCH BANG

Bảng 2.1 Các hoạt chất sinh học và dẫn xuất trong nam Linh ch - 2-52 5252 5Bang 3.1 Nong độ đường chuẩn glucose ccccsecessessesssesseessesseestessesseessesseessesseees 20Bang 3.2 Bồ trí thí nghiệm các nghiệm thức nhiệt độ trích ly - 22Bang 3.3 Bồ trí thí nghiệm các nghiệm thức tỷ lệ nguyên liệu/dung môi trích ly 22Bảng 3.4 Bồ trí thí nghiệm các nghiệm thức thời gian trích ly 2- 52552 23Bang 3.5 Chỉ tiêu đánh giá cảm quan các công thức phối trộn sản phẩm 23Bảng 3.6 Chỉ tiêu đánh giá các nghiệm thức phối trộn Maltodextrin -.- 24

Bảng 3.7 Chỉ tiêu đánh giá cảm quan theo TCVN 3215:79 -c+cc+cccccecee 25

Bang 3.8 Các chỉ tiêu đánh giá vi sinh trong sản phâm 22- 2 52552222522 26Bang 3.9 Các chỉ tiêu đánh giá kim loại nặng trong sản phẩm - 2-2 22 26Bang 4.1 Kết quả đánh giá chất lượng nguyên liệu nắm Linh chi - 27Bang 4.2 Ảnh hưởng của nhiệt độ trích ly đến hàm lượng polysaccharides 27Bang 4.3 Ảnh hưởng của tỷ lệ nguyên liệu/dung môi trích ly đến hàm lượng

[00] NSIS] Wa a ae 28

Bang 4.4 Ảnh hưởng của thời gian trích ly đến hàm lượng polysaccharides 29Bang 4.5 Kết quả đánh giá cảm quan các công thức phối trộn 2- 5252 30Bang 4.6 Ảnh hưởng của tỷ lệ chất mang đến độ ẩm, hiệu suất thu hồi sản phẩm 31Bang 4.7 Kết quả đánh giá cảm quan tỷ lệ phối trộn Maltodextrin 32

Bảng 4.8 Độ ầm, hàm lượng tro tổng số của bột trả hoà tan -s- +cs+szzzxzzez 33

Bảng 4.9 Kết quả kiểm tra vi sinh và kim loại nặng của bột tra hoà tan 34

1X

Nam Linh chi (Ganoderma Lueiđum) - 5-5 s+s+Es£s+E££+EzEezxzEezxzsez 1

Quy trình sản xuất trà hoa tan -2- 22 22222E22EE22E22EE22E22E222E22EzExerkres 15

Da SUNG Hoài TẤT secsseeessssesssesaitbosdsbiosvsligipdgtigiEEBSSG090008300290 04E8-307L5973010005 850/006 16 Tra heatant Dipton Vi da@wsncuseeseeenene eer 16 Gar pid Linh Chi ses cpccssesecsesssesucesesacesansecacssuss wrasaneu eaanasnansinscayatusaazcareennenis 17 Trà CÚI low Vath: Chit eseecosesesuseeceseneccmaenes ees na eee eR 17 Bột DAWG tie camer: cme: cea eee: seers ares een aU ee 18

00010117 18 Mab DI Đi ssensescoaspinbinsnisDDrrabilBEoiSEESSESDSSSESEEINSEESHEESHSSSESSS GISSSEDIGISHEGSSSHES4438 008088 18

Đồ thi đường chuẩn Anthrone-Sulfuric - 222 2+222S+2E+2z2zzzz£zzzzzxczxz 21Bột trà hoa tan Linh chi sau khi sấy thăng hoa - -z - 3 Í

Dich trà Linh chi pha từ bột trà hoà tan - 552522 <++2*++2£++eeezsessee 33 shes Cee) 35

CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Trên thé giới có khoảng 2.000 loài nắm ăn được, trong đó có 80 loại nam ăn ngon

va được nuôi trồng nhân tạo Ở Việt Nam, nganh nam đang ngày càng phát triển, cácloại nắm được trồng phô biến là: mộc nhĩ, nam rơm, nam mỡ, nam bào ngư, nam linhchi các loại Nước ta có tiềm năng lớn về sản xuất nắm ăn và nam duoc liệu do cónguồn nguyên liệu trồng nắm phong phú, nguồn lao động nông thôn dồi dào, điều kiệnthời tiết thuận lợi cho phát triển nhiều chủng loại nắm và có thé trồng nắm quanh năm

Nấm Linh chi có chứa các hợp chất có hoạt tính sinh học cao có tác dụng làm

thuốc hỗ trợ và điều trị bệnh Nam Linh chi được coi là “thần được” giúp kéo dai tuôi

thọ, ngăn ngừa lão hóa, tăng sức déo dai cho co thé Các nghiên cứu khoa học cũng đã

chứng minh các chế phẩm từ Linh chi có tác dụng làm tăng hệ thống miễn dịch, chống

các tế bào lão hóa, khử các gốc oxy tự do, sửa chữa cấu trúc ADN bị hỏng; ngoài ra còn

có khả năng dao thải chất phóng xạ, hạn chế và loại trừ những tổn thương phóng xạ ở

mô và tế bào Ngoài ra, nam linh chi còn giúp lam giảm mệt mỏi và tram cảm, tình trạng

suy nhược thần kinh (đau đầu, chóng mặt), và giúp cải thiện chất lượng cuộc sống.

Hiện nay, Việt Nam cũng như nhiều nước trên thế giới, với xu hướng "trở về

thiên nhiên" thì việc sử dụng các loại thảo dược ngày cảng gia tăng Thảo dược không

chỉ là nguồn cung cấp nguyên liệu cần thiết cho ngành Y Dược mà còn thật sự hữu ích

cho cả ngành sản xuất thực phẩm, mỹ phẩm, hương liệu Sản xuất các sản phẩm thực

phẩm thiết yếu sạch, hoàn toàn từ thiên nhiên là hướng đi phù hợp với xu hướng hiệnnay là hướng tới thiên nhiên chăm sóc sức khỏe cộng đồng Song song đó, xã hội ngàycàng phát triển, con người cũng bị cuốn mình theo lối sống hiện đại, nhịp sống hối hả,vội vàng nên thường ưu tiên dùng những thực phẩm nhanh chóng, tiện lợi Hiểu đượcvấn đề đó, với mục đích tạo ra một loại thức uống nhanh chóng, tiện lợi có nguồn sốc

từ các loại thảo được, có nhiều hoạt tính sinh học quý giá Sử dụng nguyên liệu chính là

nam Linh chi kết hợp cùng các loại thảo dược khác và nghiên cứu công nghệ tạo ra tra

hoà tan, đề tài “Nghién cứu chế biến trà hoà tan từ dịch chiết Linh chi” đã được thực hiện

1.2 Mục tiêu nghiên cứu

Nghiên cứu quy trình trích ly cho hàm lượng polysaccharides cao từ dịch chiết

nắm Linh chi

Nghiên cứu chế biến thành công trà hoà tan từ dịch chiết.

Kiểm tra chat lượng trà thành phẩm theo các quy chuẩn, tiêu chuan Việt Nam

1.3 Nội dung thực hiện

Nội dung 1: Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích lypolysaccharides từ nắm Linh chi

Nội dung 2: Nghiên cứu chế biến trà hoà tan Linh chi

Nội dung 3: Đánh giá chất lượng trà thành phẩm

CHƯƠNG 2 TONG QUAN TÀI LIEU

"Thần Nông Bản Thảo”, cách đây 2000 năm, Linh chi được xếp vào loại "Thượngdược”, có tác dụng bồi dưỡng cơ thê và chữa bệnh tốt hơn Nhân sâm Đầu đời nhà Minh(1595), dựa vào màu sắc, Linh chi được phân làm 6 loại (Lục Bao Linh chi) Linh chiluôn được xem là "Thượng dược” trong các loại thuốc Y học cô truyền, có tác dụng tốttrong chữa bệnh, chăm sóc và bảo vệ sức khỏe cho con người.

2.1.1.2 Phân loại

Tên gọi : Nam Linh chi, Nam trường thọ,

Tén khoa hoc : Ganoderma lucidum

Nam Linh chi có vị trí phân loại được thừa nhận rộng rãi hiện nay (Nguyễn Lan

Dũng, 2001)

Giới (regnum) : Nam (Fungi)

Ngành (phylum) : Nam Dam (Basidiomycota)

Lớp (class) : Agaricomycetes

Bộ (ordo) : polyporales

Ho (familia) : Nam 26 (Ganodermataceae)

Chi (genus) : Ganoderma

Loai (pecies) : Ganoderma lucidum

2.1.2 Đặc điểm sinh học

Nam Linh chi gồm 2 phan: cuống nắm và mũ nam Cuống nam dai hoặc ngắn,thường có hình trụ, hoặc thanh mãnh (đường kính từ 0,5 cm — 3 cm), cuống ít phânnhánh, đôi khi có uốn khúc cong queo (do biến dạng trong quá trình nuôi trồng) Lớp

vỏ cuốn láng đỏ, nâu đỏ, nâu den, bóng, khéng có long phủ suốt bề mặt tán nam

Mũ nam dang thận — gan tròn, đôi khi xòe hình quạt hoặc ít nhiều di dạng Trênmặt mũ nấm có van gon đồng tâm và có tia rảnh phóng xa, màu sắc từ vàng chanh -

vàng nghệ - vàng nâu - vàng cam - đỏ nâu - nâu tím - nâu đen, nhẫn bóng Khi gia, sim

màu lớp vỏ láng, lớp phấn đỏ nâu trên bề mặt ngày càng nhiều và càng dày hơn Kíchthước tai nắm biến động, từ 2 - 36 cm, dày 0,8 - 3,3 cm Phần đính cuống hoặc gỗ lênhoặc lõm xuống như lõm ron

Phan thịt nam dày từ 0,4 - 2,2 cm, chat lipe màu vàng kem - nâu nhot - trắng kem,phân chia kiểu lớp trên và lớp dưới Thấy rõ ở các lớp trên, các tia sợi hướng lên Trênlát cắt giải phẫu hiển vi, chỉ thấy đầu trên các sợ phình hình chùy, màng rất dày, đankhít vào nhau, tạo thành lớp vỏ láng (dày khoảng 0,2 - 0,5 mm) Nhờ lớp láng bóng

không tan trong nước do đó mà nam chịu được nắng, mưa Ở lớp đưới hệ sợi tia xuốngđều đặn, tiếp giáp vào tầng sinh bào tử (Lê Xuân Thám, 1996)

2.1.3 Thành phan hoá học chính của nắm Linh chi

Thành phan hoạt chat sinh học của nam Linh chi gồm 119 chat, trong đó một sốkhoáng tố như germanium hữu co, vanadium, crôm, hay các hợp chat polysaccharide vatriterpenoid, đã được khang định là nhân tố quan trọng trong phòng chống ung thư, di

ứng, lão hóa, xơ vữa, đông máu nội mạch, giúp điều chỉnh dẫn truyền than kinh, bảo vệ

câu trúc của nhân tê bảo.

Bảng 2.1 Các hoạt chất sinh học và dẫn xuất trong nắm Linh chỉ

Hoạt chất Nhóm chất Hoạt tính dược lý Loại mô nam

¬¬ Kích thích hệ miễn dịch RNA Nucleic acid , ; Bao tu

Chong virutKhông xác định Alkaloid Bồ tim Qua thé

; Uc chế khối u :

Không xác định Glycoprotein Qua thé

Tang su luu thong mau

Ganoderic acid Triterpenoid ; Qua thé

cholesterol Giảm huyết ap

Ganodermadiol Triterpenoid Uc ché ACE Qua thé

Tang sự lưu thông máuAdenosine Nucleoside Thu gian co, giam dau Hệ soi nam

Chống khối u

Kích thích hệ miễn dịch "¬

B-D-glucans , , Hệ soi nam

Tang san xuat khang théUridine, Uracil Nucleoside Phục hồi sự déo dai Hệ sợi namCyclooctasulpher Chéng di ứng Hệ sợi nam

(Nguyễn Minh Khang, 2005)

Trong một nghiên cứu về những thành phan của nam, Mau va ctv (2001) đã xácđịnh được tỷ lệ của các thành phần chủ yếu trong nam Linh chi gồm: tro (1,8%),carbohydrate (26 - 28%), chất béo thô (3 - 5%), chất xơ (59%) và protein (7 - 8%) Hàm

lượng của protein trong nam linh chi khoảng 7- 8%, thấp hơn so với nhiều loại nam khác

(Chang và ctv, 1996; Mau và ctv, 2001) Đặc biệt thành phần protein của nam Linh chi

có rất nhiều các amino acid thiết yếu nhất là lysine va leucine Ham lượng chat béo tổngthấp nhưng chứa nhiều acid béo không bão hòa nhiều nối đôi, đây là các hợp chất rất có

lợi cho sức khỏe của con người (Chang và ctv, 1996; Borchers và ctv, 2008; Sanodiya

và ctv, 2009) Ngoài ra trong nam còn chứa các glycoprotein và các polysaccharide

Bên cạnh đó, nắm Linh chi có chứa rất nhiều những phân tử có hoạt tính sinh họcnhư các terpenoid, các steroid, các phenol, các nucleotide và những dẫn xuất của chúng.Hoạt tính sinh học của nam Linh chi có được chủ yếu là do các polysaccharide,peptidoglycan và các triterpene mang lại ( Zhou và ctv, 2007) Về mặt định lượng, trongmột thí nghiệm, Chan va ctv (2008) đã phân tích thành phần của 11 mẫu nấm Linh chithương mại (được mua tại Hồng Kông) và nhận thấy có sự khác biệt về hàm lượng cáctriterpene cũng như các polysaccharide giữa các mẫu, trong đó các triterpen dao độngtrong khoảng từ 0 - 7,8% và các polysaccharide thay đổi từ 1,1 - 5,8% Theo các tác giảnày, có nhiều nguyên nhân dẫn đến sự khác biệt về hàm lượng của hai nhóm hoạt chất

này, một trong những nguyên nhân chính là sự khác biệt về giống loài, ngoài ra điều

kiện môi trường trong quá trình nam phát triển cũng ảnh hưởng khá lớn đến thành phan

hoạt chất của nam

Địa điểm sinh trưởng của nắm Linh chỉ cũng được xem là yếu tố ảnh hưởng đếnhàm lượng của các hoạt chất sinh học có trong nam Linh chi Trong một nghiên cứu vềhoạt tính sinh học của 11 mẫu sản phâm nam Linh chỉ được trồng ở Nhật Bản, người tanhận thấy sự chênh lệch về hàm lượng triterpenoid giữa các mẫu dao động trong khoảng

từ 0 - 7,8% và hàm lượng các polysaccharide dao động trong khoảng từ 1,1 - 5,8% (Lu

và ctv, 2012) Sự khác nhau về hàm lượng của các hoạt tính sinh học trong các sản phẩmthương mại cũng chịu ảnh hưởng bởi quá trình chế biến hoặc chiết xuất, qua đó cho thấychiết xuất bằng nước sẽ cho hàm lượng triterpenoid ít hơn khi chiết xuất bằng ethanol(Lu và ctv, 2012) Bên cạnh đó, điều kiện sinh trưởng cũng ảnh hưởng đến hàm lượngcủa các hoạt chất sinh học có trong nam linh chi (Lu và ctv, 2012)

Hoạt tinh sinh học của nam Linh chi có được chủ yếu là do các polysaccharide,

peptidoglycan và các triterpene mang lại.

2.1.3.1 Các polysaccharides và peptidoglycan

Ham lượng carbohydrate va hàm lượng chat xơ có trong nam Linh chi được xácđịnh lần lượt từ 26- 28% và 59% (Mau va ctv, 2001) Nam Linh chi có chứa rất nhiềupolysaccharides có khối lượng phân tử lớn, các hợp chất này mang hoạt tính sinh học vàđược tìm thấy ở tất cả các bộ phận của nam linh chi Nhiều nhóm polysaccharides cóthé được chiết xuất từ thân nam, bao tử và khuẩn ty Các polysaccharides của nam Linhchi có tác dụng sinh học như chống viêm, hạ đường huyết, chống loét, chống lại sự hìnhthành khối u và tăng cường kha năng miễn dịch (Miyazaki và ctv, 1981; Hikino và ctv,

1985; Tomoda và ctv, 1986; Bao và ctv, 2001; Wachtel-Galor và ctv, 2004).

Người ta thường chiết xuất các polysaccharides trong nam Linh chi bằng nướcnóng sau đó tiễn hành kết tủa chúng bằng dung dich ethanol hoặc methanol Đôi khicũng có thé chiết xuất bằng nước và dung dịch kiềm Theo kết qua phân tích, thành phầnchủ yếu trong polysaccharide của nam linh chi (Ganoderma lucidum- polysaccharides:GL- PSs) là đường glucose (Bao va ctv, 2001; Wang va ctv, 2002) Ngoài ra, GL- PSscũng có cau tric polymer mạch thang, bao gồm: xylose, mannose, galactose va fucose

với nhiều vị trí liên kết B hoặc a khác nhau như 1- 3, 1- 4 va 1- 6 với các dang đồng

phân - D hay L (Lee và ctv, 1999; Bao và ctv, 2002) Khả nang chống lại sự hình thànhkhối u của GL- PSs phụ thuộc vào cấu hình mạch nhánh cũng như tính tan củapolysaccharide này (Bao và ctv, 2001).

Nghiên cứu của Zhao và ctv (2010) đã thực hiện tách chiết hợp chấtpolysaccharides từ nấm Linh chi (GLP), thành phan polysaccharide gồm: xylose,

fructose, glucose, sucrose va maltose với ti lệ tương ứng 0,4%, 14,4%, 12,8%, 0,7% và

50,9% Nhóm nghiên cứu đã tiến hành tiêm hợp chất polysaccharides tách chiết từ nắmLinh chi (GLP) vào cơ thé chuột (chuột mắc bệnh tiểu đường với liều lượng (100, 200,

300 mg/kg)) nhằm ghi nhận ảnh hưởng của chiết xuất các enzym chống oxy hóa hoạtđộng và mức độ peroxy lipid của tuyến tụy Kết quả cho thấy GLP chiết xuất có tácdụng giảm tốn thương oxy hóa và ức chế apoptosis bằng cách tăng các hoạt động enzymechống oxy hóa và biến đổi biéu hiện giữa bel-2 và bax/bel-2 Nghiên cứu của Xu và ctv(2011) về vai trò của polysaccharide được chiết tách từ nam Linh chi (GanodermaIueidum - GLPS) trong điều trị khối u và các cơ chế liên quan Trong cả hai trường hợpnghiên cứu in vitro và in vivo điều cho thấy các hoạt động chống khối u của GLPS.GLPS ảnh hưởng đến các tế bào miễn dịch và các tế bào tham gia trong quá trình miễn

dịch như: các tế bào lympho B, tế bào lympho T, đại thực bảo Ngoài ra, nghiên cứu gần

đây cũng cho thấy rằng GLPS ngăn chặn sự phát triển của tế bào ung thư hoặc ức chế

sự phát triển của khối u thông qua tác dụng gây độc trực tiếp lên tế bảo

Có rất nhiều peptidoglycan có hoạt tính sinh học trong nắm linh chi đã được phânlập, bao gồm proteoglycan (GLPG) có tác dụng kháng virus (Li va ctv, 2005), tăngcường miễn dich (Ji va ctv, 2007)

2.1.3.2 Triterpenes

Terpenoid là nhóm chất tự nhiên, có độ dài mạch carbon là một bội số của 5, ví

dụ như menthol (monoterpene) và B- carotene (tetraterpene) Phần lớn các terpenoid

thuộc nhóm alkene, một số có chứa những nhóm chức năng, đa phần các terpenoid có

cấu trúc mạch vòng Những hợp chất này được tìm thấy trên rất nhiều loài thực vật.Terpenoid có tác dụng chống viêm, chống lại sự hình thành các khối u và giúp giảmhàm lượng chất béo Terpenoid được tìm thấy trong các loại thực vật thuộc nhóm bạchqua, ví dụ như hương thảo (Rosemarinus officinalis) và nhân sâm (Panax ginseng) có tác dụng tăng cường sức khỏe (Mahato và ctv, 1997; Haralampidis va ctv, 2002).

Triterpene là một phân lớp của terpenoid và có độ dài mạch carbon là 30 Khối

lượng phân tử khoảng từ 400 đến 600 kDa, triterpene có cấu trúc hóa học phức tạp và

có khả năng bị oxy hóa cao (Mahato và ctv, 1997; Zhou va ctv, 2007) Nhiều loài cây

có khả năng tổng hợp triterpene trong quá trình sinh trưởng và phát triển Một số cóchứa nhiều triterpene trong nhựa, qua đó giúp các cây này chống lại các loại bệnh Mặc

dù có hàng trăm loại triterpene đã được phân lập từ rất nhiều loại thực vật khác nhau vàphân nhóm này cũng đã cho thấy có rất nhiều tiềm năng nhưng hiện nay có rất ít nhữngứng dụng của triterpene được sử dụng trong thực tế

Trong nam Linh chi, cấu trúc hóa học của triterpene có dang lanostane, đây là

chất tham gia vào quá trình tổng hợp nên lanosterol, quá trình sinh tông hợp giúp hình

thành nên các squalene mạch vòng (Haralampidis và ctv, 2002) Trong quá trình chiết

xuất triterpene, người ta thường sử dụng các dung môi hữu cơ như methanol, ethanol,

acetone, chloroform, ether hoặc là hỗn hợp của chúng Dịch chiết sau đó sẽ được phân

tách bằng nhiều phương pháp khác nhau, có thể dùng HPLC thông thường hoặc HPLC

pha nghịch đảo (Chen và ctv, 1999) Những triterpene đầu tiên được Kubota phân tách

từ nam linh chi là ganoderic acid A và B (Kubota và ctv, 1982) Ké từ khi đó, hơn 100loại triterpene cùng với cấu hình của chúng đã được tìm ra Trong số đó, có hơn 50 loại

8

là đặc trưng chỉ được tìm thấy trong nam linh chi Da số các triterpene là các ganoderic

và lucidenic acid, nhưng cũng có một số loại khác như là ganoderal, ganoderiol và

ganodermic acid.

Nam linh chi rất giàu ham lượng các triterpene, những chat nay cũng góp phantạo nên vị đắng của nam linh chi Chúng mang nhiều hoạt tính sinh học có lợi cho sứckhỏe, như khả năng chống oxy hóa và giảm hàm lượng chất béo trong cơ thê Tuy nhiên,hàm lượng triterpene trong nam linh chi lại không 6n định Chúng phụ thuộc rất nhiềuvào giống, loài, nơi trồng, điều kiện canh tác cũng như phương pháp chế biến, điều này

đã được thé hiện trong một nghiên cứu của Chen và Su được tiễn hành vào năm 1999

và 2001 (Chen va ctv, 1999; Su va ctv, 2001).

2.1.3.3 Những thành phan khác

Tiến hành phân tích thân nam Linh chi, người ta còn tìm thấy thành phan chatkhoáng như phospho, silicon, sulfur, kali, calcium và magnesium chiếm một tỉ lệ khácao Bên cạnh đó còn có sắt, nhôm, kẽm, đồng, mangan và strontium với hàm lượngthấp hơn Ngoài ra còn có một số kim loại nặng như chì, cadmium và thủy ngân (Chen

và ctv, 1998).

Trong thành phan của nam Linh chi (Ganoderma spp) có một chat cũng nhậnduoc rat nhiéu su quan tam, do la germanium Day 1a chất có ham lượng nhiều thứ 5trong các chất khoáng (489 ug/g) có trong nam Linh chi Chất này tồn tại rat ít ở cácloại thực vật trong tự nhiên, chỉ một phần rất nhỏ được tìm thấy trong nhân sâm, lô hội

và tỏi (Mino va ctv, 1980) Mặc du germanium không phải là thành phần thiết yếu,nhưng chỉ cần một liều lượng thấp cũng đã có tác dụng tăng cường khả năng miễn dịch,kháng khối u, chống oxy hóa và chống đột biến (Kolesnikova và ctv, 1997)

Những hợp chất khác cũng được tìm thấy trong nam Linh chi đó là các loạienzyme như metalloprotease (đây là loại enzyme có tác dung trì hoãn quá trình đông máu) Ngoài ra, ergosterol (provitamin D2), các nucleoside và các nucleotide (như

adenosine và guanosine) (Wasser và ctv, 2005; Paterson và ctv, 2006) cũng đã được tìm

thay trong nam linh chi, đây là những hợp chất có tác dụng ức chế thuận nghịch ølucosidase và SKG-3.

a-2.1.4 Giá trị dược liệu của nam Linh chi

Nghiên cứu của Nguyễn Thị Chính (2004) về việc sử dụng sinh khối nắm Linhchi trong hỗ trợ điều trị đối với bệnh nhân viêm gan B, bệnh nhân ung thư phối tại các

9

bệnh viện K, bệnh viện Xanh-pôn Hà Nội cho thấy, hiệu quả của nam Linh chi có tácdụng rõ rệt, giảm tỷ lệ men gan, ức chế sự phát triển khối u giúp cải thiện tình trạng sức

khỏe của bệnh nhân.

Nhiều công trình nghiên cứu về Linh chi đã chứng minh trong Linh chi chứanhiều hop chất germanium va polysaccharide có tác dụng thúc day quá trình trao đổichất; làm chậm quá trình lão hóa; tăng cường miễn dịch cho cơ thể; nâng cao khả năng

dé kháng bệnh; điều tiết hệ thần kinh trung ương, giúp thăng bang cơ năng: én địnhhuyết áp; bảo vệ gan; bé não, tăng trí nhớ; giảm nhẹ các tác dụng phụ ở bệnh nhân ungthư khi điều trị bằng hóa dược liệu Linh chi (Ganoderma lucidum) là một loại nam thảodược có nhiều lợi ích cho sức khỏe con người Kết quả nghiên cứu của nhóm tác giảZhao và ctv (2010) về tác dụng của nắm Linh chỉ đối với điều hòa hoạt động tế bảo ungthư biểu mô buồng trứng (EOC) cho thấy nam Linh chi giúp giảm mạnh số lượng tế baoung thư biéu mô buồng trứng (EOC), ngoai ra giúp ức chế hình thành tế bao mới, di căn

tế bào và sự hình thành tế bào hình tự cầu Đặc biệt, nam Linh chi giúp tăng hiệu quatrong việc ức chế sự tăng trưởng tế bảo trong cả hai tế bào mẫn cảm hóa chất và tế bảokháng hóa chất và tăng cường đáng ké hiệu qua của cisplatin trên các tế bao EOC

2.1.4.1 Phòng ngừa ung thư

Nam Linh chi được sử dụng phô biến trong quá trình hỗ trợ điều trị ung thư nhằm

giúp tăng cường khả năng miễn dịch cho các bệnh nhân bên cạnh áp dụng những liệu

pháp chữa trị thông thường Mặc dù hiện nay quá trình điều trị bệnh ung thư đã có nhữngtiễn bộ nhất định thông qua việc chan đoán bệnh sớm cũng như những phương pháp hoátrị hiện dai, tuy nhiên việc chữa dứt điểm các căn bệnh này vẫn còn gặp rất nhiều khókhăn thử thách (theo WHO 2008) Trong quá trình tìm kiếm những phương pháp điều

trị và những tác nhân hoá trị mới, người ta đã tìm ra trong hàng trăm loài thực vật, trong

đó có cả nam Linh chi, những hoạt chất sinh học có khả năng ngăn chặn quá trình hìnhthành khối u (Wasser và ctv, 1999; Borchers và ctv, 2008) Trong nắm Linh chi có mộtlượng lớn những hợp chat hoá học có thể được chiết xuất từ thân nấm, sợi nắm va bao

tử Trong đó, các polysaccharide va triterpene là 2 nhóm hợp chat chính trong nam Linhchi có tác dụng ngăn ngừa ung thư và ngăn chặn quá trình hình thành khối u, điều này

đã được chứng minh trong những nghiên cứu của Yuen và ctv (2005) cũng như của

Zaidman và ctv (2005) Một trong những tác dụng mới được tim thấy của dich chiết nắm

10

Linh chi là có khả năng hỗ trợ điều trị cho các căn bệnh mãn tính, ví dụ như bệnh ungthư và bệnh liên quan đến gan Những thí nghiệm trên động vật đã cho thấy hiệu quảđáng kể trong việc ức chế sự hình thành và di căn của các tế bào ung thư Tuy nhiên,việc tiến hành những thí nghiệm này trên cơ thé người vẫn còn hạn chế.

2.1.4.2 Tăng cường khả năng miễn dịch

Những tác nhân giúp làm tăng khả năng hoạt động của hệ miễn dịch cũng có tácdụng tăng cường sức khoẻ, qua đó giúp ngăn ngừa bệnh tật Nhiều thành phan trongnam Linh chi đã được chứng minh có tác dụng tăng cường sự sinh trưởng và phát triểncủa các tế bào lympho, các bạch cầu đơn nhân, các tế bao NK (natural killer cells) (Bao

và ctv, 2001; Cao và ctv, 2002; Zhu va ctv, 2007) Trong một nghiên cứu của Chang va

ctv (2009) được tiến hành trên chuột BALB/c cho thấy dịch chiết nắm Linh chi chứanhiều polysaccharide có tác dụng tăng cường sự sinh trưởng và phát triển của các tế bàospleno và hoạt tính của các đại thực bao và các té bao NK

Trong một nghiên cứu khác cua Wang và ctv (1997), polysaccharides có trong

nắm Linh chỉ có tác dụng làm tăng khả năng hoạt động của các tế bào lympho T vàcác đại thực bào, bằng cách làm tăng hàm lượng IL- 1B, TNF-a và IL-6 Cũng trongmột nghiên cứu khác, quá trình ủ của các đại thực bao và các tế bao lympho T bằngcác polysaccharide đã cho thay hàm lượng TNF- a và INF- y tăng lên (Zhang va ctv,

1999).

2.1.4.3 Khả năng chống oxy hoá

Những hợp chất chống oxy hoá trong thực vật có tác dụng ngăn ngừa ung thưcũng như những căn bệnh nan y khác Những hợp chất này có tác dụng bảo vệ các thànhphan có trong mang tế bào chống lại những tốn thương do quá trình oxy hoá gây nên,qua đó giúp làm giảm những nguy cơ gây ra đột biến và ung thư cũng như góp phần bảo

vệ các tế bào miễn dịch Những hợp chất có trong nam Linh chi chủ yếu là các

polysaccharide và các triterpene cũng có tác dụng chống lại quá trình oxy hoá tế bào

(Lee và ctv, 2001; Wachtel-Galor và ctv, 2005; Yuen và ctv, 2008).

2.1.4.4 Điều trị bệnh đái tháo đường

Những thành phần của nắm Linh chi đã được chứng minh là có tác dụng hạ đườnghuyết đối với động vật Các ganoderan A và B là hai polysaccharide được chiết tách từthân nắm Linh chi, sau khi được tiêm cho chuột bị tiểu đường với liều lượng 100 mg/kg,cho thấy hàm lượng glucose trong máu giảm và tác dụng hạ đường huyết vẫn tiếp tục

11

kéo dài suốt 24 giờ Cũng trong một thí nghiệm trên chuột, ganoderan B có tác dụnglàm tăng lượng insulin, qua đó làm giảm hàm lượng glucose trong máu và điều chỉnh

quá trình tổng hợp glucose dưới tác dụng của các enzyme có sẵn trong gan Trong một

nghiên cứu khác cũng được tiễn hành trên chuột, người ta đã chứng minh được rằng một

polysaccharide khác có trong nam Linh chi được gọi là ganoderan C cũng có tác dụng

hạ đường huyết (Tomoda và ctv, 1986)

2.1.4.5 Một số tác dụng khác

Một số tác dụng khác của Linh chi như 6n định huyết áp, lọc sạch máu, chốngquá trình lão hoá, có tác dụng đối với các bệnh về tim mạch và hô hấp, tác dụng giảmđau, bảo vệ gan.

2.1.5 Tình hình nuôi trồng nắm ở Việt Nam

Từ những năm 70 đặc biệt trong những năm 80 và 90 của thế ky XX, ở Việt Namnam Linh chi đã được quan tâm và nghiên cứu nhiều về thành phan hoá học cũng nhưtác dụng được lý và quy trình sản xuất ra các chế phẩm Hiện nay các chế phẩm từ Linhchi rất được con người ưa chuộng và sử dụng ngày càng rộng rãi với nhiều hình thức đadạng về chủng loại như: thuốc tiêm, cồn thuốc, cao dan, thuốc xông và cao thuốc dùngngoài Việc nghiên cứu nhóm hoạt chất làm thuốc còn hạn chế, cần được quan tâm nhiềuhơn Trong công nghiệp điều chế, nhóm polysaccharides rất được chú ý, ngoài ra cácacid amin và các nguyên tố vi lượng rất đáng được quan tâm

Ở Việt Nam nhiều công trình nghiên cứu của các nhà khoa học đã khang địnhnam Linh chi có thể chữa khỏi hoặc hạn chế các bệnh hiểm nghèo như ung thu, đáiđường, tim mạch, hô hap Giá trị dược liệu của nam Linh chi đã được ghi chép trong cácthư tịch cổ cách đây khoảng 4000 năm Trong thần nông bản thao đã đề cập đến 365duoc thảo và Linh chi được xếp vào thượng dược, ở vi trí số 1 sau đó mới đến nhân sâm

va phân biệt Linh chi theo màu sắc: xích chi (Linh chi đỏ), huỳnh chi (Linh chi vàng),

hắc chi (Linh chi đen), tử chi (Linh chi tim), bạch chi (Linh chi trắng) và thanh chi (Linhchi xanh) có tác dụng lam thuốc tốt nhất nên gọi là lục bao Linh chi

Ngành nuôi trồng nam dược liệu trong những năm gan đây phát triển mạnh mẽ,tông sản lượng đạt ước tính khoảng 100,000 tắn/năm, kim ngạch xuất khẩu đạt khoảng

40 triệu USD Trong đó, nam Linh chi được nuôi trồng phổ biến ở các địa phương như

Sơn La, Lào Cai, Hà Giang, Hà Nội, Hưng Yên, Vĩnh Phúc, Ninh Bình, Lâm Đồng .dùng dé cung cấp dược liệu trong nước, bổ sung cho thực phẩm và một phan dé xuất

12

khẩu (thông báo số 2961/TB - BNN - VP, 2012) Với công nghệ ngày càng hiện đại,nhiều nhà khoa học đã nghiên cứu thành công các nguồn nguyên liệu nuôi trồng nắm

Linh chi thay cho mùn cưa cao su trước đây Kết quả này đã góp phan tránh lãng phí và

hạn chế sự ô nhiễm môi trường bởi nguyên liệu được sử dụng là phế thải của các nhà

máy đường, công nghiệp dệt như bông thải, bã mía Đặc biệt trong một vài năm gầnđây con người đã tìm kiếm và phát hiện một lượng nắm cổ Linh chi tại một số vùng caoViệt Nam Đây là một kho tàng sản phẩm quý của y được cần được nghiên cứu sâu déđược ứng dụng đưa vào sản xuất, khai thác va phát triển nắm Linh chi ở Việt Nam.2.1.6 Tình hình nuôi trồng trên thế giới

Hiện nay, Linh chi được nuôi trồng khắp nơi trên thế giới đặc biệt phải kê đến như Trung Quốc, Nhật Bản, Mỹ, Việc nuôi trồng nam Linh chi chi được ghi nhận từ

năm 1621, nhưng đến 300 năm sau (1936), với sự thành công của Dật Kiến Vũ Hưng(Nhat) thì ngành nuôi trồng nam mới được phô biến Nếu tính từ 1979 sản lượng namLinh chi khô ở Nhật đạt 5 tắn/năm thì đến năm 1995, sản lượng lên đến gần 200 tắn/năm.Như vậy là 16 năm sản lượng nam Linh chi của Nhật đã tăng gap 40 lần (Lê Xuân Thám,

1998).

Lượng nắm Linh chi sản xuất mỗi năm trên thế giới khoảng 4300 tan, trong đókhoảng 3000 tan được trồng ở Trung Quốc, còn lại là các quốc gia khác như: Hàn Quốc,Đài Loan, Nhật Bản, Thái Lan, Hoa Kỳ, Malaysia, Việt Nam, Indonesia, Srilanca NhậtBản là nước đưa ra được kỹ thuật nuôi trồng nhưng lại đứng sau Trung Quốc về lượngnam sản xuất

Nam Linh chi đã được nghiên cứu và sử dụng vào việc phòng và điều trị bệnh từlâu ở các nước như Trung Quốc, Nhật Bản, Hàn Quốc, Đài Loan Các quốc gia này đãphát triển công nghệ nuôi trồng nắm ở quy mô công nghiệp hiện đại và giúp tăng giá trịkim ngạch xuất khâu Đồng thời việc nuôi trồng nam đã tận dụng nguồn nguyên liệu

thừa trong các ngành công nghiệp, nông lâm nghiệp, dem lại sản phẩm có giá trị và hiệu

quả kinh tế cao đồng thời góp phần bảo vệ môi trường

Đã có khoảng 250 bài báo khoa học liên quan tới dược tính và lâm sàng của Linhchi được công bồ trên thế giới Hội nghị nắm học thé giới tại Vancouver, Canada đãnhất trị thành lập viện nghiên cứu Linh chi quốc tế, đặc trụ sở tại New York (Hoa Ky)

vào tháng 7/1994.

13

Một số nghiên cứu khoa học đã chứng minh trong Linh chi chứa nhiều hợp chấtgermanium va polysaccharides có tác dụng thúc day quá trình trao đổi chat, lam chậmquá trình lão hoá, tăng cường miễn dịch, nâng cao sức đề kháng, điều tiết hệ thần kinhtrung ương, ồn định huyết áp, bảo vệ gan, tăng trí nhớ vì thế mà ở Chau A, việc sửdụng Linh chi làm thuốc, thực phẩm chức năng trở nên phổ biến và số người sử dụngLinh chi ngày càng tăng trong những năm gan đây.

2.2 Công nghệ chế biến trà hoà tan

2.2.1 Nguồn gốc và xuất xứ

Trà được xem là một loại thức uống rất phố biến trên toàn thé giới Trà có nguồngốc từ Trung Quốc và được sử dụng làm thức uống từ 2500 năm trước công nguyên, sau

đó được truyền bá đến Nhật và một số nước Châu Á khác Trà hòa tan bắt đầu xuất hiện

từ năm 1959 ở Thụy Sỹ rồi đến Mỹ (Nguyễn Đức Tiến, 2006)

Ưu điểm của loại trà này là hòa tan rất nhanh, không để lại cặn, cách pha chế sửdụng đơn giản Trà hòa tan có thé được sản xuất từ nguyên liệu chè xanh thứ phẩm Désản xuất trà hòa tan, người ta tiến hành trích ly chất tan từ nguyên liệu, dịch thu đượcđem phối trộn với chất trợ sấy đến nồng độ nhất định rồi đem sấy tạo bột trà (NguyễnĐức Tiến, 2006)

14

2.2.2 Quy trình sản xuất trà hoà tan

0G

== > đầy

=msaie

Hình 2.2 Quy trình sản xuất trà hoà tan.

2.2.3 Một số sản phẩm trà hoà tan trên thị trường

Trên thị trường hiện nay, sản phẩm trà hòa tan khá phong phú và đa dạng về cácloại nguyên liệu đến các mẫu mã, bao bì Có nhiều thương hiệu trà đã gây được nhiềutiếng vang lớn trong nước như: Trà Đại Gia, Việt Cô Trà, Trà Vang Hà Giang, Tra TânCương Nhiều mặt hàng trà đã làm nên dấu ấn và nhận được sự tin tưởng của người

dùng như trà Lipton hòa tan, trà Gừng, Hoa Cúc, Atiso hòa tan.

15

Hình 2.3 Trà gừng Hoà tan Nguôn: tradaigia.net

2.2.4 Các loại sản phẩm từ nấm Linh chỉ

Hiện nay, chế phẩm nắm Linh chỉ thường có 2 dạng trích ly là trích ly hoạt chấtsinh học từ quả thé nam va nam Linh chi thu được bằng công nghệ lên men sinh khối.Trong đó chế phâm Linh chi trích ly rất được yêu thích trên thị trường do có nhiều ưuđiểm như hoạt tính sinh học cao, đễ bảo quản và tính an toàn, thuận lợi cho quá trìnhphối chế, cảm quan của sản phẩm, tiện lợi cho người tiêu đùng Các chế phẩm nam Linhchỉ được sử dụng rộng rãi trong các ngành công nghiệp thực phẩm, mỹ phẩm, dược

16

phẩm Các nước có chế phẩm linh chi được tiêu thụ nhiều trên thế giới là Malaysia,

Trung Quốc, Hàn Quốc, Nhật Bản, trong đó đứng đầu là Trung Quốc.

Một số sản phẩm từ nam Linh chi trên thị trường hiện nay như: trà hoà tan Linhchi, cao nam Linh chi, trà túi lọc Linh chi, mặt nạ chiết xuất Linh chi, cà phê Linh chi,thực pham chức năng từ Linh chi có nguồn gốc xuất xứ da dạng

| LINGZHI TEA BAG

TRÀ LINH CHI TÚI LỌC

17

CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

Nam Linh chi được cung cấp bởi phòng thí nghiệm Nắm ăn — nam dược liệu,

Viện Nghiên cứu Công nghệ Sinh hoc và Môi trường, trường Đại học Nông Lâm Thành

phố Hồ Chí Minh Nam được sấy khô ở 50 °C + 5 °C cho đến khi độ âm còn dưới 17%(theo quy định về độ 4m của dược liệu - Dược điển Việt Nam V) Nam Linh chi sau khisay được xay nhỏ và ray qua ray có kích thước lỗ ray là 0,5 mm dé chuẩn bị cho các thinghiệm tiếp theo

Bột cỏ ngọt được mua tại hiệu thuốc đông y Thuận Hưng đường Hải ThượngLang Ông, phường 10, quận 5, thành phô Hồ Chi Minh

Mật ong Viethoney được mua tại siêu thị Co.opmart thành phố Hồ Chi Minh

Hình 3.1 Bột Linh chi Hình 3.2 Bột cỏ ngọt Hình 3.3 Mật ong.

3.2.2 Dụng cụ và thiết bị

Máy nghiền búa, tủ sấy (Memmert), Cân phân tích (Ohaus PA), lò nung(Nabertherm), nôi hap tiệt trùng (Autoclave), máy do UV-Vis, bếp điện (Mayso), bếpđun bình cầu (Joanlab), bình cầu, ống sinh hàn, hệ thống sinh hàn, thiết bị sấy thăng hoa(Harvest right), máy khuấy từ gia nhiệt (Stuart), bồn đánh sóng siêu âm (LY), chén độ

18

4m, cốc nung, bình hút 4m, cân điện tử, giấy lọc Whatman và các thiết bị, dung cụ thông

dụng trong phòng thí nghiệm.

3.2.3 Hoá chất

Hoá chat được dùng trong đề tài bao gồm: acid sulfuric (H2SO,), anthrone,

ethanol (C2HsOH), Maltodextrin (CAS No: 9050-36-6).

3.3 Phương pháp nghiên cứu

3.3.1 Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly polysaccharidestrong nam Linh chỉ

3.3.1.1 Đánh giá chất lượng nguyên liệu nấm Linh chi

Nắm linh chỉ được xay thành dạng bột và rây qua rây có kích thước lỗ rây là 0,5

mm sau đó tiến hành kiểm tra độ 4m, hàm lượng tro tổng số và hàm lượngpolysaccharides tổng

mị: Khối lượng mau thử trước khi sấy (8);

ma: Khối lượng mẫu thử sau khi sấy (g);

Chỉ tiêu tro (phương pháp AOAC 900.02).

Cân chính xác 2 g mẫu cho vào chén sứ chuyên dùng xác định độ tro (chén được

nung ở 550 °C, dé nguội và ghi nhận khối lượng) Cho chén chứa mẫu vào lò nung, nung

ở nhiệt độ 550 °C — 600 °C trong khoảng 12 đến 18 giờ, đến khi mẫu được tro hoá hoàntoàn, sau khi nung, đặt chén trong bình hút ẩm, đề nguội và ghi nhận khối lượng

Hàm lượng tro tổng số của mẫu được tính theo công thức sau:

19

A =[(M:—M¡}M:] x 100 Trong đó:

A: Hàm lượng tro tổng số (%);

Mi: Khối lượng chén nung (g);

M¿: Khối lượng mẫu phân tích (g);

Ms: Khối lượng chén va mẫu sau khi nung (g);

Định lượng polysaccharides tổng trong nắm Linh chỉ (phương pháp Acid Sulfuric

— Anthrone) (Sluiter và ctv, 2008)

Chuan bị mẫu: Cân 2 g mẫu bột linh chi chiết với dung môi là ethanol 50° trong

24 giờ, lọc qua giấy lọc thu được bả và dịch Phan ba Linh chi được hấp thuỷ phân với

HzSO¿ ở nhiệt độ 121 °C trong 1 giờ 30 phút Hàm lượng polysaccharide trong mau Linh

chỉ được tính bằng tổng hàm lượng đường tan trong dịch chiết và hàm lượngpolysaccharide trong dịch thuỷ phân bằng phương pháp Acid Sulfuric - Anthrone

Polysaccharide thuỷ phân thành phân tử mono dưới acid đậm đặc và khử nước nhanh

chóng dé tạo thành Aldehyd glucorunic Sau đó glucorunic aldehyde và anthrone ngưng

tụ tạo thành dẫn xuất glucorunic, có màu xanh lam

Xây dựng đường chuẩn:

Pha Anthrone: Cân 0,2 g Anthrone, hòa tan trong bình định mức, thêm H2SO,

96% vừa đủ 100 ml

Chuẩn bị mẫu chuẩn: chất chuẩn là D — Glucose

Bảng 3.1 Nồng độ đường chuẩn glucose

Nông độ Glucose (mg/]) 0 30 60 90 120 150

Thể tích dung dịch Glucose stock (ml) 0 0,3 0.6 0,9 1,2 1,5

Nước cất (ml) 10 97 94 91 88 85Pha dung dịch chuẩn (1000 mg/l): Can 0,5 g D-Glucose pha trong 500 ml nước cat.Mỗi mẫu chuẩn lay 2 ml vào ống nghiệm, mỗi ông thêm 4 ml dung dich Anthrone

đã pha và 2 ml dung dich HaSO¿ 96% rồi lắc đều Sau đó đun cách thuỷ trong ở 100 °C

trong 15 phút Lay mẫu 100 mg/l phân tích UV — Vis ở chế độ toàn dải, xác định đượcbước sóng dung dịch hấp thụ cực đại là 624 nm Tiếp theo đo độ hấp thụ của các dung

dịch chuẩn ở bước sóng 624 nm rồi dựng đường chuẩn

20