Khóa luận tốt nghiệp Sư phạm sinh học: Khảo sát ảnh hưởng của Ga3 lên sự sinh trưởng của Cam sành (Citrus nobilis lour.) nuôi cấy in vitro trong điều kiện stress mặn

Biêu đồ ảnh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến sự sinh trưởng rễ của cây Cam sành Citrus nobilis Lour.. Anh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến sự sinh trưởng của cây Cam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRUONG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

ĐỎ THỊ TUYẾT HOA

KHAO SÁT ANH HUONG CUA GA; LÊN

SỰ SINH TRUONG CUA CAM SANH

(Citrus nobilis Lour.) NUÔI CAY IN VITRO

KHOA LUAN TOT NGHIEP NGANH SƯ PHAM SINH HỌC

THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH - 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRUONG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

NGƯỜI HUONG DAN KHOA HỌC

ThS Luong Thi Lé Tho

THANH PHO HO CHi MINH - 2024

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM

Độc lập - Tự do - Hạnh phúc

BẢN XÁC NHẠN CHÍNH SỬA KHOÁ LUẬN TÓT NGHIỆP

Họ và tên: Đỗ Thị Tuyết Hoa

Sinh viên khoá: K46 Mã sinh viên: 46.01.301.037

Ngày sinh: 22/05/2002 Nơi sinh: TP Hồ Chí Minh

Chương trình dao tạo: Sư phạm Sinh học

Người hướng dan: ThS Lương Thị Lệ Thơ

Cơ quan công tác: Khoa Sinh học - Trường Đại học Sư phạm Thanh phó Hồ Chi

Minh

Điện thoại: 0909 661 256 Email: thold®hcmue.cdu.vn

Tôi đã bảo vệ khoá luận tốt nghiệp với đề tài: “Khao sát ảnh hưởng của GA; lên

sự sinh trưởng của Cam sảnh (Citrus nobilis Lour.) nuôi cay in vitro trong điều kiện

stress man” tại hội đồng cham khoá luận ngày 07 tháng 05 năm 2024.

Tôi đã sửa chữa và hoàn chỉnh khoá luận tốt nghiệp đúng với các góp ý, yêu cầu

của Hội dong và uy viên nhận xét, gôm các ý chính như sau:

- B6 sung các công trình nghiên cứu về anh hưởng của NaCl đến sự sinh trưởng

của Cam sành (Citrus nobilis Lour.) nuôi cay in vitro và GAs đến sự sinh trưởng của

Cam sành (Citrus nobilis Lour.) nuôi cay in vitro trong điều kiện stress mặn.

- Chỉnh sửa bố cục về nội dung các phan, hình ảnh va bảng biểu hợp lí

- Chỉnh lại format của bảng số liệu thống kê vẻ sự tăng trưởng của cây Cam sành in vitro (chiều đài lá, chiều rộng lá).

- Chỉnh sửa lại phần đánh số tên hình ảnh, tên biéu đỏ, tên bảng cho phủ hợp.

- Chỉnh sửa các lỗi chính tá, định dang, hình ảnh và bảng biéu cho hợp li.

Nay tôi xin bao cáo đã hoàn thành sửa chữa khoá luận như trên và đề nghị

Hội đồng chấm khoá luận, người hướng dẫn khoa học xác nhận.

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đề tài Khóa luận tốt nghiệp ngành Sư phạm Sinh học năm

2023 - 2024 “Khảo sát ảnh hướng của GAs lên sự sinh trưởng của Cam sành

(Citrus nobilis Lour.) nuôi cay in vitro trong điều kiện stress mặn” là công trình

nghiên cứu tôi dưới sự hướng dẫn của ThS Lương Thị Lệ Thơ Toàn bộ số liệu và

kết quả nghiên cứu được trình bày trong dé tài Khóa luận tốt nghiệp này là trung thực

và chưa từng được người khác công bô trong bat kỳ công trình nào khác, các thông

tin trích dẫn trong báo cáo đẻ tài Khóa luận tốt nghiệp này đều được chỉ rõ

nguồn gốc Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm về sự cam đoan này.

Sinh viên thực hiện

Đỗ Thị Tuyết Hoa

LOI CAM ON

Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến Cô ThS Luong Thị Lệ Thơ vì luôn tận tỉnh hướng dẫn em trong quá trình học tập, nghiên cứu Nhờ có sự quan tâm, hướng dẫn và động viền của Cô, em đã có thêm nghị lực và niềm tin để hoàn thành

khoá luận một cách tốt nhất

Em xin cảm ơn Ban Giám hiệu trường Đại học Su Pham Thanh phố H6 Chí Minh, Phòng Đảo tạo, Ban Chủ nhiệm và các thay cô trong Khoa Sinh học - Trường Dại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh đã tạo điều kiện thuận lợi cho em

thực hiện và hoàn thành khoá luận tốt nghiệp

Em xin cảm ơn Cô Nguyễn Thi Nga, Cô Hà Thị Bé Tư Cô Tran Thị Hiếu (chuyên viên phòng thí nghiệm khoa Sinh học Trường Đại học Sư phạm Thành phố

Hỗ Chí Minh) và Cô TS Tran Thị Minh Dinh đã hỗ trợ dụng cụ thí nghiệm và

luôn tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện tốt nhất cho em hoàn thành tốt nhất khoá luận

tốt nghiệp

Cảm ơn sự hướng dẫn tận tình của Cô TS Trần Thị Thanh Hiền và

Cô ThS Trần Minh Hồng Lĩnh — Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Thành phố

Hỗ Chí Minh cling như các bạn thuộc Phòng thí nghiệm Sinh lý thực vật —

Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Thanh phô Hỗ Chí Minh đã hỗ trợ em trong một

số thí nghiệm của đẻ tài Khóa luận tốt nghiệp

Cam ơn các thành viên trong gia đình luôn yêu thương, động viên giúp đỡ

con trong học tập, nghiên cứu khoa học cũng như trong cuộc sống Cam ơn anh

Lưu Tăng Phúc Khang cùng các bạn sinh viên Bùi Thi Lan, Luong Thị Thu Ngan,

Nguyễn Hồng Linh, Nguyễn Thị Hồng Trinh, Nguyễn Bảo Châu, Pham Trương Phú Vạn Tai, Lê Nguyễn Cao Duong, Tran Thị Ngọc Ánh, Mai Xuân Chiến, Nguyễn Hoàng Minh Nhu, Trần Nguyễn Thảo Hiền đã động viên,

hỗ trợ em trong suốt khoảng thời gian làm khoá luận tốt nghiệp

Xin chân thành cảm ơn.

Đỗ Thị Tuyết Hoa

II MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU -222222222VEVEVEVEEEVEVEEEEEEEEEEEEEE22222222222222vvveecve 3

II ĐÓI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 222222 2 9222211511220211111211101112100101 22000011 x62 3

IV NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU 222222222222222222252522222311222221111122211111212212 3

V PHAM VI NGHIÊN CỨU 2222222222222EECSSSCEEEEE211111121111111122111111220 E1 3

VI THỜI GIAN VA DIA DIEM NGHIÊN CỨU cccccccrrrrrrcee 3

Chương ¡ TONG QUAN sissssssssssssssssssssssssssscnsscnssccsssssssssssassssassassasssnasasssssesevasassseasd 5

1.1 Sơ lược về cây Cam sành (Citrus nobilis LOUT,) nhe 5

DU), Vjitrf PHAN OOD 5.05:scciscssscssscasssasssasssassccassessesszscarscasesacsssadscseseasseaszeazssasseasis 5

1.1.2 Nguồn gốc và sự phân BG ooo cccecssessssssssesseesserssersseesveesvensvsesvsnsvsneeenreeneeen 5 1.1.3 Đặc điểm sinh học của cây Cam sành (Citrus noblis Lour.) 6

104: CONG GUNG caiociicniiiiieniiisiiisiissiiisi1023112513863161325351968565508588651363388551838805856558 8

1.1.5 Các yêu tô anh hưởng đến sự sinh trưởng và phát triền §

I2 OETGSS THANH ss ccsscsanscsescssaessacscsassanses sasasssesesesascscasacncs sasaesasscseuaststacessssseavasat sesaasseses0aes—s0%0006 10

1.2.1 Khái niệm Stress - LH hs nh HT 2T HH kh vn kế, 10

1.2.2 Đất nhiễm MAN o.oo cece ceccseeceeessesssseesesecsseseesessecssesseesssveseeesevesteseesessveevese 10

1.2.3 Tác hại stress mặn tới cây trồng, -¿: 2s 22t 2S 2220222221221 1]

1.2.4 Tác hại của mặn đối với cây có múi -s-cse+czssccssee 11

1.2.5 Cách đáp ứng của thực vật đối với stress mặn . s-ccsccss¿ 12 I3 Nhôi cày Hỗ 2a nan õn can na nano rcei 13

1.3.1 6 ae -x H 13

1.3.2 Vai trò của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật GAs trong su sinh

trưởng của THC VẬẲ::::::‹c:cccc-oceciiontiisiiisiiS12221105115631556156333861563658553565885888515051 856 13

LA Che nghiên Gữu VỆ cây Gỗ THẪÌ:cuusnaanenuiiintiiiiitilllg0100000010160100040331803013010000006 14

1.4.1 Tình hình nghiên cứu trên thé giới -2 +75c52222zcczzecrzcrrsee 14

1.4.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam cánh uhớ 16

Chương 2 VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - 20

2.1 Thời gian, địa điểm và vật liệu nghiên cứu sec 20

DUM Thôi giäñingHiÖñ:GỨN:::::;::::::::2:::::::22222222221212212301225452013853382652253533852522253653 20

2.1.2 Địa điểm nghiền cứu - ¿2222222222222 12272222 1122117217222xctrec 20

2.1.3 Vậtlliệu nghiên CỨU :‹ -ccc<62022 6c S22 t11-5405221.05188 20 2.2.iPHương pháp nghiện cỨu::;.- :::: ::cccccccciceniiiiGE000101112001110325061211661823383858363 585 21

2.2.1 Phương pháp đánh gia ty lệ sống của hạt giống Cam sành

(0 //1/719///////0190u 0P da 21

2.2.2 Phương pháp khử trùng mẫu cay (hạt Cam sành) với NaClO và HgCh ở các nông độ và thời gian khác nhau 2-22 222EEZ£EEZEEEZ E222 cxzzcvzec 21 2.2.3 Phương pháp khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến kha năng nay mam và

sinh trưởng của giống Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cây

H-VÌÍTÕ t::itti:21101231131113316331335136555953553 585358835383515855333 5555355853 255388555255335522335538558825858 22

2.2.4 Phương pháp khảo sat ảnh hướng của GA; đến khả năng nảy mam và sinhtrưởng của Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bi nhiễm mặn trong điều kiện nuôiCAY 70 VETO TP 4444 23

2.2.5 Phuong pháp theo đõi một số chỉ tiêu trong thí nghiém 24 2.2.6 Phương pháp xử lý số liệu 2-52 22+ 2222222222222 crrrrrrev 26

Chương 3 KẾT QUÁ VÀ THẢO LUẬN c cccocoSSễiSEESEeSeieễeee 27

3.1 Kết quả đánh giá tỷ lệ sông của hạt Cam sành (Citrus nobilis Lour.) 27

3.2 Kết qua khử trùng hạt Cam sảnh (Citrus nobilis Lour.) với dung dich NaClO ở các nồng độ và thời gian khác nhau 22222222©222.22222222222222222221222222222 222ee 27 3.3 Kết quả khử trùng hạt Cam sảnh (Citrus nobilis Lour.) với dung địch HgCh ở các

B0ng0073ÌE1i60mIiá6HDNUeiiaaeaeeneararenraeannnanei 29

3.4 Kết quả khảo sát ảnh hướng của NaC] đến kha năng nảy mam va sinh trưởng của

cây Cam sành (Citrus nobilis Lour ) trong điều kiện nuôi cây FR VU tiiiiiiitiiaaoariaaas 32

3.4.1 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến kha nang nảy mam của câyCam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro 323.4.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến một số chỉ tiêu sinh trưởng của

cây Cam sảnh (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro 37

3.4.2.1 Chiều CAO CÂY Sóc TH HH nh n2 1 111 0212 e2 373.4.2.2 Số lá, chiều đài lá, chiều rộng lá, diện tích lá 393.4.2.3 Số rễ, chiều đầi rễ - 2s t0 21022112111 11111111012100210022 xe 443.4.2.4 Sinh khôi tươi, sinh khôi khô - 2222 2222 x2 rxzcrzzerred 47

3.5 Anh hướng của NaCl đến các chỉ tiêu sinh lý và chỉ tiêu sinh hóa của cây Cam sành (Ciia.nobilis LonïF:) nuôi CBY fi VETO sssssesssssssorsssescanssssossonscssssssarsasseusssssanasssonssnannsssan 53

3.5.1 Ảnh hưởng của NaCl đến cường độ quang hợp của cây Cam sành (Citrusnobilis Lour.) nuôi cấy 1M VỈWO cc 2c 11 ch 0200210111011 111 g1 y2 53

3.5.2 Kết qua khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến hàm lượng proline của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro 56 3.6 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của NaC] đến một số chỉ tiêu hình thái, giải phẫu của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy ứ vữzo 59

3.6.1 Ảnh hưởng của NaCl đến hình dạng và màu sắc lá của cây Cam sành

(Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy IN VÏẨFO à.sccc2ccc<cxcS- 59

3.6.2 Ảnh hưởng của NaCl đến hình thái giải phẫu của lá của cây Cam sành

(Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy IN VIEFO -cĂSSscSsss+ 603.6.3 Anh hưởng của NaCl đến hình thái giải phẫu rễ của cây Cam sành (Citrusnobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro -2-cc-<ccczzccs2 62

3.7 Ảnh hưởng của GAs lên khả năng nảy mam và sinh trưởng của Cam sảnh (Citrus

nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy it vif70 -cnnisececsrsrrrce 64

3.7.1 Kết qua khảo sát ảnh hưởng của GA; đến khả ning nay mam của hat Cam

sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cấy in vitro 64

3.7.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của GAs đến một số chỉ tiêu sinh lý của câyCam sảnh (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro 68

B20 Ua RON casa asses secacacascensncannesaanessnecsaassaaneanossanasanapannscasncaecd 68

3.7.2.2 Số lá, chiều đài lá, chiều rộng lá, điện tích lá - 70

5723 Se C00000 0ï cosa ŸnŸnaaanaanaaaaoaaeenoanernoni 743.7.2.4 Sinh khối tươi, sinh khối khô 22 S2 S2E5 2 3 S32 EcEcE 22s ccc T1

3.8 Ảnh hưởng của GAs đến các chi tiêu sinh lý, sinh hóa của cây Cam sành (Citrus

nobilis LOUr.) NUGI CAY IN 1.76 81

3.8.1 Ảnh hưởng của GAs đến cường độ quang hợp của cây Cam sành (Citrus

nobilis Lour.) nuôi cấy in ViWO - 22-52 2222222E22E322S222222222211223222ezrxcrrec 81

3.8.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của GA; đến ham lượng proline của cây Cam

sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro 83 3.9, Kết qua khảo sát ảnh hưởng của GAs đến một số chỉ tiêu hình thái, giải phẫu của

cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cây 101 85

3.9.1 Anh hưởng của GAs đến hình dang và màu sắc lá của cây Cam sành

(Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay IN VITO 5S S5 c<<5 85 3.9.2 Anh hưởng của GAs đến hình thái giải phẫu của lá cây Cam sành (Citrus

nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in Vi(rO - :-55:5cscccsccczssce §6

3.9.3 Anh hưởng của GA; đến hình thái giải phẫu của rễ cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in VitfO s20 s6 222212 §7

Chương 4) KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHĨ sscssssscssssesssssscsssssssssscsssscssssssasassssssasasaseis 89TÀI LIÊU THAM KHẢO sssssssssnssssnsssssnsssssnsssanassansssssnassansssainsssssnsssansssanasisanassiaased 90

FHHIEDUE ẽ se s6 an 1

Phụ lục 1: Thông kê mô ta về thi nghiệm khử trùng với NaClO ở các nồng độ va thời

8ian|KBÁG nhữNssnooonnnnninniiiiiiidiiuiiiitiiiliii4B4111330313353513343366513434354113388ã835533 PLI

Phụ lục 2: Thống kê mô tả về thí nghiệm khử trùng với HgCl› ở các nồng độ và thời

gian khác nhau 22222 22222292122202222212171110100010100011111111111111120100000000000011111010 0e PL2

Phụ lục 3: Thong kê mô tả vẻ thí nghiệm khảo sat ảnh hưởng của NaC! đến khả năng nay mầm của hạt Cam sành Citrus noblis L.our -22cc22222222ccccccvvcccvsscee PL2

Phụ lục 4: Thông kê mô tả về thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến một số chỉ

tiêu sinh trưởng của cây Cam sành Citrus noblis LLOuT - -c5c«5<<<cxccee PL3

Phụ lục 5: Thông kê mô tả về thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến một số chỉ

tiêu sinh lý, sinh hóa của cây Cam sành Citrus nøblis Lour -‹- PLIHI

Phụ lục 6: Thong kê mô tả vẻ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của GAs đến kha năng

nay mam của hạt Cam sành Citrus noblis Lour trong điều kiện stress man in vitro

Phụ lục 7: Thong kê mô tả về thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của GA; đến một số chi

tiêu sinh trưởng của cây Cam sành Citrus noblis Lour trong điều kiện stress mặn

NV TỔ tintitiii511101431110345381816336338314338855858356853535398831333853489333335344539534335353351013448193835834838533ã4 PLI3

Phụ lục 8: Thông kê mô tả về thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của GAa đến một số chỉ

tiêu sinh lý, sinh hóa của cây Cam sành Citrus noblis Lour trong điều kiện stress mặn

IANO iocttiiiiiiitiiii4051111135311133538135353533583135351553533355555353553335533558553505835373385555835555353525535553055553 PLI9

Phụ lục 9: Phân tích phương sai một yếu t6 Anova về thí nghiệm khử trùng hạt Camsành Citrus nobilis Lour với NaClO ở các nồng độ và thời gian khác nhau PL2I

Phụ lục 10: Phân tích phương sai một yếu t6 Anova về thí nghiệm khử trùng hạt Cam

sành Citrus nobilis Lour với HgCl: ở các nông độ và thời gian khác nhau PL22

Phụ lục 11: Phân tích phương sai một yếu tô Anova vẻ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng

của NaCl đến kha năng nay mầm của hạt Cam sảnh Citrus nobilis Lour PL22

Phụ lục 12: Phân tích phương sai một yếu tô Anova vẻ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến một số chỉ tiêu sinh trưởng của cây Cam sảnh Citrus noblis Lour PL24 Phụ lục 13: Phân tích phương sai một yếu tô Anova vẻ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của NaCl đến một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa của cây Cam sành Citrus noblis Lour.

Phụ lục 14: Phân tích phương sai một yếu tổ Anova vé thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng

của GAs đến khả năng nảy mam của hạt Cam sảnh Citrus noblis Lour trong điều kiện

SMOG S MRAM B98 VIET sce 2cccs os sczecssassscsesesesseesssssvccsossssaoesasasesesesesascscesesacssessssssseisasieessesanesets PL34

Phụ lục 15: Phân tích phương sai một yếu tô Anova về thi nghiệm khảo sát ánh hưởng

của GAs đến một số chỉ tiêu sinh trưởng của cây Cam sành Citrus noblis Lour trong

điều kiện stress mặn A 1i/0 ccsss 2 v0 022111111121111121 2111111121111, PL35Phụ lục 16: Phân tích phương sai một yếu tô Anova vẻ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởngcủa GAs đến một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa của cây Cam sành Citrus noblis Lour.trong điều kiện stress mặn it f0 c1 c2 00002101111120111110001 002 2 00012 PL44

Phụ lục 17: Đường Chun proline TT ‹-‹4dd)ằậĂÃĂ PL45

GA: Acid gibberellic

NT Nghiệm thức

SKT Sinh khối tươi

SKK Sinh khối khô

DANH MỤC SƠ ĐỎ VÀ HÌNH ẢNH

Trang

Hình 2.1 Sơ đồ minh họa các nội dung nghiên cứu và phương pháp của đẻ tài

¬ 21

Hình 3.1 Hạt Cam sành (Citrus nobilis LOU.) - (2< c<<ss<csceesss 27

Hình 3.2 Biéu đồ ảnh hưởng của NaClO ở các nồng độ và thời gian khác nhau

đến sự sông của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro

Hình 3.3 Biéu đồ ảnh hưởng của HgC]› ở các nồng độ và thời gian khác nhau

đến sự sông của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro

Hình 3.4 Cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) in vitro sau 60 ngày nuôi cay

tröñEmöiiđườnE MS :iciiiiitiiiiiigi1111401321066445183141441330134413353584184611533158243885 32

Hình 3.5 Biêu đô ảnh hưởng của NaCl ở các nòng độ khác nhau đến khả năng

nay mam của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kién in vitro sau 20

BAY MUG CAY 0P" 41+2zŒœgŒgŒ HDHDHĂHH 33

Hình 3.6 Ảnh hưởng của NaCl ở các nòng độ khác nhau đến kha năng nảymâm của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro tal

@iai doan 0Ä) 01) 1 3

Hình 3.7 Ảnh hưởng của NaCl ở các nòng độ khác nhau đến khả năng nảy

mam của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro tại Sieh Ob esa VA Aaa 01010 aaeninanenensresoeioieioissrsnnaainnttoinisreei 36

Hình 3.8 Ảnh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến khả năng nảy

mam của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro tại

Einiiföan(7fiinEäy Hổ honecoseiisitiantintiaiiioittctii1400240112011310820162403162124351438323842030601123864 36

Hình 3.9 Biểu đồ ảnh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến chiều cao

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro sau 60 ngày

Hình 3.10 Biêu đồ ánh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến lá củacây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bi stress man trong điều kiện nuôi cay in vilro

sau 60 ngày nuôi Cấy .-5: 2: 21 9211221222122222111 211121112111 21112111211121121112210721 3 gyeg 42

Hình 3.11 Biêu đồ ảnh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến sự sinh

trưởng rễ của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro

sau 60 ngày nuôi SP 45

Hình 3.12 Biểu đồ ảnh hưởng của NaCl ở các nòng độ khác nhau dén sinh khối

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro sau 60 ngày

h0 0a 4§

Hình 3.13 Anh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến sự sinh trưởng

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cây in vitro tại giai đoạn

AO MAY WOK .44A.,M 50

Hình 3.14 Anh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến sự sinh trưởng của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro 50

Hình 3.15 Biêu đỗ ảnh hưởng của NaCl ở các nông độ khác nhau đến cường

độ quang hợp của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in VifFO 68 GO DZAY TUỔI CÊY sssssssesioecisosisosssvnsssassensssnsvavosvosnvosseessvossiessvessiessvesssesisosssoes 54

Hình 3.16 Biêu đồ ảnh hưởng của NaCl ở các nông độ khác nhau đến hàm lượng proline của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in giif:Sá0ii01I0010.181811EH0126: sai 22s2z465203210161715171620955196200220092009400333801223923512001320153001921757 57

Hình 3.17 Anh hưởng của NaC! ở các nồng độ khác nhau đến hình dang lá của

cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro sau 20 ngày

D10 s9

Hình 3.18 Ảnh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến hình dang lá của

cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cây in vitro sau 40 ngày

60 ngày nuôi cấy l4 14111313341222132222244121311)213013222029222131212152219412221272119232124215011214V21212321232 127 61

Hình 3.21 Anh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến rễ của cây Cam

sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro sau 60 ngày nuôi cay62

Hình 3.22 Biêu đồ ảnh hưởng của GA: ở các nồng độ khác nhau đến khả năng

nảy mam của hạt Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện in Viif0:SaHITIDEYBHÔTNGDV cac os12na3215261223:2121712179501931212302410220032388532839389293420332đ182đ8382133Ỷ 65

Hình 3.23 Anh hưởng của GA: ở các nông độ khác nhau đến khả năng nảy

mam của hạt Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cây

in vitro tại giai đoạn 7 ngày tuôi 2- 2252222222222 2212122222321 112 xrrrrrree 67

Hình 3.24 Ảnh hưởng của GAs ở các nồng độ khác nhau đến khả năng nảy mam của hạt Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cây

in vitro tai giai doan 14 ngay 01 1 67

Hình 3.25 Anh hưởng của GA; ở các nồng độ khác nhau đến khả năng nay mam của hat Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cay Ù1 Vitro tại giải đoạn 2Ú ngày CUO caiscassssoiscssscsiscassosssvsssveasvosssesssosssosssossiessvosssasisssseses 6§

Hình 3.26 Biéu đồ ảnh hưởng của GAs ở các nồng độ khác nhau đến chiều cao

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cấy in

vitro sau 60 ngày nuôi cấy 2-2-2222 2CEt2EE22 E32 AE AE 2EAEZErcSrerserrxerrserred 69

Hình 3.27 Biêu đồ ảnh hưởng của GAs ở các nông độ khác nhau đến các chi

tiêu của lá cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôicấy in vitro sau 60 ngày nuôi cấy -2-22ss222xz 2222222222223 222112212731172112211.- xe 72

Hình 3.28 Biêu đồ ảnh hưởng của GAs ở các nông độ khác nhau đến sự sinhtrưởng rễ của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitroSAU GO NAY NUDE 8n ẽ< AĂ ă 75

Hình 3.29 Biéu đồ ảnh hưởng của GA; ở các nông độ khác nhau đến sinh khối

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro sau 60 ngày BUỔI CD 0666 c000010001062000120160000500000000100200110052100600037000210950200033503.0003500300300 78

Hình 3.30 Ảnh hưởng của GA; ở các nồng độ khác nhau đến sự sống của câyCam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress man trong điều kiện nuôi cấy in vitro tại

giai đoạn 40 ngày tuôi 2+ 222 222 22221121112111211211211121117111711711 211.1 c.yeg 80

Hình 3.31 Ảnh hưởng của GA: ở các nồng độ khác nhau đến sự sống của cây

Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bi stress man trong diéu kiện nuôi cấy in vitro tại

1/71/0010 0 086 §I

Hình 3.32 Biêu đồ ảnh hưởng của GAs ở các nồng độ khác nhau đến cường

độ quang hợp của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện

nuôi cay in vitro sau 60 ngày nuôi nh ẽ 82

Hình 3.33 Biêu đồ ảnh hưởng của GAs ở các nông độ khác nhau đến ham lượng

proline của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress man trong điều kiện nuôicAY in vitro 700 0Tiìá on 84

Hình 3.34 Anh hưởng của GAs ở các nông độ khác nhau đến hình dang và màusắc lá của cay Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bi stress mặn trong điều kiện nuôi cây

in vitro tại giai đoạn 20 ngầy tuôi 0c So 22t 2222222222111 211721721212 11.1 erreg 85

Hinh 3.35 Anh hưởng của GA; ở các nông độ khác nhau đến hình dạng và màu sắc lá của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cay

in vitro tại giai đoạn 40 ngày tuổi - con tirsitssiissiiee 86

Hình 3.36 Anh hưởng của GA; ở các nông độ khác nhau đến hình dang và mau

sắc lá của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cấy

in vitro tại giai đoạn 60 ngày tuôi 222222222 E22 E2 AE 22207222 e-2e-xerred 86

Hình 3.347 Anh hưởng của GA; ở các nông độ khác nhau đến hình thái giải

phau của lá cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress man trong điều kiện nuôicấy in vitro sau 60 ngày nuôi cấy 2 ©22s22222222C2e22AE2E222222222211221122c222ere §7

Hình 3.38 Ảnh hưởng của GA; ở các nông độ khác nhau đến hình thái giải

phẫu của rễ cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôicấy in Vitro sau 6Ù ngày nuôi CẤY, ó0 th 00 2011211221 1 ng 11121022 S8

DANH MỤC CÁC BẢNG

Trang Bang 2.1 Các nghiệm thức khảo sát hiệu quả khử trùng của dung dich NaClO

ở các nồng độ và thời gian khác nhau lên hạt giống Cam sành 22

Bang 2.2 Các nghiệm thức khảo sát hiệu quả khử trùng của dung địch HẹCl›

0.1% ở các thời gian khác nhau lên hạt giống Cam sành 22

Bang 2.3 Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hưởng của NaCl đến 23 Bang 2.4 Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hưởng của GAa đến khả nang nay mam và sinh trưởng của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) in vitr 23

Bang 3.1 Ảnh hưởng của NaClO đến sự sông của cây Cam sành (Citrus nobilis

Lour.) trong điều kiện nuôi cấy int ViffØ 5s 22c 2220222222222 cv 27

Bang 3.2 Ảnh hưởng HgCl› đến sự sống của hạt Cam sành (Citrus nobilis

Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in WiffØ -2-222©22sc22z22ZzeEcxrczrrrcxercrxrcrreee 29

Bang 3.3 Ảnh hưởng của NaCl đến khả năng nay mam của cây Cam Sanh

(Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cay in vitro sau 20 ngày nuôi cay 33

Bang 3.4 Ảnh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến chiều cao của cây

Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitre sau 60 ngày nuôi

Bang 3.5 Ảnh hưởng của NaCl ở các nông độ khác nhau đến số lá, chiều dài

lá, diện tích lá của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in

vo sau GO ngày nuÔi CAY co uc H1 HH n2 Hà ng ad ray 40

Bang 3.6 Ảnh hưởng của NaCl ở các nông độ khác nhau đến sự sinh trưởng rễ

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro sau 60 ngày

BHÔIEH 6600 10200000006.0.6006200950052009/1002009220520055.000030u00 1051003244

Bang 3.7 Anh hưởng của NaCl ở các nồng độ khác nhau đến sinh khối của cây

Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vửro - 47

Bang 3.8 Anh hưởng của NaCl đến cường độ quang hợp của lá cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) được xử lý mặn ở các nông độ khác nhau trong điều kiện in vitro sau 60 ngdy NUGL CAY 8 Ả , 53

Bang 3.10 Anh hưởng của GAs đến kha năng nay mam của cây Cam Sanh

(Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cấy in vitro sau 20 ngày nuôi cay 65

Bang 3.11 Ảnh hưởng của GAs ở các nông độ khác nhau đến chiều cao của

cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cấy in vitro

sau 60 ngày nuôi n1 ` 69

Bang 3.12 Anh hưởng của GA; ở các nông độ khác nhau đến các chỉ tiêu của

lá cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cấy in vitrosaul 60 Ngdy NUGI CAY 4 70

Bang 3.13 Ảnh hưởng của NaCl ở các nông độ khác nhau đến sự sinh trưởng

rễ của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện nuôi cây in vitro sau 60

Bang 3.16 Anh hưởng của GA; ở các nồng độ khác nhau đến hàm lượng proline

của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) bị stress mặn trong điều kiện nuôi cây m

VIIFO'SAU GO DBAY MUOW CAY ‹:: eiesiieiiiebioiniiiiititii111111221113310335658135395281853818583238335352 83

MỞ ĐÀU

I LÍ DO CHỌN ĐÈ TÀI

Với khí hậu nhiệt đới gió mùa, âm ướt quanh năm, Việt Nam có điều kiện

thuận lợi cho thám thực vật phát triển phong phú vả đa dang, tạo nhiều thuận lợi cho

nông nghiệp [1], [2] [3] Ngành trong trọt là ngành sản xuất chủ yếu của

sản xuất nông nghiệp ở nước ta, chiếm khoảng 75% giá trị sản lượng nông nghiệp

hằng năm [4] Những năm qua, diện tích cây ăn qua có xu hướng tăng lên va đây lànhóm cây trồng đã có bước phát triển nhảy vọt [5]

Trong họ Rutaceae, các loài cây trong chi Citrus (cây có múi) là cây ăn quả phô biên, được trồng rộng rãi nhất và có giá trị kinh tế quan trọng nhất trên thé giới Theo

thông báo của FAO, từ những năm của thập ky 2000, mức tiêu thụ quả có múi của

thé giới đã tăng khoảng 26 triệu tan Day là nguồn cung cấp vitamin, khoáng chất,

chat xơ phong phú, các chất có hoạt tính sinh học có đặc tính chống oxy hóa và chống đột biến nên có lợi rat lớn với sức khỏe của con người [6] [7] [8] [9] [10] [11].

Quả Cam sành là một trong những trái cây có giá trị dinh dưỡng cao, giàu

vitamin C, hesperidine, carotenoid, các chất chống oxy hóa như flavonoid nên giúp tăng sức dé kháng tăng khả nang chồng oxy hóa mạnh, ngăn ngừa lão hóa làm chậm

ton thương do các gốc tự do gây ra, làm giảm huyết dp [12], [13] [14] [15] [16],[17] chống viêm chống sơ vữa động mạch ngăn ngừa nhồi máu cơ tim và ngăn ngừa

Theo FAO, năm 2019 tông sản lượng cam ở Việt Nam là 1.017.2 nghìn tan

(19] Diện tích trồng cam của cả nước tăng 37,56 nghìn ha và sản lượng tăng 360,53

nghìn tắn trong giai đoạn 2016 — 2020 [20] Sản lượng cam cả nước năm 2022 là

1807.9 nghìn tan [21] Vùng sản xuất cam quýt lớn nhất nước ta là Đồng bằng sông

Cửu Long (ĐBSCL) có khoảng 35.000 ha chiếm 57,86% điện tích trồng cây có múi

của cả nước, sản lượng 124.548 tan (chiêm 76,04%) Năng suất cam quýt nơi đây

được xác định là loại cây ăn qua nhanh cho thu hoạch, hiệu qua kinh tế cao [7]

Những năm gan day, diễn biến xâm nhập mặn ở ĐBSCL phức tạp bat thường

năm sớm năm muộn so với cùng kỳ nhiều năm Năm 2011, tại một số tỉnh ven biên ĐBSCL, nước biên xâm nhập sâu vào các sông rạch khiến các đòng sông bị nhiễm mặn sớm gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến đời sông người dân và hoạt động nông nghiệp Những thang đầu năm 2016 điển biển xâm nhập mặn tại DBSCL được đánh

giá nặng né nhất trong 100 năm qua va dự báo còn diễn biến xấu hon trong những

năm tiếp theo [22] Mặn xâm nhập sâu vào nội đồng làm đất bị nhiễm mặn khiến hầu

hết các loại thực vật bị giảm năng suất và làm xấu đi các tinh chat lý hóa học của dat,

ảnh hưởng tiêu cực đến cân bang sinh thái trong vùng [23]; cản trở sự tăng trưởng,

quang hợp; anh hưởng lên sự tham thấu và hạn chế sự phát triển và sản xuất của thựcvật do độc tính của ion, trong đó ion Cl đặc biệt độc đối với cây có múi [24], [25]

[26], [27] Man còn ảnh hưởng đến các hoạt động sinh lý của cây như trao đổi nước;

ngừng tông hợp cytokinin, ảnh hưởng sự sinh trưởng của các cơ quan trên mặt đất:

ức chế quá trình hút khoáng ở rễ làm cây thiểu năng lượng; ức chế vận chuyển và

phân bố các chất đồng hoá trong cây, kìm hãm quá trình sinh trưởng của cây [27]

Chất điều hòa tăng trưởng thực vật giúp điều hòa quá trình sinh trướng và phát

triển của cây Trong đó, đặc biệt là gibberellic acid (GAs) giúp cây chống lại các stress đo môi trường tạo ra bằng cách cái thiện ham lượng điệp lục, kích thước khí

không và quá trình tự huỷ của lục lap, cúng cô thành tế bao, giảm stress oxy hóa,

tích tụ chất thâm thấu, làm gia tăng hàm lượng proline, kích hoạt các enzyme chồng

oxy hóa, cải thiện cường độ quang hợp [28], [29], [30] Trong điều kiện stress mặn,GAs giúp tăng tỉ lệ nảy mam, sự tăng trưởng và năng suất lúa mì, ức chế quá trìnhperoxid hóa lipid do gốc tự đo [31], [32], [33] Do đó, sử dụng GA; có thé cai thiện

khả năng chịu mặn ở cây trồng bị stress mặn.

Từ những luận giải trên, đề tài “Khao sát anh hưởng của GAs lên sự sinh trưởng

của giông Cam sành (Citrus nobilis Lour.) nuôi cây in vitro trong điêu kiện stress

mặn” được thực hiện đẻ đánh giá anh hưởng của NaCl lên một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa hình thái của cây Cam sành và tác động của GA: lên một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa, hình thái của cây Cam sành trong điều kiện mặn in vitro từ đó giúp cây Cam giảm thiệt hại trong điều kiện stress mặn, làm cơ sở khoa học cho định hướng áp dụng trong quy trình canh tác Cam ở những vùng đất mặn.

Il MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU

Xác định ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng thực vật GAs đến sự sinh

trưởng của cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) in vitro moc từ hạt khi bj stress mặn.

II DOI TƯỢNG NGHIÊN CỨU

Cây Cam sành (Citrus nobilis Lour.) in vitro được nay mam từ hạt trong điều

kiện stress mặn.

IV NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU

Đề đạt được những mục tiêu trên, nghiên cứu này sé thực hiện các nội dung sau:

- Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng của NaClO và HgCh ở các nồng độ khác

nhau đến khả năng khử trùng của hạt giống Cam sành (Citrus nobilis Lour.)

- Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng của stress mặn lên sự sinh trưởng của cây

Cam sành (Citrus nobilis Lour.) in tro qua các chỉ tiêu hình thai, sinh lý, sinh hóa,

giải phẫu Xác định nông độ muối ảnh hưởng lên sự sinh trưởng của cây Cam sành

(Citrus nobilis Lour.) in vitro nhiều nhất.

- Nội dung 3: Khao sát anh hưởng của GAz lên sự sinh trưởng của cây Cam sành

(Citrus nobilis Lour.) in vitro trong điều kiện stress mặn qua các chỉ tiêu hình thái

sinh lý, sinh hóa, giải phẫu.

V PHAM VI NGHIÊN CỨU

Trong giới hạn của dé tài, chỉ nghiên cứu sự ảnh hưởng GA; ở các nồng độ khác nhau lên sự sinh trưởng của giống Cam sành (Citrus nobilis Lour.) trong điều kiện stress mặn nuôi cay in vitro.

VI THOI GIAN VA DIA DIEM NGHIEN CUU

Thời gian: tháng 10/2023 đến tháng 4/2024.

Dịa điểm: Các thí nghiệm được thực hiện tại:

Phòng thí nghiệm Phương pháp đạy học Sinh lý thực vật Khoa Sinh học

-Trường Dai học Sư phạm Thanh pho Hồ Chí Minh:

- Phòng thí nghiệm Sinh lý thực vật - Khoa Sinh học - Trường Đại học Khoa

học Tự nhiên thành phố Hồ Chí Minh.

- Loài : Citrus nobilis Lour var nobilis [34]

Cam sành là giống lai tự nhiên giữa Citrus reticulata va Citrus sinensis, có nhiều

tên khoa học khác nhau như Cirrus nobilis Lour., Cam sành, King Orange, Roi-de-siam, mandarin, Tangor [7] [34].

1.1.2 Nguồn gốc và sự phân bỗ

Cam sành (Citrus nobilis Lour.) có nguồn gốc ở miền Nam Việt Nam xứ Đông

Dương Tại Việt Nam, từ Bắc vô Nam, địa phương nao cũng trong Cam sành với rấtnhiều gidng cùng với các tên địa phương khác nhau ma không nơi nao trên thế giới

có như: Cam sành Bồ Hạ; Cam sành Hàm Yên, Yên Bái, ở khắp nơi trong nước đều

có giông quý [7]

Ở miền Nam, Cam sảnh được trồng trồng chủ yếu ở khu vực Đồng bằng sông

Cửu Long, như Vĩnh Long, Tiền Giang, Cần Thơ, được gọi chung là Cam sành Sài

Gon Đất đai khí hậu nhiệt đới nguồn nước tưới phong phú, lao động đôi dào lànhững lợi thé trong phát triển cây có múi (cam, quýt, chanh bưởi) của vùng Đồngbằng sông Cửu Long [35] Quả Cam sành rat dé nhận ra nhờ lớp vỏ dày san sùi giỗng

bè mặt mảnh sảnh và thường có màu lục nhạt (khi chín có sắc cam), các múi thịt có

màu cam, thịt trái nhiều nước, hương vị chua ngọt, trọng lượng trung bình 275

gram/trái Chu kỳ khai thác 10 — 15 năm Phù hợp ăn tươi, chế biến và tiêu thụ nội

địa [36].

1.1.3 Đặc điểm sinh học của cây Cam sành (Citrus noblis Lour.)

Cây Cam sành thưởng có tuôi thọ cao nhất là những nơi có khí hậu ôn hòa, đất

tốt, độ dốc thoát nước tốt [6].

Rễ cam là rễ cọc Nếu trồng bằng hạt thì rễ chính ăn sâu xuống đất, có 2-3 rễ

lớn phân hóa từ rễ chính rồi nảy thành rễ phụ rễ con, rễ nhánh ăn ngang song song

với mặt dat, Nếu trồng bằng chiết cảnh, cây thường không có rễ chính rõ ràng màgồm nhiều rễ cạnh có thê phát triển to nhưng không đâm thăng xuống sâu Rễ cam

ăn nông, độ sâu khoảng 50 em trở lên Độ ăn sâu, nông của rễ phụ thuộc vào giống

va đất trồng Ré thường ăn sâu ở đất xốp không đọng nước, ăn nông ở nơi dat có lớp

nước ngam gan mặt đất Ré phát triển tốt ở nhiệt độ 10 — 37°C, nêu nhiệt độ cao hay

thấp hơn sự phát triển của rễ sẽ ngừng lại, khi độ âm của đất dưới 1%, tí lệ oxygentrong đất dưới 1,2 - 1.5% rễ ngừng phát triển Vì vậy cần xới nông đất tơi xốp, đầy

đủ oxygen thì cây cam mới phát triển tốt [6]

Cây Cam sành cao khoảng 3 — 3,5m tán cây hình dù, thân cây có tiết diện tron,

thân trưởng thành màu nâu sam, nhiều cành, mọc yếu, không gai Những cây mọc từ

hạt có bộ rễ mọc khỏe nên trên thân nỗi đường sống Tùy theo cách tròng là chiết

cành, ghép cành trên gốc, gieo bằng hạt mà thân cam phân cành phù hợp Do các vườn cam ở Việt Nam phần lớn trồng bằng chiết cảnh nên cây cam thường có nhiều

cành góc, cành vượt rất khỏe Nên loại bỏ sớm cảnh vượt vì các cành ay sử dung

nhiều chất đỉnh dưỡng làm ảnh hưởng đến các cành cho quả Cây cam mỗi năm sinh

ra nhiều đợt cành, người ta chia ra các loại cành: cành mùa xuân, cành mùa ha, cành

mùa đông Trong đó cành mùa xuân là cành quan trọng nhất trong năm, thường chiếm hơn một nửa số cành sinh trưởng [6] [37].

Cây cam có bộ lá xanh quanh năm, lá đơn, lá không eo, màu xanh đậm, thay

nhau rụng trong lúc lá mới xuất hiện nên cây lúc nảo cũng xanh lá Trong lá có nhiều

túi tinh dầu khi vò ra thay thơm Lá vừa là cơ quan quang hợp hô hap và dự trữ [6].

Hoa hình thành ở nách lá, thường ra đồng thời với cành non, hoa nở rộ, trên một

cây có thê nở tới 60.000 hoa và chỉ cần 600 hoa đậu là mỗi cây có thê thu được 100

kg quả Hỏa mọc đơn hoặc chùm, đường kính 2,5 — 4mm, có 4 — 5 cánh trắng, khoảng

20 — 40 nhị Trong một cây, cành ở ngọn thường nở hoa sớm hơn cành gốc, cành sinh trưởng yếu ra hoa sớm hơn cành sinh trưởng mạnh Trong khi cây nảy lộc, những

cành mẹ yếu mà nảy nhiều mầm nên bam bỏ một số cành, dé cành còn lại đủ sức phát

triển nuôi hoa, nuôi quả [6].

Quả cam sành to, có dang hình cau hơi dep, đường kính 4 — 12 em, trọng lượngtrung bình 235.9 g Dáy trái và cuống lõm xuống Quả gồm vỏ thịt và hạt Vỏ màu

xanh xù xì, có túi đầu, bên trong có thịt qua mềm nhiều xơ dang chặt chẽ với nhau với 8— 11 múi, trong múi có các tép mong nước có sắc tổ tạo thành màu quả và nhiều hạt có hạch cứng bao xung quanh Hạt cam là hạt của cây 2 lá mam, có thẻ đơn hoặc

đa phôi Hạt có 2 mang, màng ngoài khá nhẫn, bóng, thắm nhiều lignin nên cứng;

màng trong mỏng Người ta nhận thấy số hạt trong quả có liên quan đến sự phát dục:

quả càng nhiều hạt càng dé phát triển, quả ít hay không hạt thì kích thước quả lại bé.Hạt cam chín cùng với quả, khi đã này mộng thì không giữ được lâu muốn đưa đi xa

phải có kĩ thuật bảo quản Khi quả Cam sành chín, vỏ quả có màu xanh vàng, san và

day 3 — 5 mm, tép màu vàng cam dam, mong nước vi ngọt chua mùi rất thơm, bảo

quan tốt trên cây [6], [38].

Cam sành tươi có chứa 87,5 % nước, protein 0,9 %, carbohydrate 8,4 %, acid

hữu co 1,3 %, cellulose 1,6 %, calcium 34 mg%, sat 23 mg%, caroten 0,4 mg% vitamin C 40 mg% Qua là nguồn vitamin C, có thé tới 150 mg trong 100 g dịch, hoặc

200 — 300 mg trong 100 g vỏ khô [39].

Trong lá và vỏ quả xanh có l-stachydrin, hesperdin, aurantin, acid aurantinic,

tinh dau Cam rụng (petitgrain) Hoa chứa tinh dầu Cam (neroli) có limonen, linalol,

geraniol Vỏ quả chứa tinh dầu mà thành phan chính là d-limonen (90%),

decyclicaldehyd tạo nên mùi thơm, các alcol như linalool, dl-terpineol, alcol nonylic, còn có acid butyric, authranilat metyl và ester caprylic [39].

1.1.4 Công dụng

Trái cây ho Citrus có chứa các hợp chat chong oxy hóa va vitamin C giúp cơ

thé chống lai các bệnh khác nhau [40], [41] như bảo vệ co thé khỏi tác hại của các

loại oxy phản ứng ROS bằng chất chống oxy hóa như phytochemical vitamin khoáng chất, flavonoid, carotenoid, polyphenol, điều hòa và tăng cường hệ thống miễn

địch, chống viêm, chống vi khuẩn [42] Các chất chéng oxy hóa còn giúp giám huyết

ấp giảm nguy cơ mắc bệnh tim và các bệnh thông thường khác có liên quan [43] [44], [45], giúp ngăn ngừa lão hóa sớm và làm chậm tôn thương đo các gốc tự do gây

ra [46] [47] Tinh dầu lá Cam sành còn thê hiện hoạt động chống oxy hóa và kháng

khuẩn mạnh mẽ [48].

Hàm lượng Vitamin C (acid ascorbic), carotenoid, polyphenol, hesperidin cao

trong trái Cam còn giúp xây dựng hệ thông miễn dịch khỏe mạnh một cách tự nhién chống lại nhiều bệnh tật như hội chứng hô hap cap tinh nặng, phì đại tim, nhồi máu

cơ tim [49], giúp ngăn ngừa virus như SARS-CoV-2 nhờ kích thích tế bào bach cầuchống lại sự nhiễm trùng [12], [17], [50], [51] Tiêm vitamin C liều cao vào tĩnh mạch

có thé cải thiện các triệu chứng và kéo dài sự sông của bệnh nhân ung thư giai đoạncudi [52]

1.1.5 Các yếu té ảnh hưởng đến sự sinh trưởng và phát triển

Vẻ khí hậu, các loài Cam thường được trồng ở các vùng khí hậu á nhiệu đới có

độ cao đưới mực nước biển là 760 m và không thể phát triển tốt ở độ cao trên 2.000 m ở xích đạo Cây Cam có thé sinh trưởng và phát trién được ở mức nhiệt từ

13 — 38°C, phù hợp nhất ở 23 — 29°C Sự sinh trưởng ngừng lại ở nhiệt độ thấp hơn13°C và trên 42°C và cây chết khi nhiệt độ dưới -5°C Nhiệt độ ảnh hưởng đến phẩm

chất và sự phát triển của trái Thường ở nhiệt độ cao trái chín sớm, ít xơ và ngọt nhưng

kha năng cất giữ kém va màu sắc trái chin không dep (các sắc tô hình thành nhiều

hơn ở nhiệt độ thấp) Tông tích ôn trung bình hằng nằm can cho cam là 2.600 3.400°C Tổng tích ôn có ảnh hưởng đến thời gian chín của quả cam Thời gian ra hoa đến trái chín của cam quýt ở vùng nhiệt đới ngắn hơn vùng á nhiệt đới do lượng

-tông tích ôn cần thiết cho cam quýt ở vùng nhiệt đới đạt sớm hơn nhiều so với vùng

A nhiệt đới [37] Cường độ ánh sáng thích hợp đối với loài không thích ánh sáng trực

xạ như Cam là khoảng 10.000 — 15.000 lux (tương ứng với ánh sáng khoảng 8 giờ

sáng và 16 — 17 giờ chiều trong ngày hè quang mây) [7], (37] Quả Cam có thé bi

nám, cây Cam bị mat nước nhiều sinh trưởng kém dẫn đến tuôi thọ ngắn khi cường

độ ánh sáng quá cao Cam sành thích lượng ánh sáng vừa phải nên cây sinh trưởng

tốt hơn nếu được trồng xen tạo điều kiện có bóng ram Lượng mưa hằng năm can cho

cây Cam là 875 mm nếu không tưới Lượng mưa hằng năm thích hợp là 1.000

-1.400mm và phân phôi đều, độ ẩm không khí khoảng 75% [37] Nhìn chung lượngmưa ở các vùng sản xuất nông nghiệp nước ta vào khoảng 1.400 — 2.500 mm đủ thỏa

mãn cho nhu cau sinh trưởng và phát triển của cây [7].

Cần chú ý lượng nước và phâm chất nước khi trồng Cam Nước rất cần thiết cho

cây trong thời kỳ ra hoa và phát triển quả nhưng cây Cam rất mam cảm với điều kiện

ngập nước Nếu không kịp thoát nước trong vùng dat thấp, mực thủy cấp cao dé gâythối rễ lá vàng úa và chết cây Hơn nữa, đất bị thiểu oxygen trong mùa mưa khiến bộ

rễ hoạt động kém, rễ bị thối, chết, đẫn đến rụng lá, rụng quả non Không được dùng

nước phèn, nước mặn đề tưới cho cây Cam Nước phải đảm bảo lượng NaC! nhỏ hơn

1,5g/L nước và lượng Mg không quá 0,3g/L nước [7], [37].

Khả năng hấp thu chất dinh dưỡng của Cam thắp do bộ rễ ăn cạn gần lớp đất

mặt và các rễ lông mọc ra yêu Cây man cảm xau với muối Bo, mudi Carbonate và NaCl Có thé trồng cây ở đất đồng bằng, phù sa ven sông hoặc đất đôi núi nhưng tốt nhất là trồng trên đất thịt pha, mau mỡ thoát nước tốt và thoáng khí vì rễ cần nhiều

oxygen trong đất; không nên tròng Cam trên đất sét nặng, phèn, đất nhiều cát, đắt cótầng canh tác mỏng, mực thủy cấp cao [37] Độ pH tốt cho Cam trong khoảng 4 — 8

và tốt nhất từ 5,5 — 6,5 do ở độ pH này các nguyên tô khoáng cần thiết cho Cam ở

dang dé tiêu Phần lớn đất trồng cam quýt ở nước ta đều có độ pH thấp từ 4 - 5, vì

vậy can chú ý cải tạo đất và bón phân thích hợp [7] [37] Cam hap thu chất dinh

dưỡng quanh năm, hap thu nhiều nhất ở thời kỳ nở hoa và khi cây đã phát triển dot

non Cần cung cấp đầy đủ và cân đối các nguyên tô đinh dưỡng NPK cũng như các

nguyên t6 vi lượng cho cây [7]

1.2 Stress mặn

1.2.1 Khái niệm stress

Stress (sự căng thăng) được dùng dé chỉ một yếu tô ngoại sinh gây ảnh hưởng

bat lợi cho thực vật hoặc toàn bộ các phản ứng của thực vật (sinh lý, biến dưỡng tập tính) đôi với một tác nhân gây stress Các tác nhân gây stress có thẻ là: thiểu nước,

lạnh, đóng băng, nhiệt độ cao, nồng độ muối cao (nhiễm mặn), thiếu oxygen trong

vùng rễ hay ô nhiễm không khí [26].

Stress thường làm giảm mạnh sự tăng trưởng và phát triển của thực vật, gây ra

bệnh hoặc rồi loạn sinh lý ở thực vật Stress lam thay đôi trạng thái cân bằng 6 trong

cây Các tác nhân gây stress có thời gian tác động khác nhau Một số tác nhân gây

stress nhanh chi trong vải phút, nhưng có những tác nhân can nhiều ngày, nhiều tuần

(nước trong dat) đôi khi nhiều tháng (vài chất định dưỡng khoáng) Chúng có thé tác động riêng lé hoặc kết hợp Một yếu tô môi trường có thé gây stress cho thực vật này

nhưng không gây stress cho thực vật khác [26].

1.2.2 Dat nhiễm mặn

Một trong những hạn chế về môi trường trong nông nghiệp là độ mặn của đất

làm giảm năng suất cây trồng Theo nghiên cứu của FAO, đất mặn được định nghĩa

là đất có độ dẫn điện từ 4 dS/m trở lên trong dịch chiết bão hòa [53] Dat mặn chứa

một lượng mudi hoà tan dư thừa gây ức chế quá trình sinh trưởng của cây Thanh phan các ion khoáng gây hại cho đất thường là Na‘, K*, Ca?*, Mg?*, Cl’, SO” trong đó muối NaCl là thành phan chinh gay man cho đất [54] Độ mặn cao ảnh hưởng

đến khoảng 20% điện tích đất nông nghiệp và một nửa điện tích đất được tưới tiêutrên thé giới [55]

Ion sodium gây độc cho hau hết thực vật và một số thực vật cũng bị ức chế bởi

nông độ ion clorua cao Lượng muối cao thê hiện tình trạng thiếu nước hoặc thâm

thấu căng thăng do khả năng thâm thấu trong dat giảm [56].

Mức độ gây hại của đất mặn rat đa dang, tuỳ thuộc vào loài cây, giống cây, thời

gian sinh trưởng các yếu tô môi trường và tính chất đất đo đó khó có định nghĩa một

cách chính xác [27].

1.2.3 Tác hai stress mặn tới cây trằng

Hai tác động chính gây ra stress mặn là stress thâm thấu và stress ion [57] [58].Stress thâm thấu xảy ra đo mức độ tiềm nắng nước trong thực vật giảm [59] Stression xảy ra khi các ion độc hại có tac động bat lợi đến thực vật và làm mất cân bằng

nội môi của các ion gây ra sự gián đoạn trong việc hấp thu các ion khác Cả hai điều

này dẫn đến stress oxy hóa ở thực vật, tức là tạo ra các loại oxy phan ứng ROS [60],

[61].

Stress mặn ngăn cản sự tăng trưởng, quang hợp; tác động lên sự thẩm thấu vàgây hại do độc tính của ion [26] [27] Uc chế tăng trưởng là tôn thương cơ bản dẫn

đến các triệu chứng khác mặc dù sự chết tế bào theo chương trình cũng có thể xảy ra

khi bị stress man nghiêm trong [57].

Mặn còn gây ảnh hưởng đến các hoạt động sinh lý của cây như trao đôi nước: ngừng tổng hợp cytokinin, ảnh hưởng sự sinh trưởng của các cơ quan trên mặt đất;

ức chế quá trình hút khoáng ở rễ làm cây thiểu năng lượng: ức chế vận chuyên và

phân bố các chat đồng hoá trong cây; kim hãm quá trình sinh trưởng của cây [62].

Mỗi giống cây trồng có một nồng độ mudi ngưỡng, vượt quá nông độ này các

cây không ưa mudi có dau hiệu giảm tăng trưởng, giảm trọng lượng khô và mat màu

lá [26] Trong đất mặn, nông độ các chất muối hoa tan bên ngoài môi trường cao làm

tăng áp suất thâm thầu của dung dịch đất hơn so với áp suất thâm thâu của tế bào làm cây không hap thu được nước, cling lúc đó lá vẫn thoát hơi nước nhiều gây hạn sinh

lý [54] Stress mặn làm tăng acid abscisic (ABA) trong rễ, dịch xylem va lá, làm đóng

khí không nên gây suy giảm quang hợp [57], [63].

Hơn nữa khi nồng độ muỗi hay tỉ lệ [Na*}/[K*] quá cao sẽ làm ngăn can hoạt động của nhiều enzyme, cản sự tổng hợp protein Na* ở nông độ cao còn có thể loại

Ca?! ra khỏi nguyên sinh chất gây xáo trộn tính thâm của màng (K* thoát ra khỏi tế

bao) [26].

1.2.4 Tác hại của mặn đối với cây có múi

Main còn làm cây có múi bị cháy lá còi cọc và giảm năng suất quả Tác động

của độ mặn đến sinh trưởng và phát triển có liên quan đến các rồi loạn sinh lý nghiêm

trọng, dẫn đến giảm khả năng thâm thấu của tế bào, tích tụ ion Cl và Na* đến mức

gây độc tế bao, gây mat cân bằng dinh dưỡng làm giảm sinh trưởng và năng suất quả.Cuối cùng, các ion độc hại trong tế bào chat gây ra stress oxy hóa có thé gây hại

nghiêm trọng cho bộ máy quang hợp [64].

Cây Cam man cảm xấu với mudi Bo, muối Carbonate và NaCl [37] Theo Yassin và cộng sự (2004), Stress muối chủ yếu làm giám quá trình đồng hóa CO2, độ

Al-dẫn khí không và tiém năng nước của lá cây có múi, ngoài ra còn làm khiến nồng độ

Cl hoặc Na" trong lá tích tụ quá nhiều [65] Tác động bắt lợi của độ mặn trong lá cây

có múi chủ yếu là do sự tích tụ clorua Sự tích ly CI” trong mô lá làm giảm mạnh

khả năng quang hợp và độ dẫn khí không [66].

1.2.5 Cách đáp ứng cua thực vật đối với stress mặn

Thực vật có khả năng thích nghỉ và thích ứng đối với các điều kiện stress.

Trong đó khả năng thích nghỉ kha nang khang stress gia tăng do thực vật đã trải qua

stress còn thích ứng là sự kháng stress trong cơ chế di truyền qua nhiều thế hệ

chọn lọc Bên cạnh đó, thực vật còn có kha năng cảm ứng sự thích nghi một stress

thông qua sự kháng một stress khác [26] Stress muỗi là một stress môi trường chủ

yếu ảnh hưởng đến sinh trưởng và phát triển của thực vật [67]

Thực vật có nhiều cơ ché thích nghi, biến đôi khác nhau như biến đôi hình thái

lá, thân, giảm sự hình thành khí mô lignin hoá các tế bào nhu mô vỏ làm cây bên ving hơn, can dong ion đi vào cây dé ứng phó và sống sót trong các điều kiện ngập mặn điều chỉnh đóng mở khí không, thay đôi các hoạt động sinh lý như quang hợp.

hồ hắp, điều hòa cân bằng nội môi ion, kích hoạt con đường stress thâm thấu, điều

hòa tín hiệu hormone thực vật và điều chỉnh động lực học của tế bào và thành phân

thành tế bao, [67], [68] Theo thời gian và theo mức độ nghiệm trọng của stress

mudi, sự mat cân bằng thâm thấu và ion trong tế bào ảnh hưởng đến quá trình quang

hợp và sự tăng trưởng của thực vật [69] Thực vật đã phát trién các hệ thông dé duy

trì hàm lượng Na * ở mức thấp bing cách loại bỏ Na? khỏi tế bào chất bang cách sử

dụng chất chống phan ứng Na*/H* vận chuyên Na" dé đôi lay H + [70] Con đường

điều hòa quá nhạy cảm với mudi (SOS) điều chỉnh cân bằng nội môi ion thông qua

điều chỉnh hoạt động của chat chong phan ứng Na? /H* khi bị stress muối [71] Việc

cung cấp Calcium có tác dụng bảo vệ cây trồng khi bị stress mặn Canxi duy trì sự

vận chuyền posstasium và tính chọn lọc K†/Na* ở những cây bị thiểu Nat và trực tiếp ngăn chặn việc nhập sodium qua trung gian bởi các cơ chế không chọn lọc kênh cation

[57].

Trong điều kiện hạn mặn cây sẽ tích lũy proline, Chất này hoạt động như chất

chống oxy hoá giúp bảo vệ các thành phần của tế bao, duy trì sự ôn định màng tế bảo, ngoai ra còn giúp cây tăng áp suất thấm thấu giúp cây hap thu nước tốt hơn [72].

Ngoài ra sự hiện diện của khí mô ở rễ được xem là đặc điểm cần thiết đề cây pháttriển trong điều kiện ngập nước Hệ thông khí mô giúp vận chuyển oxygen từ phantrên không khí đến rễ trong đất ngập nước Tuy nhiên, trong điều kiện stress mặn, số

lượng khí mô giảm đáng kẻ [73].

1.3 Nuôi cấy mô

1.3.1 Nuôi cấy mô

Nuôi cay mô hay còn gọi là nuôi cấy in vitro đều là thuật ngừ mô tả các phương

thức nuôi cây các bộ phận thực vật trong ống nghiệm có chứa môi trường xác định ở

điều kiện vô trùng [74] Ở phương pháp này, các điều kiện như nhiệt độ, ánh sáng,

thành phần đinh dưỡng phytohormone được sử dụng dé điều khién quá trình sinh

trưởng và phát triển của tế bào, mô nuôi cay theo mục tiêu và yêu câu đã đặt ra [75].

Kỹ thuật nuôi cấy mô dựa trên nguyên lý tính toàn năng của tế bào thực vật, nghĩa là từ một mô một cơ quan hoặc một tế bào của bất kỳ bộ phận nào của cây đều

có thé phát triển thành một cây hoàn chỉnh nếu được nuôi trong môi trường thích hợp.Môi trường có các chất dinh dưỡng thích hợp như muối khoáng, vitamin, các hormone

tăng trưởng và đường Kỹ thuật này cho phép tái sinh chéi hoặc cơ quan (sự phát triển

cơ quan) từ các mô như: thân, lá hoặc rễ [74].

1.3.2 Vai trò của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật GA; trong sự sinh

trưởng của thực vật

Chất điều hoa tăng trưởng thực vật gồm các hormone thực vật và các hợp chat

hữu cơ nhân tạo có bản chất hoá học khác nhau nhưng đều có khả năng điều hoà quá

trình sinh trưởng và phát triển của thực vật [28] Ứng dụng chất điều hòa tăng trưởng

thực vật trong chu trình sống của thực vật có thé anh hưởng đến sự nảy mam của hạt

và quá trình huy động các chất đỉnh đưỡng [76].

Gibberellic acid có hoạt động đối với sự kéo dai tế bào, sự kéo dai long và tang

trưởng lá GAs liều cao (hay phối hợp với cytokinin kích thích mạnh sự tăng trưởng

lá GAs kích thích sự tăng trưởng chdi, gỡ vài sự ngủ của chdi và phôi [28]

Xử lý GAg làm giảm tác động mạnh mẽ của độ mặn đến các thông số tăng trưởng

(diện tích lá, trọng lượng khô của hạt và sắc tổ quang hợp) và các thành phan hóa học

carbohydrate, protein, amino acid và ham lượng proline [77].

GAs cai thiện các chi tiêu tăng trưởng, sắc tổ quang hợp và từ đó cải thiện năngsuất cây trồng Khả năng chịu mặn khi bô sung GA: ngoại sinh cho cây có thé đạt

được thông qua quá trình điều hòa thắm thấu, từ đó làm tăng lưu lượng nước và trạng thái nước (bảo ton và sử dụng) băng cách sử dụng các chất hòa tan hữu cơ như

saccharide va protein [77].

GAs đã được chứng minh là làm giảm tác động của áp lực mudi lên ham lượngsắc tô và hiệu quả sử dụng nước [78] Cùng với sự gia tăng các chất hòa tan có hoạt

tính thầm thấu, đường hòa tan, protein hòa tan và amino acid, sự tích lũy caleium và

magienium trong rễ cây được xử lý bằng GA: có thé góp phần vào hệ thông bảo vệ

thâm thấu của cây trong điều kiện stress mặn Ở điều kiện stress mặn càng cao cây con tăng sự sản xuất ethylene GA; điều chính sự rối loan trao đôi chat và loại bỏ các

tác động tiêu cực của việc tích lũy ethylene, từ đó làm giảm rõ rệt tác động mạnh mẽ

của mudi [79]

1.4 Các nghiên cứu về cây có múi

1.4.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới

Năm 2011, Khalil va cộng sự đã tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của các mức

độ mặn khác nhau đến sự phát triển và thành phần hóa học của gốc ghép cam chua

và chanh Volkamer đồng thời chứng minh hiệu quả của nắm rễ cộng sinh trong việc kiêm soát các môi nguy hiểm khác nhau đi kèm với stress mặn Gốc cam chua và chanh Volkamer | năm tuổi được giữ trong nhà kính và tưới với mức độ mặn 1500

ppm, 3000 ppm va 4500 ppm Độ mặn làm giảm sự xâm nhập của nam rễ cộng sinh

(AM) Trong cả hai loại AM và không AM, diện tích lá, diện tích mat cắt ngang của

thân, trọng lượng khô tông cộng, ngọn, lá và rễ đều giảm khi bị nhiễm mặn Cây được tiêm nam AM có thông số tăng trưởng cao hơn đáng kê so với cây không được tiêm

[80].

Năm 2011, Balal và cộng sự tién hành đánh giá anh hưởng của độ mặn đến một

số chỉ tiêu sinh trưởng và sinh hóa của 10 gốc ghép cây có múi khác nhau với các

nông độ NaCl lần lượt là 0 (đối chứng), 30, 60 và 90 mM trong 90 ngày trong môitrường nuôi cay trên cát cho thay nồng độ muối cao làm giảm đáng ké các thông số

tăng trưởng như trong lượng tươi và khô của chi và rễ Những thay đổi này có liên

quan đến việc giảm ham lượng chất diệp luc trong lá Ngược lai, hàm lượng proline

và đường tăng lên Kết luận rằng các chất thâm thấu này đóng vai trò chính trong việc

giúp cây tăng khả năng chống chịu với stress mặn [81]

Năm 2012, Hussain và cộng sự đã cho 12 cây có múi có kiêu gene đại diện cho các loài Citrus chính và cả ba chi thuộc họ Rutaceae chịu áp lực mudi vừa phải

(75 mM) trong 12 tuần và mô phan ứng sinh lý của các cây này đối với stress muối

Các kết quả cho thấy hàm lượng clorua trong lá thấp có thể được sử dụng như một

chi số vé khả năng chống chịu stress mặn ở các kiều gen cây có múi Việc khai thác

chỉ thị này sẽ cho phép đánh giá tốt hơn nguồn gen cây có múi và sẽ dẫn đến việc xác định các nguồn kháng mới cho nhân giống gốc ghép [82].

Năm 2017, Singh và cộng sự đã tiễn hành nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng của

stress mặn (NaCl) dén SỰ nảy mam của hạt và sức sống của bael(Aegle marmelos) Hạt giỗng được ngâm trong dung dich NaC] nồng độ 5%, 10% và

15% trong 3 giờ và hạt giống đối chứng không xử lý NaCl Kết quả cho thay anh

hưởng của độ mặn làm giảm đáng ké tỷ lệ nảy mam của hạt; chiêu dài cây con, sức

sông cây con và khả năng sản xuất chất khô so với đối chứng, hạt bael có thé có khả

năng nảy mam và sức sông thấp hơn trong điều kiện stress mặn [83]

Năm 2021, Martinez-Cuenca và cộng sự đã tiền hành sàng lọc các giỗng quýt

‘King’ (Citrus nobilis Lour.) x Poncirus trifoliata ((L.) Raf.) làm gốc ghép cây có múi

chịu man nhằm đánh giá kha năng chong chịu man của gidng cam quýt lai mới so với

cam quýt Carrizo Kết quả cho thay một số giống lai có triệu chứng stress mặn rõ rệt

như sinh khối thực vật và thông số RGR giảm mạnh, tỷ lệ cháy và rụng lá Stress mặn làm giảm tiêm nang nước của lá ở tat cả các giống lai, có sự tích tụ proline ở cây bị nhiễm mặn Đặc điểm chính giúp cải thiện khả năng chịu mặn ở một số kiểu gen rõ

rang có liên quan đến sự mat cân bằng giữa các ion Cl’, Nat và K*, đặc biệt là tốc độ

hap thu va van chuyén K* dược tang cường làm chậm sự phá hủy thực vat [84].

Năm 2022, Khalid va cộng sự nghiên cứu vẻ gốc ghép tứ bội chanh Volkamertruyền khả năng chịu mặn khi ghép với lưỡng bội Kinnow Mandarin bằng cơ chế bảo

vệ chống oxy hóa mạnh và điều chỉnh thâm thấu hiệu quả Ca trong điều kiện stress

mặn vừa phải (75 mM) và stress mặn cao (150 mM) đều có Sự Suy giảm các biến số

quang hợp (Pn, gs, E, Fv/Fm, FvEm', NPQ) và sự tích lũy khoáng chat (ion Cl, Na,

K, P, N, Ca) bị anh hưởng đáng kể trong lá và rễ của gốc ghép lưỡng bội (2x) và tứ

bội (4x) Volkamer ghép với giỗng quýt Kinnow thương mại [85].

1.4.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam

Năm 2010 nghiên cứu của Lê Văn Hòa và Phan Thị Xuân Thủy cho thấy xử lý

cam Soàn với GA; 10 ppm ở 2 tháng trước thu hoạch giúp giảm ty lệ hao hụt trọng

lượng và tăng hàm lượng vitamin C trong trái, kéo dai thời gian ton trữ đến 4 tuần

trong điều kiện phòng thí nghiệm GA; giúp nâng cao chất lượng và giảm bớt tôn that

sau thu hoạch của cam Soan [86].

Năm 2012, với mục đích cải thiện màu sắc và kéo dài thời gian bảo quản trái

Cam mật (Citrus sinensis (L.) Osbeck), Lê Văn Hòa và cộng sự đã khảo sát hiệu qua

của việc xử lý Ethephon dạng đơn và kết hợp với GA3, CaCl trước khi thu hoạch đến

màu sắc và phẩm chat trái Cam mật Kết qua cho thấy xử lý Ethephon kết hợp với CaCl và GAs giúp hạn chế sự tôn thất về trọng lượng và ham lượng vitamin C trong quá trình tồn trữ, có thé kéo dai tuôi thọ trái đến 5 tuần mà giá trị cảm quan trái vẫn

én định trong suốt quá trình tôn trữ [87]

Năm 2014, Lê Hong Giang và Nguyễn Bao Toàn đã tiền hành đánh giá kha nang

chống chịu mặn của một số giống đậu nành Kết quả cho thay NaCl ảnh hưởng đến

kha năng sống va sinh trưởng của cây đậu nành Nông độ muối tăng làm giảm tý lệ

sống của cây cũng như chiều cao cây, số lóng và chiều dai rễ Ở nông độ mudi NaCl

4 g/L gây ngộ độc mặn với triệu chứng là cây còi cọc, rễ phát triển nghèo nàn, lá

trưởng thành thịt lá vàng, gân lá còn xanh, cháy chóp lá và bìa lá và theo sau là sự rụng lá [88].

Năm 2016, Lê Hồng Giang và cộng sự tiếp tục tiến hành nghiên cứu chọn lọc các dòng mô tip chong mặn của đậu nành MTD 760-4 bang xử lý tia gamma Nhóm

tác giả đã gây đột biến băng phương pháp kích thích bằng tia gamma kết hợp chọnlọc in vitro trên môi trường có bô sung NaCl trên giống đậu tương MTD 760-4 đề thuđược đòng mô sẹo chịu mặn Kết quả cho thấy, ở nồng độ muối 2,5 g/L, hau hết môsẹo đều phát triển bình thường Khả năng chịu mặn đến 5 g/L đạt được bằng cách

nuôi cay mô sẹo không chiếu xạ và chiếu xạ ở liều 5 - 40 Gy trên môi trường chọn

lọc có 5 g/L NaCl sau bốn lần chọn lọc Mô sẹo chịu được độ mặn ở liều 7,5 g/L khiđược chọn lọc ở liều chiếu xa 5 Gy Ham lượng proline được tích lũy cao ở các dòng

mô sẹo chịu mặn trên môi trường chứa NaCl nông độ 5Š và 7,5 g/L [89]

Huỳnh Chí Hiểu va cộng sự khi khảo sát khả nang chịu man của cây chanh

không hat Citrus latifolia (Yu Tanaka) Tanaka vào năm 2018 cho thấy ở nồng độ

4 - 16 g/L, NaCl gây stress thâm thấu và làm giảm sự tăng trưởng của cây chanh sau

2 tuần xử lý và ở nòng độ 12 và 16 g/l gây chết cây hoàn toàn [90].

Năm 2018, Trần Thanh Thắng và cộng sự đã tìm hiểu sự phát triển chdi

in vitro của cây cúc đại đóa (Chrysanthemum indicum L.) trong điều kiện stress man với NaCl ở các nông độ từ 4 — 10 g/L trong điều kiện nuôi cấy in vitro Các biến đôi

hình thái, sinh lý va sinh hóa trong quá trình đáp ứng với stress mặn của các khúc cất

chéi được phân tích NaCl ở nông độ 6 g/L làm giảm kha năng phát triển của các

khúc cắt chéi Trong điều kiện stress mặn, các tế bào nhu mô gan gân chính của các

lá phát trién từ khúc cắt chi giảm hàm lượng luc lap trước khi hóa nâu và chết Bên

cạnh đó, hàm lượng carotenoid, tỉnh bột và cường độ quang hợp của lá giảm Ngược

lại cường độ hô hap, hàm lượng proline và đường tông số hoạt tính IAA và

gibberellin nội sinh tăng mạnh Ngoài ra, việc áp dung GAs 0,1 mg/L giúp chôi tăng trưởng tốt hơn trong điều kiện stress mặn [91].

Năm 2018, Vũ Ngọc Thắng và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu vẻ ảnh hưởng

của mặn đến sinh trưởng, sinh ly và năng suất của 2 giống đậu tương (Glycine max

(L.) Merr.) DT§4 và DT26 Kết quả cho thấy tăng nồng độ gây mặn đã làm giảm ty

lệ nảy mam, chiều đài, khối lượng của thân mam và rễ mam trên cả hai giống đậu

tương Ở nồng độ gây mặn cao (150 mM) đã ức chế sự phát triển của cây mam trên

cả hai giống đậu tương Ở thí nghiệm trồng chậu, chiều cao cây, diện tích lá, chấtkhô nốt san, SPAD, tỷ số Fv/Fm, năng suất và các yếu tô cấu thành năng suất tỷ lệ

nghịch với nòng độ NaCl Trong khi đó độ thiểu hụt bão hòa nước, độ rò rỉ ion tăng

theo nồng độ NaCl [92]

Năm 2020, Võ Hữu nghị và cộng sự đã nghiên cứu về ảnh hưởng của mặn NaCl

đến sự tăng trưởng và tích lũy sinh khối của ba loài cỏ voi Napier (Pennisetum sp.)gồm P purpureum, P glaucum và P setaceum & Đồng bằng sông Cửu Long Ở điềuKiện thủy canh có bổ sung dung địch Hoagland 5 nông độ 0, 5, 10, 15 và 20 g NaCVL,kết quả cho thấy tốc độ tăng trưởng sinh khối tươi và khô, tốc độ tăng trưởng và ham

lượng chất diệp lục (SPAD) của ba loài đều giảm khi nồng độ mặn tăng P setaceum

có khả năng chịu mặn thấp hơn trong số 3 loài nghiên cứu, biểu hiện triệu chứng

stress mặn là cuồn lá và héo ở nồng độ 10 g NaC1/L, và toàn bộ cây bị khô và chết ở nông độ 15g và 20 g NaCV/L [93].

Khi Đỗ Tú Linh và Điêu Thị Mai Hoa nghiên cứu về một số chỉ tiêu sinh trưởng

và quang hợp của giống ngô NK4300, LVN092 và LVN17 trong điều kiện mặn nhântạo cho thay khả nang sinh trưởng và quang hợp của ba giống đều giảm khi nông độ

NaCl tăng Trong đó, giéng NK4300 có chiều cao cây giảm còn 38,75% đến 55,05%,

tông diện tích lá giảm còn 12.8% đến 26,89%, sinh khối khô toàn cây giảm còn

56,05% đến 69,57%, hàm lượng điệp lục giảm còn 78,37% đến 85,22% và hiệu suất

quang hợp thuần giảm còn 78,37 đến 87,45% so với đối chứng [94]

Năm 2023, Lương Thị Lệ Tho và Dinh Thị Bích Thủy đã nghiên cứu khảo sắt

ảnh hưởng của GA: lên sự sinh trường của giống lúa VD20 nuôi cấy in vitro trong

điều kiện nhiễm mặn Kết quả nghiên cứu cho thấy nồng độ mudi càng cao sự sinh

trưởng của Lúa càng giảm đặc biệt ở nồng độ NaCl 10g/L Sự bồ sung GA; 0.5mg/L

vào môi trường nhiễm mặn 10/L giúp cây cải thiện tôi ưu các chỉ tiêu sinh trưởng

và sinh lý sau 3 tuần nuôi cấy [95]

Chương 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Thời gian, địa điểm và vật liệu nghiên cứu

2.1.1 Thời gian nghiên cứu

Đề tài được tiền hành từ tháng 10/2023 đến tháng 4/2024, bao gồm thời gian:nghiên cứu tài liệu, thu mẫu Cam sành: pha môi trường MS cho nuôi cấy Cam sànhtrong điều kiện in vitro; khảo sát nồng độ và thời gian các hợp chất khử trùng;khảo sát ảnh hướng của NaCl đến một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa, hình thái giải phẫucủa giống Cam sành Citrus nobilis Lour trong điều kiện stress man; khảo sát

ảnh hưởng của NaCl đến một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa, hình thái giải phẫu của giống Cam sành Citrus nobilis Lour trong điều kiện stress mặn.

2.1.2 Địa diém nghiên cứu

Phòng thí nghiệm Phương pháp dạy học - Sinh lý thực vật - Trường Dai học Sư

phạm thành phố Hỗ Chí Minh.

Phòng thí nghiệm Sinh lý thực vật - trường Đại học Khoa học Tự nhiên,

thành phó Hỗ Chí Minh.

2.1.3 Vật liệu nghiên cứu

Hạt cây Cam sành Citrus nobilis Lour từ quả cây Cam sành được mua từ vườn

cam của ông Trần Văn Sa, địa chỉ Số nhà 1554, ấp Hóa Thành 1,

xã Dông Thành thị xã Bình Minh, Thành pho Vĩnh Long

2.2 Phương pháp nghiên cứu

Các nội dung và phương pháp nghiên cứu chính của dé tải được trình bày theo

sơ đồ mô tả (Hình 2.1) sau:

Ti: Cam sted (Circ not Lows,

[fans ve Heck 6.9 Theo ¬ mm" Thao &

rcs we: Fa] 1 pa mlEelE we] | {ghee [> vee [ | I—IL— co Ta at || inn (sae |

———

Hình 2.1 Sơ đồ minh họa các nội dung nghiên cứu và phương pháp của đề tài

2.2.1 Phương pháp đánh giá tý lệ sống của hạt giống Cam sành

(Citrus nobilis Lour.)

Hat được đánh thức phôi bằng cách ngâm trong nước trong 24 giờ Sau đó, bóc

vỏ hạt và ngâm hạt trong dung dịch carmin indigo Sau đó cắt đọc hạt ngang qua phần

phôi quan sát sự bat màu của phôi hạt Dém số hạt không bat mau từ đó tính % tinh

sống của phôi.

Thí nghiệm lặp lại 4 lần, mỗi lần 30 hat.

2.2.2 Phương pháp khử trùng mẫu cấy (hạt Cam sành) với NaClO và HgCh ở

các nông độ và thời gian khác nhau

Hạt giống Cam sảnh sau khi được khử trùng bên ngoài tủ cấy với quy trình sau:(1) lắc mẫu bằng xà phòng loãng 1% trong 10 phút, rửa sạch xả phòng đưới voi nướcchảy 10 phút: (2) rửa mẫu bằng nước cất vô trùng (4 - 6 lan); (3) chuyén mau vao céc

(đã được hap khử trùng) và đặt vào bên trong tủ cay.

Khử trùng trong tủ cay với quy trình sau: (1) lắc mẫu trong dung dịch khử trùng

NaClO 25%, NaClO 50%, HgC]a 0.1% (thời gian: 1 phút, 3 phút, 5 phút) tùy nghiệm

thức; (2) rửa sạch dung dịch khứ trùng bằng nước cất vô trùng 5 lần; (3) cấy vào

ống nghiệm có đường kính 22 mm, dài 20 em, chứa 10 mL môi trường nuôi cây MS.