Báo cáo nghiên cứu Đề tài Định lượng sinh khối khô:sinh khối ướt

Mục đích nghiên cứu Mục đích của nghiên c u này là có thứ ể truyền tải lượng ki n th c chuyên môn v ế ứ ềphương pháp chiết - xông hơi đến mọi người, là giảng viên và các bạn cùng lớp –

B Ộ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHI P THÀNH PH H Ệ Ố Ồ CHÍ MINH VIỆN CÔNG NGH SINH H C VÀ TH C PH M Ệ Ọ Ự Ẩ

-

BÁO CÁO NGHIÊN C U Ứ

ĐỀ TÀI: ĐỊNH LƯỢNG SINH KHỐI KHÔ/SINH KHỐI ƯỚT

L p: DHSH19A ớ

Nhóm th c hi n: T ự ệ ổ 4 – Nhóm 3 Giảng viên hướng dẫn: Th y Nguy n Trung H u ầ ễ ậ

Thành ph H ố ồ Chí Minh, tháng 3 năm 2024

Năm học: 2023 - 2024 1

MỤC L C Ụ

Trang

DANH SÁCH THÀNH VIÊN 3

LỜI MỞ ĐẦU 4

PHẦN A: M Ở ĐẦU 5

I Lí do chọn đề tài 5

II Mục đích nghiên cứu 5

III Đối tượng nghiên cứu và phạm vi nghiên c u 5ứ Đối tượng nghiên cứu: 5

Phạm vi nghiên c ứu: 5

IV Phương pháp nghiên cứu 5

Tìm tài li u tham kh o t Internet: ệ ả ừ 5

Đảm bảo tính chính xác và độ tin cậy: 6

V Kết cấu đề tài 6

PHẦN B: N I DUNG 8 Ộ I Giới thiệu chung 8

1 Khái niệm: 8

2 Nguyên tắc: 8

3 V t li u, thu c thậ ệ ố ử , thiết bị và d ng cụ ụ cơ bản: 8

a V t liậ ệu: 8

b Thu c th ố ử 11

c Thi t bế ị, dụng c ụ cơ bả 11n 4 Phương pháp này dùng trong lĩnh vực nào? 12

5 Phương pháp này được sử dụng khi nào? 12

II Mục đích của phương pháp: 12

III Ứng d ng th ụ ực tiễn phương pháp: 13

IV Cách ti n hành 14ế 1 Xông hơi và chiết 14

a Xông hơi 14

b Chi t ế 14

2 Xác định cacbon trong d ch chi t ị ế 15

2.1 Xác định cacbon sinh khố i vi sinh v t bằng phương pháp oxy hoá ậ dicromat 15

2.1.1 Nguyên t c 15ắ 2.1.2 Thuốc thử ổ b sung 15

2.1.3 Thiết bị ổ b sung 15

2.1.4 Cách ti n hành 16ế 2.1.5 Tính toán k t qu 16ế ả 2.2 Xác định cacbon sinh khối vi sinh vật bằng phân tích cacbon theo phương pháp quang phổ 17

2.2.1 Nguyên t c 17ắ 2.2.2 Thuốc thử ổ b sung 17

2.2.3 Thiết bị ổ sung b 18 2.2.4 Cách ti n hành 18ế

2.2.5 Tính toán k t qu 18ế ả

Năm học: 2023 - 2024 2

V Độ chính xác 19

PHỤ L C A 20 Ụ A.1 Ph m vi áp dạ ụng 20

A.2 Nguyên t c ắ 20

A.3 Thi t b ế ị 20

A.4 Cách ti n hành ế 20

A.5 Tính toán k t qu ế ả 21

A.6 Biểu th k t qu ị ế ả 21

PHỤ L ỤC B 22

B.1 Thuốc th b sung ử ổ 22

B.2 Thiết b b sung ị ổ 22

B.3 Cách ti n hành ế 22

B.4 Bàn lu n ậ 22

PHỤ L ỤC C 23

B ng C.1 ả 23

VI Ưu, nhược điểm của phương pháp 24

Đối với phương pháp xử lý mẫu chiết – xông hơi 24

Đối với hai phương pháp đo lường cacbon 24

Phương pháp đo lường cacbon bằng oxy hóa dicromat 24

Phương pháp đo lường cacbon bằng máy đo quang phổ 25

VII Lưu ý 26

Về m u th ẫ ử: 26

Về thu c th : ố ử 26

Trong quy trình: 26

PHẦN C: K T LU N 27 Ế Ậ TÀI LIỆU THAM KH O 28 Ả

B NG PHÂN CÔNG NHI M V 29Ả Ệ Ụ

Năm học: 2023 - 2024 3

DANH SÁCH THÀNH VIÊN

TỔ 4 – NHÓM 3

Năm học: 2023 - 2024 4

LỜI M Ở ĐẦ U Trong ngành nghiên c u v sinh kh i, viứ ề ố ệc định lượng sinh kh i khô và sinh kh i ố ốướt đóng vai trò quan trọng trong việc hiểu rõ về tính chất và ứng dụng của nguồn tài nguyên này Trong phạm vi đề tài ti u lu n này, nhóm chúng em quyể ậ ết định t p trung ậvào phương pháp định lượng bằng chiết xông hơi, vốn hiện là một phương pháp đangđược sử d ng rụ ộng rãi trong lĩnh vực này

Mục đích của nhóm là t o ra m t bài báo cáo chi ti t vạ ộ ế ề phương pháp xử lý m u ẫchiết xông hơi kết hợp với hai phương pháp đo lường cacbon để định lượng sinh khối

vi sinh v t, t ph n cách th c th c hiậ ừ ầ ứ ự ện đến những lưu ý quan trọng trong quá trình x ử

lý mẫu, tính toán đo lường Chúng em s trình bày quy trình cẽ ủa phương pháp này một cách rõ ràng và chi tiết, t khâu chuừ ẩn b mị ẫu đến các bước xử lý và đo lường

Ngoài ra, trong báo cáo của nhóm cũng sẽ nhấn mạnh các điểm c n chú ý trong ầquá trình s dử ụng phương pháp này, nhằm đảm bảo kết quả đo lường chính xác và đáng tin cậy Hy v ng r ng thông qua n l c nghiên c u này, chúng em có thọ ằ ỗ ự ứ ể đónggóp vào vi c ph c p vệ ổ ậ ề phương pháp chiết xông hơi và xây dựng được n n t ng ki n ề ả ếthức cho s phát tri n ti p theo c a chính chúng em trong ngành hự ể ế ủ ọc này trong tươnglai

n m v ng ki n thắ ữ ế ức và có th áp dể ụng các phương pháp này không ch mỉ ở ra cơ hội

h c họ ỏi mà còn làm tăng giá trị ế ki n th c, kinh nghi m có sinh viên và góp ph n vào ứ ệ ở ầ

s phát tri n cự ể ủa các lĩnh vực nghiên c u ứ như nghiên cứu môi trường, … trong tương lai

II Mục đích nghiên cứu

Mục đích của nghiên c u này là có thứ ể truyền tải lượng ki n th c chuyên môn v ế ứ ềphương pháp chiết - xông hơi đến mọi người, là giảng viên và các bạn cùng lớp –

nh ng nhà nghiên cữ ứu tương lai có thể ẽ quan tâm đến lĩnh vực môi trườ s ng và sinh thái đất Chúng em mong muốn rằng thông qua việc nghiên cứu và trình bày về phương pháp này, chúng em có th giúp mể ọi người hiểu rõ hơn về cách th c th c hiứ ự ện phương pháp này, ứng dụng thực tiễn của nó trong nghiên cứu môi trường, và những

l i ích mang l i ợ ạ cũng như những nhược điểm còn tồn đọng B ng cách này, chúng ằ em

hy v ng m r ng tọ ở ộ ầm nhìn và mang ki n th c cho mế ứ ọi người, từ đó có thể khuyến khích, t o s quan tâm cho mạ ự ọi người có th tham gia vào các hoể ạt động nghiên cứu liên quan đến bảo v ệmôi trường và quản lý tài nguyên đất

III Đối tượng nghiên c u và ph m vi nghiên c u ứ ạ ứ

Đối tượng nghiên cứu:

Trong nghiên cứu này, đối tượng nghiên cứu chính là những vi sinh vật có mặt trong

đất C thể, chúng ta quan tâm đếụ n vi sinh vật như vi khuẩn, nấm, và vi sinh vật khác trong đất, cũng như các chất hữu cơ (trong bài báo cáo này là cacbon hữu cơ) được sinh ra t quá trình s ng cừ ố ủa chúng Đối tượng nghiên cứu này đóng vai trò quan trọng trong việc hi u v cân b ng sinh hể ề ằ ọc và chức năng của hệ sinh thái đất

qu nghiên c u ả ứ

IV Phương pháp nghiên c ứu

Tìm tài li u tham kh o t Internet: ệ ả ừ

Chúng em đã tìm kiếm thông tin từ các nguồn uy tín và chính thống như các tạp chí khoa h c, các ọ b n tin nghiên c u, và các trang web chuyên ngành ả ứ

Năm học: 2023 - 2024 6

Các tiêu chuẩn và hướng d n vẫ ề phương pháp chiết xông hơi đã được tham khảo

t nhi u ngu n ừ ề ồ như Tiêu chuẩn Vi t Nam và các bài nghiên c u khoa hệ ứ ọc nước ngoài Hình ảnh minh họa và video được s d ng ngu n thông tin tìm ki m trên ử ụ là ồ ếInternet (Google và Youtube), luôn luôn đi kèm ớv i việc đảm b o tính chính xác nả ội dung và luôn trích d n ngu n g c cẫ ồ ố ủa các hình nh, video này ả

Đảm bảo tính chính xác và độ tin cậy:

Chúng em đã thực hiện các biện pháp kiểm soát chất lượng nội dung và đảm bảo tính chính xác của thông tin b ng cách l p lằ ặ ại ệvi c tham kh o t nhi u nguả ừ ề ồn, đối chiếu và chắt lọc nội dung sao cho phù h p vợ ới mục đích báo cáo đề tài

Mọi thông tin được trích d n và s d ng trong bài nghiên cẫ ử ụ ứu đều đã được kiểm tra và đảm bảo tính chính xác cũng như độ tin cậy c a chúng ủ

III Đối tượng nghiên cứu và phạm vi nghiên c u ứ

IV Phương pháp nghiên cứu

4 Phương pháp này dùng trong lĩnh vực nào?

5 Phương pháp này được sử dụng khi nào?

II Mục đích của phương pháp:

III Ứng d ng th ụ ực tiễn phương pháp:

PHỤ L ỤC B:

B.1 Thuốc thử ổ b sung B.2 Thi t b b sung ế ị ổB.3 Cách n hành tiếB.4 Bàn lu n ậ

PHỤ L ỤC C:

B ng C.1 ả

VI Ưu, nhược điểm của phương pháp:

1 Đối với sinh khối khô:

2 Đối với sinh khối ướt:

VII Lưu ý:

PHẦN C: K T LU Ế ẬN:

Trong đó, sinh kh i vi sinh vố ật là t ng khổ ối lượng c a t t c các vi sinh v t, bao gủ ấ ả ậ ồm

vi khu n, n m, vi rút và các sinh v t vi khu n khác, có trong m t m u hoẩ ấ ậ ẩ ộ ẫ ặc môi trường

cụ thể Sinh kh i vi sinh vố ật được sử d ng trong nghiên cứu sinh thái, sinh h c phân ụ ọ

t , y hử ọc và các lĩnh vực khác để đo lường s hi n di n và s phát tri n c a các lo i vi ự ệ ệ ự ể ủ ạsinh v t trong m t hậ ộ ệ thống s ng hoố ặc môi trường cụ thể Việ c nghiên c u lo i sinh ứ ạ

kh i này ố thường đi kèm với các phương pháp và kỹ thu t phân tích vi sinh hậ ọc để xác định và đo lường sinh khối vi sinh vật trong một mẫu

Định lượ ng sinh khối vi sinh vật b ằng phương pháp xử lý mẫu chiết - xông hơi là quá trình đo lường khối lượng của mẫu vật liệu hữu cơ bằng cách chiết chất cần lấy từ

mẫu, sau đó xông hơi để bay hơi dung môi và lấ ạy l i ch t cấ ần đo Phương pháp này thường được áp dụng trong nghiên cứu sinh học để đo lường lượng cacbon tồn tại trong các mẫu, t ừ đó ước lượng được lượng sinh khố ủa chúng i c

2 Nguyên tắc:

Bằng cách xông hơi mẫu đất, các t bào nguyên vế ẹn được hòa tan và ch t hấ ữu cơ vi sinh vật được gi i phóng Ch t hả ấ ữu cơ của đất không ở thể ố s ng thì không bị ảnh hưởng b i việc xông hơi Các mẫu đất được xông hơi chloroform trong 24h Cacbon ở

hữu cơ chiết b ng dung dằ ịch kali sunphat 0,5 mol/lít được xác định cho m u xông ẫhơi/không xông hơi và hiệu số cacbon hữu cơ chiết được dùng để xác định lượng cacbon sinh khối vi sinh vật

3 V t li u, thu c thậ ệ ố ử , thiết bị và d ng cụ ụ cơ bản:

a V t li u: ậ ệ

• Đất (5.1)

tại phòng thí nghiệm Tiêu chuẩn quy định hướng d n ẫ trình tự như sau:

4.2 Mô tả khu vực lấy m u ẫ

Việc l a chự ọn m t khu vộ ự ấy mc l ẫu đất tùy thuộc vào mục đích của từng nghiên c u ứ

cụ thể, nên cần có các hiểu biết về lịch sử c a khu vủ ực đất đai đượ ấy mẫu Khu vực l c

l y m u c n phấ ẫ ầ ải được mô t m t cách chính xác và cung c p c l ch s cả ộ ấ ả ị ử ủa đ a điểm ị

đó nữa Các chi tiế ề ảt v th m thực v t bao phủ đất, các điều kiện về hóa học và sinh học ậ

hoặc sự ố c ô nhiễm cần phải được ghi chép l i và vi t vào báo cáo ạ ế

4.3 Điều kiện lấy mẫu

Mẫu đất để tiến hành nghiên cứu trong điều ki n c a phòng thí nghiệ ủ ệm, nếu có th ểđược, thì đư c lấy ở hiện trường nơi đất có hàm lượng nước không gây khó khăn cho ợ

việc rây đất Việc tiến hành l y m u c n tránh trong lúc hoấ ẫ ầ ặc ngay sau lúc đất bị ạ h n (hơn 30 ngày), bị đông lạnh, hoặc bị ngập lụt Nếu thử nghiệm để phục vụ cho việc giám sát đất thì mới chấp nhận lấy mẫu với điều kiện hiện có của hiện trường

4.4 Phương pháp lấy mẫu

Kỹ thuật lấy m u tùy thuẫ ộc vào mục đích nghiên cứu N u yêu c u l y mế ầ ấ ẫu đất canh tác hiếu khí thì thông thường mẫu được lấy ở chiều sâu tối đa là 20 cm Bất cứ thực

vật, lớp rác t ừ cây cối, gỗ… nào hoặc các động vật sống trong đất đều phải nhặ ỏ đểt b

giảm đến mức ít nhất việc bổ sung các bon hữu cơ mới vào trong đất Thành ph n h u ầ ữ

cơ sinh ra từ rễ cây và các nguồn khác có thể gây ra những thay đổi không thể đoán trước đư c trong hoạt độợ ng và thành phần của hệ vi sinh vật trong đất Nếu đất tự nhiên có nh ng ch b ng ph ng thì mữ ỗ ằ ẳ ẫu đất cầ ấ ở những nơi bằn l y ng phẳng đó

* S ố đánh các mụ c c ủa TCVN 5960 : 1995 đều đượ c gi nguyên t ữ ừ văn bả n g ốc ở m c 4 Trình t ụ ự

Năm học: 2023 - 2024 10

4.5 Đánh dấu mẫu

Thùng đựng mẫu cần ph i được đánh dấu rõ ràng rành mạả ch và được phân định sao cho từng mẫu m t có thộ ể liên hệ được với vị trí của khu vực mẫu đã đượ ấy Cần c ltránh sử dụng các thùng đựng m u có th h p th mẫ ể ấ ụ ất nướ ừc t mẫu đất hoặc ti t ra các ếchất, ví dụ như dung môi, chấ ẻo hóa vào trong mt d ẫu đất

4.6 Điều kiện vận chuyển mẫu

M u cẫ ần được v n chuy n theo cách th c sao cho giậ ể ứ ảm được tới mức th p nhấ ất sự thay

đổi hàm lượng nước trong đất và mẫu cần được giữ trong t i, tiếp xúc v i không khí ố ớ

d dàng Nói chung mễ ẫu đựng trong 1 túi polyetylen thắt hơi lỏng là đáp ứng được yêu cầu này Các điều kiện môi trường khắc nghiệt cần phải tránh: đất nên gi ữcàng lạnh càng tốt nhưng quan trọng là không được làm cho đất đông cứng, bị khô cứng hoặc trở nên sũng nước

4.7 X ử lý đất

Đất cần được xử lý càng nhanh càng t t sau khi lấy mẫu Thực vật, đ ng vật sống ố ộtrong đất và đá sỏi cần phải loại bỏ trước khi rây qua rây c l ỡ ỗ2 mm để ạo thuận l i t ợcho sự trao đổi khí giữa các hạ ất đ t và vì th ế kiến ngh ị đất cần được duy trì tình trở ạng

hiếu khí Đồng thời cũng cần lo i b ạ ỏ đá sỏi nhỏ, động vật và các mẫu v n thụ ực vật ra

khỏi đất Vật chất hữu cơ như lớp đất mà màu, than bùn s khó l t qua rây c l 2 mm ẽ ọ ỡ ỗ

và c n ph i rây v i rây c l 5mm ầ ả ớ ỡ ỗ ở điều kiện ướt Công việc này cần đến s ự thao tác

thủ công và chất lượng c a các vật liệu l t qua rây ph ủ ọ ụthuộc vào người thực hiện rây Khi rây mà đất bị quá ướt, nếu có điều kiện, thì r i đ t ra và th i nhả ấ ổ ẹ không khí vào đất

để tạo điều kiện cho đất đư c khô đều Đấ ần đượợ t c c bóp v n bằng tay và th nh thoảng ụ ỉđảo đều để tránh lớp đất bề mặt bị quá khô Thông thường công việc này được thực

hi n ệ ở điều ki n nhiệ ệt độ không khí xung quanh N u cế ần làm khô đất thì không nên làm khô quá mức cần thiết đ tạo thuận l i cho công viể ợ ệc rây đất N u cế ần lưu giữ ẫu m

đất lâu hơn thì phương pháp xử lý cần xem xét theo các thông s được đưa ra trong 4.8 ố

và 4.9

4.8 Điều kiện lưu giữ bảo quản mẫu đất:

M u cẫ ần được b o qu n ả ả ở chỗ ối vớ t i nhiệt độ 4 C ± 20 0C, tiếp xúc d dàng v i không ễ ớkhí

Đựng mẫu vào trong m t túi chất dẻo thộ ắt hơi lỏng hoặc đựng trong m t túi tương tự ộnhư vậy nói chung là phù hợp với yêu cầu đã nói Cần phải c n thẩ ận để đảm bảo rằng

khối lượng đất được lưu giữ không quá nhiều để không cho phép điều ki n y m khí ệ ế

xảy ra dưới đáy của dụng c ụ đựng mẫu Đất cần phải được xử lý (xem 4.7) trước khi lưu giữ để đảm bảo cho điều kiện hiếu khí ổn định Một điều quan trọng là không được

để cho đất b ịđông cứng, bị khô hoặc tr nên sũng nướở c trong thời gian lưu giữ Mẫu

đất không đư c để chồng lên nhau ợ

Năm học: 2023 - 2024 11

4.9 Thời gian lưu giữ ả b o quản mẫ u đ t ấ

S d ng mử ụ ẫu đất sau khi l y m u càng s m càng tấ ẫ ớ ốt Cần phải giảm đến mức thấp nhất

m i nguyên nhân làm chọ ậm trễ ệ vi c v n chuy n m u N u phậ ể ẫ ế ải lưu giữ ẫu là điề m u không th tránh khể ỏi thì đất không được lưu giữ quá 3 tháng tr phi mừ ẫu đất còn cho thấy các d u hi u hoấ ệ ạt động c a vi sinh vủ ật trong đất Ho t tính cạ ủa qu n th vi sinh ầ ể

vậ ất đ t gi m xuả ống do kéo dài thời gian lưu giữ m u, ngay c khi gi m u nhiẫ ả ữ ẫ ở ệt độ

thấp, và tốc độ ả gi m này ph ụthuộc vào thành phần của đất và hệ vi sinh vậ t

4.10 mỦ ẫu sơ bộ

Trước khi đem đất đã được xử lý s d ng vào m t thử nghiệm c thể trong phòng thí ử ụ ộ ụnghiệm thì đấy cần được ủ sơ bộ để cho các hạt cây cỏ ở trong đất nảy m m và loầ ại bỏcác hạt đó, và để tái lập lại 1 sự cân bằng trao đổi chất của sinh vậ ếp theo sau s t ti ựthay đổi từ lúc lấy mẫu và điều kiện lưu giữ mẫu cho đến lúc do điều kiện mủ ẫu t o ạ

ra Các điều ki n mệ ủ ẫu sơ bộ ẽ ph thu c vào m s ụ ộ ục đích nghiên cứu nhưng các điều

ki n này nên càng gi ng vệ ố ới điều ki n th nghiệ ử ệm thì càng tốt Thời gian mủ ẫu sơ bộ

s ph ẽ ụ thuộc vào mục đích nghiên cứu, vào thành ph n cầ ủa mẫu đất và các điều ki n ệlưu giữ hoặc ủ mẫu sơ bộ

b Thu c th ố ử

S d ng các thuử ụ ốc thử tinh khiết để phân tích, bao gồm:

• M ỡ silicon (độ nhớt trung bình) (5.2.1)†*

• Cloroform không có rượu etylic (5.2.2)

• Dung dịch kali sunphat, c(K2SO4) = 0,5 mol/l (p = 87,135 g/l) (5.2.3)

• Chai nh a polyetylen, dung tích 250 ml (6.6) ự

• Hệ tạo chân không (bơm tia nước hoặc bơm điện) (6.7)

Năm học: 2023 - 2024 12

4 Phương pháp này dùng trong lĩnh vực nào?

Phương pháp định lượng sinh khối bằng chiết xông hơi trong nghiên cứu sinh học thường áp dụng trong các lĩnh vực như:

▪ Sinh thái học: Đo lượng sinh khối của các loại thảo mộc, cây cỏ, và cây trồng đểnghiên c u v cứ ề ộng đồng thực vật và chu trình sinh học

▪ Sinh học động vật: Đo lượng sinh khối của vi khuẩn, vi rút, hoặc vi sinh vật

khác để nghiên cứu về sinh học vi khuẩn, nghiên cứu dịch tễ học, và các lĩnh vực liên quan đến sinh học động vật

▪ Nghiên cứu môi trường: Đo lượng sinh khối của vi khuẩn hoặc vi sinh vật trong

mẫu nước, đất, hoặc không khí để đánh giá sự ảnh hưởng của môi trường đố ới i v

s phát tri n và phân phự ể ối của chúng

▪ Nghiên cứu dược phẩm: Đo lượng chất hoạt tính trong các loại thảo dược hoặc cây chế biến dược phẩm để đánh giá hiệu qu và an toàn cả ủa sản phẩm

5 Phương pháp này được sử dụng khi nào?

Phương pháp định lượng sinh khối bằng chiết xông hơi được sử dụng trong các lĩnh

vực như sau:

▪ Sinh thái h c và nghiên c u cọ ứ ộng đồng thực vật: Để đo lượng sinh khối của

cây c , cây g nh , ho c loài th c v t khác trong m t khu v c nghiên c u, giúp ỏ ỗ ỏ ặ ự ậ ộ ự ứ

hi u v cể ề ấu trúc và động lực của cộng đồng thực vật

▪ Nghiên cứu đất đai: Để xác định lượng hữu cơ và khoáng trong mẫu đất, từ đó đánh giá tình trạng đất đai và khả năng cung cấp dinh dưỡng cho cây trồng

▪ Nghiên c u vi sinh v t và vi sinh vứ ậ ật trong môi trường: Để đo lượng sinh khối

của vi khuẩn, vi rút, và vi sinh vật khác trong mẫu nước, đất, hoặc không khí, giúp nghiên c u v s phân b và vai trò cứ ề ự ố ủa chúng trong môi trường

▪ Nghiên cứu dược phẩm: Để xác định lượng hoạt chất trong các loại thảo dược

và cây ch biế ến dược ph m, tẩ ừ đó đánh giá hiệu qu và an toàn c a s n phả ủ ả ẩm trong y học c ổ truyền và hiện đại

II Mục đích của phương pháp:

Định lượng sinh khối bằng phương pháp chiết xông hơi là một cách tiếp cận phổ

bi n trong nghiên c u v sinh hế ứ ề ọc và môi trường Mục đích chính của vi c s d ng ệ ử ụphương pháp này là đo lường lượng sinh khối của các loài thực vật, động vật, hoặc vi khu n Viẩ ệc đo lường sinh khối thông qua phương pháp này có thể mang l i nh ng kh ạ ữ ảnăng sau:

❖Đánh giá sức khỏe của cây cối: Xác định lượng sinh khối giúp cho người nghiên c u biứ ết được s c kh e c a cây c i, có th d báo v tứ ỏ ủ ố ể ự ề ốc độ sinh trưởng,

kh ả năng chịu đựng môi trường, và cả tình trạng b nh h ệ ại

❖ Nghiên c u vứ ề năng lượng sinh học: B ng cách biằ ết lượng sinh khối, người ta

có thể tính toán được lượng năng lượng mà m t sinh v t có th s n xu t hoộ ậ ể ả ấ ặc tiêu thụ Điều này r t quan tr ng trong các nghiên c u v hấ ọ ứ ề ệ sinh thái, năng lượng tái tạo, và môi trường sống

Năm học: 2023 - 2024 13

❖Đánh giá tác động của môi trường: Sự thay đổi trong sinh kh i c a sinh v t có ố ủ ậthể phản ánh tác động của môi trường, bao g m s biồ ự ến đổi khí h u, ô nhiậ ễm môi trường, và sự thay đổi c a đất đai ủ

❖Ứng d ng trong nghiên c ụ ứu y học: Định lượng sinh khối qua phương pháp xông hơi cũng được sử dụng trong nghiên cứu y học, đặc biệt là trong việc đo lường lượng tế bào trong mẫu mô hoặc mẫu máu

đo lường khối lượng của cây cối, giúp nghiên cứu viên đánh giá sức khỏe của rừng, tốc đ sinh trưởộ ng c a cây, và tiủ ềm năng hấp th carbon cụ ủa rừng

❖ Nghiên c u v biứ ề ến đổi khí hậu: Trong b i c nh biố ả ến đổi khí h u, viậ ệc đo lường sinh kh i c a cây c i và thực vật là quan trọng để đánh giá khả năng chịu ố ủ ốđựng của chúng trước những biến đổ ề nhiệt độ và môi trường Xông hơi có i vthể được s dử ụng để đo lường lượng carbon mà cây c i h p thố ấ ụ và lưu giữ, từ

đó đánh giá tác động của biến đổi khí hậu lên quá trình này

❖ Nghiên c u vứ ề động v t hoang dã:ậ Việc đo lường sinh khối không chỉ dừng lại

ở cây cối mà còn được áp dụng trong nghiên cứu về động vật hoang dã Xông hơi có thể được sử dụng để đo lường khối lượng của các loài động vật như chim, động vật có vú, và cả loài động vật nhỏ như ếch và chuột, giúp nghiên cứu viên hi u rõ vể ề đa dạng sinh học và tác động của môi trường đến các loài này

❖Ứng dụng trong nghiên cứu y học: Trong lĩnh vực y học, phương pháp xông hơi cũng được sử dụng để đo lường lượng tế bào trong mẫu mô hoặc mẫu máu Điều này giúp trong việc đánh giá sức kh e c a các bỏ ủ ệnh nhân, theo dõi ti n ếtriển của bệnh, và đánh giá hiệu qu c a các liả ủ ệu pháp điều tr ị

❖ Nghiên c u v sinh v t biứ ề ậ ển: Trong nghiên c u v sinh v t bi n, viứ ề ậ ể ệc đo lường sinh kh i c a các loài th y s n, t o bi n, ho c c bi n có th s dố ủ ủ ả ả ể ặ ỏ ể ể ử ụng phương pháp xông hơi Điều này giúp nghiên cứu viên hiểu về sự phân bố, tác động của môi trường biển đối với sinh vật, và cả vai trò của chúng trong sinh thái hệ sinh thái biển

Lót bình hút ẩm (6.2) b ng gi y lằ ấ ọc ẩm (6.3) để xông hơi mẫu đất

Cân ít nh t ba mấ ẫu đất m ẩ (5.1) trong cốc đốt thuỷ tinh (6.4) (hoặc trong đĩa Petri)

(6.5), m i m u ch a khỗ ẫ ứ ối lượng tương đương với 25 - 50g đất khô kiệt Sau đó đặt chúng vào bình hút m cùng v i cẩ ớ ốc đốt ch a 25 ml cloroform không chứ ứa rượu etylic

(5.2.2), cho m t ít h t ch ng trào ộ ạ ố (6.10) vào c c cloroform và cố ốc đốt ch a vôi xút ứ

(5.2.4) T o chân không cho bình hút m cho t i khi cloroform bên trong bình sôi ạ ẩ ớ

m nh khoạ ảng 2 phút Đóng khóa chân không của bình hút ẩm và để ở phòng (6.1) có ủnhiệt độ 25°C ± 2°C trong bóng t i trong khoố ảng 22h đến 24h

Sau khi xông hơi kết thúc, lấy cốc cloroform và giấy lọc ra khỏi bình hút ẩm Sau đó tiến hành tách hơi cloroform trong mẫu đất bằng cách hút chân không bình hút ẩm (lặp

lại sáu lần mỗi lần hai phút) và mẫu đất có th ể mang đi chi t đưế ợc

Cho ba mẫu đối ch ng ứ ẩm không xông hơi (50g khối lượng khô) vào chai nh a PE ự

(6.6) và dùng 200 ml dung d ch kali sunphat ị (5.2.3) để chiết ngay như chỉ ẫ ở điề d n u

ở tốc độ 200 vòng/phút trong 30 phút hoặc máy lắc đứng ở ố t c đ 60 vòng / phút trong ộ

45 phút và l c dung môi chi t qua gi y lọ ế ấ ọc (6.3) Chiết đối chứng không xông hơi và

lọc dung môi chiết cũng như vậy

Xông hơi

Tính toán

kết quả