Bài báo cáo dịch tả heo châu phi môn vi sinh bệnh Động vật

ế 6 Chẩn đoán bằng PCR Phưng pháp sử ụng kĩ thuậ d t PCR và Real-time PCR Mục đích: PCR và Real-time PCR là phưng pháp được sử dụng để phát hi u vệ ật liệu di truy n cề ủa virus tron

B  GIO D C V   ĐO TO

-

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HCM

Môn Vi sinh b: nh đng vt

Chuyên ngành: Th y- chăn nuôi

Nhm: 2

1 | P a g e

B NG PHÂN CÔNG Ả 1

I) Thông tin chung 3

1) Tri u ch ng ệ ứ 6

2) Nguyên nhân, Y u t ế ố đóng góp 7

3) Chẩn đoán 8

4) Ki m soát/Phòng ng a ể ừ 8

5) B nh tích ệ 10

6) Ch ẩn đoán bằ ng PCR 10

II/ Virus ASFV 12

1) C ấu trúc cơ bả 12 n 2) Hình th c sinh s n ứ ả 13

3) S ức đề kháng 13

III) So sánh t l n Châu Phi và t l n c ả ợ ả ợ ổ điể 15 n IV) B nh phó thương hàn (Tri u ch ng gi ng d ch t heo) ứ ố ị ả 15 1) Bệnh phó thương hàn trên heo 15

2) So sánh tả heo Châu Phi và phó thương hàn 17

2 | P a g e

BẢNG PHÂN CÔNG

Nguyễn Kim Hồng

Làm Powerpoint

Phùng Xuân Tú 2287500283 Thiết kế game thuyết trình

3 | P a g e

DỊCH TẢ HEO CHÂU PHI

Bệnh d ch t heo châu Phi là m t trong nh ng b nh do virus quan tr ị ả ộ ữ ệ ọng nhất ở heo Đây là một bệnh toàn thân và ph i khai báo h u h t các qu c gia ả ở ầ ế ố

Các tên khác: ASFV

I) Thông tin chung

B nh d ch t heo châu Phi do Asfivirus gây ra Có nhi u ch ng khác nhau vệ  ả ề ủ ới

độ ực l c khác nhau Tình tr ng lâm sàng c a nó khá gi ng v i b nh d ch t heo cạ ủ ố ớ ệ  ả ổ điển và nhi u bề ệnh thông thường, chẳng hạn như salmonella, do đ cần phải chẩn đoán trong phòng thí nghiệm Việc ki m soát ASFV ể thường bao g m loồ ại heo nhi m b nh Gi ệ ống như bệnh d ch t heo c  ả ổ điển, virus này t n t i r t lâu trong ồ ạ ấ thân tht đông lạnh.

4 | P a g e

Dch t l n châu Phi (ASF) có b n thả ợ ố ể, trong đ hai thể chính là th c p tính và th ể ấ ể mãn tính:

Thể quá c p tính: ấ

- Lợn thường không có tri u ch ng lâm sàng và ch t m t cách nhanh ch ng ệ ứ ế ộ ố

- M t s ộ ố trường hợp trước khi ch t có th sế ể ốt cao và nằm ủ ủ r

- Những vùng da mỏng như bụng, mang tai hay b n có xu t hi n nhi u nẹ ấ ệ ề ốt đỏ

và chuy n d n sang màu tím ể ầ

Thể c p tính ấ :

- Được gây ra b i chở ủng virus c độc lực cao

- Lợn s s t cao (40,5 ẽ ố – 42 độ C), và có thể chết nhanh mà không bi u hiể ện tri u ch ng ho c lệ ứ ặ ợn s n m và sẽ ằ ốt cao trước khi ch t ế

- Trong 2 – 3 ngày đầu tiên, lợn có th ể giảm b ch c u và gi m ti u c u ạ ầ ả ể ầ

- Các tri u ch ng khác có th bao g m s t cao, b n, xu t huyệ ứ ể ồ ố ỏ  ấ ết ở da v cà ác c quan n i tộ ạng (Các vùng da như tai, ngực, bụng, đuôi, cẳng chân chuyển sang màu xanh tím hoặc màu đỏ và lợn đi lạ ất thười b ng)

- 1-2 ngày tiếp theo, trước khi ch t l n ế ợ thường có các tri u chệ ứng như đi lại không v ng, viêm mữ ắt, khó th , th g p, nôn m a, tiêu ch y ho c táo bón, ở ở ấ ử ả ặ mũi c bọt lẫn máu và m t s ộ ố biểu hi n thần kinh ệ

- Lợn ch t trong vòng t 7-14 ngày ho c có th ế ừ ặ ể kéo dài đến 20 ngày Lợn đang mang thai nếu mắc bệnh sẽ s y thai và dẩ ẫn đến ch t 100% ế

5 | P a g e

- Lợn nhi m mà không có tri u ch ệ ứng v n có th mang vi rút suẫ ể ốt đời và tr ở thành ngu n lây nhi m bồ  ệnh

Thể á c ấp:

- Tri u ch ng: khó th , ho, giệ ứ ở ảm n, sụt cân, viêm khớp, đi lại kh khn, c thể s y thai lẩ ở ợn đang mang thai

- Lợn s t nh ố ẹ hoặc không sốt

- Tỉ l ệ chết khi m c th á c p là 30-70%, sau 15-45 ngày nhi m bắ ể ấ  ệnh

- Có th nhi m b nh mãn tính ho c khể  ệ ặ ỏi b nh ệ

Thể mãn tính:

- Thường xu t hiấ ện ở những chú heo con t 2-3 tháng tu i, do ch ng virus có ừ ổ ủ

độ tính trung bình ho c th p ặ ấ

- Thời gian ủ b nh dài t 1-2 tháng, xu t hi n rõ r t các tri u ch ng r i loệ ừ ấ ệ ệ ệ ứ ố ạn đường tiêu hóa

- Các tri u chệ ứng thể mãn tính cũng giống như thể cấp tính nhưng c mức độ biểu hi n yếu hn và tình trạng bệnh mãn tính bao g m s t cân, s t dai d ng, ệ ồ ụ ố ẳ các d u hi u hô h p, viêm loét da và viêm kh p mãn tính ấ ệ ấ ớ

- Gây r i lo n tiêu hóa: lúc tiêu ch y, lúc táo bón, kèm theo khó th và ho ố ạ ả ở

- Các n t xu t huy t trên da cố ấ ế huyể ừ đỏn t sang tím Tróc t ng mừ ảng da trên những vùng da m ng ỏ

- Ở thể này heo có t l ỉ ệ chết thấp hn khi mắc các th khác Tuy nhiên khi ể khỏ ệi b nh v n còn t n t i virus là ngu n lây b nh ẫ ồ ạ ồ ệ

6 | P a g e

Heo con theo mẹ

• Nôn mửa

• Tiêu chảy

• Thi u ph i h p vế ố ợ ận động

• Viêm k t mế ạc

• S t cao ố

• Độ ửt t

• D tật

• Heo con lúc m i sinh r t y u (run b m sinh) ớ ấ ế ẩ

• Tỷ l ệ chết cao

Chảy nước mũi có máu, dịch nhầy

Các n t xu t huy t trên da chuy n t ố ấ ế ể ừ đỏ sang tím

Viêm loét da

7 | P a g e

Nái

• Kém n

• S t cao ố

• Sảy thai

• Tng số thai chết lưu

• Tng số thai khô

• Co giật

• Thi u s ế ự phối h p vợ ận động

• Tiêu chảy

• Suy gi m kh ả ả nng sinh sản

• Da đổi màu xanh

Heo cai s a và heo v béoữ ỗ

• Heo - gủ rũ ục đầu

• B ỏ n

• Tiêu chảy

• Chảy ghèn

• S t cao dai dố ẳng ừ 41-42 độ t C

• Dấu hiệu thần kinh

• Co giật

• Thi u s ế ự phối h p vợ ận động

• Da đổi màu xanh

2) Nguyên nhân, Y u t ế ố đóng góp

• Virus này được truyền từ heo b nhi m b nh ho ệ ặc mang trùng qua nước mũi

và miệng, nước ti u và phân Nó r t d lây lan ể ấ 

• Virus có th ể được truy n qua ve ề (đặc bi t là thu c gi ng Ornithodorus) ệ ộ ố

• Có th lây truy n qua không khí trong kho ng cách ngể ề ả ắn

• Có th xâm nh p vào tr i qua th t b v y nhi m (có th lây qua thể ậ ạ   ấ  ể t heo chưa nấu chín ho c thặ t đã qua xử lý)

8 | P a g e

• Lây truyền c học ph ổ biến qua ng, qu n áo, xe t i, v.v ủ ầ ả

• B i nhiộ m virus PRRS làm tng mức độ nghiêm tr ng c a bọ ủ ệnh

3) Chẩn đoán

• B nh bi u hiệ ể ện các b nh tích mệ ổ khám với h ch b ch huy t xu t huy t, các ạ ạ ế ấ ế vùng ho i t trong lá lách, nhi u v t xu t huy t nh ạ ử ề ế ấ ế ỏ ở thận và các v t loét ế hình nút trong ru ột

• Trong t t c ấ ả các trường h p nghi ng , chợ ờ ẩn đoán phải được xác nh n b ng ậ ằ phân tích trong phòng thí nghi m Phân tích trong phòng thí nghi m bao ệ ệ gồm việc xác đnh virus thông qua PCR, phân l p virus và phát hi n kháng ậ ệ thể trong huy t thanh ế

• Ở h u hầ ết các qu c gia, ASF là mố ột cn bệnh phải báo cáo

4) Kiểm soát/Phòng ng a ừ

- Hiện nay đã c 2 loại vaccine: NAVET-ASFVAC và AVAC ASF LIVE

- Nhưng vẫn chưa c thuốc đặc tr 

- Tuy nhiên c n th c hi n các biầ ự ệ ện pháp để phòng tránh như:

✓ Đối với người chn nuôi: cần vệ sinh s ch s ạ ẽ trước khi ti p xúc v i l n ế ớ ợ

✓ Lậ ứp t c cách li khi nghi ng l n b nh ờ ợ ệ

✓ Tránh để mầm bệnh phát tán và xâm nhập bằng cách tiêu diệt các sinh vật trung gian truy n bề ệnh như rùồi, mũi, de, rận…

✓ Vệ sinh di t khu n chu n tr i và d ng c ệ ẩ ồ ạ ụ ụ cho n đnh kỳ

✓ Nắm rõ các biểu hi n của lợn để có biện pháp x lý k p thệ ử  ời

9 | P a g e

10 | P a g e

5) B nh tích ệ

Các bệnh tích thường thấy ở heo b nhi m d ch t heo châu Phi bao g m có    ả ồ máu ch y ra t các l t ả ừ ỗ ự nhiên như miệng, mũi, hậu môn Xuất huyết ở tim, c tim, vành tim Lách b  sưng to, xu t huy t và nhấ ế ồi máu Gan cũng b sưng to, xuất huy t Ph i l n b ế ổ ợ  xuất huy t, khí qu n và ph ế ả ế quản ch a b t D ứ ọ ạ dày cũng b xuất huy t ế

6) Chẩn đoán bằng PCR

Phưng pháp sử ụng kĩ thuậ d t PCR và Real-time PCR

Mục đích: PCR và Real-time PCR là phưng pháp được sử dụng để phát hi u vệ ật liệu di truy n cề ủa virus trong đa dạng loại m u Phát hiẫ ện được sự tồn tại của ASFV trước khi virus gây ra tri u ch ng rõ ràng cho v t nuôi ệ ứ ậ

Mẫu: m u t dẫ ừ ch phết mũi, họng; mẫu lách, h ch amidan, h ch b ch huy t, huyạ ạ ạ ế ết thanh và m u máu toàn ph n th n t lẫ ầ ậ ừ ợn

Nguyên lý: xét nghi m ASFV s dệ ử ụng primer và probe để bắt cặp đặc hiệu vào trình t DNA mã hóa cho protein nh n diự ậ ện đặc thù c a ASFV Hi n nay, các kit ủ ệ chẩn đoán thường thi t k primers và probes d a trên vùng trình t mã hóa protein ế ế ự ự p72 của ASFV P72 là protein đặc hiệu của ASFV, có cấu trúc nh n di n t t k c ậ ệ ố ể ả

11 | P a g e

khi m u ch a virus b t ho t hay phân h y B kit xét nghi m ASFV cẫ ứ ấ ạ ủ ộ ệ ủa ABT cũng

sử d ng trình t ụ ự nhận biết vp72 để phát hiện virus gây b nh ệ

Ưu điểm: c độ nhạy và độ đặc hiệu cao, phát hiện được virus t s m PCR và ừ ớ Real-time PCR được tổ chức sức khỏe động vật th ế giới (OIE) khuy n cáo s dế ử ụng như một phưng pháp tiêu c ẩn đểhu chẩn đoán ASFV

Nhược điểm: phưng pháp xét nghiệm ASFV bằng PCR ho c Realtime PCR cặ ần

có phòng thí nghiệm đạt tiêu chuẩn để thực hiện các xét nghi m PCR, giá thành ệ cũng là mộ ấn đềt v đối với các nước đang phát triển

12 | P a g e

II/ Virus ASFV

1) Cấu trúc cơ bản

ASFV là Virus DNA s i kép thu c h Asfarviridae B gen dài 170-193kbp và mã ợ ộ ọ ộ hóa cho 150-167 protein Số lượng gen khác nhau m t chút gi a các dòng virus ộ ữ khác nhau ASFV có những điểm tưng đồng v i các virus DNA l n khác, ví d ớ ớ ụ như poxvirus, iridovirus và mimivirus

13 | P a g e

2) Hình th c sinh s n ứ ả

Virus d ch t l n châu Phi (ASFV) nhân lên trong t bào ch t c a các t bào b  ả ợ ế ấ ủ ế  nhi m b ệnh (Đặc biệt là đại th c bào) S nhân lên c a virus diự ự ủ n ra trong các khu v c h t nhânự ạ Quá trình được ph i hố ợp chặt chẽ ớ v i ít nh t 4 ấ giai đoạn phiên mã ngay l p tậ ức trướ- c s m, s m, trung gian và mu n Phớ ớ ộ ần lớn s sao ự chép và l p ráp x y ra các khu v c h t nhân r i r c c a t ắ ả ở ự ạ ờ ạ ủ ế bào được gọi là các nhà máy virus Cuối cùng là virion tiền sinh được vận chuyển đến màng plasma dọc theo các vi ống ni chúng nhú ra hoặc b đẩy ra dọc theo các t ế bào actin để lây nhi m vào các t bào m ế ới

3) S ức đề kháng

Virus d ch t l n châu Phi (ASFV) có s ả ợ ức đề kháng cao trong môi trường ASFV

có th ể chu được nhiệt độ thấp, trong tht lợn s ng hoố ặc ở nhiệt độ không cao virus

có th t n tể ồ ại được 3-6 tháng, virus b  chết ở 70 độ C ASFV có khả nng chu được nhiệt độ thấp, đặc bi t là trong các s n ph m th t l n sệ ả ẩ  ợ ống hoặc nấu ở nhiệt

độ không cao nên vi rút có th ể chu được trong th i gian dài 3-6 tháng; virus có th ờ ể b tiêu diệt ở nhiệt độ 56°C trong 70 phút hoặc ở 60°C trong 20 phút

14 | P a g e

ASFV cũng c khả nng kháng lại c chế bảo vệ của v t ch ASFV mã hóa các ậ ủ enzyme c n thiầ ết để sao chép và sao chép b gen c a nó, bao g m các y u t cộ ủ ồ ế ố ủa

hệ thống s a ch a cử ữ ắt b base, protein c u trúc và nhi u protein mà không c n thiỏ ấ ề ầ ết cho s sao chép trong t ự ế bào, nhưng thay vào đ c vai trò trong sự tồn tại và

truy n virus c a v t ch ề ủ ậ ủ

ASFV có kh ả nng thích nghi và biến đổi để tạo thành bi n ch ng mế ủ ới c độc lực thấp hn khi gặp phải kháng th ể trong c thể lợn Tuy nhiên, vi c s d ng vaccine ệ ử ụ sống nhược độc ASF chưa được qua đánh giá về độ an toàn có th tể ạo điều kiện cho ASFV độc lực th p t n t i mà không nh n biấ ồ ạ ậ ết được

15 | P a g e

III) So sánh t l n Châu Phi và t l n cả ợ ả ợ ổ điển

IV) Bnh phó thương hàn (Triu chứng gi ng d ch t heo) ố ị ả

1) Bệnh phó thương hàn trên heo

nguy hiểm thường gặp ở heo v i th i gian di n bi n nhanh, t l ớ ờ  ế ỉ ệ chết cao, khiến người chn nuôi thiệt hại lớn

Nguyên nhân

B nh do vi khu n Salmonella gây ra ệ ẩ

Đặc điểm nhận biết

- Trên heo cai sữa và heo tht, xuất hiện nhim trùng máu, viêm ruột, viêm dạ dày, viêm phổi

16 | P a g e

- Xáo trộn sinh sản trên heo nái

- Bệnh xảy ra chủ yếu ở heo con cai sữa cho đến 4 tháng tuổi Heo lớn ít mắc bệnh hn và nếu c mắc bệnh sẽ ở thể mãn tính

- Bệnh thường đi kèm với bệnh tả lợn

- Bệnh lây truyền chủ yếu qua đường tiêu ha, vi khuẩn theo thức n, nước uống đi vào c thể lợn Ngoài ra, bệnh còn lây qua đường nhau thai từ mẹ sang con

Triệu chứng

Bệnh ph thưng hàn ở lợn bao gồm biểu hiện ở 2 thể cấp tính và mãn tính với các đặc điểm như sau:

Thể cấp tính

- Thường gặp trên lợn con

- Sốt cao từ 42 43 độ, n rất kém hoặc bỏ n

C biểu hiện thần kinh

- Lợn b táo bn, kh đi đại tiện và hay nôn mửa ở khi khởi bệnh, sau đ chuyển sang đi ngoài, tiêu chảy, phân màu vàng c lẫn máu và nước

- Lợn rên la nhiều do đau đớn vì b viêm ruột và dạ dày nặng

- Ph thưng hàn gây cho heo thở gấp gáp và kh thở

- Da xuất hiện các nốt tụ máu đỏ rồi chuyển dần sang tím ở tai, bụng, mặt và da đùi trong

- Chết trong vòng 24 48 giờ sau khi phát bệnh với tỉ lệ lên đến 100%

-Thể mãn tính

- Chuyển sang từ thể cấp tính, thường gặp ở heo tht

- Sốt cao từ 39 40 độ

Bệnh thưng hàn ở lợn gây kém n, không tng trọng, gầy dần đi và thường

tử vong sau 2 4 tuần

Da xuất hiện các mảng đỏ hoặc tím

- B táo bn, phân c màu đen, bên ngoài xuất hiện màng nhầy trong 5 -7 ngày

- Kh thở khi phải vận động, di chuyển kh khn

Bệnh tích

Thể cấp tính

- Lá lách sưng to và dai như cao su, đặc biệt khúc giữa sưng to hn

17 | P a g e

- Xuất hiện tụ máu, xuất huyết và sưng tại hạch lâm ba

- Tụ máu và xuất hiện vài nốt hoại tử tại gan

- Vỏ thận của lợn mắc ph thưng hàn xuất hiện các điểm hoại tử

- Niêm mạc dạ dày và ruột b viêm, xuất huyết, c nốt lở loét và ruột non b bao phủ lớp màu vàng cám

- Phúc mạc b viêm, c huyết tưng và t huyết bám ở trên

- Viêm phổi và xuất hiện vết tụ máu

Thể mãn tính

- Niêm mạc dạ dày và ruột b viêm đỏ thành đám

- Ruột già và ruột non xuất hiện đám loét bờ cạn c phủ t huyết

- Gan c nốt viêm hoại tử to bằng hạt đậu, màu xám

- Phổi b viêm sưng, hoại tử màu xám

- Hoại tử xuất hiện cả trong xưng

2) So sánh t ả heo Châu Phi và phó thương hàn

Đặc

điểm Bệnh dch tả lợn châu phi Bệnh ph thưng hàn ở lợn Tốc độ

lây lan Rất nhanh và mạnh Chậm

Tỉ lệ

Đại tiện

Tiêu chảy nặng, không cầm

được, c lẫn máu tưi và mùi

thối khắm

Thường táo bn, màng nhày trắng

ở ngoài, giai đoạn cuối mới xuất hiện tiêu chảy

Sốt Lên đến 42 độ, không hạ sốt

được bằng kháng sinh

39,5 -41,5, hạ sốt được bằng kháng sinh

Kết mạc Viêm kết mạc và giác mạc, mắt c ghèn, bại liệt Không có

Da Xuất huyết đinh ghim, li ti ở mõm, tại, chân, mặt và trong

Lá lách Không sưng, nhồi huyết hình

rng cưa bên ngoài Sưng và dai

Sụn tiểu