Nghiên cứu thành phần hoá học phân Đoạn ec2 1 cao n hexane

Trong thời đại cách mạng công nghiệp 4.0 hiện nay, cùng với sự phát triển của khoa học, kĩ thuật và công nghệ, thì lĩnh vực y học cũng có nhiều bước tiễn phát triển, đáp ứng nhu cầu chữa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRUONG DAI HQC SU PHAM THANH PHO HO CHi MINH KHOA HOA HOC

KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP

Chuyên ngành: Hoá học hữu cơ

TP HCM, tháng 05 năm 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRUONG DAI HQC SU PHAM THANH PHO HO CHi MINH KHOA HOA HOC

LE QUANG TIEN

NGHIEN CUU THANH PHAN HOA HQC PHAN DOAN EC2.1 CAO n-HEXANE : ETHYL ACETATE CUA CAY DON LA DO EXCOECARIA COCHINCHINENSIS

KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP

Chuyên ngành: Hoá học hữu co

Xác nhận của hội đồng phản biện

(Kí và ghi rõ họ tên) (Kí và ghi rổ họ tên)

Lời đầu tiên cho phép em bày tỏ lòng ơn sâu sắc đến Quý Thầy Cô trường Đại

học Sư Phạm Thành phố Hỗ Chí Minh đã tận tình chỉ dạy, truyễn đạt cho em nhiều kiến

Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến TS Lê Thị Thu Hương, người cô đã nhiệt tình

hướng dẫn, quan tâm, theo sắt chỉ bảo và tạo điều kiện cho em thục hiện đ ti khoá

luận tốt nghiệp này Bên cạnh đó, cô đã day cho em rất nhiễu kiến thức chuyên môn,

những kĩ năng, ánh nghiệm thực nh, định hướng tr đuy vã cách lâm việc khoa học

.để áp dụng vào công việc một cách thành thạo và nhanh chóng Dưới sự hướng dẫn tận

tỉnh của cô, đề ải cuỗi cũng cũng đã đạt được kết quả hôm nay

Em cũng xin cảm ơn tổ bộ môn Hoá Hữu Cơ, tổ bộ môn Hoá Công Nghệ - Môi

“Trường đã hỗ trợ cho em đẫy đủ về cúc dụng cụ, hóa chất và thiết bị phục vụ cho khóa luận Em xin tỏ ông biết ơn quý Thầy Cô trong Hội đồng bảo vệ khóa luận tốt nghiệp đđã xem xết, gốp ý cho Khóa luận của em,

“Con xin gửi lời cảm ơn đến gia đình đã luôn sắt cánh kể bên ủng hộ con và là chỗ củựa vũng chắc giúp con hoàn thành tốt quá trình học tập của mình Em cũng xin cảm ơn thai gin thực hiện để ti

cô mà còn có gia đình và bạn bê, Tuy nhiên, do sự giới bạn về trình độ lý luận, cũng như sốt Em mong sẽ nhận được sự quan tâm cũng như những ÿ kiến phân bí quý Thầy Cô, để em có thể hoàn thiện đề tài và hơn hết, hoàn thiện chính bản thân mình quý giá của

“Cuối cùng em xin gửi lời chúc đến quý Thấy Cô thật nhiễu sức khoẻ, hạnh phúc và thành công tong sự nghiệp giảng dạy Em xin chân thành cảm ơn Thanh phổ Hỗ Chí Minh, thắng 05 năm 2024

1.1.1 Đặc điểm về họ Thầu Dau (Euphorbiaceae) 2

1.1.2 Mô tà về cây Đơn lá đ, 2 1.1, Phân bổ và sinh thi 3

1.2, Các nghiên cứu về được tính của cây Đơn lá đồ 4

1.3 Các nghiên cứu về thành phần hoá học của cây Đơn lá đỏ 6 1.3.1 Các nghiên cứu trong nước trên cây Đơn lá đỏ 6 1.3.2, Các nghiên cứu ngoài nước trên cây Đơn lá đô 9

CHUONG 2 THỰC NGHIỆM

2.1 Nguyên liệu, hoá chất, thiết bị 13

2.1.1 Nguyên liệu ụ 2.12, Hoá chất ụ

2.1.3 Dụng cụ, thiết bị 13

3.2 Phương pháp nghiên cứu ụ 22.1, Phuong pháp ngâm, chết ụ

2.2.2 Phương pháp cô lập va tinh chế các hợp chất 14

22.3, Phuong pháp xác định cầu trúc hoá học “

2.3 Xử lí và điều chế các loại cao 14

3.4, Cô lập và ỉnh chế các hợp chất có trong cao H:EA Is CHUONG 3 THẢO LUẬN

3.1 Khảo sắt và biện luận cu trác hoá học của hợp chất 1 Is 3.1.1 Đặc điểm cũa hợp chất Ï Is

3.1.2, Biện luận cấu trúc hoá học của hợp chất 1 18

3.4 Khảo sắt và biện luận cầu trúc hoá học của hợp chất 2 20

3221 Đặc điềm của hợp chất 2 20 3:22 Biện luận cầu trúc hoá họ của hợp chất 2 20

'CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT eeseeeesersesas22

TÀI LIỆU THAM KHẢO

—Từviếtất TêniếngAnh TêntếngViệ mm

¬ Carbon Nuclear Magnetic Phỗ cộng hưởng tử hại nhân

Độ chuyên dịch hoá hoe

Hình 4.1

DANH MỤC HÌNH ẢNH Tênhình

“Cây Đơn lá đồ - Excoecaria cochinchinensis Lout

“Cu trú hoá học của hợp chất Ï

“Cu trú hoá học của hợp chất 2 hợp chất đã phân lập

Cấu trúc hoá học của c¿

Trang

Danh pháp và phân loại khoa học cây Đơn lá đỏ

So sinh dữ liệu phỏ 'H và '°C-NMR của hợp chất 1

và lupeol

So sánh dữ liệu phố 'H vi "C-NMR eiia hợp chất 2 và eycloart-25-ene-3f,24-diol

“Sơ đồ điều chế các cao phân đoạn từ cây Đơn lá đỏ

Sơ đồ cô lập hợp chất 1 và 2 từ phân đoạn EC2.1

Phổ 'H-NMR của hợp chất 1

Phy Iue Ta

Phu lye 1b, Phố 'H-NMR giãn rộng của hợp chất! Phu lye te Phố'H-NMR giầnrông của hop chất! Phụlạe2a — Phố ”CNMIR của hợp chất

Phụ lục 2b Pho !°C-NMR giãn rộng của hợp chất 1

Phụ lục3a — Phố'H-NMRcủahgpchất2 Phụ lục 3b — Phố 'H-NMR giãn rộng của hợp chất? Phụ lục Phổ C-NMR của hợp chất 2

"Phụ lục 4b,

Phố 'C-NMR giãn rộng của hợp chất 2

Trong thời đại cách mạng công nghiệp 4.0 hiện nay, cùng với sự phát triển của khoa học, kĩ thuật và công nghệ, thì lĩnh vực y học cũng có nhiều bước tiễn phát triển, đáp ứng nhu cầu chữa bệnh và chăm sóc sức khỏe người bệnh, các nhà khoa học đã và

thi

cạnh nền y học hiện đại phát triển như ngày nay, con người cũng đang nghiên cứu các

loại thảo được thiên nhiên với mong muốn tìm ra các phương thuốc mới để có thể chữa

bệnh, chăm sóc sức khỏe nhưng vẫn đảm bảo an toàn cho con người

Nước ta là một nước có khí hậu nhiệt đối ẩm giỏ mùa nên nguồn thực vật tự nhiên cũng rất phong phú và đa dạng, Chính vì vậy, việc nghiên cứu các thành phần hoá học thực tiễn rắt lớn Việc nghiên cứu về thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của các

các tổ bào ung thư, sản xuất các nguồn kháng sinh thể hệ mới đễ ứng dụng trong

phòng ngữa, chữa ị các bệnh ung thư, kháng inh, kháng ho luôn là những để tả

Cây Đơn lá đỏ có tên khoa học là Exeoeearia cochinchinensis hay có tên gọi khác

là cây Lá đơn tia hay cây Dơn mặt ti, là loài thục vật thuộc họ Thầu Dầu Dương Đơn là đỏ được đồng bảo các dân tộc thiễu số khác nhau sử dụng trong điều tị

học gẵn đây chứng mình rằng Dơn lá đỏ chứa nhiề thành phẫn có hoạt tính sinh học,

thư, chống oxi hoá, bảo vệ gan và thận [1]

“Thông qua vie ìm hiễu và tra cứu ti iệu ở ong và ngoài nước, ác giả nhận thấy sây Đơn lá đỏ là một loài thảo được có nhiều công dụng, các hợp chất được phân lập từ

là cây mang lại nhiều hoạt tính sinh học cỏ giá tị cao, Dũ vậy, ti V

Nam thì việc

nghiên cứu loài cây này vẫn còn hạn chế, các công trình nghiên cứu, bài báo khoa học

và các sách, từ điển cây thuốc viết về loài cây này cũng chưa nhiều, điều này chứng tỏ

ềm năng phân lập thêm các hợp chất hoá học phục vụ cho ngành dược iệu sau này là

tất đăng kế,

\Véi mong muỗn cung cấp mở rộng thêm thông tìn vỀ cây, gớp phần vào việc

nghiên cứu và khai thác nhiều hơn về thành phần hoá học của cây qua các hợp chất cô

lập được, chúng tôi tiến hành thực hiện đỀ tà: *Nghiên cứu thành phần hoá học phân EC2I cao whesane: ethyl acetate của cập Đơn ld di Excoecaria

cochinchinensis”

'CHƯƠNG 1 TONG QUAN

1.1 Mô tả thực vật

1.1.1 Đặc điểm về họ Thi Diu (Euphorbiaceae)

Ho Thiu Diu (Euphorbiaceae) là một trong những họ lớn của ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Trén thể giới có Khoảng 6000 ~ 8000 loài Ở Việt Nam, họ Thầu dẫu

có T0 chỉ với 497 loài và dưới loài Họ Thầu Di đặc đi

số lá kèm) với hoa đơn tỉnh, có tuyển mật trong hoa hay trên lá, quả thường có 3 mảnh, đã dạng về thân, lá (luôn

vỏ, khi chín mở (hành các ô, các ð tách rồi nhau để lại cột trung tâm ở giữa, mổ phía bụng và tung hạt ra ngoài (2), (3)

Tác giả Nguyễn Nghĩa Thìn đã nghiên cứu đầy đủ và có tính hệ thống về họ Thầu

Dâu Tác giá nảy không chỉ nghiên cứu về hệ thông phân loại, sự đa dạng mà còn công

bổ nhiễu loài mới của họ Thầu Dẫu ở Việt Nam [4] Nhiễu loài trong họ này có ý

ý, là nguyên liệu diễu ch xăng sinh học như Coe rio (Jatropha

kinh tế cao như cho

curcas), ding lim thuốc, làm cảnh, lâm lương thực, thực phẩm cỏ giá tị dịnh dưỡng

cao Nhiễu loài được dùng làm thuốc chữa bệnh như BS eu vé (Breynia angustifolia),

“Củ đền biên thủy (Coron lòniincola), cô Sữa (Exphorbia thymifolia), Don lá đồ

(Excoecaria cochinchinensis) Một số loài là những cây làm cảnh cho màu sắc đẹp,

môi ong che bỏng mắt như Trang nguyên (Euphorbia cyathophora), S8i tia (Sapium discolor), Vang dé trang b9 (Alchornea annamica),.[2}

`Với những giá tị to im 46, ho Thiu Diu (Euphorbiaceae) dang duge nhigu nha khoa học quan tâm nghiên cứu để bảo tên, phát triễn và khai thác phục vụ cho sự phát tiễn kinh tế của đất nước

1.1.2, Mô tả về cây Đơn lá đỏ

Bing 1.1 Danh php và phân loại khoa học cây Đơn lá đ (2},|5]

"Tên khoa học, Exeoecaria cochinchinensix Lour

"Tên tiếng Anh Blinding Tree

Excoecaria bicolor Hass, Excoecaria orientalis Pax, E Hofin, Amidenma Bieolor

Đơn mặt trời, Mặt qui, Hồng bối qué hoa [6]

Exeoecaria cochinchinensis Lour var con cô một số tên gọi khác như

Cây Đơn lá đó là một loài cây nhỏ, cao tử khoảng 0,70 m đến 1,50 m; có cảnh nhỏ, gầy, vươn đãi, màu tía và là loài đặc hữu, phân bổ

Dương [7] Lá mọc gần như đỗi xứng nhau, hình trái xoan dải, phía cuống nhọn, phía

thiều ở phía đồng bản đảo Đông

đầu có mũi nhọn ngắn, đãi 5 em đến 11,5 em, rộng 2.Š em đến ‡ em Cuống lá đãi 05

cm dén | em Phiễn lá nguyên, mép lã có răng cưa nhỏ, mặt trên cỏ mẫu xanh lá đậm mặt dưới có màu đó tí [6] L7} |5]

“Cụm hoa mọc thành bông ở kẻ lá hoặc ở đầu cảnh gồm nhiều đơn tính, cùng gốc

hoặc khác gốc; hoa đực nhỏ, dài tầm 2 em, có 3 lá đài hình mác nhọn, 3 nhị; hoa cái

ngắn hơn, có 3 lồ đài hình trái xoan nhọn; hơi khía răng ở mép, bầu hình trứng [5] [6]

(Qua nang 3 mảnh Hạt có hình cầu, mẫu nâu nhạt [9] Hình 1.1 bên dưới thể hiện hình

Hinh 1.1, Cay Don li dé - Excoecaria cochinchinensis Lour, 1.1.8 Phân bố và sinh thái

“Cây Đơn lá đỏ phân bố rộng khắp Việt Nam và phân bổ nhiều ở khu vực châu Á như

Lào, Campuchia, Trung Quốc (Quảng Đông, Quảng Tây, Vân Nam), Đài Loan, Thái

Lan, Nhật Ban [5], [10], [11] Tai Việt Nam cây Đơn lá đỏ mọc nhiều nơi như Long An, Tiền Giang, Đồng Tháp, Bên Tre [9] và có các nghiền cứu mà á được thu hãi tại các tinh như Hà Nội, Tuyên Quang, Thái Nguyên §], [I3] [14]

“Cây mọc hoang, va sáng, a độ âm và còn được trồng ở nhiều vườn gia định hay các

vườn thuốc ở các cơ sở y tế đẻ lấy lá, cành non quanh năm dùng để làm thuốc và làm

cây cảnh, Cây thường ra hoa vào mùa hạ Những cây mọc hoang thường cao to hon so

với các cô „ mẫu đó tía nhạt hơn, phiến lá hình mắc thuôn dài hơn 3]

3

Toi Việt Nam, từ lâu cây Dơn lá đỏ được đồng bảo các dân tộc thiểu số khác nhau

sử dụng trong điều trị một số bệnh thông thưởng như myn nhọt, bệnh ngoài da, dị ứng dđa, chống choáng phản vệ, ức chế déi véi Bacillus subsilis, B cereus va B Pilmilus [12]

“Theo y học cỗ truyền, lá Đơn lá đỏ có vị cay, có tỉnh mát, vị nhạt, hơi đẳng, có tác dụng [9], [13] Tại Trung Quốc, Đơn lá đỏ còn được dùng đẻ chữa sới, quai bị, viêm amidan, đau thắc ngực, đau cơ [14],

Năm 1999, tác giả Phạm Xuân Sinh cùng các cộng sự đã tiễn hành nghiên cứu và xây dựng một phương thuốc có Đơn lá đõ Các nguyên liệu dùng để chế bi phương pháp cổ truyền: Đơn lá đó phơi khô, sao qua; thương nhĩ từ sao chéy gai rễ gai: kinh giới sao vàng [12] Nhõm tác giả đã thử nghiệm hiệu quá của phương thuốc chuột nhất trắng và chuột cổng trắng,

Ngoài ra, theo các nghiên cứu trước đây về y học cổ truyền, Đơn lá đỏ còn được dùng thuốc chữa mẫn ngứa, mụn nhọt, tiêu chảy lâu ngày không khỏi, kiết ly ở trẻ em, với một lượng nước nhất định và chỉa lâm 2 ~ 3 lần uéng trong một ngây [5} 6]

“Tác giả Mai Minh Thẩm cũng các cộng sự đã tế

(8) từ Đơn lá đô với dung mdi methanol 80% Coumarin có tác dụng chống đông máu, nghiền cứu này, nhóm tác giả mong muốn xác định các điều kiện cơ bản cho quá trình hợp chất này vào thực tiễn, mở ra các nghiên cứu hướng đến chế phẩm coumarin vào trong các sản phẩm thực phẩm chức năng hay dược phim [1] Các tác giả Ngủ

phần hoá học và hoạt tỉnh của dịch chiết ethanol từ Đơn lá đỏ dùng để ức chế sự di trí thu hai tai tinh Thai Nguyên, được rửa sạch và tráng lại nhiều lẫn bằng nước cất, sau đó với ethanol Thông qua các nghiên cứu „ nhóm tác giả thấy rằng, dịch chiết từ lá cây Đơn lá đỏ có chứa các nhóm chất có tiềm năng gây ức chế ung thư điền tình như các chất thuộc nhóm saponin terpenoid [13] Qua đó cho thay ring, Bon lá đỏ

là loài thảo được thiên nhiên có tiềm năng ức chế các tễ bảo ung thư dạ dày

“Các tác giả Phạm Thy Linh, Nguyễn Quốc Thịnh và Phạm Thị Tuyết Nhung tại

“Trường Dai hoe Y Dược - Dai học Thái Nguyên đã nghiên cứu bào chế cao đặc chiết

ây Đơn lá đỏ và xây dựng tiêu chuẩn cơ sở của cao đặc chiết xuất từ cây Đơn

lả đỏ thủ hái tại Thái Nguyên Nghiên cứu này của nhóm tác giả nhằm mục đích hướng tới việc tạo ra các sản phẩm hỗ trợ điều trị bệnh dị ứng [8]

năng kháng ung thư vú từ một số loài thực vật dùng làm thảo dược của Trung Quốc, qua cho thấy lá cây Đơn lá đỏ có chứa các hợp chất có hoại tính kháng ung thư vú ở

ác hợp chất phenolic có thể ngăn chặn sự phần hủy

anthocyanin và tăng cường độ ôn định của mâu sắc [16]

“Tác giả Lành Thị Ngọc cùng các cộng sự đã điều chế cao chiết tổng methanol; ede cao chiết phân đoạn: n-hexane, ethyl acetate và metbanol từ cây Đơn lá đỏ tại xã An Khang, tỉnh Tuyên Quang vào thắng 10 năm 2021 Sau đỏ nhóm tác giả

"nghiên cửu và đánh giá tác dụng kháng khuẩn và chồng oxi hoá của cao chiết tổng Kết quả của nghiên cứu cho thấy cao phân đoạn n-hexane va phân đoạn ethyl acetate thé

"hiện hoạt tỉnh kháng các vỉ sinh vật kiểm định tốt hơn so với phân dogn methanol Ngoài nhất với giá trị SCạ = 50.32 jig/ml [14],

"Năm 2020, ác giả Jiangeun Wei cing các cộng sự đã nghỉ tác dụng chéng viêm của cây Đơn lã đỏ Nhôm nghiên cứu đã tiễn hành chiết 500 ø bội thô từ lá Đơn lá

6 bằng 10 L nước cất trong 3 lần Sau đó tiến hành lọc và cô đặc dịch chiết, ba nhóm địch chiết nước thu được tương ứng là 60, 40, 20 g/kg thuốc thô Bên cạnh đó, nhóm 5% trong 3 lần, sau đó lọc và cô đặc cũng thu được tương ứng là 60, 40, 20 g/kg thuốc khỏe mạnh Số chuột được chia thành § nhóm (mỗi nhóm 12 con), trong đỏ có các nhóm

46 với liều lượng cao, trung bình và thấp, Kết quả thu được cho thấy chiết xuất nước và cethanol ở liều lượng cao, trung bình và thấp từ lá Đơn lá đỏ có thé ức chế đáng kế sự tính cục bộ ở chuột [10]

“rong nghiên cứu mới nhất vào năm 2023, nhóm tác giả gồm Fatkhurrachman và các công sự đã nghiên cứu điều chế xà phông lỏng chiết xuất từ Đơn lá đó, Nhôm tác triterpenoid [17] có tiểm năng là hợp chất kháng khuẩn, do đó nghiên cứu này muốn khuẩn, đồng thời thục hiện các xét nghiệ độ ôn định của bot, d6 pH, trọng lượng riêng và độ nhớt đẻ sản xuất xà phòng lỏng Kết quả nghiên cứu cho thấy các chế phẩm xã phòng lông được lâm từ dịch chiết methanol của Đơn lá đỏ có hiệu quả trong

vi khuẩn bám trên tay thông qua việc thử nghiệm sát trùng Nghiên cứu bước đầu thành công trong việc phát triển các chế phẩm có nguồn gốc từ thảo dược tự nhiên [18]

cảm quan,

13.1 Các nghiên cứu trong nước trên cây Đơn lá đỏ

Tại Việt Nam, đã có một số nghiên cứu về thành phần hơá học của cây Đơn lá đỏ Năm 1999, tác giả Phạm Xuân Sinh và Nguyễn Thái Ân của trường Đại học Dược

Tà Nội là nhóm tác giả tiên phong và bước đầu phân lập thành công thành phần hoá học

của dược liệu Đơn lá đỏ Nhóm tác giả thu hái lá cây Đơn lá đỏ từ làng Đại Yên - Ba

Đình — Hà Nội Với nghiên cứu này, nhóm tác giá cũng đã bước đầu phần lập một số

anthraglycoside (2) saponin (3), tannin (4) và một số đường khử, Sơ bộ xác định flavonoid có 6 chất trong đó có một chất thuộc nhóm flavanonol (8) [5 [7] [19] Đến năm 2003, nhóm tắc giả đã tiễn hành khảo sit và phân lập thành công ba hợp chất độ là: galie acid (6), ellagic acid (7) vi kaempferol 7-O-glucoside (8) [19]

Sau khi phân lập thành công các hợp chất, nhóm tác giả đã tiền hành thử hoạt tính chống oxi hoá và chống đị ứng trên da và gan của chuột nhất bằng cách thử khả năng mẫu ức chế phản ứng dị ứng lần lượt là 72.7%; 85.8%; 90.3% so với mẫu chun, Ki năng chống oxi hoá của dịch chiết ting MeOH, dịch acctone-nước cho tha

"hiện hoạt tính chống oxi hoá với giá trị ICao lần lượt là 0.306 mg/mL và 0.115 mg/mL

Ho: