thử nghiệm dùng chất kích thích hệ miễn dịch beta - 1,31,6 glucan nhằm nâng cao sức khỏe của cá khoang cổ đỏ (amphiprion frenatusbrevoort, 1856) giống

L I C M ƠN Trong th i gian th c t p hoàn thành cu n lu n văn này, ã nh n c s giúp t n tình c a quan, t ch c cá nhân Qua ây, cho chân thành c m ơn t i B môn B nh h c – Khoa Nuôi tr ng Thu s n – Trư ng i h c Nha Trang v i Phịng Cơng Ngh Ni Tr ng – Vi n Nghiên c u Bi n ã t o i u ki n cho c th c t p hoàn thi n lu n văn Xin chân thành c m ơn th y giáo: Ts Nguy n H u Dũng Ts Nguy n Th Thanh Thu ã tr c ti p hư ng d n v i t t c t m lòng nhi t tình th i gian th c hi n tài Xin chân thành c m ơn t i cô, anh ch Tr ng ã nhi t tình giúp , ch b o tơi Phịng Cơng Ngh Ni tơi hoàn thành t th c t p qua Chân thành c m ơn t i b n bè, nh ng ngư i chia s , giúp ng viên tơi su t q trình h c t p Cu i cùng, xin c bày t lòng bi t ơn sâu s c t i gia ình, nơi ln ln bên c nh tơi ng viên giúp su t qu ng ng dài gi ng ng nhà trư ng Xin chân thành c m ơn! Sinh viên th c hi n Nguy n Minh Ti n M CL C TRANG L IM U CHƯƠNG 1: T NG LU N H mi n d ch c a cá Tình hình nghiên c u v s d ng ch t kích thích h mi n d ch ni tr ng Th y s n th gi i Vi t Nam 2.1 Tình hình nghiên c u v s d ng ch t kích thích h mi n d ch nuôi tr ng th y s n th gi i 2.1.1 Ch t kích thích h mi n d ch - Imumunostimulant 2.1.2 Cơ ch tác d ng c a Beta - 1,3/1,6 glucan cá 2.1.3 Th i i m dùng ch t kích thích h mi n d ch 2.1.4 K thu t gây mi n d ch 10 2.1.5 N ng th i gian s d ng ch t kích thích h mi n d ch 11 2.2 Tình hình nghiên c u v s d ng ch t kích thích h mi n d ch nuôi tr ng Th y s n Vi t Nam 11 M t s c i m sinh h c sinh s n giá tr kinh t c a cá Khoang C 12 3.1 M t s c i m sinh h c sinh s n c a cá Khoang C 12 3.2 Giá tr kinh t 14 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 15 Th i gian, a i m i tư ng nghiên c u 15 B trí thí nghi m 15 Phương pháp thu th p x lý s li u 20 CHƯƠNG 3: K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 22 nh hư ng c a ch t kích thích h mi n d ch Beta – 1,3/1,6 glucan lên t l s ng, hàm lư ng m s c kháng c a cá Khoang C t cá t ngày tu i 22 1.1 Bi n ng y u t mơi trư ng th i gian thí nghi m 22 1.2 T l s ng c a cá Khoang C t ngày tu i 23 1.3 Hàm lư ng m t ng s c a toàn b th cá 25 1.4 S c kháng c a cá i v i vi khu n Vibrio alginolyticus 26 nh hư ng c a ch t kích thích h mi n d ch Beta – 1,3/1,6 glucan lên t c tăng trư ng, t l s ng, hàm lư ng m s c kháng c a cá Khoang C t cá t tháng tu i 30 2.1 Bi n ng y u t môi trư ng th i gian thí nghi m 30 2.2 T c tăng trư ng c a cá Khoang C tháng tu i 31 2.3 T l s ng c a cá Khoang C tháng tu i 34 2.4 Hàm lư ng m t ng s (mg/g khơ) tồn b th cá 36 2.5 S c kháng c a cá i v i vi khu n Vibrio alginolyticus 36 K T LU N VÀ XU T Ý KI N 38 K t lu n 38 1.1 T l s ng c a cá 38 1.2 T c tăng trư ng 38 1.3 Hàm lư ng m t ng s 38 1.4 S c kháng c a cá i v i vi khu n Vibrio alginolyticus 38 xu t ý ki n 39 TÀI LI U THAM KH O 40 DANH M C B NG TRANG B ng 1: Y u t môi trư ng nư c trình thí nghi m cá ngày tu i 22 B ng T l s ng c a cá Khoang C B ng 3: Hàm lư ng ngày tu i 25 ngày thí nghi m 23 m t ng s cá Khoang C B ng 4: T l t vong lũy tích h s b o v tương sau 25 ngày nuôi 26 i (% RPS) c a cá Khoang C ngày tu i sau gây c m nhi m vi khu n Vibrio alginolyticus 27 B ng 6: Bi n ng nhi t m n th i gian thí nghi m cá tháng tu i 30 B ng 7: T c tăng trư ng c a cá Khoang C B ng 8: T l s ng c a cá Khoang C B ng 9: Hàm lư ng tháng tu i th i gian thí nghi m 32 tháng tu i 21 ngày nuôi 34 m t ng s (mg/g khô) c a cá Khoang C 36 B ng 10: Phân l p vi khu n cá Cá Khoang C sau tu n gây c m nhi m 37 DANH M C HÌNH TRANG Hình 1: Sơ b trí thí nghi m nh hư ng c a Beta-1,3/1,6 glucan lên t l s ng, hàm lư ng m t ng s s c Hình 2: Sơ kháng cá Khoang C t ngày tu i 17 b trí thí nghi m nh hư ng c a Beta-1,3/1,6 glucan lên sinh trư ng, t l s ng, hàm lư ng m t ng s s c kháng c a cá Khoang C t tháng tu i 19 Hình 3: H th ng b thí nghi m 20 Hình 4: Cân kh i lư ng cá 20 Hình 5: th bi n ng nhi t m n th i gian thí nghi m cá t ngày tu i 22 Hình 6: T l s ng c a cá Khoang C Hình 7: ngày tu i 25 ngày th t l s ng c a cá Khoang C u 24 sau c m nhi m vi khu n Vibrio alginolyticus 28 Hình 8: th bi n Hình 9: T c Hình 10: T c ng nhi t m n th i gian thí nghi m 31 tăng trư ng v chi u dài c a cá Khoang C tăng trư ng v tr ng lư ng c a cá Khoang C Hình 11: T l s ng c a cá Khoang C 33 33 tháng tu i 21 ngày nuôi 35 THU T NG VI T T T CNNT : Công Ngh Nuôi Tr ng CFU : Colony Form Unit NTTS : Nuôi tr ng thu s n h : Gi mL : mililít N : S ppm : part per million Ts : Ti n sĩ TNHH SX & TM: Trách nhi m h u h n s n xu t thương m i 10 RPS : Relative Percent Survival (%) L IM U B nh nhi m khu n nguyên nhân d n n s t n th t l n nuôi tr ng th y s n Nhìn chung, phương pháp phịng tr b nh b ng hóa ch t hay vaccine ã mang l i hi u qu nh t nh phòng tr b nh nhi m khu n cho tôm cá nuôi Tuy nhiên, phương pháp thư ng nh hư ng x u n môi trư ng b i s tích t c a chúng nư c n n áy Thêm n a, vi c dùng kháng sinh hóa ch t có th gây nên nh ng dòng vi khu n kháng thu c d n n chi phí t n mà hi u qu l i khơng cao Ch t kích thích h mi n d ch có tác d ng tăng cư ng ho t d ch t nhiên c áp d ng m t ho c có th kích thích mi n d ch t nhiên h mi n d ch ng h mi n ng th i h c hi u c i kèm v i vaccine ho c cá b viêm nhi m (Philip et al, 2001) G n ây vi c dùng ch t kích thích h mi n d ch có ngu n g c t nhiên ngày c xem m t gi i pháp an toàn b n v ng vi c nâng cao s c kh e phòng b nh cho i tư ng nuôi thu s n b i khơng gây nhi m mơi trư ng, chi phí th p l i d áp d ng Cho n nay, Beta glucan c coi ch t kích thích h mi n d ch có hi u qu nh t i v i tôm, cá nuôi c s d ng m t thành ph n quan tr ng th c ăn nuôi tôm công nghi p (Lall Olivier, 1995) Tuy nhiên, vi c xác nh li u dùng, th i gian phương pháp s d ng h p lý c a Beta glucan t ng i tư ng nuôi v n chưa c nghiên c u nhi u iv i nư c ta Amphiprion frenatus loài cá c nh ph bi n Vi t Nam, có giá tr v m t th c ph m nh màu s c s , kh thích nghi cao i u ki n nuôi nh t c i m c trưng s ng c ng sinh H i quỳ nên loài cá ã c th trư ng cá c nh nư c th gi i r t ưa chu ng Cá ã c Phịng Cơng Ngh Nuôi Tr ng (CNNT) Cá Khoang C nghiên c u c i m sinh h c sinh s n bư c u th nghi m sinh s n nhân t o thành cơng Hi n Phịng ang ti p t c th c hi n s n xu t gi ng nuôi thương m i cá Khoang C àn cá gi ng v n chưa n tài “Hồn thi n quy trình ” Tuy nhiên, t l s ng c a nh M t khác, i u ki n nuôi gi , c cá trư ng thành có th b s c trư c s thay i i u ki n môi trư ng thư ng ch t nhi u nh t vào th i gian cá c chuy n t ngồi t nhiên vào mơi trư ng ni gi Do v y vi c th nghi m dùng ch t kích thích h mi n d ch nâng cao s c kh e cho loài cá n i dung c n thi t nh m ưa c phương pháp phòng b nh hi u qu b n v ng s n xu t gi ng nhân t o nuôi thương m i i tư ng Xu t phát t th c ti n trên, c s ng ý ch p thu n c a Phòng CNNT , Vi n Nghiên c u Bi n theo s phân công c a B môn B nh H c – Khoa Nuôi tr ng Th y s n – Trư ng tài: “Th nghi m i h c Nha Trang ã th c hi n dùng ch t kích thích h mi n d ch Beta - 1,3/1,6 glucan nh m nâng cao s c kh e c a cá Khoang C (Amphiprion frenatus Brevoort, 1856) gi ng M c tiêu c a tài: - Bư c u ánh giá hi u qu c a ch t kích thích h mi n d ch Beta glucan lên s c kh e c a cá Khoang C - T o ti n i u ki n nuôi gi cho vi c nghiên c u s d ng ch t kích thích h mi n d ch Beta glucan nh m nâng cao t l s ng c a àn cá gi ng sinh s n nhân t o nuôi thương m i cá Khoang C N i dung nghiên c u tài: nh hư ng c a ch t kích thích h mi n d ch Beta – 1,3/1,6 glucan lên t l s ng, hàm lư ng m s c kháng c a cá Khoang C t cá t3 ngày tu i nh hư ng c a ch t kích thích h mi n d ch Beta – 1,3/1,6 glucan lên t c tăng trư ng, t l s ng, hàm lư ng C t cá m s c kháng c a cá Khoang t tháng tu i Ý nghĩa khoa h c, th c ti n c a tài: góp ph n ưa c phương pháp phòng b nh hi u qu b n v ng s n xu t gi ng nhân t o nuôi thương m i i tư ng Do th i gian ki n th c h n ch , v y báo cáo không th tránh kh i nh ng thi u sót nh t nh R t mong c s góp ý chân thành c a quý th y cô v i t t c b n bè Sinh viên th c hi n: Nguy n Minh Ti n Nha Trang, tháng 12 năm 2007 CHƯƠNG 1: T NG LU N H mi n d ch c a cá H mi n d ch c nh nghĩa m t h th ng t hoàn thi n th s ng nh m giúp th t b o v sinh t n Cá m t nh ng xương s ng nguyên th y nh t c coi trung gian gi a s ng ng v t xương s ng nơi ch a nhi u lo i tác nhân gây b nh, ng v t có ng v t có xương có th t n t i môi trư ng nư c c bi t lo i vi sinh v t a d ng v c tính, kích thư c hình d ng, cá ph i thích nghi t t ương thách th c c a môi trư ng Thông thư ng ch b o v c a cá có th u v i nh ng c phân làm lo i: Cơ ch b o v t nhiên (b m sinh) hay g i ch b o v không c hi u (non-specific) ch b o v mơi trư ng s ng hay cịn g i ch b o v ho t t c s thích nghi v i c hi u (specific) Hai ch ng m i quan h qua l i h tr l n Cơ ch b o v b n quan tr ng nh t cá ch b o v t nhiên S mi n d ch t nhiên c a cá c xem m t kh b m sinh, giúp cá t t o kháng th t nhiên ch ng l i tác nhân gây b nh mà không c n có s kích thích c a chúng ó k t qu thích nghi c a nhi u th h cá s ng chung v i nh ng tác nhân gây b nh v n có mơi trư ng (Post, 1987) Cơ ch ho t ng c a h mi n d ch t nhiên bao g m b o v h c da, v y ch t nhày; b o v b i th d ch t bào máu h men (lysozyme, complement system), lo i transferrin, interferons) b o v b i t m (C-reactive protein, bào b ch c u, th c bào (macrophages neutrophils) (Fletcher, 1986) D ch t bào huy t cá ch a r t nhi u ch t c ch men có tác d ng b o v th ch ng l i s t tiêu hóa ng th i chúng óng vai trò quan tr ng vi c trung hòa men tác nhân gây b nh sinh (Roberts, 2001) Tình hình nghiên c u v s d ng ch t kích thích h mi n d ch nuôi tr ng Th y s n th gi i Vi t Nam Cùng v i s phát tri n m nh m c a ngh nuôi tr ng th y s n c v quy mơ l n m c thâm canh, tình hình d ch b nh i tư ng nuôi th y s n ngày nghiêm tr ng, òi h i ph i có bi n pháp phịng b nh h u hi u nh m gi m b t thi t h i cho nhà s n xu t Imumunostimulants- ch t kích ng h mi n d ch t nhiên hi n ang ch t c s d ng r ng rãi th gi i tăng cư ng kh kháng b nh cho i tư ng nuôi tr ng th y s n 2.1 Tình hình nghiên c u v s d ng ch t kích thích h mi n d ch nuôi tr ng th y s n th gi i 2.1.1 Ch t kích thích h mi n d ch - Imumunostimulant Imumunostimulants: nh ng h p ch t sinh h c ho c t ng h p nhân t o có kh làm tăng cư ng h th ng mi n d ch không c hi u c a ng v t (Trích t Fenichel Chirigos, 1984) M t s Imumunostimulant ch ph m chi t t Steptococcus pyogenes, Mycobacterium spp, vách t bào vi khu n Norcadia rubrata, Propionibacterium sp, t bào ã c gi t ch t làm khơ c a Mycobacterium tuberculosis hịa d u (Freund adjuvant) Các ch t ho t tính c a ch ph m vách t bào vi khu n lipopolysaccharide (LPS), lipopeptides, muramylpeptide, acyloligopeptide m t s peptide khác Imumunostimulants nhóm ch t (bao g m c m t s ch t b tr ) có kh làm gia tăng s c tăng áp ng mi n d ch t nhiên, có ký kháng b nh truy n nhi m, không ph i b ng vi c gia c hi u, mà b ng vi c tăng cư ng ch mi n d ch c bi t h th c bào Kh kháng không c mi n d ch th i gian b o v tương c hi u, không i ng n Tuy nhiên, imumunostimulant hi n có ý nghĩa r t l n c s d ng r ng rãi ngh nuôi tr ng th y s n th gi i nh m gia tăng kh i tư ng ni tr ng chưa có vaccine thích h p [ Imumunostimulants tăng cư ng s c kháng b nh cho Th Hoà et al, 2004] kháng c a cá b ng cách i u ch nh ch b o v c a th ch ng l i tác nhân gây b nh Các ch t có th c phân Tr ng lư ng (g/cá) 0.20 0.15 0.10 0.05 0.00 14 i ch ng Hình 10: T c Cho ăn 46ppm 21 T m 184ppm Ngày T m 552ppm tăng trư ng v tr ng lư ng c a cá Khoang C Qua B ng 7, Hình Hình 10 ta có th th y r ng: Sau 21 ngày thí nghi m, khơng có s khác bi t v kích thư c kh i lư ng gi a cá lô i ch ng cá lơ thí nghi m (P>0.05) ng th i khơng có s khác bi t v kích thư c kh i lư ng gi a lô t m lô cho ăn (P>0.05) i u có th lồi cá có t c tăng trư ng ch m nên th i gian thí nghi m s tăng trư ng v kích thư c khơng k , d n t i khơng có s sai khác Ho c có th li u trình cho ăn t m Beta - 1,3/1,6 glucan áp d ng thí nghi m chưa phù h p i v i cá Khoang C Beta - 1,3/1,6 glucan khơng có tác d ng vi c tăng cư ng t c hay tăng trư ng i v i loài cá Như v y, hi u qu c a Beta glucan lên thu c vào phương pháp, n ng , th i gian mà ph thu c vào b n ch t c a Beta glucan s d ng Do v y, 1,3/1,6 glucan lên t c i tư ng ni khơng nh ng ph ánh giá xác hi u qu c a Beta - tăng trư ng c a cá Khoang C c n có th nghi m thêm n a 2.3 T l s ng c a cá Khoang C tháng tu i Sau tu n thí nghi m, k t qu thu c c th hi n t i B ng Hình 11 B ng 8: T l s ng c a cá Khoang C tháng tu i 21 ngày ni Ngày thí nghi m Lơ thí nghi m i ch ng CĂ β-glucan T m β-glucan T m β-glucan (46 ppm) (184 ppm) (552 ppm) a 100 ± 0,00 a 100 ± 0,00 a 100 ± 0,00a 100 ± 0,00 93 ± 4,00a 92 ± 5,00a 92 ± 7,00a 92 ± 10,00a 14 91 ± 4,00a 89 ± 6,00b 90 ± 8,00ab 84 ± 13,00c 21 91 ± 3,00a 87 ± 5,00b 90 ± 8,00ab 79 ± 15,00c Chú thích: S li u trình bày giá tr trung bình c a b ni thí nghi m ± sai s chu n (SD) Trên m t dòng, s trung bình có ch vi t kèm khác khác có ý nghĩa T l s ng (%) th ng kê (Anova, P0.05) u thí nghi m t l s ng gi a lơ khơng có s khác bi t t cao (dao ng t 92 – 93%) Trong tu n th hai thí nghi m ã có s sai khác t l s ng gi a lơ thí nghi m T l s ng c a cá lô i ch ng cao cá lô cho ăn lô t m Beta - 1,3/1,6 glucan 552 ppm (P0.05) (B ng 8.) T l s ng c a cá i lô t m 552 ppm th p cá lô cho ăn lô t m 184 ppm (P0.05) S sai khác t l s ng tu n th hai c th y rõ ràng tu n th ba thí nghi m Lúc t l s ng c a cá ã n lô i ch ng lô t m 184 ppm nh h n lô cho ăn lô t m 552 ppm có s gi m xu ng Như v y, sau ba tu n thí nghi m v i lơ s d ng ch t kích thích h mi n d ch Beta - 1,3/1,6 glucan lên cá Khoang C t cá t tháng tu i ta có nh n xét: T l s ng c a cá lơ t m 184 ppm khơng có s khác bi t so v i cá i ch ng (P>0.05), i u ch ng t tác d ng c a Beta - 1,3/1,6 glucan lên t l s ng c a cá chưa rõ ràng Ngư c l i cá s ng th p so v i cá lô lô cho ăn t m 552 ppm l i cho t l i ch ng (P0.05) m toàn b th cá gi a lơ i ch ng c hai t thí nghi m 1.4 S c kháng c a cá cá ngày tu i, s c ba tu n gây nhi m th hi n i v i vi khu n Vibrio alginolyticus kháng i v i vi khu n Vibrio anginolyticus sau h s RPS c a lô cá t m 18,4 ppm t m 920 ppm Beta - 1,3/1,6 glucan 100% lô t m 184 ppm 77,8% cá tháng tu i sau tu n c m nhi m, cá ch ng u ho t lơ thí nghi m lơ i ng bình thư ng khơng có hi n tư ng ch t Do ó hi u qu c a Beta - 1,3/1,6 glucan lên s c kháng khu n c a cá thí nghi m chưa rõ ràng xu t ý ki n Trong th i gian t i c n th nghi m thêm phương pháp, n ng th i gian khác c a ch t kích thích h mi n d ch Beta - 1,3/1,6 glucan xác nh c li u trình thích h p lên s c kh e c a cá Khoang C C n xác nh ch ng vi khu n có c l c th c s i v i loài cá TÀI LI U THAM KH O TÀI LI U TI NG VI T Catalogue (2006) S n ph m ph c v ngành nuôi tr ng thu s n Công ty TNHH SX& TM Văn Minh AB 13 ng Bàu Cát 8- P.14- Q Tân Bình, HCM Th Hoà, Bùi Quang T , Nguy n H u Dũng Nguy n Th Mu i (2004) B nh h c thu s n NXB Nông nghi p, trang 153-157 Hà Lê Th L c (2004) Nghiên c u s sinh h c ph c v cho sinh s n nhân t o cá Khoang C (Amphiprion sp.) vùng bi n Khánh Hòa, 174 trang.) B n th o lu n án ti n sĩ Ngư lo i h c TÀI LI U NƯ C NGOÀI Allen and Foutin (1972) Field guide to anemonefish and their host sea anemone western Australia Museum 1992, 160 pp Anderson, D., 1992 Immunostimulants, adjiuvants and vaccine carriers in fish: applications to aquaculture Ann Rev Fish Dis., 2: 281 – 307 Anderson, D.P , Siwicki, A.K., Rumsey, G.L., 1995 Injection or immersion delivery of selected immunostimulants to trout demonstrate enhancement of nonspecific defense mechanisms and protective immunity In Shariff, M., Subasighe, R.P., Arthur, J.R., Diseases in Asian Aquaculture Vol 11 Fish Health Section, Asian Fisheries Society, Manila, Philippines, pp.413 – 426 Baba, T , Yoshinaga, Y , 1993 Activation of mononuclear phagocyte function by levamisole immersion in carp Nippon Suisan Gakkaishi 59, pp 301 – 307 Baldwin, T.J , Newton, J.C., 1996 Pathogenesis of enteric septicemia of channel catfish, caused by Edwardsiella ictaluri: bacteriological and light and electron microscope findings J Aquat Anim Health 5, 189 – 198 Boonyaratpalin, S , Boonyaratpalin, M., Supamattaya, K., Toride, Y , 1995 Effects of peptidoglucan PG on growth, survival, immune responses, and tolerance to stress in black tiger shrimp, Penaeus monodon In: Shaif, M., Subasighe, R.P., Arthur, J.R Eds , Diseases in Asian Aquaculture Vol 11 Fish Health Section, Asian Fisheries Society, Manila, Philippines, pp 469 – 477 10 Davina, J H M., Rijekers, G T., Rombout, J.H.W.M., Timmermans L P M., Van Muiswinkel, W.B., 1980 Lymphoid and non-lymphoid cells in the intestine of cyprinid fish, p 129 – 140 In: Development and differentiation of vertebrate lymphocytes, (J D Horton, ed.) Elsevier/North-Holland Biomedical Press, Amterdam 11 Doggett, T A., Harris, J E., 1987 The ontogeny of gut-associated lymphoid tissue in Orechromis mossambicus J Fish Biol 31, suppl A, 23 – 27 12 Ducan, L.; Klesius, H., 1996 Effects of feeding Spirulina on specific and nonspecific immune responses of channel catfish J Aquatic Animal Health, (4): 308 – 313 13 Engstad R E and Robertsen, B., 1994 Recognition of yeast cell wall glucan by Atlantic salmon ( Salmon salar L.) macrophages Dev Comp Immunol., 17: 319 – 330 14 Gutenberger, S K., Duimstra, J.R., Rohovec, J.S., Fryer, J.L., 1997 Intracellular survival of Renibacterium salmoninarum in trout mononuclear phagocytes Dis Aquat Org 28, 93 – 106 15 Jeney, G and Anderson, D., 1993 Enhanced immune response and protection in rainbow trout to Aeromonas salmonicida bacterin fo;;wing prior immersion in immunostimulants Fish Shellfish Immunol., 3(1): 51 – 58 16 Jorgensen, J B., Sharp, G J E., Secombes, C J., and Robertsen, B., 1993 Effect of a yeast cell wal glucan on the bactericidal activity of rainbow trout macrophages Fish Shellfish Immunol 3: 267 – 277 17 Kitao, T., Yoshida, T., 1986 Effect of an immunopotentiator on Aeromonas salmonicida infection in rainbow trout Salmo gairdneri Vet Immunol Immunopathol 12, 287 – 291 18 Lall, S and Oliver, G., 1991 Role of micronutrients in immune response and disease resistance in fish In Fish Nutrition and Practice (INRA, ed.) 19 Matsuo, K., Miyazono, I., 1993 The influence of long – term administration of peptidoglycan on disease resistance and growth of juvenile rainbow trout Nippon Suisan Gakkaishi 59, 1377 – 1379 20 Nelson, J S., Kawahara, E., Kawai, K., Kusuda, R., 1989 Macrophage infiltration in pseudotuberculosis of yellowtail Seriola quinqueradiata Bull Marine Sci Fish Kochi Univ 11, 17 – 22 21 Nicolletti, A., Nicoletti, G., Ferraro, G., Palmieri, G., Mattaboni, P., Germogli, R., 1992 Preliminary Evaluation of Immunoadijuvant Activity of an Orally Administered Glucan Extracted from Candida albicans Arzneim – Forsch./Drug Res 42 (II) Nr 10 22 Nikil, L., Evelyn, T.P.T., Albright, L.J., 1993 Trials with an orally and immersion – administered h-1,3 glucan as an N Couso et al / Aquaculture 219 (2003) 99-109 108 immunoprophyactic against Aeromonas salmonicida in juvenile Chinook salmon Oncorhynchus tshawytscha Dis Aquat Org 17, 191 – 196 23 Philip, R., Sreekumar K., Anas, A and Bright Singh l S., 2001 Immunostimulants – Source, diversity, commercial preparations and mode of application Natl workshop on Aquaculture Medicine p.74 24 Post, G., 1987 Textbook of fish health Manufactured in the United States of America by T F H Publication, Inc pp 215 – 216 25 Quinghui Ai, Kanggsen Mai, Lu Zhang, Beiping tan, Wenbing Zhang, Wei Xu, Huitao Li ,2006 Effects of dietary β- 1,3 glucan on innate immune response of large yellow croaker, Pseudosciaena crocea 1, 4-7 26 Raa, J., 1996 The use of immunostimulatory substances in fish and shellfish farming Reviews Fish Sci 4, 288 – 299 27 Raa, J., Rorstad, G., Engstad, R., Robertsen, B., 1992 The use of immunostimulants to increase resistance of aquatic organisms to microbial infections In: Shariff, I.M., Subasinghe, R.P., Arthur, J.R (Eds), Diseases in Asian Aquaculture Fish Health Section, Asian Fisheries Society, Manila, Philippines, pp:39-50 28 Robertsen, B., Rorstad, R amd Raa J., 1990 Enhancement of non-specific disease resistance in Atlantic Salmon, Salmo salar L., by a glucan from Saccharomyces cerevisiae cell walls J Fish Dis., 13: 391 – 400 29 Rombout, J H W.M., Bot H E., Taverne-Thiele, J.J., Villena, M.l., 1993 The gutassociates lymphoid tissue (GALT) of carp (Cyprinus carpio L): An immunocytochemical analysis Dev Comp Immunol 17, 55-66 30 Rostad, G., Aasjord, P.M., Robertsen, B., 1993 Adjuvant effects of yeast glucan in vaccines against furunculosis in Atlantic salmon (Salmo salar L) Fish Shellfish Immunol., 3, 179-190 31 Sahoo, P K and Mukherjee, S C., 1999 influence of the immunostimulant, chitosan on inmmune responses of healthy and cortisol- treated Rohu (Labeo rohita) J.Aqua Trop., 14 (3): 209- 215 32 Sahoo, P K and Mukherjee, S C.,2001a Dietary intake of levamisole improves non – specific immunity and disease resistance of health and aflatoxin – induced immunocompromised Rohu, Labeo rohita J Applied Aquacult., 11:4 33 Sahoo, P K and Mukherjee, S C.,2001b Immunosuppressive effect of aflatoxin B1 in Indian major carp (Labeo rohita) Comp Immunol Microbiol Infectious Dis., 24: 143 – 149 34 Selvaraj, K Sampath, v Sekar, 2005 Administration of yeast glucan enhances survival and some non-specific and specific immune parameters in carp (Ciprinus carpio) infected with Aeromonas hydrophila, 1, 294- 304 35 Shoenherr, W D., Pollman, D S., Coalson, J A., 1994 Titration of MacroGard on growth performance of nurserypigs J Anim Sci 72: Suppl.1 36 Skjermo, Trond R, Storseth, Karina Hansen, Aleksander Handa, Gunvor Oie (2006) Evalution of β- 1,3/1,6 glucan and High – M alginate used as immunostimulatory supplement during first feeding and weaning of Atlantic cod (Gadus morhua L.) 1, 5-11 37 Siwicki, A K., 1989 Immunostimulating influence of levamisole on non– specific immunity in carp (Cyprinus carpio) Dev Comp Immunol., 13: 87-91 38 Sung, H.H., G.h., Song, Y.L., 1994 Vibriosis resistace induced by glucan treatment in tiger shrimp, Penaeus monodon Fish Pathol 29, 11-17 39 Supamattaya., Pongmaneerat., 1998 The effect of MacroGard on growth performance and health condition of black tiger shrimp Scientific report, Princ of Songkhla University 40 Thompson, l., White, A., Fletcher, T.C., Houlihan, D.F., Secombers, C.J., 1993 The effect of stress on the immune responses of Atlantic salmon Salmo salar L fed diets containing different amounts of vitamin C Aquaculture 114, 1-18 41 Verlhac V, Obach A, Gabaudan J, shuep W, hole R Immunomodulation by dietary vitamin C and glucan in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) Fish Shellfish immunology 1998; 8: 409e24 42 Wedemeyer and mcLealy, 1981 Methods for determining the tolerance of fishes to environmental stressor Pp 248 – 275 In A D Pickering, editor Stress and fish Academic Press New York 43 Wiegertjes, G F., R J M Stet, H k Parmentier, and Muiswinkel, W B., 1996 Immunogenetics of Disease Resistance in Fish: A Comparative Approach Dev Comp Immunol., 20: 365 – 381 44 Williams, D L., 1997 Overview of (1 – 3) β – D- glucan immunology Mediator of Inflammation, 6: 247 – 250 45 Williams, D L., Mueller, A and browder, w., 1996 Glucan-based macrophage stimulators A review of thei anti-infective potential Clinical Immunotherapy, 5: 392 – 399 46 Yoshida, T., kruger, R., Inglis, V., 1995 Augmentation of non-specific protection in African catfish, Clarias gaiepinus (Burchell), by the longterm oral administration of immunostimulants J Fish Dis 18, 198 – 198 PH L C THÍ NGHI M 2: Cá t tháng tu i KÍCH THƯ C CÁ SAU 21 NGÀY NUÔI Anova: Single Factor SUMMARY Groups i ch ng Cho ăn T m 184ppm T m 552ppm Count Sum Average Variance 62.13 20.71 5.16607778 61.8188889 20.6062963 2.17774856 61.33 20.4433333 1.92963333 60.6411111 20.2137037 1.20804486 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 0.42119342 Within Groups 20.9630091 Total df 21.3842025 MS F P-value F crit 0.14039781 0.05357926 0.98249353 4.06618056 2.62037613 11 KH I LƯ NG CÁ SAU 21 NGÀY NUÔI Anova: Single Factor SUMMARY Groups i ch ng Cho ăn T m 184ppm T m 552ppm Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.00235763 0.007259556 Total 0.009617185 Sum 0.515333333 0.459333333 0.428 0.402666667 df 11 Average 0.171777778 0.153111111 0.142666667 0.134222222 Variance 0.002016148 0.000915704 0.000385778 0.000312148 MS 0.000785877 0.000907444 F 0.866032679 P-value F crit 0.497306786 4.06618 T L S NG C A CÁ SAU 21 NGÀY NUÔI Anova: Single Factor SUMMARY Groups i ch ng Cho ăn T m 184ppm T m 552ppm Count 63 63 63 63 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.511603 2.053057 Total Sum 57.35294118 55.11764706 56.41176471 50 2.564659 HÀM LƯ NG df Average Variance 0.910364146 0.00121187 0.874883287 0.002957034 0.895424837 0.006523546 0.793650794 0.022421366 MS F P-value 0.170534227 20.59976815 5.96E-12 248 0.008278454 F crit 2.641 251 M Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count i ch ng Sum Average 1563.9 Cho ăn 1400.2 466.7333 982.8233 T m 184ppm T m 552ppm 3 1488 1512 521.3 Variance 496 504 96.13 249.76 228 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 4669.683 1556.561 3.999608 0.051905 4.066181 Within Groups 3113.427 389.1783 Total 7783.109 11 ... n dùng ch t kích thích h mi n d ch Beta - 1,3/1,6 glucan nh m nâng cao s c kh e c a cá Khoang C (Amphiprion frenatus Brevoort, 1856) gi ng M c tiêu c a tài: - Bư c u ánh giá hi u qu c a ch t kích. .. kích thích h mi n d ch Beta glucan lên s c kh e c a cá Khoang C - T o ti n i u ki n nuôi gi cho vi c nghiên c u s d ng ch t kích thích h mi n d ch Beta glucan nh m nâng cao t l s ng c a àn cá. .. 1,3/1,6 glucan (P