báo cáo thí nghiệm kiểm nghiệm vi sinh thực phẩm bài 5 kiểm nghiệm salmonella

KET QUA VA BIEN LUAN 3.1 Kết quả sau khi cây mẫu thịt gà vào môi trường HE Vi vậy, ta có thể xác định rằng cả 2 đĩa môi trường trên đều xuất hiện vi khuan Salmonella vì đa số các dong S

TONG LIEN DOAN LAO ĐỘNG VIỆT NAM

DAI HOC TON DUC THANG

KHOA KHOA HOC UNG DUNG

ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG

BAO CAO THI NGHIEM KIEM NGHIEM

VI SINH THUC PHAM

Bai 5: KIEM NGHIEM Salmonella

GVHD: NGUYEN NGOC TUAN, Ph.D

Nhóm thực hiện — S6-N3

Thành viên

1/ Trần Phạm Thanh Thảo - 620H0130 2/ Đoàn Lê Ngọc Thanh Thúy- 620H0141 3/ Trần Phạm Thanh Tuyền — 620H0 169 4/ Nguyễn Pham My Dung — 620H0265

THANH PHO HO CHI MINH, NAM 2023

MỤC LỤC

MỤC LỤC cán Hàn HH Hà Hà Hà Hà Hàn Hà HH HH HH TH TH HH HH Hg i

) 0:09:10) 0018 ii )9I:0/i0970 0008 iii

CHƯƠNG 1 TONG QUAN :- tr HH HH HH nghe ưng 1

VD Dinh mg hia go 1 1,2 NQWy@I CAC cccccccccssesssessssessssesesscassssasessssssssesassesascsssesessesessesassesassesasesessesassesassesasecessseesseeasseeaveass 1

CHƯƠNG 2 VAT LIEU VA PHUONG PHAP NGHIEN CUU ccccccccccccssssssssssssstsssseesstesassesaseesssesessen 2

21 Vat THEW cn nh HH Hà Hà Hà HH Hà Hà Hàng Hà HH TH HH HH HH Hiện 2 2.2 Dụng cụ và thiết bị s00 22 cọ cHH TH HH HH HH ng ng ưa 2

2.3 Cách tiến hành nh HH HH HH HH HH ngu 3 CHƯƠNG 3 KẾT QUÁ VÀ BIỆN LUẬN 5o 2S 2222 12.212 reo 10

3.1 Kết quả sau khi cấy mẫu thịt vào môi trường HE 2:- 2 2 vcxretrrrerrrrerrrrerree 10 3.2 Kết quả cấy mẫu vào môi trường HE .-+:2St2 S92 221212122 121.1 re 10 3.3 Kết quả cấy mẫu thịt vào môi trường XLID Shin tre 11 3.4 Kết quả cấy mẫu vào môi trường XLD 55:5 St v2 2kxrkrrkkrrkrrrrrrrrrreree 11 3.5 Kết quả ống nghiệm sao khi thứ nghiệm sinh hóa - 0 ncnntnhnrhtrererrrrrrerrree 12 3.6 Kết quả đĩa BHI sau khi thử nghiệm sinh hóa - 55-55 5c ề9SxềtteEttrxtrterkerrrrrerrerrre 15

1 Cân 0,56g LDC dạng bột dùng để pha với 40 mÌ nước cất sec ccc¿ 3

2 Can 0,36 g ODC dạng bột dùng đề pha với 40 ml nước cất - 5-5-5: 4

3 Cân 0,6g Trypton dạng bột dùng đề pha với 40ml nước cất s55: 4

4 Cân 3,6g BHI dạng bột dùng để pha với 40 mÏ nước cất -cccscccc 5

5 Can 7,667g HE dạng bột dùng đề pha 100 mÌ nước cất - 5: cscscc se: 5

6 Cân 3,87g TSI dạng bột dùng đề pha 60ml nước cắt 55: Set 6

7 Cân 0,4g urea dạng bột dùng để pha 20ml nước cất se sry 6

8 Cân 5,668g XLD dạng bột dùng đề pha 100ml nước cắt - s52 7

9 Urea được đồ ra đĩa sau khi hấp khử trùng 5 nề E1 ra 7

10 Cân 3,64g BHI cùng với 0,7g Sorbitol vào 70ml nước cất 5-5: 8

11 Can 3,64g BHI cùng với 1,47g Manitol vào 70ml nước cất 5 8

12 Quá trình thử nghiệm - ee cee 212112111111 15151111111111111 1111 11 8 tt Hy 9 yHình 3 1 Kết quả sau khi cấy mẫu thịt vào môi trường

c1111111 1111111111111 8111111111 tk 10

2 Kết quả cây mẫu vào môi trường IHE 52 ST E212 112117111 1xx cree 10

3 Kết quả cây mẫu thịt vào môi trường XLD 5S S122 tre 11

4 Kết quả cây mẫu vào môi trường XLD 5-5 2S 1E E1 E1 II

5 Kết quả sau khi cấy của hỗn hợp BHI và Manitol 5-5 ctsEszzzxers 12

6 Kết quả sau khi cấy của hỗn hợp BHI và Sorbitol 5 Sen 12

7 Ông urea thử nghiệm sinh hóa - 5-55 1 EEE11 11 1121111 1.1211 Enrtxe 13

1

DANH MỤC HÌ

8 Ông urea mẫu - 5 S22 21111111 11211111121211211 1 1111 ng tr ng ra 13

1H

DANH MỤC BẢNG

Bang 2 1 Môi trường và mẫu - 1 S1 1E E111 12121221221 11H ng re

Bảng 2 2 Dụng cụ và thiết bị ST T1 ng T1 T1 T151 T5 15T HH rersse

CHUONG 1 TONG QUAN

1.1 Dinh nghia

Salmonella 1a tryc khuan gram (-), hiéu khi va ki khi thy y, 0.6x2um, di dng,

không tạo bào tử Lên men glucose va mannitol sinh acid nhung không lên men saccharose và lactose, không có khả năng tách nhóm ammn từ trytophan, không sinh Indol,

không phân giải urea, hầu hết các chủng đều sinh H2S Đã xác định có 2339 kiêu huyết

thanh (serotype), các serotype được chia dựa trên các kháng nguyên O (kháng nguyên somatic) va kháng nguyên H (flagella)

1.2 Nguyén tac

Salmonella thuong hién dién trong mẫu với lượng nhỏ, bị ton thuong va cung hién điện với những sinh vật khác thuộc họ Enterobacteriaceae, có tính cạnh tranh mạnh và ức

chế tăng trưởng Salmonella Quy trình phát hiện gồm 4 bước là tăng sinh, tăng sinh chọn

lọc, phân lập và khăng định bằng những test sinh hóa phù hợp.

CHUONG 2 VAT LIEU VA PHUONG PHAP NGHIÊN CỨU 2.1 Vat ligu

Bang 2.1 Môi trường và mẫu

Bao dap mau 1 cai

2.3 Cách tiễn hành

Đồng nhất 225 mÌ môi trường tăng sinh (BPW), ủ ở 37oC

trong 18-24h

Cay 0.1 ml dung dich tang sinh sang mdi truéng tang sinh chon loc (RV), 6

42°C, 18-24 giờ

Phân lập khuẩn lạc đơn trên ít nhất hai môi trường chọn lọc phân biệt

(XLD, HE) ủ ở 37oC trong 24 giờ

Thử nghiệm sinh hóa

Hình 2 3 Cân 0,6g Trypton dạng bột dùng đề pha với 40ml nước cat

Hình 2 9 Urea được đồ ra đĩa sau khi hấp khử trùng

Hình 2 12 Quá trình thử nghiệm

10

CHUONG 3 KET QUA VA BIEN LUAN

3.1 Kết quả sau khi cây mẫu thịt gà vào môi trường HE

Vi vậy, ta có thể xác định rằng cả 2 đĩa môi trường trên đều xuất hiện vi khuan

Salmonella vì đa số các dong Salmonella đều có khả năng sinh khí H;S nên xuất hiện các

vệt đen trên bề mặt môi trường, đều đó còn cho ta thấy ở mẫu thịt gà được mang đi kiểm định có mật độ vi khuân Salmonella kha cao

G mau déi chimg trén méi truong HE sau khi ủ ở 37°C trong 24 giờ, ta không thấy sự

xuât hiện của các vệt đen Từ đó, ta có thê xác định ở mầu đôi chứng không có sự xuât hiện của v1 khuân Saửmonelia

Ở mẫu đối chứng trên môi trường XLD sau khi ủ ở 37°C trong 24 giờ, ta không thấy sự

xuất hiện của các vệt đen như ở mẫu thịt gà Từ đó, ta có thê xác định ở mẫu đối chứng không có sự xuất hiện của vi khuan Salmonella vi khéng co khi H2S sinh ra 6 trong môi

trường

13

3.4 Kết quả cấy mẫu thịt gà vào môi trường XLD

Hình 3 4 Kế quá cấy mẫu thịt gà vào môi trường XLD

Biện luận

Sau khi ủ mẫu thịt gà trong môi trường XLD ở 37°C trong 24 giờ, ta thấy trên đĩa thạch xuất hiện rất nhiều vệt đen, hầu như chiếm toàn bộ môi trường

Qua đó, ta có thể xác định cả 2 đĩa môi trường trên đều có sự xuất hiện của vi khuẩn

Salmonella vì đa sô các dòng Sabnonelia đều có khả năng sinh khí H;S khiến cho môi trường nuôi cấy chuyên sang màu đen, đều đó còn cho ta thấy ở mẫu thịt gà được mang

đi kiểm định có chứa mật độ vi khuẩn Salmonella kha cao

14 3.5 Kết quả ống nghiệm sao khi thử nghiệm sinh hóa

Hình 3 5 Kết quả sau khi cấy của hỗn hợp BHI và Mamitol

Hình 3 6 Kết quả sau khi cấy của hỗn hợp BHI va Sorbitol

Biện luận

Ở môi trường hỗn hợp BHI và Manitol ta thấy có sự phát triển của vi sinh vật từ đó cho

ra mẫu dương tính Vì có vi khuẩn phát triển trên môi trường hỗn hợp BHI va Manitol, khi so sánh với mẫu đối chứng, ta có thê ghi nhận kết quả dương tính ở 5 ông còn lại

15

Phản ứng ở môi trường hỗn hợp BHI và Sorbitol ta thấy có sự phát triển của vi sinh vật xác định mẫu dương tính Vì có vi khuẩn phát triển trên môi trường hỗn hợp BHI và Sorbitol, khi so sánh với mẫu đối chứng, ta có thê ghi nhận kết quá dương tính ở 5 ống

còn lại

16

nghiệm sinh hóa

Biện luận

Ở ống urea sau khi thử nghiệm hóa sinh thì cho thấy ở ống mẫu đối chứng và ống chứa mẫu thịt đều chuyên từ màu đỏ sang màu hồng hoặc đỏ hồng Từ đó cho ra kết quá 5 ống dương tính, phản ứng thường xuất hiện sau 2h đến 4h

Mỗi trường Trytone

18

Bién luan

Thử nghiệm hóa sinh trên Trytone khi cho 5 giot thuéc thir Kovac’s 6 ống nghiệm, ta thấy

có 2 Ống có xuất hiện vòng màu đỏ chứng tỏ phản ứng dương tính Bốn ống còn lại cho

ra 2 Ống nâu và 2 ống vàng chứng tỏ phản ứng âm tính

19

3.6 Kết quả đĩa BHI sau khi thử nghiệm sinh hóa

Biện luận

Ở môi trường BHI cả 6 vùng cay trên đĩa đều có vi sinh vật xuất hiện từ đó ta xác định ở

6 vùng cấy trên kê cả vùng cây mẫu đổi chứng đều dương tính

Biện luận

Ở thử nghiệm hóa sinh trên LDC ta thấy ống đối chứng (ống thứ nhất từ trái qua phải) chưa chuyên sang màu vàng hoàn toàn Suy ra ông mẫu đối chứng âm tính Còn lại 5 ông tiếp theo chuyên từ tím sang vàng Vì lượng acid sẽ được sinh ra do quá trình lên men dẫn đến làm thay đổi màu sắc của môi trường (tím sang vàng) do có chất Bromocresol purple làm chỉ thị Vì thế 5 ông mẫu thịt gà tiếp theo còn lại dương tính

Biện luận

Ở thử nghiệm hóa sinh trên TSI ta thay toàn bộ 6 ông nghiệm kẻ cả 1 Ống mẫu đối chứng đều dần chuyên sang đen do có khí H;S được sinh ra Ta xác định cả 6 ống TSI đều đương tính

23

Môi

hop BHI va Manitol

BHI va Sorbitol