Có nhiều biện pháp đã được sử dụng để làm tăng độ tan và sinh khả dụng của berberin như tạo phức với B- cyclodextrin, tạo hệ phân tán rắn, dung dịch micell, bào chế dạng nano,.... Trong
DAT VAN DE
Ưu nhược điểm của HPTR Uu điểm
HPTR cải thiện độ tan của dược chất ít tan, làm tăng độ tan của dược chất qua cơ chế giảm kích thước tiểu phân, tăng tính thấm, tôn tại ở dạng vô định hình, từ đó tăng tính thấm qua màng sinh học và tăng sinh khả dụng [45]
HPTR có bề mặt xốp, không ôn định làm cho dược chất dễ chuyên từ trạng thái vô định hình về kết tỉnh làm giảm độ tan [45]
1.2.4 Chất mang trong hệ phân tán rắn 1.2.4.1 Yêu cầu của chất mang
Yêu cầu của chất mang phụ thuộc vào mục đích sử dụng của HPTR:
Dễ tan trong nước và dịch tiêu hóa
Không độc, trơ về mặt dược lý
Có khả năng làm tăng độ tan và tốc độ tan của được chất ít tan.
Tạo được HPTR có độ ôn định cao trong quá trình báo quán, phù hợp với dạng thuốc dự kiến
Thích hợp với phương pháp bào chế và dạng bào chế: chất mang sử dụng trong phương pháp đun chảy phải có nhiệt độ nóng chảy thấp và bền vững về mặt nhiệt động học, còn chất mang sử dụng trong phương pháp dung môi phải dễ tan trong dung môi hòa tan và dễ loại dung môi ngay cả khi dung dịch có độ nhớt cao [20]
1.2.4.2 Một số chất mang sử dụng trong HPTR Polyethylen glycol (PEG)
Các PEG với khối lượng phân tử khác nhau như PEG 3000, PEG 4000, PEG 6000, được dùng rất phô biến làm chất mang trong HPTR của nhiều dược chất ít tan
PEG bén về mặt lý hóa, ít bị ảnh hưởng bởi vi khuân nắm mốc, không độc, có khả năng cải thiện tính thắm ướt cho được chất [37]
Các loại PEG đều có nhiệt độ nóng cháy dưới 65°C và ôn định về mặt nhiệt động học nên thích hợp để điều chế HPTR bằng phương pháp đun chảy [46]
PVP được dùng thông dụng trong sản xuất dược phẩm như PVP KI5, PVP K30, PVP K60, PVP K90 với chí số K biểu thị khối lượng phân tử trung bình của PVP Các
PVP có điểm chảy cao (275°C) và bị phân hủy ở nhiệt độ này, nhưng PVP lại hòa tan tốt trong nước và nhiều dung môi hữu cơ nên thích hợp dùng làm chất mang trong HPTR bào chế bằng phương pháp dung môi Tương tự PEG, PVP có thê cái thiện khả năng thấm ướt của dược chất ít tan nhưng có nhược điểm là hút âm mạnh [37]
Dễ tan trong nước và ít/không độc với cơ thê người Đa số đường có nhiệt độ nóng chảy cao và tan kém trong hầu hết các dung môi hữu cơ nên khó sử dụng phương pháp đun chảy và dung môi [32] Các đường hay dùng như manttol, fructose, lactose và đặc biệt là j-cyelodextrin P-eyelodextrin có khả năng tạo thành phức chất lồng làm tăng độ tan cho dược chất it tan Hién nay B-cyclodextrin va dan chat hydroxyl propyl B-cyclodextrin duge nghién ciru img dung nhiéu [26].
HPMC là hỗn hợp của methyl và hydroxypropyl cellulose, trong do 16,5-30% các nhóm hydroxyl được methyl hóa và 4-32% là dẫn xuất với các nhóm hydroxypropyl Các HPMC hầu hết đều hòa tan được trong nước, hỗn hop ethanol voi diclometan va methanol với dielometan [26] Các chất này có khá năng cải thiện độ hòa tan của các được chất ít tan ngay cả với ty lệ chất mang thấp [6]
1.2.5 Các phương pháp bào chế hệ phân tán rắn
Dựa vào tính chất hóa lý của được chất và chất mang mà chọn phương pháp bào chế phù hợp Một số phương pháp phô biến thường được sử dụng:
1.2.5.1 Phương pháp nghiền Đối tượng áp dụng
Dược chất không tan trong dung môi và chất mang, không bền ở nhiệt độ cao, chất mang có thể tan trong dung môi
Trộn dược chất và chất mang với một lượng tối thiểu chất lỏng thích hợp (có thé là nước), nghiền trộn trong một thời gian đài bằng chày cối hoặc máy nghiên, thu được khối bột nhão Khối bột nhão sẽ được làm khô, sau đó đem nghiền hoặc rây thu được hạt có kích thước thích hợp [7] Ưu điểm chính: Phương pháp đơn giản, dễ thực hiện, tiết kiệm chỉ phí vì không phụ thuộc nhiều vào thiết bị
1.2.5.2 Phương pháp đun chảy Đối tượng áp dụng
Chi 4p dung cho dược chất bền với nhiệt và chất mang có nhiệt độ nóng chảy tương đối thap (PEG 4000, PEG 6000, urê ) Dược chất và chất mang ở nhiệt độ nóng chảy cao cũng có thể áp dụng khi sử dụng đồng chất mang
Cách tiễn hành Phối hợp dược chất vào chất mang đã đun chảy ở nhiệt độ thích hợp (thường ở nhiệt độ cao hơn điểm chảy hỗn hợp eutectic của chúng), khuấy trộn đến khi dược chất và chất mang trộn lẫn với nhau ở trạng thái cháy lỏng tạo thành dung địch trong suối
Làm nguội nhanh trong nước đá, đồng thời khuấy trộn liên tục cho đến khi hệ đông rắn lại tạo thành HPTR Khối rắn được dé ôn định một thời gian, sau đó được phân chia tới kích thước xác định [4, 26] Ưu điểm chính: đơn gián và kinh tễ
1.2.5.3 Phương pháp dung môi Đối tượng áp dụng
Dược chất kém bên với nhiệt, đồng tan hoặc không đồng tan với chất mang:
Chất mang có điểm nóng chảy cao như PVP, polysaccharid,
Dung môi: có khả năng hòa tan cao, ít độc, không dễ cháy
Dược chất và chất mang được hòa tan trong một lượng dung môi trơ hoặc hỗn hợp dung môi trơ tối thiêu Dung môi sau khi hòa tan dược chất và chất mang sẽ được loại bỏ bằng một số cách: bốc hơi dung môi dưới áp suất giám bằng máy cô quay hoặc tủ sấy chân không ở nhiệt độ thấp; phun sấy ở nhiệt độ thích hợp hay loại dung môi bằng phương pháp đông khô Cuối cùng phân chia hạt tới kích thước xác định bằng rây, nghiền Ưu điểm chính: có thể tránh được sự phân hủy do nhiệt của dược chất và chất mang do đó có thể chọn một dung môi chung có nhiệt độ sôi thấp hơn nhiều so với nhiệt độ cháy của chất mang [7]
1.2.6 Phương pháp đánh giá 1.2.6.1 Phân tích nhiét vi sai (DSC)
Phương pháp phân tích nhiệt vi sai được dùng phô biến trong nghiên cứu vật lý chất rắn, khoa học vật liệu và hóa học Đối với hệ phân tán rắn, phương pháp này giúp xác định dược chất ở trạng thái tinh thể hay vô định hình và xác định cầu trúc HPTR là dung dich rắn hay hệ phân tán thông qua việc đo dòng nhiệt là tỏa ra (hoặc thu vào) khi so mẫu với một mẫu chuẩn Tuy nhiên nếu tỷ lệ kết tính dưới 2% thì thường không phát hiện được bằng phân tích nhiệt vi sai [ 14].
1.2.6.2 Quang phố hồng ngoại (IR)
Quang phô hồng ngoại cung cấp thông tin về cầu trúc và cấu tạo phân tử ở trạng thái rắn bằng cách nghiên cứu sự chuyển động của các nguyên tử trong phân tử Dược chất trong HPTR khi so sánh phô hồng ngoại với dược chất tỉnh khiết thì có thê chỉ ra được sự tương tác giữa dược chất và tá được trong HPTR [40]
CHƯƠNG 2 ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
STT Tên nguyên liệu, héa chat Neguon goc Tiéu chuan
1 Berberin clorid Việt Nam DDVN V
13 Nước cât Việt Nam DDVN V
14 Kali dihydrophotphat (KH2PO4) Trung Quôc NSX 15 Natri hydroxid (NaOH) Trung Quéc NSX 2.1.2 Thiét bi va dung cu
Bảng 2.2 Các thiết bị sử dụng trong nghiên cứu
STT Tên thiết bị Xuất xứ
1 Can ky thuat Ohaus My
2 Can phan tich Quintix Sartorius Duc
3 May phun say YC-015 Shanghai Pilotech Trung Quốc
5 Máy siêu âm S60H Elma Đức
6 Máy thử độ hòa tan 708-DS Dissolution Mỹ
7 May do pH Hach senslION+ PH3 Trung Quoc
8 May do quang UV-2600 Shimadzu Nhat Ban
9 May do ham 4m MB45 Switzerland
10 May do pho hong ngoai IR Cary 630 FTIR Mỹ Agilent Technologies
11 May phan tich nhiét quét vi sai DSC LINSEIS Duc 12 | Máy đo phô nhiễu xa tia X D8 Advance, Brucker Duc
Bảng 2.3 Các dụng cụ sử dụng trong thí nghiệm
STT Tén dung cu STT Tén dung cu
3 Ong nghiệm 9 Rây các cỡ
4 Bình định mức 10 Mang loc cellulose acetat 0,45 um
5 Bình hút am silicagel 1 Ong dong
2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp bào chế hệ phân tán rắn
Có rất nhiều phương pháp để bào chế HPTR chứa berberin Mỗi phương pháp lại áp dụng với các chất mang và kỹ thuật khác nhau Trong nghiên cứu này, HPTR sử dụng các chất mang là HPMC E6, HPMC, HPMC K4M, lactose, PEG 4000, PEG 3000, B-CD, PVP K30 va duoc bao ché theo cac phuong phap thich hop nhu sau:
2.2.1.1 Phương pháp nghiền Tiến hành bào chế HPTR berberin bằng phương pháp nghiền Khảo sát bào chế
HPTR với chất mang la HPMC E6, HPMC, HPMC K4M, Lactose, PEG 3000, PEG 4000, B-cyclodextrin
Tiến hành: Cân berberin và chất mang theo tỷ lệ đã chọn Trộn đều berberin và chất mang theo nguyên tắc đồng lượng, thêm I lượng Ethanol 96% đủ làm âm hỗn hợp bột rồi nghiền kỹ bằng chày cối để thu được khối bột nhão Sấy khô trong tủ sấy ở nhiệt độ 40 - 50mC Đề ổn định và làm khô sán phẩm trong bình hút âm 24 giờ Nghiền nhỏ hệ phân tán rắn thu được, rây qua rây 355, bảo quán trong bình hút âm
Tiến hành bào chế HPTR berberin bằng phương pháp đun chảy Khảo sát bào chế HPTR với chất mang là PEG 4000, PEG 3000
Tiến hành: Cân berberin và chất mang theo tý lệ thích hợp Đun chất mang trên nôi cách thủy cho nóng chảy hoàn toàn, thêm berberin vào, khuấy liên tục cho đến khi tạo thành dung địch trong suốt Làm lạnh ngay bằng nước đá, khuấy trộn liên tục cho đến khi dung dịch đông rắn lại Để ôn định và làm khô sán phẩm trong bình hút âm 24 giờ Nghiền nhỏ hệ phân tán rắn thu được, rây qua rây 355 Bảo quản HPTR trong bình hút ẩm
Tiến hành bào chế HPTR berberin bằng phương pháp dung môi Khảo sát bào chế HPTR với chất mang là PVP K30, HPMC E6, HPMC E15, B-cyclodextrin Ethanol 50% được lựa chọn làm dung môi Dung môi được làm bay hơi bằng thiết bị phun sấy và HPTR thu được dưới dạng bột
Tiến hành: Cân berberin và chất mang theo tỷ lệ thích hợp, sau đó hòa tan hỗn hợp berberin và chất mang vào một lượng ethanol 50% theo tỷ lệ 1/25 (g/ml), siêu âm ở 60°C cho tới khi tan hết Làm khô: Loại dung môi bằng thiết bị phun sấy với các thông số máy: Nhiệt độ khí đầu vào 140°C, nhiệt độ khí đầu ra 80°C, áp lực súng phun 3.5 atm, tốc độ phun dịch 1200 ml/giờ, tốc độ thối khí 800 lít/giờ Thu sản phẩm, để ôn định trong bình hút âm 24 giờ Bảo quản sản phẩm trong lọ thủy tỉnh được đậy kín ở nhiệt độ thường và đặt trong bình hút ầm
Phương pháp xác định hiệu suất phun sấy
Hiệu suất quá trình phun sấy (H) được đánh giá dựa trên phần trăm khối lượng sán phẩm thu được so với tông lượng chất rắn trong công thức hỗn dịch đem đi phun say ban dau
Hiệu suất phun sấy được tính theo công thức:
H: hiệu suất quá trình phun sấy (%) m: khối lượng sản phẩm thu được (g) mị: khối lượng berberin trong công thức hỗn dịch phun sấy (g) m;: khôi lượng chất mang trong công thức hỗn dịch phun sấy (g)
2.2.2 Phương pháp bào chế hỗn hợp vật lý
Bào chế hỗn hợp bột gồm berberin và các chất mang với các tỷ lệ: berberin/chất mang là 1:5, được thực hiện theo các bước như sau:
Tiến hành: Nghiền nhỏ chất mang thành bột mịn, sau đó rây qua rây 355 Cân dược chất và chất mang, nghiền trộn dược chất và chất mang trong chày cối sạch thành hỗn hợp bột kép theo nguyên tắc trộn đồng lượng Để ôn định trong bình hút âm 24 giờ và bao quán trong lọ thủy tinh kín, đặt trong bình hút âm
Hỗn hợp vật lý được dùng để so sánh khả năng giải phóng berberin trong các mẫu HPTR
2.2.3 Phương pháp đánh giá hệ phân tán rắn 2.2.3.1 Hình thức Đánh giá hình thức bằng cảm quan: tiễn hành quan sát màu sắc, độ đều màu, kết cầu của sản phẩm
2.2.3.2 Đánh giá tính chất của HPTR a Đánh giá tương tác dược chất — tá dược
Hai phương pháp phân tích nhiệt vi sai và phương pháp quang phô hồng ngoại đánh giá dựa vào sự thay đôi phô của hỗn hợp dược chất - tá dược so với dược chất tỉnh khiết để xác định tương tác giữa dược chất và tá dược
Phương pháp phán tích nhiệt ví sai (DSC) Để nghiên cứu sự thay đổi trạng thái tỉnh thể trước và sau khi bào chế, điểm nóng cháy của HPTR berberin được so sánh với điểm nóng chảy của berberin nguyên liệu Các điểm nóng chảy này được xác định bằng phương pháp đo nhiệt vi sai DSC
Tiến hành: Cân khối lượng mẫu chính xác khoảng 10-20 mg vào một đĩa nhôm Quét nhiệt độ từ 40-250°C tốc độ gia nhiệt I0°C/phút, theo dõi máy và đọc kết quả
Phương pháp quang phố hồng ngoại IR
Lấy khoảng 5-10 mg mẫu thử đặt trực tiếp lên mặt kim cương Tiến hành quét phô trên máy hồng ngoại biến đổi FTIR với dải bước sóng 4000-400 em, độ phân giải
0,4em', theo dõi máy và đọc kết quả b Đánh giá mức độ kết tỉnh bằng phố nhiễu xạ tia X
Phương pháp phổ nhiễu xa tia X có thể xác định được cấu trúc hóa lý của
HPTR theo nguyên tắc: Khi chiếu chùm tia X qua, mạng tỉnh thê cấu tạo từ nguyên tử hay ion đóng vai trò như một cách tử nhiễu xạ đặc biệt Dái nhiễu xạ được ghi lại bằng một máy đếm Trên nhiễu xạ đô, các đỉnh nhiễu xạ được thể hiện bằng một pic có cường độ xác định tương ứng với góc giữa tia tới và tia nhiễu xạ Phần kết tinh cho ra các pic nhọn và hẹp trong khi phần vô định hình lại là một pic rong
Tiên hành: Mẫu bột mịn cần phân tích được đưa vào thiết bị nhận tia X với các điều kiện cụ thể như sau: Quét mẫu từ góc 5° - 50° với tốc độ quét 0,03/0,8 giây Phép đo được tiến hành ở nhiệt độ 25°C
Mức độ và cường độ pic trong phô thể hiện mức độ kết tỉnh của berberin trong hệ phân tán ran
2.2.3.3 Định lượng berberin bằng phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS Xác định bước sóng hấp thụ cực đại của berberin
CHUONG 3: KET QUA VA BAN LUAN
3.1 Kết quả định lượng berberin bằng phương pháp đo quang 3.1.1 Xác định đỉnh cực đại hấp thụ của berberin
Quét phô hấp thụ quang của dung dịch Berberin chuẩn có nông độ 10 ug/ml ở bước sóng từ 800 nm đến 200 nm
Kết quá cho thấy dung dịch Berberin chuẩn nồng độ 10 ug/ml có đỉnh cực đại hấp thụ quang ở bước sóng 351 nm Hình ánh phô hấp thụ của dung dịch berberin 10 pg/ml duoc thé hiện trong phụ lục 1 Do đó các nghiên cửu định lượng tiếp theo sẽ được tiễn hành bằng phương pháp đo quang UV — VIS ở bước sóng 351 nm
3.1.2 Đường chuẩn định lượng berberin bằng phương pháp đo quang
Tiến hành pha các dung dịch chuẩn berberin elorid có nồng độ lần lượt là 2,5; 5;
7,5; 10; 12,5ug/ml và ẩo độ hấp thụ quang ở bước sóng 351 nm, kết quả thể hiện trong bảng 3.1 và hình 3.1
Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang theo nồng độ của berberin tại bước sóng 351 nm
Nong dé (ug/ml) 2,5 5 7,5 10 12,5 Độ hấp thụ
Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn độ hấp thụ quang của berberin theo nồng độ tại bước sóng
Giá trị R” = 0.9994 ( > 0,995), cho thấy có sự phụ thuộc tuyến tính giữa mật độ quang và nồng độ dung dịch berberin trong khoảng từ 2,5 ng/ml đến 12,5 ug/ml
Phương trình biêu diễn sự tương quan giữa độ hấp thụ quang với nồng độ là: y = 0,0716 x - 0,0139
Trong đó, y là độ hấp thụ quang (đơn vị Abs), x là nồng độ berberin (don vi ug/ml)
Do đó, nong độ berberin trong mẫu thử có thê được xác định dựa vào phương trình tuyến tính vừa xây dựng được
3.2 Kết quả khảo sát độ hòa tan của berberin nguyên liệu Đánh giá độ hòa tan của berberin nguyên liệu ở dạng bột đã nghiền mịn trong môi trường đệm phosphat pH 6,8 như mô tả ở mục 2.2.3.4 Kết quả thí nghiệm được trình bày như trong bang 3.2 và hình 3.2
Bảng 3.2 Độ hòa tan của bột berberin nguyên liệu
Thời gian (phút) % berberin hòa tan
Tỷ lệ berberin hũa tan (%} be ơ S ơ w â
Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan của bột berberin nguyên liệu
Berberin nguyên liệu hòa tan chậm trong môi trường đệm phosphat pH 6,8 Độ hòa tan thấp: sau 5 phút hòa tan được 9,78% và sau 60 phút hòa tan được 28,11% so với lượng ban đầu Từ phút 15 đến phút 60 độ hòa tan của berberin không tăng đáng kế, điều này cho thay berberin tan tương đôi ít trong môi trường đệm phosphat pH 6,8 Đề tăng độ hòa tan của berberin, có thê bào chế HPTR berberin với các chất mang thân nước để cải thiện khả năng thắm ướt môi trường
3.3 Kết quả khảo sát độ hòa tan của berberin trong hệ phân tán rắn bào chế theo phương pháp nghiền
3.3.1 Khảo sát ảnh hướng của các chất mang
HPTR chứa berberin được bào chế theo phương pháp nghiền như mô tả ở mục 2.2.1.1, hỗn hợp vật lý được bào chế theo phương pháp như mô tả ở mục 2.2.2 Trong đó tỷ lệ dược chat/chat mang la 1:5 Cac mẫu được bào chế với một số chất mang thân nước: HPMC E6, HPMC K4M, HPMC, lactose, PEG 4000, PEG 3000, B-cyclodextrin được trình bày trong bảng 3.3 Tỷ lệ berberin hòa tan của các mẫu được trình bày trong bảng 3.4 và hình 3.3
Bảng 3.3 Công thức HPTR berberin sử dụng các chất mang khác nhau
Ethanol 96% vd vd vd vd vd vd vd
Bang 3.4 Ty 1é berberin hòa tan theo thời gian trong HPTR sử dụng các chất mang khác nhau
Thời % berberin hòa tan gian
Hình 3.3 Đồ thị hòa tan của berberin trong HPTR sử dụng các chất mang khác
Từ kết quả và đồ thị hòa tan của HPTR berberin được bào chế bằng phương pháp nghiền cho thấy:
Tất cả các mẫu HPTR với chất mang khác nhau đều làm tăng mức độ và tốc độ hòa tan của berberin so với berberin nguyên liệu gấp I,§ - 2,6 lần và cao hơn so với hỗn hợp vật lý 1,69 - 2,45 lần sau 60 phút thử nghiệm Đặc biệt là tốc độ hòa tan của berberin được cái thiện đáng kê ngay sau 5 phút ban đầu (thê hiện ở độ dốc của đường cong hòa tan theo thời gian)
So sánh với mức độ và tốc độ hòa tan của berberin nguyên liệu thì mức độ và tốc độ hòa tan của berberin từ các HPTR tăng lên có sự khác nhau theo các chất mang khác nhau HPTR tan tốt nhất khi chất mang là B-cyclodextrin, dat 65% ngay sau 5 phút và 72,9% sau 60 phút Sau đó đến các chất mang HPMC, lactose, PEG 4000, PEG
3000 và HPMC E6 HPTR chứa chất mang HPMC K4M tan kém nhất, chí tan 23,7% sau 5 phút và 50,5% sau 60 phút hòa tan
Kết luận: Từ các kết quả thu được cho thấy HPTR berberin bào chế bằng phương pháp nghiền sử dụng chất mang j-cyelodextrin có khả năng hòa tan tốt nhất
Do đó j-cyelodextrin được lựa chọn sử dụng trong nghiên cứu tiếp theo
3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệ dược chất/chất mang B-cyclodextrin
Sau khi lựa chọn được chất mang f-cyelodextrin, tiễn hành kháo sát tỷ lệ dược chất/chất mang ảnh hưởng tới độ hòa tan của HPTR berberin qua một sô mẫu Các mẫu được bào chế với tỷ lệ được chất/chất mang khác nhau được trình bày trong bảng 3.5
Tỷ lệ berberm hòa tan được trình bày ở bảng 3.6 và hình 3.4
Bảng 3.5 Công thức HPTR berberin sử dụng các tỷ lệ chất mang khác nhau
Ethanol vd vd vd vd vd -
Bảng 3.6 Tý lệ berberin hòa tan theo thoi gian trong HPTR str dung ty 16 chat mang B- cyclodextrin khac nhau
Thoi % berberin hòa tan gian
Hình 3.4 Đồ thị hòa tan của berberin trong HPTR sử dụng các tỷ lệ chất mang j- cyclodextrin khác nhau Nhận xét:
Từ kết quả và đồ thị hòa tan của HPTR berberin với chất mang j-cyelodextrin ở các tỷ lệ khác nhau cho thấy:
Tất cả các mẫu HPTR với chất mang B-cyclodextrin 6 tỷ lệ khác nhau đều làm tăng độ hòa tan của berberin so với nguyên liệu lên 2,5 - 2,66 lần và cao hon 1,55 - 1,62 lần so với hỗn hợp vật lý sau 60 phút thử nghiệm
Có thê thấy, giá trị độ hòa tan của berberin ở các tỷ lệ chất mang khác nhau là gan như tương đương Do đó, để tôi ưu khá năng mang dược chất, chọn tỷ lệ berberin/B-CD là 1:1 đê bào chế HPTR berberin bằng phương pháp nghin
Kết luận: Lựa chọn tỷ lệ berberin/B-CD là 1:1 để bào chế HPTR berberin bằng phương pháp nghiên trong nghiên cứu tiếp theo
3.4, Kết quả khảo sát độ hòa tan của berberin trong hệ phân tán rắn bào chế theo phương pháp đun chảy
3.4.1 Khảo sát ảnh hướng của các chất mang
Hệ phân tán răn berberin được bào chế cùng các chất mang là polymer thân nước PEG 4000, PEG 3000 với tỷ lệ dược chất/chất mang là 1:5 được trình bày ở bảng 3.7 Bào chế HPTR theo phương pháp đun chảy như mô tá trong mục 2.2.1.2 và hỗn
26 hợp vật lý như mô tả ở mục 2.2.2 Kết quả độ hòa tan của các mẫu HPTR được trình bày ở bảng 3.8 và hình 3.5
Bảng 3.7 Công thức HPTR berberin sử dụng các chất mang khác nhau và công thức hỗn hợp vật lý
Tỷ lệ DC/CM N8 N9 HHVL
Bang 3.8 Tý lệ berberin hòa tan theo thời gian trong HPTR sử dụng chất mang khác nhau và hỗn hợp vật lý
% berberin hòa tan Thời gian (phút)
Tỷ lệ berberin hòa tan (%) N S ơ â â
Hình 3.5 Đồ thị hòa tan của berberin trong HPTR sử dụng các chất mang khác nhau
Tween 80 là chất diện hoạt không ion hóa, so với các chất diện hoạt thường sử
dụng khác như Poloxame 188 hay Natri lauryl sulfat thi Tween 80 it kha nang gây ra độc tính nên quyết định lựa chọn Tween 80 cho công thức bào chế HPTR Từ hoạt chất berberin, chất mang j-CD và chất diện hoạt Tween 80 bào chế các mẫu HPTR với tỷ lệ Tween 80/Berberin 14 5%; 10% va 15% theo phương pháp dung môi (như phần 2.2.1.3) Công thức bào chế với tỷ lệ berberin/ B-CD = 1:1 được trình bày như bảng 3.17 Kết quả độ hòa tan của các HPTR như bảng 3.18 và hình 3.10
Bảng 3.17 Công thức HPTR berberin sử dụng các tỷ lệ Tween 80 khác nhau
Bảng 3.18 Tỷ lệ berberin hòa tan theo thời gian trong HPTR str dung ty 1é Tween 80 khác nhau
Thời gian % berberin hòa tan
Hình 3.10 Đồ thị hòa tan của berberin trong HPTR sử dụng các tỷ lệ Tween 80 khác
Hinh 3.17 Phé nhiéu xa tia X cha HPTR berberin
Phố nhiễu xạ tia X của berberin có nhiều pic nhiễu xạ cho thấy berberin tồn tại ở trạng thái kết tính Trong khi đó biên độ các pic trong phô nhiễu xạ tia X ở HPTR giảm
44 di rõ rệt, sô pic ít và độ cao pic thấp chứng tỏ mức độ berberin kết tính trong HPTR giảm, cũng có nghĩa là berberm tồn tại chủ yếu ở trạng thái vô định hình Như vậy, có thê giải thích cơ chế làm tăng độ hòa tan của HPTR là do giảm tỷ lệ berberin kết tinh, tăng tỷ lệ vô định hình
Kết luận: Dựa vào các kết quá thu được, có thể thấy HPTR đã bào chế giúp cải thiện tốt khả năng hòa tan của berberin do có sự biến đôi về trạng thái thù hình và tạo phức với chất mang Từ đó chúng tôi đưa ra công thức hệ phân tán rắn chứa berberin là:
Thành phần Khối lượng (g) Berberin (g) 10 B-cyclodextrin (g) 10
CHUONG 4 BAN LUAN
4.1 Sử dụng hệ phân tán rắn để tăng độ hòa tan Cùng với sự phát triên của công nghệ bào chế, việc cai thiện độ hòa tan cho các dược chất ít tan vẫn đang là vấn đề được nghiên cứu rộng rãi Trong đó sử dụng HPTR để cái thiện độ tan và tốc độ hòa tan là biện pháp được áp dụng từ lâu Từ các nghiên cứu gần đây cho thấy, bào chế HPTR là một trong những xu hướng nổi bật hiện nay nhằm mục đích cuối cùng là cải thiện SKD của dược chất có vấn đề về SKD như các dược chất thuộc nhóm III trong bảng hệ thông phân loại sinh dược học [21,35,44]
Trong khi một số các kỹ thuật cải thiện độ tan khác đòi hỏi phải có máy móc kỹ thuật cao mới có thể áp dụng được thì HPTR có thể sử dụng các kỹ thuật đơn gián như phương pháp nghiền, phương pháp đun cháy để chế tạo và tiểu phân thu được có kích thước nhỏ, tăng thấm ướt, tăng độ xốp trong hỗn hợp và đặc biệt là chuyên tinh thể hoạt chất từ dạng tính thể sang dạng vô định hình có độ tan lớn hơn Tính đến thời điểm hiện tại, HPTR đã có nhiều bước phát triển với nhiều phương pháp bào chế nhằm nâng cao hơn nữa khả năng cải thiện độ tan và độ hòa tan của các hợp chất khó tan cũng như tăng độ ôn định của HPTR [44]
Trong nghiên cứu này, các chất mang được sử dụng đề bào chế HPTR berberin gdm HPMC E6, HPMC K4M, HPMC, HPMC E15, lactose, PEG 3000, PEG 4000,
Bcyclodextrin, PVP K30 đều là các polyme thân nước có vai trò làm tăng độ tan và tốc độ hòa tan cho berberin Qua khảo sát, berberin nguyên liệu chỉ tan 28% sau 60 phút thử độ hòa tan, cần thiết phải tăng độ tan của berbein để tăng sinh khả dụng của nó
Với công thức HPTR, berberin đã cải thiện đáng kể độ tan và độ hòa tan cả về mức độ lẫn tốc độ
4.2 Lựa chọn phương pháp dung môi để bào chế hệ phân tán rắn Một số phương pháp thường dùng đề bào chế HPTR: phương pháp gia nhiệt như đun chảy, đùn nóng chảy: phương pháp dung môi như phun sấy, đông khô, cô quay ; phương pháp dùng chất lỏng siêu tới hạn; phương pháp nghiền; tạo phức Mỗi một phương pháp đều có ưu điểm và nhược điểm riêng Vì vậy, tùy vào đặc tính hóa lý của dược chất và chất mang cũng như dạng bào chế sẽ ứng dụng dược chất mà lựa chọn phương pháp phù hợp nhất
Tiên hành bào chế HPTR berberin bằng các phương pháp: phương pháp dun chảy, phương pháp dung môi và phương pháp nghiền Sau đó đánh giá các HPTR này dựa trên hàm lượng berberin giải phóng, nhận thấy: HPTR có mức độ và tốc độ giải phóng hoạt chất giám dân theo thứ tự: phương pháp dung môi > phương pháp nghiền > phương pháp đun chảy Như vậy, HPTR bào chế bằng phương pháp dung môi rồi phun say cho kết quả tốt nhất Do vậy, dung môi - phun sấy là phương pháp được lựa chọn đề bào chế HPTR trong các nghiên cứu của đề tài
Phương pháp dung môi - phun sấy được áp dụng trong nghiên cứu này vì những ưu điểm mà phương pháp mang lại: giúp cải thiện độ hòa tan của dược chất tốt nhất, tránh sự biến tính của được chất và chất mang khi phải tiếp xúc lâu với nhiệt độ cao như trong phương pháp đun chảy Ngoài ra, bột phun sấy có kích thước tiểu phân bé, độ xốp cao cũng là yếu tô làm tăng độ hòa tan của dược chất [37, 43] Tuy hiệu suất của phương pháp dung môi - phun sấy thấp hơn so với những phương pháp dung môi khác, nhưng kỹ thuật phun sấy được đánh giá cao hơn do có thể dễ dàng điều chỉnh thông số để thu được sản phẩm với đặc tính mong muốn cũng như mở rộng được quy mô bào chế [17]
4.3 Về sử dụng chất mang trong phương pháp dung môi Với phương pháp dung môi - phun sấy, qua khảo sát sơ bộ nhận thấy phương pháp này khi sử dụng -CD làm chất mang, bào chế được HPTR berberin có khả năng cải thiện độ hòa tan tốt nhất so với các chất mang khác Điều này là do j-CD có hình dạng phân tử giống như một khối rỗng chóp cụt và khoảng không gian ở giữa hình chóp đó là trung tâm thân dầu với mật độ điện tử cao, phần bên ngoài là các nhóm hydroxyl của các đơn vị đường trong cầu trúc bậc 1 và 2 Phân tử cyclodextrin có phần bên ngoài thân nước, phần lõi thân dầu nên có thê liên kết với hợp chất ít tan trong nước theo kiêu liên kết cộng hợp không đồng hóa trị dé tạo dạng phức hợp dược chất - cyclodextrin bền vững Phức mới hình thành có đặc tính thân nước vì vậy cải thiện được độ tan và tốc độ hòa tan của nhiều dược chất ít tan [30] Đặc trưng quan trọng nhất của j-CD là có khả năng tạo thành phức chất lồng vào nhau ở trạng thái dung dịch và rắn (loại chủ thê - khách thể) với một phạm vi rất rộng của các chất thân đầu dạng rắn, lỏng, khí bằng hiện tượng tạo phức phân tử, phức được hình thành do có sự phù hợp giữa kích thước phân tử khách và lỗ hồng của vòng B-CD Không có liên kết cộng hóa trị hay liên kết mới nào được hình thành trong quá trình tạo phức [30] Cho tới nay
47 đã có nhiều nghiên cứu sử dụng B-CD 1a chat mang dé bao ché HPTR cai thién d6 tan và độ hòa tan của một sé duoc chat it tan nhu: celecoxib [36], domperidon [39], indomethacin [6],
Bên cạnh đó, năm 2013 Ye Zhang và cộng sự đã nghiên cứu tac dụng tăng cường của j-cyclodextrin đôi với sự hấp thu ở ruột của berberin hydrochlorid Kết quả chỉ ra rằng 1,3-benzodioxole của berberin hydrochlorid đã được đưa vào khoang của - CD dé tạo thành một phức hợp có tốc độ hòa tan cao hơn berberin tự do trong thử nghiệm in yiro Sự hấp thu ở ruột của phức hợp ở chuột cao hơn đáng kê so với thuộc tự đo do tác dụng tăng khả năng hòa tan và tác động ức chế Pgp của j-cyelodextrin Cơ chế ức chế của j-CD trên Pgp đã được chứng minh bằng cách điều chính hoạt động Pgp ATPase, mức mRNA Pgp và sự biểu hiện Pgp Điều này cũng gợi ý rằng phức hợp của -cyelodextrin với berberin giúp tăng sinh khá dụng ở ruột của thuốc [48]
4.4 Về ảnh hưởng của chất diện hoạt trong hệ phân tán rắn Chất diện hoạt có vai trò làm tăng khả năng thấm ướt bề mặt tiêu phân, do vậy ngày nay xu hướng sử dụng CDH vào bào chế HPTR ngày càng tăng Ngoài ra, chất diện hoạt còn giúp HPTR ổn định hơn, tránh sự tái kết kinh dẫn tới giám độ hòa tan [45] Tuy nhiên vai trò của các CDH khác nhau có ánh hưởng khác nhau đến khả năng hòa tan của hoạt chất ít tan
Trong nghiên cứu này, Tween 80 được lựa chọn do có độc tính thấp hơn các chất diện hoạt khác Ngoài ra, Tween 80 là chất điện hoạt làm giám sức căng bề mặt nên không tác động nhiều đến mối liên kết giữa phức hợp B-CD và berberin nên không ảnh hưởng đến độ hòa tan của HPTR Có thể thấy, CDH giúp cải thiện độ hòa tan của HPTR theo cơ chế chất mang là chủ yêu hơn là vai trò tăng khả năng diện hoạt thông thường
Với công thức HPTR chúng tôi đưa ra, độ hòa tan của berberin được cải thiện đáng kể Khi berbein nguyên liệu cho kết quá thử độ hòa tan sau 1 giờ chí đạt 28,11% thì lượng berberin hòa tan từ HPTR đạt 86,66% chỉ sau 5 phút và 93,95% sau l giờ, tức là tăng gấp hơn 3 lần so với berberin nguyên liệu
CHUONG 5 KET LUAN VA KIEN NGHI
Qua quá trình thực nghiệm đã thu được một số kết quả như sau:
1) Nghiên cứu đã khảo sát được sự ánh hưởng của chất mang tới độ hoà tan của berberin trong hệ phân tán rắn, cụ thé 1a:
Khi bào chế HPTR berberin bằng phương pháp nghiên, tất cá các mau HPTR với chất mang khác nhau đều làm tăng độ hòa tan của berberin gấp 1,8 - 2,6 lần so với berberin nguyên liệu HPTR với chất mang HPMC K4M cho kết quả độ hòa tan kém nhất, HPTR với chất mang j-cyelodextrin cho kết quá độ hòa tan tốt nhất Trong đó tỷ lệ DC/ B-CD là 1:1 cho độ hòa tan tốt
Khi bào chế HPTR berberin bằng phương pháp đun chảy, tất cá các mẫu HPTR với chất mang khác nhau đều làm tăng độ hòa tan của berberin từ 2,1 - 2,4 lần sau 60 phút so với berberin nguyên liệu HPTR chứa chất mang PEG 4000 tan tốt hơn chất mang PEG 3000 Tỷ lệ DC/PEG 4000 là 1:7 cho độ hòa tan tốt nhất
Khi bào chế HPTR berberin bằng phương pháp dung môi, tất cả các mẫu HPTR với chất mang khác nhau đều làm tăng độ hòa tan của berberin từ 2,4 - 3, lần sau 60 phút so với berberin nguyên liệu HPTR với chất mang PVP K30 cho kết quả độ hòa tan kém nhất, HPTR với chất mang B-cyclodextrin cho kết quả độ hòa tan tốt nhất
Trong đó tý lệ DC/ B-CD là 1:1 cho độ hòa tan tốt
2) Nghiên cứu đã xây dựng được công thức bào chế HPTR chứa berberin bằng phương pháp dung môi với khả năng hòa tan dược chất tốt, độ tan sau 5 phút đạt 86,66% và sau 60 phút đạt 93,95%; gấp 3,3 lan berberin nguyên liệu Công thức bào chế HPTR chứa berberin là:
Berberin 10 g B-cyclodextrin 10 g Tween 80 0,5 g Ethanol 500 ml
5.2 KIEN NGHI Đề tiếp tục hoàn thiện đề tài nghiên cứu, chúng tôi xin có một sô dé xuất sau:
1 Tối ưu hóa công thức và một sô thông số kỹ thuật của quá trình bào chế hệ phân tán răn berberin bằng phương pháp dung môi
2 Đánh giá độ ôn định của HPTR tối ưu bào chế được
3 Nghiên cứu ứng dụng vào dạng bào chê cụ thê như viên nén, viên nang,
TAI LIEU THAM KHAO TAI LIEU TIENG VIET
[1] Bộ Y Tế (2018), Dược điển Việt Nam V, Chuyên luận Berberin clorid, NXB Y học, tập 1
[2] Trần Trịnh Công (2015), Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh kia dụng viên nang traconazol, Luan an tién si dược học, Đại học Dược Hà Nội
[3] Đồng Quang Huy (2014), Nghiên cứu chiết xuất berberin từ vàng đẳng bằng dung dich kiềm, Luận văn thạc sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội
[4] Đỗ Tất Lợi (1999), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, pp 189 - 191
[5] Nguyễn Văn Long (1993), "Một số vẫn đề về hệ phân tán rắn và ứng dụng trong các dạng thuộc”, Tạp chí dược học 6, pp 10-14
[6] Vũ Thị Lưu Ly (2006), Nghiên cứu hệ phân tán ran cua Indomethacin voi j- cyclodextrin, ung dung vao dang thuốc nang cứng, Luận văn thạc sỹ dược học, Đại học Dược Hà Nội
[7] Phan Thị Phượng (2016), Nghiên cứu bào chế hệ phân tán rắn berberin đề cải thiện độ hòa tan của viên nén, Luận văn thạc sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội
[8] Nguyễn Thị Kim Thanh (2008), Định lượng berberin nguyên liệu bằng phương pháp tạo cặp ion chiết - đo quang, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội
[9] Nguyễn Thị Thơi (2018), Nghiên cứu tạo ví nang aleinat chứa berberin, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội.
TAI LIEU TIENG ANH
[10] Affuso Flora et al (2010), “Cardiovascular and metabolic effects of Berberine”, World journal of cardiology 2 (4), pp 71
[11] Battu Sunil Kumar et al (2010), "Physicochemical characterization of berberine chloride: a perspective in the development of a solution dosage form for oral delivery”, Aaps Pharmscitech 11 (3), pp 1466-1475
[12] Bhatnagar Punit et al (2014), "Solid dispersion in pharmaceutical drug development: from basics to clinical applications”, Current drug delivery 11 (2), pp 155-171
[13] Birdsall Timothy C (1997), "Berberine: Therapeutic potential of alkaloid found in several medicinal plants”, Altern Med Rev 2, pp 94-103
[14] Chiou Win Loung et al (1971), "Pharmaceutical applications of solid dispersion systems”, Journal of pharmaceutical sciences 60 (9), pp 1281-1302
[15] Chun YT et al (1979), "A biochemical study on the hypotensive effect of berberine in rats”, General Pharmacology: The Vascular System 10 (3), pp
Dhirendra K et al (2009), "Solid dispersions: a review”, Pakistan journal of pharmaceutical sciences 22 (2)
Frizon Fernando et al (2013), "Dissolution rate enhancement of loratadine in polyvinylpyrrolidone K-30 solid dispersions by solvent methods”, Powder Technology 235, pp 532-539
Guo Shuang et al (2017), "Solid dispersion of berberine hydrochloride and Eudragit® $100: formulation, physicochemical characterization and cytotoxicity evaluation”, Journal of Drug Delivery Science and Technology 40, pp 21-27
Hu Siwang et al (2019), "Preventive and therapeutic roles of berberine in gastrointestinal cancers”, BioMed research international 2019
Kaur Jatinder et al (2012), “Improvement of drug solubility using solid dispersion”, Int J Pharm Pharm Sci 4 (2), pp 47-53
Kawabata Yohei et al (2011), “Formulation design for poorly water-soluble drugs based on biopharmaceutics classification system: basic approaches and practical applications”, International journal of pharmaceutics 420 (1), pp 1- 10
Kong Weijia et al (2004), "Berberine is a novel cholesterol-lowering drug working through a unique mechanism distinct from statins”, Nature medicine
Kumar Shobhit et al (2013), "Pharmaceutical solid dispersion technology: a strategy to improve dissolution of poorly water-soluble drugs”, Recent patents on drug delivery & formulation 7 (2), pp 111-121
Kuo Chi-Li et al (2004), "The anti-inflammatory potential of berberine in vitro and in vivo", Cancer letters 203 (2), pp 127-137
Lee Yun S et al (2006), "Berberine, a natural plant product, activates AMP- activated protein kinase with beneficial metabolic effects in diabetic and insulin- resistant states”, Diabetes 55 (8), pp 2256-2264
Leuner Christian et al (2000), "Improving drug solubility for oral delivery using solid dispersions”, European journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics
Li Jieping et al 2018), "Self-nanoemulsifying system improves oral absorption and enhances anti-acute myeloid leukemia activity of berberine”, Journal of nanobiotechnology 16 (1), pp 1-13
Lin Yu-Hsin et al (2015), "Berberine-loaded targeted nanoparticles as specific Helicobacter pylori eradication therapy: in vitro and in vivo study”,
Liu Chang-Shun et al (2016), "Research progress on berberine with a special focus on its oral bioavailability”, Fitoterapia 109, pp 274-282
Loftsson Thorsteinn et al (2005), “Cyclodextrins in drug delivery”, Expert opinion on drug delivery 2 (2), pp 335-351.
Ma Jing-Yi et al (2013), "Excretion of berberine and its metabolites in oral administration in rats”, Journal of pharmaceutical sciences 102 (11), pp 4181- 4192
Mogal SA et al (2012), "Solid dispersion technique for improving solubility of some poorly soluble drugs", Der Pharmacia Lettre 4 (5), pp 1574-1586
Naveen CR et al (2016), "Berberine induces neuronal differentiation through inhibition of cancer stemness and epithelial-mesenchymal transition in neuroblastoma cells”, Phytomedicine 23 (7), pp 736-744
Pan Guo-yu et al (2002), "The involvement of P-glycoprotein in berberine absorption”, Pharmacology & toxicology 91 (4), pp 193-197
Pawar Anil (2012), “Novel techniques for solubility, dissolution rate and bioavailability enhancement of class II and IV drugs”, Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Sciences 2 (13), pp 9
Rawat Swati et al (2004), "Solubility enhancement of celecoxib using B- cyclodextrin inclusion complexes”, European journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 57 (2), pp 263-267
Sharma Anshu et al (2011), "Solid dispersion: A promising technique to enhance solubility of poorly water soluble drug”, International Journal of Drug Delivery 3 (2), pp 149
Shinjyo Noriko et al (2020), "Berberine for prevention of dementia associated with diabetes and its comorbidities: A systematic review”, Journal of integrative medicine 18 (2), pp 125-151
Swami Gaurav et al (2010), "Preparation and characterization of Domperidone- B-cyclodextrin complexes prepared by kneading method”, International Journal of Advances in Pharmaceutical Sciences 1 (1)
Swarbrick, James, et al (2000), “Encyclopedia of Pharmaceutical Technologys Volume 20- Supplement 3”, CRC press
Tsai Pi-Lo et al (2002), "Simultaneous determination of berberine in rat blood, liver and bile using microdialysis coupled to high-performance liquid chromatography”, Journal of Chromatography A 961 (1), pp 125-130
V Diogo Catia et al (2011), "Berberine as a promising safe anti-cancer agent-is there a role for mitochondria?”, Current drug targets 12 (6), pp 850-859
Vasconcelos Teofilo et al (2007), "Solid dispersions as strategy to improve oral bioavailability of poor water soluble drugs”, Drug discovery today 12 (23-24), pp 1068-1075
Verma Surender et al (2011), "Solid dispersion: a strategy for solubility enhancement”, Jnt J Pharm Technol 3, pp 1062-1099
Vo Chau Le-Ngoc et al (2013), "Current trends and future perspectives of solid dispersions containing poorly water-soluble drugs”, European journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 85 (3), pp 799-813
Wu Jui- Yu et al (2012), "Thermal analysis and dissolution characteristics of nifedipine solid dispersions”, Journal of Food and Drug Analysis 20 (1).
[47] Ye Minzhong et al (2009), "Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent research”, Journal of Pharmacy and Pharmacology 61 (7), pp 831-837
[48] Zhang Ye et al (2013), "Effects of B-cyclodextrin on the intestinal absorption of berberine hydrochloride, a P-glycoprotein substrate”, International Journal of Biological Macromolecules 59, pp 363-371
WEBSITE [49] Cuc quan ly dược, Ngân hàng dữ liệu ngành dược, http://drugbank.vn/, ngay truy cập 27/05/2021.
PHU LUC 1: PHO HAP THU UV-VIS
Hinh 1 Day phổ hấp thụ quang của dung dịch berberin chuẩn ở bước sóng từ 800 nm đên 200 nm
PHU LUC 2: HINH ANH GIAN DO NHIET VI SAI DSC
sEeTARAN | Figure: Experiment:LinhYD Berberin Crucible:Al 30 yl Atmosphereâir DSC131 26/05/2021 Procedure: 30-300 oC 10C.min-1 one 2) Mass (ng): 8.91
Peak :130.08 °C Enthalpy 4J/g : 147.62 (Endothermic effect) Onset Paint :96.64 °C
Hình 1 Hình ảnh giản đồ nhiệt vi sai của berberin nguyên liệu
SeTaAaRANm | Figure: Experiment:LinhYD Beta-Cyclodextrin Crucible:Al 30 pl Almospheresir
DSC131 21/05/2021 Procedure: 30-300 oC 10G.min-1 (Zone 2) Mass (mg): 22.1
Peak :117.54 °C Onset Point :78.85 °C Enthalpy /J/g : 366.07 (Endothennic effect)
Hình 2 Hình ảnh giản đỗ nhiệt vi sai của B-CD setaranm | Figure: Experiment:LinhYD HPTR Berberin Crucible:Al 30 jl AtmosphereÂir
DSC131 21/05/2021 Procedure: 30-300 oC 10C.min-1 (one 2) Mass (mg): 9.33