Có nhiều kỹ thuật tăng độ hòa tan của dược chất ít tan như bào chế hệ phân tán rắn HPTR, giảm kích thước tiểu phân, thêm các chất diện hoạt, bào chế các hệ mang thuốc lipid, hệ tự nhũ hó
TỔNG QUAN
Tổng quan về cilnidipin
1.1.1 Công thức hóa học, tính chất lý hóa
1.1.1.1 Công thức hóa học và tên khoa học
Hình 1.1 Công thức hóa học của cilnidipin
- Khối lượng phân tử: 429,52 g/mol [11]
- Tên khoa học: 3-(2-Methoxyethyl)5-[(2E)-3-phenylprop-2-en-1-yl](4RS)-2,6- dimethyl-4-(3-nitrophenyl)-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylat [11]
1.1.1.2 Tính chất lý hóa
- Cảm quan: bột tinh thể màu vàng nhạt [11], nhiệt độ nóng chảy: 108-113˚C [10]
- Độ tan: tan hoàn toàn trong acetonitril, ít tan trong methanol và ethanol, thực tế không tan trong nước [11]
- Hệ số phân bố dầu/nước: 4,7
- Độ bền: CIL bị phân hủy bởi ánh sáng, tạo sản phẩm màu vàng đỏ [11]
- Theo hệ thống phân loại sinh dược học (BCS), CIL thuộc nhóm II, nhóm có độ tan trong nước kém và tính thấm tốt
Cilnidipin được hấp thu nhanh sau khi uống, nồng độ thuốc trong máu đạt đỉnh sau
2 giờ Theo nghiên cứu của Lee Jieon và các cộng sự, thực hiện ở 51 đối tượng nam khỏe mạnh, sau khi sử dụng 10 mg CIL đơn liều, nồng độ thuốc tối đa trong máu Cmax và diện tích dưới đường cong AUC được ghi nhận lần lượt là 8,9 ± 4,2 ng/mL và 41,2 ± 20,4 ng.h/mL [16] Trong cơ thể, thuốc được phân bố chủ yếu ở thận, gan, huyết tương và các mô khác Khoảng 98 % CIL liên kết với protein huyết tương Thời gian bán thải là 7,5 giờ [6] Cilnidipin chuyển hóa ở cả gan và thận, thông qua quá trình khử hydro với sự có mặt của hệ enzym microsome cytochrom P450 ở gan Thuốc được thải trừ 80
% qua phân và 20% qua nước tiểu [21]
Do CIL có độ tan và độ hòa tan trong nước thấp và bị chuyển hóa lần đầu qua gan, sinh khả dụng (SKD) đường uống của thuốc rất thấp, khoảng 13 % [12] Nhiều nghiên cứu cải thiện độ hòa tan và sinh khả dụng của thuốc đã được thực hiện bằng cách tạo
3 phức hợp của CIL với hydroxypropyl-β-cyclodextrin, tạo tiểu phân nano lipid rắn, tiểu phân nano PGLA [15]
1.1.3 Tác dụng và cơ chế tác dụng
Không giống như các thuốc chẹn kênh canxi khác, CIL ức chế đồng thời cả 2 kênh
Ca 2+ loại L trên cơ trơn mạch máu và kênh Ca 2+ loại N trên tế bào thần kinh giao cảm CIL được chứng minh về tác dụng hạ huyết áp hiệu quả và an toàn mà không gây ra tác dụng hạ huyết áp quá mức và gây phản xạ nhịp tim nhanh so với các dihydropyridin khác khi dùng liều đơn [16],[20]
Trên kênh canxi L, CIL ức chế dòng canxi đi vào tế bào cơ trơn mạch máu, làm giãn nở mạch máu, dẫn đến hạ huyết áp, bền vững hơn các thuốc khác (nifedipin, nicardipin) Ngoài ra, thuốc còn làm chậm nhịp tim, giãn mạch, hạ huyết áp do stress, tăng lưu lượng máu qua thận Các nghiên cứu lâm sàng đã chứng minh tác dụng bảo vệ tim mạch, thần kinh và chức năng thận của cilnidipin Thuốc phù hợp với người cao huyết áp mắc bệnh tiểu đường, bệnh thận mạn tính, bị phù nề chân, có hiệu quả cao trong điều trị lâu dài các bệnh tim mạch, cải thiện chức năng nội mô mạch máu.
1.1.4 Một số chế phẩm của cilnidipin trên thị trường
Cilnidipin được hợp tác phát triển bởi Ajinomoto và Fuji Viscera Pharmaceuticals và được phê duyệt lần đầu tiên tại Nhật Bản vào năm 1995 Sau đó, thuốc được Trung Quốc, Ấn Độ, Hàn Quốc và một số nước khác cấp phép và trở thành một trong những thuốc điều trị tăng huyết áp phổ biến Hiện nay, tại Việt Nam, một số viên nén bao phim chứa cilnidipin được cấp phép lưu hành như Atelec 5 mg và 10 mg (Ajinomoto Pharmaceuticals Co., Ltd.); Amnol 5 mg và 10 mg (Công ty TNHH sinh dược phẩm Hera).
Một số phương pháp cải thiện độ hòa tan của dược chất ít tan
Hòa tan là quá trình dược chất giải phóng ra khỏi dạng thuốc ban đầu và được phân tán trong dung dịch ở dạng phân tử tự do Khi tồn tại ở dạng phân tử, dược chất được khuếch tán và hấp thu qua màng sinh học, từ đó có tác dụng dược lý và đem lại hiệu quả điều trị Độ hòa tan và tốc độ hòa tan là yếu tố ảnh hưởng lớn tới mức độ và tốc độ hấp thu thuốc trong cơ thể, là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sinh khả dụng của thuốc
Hệ phân tác rắn làm tăng độ hòa tan của dược chất ít tan thông qua cơ chế như làm giảm kích thước tiểu phân dược chất, dược chất được phân tán ở mức độ cực mịn, thậm
4 chí ở mức độ phân tử nếu hệ có cấu trúc của dung dịch rắn Ngoài ra, sự tương tác của dược chất và chất mang làm tăng tính thấm ướt với môi trường, ngăn chặn sự kết tụ của các tiểu phân dược chất, làm tăng diện tích bề mặt tiếp xúc với môi trường hòa tan Dược chất được chuyển từ dạng tinh thể sang dạng vô định hình trong HPTR Độ tan của dược chất ở dạng vô định hình tăng lên đáng kể do không cần năng lượng để phá vỡ mạng tinh thể trong quá trình hòa tan [7]
1.2.2 Giảm kích thước tiểu phân
Phương trình Noyes-Whitney mô tả mối quan hệ giữa kích thước tiểu phân và tốc độ hòa tan của chất rắn: dm/dt = D * A * (CS - C) / h, trong đó dm/dt là tốc độ hòa tan, D là hệ số khuếch tán, A là diện tích bề mặt của tiểu phân, CS là nồng độ bão hòa, C là nồng độ chất tan tại thời điểm t, và h là độ dày lớp khuếch tán.
ℎ Kích thước tiểu phân càng nhỏ, diện tích bề mặt tiếp xúc của tiểu phân với môi trường hòa tan càng lớn, thuốc hòa tan càng nhanh Các phương pháp làm giảm kích thước tiểu phân (KTTP) như nghiền phản lực, nghiền bi… các phương pháp này về bản chất là tác động lực cơ học lên hạt thô gây ra các biến dạng làm vỡ hạt, từ đó thu được các hạt có kích thước nhỏ hơn Tuy nhiên, phương pháp trên có nhiều nhược điểm như sự phân bố rộng về kích thước hạt sau nghiền, nhiệt sinh ra trong quá trình, tiêu hao năng lượng lớn, dạng vô định hình dễ bị kết tinh trong điều kiện nóng ẩm [24] Với dược chất bề mặt sơ nước, khi giảm kích thước tiểu phân tạo bột siêu mịn, các tiểu phân này có xu hướng vón cục và kết tập làm giảm diện tích bề mặt tiếp xúc của tiểu phân với môi trường hòa tan, làm tốc độ hòa tan giảm [1]
1.2.3 Tạo phức chất với các cyclodextrin
Một số chất thân nước có khả năng liên kết với dược chất tạo phức chất hoặc phức hợp làm tăng đáng kể độ tan của dược chất trong nước [1] Cyclodextrin có khả năng hình thành phức hợp, từ đó làm tăng độ hòa tan của dược chất trong nước, tăng SKD và độ ổn định của thuốc [30] Cyclodextrin có bản chất là những oligosacarit mạch vòng, có cấu trúc không gian hình nón cụt rỗng, mặt bên ngoài ưa nước và phần lõi bên trong kỵ nước Với cấu trúc và hình dạng như vậy, cyclodextrin có khả năng nhốt dược chất ít tan vào khoang trung tâm, che giấu hầu hết phần kỵ nước Phức hợp này dễ dàng phân ly trong nước, nồng độ dược chất tự do cân bằng với dược chất trong khoang lõi [30]
So với 2 dạng ⍺-cyclodextrin và γ-cyclodextrin, β-cyclodextrin cùng với các dẫn chất của chúng như hydroxypropyl β-cyclodextrin, hydroxyethyl β-cylcodextrin… được ứng dụng nhiều [1]
1.2.4 Sử dụng thêm chất diện hoạt
Với cấu trúc lưỡng thân gồm phần thân dầu và phần thân nước, nhóm chất diện hoạt có khả năng hấp phụ trên bề mặt phân cách pha, tạo thành lớp đơn, đa phân tử hoặc lớp ion làm thay đổi tính phân cực lớp bề mặt và giảm sức căng bề mặt giữa hai pha Khi nồng độ chất diện hoạt lớn hơn nồng độ micell tới hạn (CMC), các phân tử dược chất phân bố vào cấu trúc lõi của micell, không tham gia vào cân bằng của dung dịch ở trạng thái bão hòa [1] Khi đó, nồng độ dược chất trong micell lớn hơn nhiều so với nồng độ ở trong dung dịch, giúp cải thiện đáng kể độ tan của dược chất [2]
1.2.5 Sử dụng đồng dung môi
Phương pháp này sử dụng hỗn hợp có độ phân cực gần với độ phân cực của dược chất để làm tăng độ hòa tan của dược chất ít tan trong nước Hỗn hợp dung môi thường bao gồm nước và dung môi thân nước như glycerin, ethanol, isopropanol… theo tỷ lệ thích hợp Bên cạnh vai trò tăng độ tan, một số hỗn hợp dung môi còn có vai trò tăng độ ổn định và tăng sinh khả dụng của thuốc [1]
Phương pháp này áp dụng cho một số dược chất ở dạng acid hoặc base rất ít tan trong nước có thể tạo muối hoặc dạng muối liên hợp dễ tan Các anion thường sử dụng để tạo muối là clorid, sulfat, acetat, phosphat… và các cation Na + , K + , Ca 2+ , Al 3+ … [1] Dạng muối tạo thành sẽ thay đổi pH của lớp khuếch tán bao quanh dược chất, dẫn đến tăng độ tan so với dạng tự do tương ứng [26] Các dạng muối khác nhau làm thay đổi tính chất lý hóa, độ tan và mức độ hòa tan của dược chất, từ đó ảnh hưởng đến sinh khả dụng của thuốc
Trong một số trường hợp, có thể phải phối hợp hai hay nhiều biện pháp làm tăng độ hòa tan của dược chất kém tan Có thể dùng hỗn hợp dung môi và chất diện hoạt, điều chỉnh pH và tạo phức chất, tạo muối kết hợp với điều chỉnh pH và dùng hỗn hợp dung môi…
Hệ phân tán rắn
Hệ phân tán rắn (HPTR) là hệ rắn gồm ít nhất hai thành phần là dược chất kỵ nước và chất mang thân nước, cải thiện sinh khả dụng đường uống bằng cách tăng độ hòa tan của dược chất [22] Một hay nhiều dược chất được phân tán trong một hay nhiều chất mang hoặc cốt trơ không có hoạt tính sinh học, được bào chế bằng phương pháp thích hợp [7] Chất mang có thể ở dạng tinh thể hoặc vô định hình, dược chất được phân tán có thể tồn tại ở dạng hạt vô định hình, tinh thể mịn hoặc dạng phân tử [22] Một HPTR được coi là lý tưởng là khi dược chất - chất mang vô định hình được phân tán ở mức độ phân tử như một dung dịch rắn So với dạng vô định hình thuần túy, dung dịch rắn có độ ổn định vật lý cao hơn [33]
6 Khái niệm HPTR được bắt nguồn từ nghiên cứu của Sekiguchi và Obi năm 1961 về sự hình thành hỗn hợp eutecti của sulfathiazol với chất mang trơ ure từ hỗn hợp nóng chảy của chúng Từ đó, HPTR trở thành đối tượng của nhiều nghiên cứu và đã được chứng minh về khả năng cải thiện độ tan và SKD của nhiều dược chất ít tan [7],[25]
Dựa vào cấu trúc lý hóa, HPTR có thể phân loại thành các nhóm gồm hỗn hợp eutecti, dung dịch rắn, kết tủa vô định hình trong chất mang tinh thể, dung dịch và hỗn dịch kiểu thủy tinh
Hỗn hợp eutecti là hỗn hợp vật lý, gồm hai chất kết tinh có thể hòa tan hoàn toàn vào nhau ở trạng thái lỏng nhưng không thể trộn lẫn ở trạng thái rắn Hỗn hợp eutecti rắn được tạo thành bằng cách làm lạnh nhanh hỗn hợp nóng chảy của hai chất có tỷ lệ thích hợp để thu được hỗn hợp các tinh thể rất mịn [17] Khi tiếp xúc với môi trường nước hoặc dịch tiêu hóa, chất mang trong hỗn hợp eutecti sẽ được hòa tan nhanh chóng và giải phóng ra dược chất ở dạng hạt tinh thể rất mịn có diện tích bề mặt lớn, từ đó làm tăng độ hòa tan của dược chất Chất mang còn có tác dụng tăng tính thấm ướt môi trường hòa tan của dược chất, làm tăng tốc độ hòa tan, cải thiện SKD của thuốc [17]
Trong dung dịch rắn, dược chất và chất mang phân tán vào nhau ở mức phân tử tạo thành hệ một pha đồng thể Trong dung dịch rắn, tốc độ hòa tan dược chất bằng tốc độ hòa tan của chất mang So với hỗn hợp eutecti, tốc độ hòa tan của dược chất trong dung dịch rắn nhanh hơn do dược chất tồn tại ở dạng phân tử và sẵn sàng để hòa tan [13] Bên cạnh đó, dung dịch rắn có khả năng cải thiện độ ổn định dạng vô định hình bằng cách ức chế sự kết tinh của dược chất [8] Có thể phân loại dung dịch rắn theo mức độ trộn lẫn giữa hai thành phần (dung dịch rắn liên tục, dung dịch rắn không liên tục) hoặc theo cách các phân tử dược chất phân bố trong mạng lưới dung môi (dung dịch rắn thay thế, dung dịch rắn xen kẽ, dung dịch rắn vô định hình) [7],[8],[17]
Trong dung dịch rắn liên tục, hai thành phần được trộn lẫn vào nhau ở mọi tỷ lệ mà tại đó mức độ liên kết giữa hai thành phần (tương tác giữa các phân tử dược chất và tá dược) lớn hơn mức độ liên kết của từng thành phần riêng lẻ (tương tác phân tử dược chất với nhau và tương tác phân tử tá dược với nhau) Với dung dịch rắn không liên tục, khả năng trộn lẫn hoặc hòa tan của thành phần này với thành phần kia bị hạn chế Dưới một nhiệt độ nhất định, độ hòa tan lẫn nhau của hai thành phần giảm [8],[32] Trong dung dịch rắn thay thế, phân tử dược chất là một nút trong mạng lưới tinh thể của dung môi rắn, với điều kiện kích thước của các phân tử dược chất so với kích thước của các phân tử dung môi rắn khác nhau ít hơn 15 % [17] Trong dung dịch rắn xen kẽ, các phân tử dược chất lấp vào khoảng trống giữa các phân tử dung môi trong mạng tinh thể [32]
7 Để vừa vào khoảng trống, đường kính của phân tử chất tan phải nhỏ hơn 0,59 lần đường kính phân tử dung môi và thể tích của các phân tử chất tan phải nhỏ hơn 20 % thể tích dung môi [17] Với dung dịch rắn vô định hình, các phân tử chất tan phân tán ở dạng phân tử nhưng không đều trong dung môi vô định hình [8],[17],[19]
1.3.2.3 Kết tủa vô định hình trong chất mang tinh thể
Khác với hỗn hợp eutecti đơn giản, cả dược chất và chất mang được kết tinh đồng thời từ việc đun chảy hay bốc hơi dung môi, ở đây dược chất có thể được kết tủa dưới dạng vô định hình trong chất mang kết tinh Trạng thái năng lượng cao của dược chất trong hệ thường tạo ra tốc độ hòa tan lớn hơn nhiều so với dạng tinh thể tương ứng [8]
1.3.2.4 Dung dịch và hỗn dịch kiểu thủy tinh Đây là một hệ đồng nhất, trong đó với dung dịch thủy tinh, các phân tử dược chất hoà tan trong dung môi thủy tinh, còn với hỗn dịch thủy tinh các phân tử dược chất kết tủa, phân tán trong dung môi thủy tinh [32] Thuật ngữ “thủy tinh” được dùng để mô tả một chất tinh khiết hoặc một hỗn hợp các chất ở trạng thái thủy tinh, trạng thái mà ở đó các chất này tồn tại ở thể rắn, thu được bằng cách làm nguội đột ngột hỗn hợp đã đun chảy Trạng thái thủy tinh được đặc trưng bởi độ trong suốt và độ giòn ở dưới nhiệt độ chuyển thủy tinh (Tg) [37] Dung dịch thủy tinh có năng lượng mạng nhỏ hơn nhiều so với dung dịch rắn, do đó tốc độ hòa tan của các chất dạng dung dịch thủy tinh nhanh hơn [13] Tuy nhiên, trạng thái thủy tinh dễ thay đổi hơn so với trạng thái tinh thể, tùy thuộc vào tính chất lý hóa và điều kiện bảo quản, thủy tinh có thể chuyển thành chất rắn kết tinh [8]
1.3.3 Ưu nhược điểm của HPTR Ưu điểm: Khi dược chất được bào chế ở dạng HPTR sẽ giúp giảm kích thước tiểu phân dược chất, bên cạnh đó dược chất tương tác tốt hơn với chất mang thân nước làm tăng tính thấm ướt và giảm sự kết tụ [32] Do kích thước tiểu phân dược chất trong HPTR nhỏ, diện tích bề mặt tiếp xúc của dược chất với môi trường được tăng lên, làm tăng độ tan, tốc độ hòa tan, cải thiện SKD [5] So với biện pháp giảm KTTP khác, bào chế ở dạng HPTR có hiệu quả hơn về khía cạnh: tăng độ xốp của hệ, thay đổi trạng thái tồn tại (dạng thù hình) làm dược chất dễ hòa tan hơn [14] Cụ thể, HPTR chứa polyme mạch thẳng sẽ tạo ra số lượng lớn các hạt xốp hơn so với các polyme mạng lưới [5],[22], các cấu trúc xốp này giúp cho nước dễ thấm vào bên trong cấu trúc và làm tăng tốc độ hòa tan Đối với HPTR vô định hình, dược chất ở trạng thái vô định hình có xu hướng hòa tan tốt hơn, giải phóng nhanh hơn do không cần năng lượng để phá vỡ mạng tinh thể trong quá tình hòa tan [5] HPTR còn có khả năng che vị, ứng dụng để sản xuất thuốc rắn thay cho các dạng bào chế lỏng
Nhược điểm: HPTR ít được ứng dụng rộng rãi trong công nghiệp do hệ kém ổn định về mặt hóa lý Sự hút ẩm trong khi bảo quản thúc đẩy quá trình kết tinh, làm giảm
8 độ ổn định của chế phẩm vô định hình [22] Hơn nữa, đa số các polyme được sử dụng làm chất mang trong HPTR đều có tính hút ẩm dẫn đến làm giảm nhiệt độ chuyển thủy tinh Tg, thúc đẩy các hiện tượng tách pha, kết tinh lại, hoặc phá vỡ tương tác giữa dược chất và chất mang trong quá trình bảo quản, giảm độ ổn định [14],[31],[32] Ngoài ra, các đặc tính lý hóa và độ ổn định của HPTR có thể bị ảnh hưởng khi nâng cấp quy mô sản xuất do thay đổi về tốc độ gia nhiệt và làm lạnh HPTR so với trong nghiên cứu [27]
1.3.4 Chất mang sử dụng trong HPTR
Các chất mang trong HPTR là chất không có hoạt tính, có vai trò như một phương tiện vận chuyển hoạt chất hoặc cải thiện độ hòa tan cho dược chất kém tan Chất mang cần đảm bảo một số đặc điểm sau: hòa tan tốt trong dịch tiêu hóa, trơ về mặt dược lý, không độc, phù hợp với phương pháp bào chế, cải thiện khả năng hòa tan của dược chất trong nước, tương thích về mặt hóa học với dược chất [2],[14]
Polyethylen glycol (PEG): các PEG có trọng lượng phân tử từ 4000-6000 thường sử dụng với vai trò chất mang trong bào chế HPTR PEG có nhiệt độ nóng chảy thấp (dưới 65˚C) và có khả năng hòa tan tốt trong nhiều dung môi hữu cơ là hai đặc điểm rất thích hợp trong bào chế HTPR bằng phương pháp đun chảy và dùng dung môi [17] PEG có độ nhớt cao, có thể hạn chế sự kết tinh lại dược chất, nhưng cũng có thể cản trở khả năng phân tán của dược chất trong chất mang, làm chậm quá trình hòa tan dược chất trong cơ thể [34] Mặc dù có đặc tính hút ẩm mạnh, nhưng PEG có thể cải thiện khả năng thấm ướt của dược chất
Polyvinylpyrrolidon (PVP): nhiều loại PVP được sử dụng trong dược phẩm, và được phân loại theo khối lượng phân tử trung bình PVP có nhiệt độ chuyển thủy tinh (Tg) cao nên ít được sử dụng cho phương pháp nóng chảy Tá dược này phù hợp với bào chế HPTR bằng phương pháp dung môi nhờ khả năng hòa tan tốt trong nhiều loại dung môi hữu cơ PVP có khả năng cải thiện tính thấm ướt của dược chất ít tan, rất dễ hút ẩm trong quá trình bảo quản HPTR Loại PVP ảnh hưởng đáng kể đến tốc độ hòa tan của dược chất trong HPTR, phân tử lượng của PVP tăng thì tốc độ hòa tan giảm [17]
Một số nghiên cứu cải thiện độ hòa tan của cilnidipin
Các nghiên cứu cải thiện sinh khả dụng của thuốc đều tập trung chủ yếu vào việc tăng độ hòa tan của dược chất do CIL có độ tan thấp nhưng tính thấm cao Năm 2023, nghiên cứu giảm kích thước tiểu phân dược chất CIL bằng phương pháp nghiền bi đã được tiến hành để tăng độ hòa tan của CIL Tiểu phân dược chất CIL có thể nghiền nhỏ đến kích thước 0,35 μm, kết quả cho thấy, trong môi trường 0,1% Tween 80, tốc độ hòa tan và mức độ hòa tan của CIL từ hỗn dịch tăng 4-5 lần so với nguyên liệu Sau 5 phút, tỷ lệ hòa tan của CIL từ mẫu bào chế có thể đạt tới 95 %, trong khi độ hòa tan của mẫu nguyên liệu chỉ đạt 6 % trong cùng khoảng thời gian [3]
Nghiên cứu do Farhatja Shaikh thực hiện tập trung vào việc giảm kích thước hạt của các tiểu phân nhằm nâng cao độ hòa tan của chúng Sử dụng phương pháp kết tủa - siêu âm, nhóm nghiên cứu đã tạo ra hỗn dịch nano có kích thước hạt trung bình là 280,1 ± 3,7 nm, độ đồng nhất phân bố kích thước hạt là 0,176 và thế Zeta là -13,9 ± 0,9 mV Thử nghiệm độ hòa tan in vitro với công thức tối ưu đã chứng minh hiệu quả cải thiện độ hòa tan của hỗn dịch nano.
12 sau 40 phút CIL được hòa tan hoàn toàn (100,23 ± 1,63 %) Công thức tối ưu cũng đã được thử nghiệm in vivo, kết quả cho thấy các thông số dược động học được cải thiện đáng kể, bao gồm Cmax (23,67 ± 1,50 ng/mL), tmax (0,25 giờ) và AUC0-t (94,26 ± 2,19 ng.h/mL) so với giá trị tương ứng của CIL nguyên liệu và chế phẩm trên thị trường [28] Năm 2012, với mục đích cải thiện khả năng hòa tan trong nước và tính nhạy cảm quang hóa của CIL, Liandong Hu và các cộng sự đã công bố kết quả bào chế phức hợp của CIL với hydroxypropyl-β-cyclodextrin bằng phương pháp đông khô Độ tan của CIL trong phức hợp thu được là 1,84 × 10 -3 mol/L, cao hơn 10.000 lần độ tan của CIL nguyên liệu (1,30 × 10 -7 mol/L) Hơn nữa, CIL ở dạng phức hợp ổn định hơn dưới tác động của ánh sáng [9]
Khi bào chế dưới dạng vi nhũ tương, chế phẩm chứa CIL cũng có thể được cải thiện đặc tính hòa tan Công thức bào chế được xác định bằng phương pháp xây dựng giản đồ pha với tocotrienol, sử dụng chất hoạt động bề mặt và chất đồng hoạt động bề mặt lần lượt là Tween 20 và Transcutol HP Kết quả thu được sau khi bào chế là vi nhũ tương với các hạt tiểu phân hình cầu có kích thước 13,31 ± 4,3 nm, thế zeta là -11,4 ± 2,3 mV Vi nhũ tương CIL được đánh giá là có những đặc tính của một vi nhũ tương lý tưởng và ổn định trong 3 tháng ở nhiệt độ môi trường [29]
Hệ phân tán rắn chứa CIL đã được nghiên cứu và công bố năm 2018, trong đó Pluronic F-68 đã được sử dụng là chất mang Từ HPTR tạo ra, nhóm tác giả đã bào chế viên hòa tan nhanh chứa CIL Công thức viên có tỷ lệ CIL:Pluronic F-68 (1:3) giải phóng
85 % CIL, còn CIL nguyên liệu cho kết quả giải phóng 8 % sau 15 phút [18]
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Nguyên vật liệu, thiết bị
2.1.1 Nguyên vật liệu, hóa chất
Bảng 2.1 Hóa chất dùng trong nghiên cứu
STT Tên nguyên liệu Xuất xứ Tiêu chuẩn
3 Acid hydrocloric Trung Quốc Phân tích
6 Hydroxypropylcellulose EF (HPC EF) Mỹ USP/NF
7 Natri dihydrophosphat dyhydrat Trung Quốc Phân tích
8 Polysorbat 80 (Tween 80) Singapore USP/NF
Bảng 2.2 Bảng thiết bị dùng trong nghiên cứu
STT Tên thiết bị Model Xuất xứ
1 Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao
2 Thiết bị thử khuếch tán Side-by-side diffusion
3 Kính hiển vi kết nối camera Eclipse Ci - L Nikon – Nhật Bản
4 Máy đo pH FiveEasy TM FE20 Mettler Toledo –
5 Máy khuấy từ Wisetir MSH – 20A Daihan Scientific –
6 Thiết bị thử độ hòa tan 6 cốc RC – 6 Trung Quốc
7 Bể siêu âm WUC - A10H Hàn Quốc
8 Tủ sấy UM500 Memmert – Đức
9 Máy FTIR FTIR Affinity - 1S Shimadzu – Nhật
10 Máy phân tích nhiệt vi sai DSC 1 StarSystem Mettler Toledo –
14 Các dụng cụ khác: tấm kính, dao cạo inox, chày cối sứ, cân phân tích, bể điều nhiệt, bể siêu âm, cốc có mỏ, micropipet, bình định mức, ống đong, màng lọc cellulose acetat kích thước lỗ lọc 0,45 μm, màng PTFE 0,2 μm.
Nội dung nghiên cứu
- Sàng lọc, lựa chọn dung môi và chất mang bào chế HPTR
- Bào chế HPTR bằng phương pháp tráng phim - bay hơi dung môi
- Đánh giá ảnh hưởng của loại chất mang, của tỷ lệ dược chất đến một số đặc tính của HPTR.
Phương pháp nghiên cứu
2.3.1.1 Phương pháp lựa chọn thành phần công thức
Thành phần chính của HPTR bao gồm: dược chất cilnidipin (CIL), chất mang polyme và dung môi hữu cơ Tiến hành lựa chọn polyme và dung môi bằng cách khảo sát sơ bộ độ tan của dược chất CIL và khả năng được solvat hóa, trương nở, hòa tan của một số polyme thân nước trong các loại dung môi hữu cơ a Khảo sát lựa chọn dung môi hữu cơ
- Khảo sát sơ bộ khả năng hòa tan của CIL trong dung môi hữu cơ: Trong lọ thủy tinh 10 mL có nút cao su kín, cố định lượng dung môi sử dụng (5 mL) Đặt lọ dung môi bên trong có thanh khuấy từ được bao bởi teflon kháng dung môi lên trên máy khuấy từ Cân từng lượng nhỏ dược chất và thêm lần lượt vào lọ thủy tinh, đậy kín bằng nút cao su, khuấy trộn bằng máy khuấy từ để hòa tan dược chất (nếu cần) Việc thêm dược chất được tiếp tục cho đến khi trong dung dịch có tiểu phân rắn không thể tan thêm Lượng dược chất đã thêm vào ở các lần trước đó được ghi lại để tính toán Các dung môi được lựa chọn để khảo sát gồm có: ethanol 96 %, methanol, ethyl acetat, n-hexan, cloroform, aceton, diclomethan b Khảo sát khả năng hòa tan của polyme
- Khảo sát khả năng được solvat hóa, trương nở và hòa tan của polyme trong dung môi hữu cơ: Đong khoảng 20 g dung môi vào cốc thủy tinh 50 mL, đặt lên máy khuấy từ và duy trì khuấy liên tục trong khi cho từ từ polyme vào với tỷ lệ 1:10 (kl/kl) so với lượng dung môi Duy trì khuấy trộn trong 60 phút Màng polyme được dùng để bọc kín miệng cốc trong quá trình khuấy nhằm hạn chế sự bay hơi của dung môi Quan sát hình thức của chất lỏng thu được để đánh giá khả năng solvat hóa, trương nở và hòa tan của polyme Các polyme thân nước, có khả năng tan trong môi trường dịch vị được lựa chọn để khảo sát gồm có: HPC EF, Eudragit E100 (EE100), HPMCAS, HPMCP, PVP K30, HPMC E6, PVA 205
2.3.1.2 Phương pháp bào chế HPTR
15 HPTR chứa CIL bào chế bằng phương pháp tráng phim - bay hơi dung môi tiến hành gồm các bước sau:
- Cân lượng dược chất, polyme và dung môi theo các công thức khảo sát
- Chuyển dung môi vào trong cốc thủy tinh được bọc kín miệng cốc bằng màng
PE, đặt cốc lên máy khuấy từ trong điều kiện hạn chế ánh sáng
- Hòa tan hoàn toàn dược chất trong dung môi hữu cơ sử dụng máy khuấy từ
- Thêm từ từ lượng polyme có trong công thức vào dung dịch dược chất trên kết hợp với khuấy trộn để tránh sự vón cục của polyme
- Duy trì khuấy để polyme trương nở/hòa tan trong khoảng 2 giờ đến khi thu được dung dịch trong suốt
- Dung dịch chứa dược chất và polyme được dàn thành lớp mỏng, đều trên các phiến kính có kích thước 30×30 cm
- Bay hơi dung môi bằng cách thổi khí nóng (khoảng 40 - 45˚C) lên bề mặt các dung dịch đã được dàn mỏng ở trên cho đến khi tạo thành lớp màng mỏng khô, rắn
- Dùng dao cạo bằng inox thu gom mẫu vào đĩa petri, tiếp tục sấy ở 55˚C trong tủ sấy tĩnh (khoảng 3 giờ) đến khối lượng không đổi thu được HPTR
- Làm nguội HPTR, sau đó nghiền bằng chày cối sứ thu được bột mịn hoặc hạt
- HPTR đã nghiền mịn được bảo quản bằng 2 lần túi PE hàn kín, đặt trong bình hút ẩm có chứa silicagel ở nhiệt độ phòng và tránh ánh sáng
2.3.2 Các phương pháp đánh giá
2.3.2.1 Phương pháp định lượng cilnidipin bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao a Điều kiện sắc ký
Qua tham khảo tài liệu [3],[11], và thực nghiệm thăm dò, điều kiện định lượng cilnidipin bằng phương pháp HPLC cụ thể như sau: Thiết bị: hệ thống HPLC Agilent
1200 Series, Agilent Technologies (Đức); cột GL Sciences C18 4,6 × 150 mm, kích thước hạt nhồi 5 μm; detector UV: phát hiện ở bước sóng 355 nm; pha động: hỗn hợp đệm phosphat pH 6,0 : acetonitril (30 : 70, v/v); tốc độ dòng: 1,5 mL/phút, chế độ rửa giải đẳng dòng; thể tích tiêm mẫu: 20 μL, tiêm mẫu tự động b Tiến hành
- Chuẩn bị pha động: Pha dung dịch đệm phosphat pH 6,0: Hoà tan 6,8 g natri dihydrophosphat trong nước siêu sạch vừa đủ 1000 mL, điều chỉnh pH bằng acid phosphoric hoặc natri hydroxyd Lọc dung dịch đệm phosphat pH 6,0 qua màng lọc kích thước 0,45 μm; siêu âm đuổi bọt khí dung dịch đệm phosphat pH 6,0 và acetonitril trong
Dung dịch chuẩn gốc được pha chế bằng cách cân chính xác khoảng 10 mg CIL chuẩn, cho vào bình định mức 25 mL và thêm 15 mL acetonitril Sau đó dùng phương pháp siêu âm cho đến khi CIL tan hoàn toàn Bước tiếp theo, sử dụng acetonitril để bổ sung vào bình định mức đến vạch chuẩn và lắc đều để dung dịch chuẩn gốc đồng nhất.
- Dãy dung dịch chuẩn: pha loãng dung dịch chuẩn gốc bằng acetonitril để thu được dãy dung dịch chuẩn có nồng độ từ 0,625 - 20,0 μg/mL
- Dung dịch thử: mẫu thử hòa tan của HPTR chứa CIL trong môi trường HCl pH 1,2 có hoặc không chứa 0,1 % Tween 80
- Dung dịch placebo: có các thành phần và tỷ lệ tương tự mẫu thử nhưng không chứa CIL Tiến hành chuẩn bị dung dịch chuẩn và dung dịch thử trong điều kiện tránh ánh sáng
Phương pháp được thẩm định trên một số tiêu chí: độ đặc hiệu, độ thích hợp, khoảng tuyến tính (Phụ lục 1)
2.3.2.2 Định lượng toàn phần HPTR
Chuẩn bị mẫu thử: Cân chính xác m (g) bột phân tán rắn tương ứng với khoảng 0,01 g CIL cho vào bình định mức 5 mL, thêm khoảng 3 mL dung dịch acetonitril hoặc hỗn hợp acetonitril : nước = 80 : 20 (v/v), tùy thuộc vào loại polyme trong HPTR Đem siêu âm để hòa tan hoàn toàn bột rắn, bổ sung dung môi hòa tan vừa đủ đến vạch, lắc đều Tiến hành pha loãng 200 lần dung dịch trên bằng dung môi vừa hòa tan để thu được dung dịch thử có nồng độ của CIL khoảng 10 μg/mL Định lượng nồng độ CIL trong dung dịch thử bằng phương pháp HPLC đã mô tả ở mục 2.3.2.1 Hàm lượng CIL trong mẫu bột phân tán rắn được tính theo công thức:
𝑚 10 6 100 Trong đó: C là nồng độ CIL trong dung dịch thử (μg/mL); f là hệ số pha loãng (f
=200); m là khối lượng bột phân tán rắn (g)
2.3.2.3 Phương pháp thử độ hòa tan của cilnidipin trong HPTR
Dựa trên nghiên cứu đã thực hiện trước đây và tham khảo các tài liệu [3],[11], tiến hành đánh giá độ hòa tan của CIL bằng phương pháp thử độ hòa tan với điều kiện sau:
- Thiết bị: kiểu cánh khuấy
- Tốc độ khuấy: 75 vòng/phút
- Môi trường hòa tan: 900 mL dung dịch acid hydrocloric (HCl) pH 1,2; có thể chứa 0,1 % Tween 80
- Tại các thời điểm nhất định (5 phút, 10 phút, 20 phút, 30 phút, 45 phút, 60 phút,
90 phút), hút chính xác 5,0 mL dịch hòa tan, lọc qua màng lọc cellulose acetat kích thước lỗ lọc 0,45 μm, bỏ một phần dịch lọc đầu Đồng thời bổ sung chính xác 5,0 mL môi trường hòa tan mới vào cốc thử hòa tan Định lượng nồng độ CIL trong các mẫu ở từng thời điểm bằng HPLC đã nêu ở mục 2.3.2.1 Tỷ lệ CIL đã hòa tan tại thời điểm thứ i (% CIL hòa tan) theo công thức:
C i là nồng độ CIL trong môi trường thử hòa tan tại thời điểm i (μg/mL);
V mt là thể tích môi trường thử hòa tan (V mt = 900 mL);
V là thể tích môi trường đã hút ra tại mỗi thời điểm (V = 5 mL); m là tổng khối lượng CIL trong mẫu thử hòa tan (μg)
2.3.2.4 Phương pháp thử hòa tan - khuếch tán trên thiết bị khuếch tán ngang
Nguyên lý cấu tạo: bao gồm 2 khoang (khoang cho và khoang nhận) được ngăn cách nhau bởi màng khuếch tán Một số thiết bị thử khuếch tán thường dùng trong nghiên cứu: bình khuếch tán Kath, Wurster, Franz, thiết bị side-bi-side diffusion,…[2]
Hình 2.1 Thiết bị side-bi-side diffusion (khuếch tán kiểu nằm ngang)
Mô hình thử khuếch tán ngang bằng thiết bị side-bi-side diffusion mô phỏng quá trình hấp thu thuốc qua đường tiêu hóa, bao gồm hòa tan thuốc trong dịch tiêu hóa và khuếch tán qua niêm mạc ruột Quá trình này mô phỏng chính xác hoạt động của thuốc khi đi vào đường tiêu hóa, giúp đánh giá khả năng hòa tan và khuếch tán của dược chất, cung cấp thông tin quan trọng trong việc thiết kế và tối ưu hóa hệ thống phân phối thuốc qua đường tiêu hóa.
Khả năng hòa tan - khuếch tán dược chất qua màng được đánh giá trong hai điều kiện môi trường như sau: a Môi trường khoang cho có Tween 80
- Môi trường khoang cho là dung dịch HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80
- Môi trường khoang nhận là dung dịch HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 b Môi trường khoang cho không có Tween 80
- Môi trường khoang cho là dung dịch HCl pH 1,2
- Môi trường khoang nhận là dung dịch HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 Điều kiện thử cho 2 trường hợp:
- Màng thử giải phóng: hydrophillic PTFE 0,2 μm, bề dày 65 μm, độ xốp 80 %, diện tích khuếch tán 0,6369 cm 2 (Omnipore, Ireland) Màng được ngâm trong nước cất khoảng 30 phút trước khi thử
- Tốc độ khuấy từ ở khoang cho và khoang nhận là 200 vòng/phút
Tiến hành thử hòa tan - khuếch tán:
- Thêm đồng thời 2 mL môi trường vào từng khoang tương ứng, cho một lượng bột phân tán rắn tương đương với 5 mg CIL vào khoang cho Bổ sung môi trường tương ứng vào cả khoang cho và khoang nhận sao cho thể tích mỗi khoang vừa đủ 4 mL
- Tại các thời điểm 5; 15; 30; 60; 90; 150 phút, dùng syringe 1 mL để hút 0,5 mL dịch trong khoang nhận và bổ sung ngay 0,5 mL môi trường mới vào khoang nhận Định lượng nồng độ CIL trong môi trường khoang nhân tại từng thời điểm bằng phương pháp HPLC mô tả ở mục 2.3.2.1
Xác định lượng CIL khuếch tán qua màng tại thời điểm khác nhau theo công thức:
Trong đó: X i là lượng CIL khuếch tán qua màng ở thời điểm i (μg);
C i là nồng độ CIL trong khoang nhận tại thời điểm thứ i (μg/mL);
V1 là thể tích môi trường khoang nhận (V1 = 4 mL);
V2 là thể tích môi trường lấy tại các thời điểm i (V2 = 0,5 mL)
2.3.2.5 Phương pháp khảo sát đặc tính màng mỏng HPTR bằng kính hiển vi
Mục đích của thí nghiệm này là nhằm khảo sát định tính sự kết tinh của dược chất trong HPTR
THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Khảo sát và lựa chọn thành phần công thức bào chế
3.1.1 Sàng lọc dung môi hòa tan cilnidipin
Tiến hành xác định sơ bộ độ tan của CIL nguyên liệu trong một số dung môi hữu cơ theo phương pháp đã mô tả ở mục 2.3.1.1a, kết quả được trình bày ở Bảng 3.1
Bảng 3.1 Sơ bộ xác định độ tan của CIL trong một số dung môi hữu cơ
Dung môi hữu cơ Độ tan của CIL (kl/kl)
Kết quả nghiên cứu chỉ ra rằng, CIL nguyên liệu (CIL NL) có khả năng tan tốt nhất trong bốn dung môi là diclomethan, aceton, chloroform và ethyl acetat Do đó, việc lựa chọn bốn dung môi này sẽ tiếp tục đánh giá sâu hơn về khả năng solvat hóa, hòa tan và trương nở của các polyme trong dung môi.
3.1.2 Sàng lọc polyme Đánh giá khả năng được solvat hóa, hòa tan, trương nở của một số polyme trong các dung môi hữu cơ đã lựa chọn theo phương pháp đã mô tả ở mục 2.3.1.1b, kết quả được trình bày ở Bảng 3.2
Bảng 3.2 Khả năng được solvat hóa, trương nở, hòa tan của các polyme trong dung môi
Polyme Diclomethan Ethyl acetat Chloroform Aceton
(-) Không được solvat hóa, (+) Solvat hóa, trương nở, hòa tan chậm, (++) Solvat hóa, trương nở, hòa tan nhanh
Từ kết quả khảo sát trên, 3 loại polyme được lựa chọn để bào chế HPTR bao gồm HPC-EF, PVP K30, EE100 Chúng tôi nhận thấy rằng, đối với các polyme hòa tan chậm trong dung môi khi làm ướt bằng ethanol có thể làm cho quá trình hòa tan nhanh hơn đáng kể Vì vậy, ethanol được dùng để giúp hòa tan hoàn toàn polyme và được thêm vào tạo hỗn hợp trước khi hòa tan polyme (nếu cần dùng)
Aceton là dung môi được lựa chọn để hòa tan dược chất và polyme do tính ít độc và khả năng hòa tan như nhau đối với cả 3 loại polyme đã lựa chọn Tiến hành bào chế HPTR cilnidipin bằng phương pháp bay hơi dung môi theo phương pháp được trình bày ở mục 2.3.1.2, với chất mang là EE100, HPC EF, PVP K30; dung môi là aceton có thể phối hợp với ethanol, nồng độ polyme so với dung môi khoảng 20 % Các thí nghiệm và ký hiệu được trình bày ở Bảng 3.3, Bảng 3.4 mô tả thông số quá trình chế tạo HPTR và đặc điểm sản phẩm
Bảng 3.3 Bảng thiết kế thí nghiệm và ký hiệu
Loại polyme Tỷ lệ CIL
Kết quả thu được 12 mẫu HPTR chứa CIL, trong đó các HPTR có chất mang là EE100 và PVP K30 có thể nghiền thành bột mịn, HPTR chứa chất mang HPC EF không thể nghiền thành bột mịn, chỉ có thể nghiền nhỏ thành dạng mảnh nhỏ, mẫu bột được thể hiện qua Hình 3.1
Hình 3.1 Hình ảnh mẫu bột HPTR lần lượt tương ứng với 3 loại chất mang EE100, HPC
EF, PVP K30 chụp bằng máy ảnh (a, b, c) và qua kính hiển vi ở vật kính 4x (d, e, f)
Bảng 3.4 Ảnh hưởng của loại polyme đến quá trình bào chế HPTR Đặc tính kỹ thuật Loại polyme
Dung môi Aceton Aceton Aceton + Ethanol 96
% (tỷ lệ 9:1) Đặc điểm sản phẩm sau bốc hơi dung môi
Màng giòn, dễ nghiền thành bột
Lớp màng dẻo, không nghiền tạo bột được
Màng giòn, dễ nghiền thành bột
HPTR Bột mịn Hạt Bột mịn
Tiêu bản của CIL nguyên liệu, các mẫu HPTR được soi dưới kính hiển vi (KHV) theo phương pháp mô tả ở mục 2.3.2.5, kết quả được trình bày ở Hình 3.2 và Hình 3.3
Hình 3.2 Hình ảnh CIL nguyên liệu khi quan sát trên KHV vật kính 40x
Hình 3.3 Một số hình ảnh đại diện quan sát dưới KHV vật kính 40x của các HPTR với chất mang polyme và tỷ lệ dược chất khác nhau
Tiến hành định lượng CIL trong các mẫu HPTR theo phương pháp đã mô tả ở mục 2.3.2.2, kết quả được trình bày ở Bảng 3.5
Bảng 3.5 Kết quả định lượng CIL trong các mẫu HPTR (%)
Hàm lượng theo thiết kế
% Lý thuyết % Thực tế % Lý thuyết % Thực tế % Lý thuyết % Thực tế
24 Nhận xét: Kết quả định lượng CIL trong HPTR cho thấy kết quả thu được không khác biệt nhiều so với giá trị lý thuyết Các mẫu có tỷ lệ CIL ở mức 10 % có kết quả định lượng thấp hơn từ 0,05 % đến 0,13 % so với giá trị lý thuyết Trong khi đó, hầu hết các mẫu có mức hàm lượng cao hơn đều cho kết quả định lượng cao hơn so với lý thuyết Điều này có thể xuất phát từ tỷ lệ hư hao lớn khi thao tác với số lượng nhỏ Trên sắc ký đồ của mẫu phân tích đều không phát hiện thêm píc mới hoặc píc lạ Kết quả định lượng dược chất trong các HPTR (hàm lượng ít thay đổi, không có píc phân hủy) cho thấy dược chất ổn định trong quá trình bào chế.
Đánh giá tương tác dược chất - polyme trong HPTR bằng phổ FTIR
Tiến hành ghi phổ FTIR các mẫu cilnidipin nguyên liệu (CIL NL), các polyme EE100, HPC EF, PVP K30, hỗn hợp vật lý của công thức bào chế HPTR với tỷ lệ dược chất 20 % (CIL-Eudragit, CIL-HPC, CIL-PVP) và mẫu HPTR có tỷ lệ CIL 20 % (E2, H2, P2) Phổ IR truyền qua các mẫu được trình bày trong các Hình 3.4, Hình 3.5, Hình 3.6 a Mẫu HPTR sử dụng chất mang Eudragit E100
Hình 3 4 Phổ IR của (a) CIL nguyên liệu (CIL NL), (b) HPTR E2,
(c) hỗn hợp vật lý (CIL-Eudragit), (d) Eudragit E100
Trên phổ FTIR của nguyên liệu CIL có các đỉnh sắc nhọn, đặc trưng cho các nhóm chức trong phân tử Ở số sóng 3284 cm -1 có một đỉnh đặc trưng của nhóm chức amin bậc 2 Vùng có số sóng 3000 - 2850 cm -1 là sự cộng gộp của nhiều nhóm C-H của nhân thơm, alken và alkan Đỉnh có số sóng 1695 cm -1 là đặc trưng của nhóm chức C=O Hai đỉnh có số số sóng ở 1648 cm -1 và 1622 cm -1 tương ứng với dao động của các nối đôi C=C mạch hở và mạch vòng Đỉnh ở số sóng 1523 cm -1 tương ứng với dao động của liên kết N-O bất đối xứng và đỉnh ở 1490 cm -1 tương ứng với dao động của các liên kết C-C trong nhân thơm
Trên phổ IR của hỗn hợp vật lý CIL và EE100, các tín hiệu đặc trưng của CIL vẫn xuất hiện rõ nét Tuy nhiên, trong phổ IR của HPTR E2, các tín hiệu đặc trưng của CIL yếu đi đáng kể, ngoại trừ các dao động C-H Tín hiệu nhóm amin bậc 2 tại 3284 cm-1 trên phổ IR của CIL biến mất trong phổ IR của HPTR, chứng tỏ liên kết hydro đã hình thành giữa nhóm amin này với EE100 Tương tự, tần số dao động của nhóm C=O và C=C của CIL dịch chuyển và che khuất trong phổ IR của HPTR, cho thấy các nhóm chức này có thể tham gia liên kết hydro với EE100.
Hình 3.5 Phổ IR của (a) CIL nguyên liệu (CIL NL), (b) HPTR H2, (c) hỗn hợp vật lý
(CIL-HPC), (d) HPC EF (HPC)
Trên phổ IR của HPC EF có píc doãng rộng từ 3600 cm -1 đến 3200 cm -1 đặc trưng cho nhóm OH Vùng 3040 - 2800 cm -1 là sự cộng gộp tín hiệu của nhiều loại liên kết C-
H khác nhau Vùng tín hiệu tương đối mạnh trải rộng từ khoảng 950 cm -1 đến 1300 cm -
1 là tín hiệu cộng hợp của nhiều liên kết C-O Tương tự như trên, các đỉnh đặc trưng của CIL vẫn xuất hiện rõ nét ở hỗn hợp vật lý của CIL và HPC EF Mặc dù vậy, ở mẫu HPTR H2 không còn nhìn rõ tín hiệu đặc trưng của CIL, ngoại trừ nhóm các dao động đặc trưng cho liên kết C-H và C-O Trên phổ IR của HPTR cũng không còn xuất hiện tín hiệu đặc trưng của nhóm amin bậc 2 tại 3284 cm -1 , chứng tỏ H của nhóm amin đã được đưa ra để tạo liên kết hydro Tín hiệu của nhóm C=O gần như mất đi hoàn toàn, chứng tỏ các nhóm chức này có tương tác với phân tử polyme, nhiều khả năng là liên kết hydro với nhóm -OH trong phân tử HPC
26 c Mẫu HPTR sử dụng chất mang PVP K30
Hình 3.6 Phổ IR của (a) CIL nguyên liệu (CIL NL), (b) HPTR P2, (c) hỗn hợp vật lý (CIL-
Trên phổ IR của PVP K30 có píc doãng rộng từ 3600 cm -1 đến 3200 cm -1 có thể do nước dưới dạng hơi ẩm trong nguyên liệu Vùng 3040 - 2800 cm -1 là sự cộng gộp tín hiệu của nhiều loại liên kết C-H khác nhau Tín hiệu có đỉnh ở 1645 cm -1 là đặc trưng của các liên kết C=O ceton Cũng như hai trường hợp trên, các đỉnh đặc trưng của CIL vẫn xuất hiện rõ nét ở hỗn hợp vật lý của CIL và PVP K30 Tuy nhiên, ở mẫu HPTR P2, các tín hiệu đặc trưng của CIL yếu đi đáng kể, một số tín hiệu đặc trưng bị mất đi Phổ
Phổ hồng ngoại (IR) của hỗn hợp HPTR P2 không phát hiện tín hiệu nhóm amin bậc hai của CIL tại bước sóng 3284 cm⁻¹, cho thấy proton (H+) từ nhóm amin đã liên kết hydro Đồng thời, tín hiệu nhóm C=O của CIL cũng dịch chuyển và che khuất, chứng minh CIL tương tác với phân tử PVP K30.
Kết quả phân tích phổ FTIR của các mẫu HPTR cho thấy có bằng chứng của việc tạo ra các liên kết hydro giữa dược chất và các tá dược polyme Các liên kết hydro này không làm thay đổi bản chất hóa học của dược chất nhưng có khả năng làm tăng phân tán dược chất vào chất mang và độ ổn định về mặt vật lý của HPTR Tương tác dược chất và tá dược cũng giúp tăng độ hòa tan của dược chất từ HPTR.
Đánh giá trạng thái kết tinh của dược chất bằng quét nhiệt vi sai DSC
3.3.1 HPTR sử dụng chất mang Eudragit E100
Phép đo DSC được thực hiện với các mẫu CIL nguyên liệu (CIL NL), mẫu bào chế HPTR E1, E2, E3, E4 và hỗn hợp vật lý của CIL và EE100 (tỷ lệ CIL 10 %) (HHVL) Kết quả quét phổ DSC được trình bày ở Hình 3.7
Hình 3.7 Phổ quét nhiệt vi sai của mẫu cilnidipin nguyên liệu (CIL NL), hỗn hợp vật lý của CIL và EE100 (HHVL), HPTR E1, E2, E3, E4
Nhận xét: Trên giản đồ nhiệt của mẫu cilnidipin nguyên liệu (CIL NL) xuất hiện một píc thu nhiệt duy nhất (đỉnh píc khoảng 110˚C) chứng tỏ CIL tồn tại ở dạng tinh thể Trên giản đồ của mẫu hỗn hợp vật lý của CIL và EE100 (tỉ lệ CIL 10%) xuất hiện một píc thu nhiệt gần với píc thu nhiệt của mẫu CIL nguyên liệu (đỉnh píc khoảng 108˚C), tương ứng với sự nóng chảy của tinh thể CIL nhưng sự có mặt của EE100 đã làm cho píc nóng chảy doãng ra, không còn sắc nhọn như nguyên liệu CIL, và có xu hướng dịch chuyển về nhiệt độ thấp hơn Đối với các mẫu HPTR công thức E1, E2, E3, trên phổ quét nhiệt vi sai không xuất hiện píc thu nhiệt, gợi ý rằng, CIL có thể đã chuyển từ trạng thái tinh thể sang tồn tại trạng thái vô định hình hoặc CIL đã hòa tan trong cốt EE100 Kết quả này cũng phù hợp với hình ảnh của film HPTR được soi trên kính hiển vi không phát hiện được, hoặc rất ít tinh thể CIL có thể tìm thấy Còn với công thức bào chế E4, trên giản đồ nhiệt xuất hiện 1 píc thu nhiệt (đỉnh píc khoảng 105˚C) chứng tỏ CIL vẫn tồn tại ở trạng thái tinh thể trong HPTR Soi HPTR E4 trên kính hiển vi dễ dàng thấy rất nhiều tinh thể lớn CIL trên vi trường ở Hình PL-4 (phụ lục 4)
3.3.2 HPTR sử dụng chất mang HPC EF
Thực hiện phép đo DSC với các mẫu HPTR H1, H2, H3, H4 và hỗn hợp vật lý của CIL và HPC EF (tỷ lệ CIL 10 %) (HHVL) Các giản đồ DSC của mẫu HPTR và của CIL nguyên liệu (CIL NL) được trình bày trong Hình 3.8
Hình 3.8 Phổ quét nhiệt vi sai của mẫu cilnidipin nguyên liệu (CIL NL), hỗn hợp vật lý của CIL và HPC EF (HHVL), HPTR H1, H2, H3, H4
Phân tích DSC cho thấy sự nóng chảy của CIL trong hỗn hợp vật lý CIL và HPC EF, trong khi nhiệt đồ DSC của HPTR H1 là một đường thẳng cho thấy CIL đã chuyển sang dạng vô định hình Các nhiệt đồ DSC của HPTR H2, H3 và H4 cho thấy sự hiện diện của cả CIL dạng tinh thể và vô định hình, với tỷ lệ vô định hình tăng theo tỷ lệ CIL giảm trong HPTR.
3.3.3 HPTR sử dụng chất mang PVP K30
Phép đo DSC được thực hiện với các mẫu: HPTR P1, P2, P3, P4 và hỗn hợp vật lý của CIL và PVP K30 (tỷ lệ cilnidipin 10%) (HHVL) Kết quả quét phổ DSC được trình bày trong Hình 3.9
Nhận xét: Từ giản đồ nhiệt của mẫu hỗn hợp vật lý của CIL và PVP K30, CT P4 thấy xuất hiện một píc thu nhiệt tương ứng với píc thu nhiệt của mẫu CIL nguyên liệu, chứng tỏ rằng CIL ở dạng tinh thể trong mẫu hỗn hợp vật lý và mẫu P4 Đối với P1, P2, P3 không thấy xuất hiện píc thu nhiệt ở vị trí tương ứng với nhiệt độ nóng chảy của CIL trên giản đồ nhiệt, có thể gợi ý rằng, CIL không tồn tại ở trạng thái tinh thể trong HPTR công thức P1, P2, P3
Hình 3.9 Phổ quét nhiệt vi sai của mẫu cilnidipin nguyên liệu (CIL NL), hỗn hợp vật lý của CIL và PVP K30 (HHVL), HPTR P1, P2, P3, P4
Đánh giá ảnh hưởng của loại chất mang đến độ hòa tan CIL từ HPTR
3.4.1 Đánh giá ảnh hưởng bằng phương pháp thử độ hòa tan thường quy Để đánh giá ảnh hưởng của loại chất mang (polyme) đến độ hòa tan dược chất, tiến hành thử độ hòa tan các mẫu HPTR sử dụng loại chất mang khác nhau từ bảng thiết kế thí nghiệm: EE100, HPC EF và PVP K30, môi trường thử hòa tan được thay đổi là dung dịch HCl pH 1,2 và dung dịch HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80
3.4.1.1 Độ hòa tan ở môi trường HCl pH 1,2
Tiến hành đánh giá độ hòa tan của 3 mẫu HPTR của các polyme EE100, HPC EF, PVP K30, tỷ lệ CIL 10 %, gồm: E1, H1, P1 theo phương pháp mô tả ở mục 2.3.2.3 trong môi trường HCl pH 1,2 Kết quả thử độ hòa tan được trình bày ở Bảng 3.6 và Hình 3.10
Bảng 3.6 Kết quả thử độ hòa tan của E1, H1, P1 trong môi trường HCl pH 1,2 (n=3)
Thời gian (phút) % CIL hòa tan
Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan CIL theo thời gian của 3 mẫu E1, H1, P1 trong môi trường HCl pH 1,2 (n=3)
Nhận xét: Độ hòa tan của CIL từ HPTR E1 (EE100) trong môi trường HCl pH 1,2 thấp, sau 5 phút ban đầu, chỉ khoảng 10 % CIL hoà tan, sau đó độ hòa tan và tốc độ hòa tan giảm dần theo thời gian Đây là dấu hiệu tăng độ hòa tan biểu kiến của E1 và trạng thái siêu bão hòa dần giảm xuống đến độ tan nhiệt động học của CIL Hiện tượng này không xuất hiện với HPTR có chất mang là 2 polyme còn lại Với HPTR H1 (HPC EF) và P1 (PVP K30) không định lượng được CIL trong môi trường thử, giống như nguyên liệu CIL hầu như không tan môi trường HCl pH 1,0 [3]
3.4.1.2 Độ hòa tan ở môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1% Tween 80
Tiến hành đánh giá độ hòa tan theo phương pháp quy định để xác định khả năng hòa tan của các hoạt chất HPTR E1, H1, P1 và cilnidipin nguyên liệu trong môi trường HCl pH 1,2 có chứa 0,1% Tween 80 Kết quả thử nghiệm được thể hiện trong Bảng 3.7 và Hình 3.11.
Bảng 3.7 Kết quả thử độ hòa tan của CIL từ E1, H1, P1, CIL NL trong môi trường hòa tan
Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan của CIL theo thời gian của 4 mẫu: E1, H1, P1, CIL
NL trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1% Tween 80 (n=3)
Từ đồ thị và kết quả thu được, độ hòa tan của CIL từ các mẫu HPTR E1, H1, P1 và CIL nguyên liệu trong môi trường có chứa 0,1% Tween 80 đều tăng đáng kể so với môi trường không có Tween 80 Hiện tượng này có thể giải thích do sự hiện diện của Tween 80.
80 nồng độ 0,1 % làm tăng tính thấm ướt với môi trường hòa tan, tăng độ hòa tan
So với CIL nguyên liệu, mức độ và tốc độ hòa tan CIL của HPTR E1, H1, P1 cao hơn rõ rệt HPTR có độ hòa tan tốt nhất là E1, đạt 98 % CIL hòa tan ngay sau 5 phút, đạt hơn 99 % sau 10 phút, gấp gần 5 lần so với CIL NL Sau đó đến P1, có 83 % CIL hòa tan sau 5 phút, gấp 4 lần so với CIL NL HPTR sử dụng chất mang HPC EF tan kém nhất, chỉ khoảng 19 % dược chất được hòa tan sau 5 phút ban đầu và 49 % sau 60 phút hòa tan Có thể thấy rằng, độ hòa tan của HPTR với các polyme khác nhau thay đổi đáng kể và tuân theo thứ tự giảm dần lần lượt từ EE100, PVP K30, HPC EF
Tiến hành thử độ hòa tan các mẫu HPTR có cùng tỷ lệ CIL 50 %, gồm: CT E4 (EE100), H4 (HPC EF), P4 (PVP K30) và cilnidipin nguyên liệu (CIL NL) trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 theo phương pháp đã mô tả ở mục 2.3.2.3 Kết quả thử hòa tan được trình bày ở Bảng 3.8 và Hình 3.12
Bảng 3.8 Kết quả thử độ hòa tan của CIL từ E4, H4, P4, CIL NL trong môi trường hòa tan
Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan của CIL theo thời gian của 4 mẫu: E4, H4, P4, CIL
NL trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 (n=3)
Nhận xét: Quan sát đường cong biểu diễn độ hòa tan CIL trong môi trường HCl pH 1,2 có chứa 0,1 % Tween 80 theo thời gian thấy, mức độ và tốc độ hòa tan dược chất từ CIL nguyên liệu cao hơn mẫu HPTR được bào chế theo công thức H4, P4; ở thời điểm 5 phút đầu tiên, có khoảng 21 % dược chất được hòa tan từ mẫu CIL nguyên liệu,
10 % CIL được hòa tan từ CT H4 và gần 9 % từ CT P4 So với CIL NL, 5 phút đầu, HPTR E4 có độ hòa tan CIL cao hơn, khoảng 29 % dược chất hòa tan, nhưng sau 90 phút, độ hòa tan CIL từ HPTR E4 lại thấp hơn so với CIL NL Quan sát hình ảnh của các HPTR này trên kính hiển vi cho thấy rất nhiều tinh thể CIL có kích thước lớn hơn nhiều so với kích thước tiểu phân của nguyên liệu được hình thành Đây là nguyên nhân làm cho độ hòa tan của các mẫu HPTR với tỷ lệ dược chất 50 % hòa tan kém hơn so với nguyên liệu
Kết quả thử hòa tan trong môi trường chứa Tween 80 cho thấy khả năng cải thiện độ hòa tan của các mẫu HPTR có tỷ lệ CIL 50% không đồng nhất so với các mẫu có tỷ lệ CIL 10%, mặc dù chúng có cùng loại chất mang Điều này cho thấy, ở tỷ lệ CIL 50%, hiệu quả hòa tan của các mẫu HPTR có sự khác biệt đáng kể so với tỷ lệ CIL 10% trong cùng điều kiện.
10 %, loại chất mang được sử dụng ảnh hưởng lớn đến độ hòa tan CIL từ HPTR, còn khi HPTR có CIL ở tỷ lệ 50 %, phần lớn dược chất bị kết tinh lại thành tinh thể lớn trong HPTR nên gần như không có tác dụng tăng độ hòa tan Độ hòa tan của CIL nguyên liệu rất thấp, bởi xuất phát từ tính sơ nước, khi đưa vào môi trường hòa tan các tiểu phân dược chất nổi trên bề mặt và có xu hướng kết tụ với nhau làm giảm diện tích bề mặt tiếp xúc với môi trường hòa tan Các mẫu bào chế HPTR E1, H1, P1 cải thiện độ hòa tan của CIL nhờ cơ chế được coi là điển hình để cải thiện đặc tính hòa tan của thuốc bằng HPTR gồm giảm kích thước hạt, chuyển đổi từ trạng thái tinh thể sang tồn tại ở dạng vô định hình và cải thiện khả năng thấm ướt do tương tác với chất mang thân nước [36] Trong đó, CIL đã chuyển một phần hoặc phần lớn từ trạng thái tinh thể sang vô định hình trong HPTR E1, H1, P1 và tồn tại ở dạng tinh thể với các HPTR E4, H4, P4 được thể hiện rất rõ trên các hình ảnh của film HPTR được soi trên kính hiển vi và giản đồ quét nhiệt vi sai
3.4.2 Đánh giá ảnh hưởng bằng phương pháp thử hòa tan - khuếch tán
3.4.2.1 Môi trường khoang cho chứa 0,1 % Tween 80
Tiến hành đánh giá khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của các HPTR được bào chế theo công thức E1, H1, P1, E4, H4, P4 và mẫu CIL nguyên liệu (CIL NL) theo phương pháp ở mục 2.3.2.4 trong trường hợp môi trường khoang cho có chứa 0,1 % Tween 80 Kết quả thử hòa tan - khuếch tán được thể hiện ở Bảng 3.9, Bảng 3.10 và Hình 3.13
Bảng 3.9 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 4 mẫu E1, H1, P1, CIL NL khi môi trường khoang cho chứa 0,1% Tween 80 (n=3)
Bảng 3.10 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 4 mẫu E4, H4, P4, CIL NL khi môi trường khoang cho chứa 0,1% Tween 80 (n=1)
Hình 3.13 Đồ thị biểu diễn khả năng hòa tan - khuếch tán của CIL khi môi trường khoang cho có 0,1 % Tween 80 theo thời gian của mẫu HPTR: (a) E1, H1, P1, CIL NL; (b)
Nhận xét: Qua hình 3.13.a thấy khả năng hòa tan - khuếch tán CIL được cải thiện ở cả 3 công thức E1, H1, P1 so với CIL nguyên liệu, có sự khác biệt rõ rệt về lượng dược chất khuếch tán sang khoang nhận của E1, H1, P1 và CIL NL theo thời gian HPTR bào chế theo công thức E1 cho lượng CIL khuếch tán nhiều nhất, có khoảng 21 μg CIL ở khoang nhận sau 150 phút, cao gấp khoảng 3 lần HPTR P1 và 4 lần HPTR H1, gấp gần 10 lần so với CIL NL
Không có sự khác biệt về khả năng hòa tan - khuếch tán CIL ở cả 4 mẫu HPTR E4, H4, P4 so với CIL nguyên liệu Điều này được lý giải do phần lớn CIL kết tinh lại tạo thành các tinh thể lớn trong HPTR khi tỷ lệ dược chất chiếm 50 % trong các HPTR
3.4.2.2 Môi trường khoang cho không chứa chất diện hoạt
Tiến hành đánh giá khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của các HPTR được bào chế theo công thức E1, H1, P1, E4, H4, P4 và mẫu CIL nguyên liệu (CIL NL) theo
L ượn g C IL k hu ếc h tán ( μg)
L ượn g dược ch ất kh uếc h tán ( μg)
35 phương pháp ở mục 2.3.2.4 trong trường hợp môi trường khoang cho không có Tween
80 Kết quả thử hòa tan - khuếch tán được thể hiện ở Bảng 3.11 và Bảng 3.12, Hình 3.14
Bảng 3.11 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 4 mẫu E1, H1, P1, CIL NL khi môi trường khoang cho không có Tween 80 (n=1)
Bảng 3.12 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 4 mẫu E4, H4, P4, CIL NL khi môi trường khoang cho không có Tween 80 (n=1)
Nhận xét: Quan sát Hình 3.14a thấy đường cong khuếch tán - hòa tan của cả 4 mẫu E1, H1, P1 và CIL NL khác nhau đáng kể, lượng CIL khuếch tán sang khoang nhận giảm dần lần lượt từ E1, P1, H1, CIL NL Trong đó, E1 có khối lượng CIL khuếch tán sang khoang nhận là nhiều nhất, sau 150 phút, có 12,42 μg dược chất ở khoang nhận từ E1; H1 có 2,73 μg dược chất khuếch tán; 4,84 μg CIL hòa tan – khuếch tán từ P1 Hình 3.14b cho thấy lượng CIL khuếch tán qua màng giảm dần lần lượt từ HPTR E4, P4, H4, CIL NL Đối với mẫu nguyên liệu, không định lượng được dược chất trong khoang nhận Như vậy, có thể thấy rằng, bào chế dưới dạng HPTR có khả năng làm tăng đáng kể khả năng hòa tan và khuếch tán dược chất khi môi trường hòa tan không có yếu tố làm tăng độ tan
Hình 3.14 Đồ thị biểu diễn khả năng hòa tan - khuếch tán của CIL khi môi trường khoang cho không có chất diện hoạt của HPTR: (a) E1, H1, P1, CIL NL; (b) E4, H4, P4,
Đánh giá ảnh hưởng của tỷ lệ dược chất đến độ hòa tan CIL từ HPTR
3.5.1 Đánh giá ảnh hưởng bằng phương pháp thử độ hòa tan thường quy Để đánh giá ảnh hưởng của tỷ lệ dược chất trong CT bào chế HPTR đến độ hòa tan dược chất, tiến hành đánh giá thử và so sánh độ hòa tan của HPTR có cùng loại chất mang trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 Đánh giá độ hòa tan các công thức E1, E2, E3, E4 trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 theo phương pháp đã trình bày ở mục 2.3.2.3 Kết quả thử hòa tan được trình bày ở Bảng 3.13 và Hình 3.15
Bảng 3.13 Kết quả thử độ hòa tan CIL của E1, E2, E3, E4 trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 (n=3)
L ượn g C IL k hu ếc h tán ( μg)
L ượn g C IL k hu ếc h tán ( μg)
Hình 3.15 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan CIL theo thời gian của 4 mẫu: E1, E2, E3, E4, CIL
NL trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1% Tween 80 (n=3)
Nhận xét: Từ đồ thị trên cho thấy tốc độ và mức độ hòa tan dược chất được cải thiện rõ rệt ở HPTR E1 và E2 so với CIL nguyên liệu Sau 5 phút, HPTR E1 (CIL 10 %) có tốc độ hòa tan nhanh nhất, hơn 98 % dược chất được hòa tan; E2 (CIL 20 %) có gần
96 % CIL được hòa tan Tốc độ hòa tan của CIL ở E3 (CIL 30 %) và E4 ( CIL 50 %) diễn ra chậm hơn, sau 5 phút, khoảng 32 % dược chất hòa tan từ E3 và 29 % CIL hòa tan từ E4, 21 % CIL được hòa tan từ CIL nguyên liệu Như vậy, với tỷ lệ dược chất từ
30 %, các HPTR dùng chất mang EE100 ít có tác dụng trong việc tăng độ hòa tan của dược chất trong môi trường có mặt chất diện hoạt, có thể do dược chất đã kết tinh lại với tỷ lệ đáng kể trong HPTR
Tiến hành thử độ hòa tan các công thức H1, H2, H3, H4 trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1% Tween 80 theo phương pháp đã trình bày ở mục 2.3.2.3, kết quả thử hòa tan được trình bày ở Bảng 3.14 và Hình 3.16
Bảng 3.14 Kết quả thử độ hòa tan CIL của H1, H2, H3, H4, CIL NL trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1% Tween 80 (n=3)
38 Nhận xét: Đường cong biểu diễn độ hòa tan theo thời gian giảm dần lần lượt từ H1, H2, H3, H4 So với CIL nguyên liệu, CT H1 cho thấy khả năng cải thiện tốc độ và mức độ hòa tan CIL, sau 60 phút, H1 có gần 49 % CIL hòa tan, còn CIL nguyên liệu chỉ có khoảng 29 % CIL hòa tan Tuy có sự tăng về độ hòa tan ở các mẫu HPTR nhưng hiệu quả không cao khi dùng HPC EF làm chất mang Đặc biệt, mẫu có tỷ lệ dược chất 50 % có độ hòa tan thấp hơn so với nguyên liệu
Hình 3.16 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan CIL theo thời gian của 5 mẫu: H1, H2, H3, H4, CIL
NL trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1% Tween 80 (n=3)
Thử nghiệm độ hòa tan của công thức P1, P2, P3, P4 trong môi trường HCl pH 1,2 có chứa 0,1% Tween 80 được thực hiện theo phương pháp trình bày trong mục 2.3.2.3 Kết quả thử nghiệm được thể hiện trong Bảng 3.15 và Hình 3.17.
Bảng 3.15 Kết quả thử độ hòa tan CIL của P1, P2, P3, P4 trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80
%C IL h ò a tan thời gian (phút)
39 Nhận xét: Từ đồ thị cho thấy, đường cong biểu diễn độ hòa tan theo thời gian giảm dần từ P1, P2, CIL nguyên liệu, P3 và P4 Độ hòa tan dược chất của P1 (CIL 10 %) cao nhất, sau 5 phút đầu tiên, khoảng 83 % dược chất được hòa tan, P2 (CIL 20 %) với 58,87
% dược chất hòa tan, P3 (CIL 30 %) có khoảng 7 % CIL được hòa tan và chỉ 9 % CIL hòa tan ở P4 (CIL 50 %) Với tỷ lệ dược chất không quá 20 %, khả năng cải thiện hòa tan của HPTR được thể hiện rõ rệt Tuy nhiên, khi tỷ lệ dược chất từ 30 %, độ hòa tan của dược chất thấp hơn so với nguyên liệu, do sự kết tinh thành tinh thể lớn trong HPTR chiếm ưu thế Điều đó đã được minh chứng ở các ảnh chụp trên kính hiển vi của các mẫu HPTR có xuất hiện nhiều tinh thể lớn Như vậy, tốc độ hòa tan và mức độ hòa tan dược chất từ HPTR tỷ lệ nghịch với tỷ lệ dược chất trong HPTR
Hình 3.17 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan CIL theo thời gian của 4 mẫu: P1, P2, P3, P4 trong môi trường HCl pH 1,2 chứa 0,1 % Tween 80 3.5.2 Đánh giá ảnh hưởng bằng phương pháp thử hòa tan - khuếch tán
Tiến hành đánh giá khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 4 mẫu cùng sử dụng loại chất mang EE100 từ bảng thiết kế thí nghiệm: E1 (CIL 10 %), E2 (CIL 20 %), E3 (CIL 30 %) và E4 (CIL 50 %) và CIL nguyên liệu (CIL NL) theo phương pháp ở mục 2.3.2.4 trong trường hợp môi trường khoang cho có chứa 0,1 % Tween 80 và trường hợp môi trường khoang cho không có Tween 80 Kết quả thử hòa tan - khuếch tán được thể hiện ở Bảng 3.16 và Bảng 3.17, Hình 3.18
Bảng 3.16 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 5 mẫu E1, E2, E3, E4, CIL
NL khi môi trường khoang cho có chứa 0,1% Tween 80 (n=1)
Bảng 3.17 Kết quả thử khả năng hòa tan – khuếch tán CIL của 5 mẫu E1, E2, E3, E4,
CIL NL khi môi trường khoang cho không có Tween 80 (n=1)
Nhận xét: Từ đồ thị cho thấy tốc độ và mức độ hòa tan CIL từ HPTR trong cả 2 trường hợp đều tăng so với mẫu CIL NL Khi môi trường khoang cho là HCl pH 1,2 có chứa 0,1 % Tween 80, lượng CIL khuếch tán sang khoang nhận lớn hơn nhiều so với khi khoang cho không có Tween 80, do sự có mặt của Tween 80 – một chất diện hoạt làm tăng tính thấm của dạng bào chế với môi trường hòa tan, từ đó làm tăng chênh lệch nồng độ dược chất giữa 2 bên màng, tăng tốc độ khuếch tán Ở 2 điều kiện môi trường thử, lượng dược chất khuếch tán sang khoang nhận ở HPTR E1 (CIL 10 %) là lớn nhất, sau đó giảm dần lần lượt tới E2 (CIL 20 %), E3 (CIL 30 %), E4 (CIL 50 %)
Hình 3.18 Đồ thị biểu diễn khả năng hòa tan - khuếch tán của CIL theo thời gian của 5 mẫu E1, E2, E3, E4, CIL NL khi: môi trường khoang cho có 0,1% Tween 80 (a), môi trường khoang cho không có Tween 80 (b) (n=1)
Tiến hành đánh giá khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 4 mẫu loại chất mang là HPC EF từ bảng thiết kế thí nghiệm: H1 (CIL 10 %), H2 (CIL 20 %), H3 (CIL 30 %) và H4 (CIL 50 %) và CIL nguyên liệu (CIL NL) theo phương pháp ở mục 2.3.2.4 trong trường hợp môi trường khoang cho có 0,1 % Tween 80 và trường hợp môi trường khoang cho không có Tween 80 Kết quả thử hòa tan - khuếch tán được trình bày ở Bảng 3.18 và Bảng 3.19 và Hình 3.19
Bảng 3.18 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 5 mẫu H1, H2, H3, H4,
CIL NL khi môi trường khoang cho có 0,1 % Tween 80 (n=1)
L ượn g dược ch ất kh uếc h tán ( μg)
L ượn g dược ch ất kh uếc h tán ( μg)
Bảng 3.19 Kết quả thử khả năng hòa tan - khuếch tán CIL của 5 mẫu H1, H2, H3, H4,
CIL NL khi môi trường khoang cho không có Tween 80 (n=1)
Hình 3.19 Đồ thị biểu diễn khả năng hòa tan – khuếch tán của CIL theo thời gian của 5 mẫu: H1, H2, H3, H4, CIL NL khi: môi trường khoang cho chứa Tween 80 (a), khi môi trường khoang cho không có Tween 80 (b) (n=1)