Luận văn thạc sĩ Kỹ thuật hóa học: Nghiên cứu phương pháp định lượng axit humic và axit fulvic trong phân bón bằng sắc ký rây phân tử hiệu năng cao

NHIӊM VӨ VÀ NӜI DUNG: - Xây dӵng quy trình xӱ lý mүu và quy trình phân tích axit humic, axit fulvic trong mүu phân bón bҵng sҳc ký rây phân tӱ hiӋXQăQJFDR +3/&-SEC.. 7Ï07Ҳ7 Trong nghiên

Giӟi thiӋu vӅ các hӧp chҩt humic

Humin

Humin là mӝt phҫn cӫa chҩt humic mà không tan trong kiӅm (pH cao) và không tan trong axit (pH thҩp) Humin là chҩt không tan trong Qѭӟc vӟi bҩWNuÿLӅu kiӋn pH nào Hӧp chҩWKXPLQÿѭӧc coi là nhӳng chҩt hӳXFѫSKkQ Wӱ lӟn, vì khӕi Oѭӧng phân tӱ cӫa nó xҩp xӍ tӯ ÿӃn 10.000.000, so vӟi khӕLOѭӧng phân tӱ cӫa hӧp chҩW ÿѭӡng chӍ xҩp xӍ tӯ ÿӃQ +XPLQ WURQJ ÿҩt là phҫn khó ÿѭӧc phân hӫy nhҩt trong sӕ các chҩWKXPLFĈһc tính lý hóa cӫDQyFǊQJPӟi chӍ ÿѭӧc hiӇu rõ phҫn nào Mӝt vài chӭFQăQJFKtQKFӫDKXPLQWURQJÿҩt bao gӗm cҧi thiӋn khҧ QăQJJLӳ Qѭӟc, cҧi thiӋn cҩXWU~FÿҩWGX\WUuÿӝ әQÿӏnh cӫDÿҩWÿyQJYDL trò trong hӋ thӕng chuyӇQ ÿәL FDWLRQ Yj QKuQ FKXQJ WăQJ ÿӝ màu mӥ FKR ÿҩt NhӳQJÿһc tính quan trӑng này khiӃn humin trӣ thành yӃu tӕ then chӕWJL~Sÿҩt màu mӥ [1].

Axit humic

Axit humic (HA) bao gӗm hӛn hӧp axit béo yӃu (mҥch thҷQJYjD[LWWKѫP(mҥch vòng) không tan trong dung dӏFKD[LWQKѭQJWDQWURQJGXQJGӏch kiӅm HA bao gӗm các chҩt humic kӃt tӫa tӯ dung dӏFKNKLÿӝ pH thҩSKѫQ

$[LWKXPLFÿѭӧc coi là chҩWÿDSKkQWiQYuQKӳQJÿһc tính hóa hӑc phӭc tҥp Xét vӅ mһW NtFK WKѭӟF +$ ÿѭӧc coi là hӧp chҩt polymer tuyӃn tính tӗn tҥi dҥng cuӝn ngүu nhiên kӃt hӧp vӟi dây kӃt nӕi Trung bình 35% phân tӱ HA là chҩWWKѫP (mҥch vòng) trong khi phҫn còn lҥi là chҩt béo (mҥch thҷQJ.tFKWKѭӟc cӫa phân tӱ HA xҩp xӍ tӯ ÿӃn 100.000 Các phân tӱ HA sҹn sàng liên kӃt vӟi khoáng VpWÿӇ tҥo thành hӧp chҩt sét hӳXFѫәQÿӏnh Các mҳc xích cӫa hӧp chҩt cao phân tӱ này có khҧ QăQJ NӃt nӕi các chҩt hóa hӑc hӳX Fѫ Wәng hӧp và tӵ nhiên vào trong mӝt chuӛi dҥQJOѭӟL>@$[LWKXPLFFǊQJGӉ dàng tҥo thành hӧp chҩt muӕi vӟi các nguyên tӕ khoáng chҩWY{Fѫ3KkQWtFKFKLӃt xuҩt HA tӗn tҥi trong tӵ nhiên chӍ ra sӵ xuҩt hiӋn cӫa 60 nguyên tӕ khoáng chҩt khác nhau tӗn tҥi trong nó Nhӳng nguyên tӕ YLOѭӧng này gҳn chһt vӟi phân tӱ axit humic dӉ GjQJÿѭӧc các sinh vұt sӕng hҩp thө Do vұy, HA có chӭFQăQJTXDQWURQJWURQJTXiWUuQKFKX\Ӈn hóa ion và quá trình chelat kim loҥi Mӝt sӕ cҩX WU~F ÿLӇQ KuQK +$ ÿѭӧc trình bày trong

Hình 1.1 CҩXWU~FÿLӇn hình HA (hình trên) và cҩu trúc hóa hӑc cӫa HA dӵa trên các sҧn phҭPR[\KyDKuQKGѭӟi)

Hình 1.2 Cҩu trúc mô hình HA hai chiӅu.

Axit fulvic

Axit fulvic là hӛn hӧp cӫD D[LW EpR Yj D[LW WKѫP\ӃX WDQ WURQJ Qѭӟc ӣ các ÿLӅu kiӋn pH khác nhau (axit, trung tính và kiӅm) [1] FA ÿѭӧc xem là mӝt polymer ÿDSKkQ tӱ vӟi cҩXWU~FYjÿһFÿLӇPWKD\ÿәi cùng vӟi nguӗn gӕFYjP{LWUѭӡng vi sinh GiӕQJQKѭHA, quá trình tҥo FA xҧy ra tӵ QKLrQWURQJQѭӟFÿҩt và than bùn

&K~QJÿѭӧc tҥo ra bӣi sӵ phân hӫy hóa hӑc và vi khuҭn cӫa thӵc vұt Thành phҫn và hình dҥQJNKiÿDGҥQJ.tFKWKѭӟc cӫa FA nhӓ KѫQ+$Yӟi khӕLOѭӧng phân tӱ chӍ xҩp xӍ tӯ ÿӃQ )$ Fy KjP Oѭӧng oxy gҩS ÿ{L +$ FA có chӭa nhiӅu nhóm hoҥt tính phҧn ӭng, bao gӗm carboxyl, hydroxyl, carbonyl, phenol, quinone và semiquinone Nhӳng nhóm phҧn ӭng này làm cho FA có phҧn ӭng hóa hӑFFDRKѫQ trӣ thành mӝt chҩt có tính chҩt tҥo phӭc chelate hóa kim loҥi và chӕng oxy hoá mҥnh Khҧ QăQJFKX\ӇQÿәi ion cӫDIXOYLFFǊQJFDRJҩSÿ{L+$>@

'RNtFKWKѭӟc phân tӱ WѭѫQJÿӕi nhӓ, FA có thӇ dӉ GjQJÿѭӧc hҩp thө qua rӉ Fk\WKkQYjOiGRÿyFK~QJPDQJWKHRFiFYLOѭӧng tӯ bӅ mһt vào tұn trong mô Axit fulvic là thành phҫn chính cӫa các loҥi phân bón lá chҩWOѭӧng cao Các dҥng phân bón lá chӭa FA có khҧ QăQJ FKHODWH KyD FiF YL Oѭӧng ӣ mӝW JLDL ÿRҥn phát triӇn nhҩWÿӏQKGRÿyFyWKӇ ÿѭӧFGQJQKѭPӝWNƭWKXұWÿӇ tӕLÿDKyDQăQJVXҩt cây trӗQJ KL ÿѭӧc bón vào cây, FA sӁ vұn chuyӇQ FiF YL Oѭӧng chӭa phӭc hӧp FKHODWH ÿӃn trӵc tiӃS FiF Fѫ TXDQ Wәng hӧp cӫa tӃ bào ChҩW Oѭӧng cӫa FA ÿѭӧc ÿiQKJLiWK{QJTXDVӕ Oѭӧng nhóm chӭc có trên mӛi phân tӱ CҩXWU~FÿLӇn hình cӫa )$ÿѭӧc trình bày trong Hình 1.3

Hình 1.3 Cҩu trúc cӫa mӝt FA ÿLӇn hình tӯ tӵ nhiên.

Vai trò quan trӑng cӫa chҩt humic vӟi cây trӗng

ĈһFWtQKWtFKÿLӋn cӫa chҩt humic ҧQKKѭӣng tӟi nhiӅu phҧn ӭng hóa hӑc Cҧ KDLQKyP+$Yj)$ÿӅXÿѭӧc công nhұQOLrQTXDQÿӃn 3 phҧn ӭng hóa hӑc nәi bұt, ÿyOjK~WWƭQKÿLӋn, hình thành phӭc hӧp chelate và cҫu nӕLQѭӟc [1]

Phҧn ӭQJWUDRÿәLFKHODWHOLrQTXDQÿӃn các yӃu tӕ trung chuyӇn Sӵ phóng thích các yӃu tӕ khoáng vào trong cây thì hoàn toàn khác hӋ thӕQJWUDRÿәi cation cә ÿLӇn Cation 2+ không thӇ ÿѭӧc thay thӃ bӣi FDWLRQQKѭ+ + , K + , Na + Cation 1+ không thӇ thay thӃ bҵng ion kim loҥLQKѭ&X 2+ , mà cҫQÿѭӧFWUDRÿәi bӣi mӝt ion kim loҥi trung gian 2+ Chelate cung cҩSFѫFKӃ trung chuyӇn bӣi nhӳng nguyên tӕ GLQKGѭӥng bӏ thiӃu hөt sӁ ÿѭӧc bù lҥi ӣ bӅ mһt rӉ Quá trình chelate sӁ WăQJNKҧ QăQJFKX\Ӈn nguyên tӕ YLOѭӧng tӟi rӉÿӗng thӡi FKHODWHYLOѭӧng các kim loҥLÿӝc FǊQJÿѭӧc thӵc hiӋn nhӡ sӵ xuҩt hiӋn cӫa chҩt humic Nhӳng kim loҥLÿӝFQKѭWKӫy QJkQFKuFDGLPLXPÿѭӧc chelate hóa, giúp cây trӗng hҥn chӃ hҩp thө FK~QJ/ѭXê rҵng cation kim loҥi tӵ GRQKѭ)H 2+ , Cu 2+ và Zn 2+ WKuNK{QJWѭѫQJWKtFKYӟi tӃ bào cây ViӋc bón trӵc tiӃp các muӕi kim loҥLQKѭVҳWVXQIDWÿӗng sunfat, kӁPVXQIDWÿӇ Eÿҳp thiӃu hөWYLOѭӧng có thӇ gây ra các vҩQÿӅ nghiêm trӑQJNKLÿҩt thiӃu chҩt ÿӋm humic hӳu hiӋu, và nó cҫQÿѭӧFÿѭDGѭӟi dҥng chelate bӣi HA và FA [1]

ThiӃu vҳng các chҩt humic, các nguyên tӕ khoáng chҩt sӁ ÿѭӧc chuyӇn thành dҥQJNKyKzDWDQQKѭFDFERQDWR[LGHVXOILGHYjK\GUR[LWGRÿyKXPLFQJăQFKһn sӵ hình thành các khoáng chҩt mӟL WURQJ ÿҩt Cation cӫa các kim loҥi này (Cu 2+ ,

Zn 2+ , Fe 2+ ÿѭӧc giӳ trong chuӛi phân tӱ humic nhӡ FKHODWHWURQJWѭѫQJODLVӁ giҧi phóng cho các sinh vұWÿҩt hoһc rӉ cây hҩp thө [1]

Rҩt nhiӅu nghiên cӭXÿmFKӍ ra rҵng khi sӱ dөng nguӗn cung cҩp nLWѫ (N) cho cây trӗng nӃu có sӵ hiӋn diӋn cӫa HA, có thӇ giҧm sӵ thҩt thoát ammoniaFGRÿy giҧi pháp kӃt hӧp chҩt humic vӟi urê sӁ nâng cao hiӋu qӫa sӱ dөng phân bón Trong NKLÿyOѭӧng nLWѫFXQJFҩp bӣi urê chӍ ÿѭӧc cây trӗng hҩp thu khoҧng 30% và còn lҥi do thҩt thoát bӣLED\KѫLKD\Eӏ rӱa trôi ӣ dҥng NO3 [3] Do vұy, phân bón bә sung hàm Oѭӧng HA và FA vӯDÿӫ giúp cây trӗQJWKtFKQJKLÿѭӧc vӟLFiFÿLӅu kiӋn WKD\ÿәi do biӃQÿәi khí hұu, xâm nhұp mһn mang lҥi dӵDWUrQFѫFKӃ QKѭHình 1.4

Hình 1.4 Công dөng cӫa HA, FA ÿӕi vӟLÿҩt và cây trӗng

1.2 &iFSKѭѫQJSKiS[iFÿӏnh Axit Humic và Axit Fulvic

ThӃ giӟi

Do HA và FA không có cҩu trúc hóa hӑc rõ ràng và nhҩt quán, nên mӝt kӻ thuұWSKkQWtFKÿӇ ÿӏQKOѭӧng chính xác nó không tӗn tҥi Tuy nhiên, hiӋn tҥi có ba SKѭѫQJSKiSÿѭӧc cung cҩp bӣi các phòng thí nghiӋPWKѭѫQJPҥLÿӇ ѭӟc tính hàm

Oѭӧng chúng dӵDWUrQÿӝ hòa tan cӫa HA trong các dung dӏch kiӅm loãng và sӵ kӃt tӫa cӫDQyNKLÿѭӧc axit hóa [4] Các quy trình này bao gӗm:

- 3KѭѫQJSKiSVRPjXGӵDWUrQTX\WUuQKÿѭӧc phát triӇn bӣi Mehlich (1984)

- 3KѭѫQJSKiSFӫa Sӣ Nông nghiӋp và Thӵc phҭm California (CDFA)

- 3KѭѫQJSKiSFҧi tiӃn cӫa Swift (1996) dӵDWUrQSKѭѫQJSKiSFә ÿLӇn

3KѭѫQJSKiSVRPjX: bao gӗm chiӃt bҵng kiӅm vӟi dung dӏch gӗm NaOH

0,2 M, diethylenetriamine penta acetic axit (DTPA) 0,002 M và 2% cӗn Giҧi pháp Qj\ÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ trích xuҩt các humate hoһc tӯ chiӃt xuҩWKXPDWH3KѭѫQJSKiS này cӕ gҳQJѭӟc tính sӕ Oѭӧng các humic bҵQJFiFKVRViQKFѭӡQJÿӝ màu cӫa dӏch chiӃt kiӅm cӫa mүu vӟLFѭӡQJÿӝ PjXÿѭӧc tҥo ra bӣi dӏch chiӃt cӫa mӝWOѭӧng HA tiêu chuҭn, dӵD WUrQ ÿӏnh luұt Lambert-Beer Tuy nhiên, vì FA và các thành phҫn KzDWDQWURQJQѭӟFYjED]ѫNKiFEDRJӗPD[LWDPLQSURWHLQÿѭӡng, axit béo và các chҩW KXPLF FǊQJ VӁ ÿѭӧc chiӃt xuҩW GR ÿy NK{QJ ѭӟF WtQK ÿѭӧF KjP Oѭӧng

HA mà bao gӗP KjP Oѭӧng HA, FA và các thành phҫn hòa tan khác cùng hoҥt ÿӝng phә ӣ EѭӟFVyQJSKkQWtFKÿѭӧc sӱ dөng Kӻ thuұWQj\FǊQJFyWKӇ ÿѭӧc thӵc hiӋQFKtQK[iFKѫQQӃu FA và các hӧp chҩWNKiFÿmEӏ loҥi bӓ WUѭӟc khi phân tích ĈLӅu này có thӇ ÿѭӧc thӵc hiӋn dӉ dàng bҵng cách axit hóa dung dӏch chiӃt thành pH < 2, tách HA kӃt tӫa bҵng cách ly tâm và hòa tan nó trong dung dӏch chiӃt mӟi WUѭӟFNKLÿRPjX>@

3KѭѫQJSKiS&')$: sӱ dөQJ 1D2+ 1ÿӇ trích xuҩt các chҩt humic tӯ các mүu rҳn Sau khi chiӃt xuҩt, pH cӫa dӏch chiӃW ÿѭӧF ÿLӅu chӍnh thành pH < 2 bҵQJ+&OÿұPÿһc HA kӃt tӫDVDXÿyÿѭӧc loҥi bӓ khӓi dung dӏch chiӃt axit hóa, và dӏch chiӃt chӍ Fy)$+$VDXÿyÿѭӧc rӱa, sҩ\NK{YjFkQÿӇ [iFÿӏnh nӗQJÿӝ cӫa Qy'RÿySKѭѫQJSKiS CDFA chӫ yӃXÿRKjPOѭӧQJ+$NK{QJÿѭӧc làm sҥch QJKƭDOjWURNK{QJEӏ loҥi bӓ) Giá trӏ thӵc luôn luôn nhӓ KѫQJLiWUӏ ÿѭӧc tính toán bӣi phép so màu vì FA và các thành phҫn hoҥWÿӝng phә khác vүn hòa tan ӣ pH 2 ÿѭӧc loҥi bӓ7X\QKLrQKjPOѭӧng tro (tӭc là phҫQY{Fѫÿѭӧc tҥo phӭc bӣi hàm Oѭӧng HA và FA) cӫa các humate tӯ các nguӗn khác nhau lҥLWKD\ÿәLÿiQJNӇ Do ÿySKѭѫQJSKiS&')$NK{QJORҥi bӓ tro, nên nó sӁ ÿiQKJLiKjPOѭӧng HA cӫa các dүn xuҩWKXPDWHFDRKѫQWKӵc tӃ [2,4,5]

3KѭѫQJ SKiS Fә ÿLӇn: ÿӇ chiӃt xuҩt và tinh chӃ HA bao gӗm hòa tan mӝt mүu humate rҳn trong NaOH 0,1 N hoһFÿLӅu chӍnh pH cӫa mүu chҩt lӓng thành pH

11 bҵQJ1D2+ÿұPÿһc và lҳFTXDÿrPWURQJP{LWUѭӡQJQLWѫ+ӛn hӧSQj\VDXÿy ÿѭӧFO\WkPÿӇ loҥi bӓ các vұt liӋXY{FѫNK{QJ KzDWDQĈӝ pH cӫa phҫn nәi phía WUrQVDXÿyÿѭӧFÿLӅu chӍnh thành pH 2 bҵQJ+&OÿұPÿһFYjÿѭӧFÿӇ \rQTXDÿrP Hӛn hӧSQj\VDXÿyÿѭӧc ly tâm và kӃt tӫa, chӭa HA vӟi các chҩt gây ô nhiӉm vô Fѫÿѭӧc thu thұp và khӱ ViӋc tinh chӃ ÿҥWÿѭӧc bҵng cách rӱa HA nhiӅu lҫn trong dung dӏch HCl/HF BӣLYu+$ÿѭӧc chiӃt xuҩt và tinh chӃSKѭѫQJSKiSQj\OjPӝt WURQJEDSKѭѫQJSKiS[iFÿӏQKKjPOѭӧng HA thӵc sӵ cӫa humate hoһc chiӃt xuҩt humate GҫQÿk\Pӝt quy trình lô nhanh dӵDWUrQSKѭѫQJSKiSQj\ÿmÿѭӧc phát triӇn cho phép phân tích nhiӅu mүXÿѭӧFKRjQWKjQKWURQJÿӃn 4 giӡ [4]

GҫQÿk\PӝWSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKÿѭӧc xác nhұn kӻ Oѭӥng và tiêu chuҭn KyD ÿӇ [iF ÿӏQK KjP Oѭӧng HA và FA trong quһng humate thô và trong các sҧn phҭm rҳn, lӓQJÿѭӧc sҧn xuҩt tӯ FK~QJ&iFSKѭѫQJSKiSÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ ÿLӅu chӃ +$Yj)$ÿѭӧc thӵc hiӋQWKHRKѭӟng dүn cӫa HiӋp hӝi các chҩt humic Quӕc tӃ liên TXDQÿӃn chiӃt xuҩt kiӅPVDXÿyD[LWKyDÿӇ tách HA khӓi phҫn fulvic TiӃp theo, )$ÿѭӧc phân tách bҵng cách hҩp phө trên nhӵa ester acrylic không ion ӣ ÿLӅu kiӋn axit Khác vӟLFiFSKѭѫQJSKiSWUѭӟFÿySKѭѫQJSKiSQj\[iFÿӏnh nӗQJÿӝ HA

Yj )$ WUrQ Fѫ Vӣ NK{QJ WUR ÿm ÿѭӧc HiӋp hӝL 7KѭѫQJ Pҥi Sҧn phҭm Humic (HPTA) sӱDÿәLYjWK{QJTXDÿѭӧc gӑLOjSKѭѫQJSKiSWLrXFKXҭn mӟi (NSMÿӏnh Oѭӧng HA và FA trong quһng humic và các sҧn phҭPWKѭѫQJPҥi Nghiên cӭu này ÿmÿѭӧc thӵc hiӋQGѭӟi sӵ Kѭӟng dүn cӫa HiӋp hӝi các quan chӭc kiӇm soát thӵc phҭm, thӵc vұt Hoa KǤ (AAPFCO) nhҵm xác nhұQ SKѭѫQJ SKiS SKkQ WtFK ÿӏnh Oѭӧng HA và FA trong các sҧn phҭPKXPLFWKѭѫQJPҥi [6]

HiӋn nay, ViӋW1DP ÿDQJiSGөng theo tiêu chuҭn TCVN 11456:2016, quy ÿӏQKSKѭѫQJSKiS[iFÿӏQKKjPOѭӧng HA và FA trong các loҥLÿҩWWKHRSKѭѫQJ pháp Walkley-Black [7] và 7&91TX\ÿӏQKSKѭѫQJSKiS[iFÿӏnh HA và FA trong phân bón [8] Dӵa vào tính chҩt hòa tan cӫa HA và FA trong môi WUѭӡng kiӅP[iFÿӏQKÿѭӧc tәng HA và FA; dӵa vào tính chҩt không hòa tan trong P{LWUѭӡng axit cӫa HA ÿӇ tách riêng HA, tӯ ÿyVX\UDKjPOѭӧng FA

PKѭѫQJ SKiS Walkley-Black GӵD WUrQ TXi WUuQK oxy hóa các FKҩW KӳX

Fѫ EҵQJGXQJGӏFKNDOLELFURPDWGѭWURQJP{LWUѭӡQJD[LWVXQIXULFVӱGөQJQKLӋWGR TXiWUuQKKzDWDQD[LWVXQIXULFÿұPÿһFYjR GXQJGӏFKELFURPDWVDXÿyFKXҭQÿӝ OѭӧQJGѭELFURPDWEҵQJGXQJGӏFKPXӕL0RUKVӱGөQJFiFFKҩWFKӍWKӏR[\KyD± NKӱÿӇ[iFÿӏQKKjPOѭӧQJWәQJcarbon (%C) trong HA và FA+ӋVӕTXLÿәLWӯ SKҫQ WUăP NKӕL OѭӧQJ %C sang HA là 1, WѭRQJ ӭQJ & Yj FA là 2,15 (WѭѫQJ ӭQJ 46,5% C) Ĉk\ Oj SKѭѫQJ SKiS KyD KӑF FKXҭQ ÿӝ WKӇ WtFK ÿzL KӓL QKLӅXWKDRWiFÿӝFKtQK[iFNK{QJFDRÿһFELӋWOjNK{QJORҥLWUӯÿѭӧFVDLVӕGѭѫQJ Jk\UDEӣLFiFSKҧQӭQJQKLӉXYjFiFWҥSFKҩWEӏR[\KyDWURQJFQJÿLӅXNLӋQ

1.2.3 Các nghiên phân tích HA và FA trên HPLC-SEC -ESC

3KѭѫQJSKiS Vҳc ký rây phân tӱ hiӋXQăQJFDR+3/&-6(&ÿm ÿѭӧc phát triӇQÿӇ ÿӏQKOѭӧng nhanh HA và FA HPLC-SEC là mӝt kӻ thuұWWKѭӡQJÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ mô tҧ và tách các hӧp chҩt hӳXFѫKzDWDQPjNK{QJFҫn trích xuҩWWUѭӟc GRWtQKQKDQKÿӝ nhҥ\ÿӝ tái lұp và tính sҹn có cӫa nó HPLC-SEC vӟLÿҫu dò UV ÿmÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ WtQKWRiQNtFKWKѭӟc phân tӱ YjÿDGҥng các chҩt hӳXFѫKzDWDQ trong tӵ nhiên: Chin và cӝng sӵ, 1994; Peuravuori và Pihlaja, 1997; Hoque và cӝng sӵ, 2003 [11] ĈӇ [iF ÿӏnh trӑQJ Oѭӧng phân tӱ cӫa các chҩt humic trong các mүX Qѭӟc ngҫm, Christensen và cӝng sӵ ÿm ӭng dөng sҳc ký rây phân tӱ hiӋX QăQJ FDR (HPLC-6(&[iFÿӏnh sӵ phân bӕ trӑQJOѭӧng phân tӱ cӫa HA và FA Các cӝt TSK G2000SWXL và TSK G3000SWXL 6(& ÿѭӧc ghép nӕL VRQJ VRQJ SKD ÿӝQJ ÿӋm phosphate (pH 7,0; NaCl 0,2 mol/L) vӟLÿҫu dò UV ӣ Eѭӟc sóng 254 nm [12]

Wu và công sӵ ÿmFXQJFҩp mӝWSKѭѫQJSKiSWUrQVҳc ký rây phân tӱ hiӋX QăQJ FDR +3/&-SEC) cӝt Tsk-Gel, G2500PWXL dung dӏFK ÿӋm SKRVWSKDWHS+01D&Oÿѭӧc sӱ dөQJOjPSKDÿӝng vӟi tӕFÿӝ dòng

Các nghiên phân tích axit humic và axit fulvic trên HPLC-SEC

ViӋc ӭng dөng sҳc ký rây phân tӱ hiӋX QăQJ FDR +3/&-6(& [iF ÿӏnh QKDQK+$Yj)$WURQJQѭӟFÿmFXQJFҩp thông tin sӕ Oѭӧng và chҩWOѭӧng hӳu ích có thӇ ÿѭӧc sӱ dөng trong nhiӅu nghiên cӭu.

Mөc tiêu và nӝi dung nghiên cӭu

Mөc tiêu nghiên cӭu

ViӋF [iF ÿӏnh HA và FA trong tӵ nhiên bҵQJ SKѭѫQJSKiS WUrQ Vҳc ký rây phân tӱ hiӋXQăQJFDR+3/&-6(&ÿmQJKLrQFӭa và ӭng dөng Tuy nhiên, hiӋn QD\FKѭDFyQJKLrQFӭXÿӇ phân tích HA và FA trong phân bón bҵng kӻ thuұt này Phát triӇQ SKѭѫQJ SKiS SKkQ WtFK D[LW KXPLF Yj D[LW IXOYLF Eҵng kӻ thuұt sҳc ký rây phân tӱ hiӋX QăQJ FDR +3/&-SEC) trong các mүu phân bón sinh hӑc, bao gӗPSKkQWtFKÿӏQKOѭӧQJYj[iFÿӏnh phân bӕ khӕLOѭӧng cӫa các axit humic và axit fulvic.

Nӝi dung nghiên cӭu

- Sӱ dөng kӻ thuұWSKkQÿRҥQWKHRS+ÿӇ phân tách HA và FA tӯ mүu phân tích (nguyên liӋu và mүu phân bón)

- ;iFÿӏQKKjPOѭӧng C trong dung dӏch chuҭQ+$Yj)$ÿѭӧc cô lұp tӯ mүu ÿӕi chӭng theo TCVN 8561:2010

- Nghiên cӭu tӕLѭXKyDÿLӅu kiӋn phân tích HA và FA bҵng HPLC-SEC

- ;iFÿӏnh phân bӕ khӕLOѭӧng cӫa HA và FA chuҭQÿѭӧc cô lұp tӯ mүXÿӕi chӭng

- Xác nhұn giá trӏ sӱ dөng cӫDSKѭѫQJSKiSSKkQ tích HA và FA bҵng HPLC-SEC

Hóa chҩt, thiӃt bӏ và dөng cө

Hóa chҩt

- 1ѭӟc deion dùng cho HPLC: 1ѭӟc cҩWGQJFKRSKkQWtFKÿѭӧc lӑc qua máy lӑc Mili Q

- $[LWVXQIXULFÿұPÿһc 95% (H2SO4), NSX Merck, mã lô: K50525031,NSX: 04/09/20218, thành phҫn 96,2%

- Natri sunfat khan (Na2SO4), NSX Merck, mã lô: AM1487649, NSX: 02/10/2019, thành phҫn 100,2%

- Natri pyrophosphat (Na4P2O7.10H2O), NSX Merck, mã lô: F2100891, NSX: 09/01/2020, thành phҫn 100,1 %

- Dinatri hydrophosphat (Na2HPO4), NSX Merck, mã lô: K52466580, NSX: 12/05/2021, thành phҫn: 100 %

- Natri dihydrophosphat monohydrat, NSX Merck, mã lô: K95697742, NSX:22/08/2019

- Muӕi Mohr (FeSO4(NH4)2SO4.6H2O), NSX Merck, mã lô: K51996692, NSX: 13/11/2019, thành phҫn 100%

- Kali bicromat (K2Cr2O7), NSX Merck, mã lô K51800164, NSX: 06/09/2019, thành phҫn 100%

- Dung dӏch hӛn hӧp natrihydroxit-pyrophotphat pH = 13: Cân 44,6 g

Na4P2O7.10 H2O và 4g NaOH vào cӕF GXQJ WtFK PO WKrP PO Qѭӟc, khuҩy tan, chuyӇn vào bìnKÿӏnh mӭFGXQJWtFKPOWKrPQѭӟFÿӃn vҥFKÿӏnh mӭc, lҳFÿӅu (Dung dӏch có nӗQJÿӝ 0,1 M cho mӛi loҥi)

- Dung dӏch tiêu chuҭn kali bicromat (K2Cr2O7) 0,2 N: Cân 9,808 g K2Cr2O7 ÿmVҩy khô ӣ 105 0 &WURQJKÿӇ nguӝi trong bình hút ҭm) cho vào cӕc dung tích POWKrPPOQѭӟc, khuҩy tan, chuyӇQYjREuQKÿӏnh mӭc dung tích 1000 POWKrPQѭӟFÿӃn vҥFKÿӏnh mӭc, lҳFÿӅu Bҧo quҧn kín ӣ 20 0 C

- Dung dӏch muӕi Mohr FeSO4(NH4)2SO4.6H2O nӗQJÿӝ khoҧng 0,1 M: Cân 39,2 g FeSO4(NH4)2SO4.6H2O vào cӕc dung tích 1000 ml, thêm 50 ml axit H2SO4 ÿһFWKrPPOQѭӟc, khuҩy tan, chuyӇQYjREuQKÿӏnh mӭc dung tích 1000 ml,

WKrPQѭӟFÿӃn vҥFKÿӏnh mӭc, lҳFÿӅXÿӇ cho lҳng trong, nӃXÿөc phҧi lӑc Bҧo quҧn kín trong lӑ màu nâu ӣ 20 0 C, tránh xâm nhұp cӫa không khí

- Dung dӏch H2SO4 1N: Lҩy 28 ml H2SO4 d = 1,84 vào cӕFÿmFyVҹn 400 ml Qѭӟc, khuҩy tan, chuyӇQ YjR EuQK ÿӏnh mӭF GXQJ WtFK PO WKrP QѭӟF ÿӃn vҥFKÿӏnh mӭc, lҳFÿӅu

- 3KDÿӝQJÿӋm Phosphat (pH 6,8, 0.025 M hay 0,05 M Na2SO4): Cân 24 g

Na2HPO4, 40,5 g KH2PO4 và 3,55 g Na2SO4 thêm 450 ml Qѭӟc, khuҩy tan, chuyӇn YjREuQKÿӏnh mӭFGXQJWtFKPOWKrPQѭӟFÿӃn vҥFKÿӏnh mӭc, lҳFÿӅXÿӇ cho lҳng trong, nӃXÿөc phҧi lӑc KiӇm tra lҥi pH bҵng máy pH kӃ, bҧo quҧn kín ӣ

20 0 C, tránh xâm nhұp cӫa không khí.

ThiӃt bӏ và dөng cө

- HӋ thӕng sҳc ký lӓng cao áp hiӋu Agilent 1290 Infinity II LC, gӗPÿҫu dò UV/DAD, lò cӝt (±10-80 o C), bӝ tiêm mүu tӵ ÿӝQJYjEѫPVLrXFDRiSEDU x %ѫPEӕQNrQKWUӝQGXQJP{LWUѭӟFEѫPWҥRiSVLrXFDRWӟLEDU (Agilent 1290 Infinity II Flexible Pump) x %ӝWLrPPүXWӵÿӝQJYӟLPүXәQQKLӋWWӯ-40 o &FKӏXiSWӟL bar (1290 Infinity II Vialsampler) x %XӗQJ ÿLӅX QKLӋW ÿD FӝW ÿLӅX QKLӋW WURQJ NKRҧQJ Wӯ ±10-80 o & YӟL ÿӝ chính xác 0,2 o C (Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat Compartment (MTC) x Van FKӑQ FӝW ORҥL FәQJ FKR SKpS FKӑQ FӝW WKD\ ÿәL QKDQK FKӏX iS

1300 bar x ĈҫXGz89'$',QILQLW\,,Diode Array Detector) x Cӝt phân tích HPSEC: SEC-s2000 (Phenomenex BioSep TM ) vӟi kích WKѭӟc hҥt nhӗLOjPÿѭӡng kính trung bình cӫa lӛ xӕp là 145 Å, chiӅu GjLPPYjÿѭӡng kính cӝt là 7,8 mm, pH làm viӋc 2,5 ± 7,5, áp suҩt ÿҫu cӝt nhӓ KѫQSVL

- Máy ly tâm 10.000 vòng/phút

- %ѫPWLrPYjÿҫXOӑFPүX&KҩWOLӋX3RO\SURS\OHQÿѭѫQJNtQKPPNtFKWKѭӟFOӛOӑFP

Mүu nghiên cӭu

ĈӅ WjLÿѭӧc nghiên cӭu thӵc nghiӋm trên nguôn nguyên liӋu và sҧn phҭm cӫa Công ty Cә phҫn Phân bón DҫXNKt&j0DXQKѭEҧng 2.1 và Hình 2,1

Bҧng 2.1 Thông tin mүu nghiên cӭu 0үXQJX\rQ/LӋX6XSHUILQH 0үXVҧQSKҭP1+XPDWH7(

- +jPOѭӧQJFKҩWKӳXFѫ

- 6ҧQ[XҩW&{QJW\&әSKҫQ3KkQ EyQ'ҫXNKt&j0DX

- +jPOѭӧQJWәQJ1LWѫ

- +jPOѭӧQJ+XPtFWәQJVӕ

Hình 2.1: Sҧn phҭP1+XPDWH7(WKѭѫQJPҥi cӫDĈҥm Cà Mau

TәQJTXDQSKѭѫQJSKiSSKkQWtFK+3/&

Cҩu tҥo hӋ thӕng HPLC [13-16]

- Bình chӭDGXQJP{LSKDÿӝng): Dung dӏFKSKDÿӝQJÿѭӧc chӭa trong mӝt bình thӫ\WLQK3KDÿӝQJWKѭӡng là hӛn hӧp các thành phҫn chҩt lӓng phân cӵc và không phân cӵc có nӗQJÿӝ WѭѫQJӭQJWKD\ÿәi tùy thuӝc vào thành phҫn cӫa mүu

- %ѫP%ѫPK~WSKDÿӝng tӯ bình chӭDYjÿҭy qua hӋ thӕng, cӝWYjÿҫu dò

Tùy thuӝc vào mӝt sӕ yӃu tӕ bao gӗPNtFKWKѭӟc cӝWNtFKWKѭӟc hҥt cӫDSKDWƭQK tӕFÿӝ dòng chҧy và thành phҫn cӫDSKDÿӝng mà áp suҩt vұn hành có thӇ lên tӟi khoҧng 6000 Psi

- Bӝ tiêm mүu: Bӝ tiêm mүu có thӇ OjPǊLWLrPÿѫQKRһc hӋ thӕng tiêm mүu tӵ ÿӝng Bӝ tiờm mүu cú thӇ tiờm chҩt lӓng cú thӇ tớch 0,1-100 àL vӟLÿӝ lһp lҥi cao và hoҥWÿӝQJGѭӟi áp suҩt cao

- Cӝt phân tách SKDWƭQK7Kѭӡng làm bҵng thép không gӍ, dài tӯ 50-300 mm và Fy ÿѭӡng kính trong tӯ 2-5 mm CӝW ÿѭӧc lҳS ÿҫy bӣi pha rҳQ ÿӭng yên vӟL NtFK WKѭӟc lӛ hҥt là 3-10 àm Cỏc cӝW Fy ÿѭӡng kớnh trong nhӓ KѫQ PP WKѭӡQJÿѭӧc gӑi là cӝWPLFURERUH/êWѭӣng nhҩt là nhiӋWÿӝ cӫDSKDÿӝng và cӝt phҧLÿѭӧc giӳ NK{QJÿәi trong suӕt thӡi gian phân tích

- Ĉҫu dò Ĉҫu dò HPLC nҵm ӣ cuӕi cӝt phát hiӋn các chҩt phân tích khi chúng rӱa giҧi tӯ cӝt sҳFNê&iFÿҫXGzWKѭӡQJÿѭӧc sӱ dөQJOjÿҫu dò quang phә 89ÿҫu dò huǤQKTXDQJÿҫu dò khӕi phә YjÿҫXGzÿLӋn hóa

- Bӝ ghi dӳ liӋu: Tín hiӋu tӯ ÿҫXGzÿѭӧc thu thұp trên bӝ ghi dӳ liӋXWKѭӡng

OjPi\WtQKÿѭӧc kӃt nӕi vӟLÿҫXGzYjÿLFQJYӟi thiӃt bӏ phân tích.

Các kӻ thuұt phân tích HPLC [13-16]

- Sҳc ký pha thuұn: Sҳc ký lӓng pha thuұn sӱ dөQJ SKD WƭQK SKkQ Fӵc, pha ÿӝng không phân cӵc Pha WƭQKWKѭӡQJOjVLOLFDYjSKDÿӝng là hexane, methylene, chloroform, dietyl ete và hӛn hӧp cӫa các pha này Các vұt liӋu càng phân cӵc FjQJÿѭӧc giӳ lâu trong cӝt

- SҳFNêSKDÿҧo: Sҳc ký lӓQJSKDÿҧo sӱ dөQJSKDWƭQKNK{QJSKkQFӵc, pha ÿӝng phân cӵF QKѭ Qѭӟc, methanol hoһc acetone nitrile Nó hoҥW ÿӝng dӵa trên nguyên tҳFWѭѫQJWiFNӷ QѭӟFGRÿyYұt liӋu càng không phân cӵc thì nó sӁ ÿѭӧc giӳ lҥLFjQJOkXWURQJSKDWƭQK

- SҳFNêWUDRÿәi ion: 3KDWƭQKFyEӅ mһWPDQJÿLӋn tích ion trái dҩu vӟi các ion trong mүXĈLӋn tích trên mүu càng mҥnh thì sӁ càng bӏ hút mҥQKKѫQYjREӅ mһWLRQYjGRÿyVӁ mҩt nhiӅu thӡi gian rӱa giҧLKѫQ3KDÿӝng là dung dӏFKÿӋm, WURQJÿyFҧ S+YjFѭӡQJÿӝ LRQÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ kiӇm soát thӡi gian rӱa giҧi

- Sҳc ký Hilic (Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography) hay còn gӑi là sҳc ký lӓQJSKDWKѭӡng trong dung dӏFKQѭӟc (Aqueous normal phase HPLC): 3KDWƭQKUҩt phân cӵFSKDÿӝQJWKѭӡng có thành phҫQQѭӟc (2-40%) và dung môi hӳX Fѫ WKѭӡng là Acetone nitrile (ACN) Chҩt phân tích càng phân cӵc thì càng OѭXJLӳWăQJKjPOѭӧQJQѭӟFWURQJSKDÿӝng lên thì giҧm thӡLJLDQOѭXJLӳ

- Sҳc ký rây phân tӱ: CӝWÿѭӧc nhӗi bҵng các vұt liӋXFyNtFKWKѭӟc lӛ ÿѭӧc kiӇm soát chính xác và các hҥW ÿѭӧF SKkQ WiFK WKHR NtFK WKѭӟc phân tӱ cӫa nó Các phân tӱ lӟQ KѫQ QKDQK FKyQJ ÿѭӧc rӱa qua cӝt, các phân tӱ nhӣ KѫQ WKkP nhұp vào sâu bên trong lӛ xӕp cӫa các hҥt nhӗi và rӱa giҧLVDXÿyP{Wҧ Hình 2.3

Hình 2.3 Nguyên lý tách trong cӝt SEC

Các thông sӕ ÿһFWUѭQJFӫa quá trình sҳc ký [14-16]

Các chҩt tan trong hӛn hӧp mүX SKkQ WtFK KL ÿѭӧc nҥp vào cӝt sҳc ký, chúng sӁ bӏ OѭXJLӳ ӣ trong cӝWWiFKSKDWƭQKWKHRPӝt thӡi gian nhҩWÿӏnh, tRĈy là thӡLJLDQOѭXFӫa nó trong hӋ ÿmFKR7KӡLJLDQQj\ÿѭӧc tính tӯ lúc nҥp mүu vào cӝt tách sҳFNêFKRÿӃn lúc chҩWWDQÿѭӧc rӱa giҧi ra khӓi cӝt ӣ ÿLӇm có nӗng ÿӝ cӵFÿҥi ݐԢ ோ ൌ ݐ ோ െ ݐ ଴ t0: thӡLJLDQOѭXFKӃt (hay thӡLJLDQNK{QJOѭXJLӳ) là khoҧng thӡi gian ÿӇ cho chҩW QjR ÿy NK{QJ Fy iL Oӵc vӟL SKD WƭQK ÿL TXD cӝW ÿy FǊQJ Oj khoҧng thӡLJLDQSKDÿӝQJÿLWӯ ÿҫu cӝWÿӃn cuӕi cӝt tR: thӡLJLDQOѭXFӫa mӝt cҩu tӱ tӯ khi vào cӝWÿӃn khi tách ra khӓi cӝt WảR: thӡLJLDQOѭXWKӵc cӫa mӝt cҩu tӱ

+ӋVӕOѭXJLӳNFzQ ÿѭӧFJӑLOjKӋVӕGXQJOѭӧQJÿѭӧFÿӏQKQJKƭDOjWӹVӕ JLӳDWKӡLJLDQOѭXKLӋXFKӍQKYjWKӡLJLDQNK{QJOѭXJLӳWKӇKLӋQNKҧQăQJOѭXJLӳ FӫDFӝWÿӕLYӟLFҩXWӱYj ÿѭӧFWtQK WKHRF{QJWKӭFVDX ݇ ൌݐԢ ோ ݐ ଴ ൌݐ ோ െ ݐ ଴ ݐ ଴

+ӋVӕNOjWӹOӋWKӡLJLDQPүXQҵPWURQJSKDWƭQKVRYӟLWKӡLJLDQQҵPWURQJ SKDÿӝQJ+D\QyLFiFKNKiFNOjWӹOӋJLӳDVӕPROFKҩWWDQWURQJSKDWƭQKYӟLVӕ PROFKҩWWDQWURQJSKDÿӝQJ+ӋVӕNFjQJOӟQWKuWKӡLJLDQSKkQWtFKFjQJOkX

- NӃu k §Fҩu tӱ cҫn phân tích không bӏ OѭXJLӳ bӣLSKDWƭQKFӫa cӝt và có thӡLJLDQOѭX § ݐ ଴ ĈLӅu này giҧi thích vì sao chúng ta hay thҩ\SLFSKtDÿҫu cӫa sҳFNêÿӗ kӇ cҧ khi mүu chҥy không chӭa chҩt cҫn phân tích

- NӃu k § nhӳng cҩu tӱ Qj\ WѭѫQJ WiF NK{QJ WKXұn nghӏch vӟL SKD WƭQK (không nҵPWURQJSKDÿӝng) sӁ có giá trӏ k tiӃn tӟi YjVӁ không bӏ rӱa giҧi hoһc rҩt khó rӱa giҧi khӓi cӝt phân tích ĈLӅu này giҧi thích vì sao sau mӝt thӡi gian chҥy mүu nhҩWÿӏnh cӝt phân tích cӫa chúng ta mҩt khҧ QăQJWiFKFiFFKҩt do nhӳng cҩu tӱ này sӁ chiӃm dҫn dҫn hӃt bӅ mһt cӫa cӝt phân tích Nhҩt là nhӳng mүXSKkQWtFKNK{QJÿѭӧc làm sҥch ký

WUѭӟFNKLÿѭDOrQPi\SKkQWtFKĈӇ khҳc phөc ҧQKKѭӣng do nhӳng cҩu tӱ này gây ra chúng ta cҫn làm sҥch mүXWUѭӟc khi phân tích và nên WKrPFKѭѫQJWUuQK rӱa cӝt ngay sau loҥt mүXSKkQWtFKWKHRKѭӟng dүn sӱ dөQJÿLNqPNKLPXDFӝt ÿӇ ÿҭy chúng ra khӓi cӝt

- NӃu k = 1±20 khi phân tích mӝt hӛn hӧp phӭc tҥp có thӇ chҩp nhұQÿѭӧc; k

HӋ sӕ chӑn lӑc hay hӋ sӕ WiFKĮÿһFWUѭQJFKRNKҧ QăQJWiFKKDLFKҩt cӫa cӝt ߙ ൌ݇ ஻ ݇ ஺ ൌݐԢ ஻ ݐԢ ஺ ൌሺݐ ஻ െ ݐ ଴ ሻ ሺݐ ஺ െ ݐ ଴ ሻ ĮFjQJNKiFWKuVӵ tách hai chҩt càng rõ ràng

Sӕ ÿƭDOêWKX\Ӄt N: ĈӇÿһFWUѭQJFKRNKҧQăQJWiFKFӫDPӝWFӝWVҳFNêQJѭӡLWDGQJNKiLQLӋP VӕÿƭDOêWKX\ӃW1ÿѭӧFWtQKWKHRF{QJWKӭF ܰ ൌ ܮ ܪ Vӟi: L: chiӅu dài cӫa cӝt

Hay sӕ ÿƭDOêWKX\Ӄt tính theo sҳFNêÿӗ: ܰ ൌ ൬ݐܴ ߪ ൰ ଶ ൌ ͳ͸ ൬ݐܴ ܹ ௕ ൰ ଶ ൌ ͷǡͷͶ ൬ݐܴ ܹ ௛ ൰ ଶ

9ӟL ܹ ௛ ൌ ܹ ଴Ǥହ OjFKLӅXUӝQJSHDNVҳFNêӣYӏWUtòFKLӅXFDRSHDN ܹ ௕ OjFKLӅXUӝQJSHDNVҳFNêӣYӏWUtÿi\SHDN éQJKƭDFӫa sӕ ÿƭDOêWKX\Ӄt N: x 1FjQJOӟQNKҧQăQJWiFKFjQJWӕWFiFSLFVҳFNêFjQJKҽSYjQKӑQWӕW x 1QKӓNKҧQăQJWiFKNpPVӁFKRFiFSLFWYj[ҩXNK{QJWӕW

Hình 2.6 ҦQKKѭӣQJFӫDVӕÿƭDOêWKX\ӃWOrQÿӝUӝQJFӫDSLF

Các yӃu tӕ ҧQKKѭӣQJÿӃn sӕ ÿƭDOêWKX\Ӄt: x tFKWKѭӟFKҥWKҩSSKөGpKҥWFjQJQKӓVӕÿƭDOêWKX\ӃWFjQJOӟQWX\nhiên KҥWQKӓTXiVӁGүQÿӃQiSVXҩWNKLSKkQWtFKWăQJOrQÿLӅXQj\W{LVӁQyLFKL WLӃWӣEjLYLӃWYӅFӝWVҳFNê x ĈӝQKӟWFӫDSKDÿӝQJFjQJOӟQ1FjQJQKӓ x 1KLӋW ÿӝ FӝW FjQJ FDR 1 FjQJ OӟQ WX\ QKLrQ SKҧL QҵP WURQJ JLӟL KҥQ FKR SKpSFӫDFӝW x 7ӕFÿӝSKDÿӝQJFjQJWăQJ1FjQJJLҧPYjQJѭӧFOҥLWX\QKLrQYӟLKҥWQKӗL FyNtFKWKѭӟFGѭӟLPVӁNK{QJÿiQJNӇYjTXiWUuQKSKkQWtFKÿѭӧFÿҭ\ nhanh Ĉӝ phân giҧi R s : Ĉk\OjÿҥLOѭӧng biӇu thӏ rõ cҧ ba khҧ QăQJFӫa cӝt sҳc ký: sӵ giҧi hҩp, sӵ chӑn lӑc và hiӋu quҧ WiFK1yÿѭӧF[iFÿӏQKTXDSKѭѫQJWUuQKVDX ܴ ௦ ൌ ʹ כሺݐ ோଶ െ ݐ ோଵ ሻ ሺܹ ଵ ൅ ܹ ଶ ሻ7URQJÿy tR1, tR2 thӡLJLDQOѭXFҩu tӱ thӭ 1 và thӭ 2

W1, W2 ÿӝ rӝng chân pic cҩu tӱ thӭ 1 và thӭ 2

Rs phù hӧp trong khoҧQJÿӃn 10

Hình 2.7 Tách giӳa 2 peak sҳc ký ܴ ௌ ൌͳ Ͷכ ݇ ͳ ൅ ݇כሺߙ െ ͳሻ ߙ כ ξܰ

Hình 2.8 GiҧQÿӗ vӅ sӵ tách cӫa hai peak sҳFNê$Yj%WѭѫQJӭng các Rs.

HӋ sӕ NpRÿX{L7OjPӝt chӍ sӕ biӇu diӉQWtQKÿӕi xӭng cӫa mӛi pic sҳc ký

HӋ sӕ NpRÿX{LOêWѭӣng nhҩW7 QKѭQJFyWKӇ do mӝt sӕ lý do ҧQKKѭӣng nên QyNK{QJÿҥWÿѭӧF7WKѭӡng trong khoҧng tӯ 0,8±Ĉѭӧc tính theo công thӭc sau: ࢀ ൌ ࢇ ൅ ࢈ ૛ࢇ

Hình 2.9 Minh hӑa a, b lҩy tҥi vӏ trí peak sҳFNêÿӝ cao 5%.

Thӵc nghiӋm

ChiӃt HA và FA tӯ nӅn mүu

6DXNKLÿmÿӗng nhҩt, nghiӅn mӏn (cho qua rây 0,2 mm) mүu phân tích, cân 5 g ± 0,001 g mүu và cho vào bình tam giác dung tích 250 mL Thêm 100 mL dung dӏch hӛn hӧp natrihydroxit-pyrophotphat pH 13 LҳFÿӅu trong 1 giӡ YjÿӇ TXDÿrP (thӡi gian chiӃt tӕLѭXÿѭӧc trình bày trong mөc 3.1.1) Lӑc khô qua giҩy lӑc mӏQÿӇ thu dung dӏch lӓng, nӃX ÿөc cҫn lӑc lҥi Dӏch lӑF ÿѭӧc chӍnh vӅ pH 7 bҵng dung dӏch H2SO4 1Yjÿӏnh mӭc lên 200 mL bҵQJQѭӟc cҩt [8,9] Dung dӏFKWKXÿѭӧc gӑi là dung dӏch AÿѭӧFGQJÿӇ cô lұp chuҭn HA và FA tӯ mүXÿӕi chӭng theo mөc 2.3.2.

KӃt tӫDSKkQÿRҥn HA ra khӓi dung dӏch FA

Lҩy chính xác 50 mL dung dӏch A cho vào cӕc chӏu nhiӋt dung tích 250 mL KӃt tӫa HA bҵng cách cho vào dung dӏch tӯng giӑt H2SO4 1 N, lҳF ÿӅu, tӟi pH 1 (kiӇm tra bҵng pH kӃĈXQQyQJGXQJGӏch trên bӃp cách thӫy 1-2 giӡ ÿӇ WK~Fÿҭy thêm quá trình keo tө +$VDXÿyÿӇ nguӝi dung dӏch

Sau khi lӑc khô bҵng giҩy lӑc, dӏch lӑFÿѭӧFWKXJRPYjÿӏnh mӭc lên 100 mL bҵQJQѭӟc cҩWVDXÿySKDORmQJOҫQÿѭӧc dung dӏch F

Hòa tan kӃt tӫa trên giҩy lӑc bҵng dung dӏch phosphate pH 6,8 (có chӭa

Na2SO4 0VDXÿyFKRYjREuQKÿӏnh mӭc 100 mL, rӗi pha loãng 25 lҫQÿѭӧc dung dӏch H

2.3.3 ;iF ÿӏnh nӗQJ ÿӝ HA hay FA (quy vӅ carbon) trong dung dӏch H hay F theo TCVN 8561:2010

Lҩy chính xác 5 mL dung dӏch H hay F cho vào erlen 250 mL, thêm 5 mL dung dӏch K2Cr2O7 0,2 N, thêm nhanh 20 mL H2SO4 ÿһc tӯ ӕQJÿRQJOҳc nhҽ trӝn ÿӅXĈһt bình lên trên tҩm cách nhiӋWÿӇ yên trong thӡLJLDQSK~WVDXÿyWKrP P/Qѭӟc và 5 mL dung dӏch H3PO4 ÿұPÿһFÿӇ nguӝi ӣ nhiӋWÿӝ phòng TiӃn hành ÿӗng thӡi hai mүu trҳng không có mүu thӱÿӗng nhҩWFQJÿLӅu kiӋQQKѭPүu thӱ

Thêm 1 giӑt chӍ thӏ màu Ferroin và chuҭQÿӝ OѭӧQJGѭELFURPDWEҵng dung dӏch muӕi Mohr 0,1 M tӟi khi màu cӫa dung dӏFK WKD\ ÿәi tӯ vàng nhҥW VDQJ ÿӓ NӗQJÿӝ cӫD+$Yj)$ÿѭӧc tính toán theo công thӭc (1) ୌ୅Ȁ୊୅ ሺȀሻ ൌ ሺ െ ሻ ൈ େ୰ሺ୚୍ሻ େ୰ሺ୚୍ሻ ൈ ͵ Ͳǡ͹ͷൈ ୤ ୫ኻ୳ ൈ ͳͲͲͲሺͳሻ m A

CHA/FA NӗQJÿӝ cӫa HA hay FA tính theo mg carbon có trong 1 lít dung dӏch

A ThӇ tích dung dӏch muӕi Mohr chuҭQ ÿӝ mүu trҳng tính theo mililit

B ThӇ tích dung dӏch muӕi Mohr chuҭQ ÿӝ mүu thӱ tính theo mililit

VCr(VI) ThӇ tích dung dӏch K2Cr2O7 tính theo mililit (5 mL);

NCr(VI) NӗQJÿ{GXQJGӏch K2Cr2O7 WtQKWKHRÿѭѫQJOѭӧng (0,2 N);

3 ĈѭѫQJOѭӧng gam cӫa carbon tính theo gam (g);

1/0,75 HӋ sӕ TXL ÿәi thӵc nghiӋm do HA và FA có các nhóm chӭc mҥch vòng nên khi oxit hóa bҵng kali bicromat chӍ R[L KyD ÿѭӧc 75% carbon trong hӧp chҩt [8];

Df HӋ sӕ pha loãng (1 lҫn); mmүu KhӕLOѭӧng mүu phân bón nguyên liӋu;

Vmүu ThӇ tích dung dӏch chuҭn HA hoһc FA tính theo mililit (5 mL)

2.3.4 ĈӏQKOѭӧng HA hay FA bҵng HPLC-SEC-UV

+$KD\)$ÿѭӧc chiӃt tӯ mүu phân bón theo mөc 2.3.1VDXÿyÿѭӧc kӃt tӫa SKkQÿRҥn theo mөc 2.3.2ÿӇ thu nhӳng dung dӏch chӭa HA hay FA có thӇ tích là P/+jPOѭӧng HA hay FA cӫa các dung dӏFK+KD\)ÿmSKDORmQJYӟi hӋ sӕ

Df thích hӧS ÿѭӧc phân tích bҵng kӻ thuұt HPLC-SEC-89 WKHR SKѭѫQJ SKiS ngoҥi chuҭn

Dung dӏFK ) KD\ + ÿѭӧc lӑc qua màng lӑc PTFE 0,45 àm, 20 àL dӏch lӑc ÿѭӧc tiêm vào hӋ thӕng HPLC sӱ dөQJÿҫu dò UV/DAD vӟLEѭӟFVyQJÿӏQKOѭӧng

240 nm, cӝt SEC-Vÿѭӡng kính hҥWPNtFKWKѭӟc lӛ xӕScNtFKWKѭӟc cӝt 300 u 7,8 mm) hiӋu Phenomenex BioSep TM ÿѭӧc әn nhiӋt tҥi 40 o C bҵng lò cӝt và hӋ EѫPÿ{Lÿҭ\SKDÿӝQJOjÿӋm phosphate pH 6,8 chӭa Na2SO4 0,025 M vӟi tӕc ÿӝ dòng 0,5 mL/phút SҳFNêÿӗ cӫa dung dӏch H hay F ÿѭӧc ghi nhұQYjOѭXGӳ liӋu trong 30-SK~Wÿҫu

Cách xây dӵQJÿѭӡng chuҭQÿӏQKOѭӧng: dung dӏFK+ÿѭӧc pha loãng bҵng SKDÿӝQJÿӇ WKXÿѭӧc 1 L dung dӏch chӭa HA vӟi các mӭc nӗQJÿӝ khác nhau; và dung dӏFK)ÿҫXWLrQÿѭӧc pha loãng 5 lҫn thành dung dӏFK)VDXÿyWLӃn hành vӟi dung dӏFK)WѭѫQJWӵ QKѭYӟi dung dӏFK+Ĉѭӡng chuҭn biӇu diӉn diӋQWtFKPǊL

HA hay FA theo nӗQJÿӝ cӫa HA hay FA chuҭn cô lұp (C, mg/L)

NӗQJÿӝ HA cӫa dung dӏch H và nӗQJÿӝ FA cӫa dung dӏFK)ÿѭӧc tính toán theo công thӭc (3) ୌ୅Ȁ୊୅ ሺΨሻ ൌ ሺ െ ሻ ͳͲͲͲ ൈ ൈ ୌ୅Ȁ୊୅ ൈ ୤ ൈͳͲͲΨ ୫ኻ୳ ሺ͵ሻ 7URQJÿy

CHA/FA(%) NӗQJÿӝ cӫa HA hay FA tính theo % carbon có trong 1 g mүu phân bón (%, KL/KL);

S DiӋn tích trung bình cӫDPǊL+$KD\)$[Xҩt hiӋn trên sҳFNêÿӗ ÿY dt); b HӋ sӕ chҳn cӫDSKѭѫQJWUuQKÿѭӡng chuҭQÿӏQKOѭӧQJÿYGW a HӋ sӕ góc cӫDSKѭѫQJWUuQKÿѭӡng chuҭQÿӏQKOѭӧng (L/mg);

VHA / FA ThӇ tích dӏch chiӃt HA hay FA tӯ mүu (200 mL hay 0,2 L);

Df HӋ sӕ pha loãng (Df NKL[iFÿӏnh HA và Df NKL[iFÿӏnh FA); mmүu KhӕLOѭӧng mүu phân bón nguyên liӋu (~5 g)

2.3.5 ;iFÿӏnh phân bӕ khӕLOѭӧng cӫa HA và FA

Tӯ sҳFNêÿӗ WKXÿѭӧc, khӕLOѭӧng phân tӱ trung bình và hӋ sӕ phân bӕ khӕi Oѭӧng cӫD +$ KD\ )$ÿѭӧc tính toán bҵng phҫn mӅm Agilent GPC Rev B.01.02 dӵDWUrQÿѭӡng chuҭn khӕLOѭӧng phân tӱ theo thӡL JLDQOѭXJLӳ cӫa polyethylene glycol (PEG) chuҭQÿѭӧc thӇ hiӋn trong Hình 2.10

Hình 2.10 Ĉѭӡng chuҭn khӕLOѭӧng phân tӱ theo thӡLJLDQOѭXJLӳ cӫa các PEG

Ĉӏnh Oѭӧng HA hay FA bҵng HPLC-SEC-UV

Các quy trình chiӃt HA và FA dӵDWUrQÿһFÿLӇm tính tan ӣ pH cao cӫa hai chҩWQj\1JRjLUDÿLӅu kiӋn chiӃt cҫQQJăQFKһn quá trình oxy hóa hoһFQJѭQJWө cӫa các hӧp chҩt humic Trong nghiên cӭu này, hӛn hӧp NaOH/pyrophosphate (pH ÿѭӧc sӱ dөng làm dӏch chiӃt HA và FA vì pyrophosphate có khҧ QăQJWҥo phӭc vӟi ion canxi và nhiӅu ion kim loҥi chuyӇn tiӃSNKiFQKѭVҳWÿӗQJĈLӅu này hӛ trӧ hình thành dҥng HA hay FA tӵ do tan nhanh vào dung dӏch kiӅm [9]

+$KD\)$ÿӅu là hӛn hӧp cӫa nhӳQJÿҥi phân tӱ hӳXFѫNKLWKӡi gian chiӃt quá ngҳn, ta chӍ WKX ÿѭӧc các HA hay FA phân tӱ nhӓ, dүQ ÿӃn sai sӕ trong xác ÿӏQKKjPOѭӧng và phân bӕ khӕLOѭӧng cӫDFK~QJ 1Jѭӧc lҥi, khi thӡi gian chiӃt quá dài các quá trình không mong muӕQ QKѭ Vӵ oxy hóa có thӇ xҧy ra và gây ra nhӳng sai sӕ khác Tәng hàm OѭӧQJ+$Yj)$ÿѭӧF[iFÿӏQKGѭӟi dҥng %C bҵng công thӭc (2) theo TCVN 8561:2010 cho thҩy quá trình chiӃW QrQ ÿѭӧc tiӃn hành ÿӃn 24 giӡ (Bҧng 3.1)

Bҧng 3.1 Khҧo sát thӡi gian chiӃt mүu

3.1.2 Tách HA ra khӓi FA tҥi pH thҩS Yj ÿӏQK Oѭӧng theo TCVN 8561:2010

Trong khi FA tan vào dung dӏFK Qѭӟc muӕi ӣ mӑi pH, HA lҥi chӍ tan vào dung dӏFKQѭӟc muӕi ӣ S+ÿӫ cao và sӁ tҥo thành kӃt tӫa ӣ pH thҩSS+'Rÿy dӏch chiӃt chӭD+$Yj)$ÿѭӧFÿLӅu chӍnh vӅ pH 1, kӃt tӫa hoàn toàn HA ra khӓi dung dӏFKYjWKXÿѭӧc dung dӏch F chӍ chӭD)$6DXÿyNӃt tӫD+$ÿѭӧc hòa tan trong dung dӏFKFyS+Yjÿӏnh mӭFWKXÿѭӧc dung dӏch H chӍ chӭa HA Hàm Oѭӧng HA và FA quy vӅ C (mg/L) cӫa dung dӏFK+Yj)ÿѭӧc phân tích bҵng kӻ thuұt chuҭQÿӝ QJѭӧFWKHRSKѭѫQJSKiSFKXҭQÿӝ oxy hóa ± khӱ, sӱ dөng ferroin làm chҩt chӍ thӏ.

Phân tích HA và FA bҵng sҳc ký rây phân tӱ (HPLC-SEC-UV)

ChiӃt HA và FA tӯ nӅn mүu

Các quy trình chiӃt HA và FA dӵDWUrQÿһFÿLӇm tính tan ӣ pH cao cӫa hai chҩWQj\1JRjLUDÿLӅu kiӋn chiӃt cҫQQJăQFKһn quá trình oxy hóa hoһFQJѭQJWө cӫa các hӧp chҩt humic Trong nghiên cӭu này, hӛn hӧp NaOH/pyrophosphate (pH ÿѭӧc sӱ dөng làm dӏch chiӃt HA và FA vì pyrophosphate có khҧ QăQJWҥo phӭc vӟi ion canxi và nhiӅu ion kim loҥi chuyӇn tiӃSNKiFQKѭVҳWÿӗQJĈLӅu này hӛ trӧ hình thành dҥng HA hay FA tӵ do tan nhanh vào dung dӏch kiӅm [9]

+$KD\)$ÿӅu là hӛn hӧp cӫa nhӳQJÿҥi phân tӱ hӳXFѫNKLWKӡi gian chiӃt quá ngҳn, ta chӍ WKX ÿѭӧc các HA hay FA phân tӱ nhӓ, dүQ ÿӃn sai sӕ trong xác ÿӏQKKjPOѭӧng và phân bӕ khӕLOѭӧng cӫDFK~QJ 1Jѭӧc lҥi, khi thӡi gian chiӃt quá dài các quá trình không mong muӕQ QKѭ Vӵ oxy hóa có thӇ xҧy ra và gây ra nhӳng sai sӕ khác Tәng hàm OѭӧQJ+$Yj)$ÿѭӧF[iFÿӏQKGѭӟi dҥng %C bҵng công thӭc (2) theo TCVN 8561:2010 cho thҩy quá trình chiӃW QrQ ÿѭӧc tiӃn hành ÿӃn 24 giӡ (Bҧng 3.1)

Bҧng 3.1 Khҧo sát thӡi gian chiӃt mүu

Tách HA ra khӓi FA tҥi pH thҩS Yj ÿӏQK Oѭӧng theo TCVN 8561:2010

Trong khi FA tan vào dung dӏFK Qѭӟc muӕi ӣ mӑi pH, HA lҥi chӍ tan vào dung dӏFKQѭӟc muӕi ӣ S+ÿӫ cao và sӁ tҥo thành kӃt tӫa ӣ pH thҩSS+'Rÿy dӏch chiӃt chӭD+$Yj)$ÿѭӧFÿLӅu chӍnh vӅ pH 1, kӃt tӫa hoàn toàn HA ra khӓi dung dӏFKYjWKXÿѭӧc dung dӏch F chӍ chӭD)$6DXÿyNӃt tӫD+$ÿѭӧc hòa tan trong dung dӏFKFyS+Yjÿӏnh mӭFWKXÿѭӧc dung dӏch H chӍ chӭa HA Hàm Oѭӧng HA và FA quy vӅ C (mg/L) cӫa dung dӏFK+Yj)ÿѭӧc phân tích bҵng kӻ thuұt chuҭQÿӝ QJѭӧFWKHRSKѭѫQJSKiSFKXҭQÿӝ oxy hóa ± khӱ, sӱ dөng ferroin làm chҩt chӍ thӏ

Hình 3.1a /ѭXWiFK+$Yj)$Eҵng pH

Hình 3.1b ;iFÿӏnh HA và FA chuҭn H và F cô lұp

Thí nghiӋP ÿѭӧc tiӃn hành 10 lҫn và cho giá trӏ WUXQJ EuQK ÿѭӧc trình bày trong Bҧng 3.2

Bҧng 3.2 NӗQJÿӝ HA và FA cӫa dung dӏch H và dung dӏFK)WѭѫQJӭng

Thông sӕ Dung dӏch H Dung dӏch F

ThӇ tích chuҭQÿӝ mүu trҳng, A 8,15 ± 0,05 8,15 ± 0,05

ThӇ tích chuҭQÿӝ mүu thӱ, B 6,40 ± 0,05 7,15 ± 0,05

ThӇ tích bicromate, VCr(VI) 5,00 5,00

ThӇ tích dung dӏch mүu, Vmүu 5,00 5,00

Phân tích HA và FA bҵng sҳc ký rây phân tӱ (HPLC-SEC-UV)

&iFSKѭѫQJSKiS[iFÿӏnh tәQJ+$Yj)$WKHRSKѭѫQJSKiSFKXҭQÿӝ oxy hóa khӱ ELFURPDWQKѭ7&91FKӍ FKRSKpS[iFÿӏnh phҫQWUăPcarbon cӫa HA hay FA mà không phҧQiQKÿѭӧc phân bӕ khӕLOѭӧng cӫa các HA và FA có trong mүXĈLӅu này có thӇ là mӝt thiӃu sót lӟn vì vai trò cӫa HA và FA là giúp cӕ ÿӏnh các chҩWGLQKGѭӥng cho cây trӗng NӃu phân tӱ khӕi cӫa FA hay HA quá nhӓ sӁ dӉ GjQJWDQYjRQѭӟFQJѭӧc lҥi nӃu phân tӱ khӕi cӫa FA và HA quá lӟQÿӝ OLQKÿӝng cӫDFK~QJFǊQJNpPQrQNKҧ QăQJÿLӅu phӕi chҩWGLQKGѭӥng sӁ bӏ hҥn chӃ >@+ѫQQӳa, viӋF[iFÿӏQKKjPOѭӧng các chҩWKXPLFGѭӟi dҥng tәng hàm Oѭӧng cacbon dӵa trên quá trình oxy hóa có thӇ gây ra các sai sӕ GѭѫQJGRFiF quá trình nhiӉu hóa hӑc và các tҥp chҩt hӳXFѫFyNKҧ QăQJEӏ oxy hóa trong cùng ÿLӅu kiӋQ 'R ÿy YLӋc phân tích HA và FA bҵng kӻ thuұt sҳF Nê ÿҧm bҧo tính chӑn lӑc cӫa kӃt quҧ, bҵng cách loҥi bӓ các quá trình oxy hóa không mong muӕn

Trong nghiên cӭXQj\ÿҫXGz'$'ÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ ÿӏQKOѭӧng HA và FA, Eѭӟc sóng tӯ QPÿӃn 400 nm (Hình 3.2) KӃt quҧ phә hҩp thu cho thҩy mүu trҳQJSKDÿӝng) không hҩSWKXWURQJYQJEѭӟFVyQJQj\YjFyÿӝ әQÿӏnh tӯ 240 nm Trong vùng tӯ 240QPFѭӡQJÿӝ tín hiӋu giҧm dҫn theo chiӅXWăQJEѭӟc sóng 'R ÿy EѭӟF VyQJ QP ÿѭӧc chӑQ ÿӇ ghi nhұn tín hiӋX +$ Yj )$ ĈLӅu Qj\FǊQJSKKӧp vӟi mӝt sӕ nghiên cӭXWUѭӟFÿk\FKҷng hҥn Wu và cӝng sӵ ÿm chӑQEѭӟFVyQJÿӏQKOѭӧQJOjQPÿӇ phân tích HA và FA trong các mүXQѭӟc tӵ nhiên [11]

Hình 3.2 Phә hҩp thu cӫa HA D)$EYjSKDÿӝng (c) ÿѭӧc ghi nhұn bӣLÿҫu dò DAD WURQJYQJEѭӟc sóng 200400 nm

TӕFÿӝ SKDÿӝng ҧQKKѭӣQJÿӃn thӡLJLDQOѭXÿӝ phân giҧLYjÿӝ ÿӕi xӭng cӫa các tín hiӋu sҳc ký 7URQJSKѭѫQJSKiSVҳc ký rây phân tӱ, tӕF ÿӝ dòng càng thҩSÿӝ phân giҧi càng cao Tuy nhiên nӃu tӕFÿӝ dòng quá thҩp sӁ mҩWÿӝ nhҥy và gây lãng phí thӡLJLDQ'RÿyWURQJÿӅ WjLQj\ÿӇ phân tách hӛn hӧp HA và FA cӫa mүX SKkQ EyQ ÿӕi chӭQJ FK~QJ W{L ÿm NKҧo sát tҥi 4 tӕF ÿӝ GzQJ QKѭ WURQJBҧng 3.3

Hình 3.3 Sҳc Nêÿӗ thӡLJLDQOѭXWKHRWӕFÿӝ ÿzQJPOSK~WFӫa FA: (a)1,0; (b)

Bҧng 3.3 Thông sӕ khҧo sát tӕWÿӝ dòng HA và FA

HA FA tR / W1/2 Ĉӝ ÿӕi xӭng tR / W1/2 Ĉӝ ÿӕi xӭng 0,25 43,46/6,482 1,40 43,00/2,341 0,58

Trong nghiên cӭu này, tӕFÿӝ dòng càng thҩp thì thӡLJLDQOѭXFjQJOkXiS suҩt hӋ thӕng thҩp TӕF ÿӝ dòng càng cao sӕ ÿƭD Oê WKX\Ӄt giҧm và thӡL JLDQ OѭX ngҳn, áp suҩt hӋ thӕng cao TӕF ÿӝ dòng tӕL ѭX ÿѭӧc chӑn là 0,5 mL/phút vì thӡi JLDQOѭXQJҳQGѭӟLSK~Wÿӝ ÿӕi xӭng (hӋ sӕ NpRÿX{L7Iÿҥt yêu cҫu (0,5 < Tf

CҫQ OѭX ê vӟi hҥn chӃ cӫa cӝt sҳc ký, viӋF [iF ÿӏQK ÿӗng thӡi HA và FA WURQJÿLӅu kiӋn nghiên cӭXNK{QJÿҥt yêu cҫX'RÿyYLӋFÿӏQKOѭӧng HA và FA ÿѭӧc tiӃn hành trên hai dung dӏFK+Yj)ÿӝc lұp KӃt quҧ sҳFNêÿӗ phân tích HA Yj)$ÿѭӧc thӇ hiӋn trong Hình 3.4 và các thông sӕ tín hiӋX ÿѭӧc thӇ hiӋn trong Bҧng 3.4

Hình 3.4 SҳFNêÿӗ cӫa HA và FA vӟLSKDÿӝQJOjQѭӟFÿӋm phosphate pH 6,8 chӭa Na2SO4 0,025 M) vӟi tӕFÿӝ dòng 0,5 mL/phút

Bҧng 3.4 Thông sӕ tín hiӋu sҳc ký cӫa HA và FA

ThӡLJLDQOѭXSK~W 20,9 21,1 Ĉӝ ÿӕi xӭng, Tf

Cách xây dӵQJÿѭӡng chuҭQÿӏQKOѭӧng HA và FA: Dung dӏch H cáo thành phҫn C HA 172,0 ± 2,4 C (mg/l) ÿѭӧc pha loãng bҵQJSKDÿӝQJÿӇ WKXÿѭӧc 1 L dung dӏch chӭa HA vӟi các mӭc nӗQJÿӝ khác nhau; và dung dӏch F vӟi thành phҫn

C FA 98,0 ± 1,4 (mg/l) WUѭӟc tiêQÿѭӧc pha loãng 5 lҫn thành dung dӏFK)VDXÿy tiӃn hành vӟi dung dӏFK)WѭѫQJWӵ QKѭYӟi dung dӏFK+Ĉѭӡng chuҭn biӇu diӉn diӋQWtFKPǊL+$KD\)$WKHRQӗQJÿӝ cӫa HA hay FA chuҭn cô lұp (C, mg/L) thӇ hiӋn Hình 3.5 y = 69.495x - 625.55 R² = 0.9993

Hình 3.5 Ĉѭӡng chuҭn và sҳFNêÿӗ ÿѭӡng chuҭn HA và FA

+$KD\)$ÿѭӧc chiӃt tӯ mүu phân bón theo mөc 2.3.1VDXÿyÿѭӧc kӃt tӫa SKkQÿRҥn theo mөc 2.3.2ÿӇ thu nhӳng dung dӏch chӭa HA hay FA có thӇ tích là

200 ml Các dung dӏch chӭa H$KD\)$ÿmSKDORmQJYӟi hӋ sӕ Df thích hӧSÿѭӧc ghi nhұQWKHRSKѭѫQJSKiS+3/&-SEC vӟLÿLӅu kiӋQÿmQrXWURQJmөc 2.3.4 Hàm OѭӧQJ+$KD\)$ÿѭӧF[iFÿӏQKWKHRSKѭѫQJSKiSQJRҥi chuҭn vӟLÿѭӡng chuҭn biӇu diӉn diӋQWtFKPǊL+$KD\)$WKHRQӗQJÿӝ cӫa HA hay FA chuҭn cô lұp ( C mg/L), ÿѭӧc thӇ hiӋn trong Hình 3.5 y = 36.96x - 8.09 R² = 0.9977 0

Hình 3.6 /ѭXÿӗ phân tích HA và FA bҵng HPLC-SEC-UV)

KӃt quҧ phân tích nӗQJÿӝ HA và FA (quy vӅ phҫQWUăPNKӕLOѭӧng cacbon) tӯ mүu phân bón bҵng kӻ thuұt HPLC-SEC-UV, sӱ dөQJSKѭѫQJSKiSQJoҥi chuҭn ÿѭӧc trình bày trong Bҧng 3.5 (thí nghiӋP ÿѭӧc tiӃn hành 10 lҫn và cho giá trӏ trung bình)

Bҧng 3.5 NӗQJÿӝ cӫa HA và FA tӯ dung dӏch H và dung dӏch F phân tích bҵng HPLC-SEC-UV

KhӕLOѭӧng mүu phân bón, mmүu 5,045 5,045

Phân bӕ khӕLOѭӧng cӫD+$Yj)$ÿѭӧc tính toán dӵDWUrQÿѭӡng chuҭn cӫa SRO\HWK\OHQHJO\FRO3(*Ĉk\OjORҥLSRO\PHUNK{QJPDQJÿLӋn; trong khi HA và )$OjFiFLRQÿDÿLӋQWtFKWURQJP{LWUѭӡng trung tính, dүQÿӃn các sai khác trong bán kính hydrat cӫa các chҩt KXPLFQj\'RÿyPӕLWѭѫQJTXDQJLӳDNtFKWKѭӟc và khӕLOѭӧng phân tӱ cӫa HA và FA sӁ khác rҩt nhiӅu so vӟL3(* ĈLӅu này có thӇ ÿѭӧc giҧm bӟt khi lӵc ion cӫDSKDÿӝQJÿӫ lӟn Trong nghiên cӭXQj\SKDÿӝng phosphat pH 6,8 có bә sung thêm Na2SO4 0,025 M gL~S WăQJ Oӵc ion và giҧP ÿӝ nhӟt cӫDSKDÿӝng

Sau khi tӕLѭXKyDÿLӅu kiӋn phân tích (mөc 3.1.3), kӃt quҧ ÿiQKJLiFKLWLӃt phân bӕ khӕL Oѭӧng cӫa HA và FA trong mүu ÿѭӧc trình bày trong Hình 3.6 và ÿѭӧc tóm tҳt trong Bҧng 3.6

Hình 3.6 Phân bӕ khӕLOѭӧng cӫa HA và FA trong mүu

Bҧng 3.6 Phân bӕ MW cӫa HA và FA trong dung dӏFK+Yj)WѭѫQJӭng

KhӕLOѭӧng trung bình sӕ, 0ࡄ n 1710 1081

KhӕLOѭӧng trung bình khӕi, 0ࡄ w 3743 1572

KӃt quҧ cho thҩy hӋ sӕ phân tán cӫa HA lӟQ KѫQ )$ FKӭng tӓ +$ Fy ÿӝ phân tán khӕLOѭӧng lӟQKѫQGRÿyEӅ rӝng chân peak sҳc ký lӟQKѫQQKLӅu so vӟi )$+ѫQQӳDNtFKWKѭӟc và khӕLOѭӧng cӫa các loҥi polymer này chӏu ҧQKKѭӣng rҩt lӟn vӟLÿLӅu kiӋQSKkQWtFKQKѭGXQJP{LS+OӵFLRQFiFLRQÿӕLô9LӋc phõn tích các HA và FA chuҭn trên thӏ WUѭӡng (tӯ Aldrich Sigma chҷng hҥn) cho thҩy kӃt quҧ khác biӋt vӅ ÿӝ phân bӕ khӕL Oѭӧng này, chӭng minh HA và FA có cҩu trúc không rõ ràng và nhҩt quán 'RÿyNhông thӇ dùng chuҭn trên thӏ WUѭӡQJÿӇ ÿӏnh Oѭӧng FA và HA trong mүu nguyên liӋu hay mүu thành phҭm Nói tóm lҥi, nӃu muӕQÿӏQKOѭӧng HA hay FA trong loҥi mүu nào thì phҧi chuҭn bӏ chuҭn HA và FA cô lұp tӯ mүXÿӕi chӭQJÿһFWUѭQJFKRORҥi mүXÿDQJ[HP[pW

Xác nhұn giá trӏ sӱ dөQJSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKWUrQPүu nguyên liӋu

Ĉӝ chӑn lӑc

Ĉӝ chӑn lӑFÿѭӧFÿiQKJLiEҵng viӋc phân tích lһp 3 lҫn dung dӏch chuҭn cô lұp HA (8,6 mg/L), FA (0,98 mg/L) và dung dӏch mүu trҳng là dung dӏch chiӃt (theo TCVN 8561:2010)

Hình 3.7 SҳFNêÿӗ các dung dӏch HA (8,6 mg/L), FA (0,98 mg/L) so vӟi nӅn

KӃt quҧ cho thҩy các dung dӏch chuҭQ+$FKRPǊLVҳc ký trong khoҧng thӡi JLDQÿһFWUѭQJ-25 phút), dung dӏch chuҭQ)$FKRPǊLVҳc ký trong khoҧng thӡi gian ÿһFWUѭQJ-25 phút) Tuy nhiên, dung dӏch mүu trҳng không TXDQViWÿѭӧc tín hiӋu trong khoҧng thӡLJLDQÿһFWUѭQJFӫa HA hay FA KӃt quҧ này cho thҩy HA và FA chӑn lӑc tӕt ӣ Eѭӟc sóng 240 nm.

Tính phù hӧp hӋ thӕng

Tính phù hӧp hӋ thӕng cӫDSKѭѫQJSKiSÿѭӧFÿiQKJLiWK{QJTXDJLiWUӏ ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi (RSD) khi tiӃn hành phân tích 6 lҫn mүu trҳng thêm chuҭn HA và FA tҥi nӗQJÿӝ lӟQKѫQKRһc bҵng 5uMQL

KӃt quҧ thӇ hiӋn trong Bҧng 3.6 cho thҩy qX\WUuQKSKkQWtFKÿҥWWtQKWѭѫQJ thích hӋ thӕng do RSD cӫa thӡLJLDQOѭXYjGLӋQWtFKSHDNEpKѫQ

Hình 3.8 SҳFNêÿӗ khҧRViWÿӝ lұp lҥi HA và FA

Bҧng 3.6 Tính phù hӧp cӫa hӋ thӕQJÿӕi vӟi HA và FA

KӃt quҧ thӇ hiӋn trong Bҧng 3.6 cho thҩy qX\WUuQKSKkQWtFKÿҥWWtQKWѭѫQJ thích hӋ thӕng do RSD vӅ thӡLJLDQOѭXYjGLӋn tích peak cӫa HA và FA nhӓ KѫQ 2% phù hӧp vӟi yêu cҫu

3.2.3 ;iFÿӏnh khoҧng tuyӃQWtQKYjÿѭӡng chuҭn

Khoҧng tuyӃn tính cӫa mӝWSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKOjNKRҧng nӗQJÿӝ ӣ ÿy có sӵ phө thuӝc tuyӃn tính giӳDÿҥLOѭӧQJÿRÿѭӧc và nӗQJÿӝ chҩt phân tích

&iFK[iFÿӏnh: TiӃn hành phân tích sҳc ký dung dӏch chuҭn có nӗQJÿӝ thay ÿәi (tӕi thiӇu 6 nӗQJÿӝ khác nhau), vӁ ÿѭӡng cong phө thuӝc giӳD ÿҥLOѭӧQJÿR ÿѭӧc và nӗQJÿӝ chҩWSKkQWtFK[iFÿӏnh khoҧng tuyӃn tính Ĉѭӡng chuҭQÿҥt yêu cҫXYuFy5 2 5 2 là hӋ sӕ WѭѫQJTXDQEuQKSKѭѫQJYjQӗQJÿӝ WtQKWRiQÿѭӧc trên tӯQJÿLӇm chuҭn không lӋch quá 15% so vӟi giá trӏ thӵc, ngoҥi trӯ nӗQJÿӝ tҥLÿLӇP04/NK{QJYѭӧt qua 20%

Bҧng 3.7 KӃt quҧ khҧo sát diӋn tích peak HA theo nӗQJÿӝ HA trong dung dӏch

(àL) V H (àL) S PǊL ÿYGW C (mg/L)

Hình 3.9 Ĉѭӡng chuҭn HA trên mүu nguyên liӋu

Bҧng 3.8 KӃt quҧ khҧo sát diӋQWtFKPǊL)$WKHRQӗQJÿӝ FA trong dung dӏch F

STT Tờn mүu V SKDÿӝng (àL) V F/5 (àL) S PǊL ÿYGW C (mg/L)

Hình 3.10 Ĉѭӡng chuҭn FA trên mүu nguyên liӋu

Bҧng 3.9 Khoҧng tuyӃQWtQKYjÿѭӡng chuҭn cӫa HA và FA

Khoҧng tuyӃn tính 8,6 172,0 (C, mg/L) 0,98 19,6 (C, mg/L) Ĉѭӡng chuҭn y = 69,49x ± 625,5 y = 36,95x ± 9,319

Vӟi kӃt quҧ hӋ sӕ WѭѫQJTXDQ5 2 ÿӕi vӟL+$Yj)$ÿLӅu lӟn KѫQSKKӧp tiêu chí yêu cҫu (R 2 > 0,99) Khoҧng tuyӃn tính cӫa HA và FA QKѭBҧng 3.9

3.2.4 ;iF ÿӏnh giӟi hҥn phát hiӋn (MDL) và giӟi hҥQ ÿӏQK Oѭӧng (MQL)

MDL là nӗQJ ÿӝ thҩp nhҩt cӫa chҩt phân tích trong mүu có thӇ phát hiӋn ÿѭӧFQKѭQJFKѭDWKӇ ÿӏQKOѭӧQJÿѭӧFÿӕi vӟLSKѭѫQJSKiSÿӏQKOѭӧng) Cách xác ÿӏnh MDL: phân tích mүu trҳng thêm chuҭn ӣ nӗQJÿӝ thҩp còn có thӇ xuҩt hiӋn tín hiӋu cӫa chҩt phân tích Sӕ lҫn phân tích lһp lҥi 6 lҫQ;iFÿӏnh tӍ lӋ tín hiӋu chia cho nhiӉX 61 VLJQDO WR QRLVH UDWLR WURQJ ÿy 6 Oj FKLӅu cao tín hiӋu cӫa chҩt phân tích, N là nhiӉu nӅQ0'/ÿѭӧc chҩp nhұn tҥi nӗQJÿӝ mà tҥLÿyWtQKLӋu lӟn gҩp 2-3 lҫn nhiӉXÿѭӡng nӅQWK{QJWKѭӡng lҩy S/N = 3

MQL là nӗQJÿӝ tӕi thiӇu cӫa mӝt chҩt có trong mүu thӱ mà ta có thӇ ÿӏnh Oѭӧng bҵQJSKѭѫQJSKiSNKҧRViW&iFK[iFÿӏnh MQL: phân tích mүu trҳng thêm chuҭn ӣ nӗQJÿӝ có thӇ ÿӏQKOѭӧQJWKѭӡng lҩy S/N = 10) Sӕ lҫn phân tích lһp lҥi

12 lҫn Tính toán hiӋu suҩt thu hӗLYjÿӝ tái lһp Tiêu chí chҩp nhұn MQL: hiӋu suҩt thu hӗi tҥi nӗQJÿӝ 04/Fyÿӝ thu hӗi = 80110 %

Bҧng 3.10 MDL và MQL cӫa quy trình phân tích HA, FA

KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi cӫa MQL HA: 98 % và FA: 96% phù hӧp vӟi tiêu chí yêu cҫu ( 8 ± 120%) Giá trӏ giӟi hҥn hҥn phát hiӋn và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng cӫDSKѭѫQJ pháp theo Bҧng 3.10

3.2.5 Ĉӝ FKtQK[iFÿӝ lһp lҥi RSD r ÿӝ tái lһp RSD R Yjÿӝ ÿ~QJÿӝ thu hӗi)

&iFK[iFÿӏnh ÿӝ lһp lҥi RSDr: chuҭn bӏ mүu thêm chuҭn HA, FA và thӵc hiӋn phân tích 6 lҫQ7tQKÿӝ lӋch chuҭQ6'Yjÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi RSDr tҥi các mӭc nӗQJÿӝ thêm vào theo công thӭc: ൌ ඩ ͳ െ ͳ෍ሺ ୩ െ ୲ୠ ሻ ଶ ୬ ୩ୀଵ ୰ Ψ ൌ Ψ ൌ ͳͲͲ ୲ୠ Cách [iF ÿӏQK ÿӝ tái lһp RSDR: tiӃn hành phân tích các mүu thêm chuҭn WѭѫQJWӵ QKѭÿӝ lһp lҥLÿѭӧc thӵc hiӋn 1 ngày khác do mӝt kiӇm nghiӋm viên khác Ĉӝ ÿ~QJÿӝ thu hӗi) cӫD SKѭѫQJSKiS OjNKiLQLӋm chӍ mӭF ÿӝ gҫn nhau giӳa giá trӏ trung bình cӫa kӃt quҧ thӱ nghiӋm và giá trӏ thӵc hoһc giá trӏ ÿѭӧc chҩp nhұQ Oj ÿ~QJ &iFK [iF ÿӏQK ÿӝ thu hӗi: tiӃn hành phân tích các mүu thêm chuҭn WѭѫQJWӵ QKѭÿ{Oһp lҥLYjÿӝ tái lһSWtQKÿӝ thu hӗi theo công thӭc:

Ctt: nӗQJÿӝ thӵc tӃ WKXÿѭӧc

7LrXFKtÿiQKJLiÿӝ FKtQK[iF WK{QJTXD ÿӝ lһp lҥi RSDrYj ÿӝ tái lһp RSDRÿӝ ÿ~QJWK{QJTXDÿӝ thu hӗi) và kӃt quҧ ÿiQKJLiSKѭѫQJSKiSÿѭӧc lҫn Oѭӧt trình bày trong Bҧng 3.11 và Bҧng 3.12

Bҧng 3.11 7LrXFKtÿiQKJLiÿӝ chính xác qua RSDr và RSDR

Bҧng 3.12 KӃt quҧ ÿiQKJLi56'r, RSDR Yjÿӝ ÿ~QJFӫDSKѭѫQJSKiS

KӃt quҧ Tiêu chí KӃt quҧ Tiêu chí Tiêu chí Tiêu chí

(98,0 mg/L) 5,6 < 7,3 3,8 < 11 90,7 80-110 Tҥi nӗQJÿӝ khҧo sát HA trong khoҧng nӗQJÿӝ 100 ppm, FA trong khoҧng

10 ppm, kӃt quҧ ÿӝ lұp lҥi RSDr, RSDRYjÿӝ ÿ~QJFӫD+$Yj)$WKXÿѭӧFQKѭ trong Bҧng 3.12 phù hӧp vӟi yêu cҫu cӫa tiêu chí xác nhұn giá trӏ sӱ dөng cӫa

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿR

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDSKpSÿRXQFHUWDLQW\± U) là thông sӕ gҳn vӟi kӃt quҧ cӫD SKpS ÿR ÿҥi diӋQ FKR ÿӝ phân tán cӫa kӃt quҧ &iFK [iF ÿӏQK ÿӝ không ÿҧm bҧRÿR

Up ÿѭӧc tính tӯ ÿӝ tái lһp, %Up = %RSDR

Ua ÿѭӧc tính tӯ ÿӝ chӋch cӫa hiӋu suҩt thu hӗi, Ua = 100 ÿӝ thu hӗi Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRPӣ rӝng vӟi hӋ sӕ phӫ k = 2

7LrXFKtÿiQKJLiÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRPӣ rӝng (CAC/GL 54-2004) và kӃt quҧ ÿiQKJLiÿѭӧc lҫQOѭӧt trình bày trong Bҧng 3.13 và Bҧng 3.14

Bҧng 3.13 7LrXFKtÿiQKJLiÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRPӣ rӝng

STT NӗQJÿӝ Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧo ÿRPӣ rӝng (%)

Bҧng 3.14 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa quy trình phân tích HA, FA

KӃt quҧ Tiêu chí KӃt quҧ Tiêu chí

KӃt quҧ ÿiQKJLiÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRmӣ rӝng vӟLÿӝ tin cұy 95 %, giá tính WRiQÿѭӧc phù hӧp vӟLWLrXFKtÿiQKJLi

Ĉһc tính cӫa axit humic, axit fulvic và humin

Axit humic Axit fulvic Humin

Màu sҳc Màu nâu hoһc xám Màu vàng 0jXÿHQ

Tan trong tҩt cҧ FiFP{LWUѭӡng Qѭӟc

Không tan trong P{LWUѭӡQJQѭӟc

Humin là mӝt phҫn cӫa chҩt humic mà không tan trong kiӅm (pH cao) và không tan trong axit (pH thҩp) Humin là chҩt không tan trong Qѭӟc vӟi bҩWNuÿLӅu kiӋn pH nào Hӧp chҩWKXPLQÿѭӧc coi là nhӳng chҩt hӳXFѫSKkQ Wӱ lӟn, vì khӕi Oѭӧng phân tӱ cӫa nó xҩp xӍ tӯ ÿӃn 10.000.000, so vӟi khӕLOѭӧng phân tӱ cӫa hӧp chҩW ÿѭӡng chӍ xҩp xӍ tӯ ÿӃQ +XPLQ WURQJ ÿҩt là phҫn khó ÿѭӧc phân hӫy nhҩt trong sӕ các chҩWKXPLFĈһc tính lý hóa cӫDQyFǊQJPӟi chӍ ÿѭӧc hiӇu rõ phҫn nào Mӝt vài chӭFQăQJFKtQKFӫDKXPLQWURQJÿҩt bao gӗm cҧi thiӋn khҧ QăQJJLӳ Qѭӟc, cҧi thiӋn cҩXWU~FÿҩWGX\WUuÿӝ әQÿӏnh cӫDÿҩWÿyQJYDL trò trong hӋ thӕng chuyӇQ ÿәL FDWLRQ Yj QKuQ FKXQJ WăQJ ÿӝ màu mӥ FKR ÿҩt NhӳQJÿһc tính quan trӑng này khiӃn humin trӣ thành yӃu tӕ then chӕWJL~Sÿҩt màu mӥ [1]

Axit humic (HA) bao gӗm hӛn hӧp axit béo yӃu (mҥch thҷQJYjD[LWWKѫP(mҥch vòng) không tan trong dung dӏFKD[LWQKѭQJWDQWURQJGXQJGӏch kiӅm HA bao gӗm các chҩt humic kӃt tӫa tӯ dung dӏFKNKLÿӝ pH thҩSKѫQ

$[LWKXPLFÿѭӧc coi là chҩWÿDSKkQWiQYuQKӳQJÿһc tính hóa hӑc phӭc tҥp Xét vӅ mһW NtFK WKѭӟF +$ ÿѭӧc coi là hӧp chҩt polymer tuyӃn tính tӗn tҥi dҥng cuӝn ngүu nhiên kӃt hӧp vӟi dây kӃt nӕi Trung bình 35% phân tӱ HA là chҩWWKѫP (mҥch vòng) trong khi phҫn còn lҥi là chҩt béo (mҥch thҷQJ.tFKWKѭӟc cӫa phân tӱ HA xҩp xӍ tӯ ÿӃn 100.000 Các phân tӱ HA sҹn sàng liên kӃt vӟi khoáng VpWÿӇ tҥo thành hӧp chҩt sét hӳXFѫәQÿӏnh Các mҳc xích cӫa hӧp chҩt cao phân tӱ này có khҧ QăQJ NӃt nӕi các chҩt hóa hӑc hӳX Fѫ Wәng hӧp và tӵ nhiên vào trong mӝt chuӛi dҥQJOѭӟL>@$[LWKXPLFFǊQJGӉ dàng tҥo thành hӧp chҩt muӕi vӟi các nguyên tӕ khoáng chҩWY{Fѫ3KkQWtFKFKLӃt xuҩt HA tӗn tҥi trong tӵ nhiên chӍ ra sӵ xuҩt hiӋn cӫa 60 nguyên tӕ khoáng chҩt khác nhau tӗn tҥi trong nó Nhӳng nguyên tӕ YLOѭӧng này gҳn chһt vӟi phân tӱ axit humic dӉ GjQJÿѭӧc các sinh vұt sӕng hҩp thө Do vұy, HA có chӭFQăQJTXDQWURQJWURQJTXiWUuQKFKX\Ӈn hóa ion và quá trình chelat kim loҥi Mӝt sӕ cҩX WU~F ÿLӇQ KuQK +$ ÿѭӧc trình bày trong

Hình 1.1 CҩXWU~FÿLӇn hình HA (hình trên) và cҩu trúc hóa hӑc cӫa HA dӵa trên các sҧn phҭPR[\KyDKuQKGѭӟi)

Hình 1.2 Cҩu trúc mô hình HA hai chiӅu

Axit fulvic là hӛn hӧp cӫD D[LW EpR Yj D[LW WKѫP\ӃX WDQ WURQJ Qѭӟc ӣ các ÿLӅu kiӋn pH khác nhau (axit, trung tính và kiӅm) [1] FA ÿѭӧc xem là mӝt polymer ÿDSKkQ tӱ vӟi cҩXWU~FYjÿһFÿLӇPWKD\ÿәi cùng vӟi nguӗn gӕFYjP{LWUѭӡng vi sinh GiӕQJQKѭHA, quá trình tҥo FA xҧy ra tӵ QKLrQWURQJQѭӟFÿҩt và than bùn

&K~QJÿѭӧc tҥo ra bӣi sӵ phân hӫy hóa hӑc và vi khuҭn cӫa thӵc vұt Thành phҫn và hình dҥQJNKiÿDGҥQJ.tFKWKѭӟc cӫa FA nhӓ KѫQ+$Yӟi khӕLOѭӧng phân tӱ chӍ xҩp xӍ tӯ ÿӃQ )$ Fy KjP Oѭӧng oxy gҩS ÿ{L +$ FA có chӭa nhiӅu nhóm hoҥt tính phҧn ӭng, bao gӗm carboxyl, hydroxyl, carbonyl, phenol, quinone và semiquinone Nhӳng nhóm phҧn ӭng này làm cho FA có phҧn ӭng hóa hӑFFDRKѫQ trӣ thành mӝt chҩt có tính chҩt tҥo phӭc chelate hóa kim loҥi và chӕng oxy hoá mҥnh Khҧ QăQJFKX\ӇQÿәi ion cӫDIXOYLFFǊQJFDRJҩSÿ{L+$>@

'RNtFKWKѭӟc phân tӱ WѭѫQJÿӕi nhӓ, FA có thӇ dӉ GjQJÿѭӧc hҩp thө qua rӉ Fk\WKkQYjOiGRÿyFK~QJPDQJWKHRFiFYLOѭӧng tӯ bӅ mһt vào tұn trong mô Axit fulvic là thành phҫn chính cӫa các loҥi phân bón lá chҩWOѭӧng cao Các dҥng phân bón lá chӭa FA có khҧ QăQJ FKHODWH KyD FiF YL Oѭӧng ӣ mӝW JLDL ÿRҥn phát triӇn nhҩWÿӏQKGRÿyFyWKӇ ÿѭӧFGQJQKѭPӝWNƭWKXұWÿӇ tӕLÿDKyDQăQJVXҩt cây trӗQJ KL ÿѭӧc bón vào cây, FA sӁ vұn chuyӇQ FiF YL Oѭӧng chӭa phӭc hӧp FKHODWH ÿӃn trӵc tiӃS FiF Fѫ TXDQ Wәng hӧp cӫa tӃ bào ChҩW Oѭӧng cӫa FA ÿѭӧc ÿiQKJLiWK{QJTXDVӕ Oѭӧng nhóm chӭc có trên mӛi phân tӱ CҩXWU~FÿLӇn hình cӫa )$ÿѭӧc trình bày trong Hình 1.3

Hình 1.3 Cҩu trúc cӫa mӝt FA ÿLӇn hình tӯ tӵ nhiên

1.1.4 Vai trò quan trӑng cӫa chҩt humic vӟi cây trӗng ĈһFWtQKWtFKÿLӋn cӫa chҩt humic ҧQKKѭӣng tӟi nhiӅu phҧn ӭng hóa hӑc Cҧ KDLQKyP+$Yj)$ÿӅXÿѭӧc công nhұQOLrQTXDQÿӃn 3 phҧn ӭng hóa hӑc nәi bұt, ÿyOjK~WWƭQKÿLӋn, hình thành phӭc hӧp chelate và cҫu nӕLQѭӟc [1]