Luận văn thạc sĩ Kỹ thuật hóa học: Xây dựng phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên nền gạo và hồ tiêu

THUӔC BҦO Vӊ THӴC VҰT

Thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt

Thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt còn gӑi là thuӕc trӯ dӏch hҥi hoһc sҧn phҭPQ{QJGѭӧc, bao gӗm nhӳng chӃ phҭPGQJÿӇ phòng trӯ các sinh vұt gây hҥi tài nguyên thӵc vұt, các chӃ phҭm có tác dөQJ[XDÿXәi hoһc thu hút các loҥi sinh vұt gây hҥi tài nguyên thӵc vұWÿӃQÿӇ tiêu diӋt Tài nguyên thӵc vұWÿѭӧc bҧo vӋ bao gӗm cây trӗng và các sҧn phҭm cӫa chúng Nhӳng sinh vұt gây hҥi tài nguyên thӵc vұt còn gӑi là dӏch hҥi bao gӗm sâu hҥi, bӋnh hҥi, cӓ dҥi, chuӝt và các tác nhân sinh vұt gây hҥi khác [2]

Tӯ QăP7&1FRQQJѭӡLÿmELӃt sӱ dөng thuӕc trӯ dӏch hҥLÿӇ QJăQFҧn sӵ gây hҥi cho mùa vө Thuӕc trӯ dӏch hҥLÿҫXWLrQÿѭӧc sӱ dөng là /ѭXKXǤnh Vào thӃ kӹ thӭ 15 chҩWÿӝc hóa hӑFÿѭӧc biӃWÿӃQQKѭOj asen (thҥch tín), thӫy ngân, chì ÿmÿѭӧc áp dөQJÿӇ tiêu diӋt dӏch hҥi [3] Ӣ thӃ kӹ XVII, muӕi sunfat nicotin ÿѭӧc chiӃt xuҩt tӯ lá cây thuӕc lá ÿѭӧc sӱ dөQJQKѭORҥi thuӕc trӯ côn trùng ThӃ kӹ XIX QJѭӡi ta biӃWÿӃn hai loҥi thuӕc dҥng tӵ nhiên là pyrethrum tìm thҩy ӣ các loài cây chi c~Fÿҥi ÿRi (Chrysanthemum) và rotenon tìm thҩy tӯ rӉ các loài cây nhiӋWÿӟi thuӝc hӑ Ĉұu [2]

1ăP Paul Müller QJѭӡi Ĉӭc phát hiӋn ra DDT có hiӋu lӵc rҩt mҥQKÿӕi vӟi côn trùng, và nhanh chóng ÿѭӧc sӱ dөng rӝng rãi thӃ giӟL 1KѭQJ ÿӃQ QăP QJѭӡi ta phát hiӋn nó ҧQKKѭӣQJÿӃn cá, chim YjÿHGӑDÿӃn sӵ ÿDGҥng sinh hӑc ''7ÿѭӧc sӱ dөng ӣ ít nhҩWOjQѭӟc, hiӋn nay DDT vүQÿѭӧc sӱ dөng ӣ nhӳng quӕc gia nhiӋWÿӟLÿӇ QJăQFKһn bӋnh sӕt rét vì nó có khҧ QăQJWLrXGLӋt muӛi rҩt mҥnh và mӝt sӕ côn trùng mang bӋnh truyӅn nhiӉm khác [1] Sӱ dөng thuӕc trӯ dӏch hҥi QJj\FjQJJLDWăQJWӯ QăP 1950+jQJQăPNKRҧng 2,5 triӋu tҩn thuӕc sҧn xuҩWÿѭӧc sӱ dөQJFKRÿӗng ruӝng

Thuӕc BVTV trong sҧn xuҩt nông nghiӋp tҥo ra nhiӅu lӧLtFKÿһc biӋt là phòng, trӯ sâu bӋnh gây hҥLJL~SWăQJQăQJVXҩt, sҧQOѭӧng, bҧo quҧn nông sҧn Các nhà chuyên môn cho rҵng, thiӃXÿLF{QJFө Qj\KѫQmӝt nӱa sҧQOѭӧQJOѭѫQJWKӵc toàn cҫu sӁ bӏ thҩt thoát do tác hҥi cӫa sâu, bӋnh và cӓ dҥi, gây thiӋt hҥi lӟn vӅ kinh tӃ và WiFÿӝng xҩXÿӃQÿӡi sӕng, thu nhұp cӫDQJѭӡi nông dân Theo Cөc BVTV - Bӝ Nông nghiӋp và phát triӇn nông thôn, ViӋt Nam nҵm trong vùng khí hұu nhiӋWÿӟi vӟLÿһc thù nóng ҭPPѭDQKLӅu, tҥo thuұn lӧi cho phát triӇn nông nghiӋSQKѭQJÿӗng thӡi FǊQJOjÿLӅu kiӋn cho nhӳng loҥi sinh vұt gây hҥi sinh sôi, nҧy nӣ nhanh Cùng vӟi ÿyYҩQÿӅ thâm canh tăQJQăQJVXҩt và biӃQÿәi khí hұXFǊQJNKLӃn cho nhiӅu sinh vұt gây hҥi phát sinh, phá hoҥi trên diӋn rӝng Trong nhӳQJWUѭӡng hӧp nêu trên, nӃu không sӱ dөng thuӕF%979ÿӇ phòng, trӯ dӏch bӋnh, ngành nông nghiӋp sӁ tәn hҥi rҩt lӟn

Lӧi ích mà thuӕc BVTV mang lҥi là không thӇ bàn cãi, tuy nhiên viӋc lҥm dөng hoһc sӱ dөng thuӕc BVTV không phù hӧp gây nên các tác hҥi to lӟn Sӱ dөng thuӕc

%979WX\ÿHPOҥi hiӋu quҧ tӭc thӡLQKDQKFKyQJQKѭQJOҥi gây ra nhӳng hӋ quҧ nghiêm trӑng trên nhiӅu mһt lâu dài vӅ sau

Trong tӵ nhiên, có các loài gây hҥLWKuFǊQJFyFiFORjLFyOӧi, các loài thiên ÿӏch ÿӇ cân bҵng hӋ sinh thái Thuӕc BVTV có tác dөng tiêu diӋt các loài gây hҥLQKѭQJ FǊQJÿmJLӃt chӃt rҩt nhiӅu loài có lӧi Nhӳng loҥLWKLrQÿӏFKQKѭRQJNtVLQKKD\F{Q trùng bҳt mӗL WKѭӡng nhҥy cҧm vӟi thuӕF KѫQ QKӳng loài gây hҥi Sau khi dùng thuӕc, sӕ Oѭӧng côn trùng và sâu gây hҥi chӃt rҩt nhiӅXOjPFiFORjLWKLrQÿӏch bӏ thiӃu thӭFăQYjFKӃt dҫn, phҫn khác thì lҥi bӏ ngӝ ÿӝc tӯ con mӗLÿmEӏ trúng thuӕc 7KHR3LPHWHOÿӇ chӕng lҥi 1000 loҥi sâu hҥi thì thuӕF%979ÿmWiFÿӝQJÿӃn KѫQ loài sinh vұt không có hҥi mà còn quan trӑQJÿӕi vӟi sӵ tӗn tҥi và phát triӇn cӫDFRQQJѭӡi [4]

Sau mӝt thӡi gian dùng thuӕc BVTV, nhӳng loài dӏch hҥi chӫ yӃXWUѭӟFÿyEӏ suy yӃu, gây hҥLNK{QJÿiQJNӇ1Jѭӧc lҥi, nhӳQJÿӕLWѭӧng mà bӏ xem nhҽ WUѭӟFÿk\ gây hҥi ít thì lҥi phát triӇn mҥnh lên và thành dӏch hҥi nguy hiӇm, gây tәn thҩt nһng nӅ Nhӳng dӏch hҥi mӟi rҩt phӭc tҥp và khó xӱ OêKѫQQKӳQJORjLWUѭӟFÿyĈӇ chӕng lҥi nhӳng loҥi dӏch hҥi mӟi này thuӕc BVTV phҧi WăQJQӗQJÿӝ hoһc liӅXOѭӧng; WăQJ sӕ lҫn dùng thuӕc hoһc giҧm thӡi gian cӫa chu kǤ dùng thuӕFĈӗng thӡi, nhӳng thuӕc BVTV mӟLFǊQJWӯ ÿyPjÿѭӧc nghiên cӭu phát triӇn thêm Nhӳng thӕng kê trong lӏch sӱ sӱ dөng thuӕc BVTV cho thҩy dӏch hҥi mӟi không phҧi là tӯ nhӳQJQѫLNKiF quҧ cӫa sӵ khác biӋt vӅ ÿӝ mүn cҧm và khҧ QăQJKuQKWKjQKWtQKNKing thuӕc giӳa các loài

9 Gây ô nhiӉPP{LWUѭӡng

Thuӕc BVTV có thӇ gây ô nhiӉPP{LWUѭӡQJÿҩWQѭӟc ngҫm và cҧ không khí Nhӳng thuӕc BVTV dӉ ED\KѫLQKҩt là trong thӡi tiӃt nҳng nóng, gây ô nhiӉm không NKt7X\QKLrQFiFWUѭӡng hӧSÿѭӧc ghi nhұn là ngӝ ÿӝFGRGѭOѭӧng thuӕc BVTV trong không khí là không nhiӅu Chӫ yӃXFK~QJWiFÿӝng ӣ P{LWUѭӡQJÿҩWYjQѭӟc Sau khi sӱ dөng thuӕc BVTV thì mӝt phҫn sӁ bӏ ED\KѫLPӝt phҫQÿѭӧc quang hóa; mӝt phҫn cây sӁ hҩp thu và phân giҧi, chuyӇn hóa; dù có xӱ lý bҵng cách nào thì cuӕi cùng thuӕc vүQÿLYjRÿҩt Thuӕc sӁ tӗn tҥi ӣ các lӟSÿҩt khác nhau, vào các khoҧng thӡi gian khác nhau, nhӳng sinh vұt có lӧLWURQJÿҩt sӁ giúp phân giҧi mӝt phҫn và các hҥWÿҩt hҩp thu mӝt phҫn NhiӅu loҥi thuӕFFyWtQKÿӝc cao sӁ giӃt chӃt rҩt nhiӅu sinh vұt có lӧLWURQJÿҩt, ÿӗng thӡi thӡi gian phân hӫy dài sӁ khiӃn chúng WtFKOǊ\Oҥi WURQJÿҩt trӗng Nhӳng phҫn thuӕFNKLFKѭDWKҩPYjRÿҩt thì chҧ\WUjQWUrQÿӗng ruӝng, kênh rҥFKKD\WK{QJTXDÿҩt mà ngҩm vào mҥFKQѭӟc ngҫm Tҩt cҧ ÿӅu là nguyên nhân dүQÿӃn ô nhiӉPP{LWUѭӡQJÿҩWYjQѭӟc, gây ҧQKKѭӣng nghiêm trӑng ÿӃn ÿӡi sӕng, sӭc khӓHFRQQJѭӡiWiFÿӝQJÿӃn vi sinh vұt

9 ҦQKKѭӣng nghiêm trӑQJÿӃn sӭc khӓHFRQQJѭӡi Ĉӕi vӟLFѫWKӇ FRQQJѭӡLFǊQJQKѭP{LWUѭӡng, thuӕc BVTV hҫu hӃWÿӅu là các chҩWÿӝc Xét trên cách thӭc xâm nhұSFyEDFRQÿѭӡQJJk\ÿӝFÿѭӡng tiêu hóa, ÿѭӡng hô hҩSYjTXDGDĈӝc tính cӫa các hoҥt chҩt là khҧ QăQJPӝWOѭӧng thuӕc nhҩt ÿӏQKWiFÿӝng có hҥLÿӕi vӟLFѫWKӇĈӝc cҩp tính gây ra ngay khi hoҥt chҩt thuӕc tiӃp xúc vӟLFѫWKӇĈӝc mãn tính gây ra do sӵ ngҩm dҫn các hoҥt chҩt thuӕFYjRFѫWKӇ, WKѭӡng không biӇu hiӋQQJD\OѭӧQJÿӝc sӁ WtFKOǊ\VDXQKLӅu lҫn tiӃp xúc, khi tích tө ÿӫ nhiӅu sӁ bӝc phát và biӇu hiӋn qua các triӋu chӭng bӋnh Tә chӭc y tӃ thӃ giӟi phân thuӕF%979WKjQKQKyPÿӝFFăQFӭ vào giá trӏ LD50 (mg/kg) LD50 là liӅu Oѭӧng hoҥt chҩt gây chӃt 50% sӕ ÿӝng vұt thí nghiӋm cho uӕng hoһc phӃt thuӕc vào da hoҥt chҩt thuӕc BVTV (mg/kg)

B̫ng 1.1: Phân lo̩Lÿ͡ ÿ͡c thu͙c b̫o v th͹c v̵t d͹a vào giá tr͓ LD50 (mg/kg)

3KkQQKyPÿӝc 4XDÿѭӡng miӋng Qua da

ThӇ rҳn ThӇ lӓng ThӇ rҳn ThӇ lӓng Ĉӝc nhҽ >500 >2000 >1000 >4000 Ĉӝc trung bình 50-500 200-2000 100-1000 400-4000 Ĉӝc 5-50 20-200 10-100 40-400 Ĉӝc mҥnh 10 thì phҧi dùng dung dӏch thӱ ORmQJKѫQKRһc pha loãng dung thӱ ÿm dùng và làm lҥi thí nghiӋm và tính lҥi R

Cách này chӍ áp dөQJÿӕi vӟi các quy trình phân tích sӱ dөng có công cө tính toán nhiӉXÿѭӡng nӅQ7K{QJWKѭӡng cách tính này áp dөng phә biӃn ÿӕi vӟLNƭWKXұt sҳc kí Phân tích mүu (mүu thӵc, mүu thêm chuҭn hoһc mүu chuҭn) ӣ nӗQJÿӝ thҩp còn có thӇ xuҩt hiӋn tín hiӋu cӫa chҩt phân tích Sӕ lҫn phân tích lһp lҥi ít nhҩt 4 lҫn Xác ÿӏnh tӍ lӋ tín hiӋu chia cho nhiӉu (S/N = Signal to noise ratio),

TURQJÿy S là chi͉u cao tín hi u cͯa ch̭t phân tích,

NhiӉXÿѭӡng nӅQÿѭӧc tính vӅ hai phía cӫDÿѭӡng nӅn và tӕt nhҩt là tính nhiӉu lân cұn hai bên cӫa peak, bӅ rӝng mӛi bên tӕi thiӇu gҩp 10 lҫn chiӅu rӝng cӫa peak tҥi nӱa chiӅu cao

/2'ÿѭӧc chҩp nhұn tҥi nӗQJÿӝ mà tҥLÿyWtQKLӋu lӟn gҩp 2-3 lҫn nhiӉXÿѭӡng nӅQWK{QJWKѭӡng lҩy S/N =3

/24ÿѭӧc chҩp nhұn tҥi nӗQJÿӝ mà tҥLÿyWtQKLӋu lӟn gҩp 10 lҫn nhiӉXÿѭӡng nӅn S/N

ChӍ áp dөQJÿѭӧFFKRFiFSKѭѫQJSKiSFy[k\GӵQJÿѭӡng chuҭn Giá trӏ LOD, LOQ có thӇ ÿѭӧF[iFÿӏnh dӵDYjRÿӝ dӕc cӫDÿѭӡng chuҭQYjÿӝ lӋch chuҭn cӫa tín hiӋXÿR ܮܱܦ ൌ͵ǡ͵ݔܵܦ ܽ ܮܱܳ ൌ ͳͲݔܵܦ ܽ

7URQJÿy 6'Ĉ͡ l ch chu̱n cͯa tín hi u

Giá trӏ DWtQKÿѭӧc tӯ ÿѭӡng chuҭn, giá trӏ SD có thӇ tính theo nhiӅu cách khác nhau, bao gӗm:

- DӵDWUrQÿӝ lӋch chuҭn cӫa mүu trҳng: Phân tích mүu trҳng lһp lҥi 10 lҫn và tính 6'WѭѫQJӭng

- DӵDWUrQÿӝ lӋch chuҭn cӫa mүu thêm chuҭn ӣ nӗQJÿӝ nhӓ gҫn LOD, lһp lҥi 10 lҫn (xem phҫn kiӇm tra ӣ phía trên) và tính SD

- Dӵa trên hӋ sӕ chһn cӫDÿѭӡng chuҭn, làm nhiӅu lҫQÿӇ tính SD cӫa giá trӏ b (intercept)

- DӵDWUrQÿӝ lӋch chuҭn cӫa khoҧng cách các giá trӏ ÿRWKӵc vӟLÿѭӡng chuҭn

Giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng có thӇ ÿѭӧc xác nhұn tҥi mӭc nӗQJÿӝ yêu cҫu Giӟi hҥQÿӏnh Oѭӧng cӫDSKѭѫQJSKiSOjJLiWUӏ nӗQJÿӝ chҩt cҫn phân tích mà tҥLÿyÿӝ ÿ~QJÿӝ chөPWURQJÿӅu kiӋn lһp lҥi và tái lһSÿӅu thӓa mãn các yêu cҫXÿһt ra [22].

Ĉӝ chính xác

7KHRTXDQÿLӇm cӫa tiêu chuҭn quӕc tӃ ISO 5725 1-6:1994 [23] và tiêu chuҭn quӕc gia TCVN 6910-2:2001 [24], hai thuұt ngӳ ÿӝ ÿ~QJYjÿӝ chөPÿӇ diӉn tҧ ÿӝ chính xác cӫa mӝWSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKĈӝ ÿ~QJFKӍ mӭFÿӝ gҫn nhau giӳa giá trӏ trung bình cӫa kӃt quҧ thӱ nghiӋm và giá trӏ thӵc hoһc giá trӏ ÿѭӧc chҩp nhұQOjÿ~QJȝĈӝ chөm chӍ mӭFÿӝ mӭFÿӝ GDRÿӝng cӫa các kӃt quҧ thӱ nghiӋPÿӝc lұp quanh trӏ giá trung bình Ĉӝ FKtQK[iFDFFXUDF\ ÿӝ chөPSUHFLVLRQÿӝ ÿ~QJWUXHQHVV

1.6.4.1 Ĉӝ chөm Ĉӝ chөm là mӝt khái niӋPÿӏnh tính Yjÿѭӧc biӇu thӏ ÿӏQKOѭӧng bҵQJÿӝ lӋch chuҭn hay hӋ sӕ biӃQWKLrQĈӝ chөm càng thҩSWKuÿӝ lӋch chuҭn hay hӋ sӕ biӃn thiên càng lӟn

;iFÿӏQKÿӝ chөm: Thӵc hiӋn phân tích các mүu trҳng thêm chuҭn ӣ các nӗQJÿӝ khác nhau (thҩp, trung bình, cao cӫa khҧng làm viӋc) Mӛi mүu thӵc hiӋn 6-10 lҫn, WtQKÿӝ lӋch chuҭQ6'Yjÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi RSD hay hӋ sӕ biӃn thiên CV theo các công thӭc sau: ൌ ඨȭሺ ୧ െ തሻ ଶ െ ͳ Ψ ൌ Ψ ൌ ܵܦ ݔҧ ൈ ͳͲͲ

7URQJÿy 6'ÿ͡ l ch chu̱n n: s͙ l̯n thí nghi m x i : Giá tr͓ WtQKÿ˱ͫc cͯa l̯n th͵ nghi m thͱ i x : Giá tr͓ trung bình cͯa các l̯n th͵ nghi m 56'Ĉ͡ l ch chu̱QW˱˯QJÿ͙i

Giá trӏ ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕL56'WtQKÿѭӧFNK{QJÿѭӧc lӟQKѫQÿӝ lһp lҥi chҩp nhұQÿѭӧFĈӝ chөPWKD\ÿәi theo nӗQJÿӝ chҩt phân tích NӗQJÿӝ chҩt càng thҩp thì kӃt quҧ FjQJGDRÿӝng nhiӅu (không chөPQJKƭDOj56'FjQJOӟn [25]

B̫ng 1.3Ĉ͡ l ch chu̱QW˱˯QJÿ͙i ch̭p nh̵Qÿ˱ͫc (AOAC)

STT +jPOѭӧng TӍ lӋ chҩt ĈѫQYӏ RSD%

1.6.4.2 Ĉӝ ÿ~QJ Ĉӝ ÿ~QJFӫDSKѭѫQJSKiSOjNKiLQLӋm chӍ mӭFÿӝ gҫn nhau giӳa giá trӏ trung bình cӫa kӃt quҧ thӱ nghiӋm và giá trӏ thӵc hoһc giá trӏ ÿѭӧc chҩp nhұQOjÿ~QJȝ Ĉӕi vӟLÿDVӕ mүu phân tích, giá trӏ thӵc không thӇ biӃt mӝt cách chính xác, tuy nhiên nó có thӇ có mӝt giá trӏ quy chiӃXÿѭӧc chҩp nhұQOjÿ~QJJӑi chung là giá trӏ ÿ~QJ Ĉӝ ÿ~QJWKѭӡQJÿѭӧc diӉn tҧ bҵQJÿӝ chӋch [24] ȟ ൌܺ ௧௕ െ ߤ ߤ

X tb : Giá tr͓ trung bình cͯa k͇t qu̫ th͵ nghi m ȝ*LiWU͓ th͹c ho̿c giá tr͓ ÿ˱ͫc ch̭p nh̵QOjÿ~QJ

ViӋF[iFÿӏQKÿӝ ÿ~QJGRÿyFyWKӇ thӵc hiӋQWK{QJTXD[iFÿӏQKÿӝ thu hӗi cӫa SKѭѫQJSKiS ;iFÿӏQKÿӝ ÿ~QJ7KrPPӝWOѭӧng chҩt chuҭQ[iFÿӏQKWKѭӡng ӣ 3 mӭc nӗQJÿӝ là mӭc thҩp, trung bình và cao trong khoҧng nӗQJÿӝ làm viӋc) vào mүu thӱ hoһc mүu trҳng, phân tích các mүu thêm chuҭn, làm lһp lҥi tӕi thiӇu 4 lҫn bҵng SKѭѫQJSKiSNKҧo sát TtQKÿӝ thu hӗi theo công thӭc: ܪ ൌ ܥ ௠ା௖ െ ܥ ௠ ܥ ௖ ݔͳͲͲ

C m+c : N͛QJÿ͡ ch̭t phân tích trong m̳u thêm chu̱n

C m : N͛QJÿ͡ ch̭t phân tích trong m̳u th͵

C c : N͛QJÿ͡ chu̱n thêm (lý thuy͇t)

Giá trӏ ÿӝ lӋFKÿӝ thu hӗi H% phҧi nҵm trong khoҧQJÿӝ thu hӗi chҩp nhұQÿѭӧc

B̫ng 1.4Ĉ͡ thu h͛i ch̭p nh̵Qÿ˱ͫc (AOAC)

STT +jPOѭӧng (%) TӍ lӋ chҩt ĈѫQYӏ Ĉӝ thu hӗi

ѬӞ&/ѬӦ1*ĈӜ +Ð1*ĈҦM BҦ2Ĉ2

ĈӏQKQJKƭD

Các giá trị trong mô hình NK{QJÿҧm bҧRÿR chia thành nhiều thành phần Mỗi thành phần chứa nhiều giá trị, được phân biệt bằng cách thống kê từ kết quả của một loạt SKpSÿRYjFyWKӇ mà các thành phần này lưu giữ theo thứ tự thời gian Các thành phần này lưu giữ theo thứ tự thời gian các phân bố xác suất mô phỏng thí nghiệm hoặc các thông tin khác.

Trong phân tích hoá hӑFÿҥLOѭӧQJÿR sӁ là nӗQJÿӝKjPOѭӧng cӫa phép phân tích Tuy nhiên trong phân tích hoá hӑc còn sӱ dөQJFiFSKpSÿRÿӏQKOѭӧng khác ví dө QKѭPҫu, S+ô ĈӏQKQJKƭDÿӝ Ĉ%ĈÿѭDUDӣ trên nhҵm mөFÿtFKÿѭDUDNKRҧng các giá trӏ cӫa phép phân tích mà chӭDÿҥLOѭӧQJÿR Trong phân tích hoá hӑFÿҥLOѭӧQJÿR sӁ là nӗQJÿӝ hoһc KjPOѭӧng cӫa phép phân tích Nói chung tӯ ÿӝ KĈ%Ĉ liên quan tӟi khái niӋm sӵ nghi ngӡ Ĉӝ Ĉ%Ĉ không hàm ý là sӵ nghi ngӡ vӅ giá trӏ cӫa mӝWSKpSÿRWUiLOҥLÿӝ Ĉ%Ĉ FyQJKƭDOjWăQJPӭFÿӝ tin cұ\ÿӕi vӟi giá trӏ cӫa kӃt quҧ ÿR [30]

1.7.2 Ĉӏnh OѭӧQJÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿR tӯ dӳ liӋu phê duyӋt SKѭѫQJSKiS Ĉӝ NK{QJ ÿҧm bҧR ÿR Fy WKӇ ѭӟF Oѭӧng tӯ thӵc nghiӋm phê duyӋt/thҭP ÿӏnh SKѭѫQJSKiS [28] Ĉӝ Ĉ%Ĉ ÿѭӧFWtQKWK{QJTXDFiFÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRWKjQK phҫQOjÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ chөPYjÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ [21] ݑ ௖ ൌ ඥݑሺ݌ݎ݁ܿ݅ݏ݅݋݊ሻ ଶ ൅ ݑሺܾ݅ܽݏሻ ଶ

7URQJÿy u c ÿ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRW͝ng hͫp u (pecision) ÿ͡ không ÿ̫m b̫RÿRFͯDÿ͡ chͭm.

ĈӏQKOѭӧQJÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRtӯ dӳ liӋu phê duyӋWSKѭѫQJSKiS

7URQJÿy k: h s͙ phͯ W˱˯QJͱng kho̫ng tin c̵y 95% (k=2)

1.7.2.1 Nghiên cӭXÿӝ chөm- Tính uprecision

Các nghiên cứu chất lượng cao thường có phạm vi nghiên cứu chặt chẽ Các nghiên cứu này thường tập trung vào một số lượng nhỏ các biến và khám phá mối quan hệ rõ ràng giữa chúng Điều này giúp giảm thiểu khả năng nhầm lẫn và tăng độ chính xác của kết quả [21].

PhҥPYLSKѭѫQJSKiSFKӍ gӗm mӝt dҥng mүu

9 7Uѭӡng hӧp mӝt dҥng mүu, mӝt nӗQJÿӝ phân tích

NӃu phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiSFKӍ bao gӗm mӝt dҥng mүu và mӝt nӗQJÿӝ phân WtFKWKuÿӝ chөm có thӇ ÿѭӧFѭӟFOѭӧng tӯ phân tích lһp lҥi trên cùng mӝt dҥng mүu Thӵc hiӋn ít nhҩt 10 lҫn phân tích mүu Mӛi mӝt lҫn phân tích phҧi áp dөQJÿҫ\ÿӫ FiFEѭӟFWURQJSKѭѫQJSKiSEDRJӗm cҧ FiFEѭӟc chuҭn bӏ mүu Không nên thӵc hiӋn 10 lҫn phân tích trên 10 mүu cӫa mӝt lô vұt liӋu [27] Nên lҩy 10 mүu trên các lô vұt liӋXNKiFQKDXYjWKD\ÿәi mӝt sӕ tham sӕ Các tham sӕ ÿӇ lӵa chӑn có thӇ là: HiӋu chuҭn: nghiên cӭu nên bao gӗm viӋc chuҭn bӏ chuҭn hiӋu chuҭn khác nhau vӟi các dung dӏch chuҭn hiӋu chuҭn tӯ các lô khác nhau (Bao gӗm cҧ dung dӏch sӱ dөQJÿӇ chuҭn bӏ dung dӏch hiӋu chuҭn)

Thuӕc thӱ: các thuӕc thӱ nên chuҭn bӏ tӯ các lô khác nhau

1Jѭӡi phân tích: thӵc hiӋn nghiên cӭXÿӝ chөm vӟi nhiӅu nhân YLrQKѫQOjFKӍ mӝt nhân viên PTN Ĉӝ Ĉ%ĈÿѭӧFѭӟFOѭӧQJWK{QJTXDÿӝ lӋch chuҭn hoһFÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi cӫa kӃt quҧ nghiên cӭXÿӝ chөm Ĉӝ lӋch chuҭQ6'ÿѭӧc tính theo công thӭc sau: ܵܦ ൌ ට σሺ௫ ೔ ି௫ҧሻ మ ௜ିଵ Ĉӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi (RSD) OjFKLDÿӝ lӋch chuҭn cӫa các kӃt quҧ mүu cho trung bình cӫa các kӃt quҧ nghiên cӭXÿӝ chөm: ܴܵܦ ൌ ௌ஽ ௫ҧ ൈ ͳͲͲ Ĉӝ chөm phҧLÿѭӧc nghiên cӭu tҥi các nӗQJÿӝ mà có thӇ bao phӫ toàn bӝ các khoҧng nӗng ÿӝ trong phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiS1Ӄu không có mүXÿҥi diӋn cho các khoҧng nӗQJÿӝ thích hӧSÿӇ nghiên cӭu phân tích thì sӱ dөng các mүu thêm chuҭn ÿӇ nghiên cӭu Chú ý là ít nhҩt phҧi có 3 khoҧng nӗQJÿӝ ÿѭӧc nghiên cӭu (ví dө QKѭ khoҧng nӗQJÿӝ thҩp, trung bình và cao) vӟi ít nhҩt 4 lҫn thӱ nghiӋm lһp lҥi cho mӛi khoҧng nӗQJÿӝ [27]7tQKWRiQÿӝ lӋch chuҭQYjÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi cӫa các kӃt quҧ cӫa tӯng mӭc nӗQJÿӝĈӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi tәng (RSDpool) cӫa các mӭc nӗQJÿӝ ÿѭӧFWtQKQKѭVDX ܴܵܦ ௣௢௢௟ ൌ ඨሺ݊ ଵ െ ͳሻ ൈ ܴܵܦ ଵ ଶ ൅ ሺ݊ ଶ െ ͳሻ ൈ ܴܵܦ ଶ ଶ ൅ ڮ ሺ݊ ଵ െ ͳሻ ൅ ሺ݊ ଶ െ ͳሻ ൅ ڮ

7URQJÿy RSD i Ĉ͡ l ch chu̱QW˱˯QJÿ͙i ͧ mͱc n͛QJÿ͡ i n i : S͙ l̯n l̿p l̩i ͧ mͱc n͛QJÿ͡ i

PhҥPYLSKѭѫQJSKiSEDRJӗm nhiӅu dҥng mүu

Trong mӝt sӕ WUѭӡng hӧp phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiSEDRJӗm các dҧi nӗQJÿӝ phân tích mӝt sӕ khoҧng nӗQJ ÿӝ cho mӝt sӕ dҥng mүu Trong nhӳQJ WUѭӡng hӧp này nghiên cӭXÿӝ chөm phҧLÿѭӧc cân nhҳFÿӃQÿҥi diӋn cӫa các dҥng mүu trong phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiS&yWKӇ sӱ dөng viӋFѭӟFOѭӧQJÿӝ Ĉ%Ĉ mà bao phӫ cho tҩt cҧ các dҥng mүu nêu trong phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiS7X\QKLrQFyWKӇ FyWUѭӡng hӧp nhiӅu dҥng mүu và/hoһc nӗQJÿӝ phân tích cҫn phҧLѭӟFOѭӧQJÿӝ Ĉ%Ĉ riêng cho tӯQJÿӕLWѭӧng, tӯng dҥng mүu [27]

9 7Uѭӡng hӧp mӝt nӗQJÿӝ phân tích, nhiӅu dҥng mүu

;iFÿӏnh các mүXÿҥi diӋn cho mӛi dҥng mүu trong phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiS NӃXSKѭѫQJSKiSFySKҥm vi rӝng thì có thӇ không nghiên cӭu thӵc tӃ QKѭWKӃ ÿѭӧc mà nghiên cӭu lһp lҥi bҵng lҩy mӛi dҥng mүu mӝt mүXÿҥi diӋn Trong nhiӅXWUѭӡng hӧS QJѭӡi phân tích sӁ quyӃW ÿӏnh sӕ Oѭӧng dҥng mүu cҫn nghiên cӭu, phân tích Phân tích lһp lҥLÿӕi vӟi mӛi mүu Cҫn phҧi thӵc hiӋn phân tích lһp lҥi 10 lҫn cho mӛi dҥng mүu Tuy nhiên nӃXÿӕLWѭӧng mүXÿDGҥng thì viӋc nghiên cӭu thӵc nghiӋm QKѭYұy là không thӵc tӃ Phө thuӝFYjRSKѭѫQJSKiStWQKҩt phҧi thӵc hiӋn thӱ nghiӋm lһp lҥi 4 lҫn cho mӝWÿӕLWѭӧng mүu [27, 31]7tQKWRiQÿӝ lӋch chuҭn cӫa các kӃt quҧ WKXÿѭӧc cho mӛi mүu Ĉӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi tәng (RSDpool) cӫa các dҥng mүXÿѭӧFWtQKQKѭVDX ܴܵܦ ௣௢௢௟ ൌ ඨሺ݊ ଵ െ ͳሻ ൈ ܴܵܦ ଵ ଶ ൅ ሺ݊ ଶ െ ͳሻ ൈ ܴܵܦ ଶ ଶ ൅ ڮ ሺ݊ ଵ െ ͳሻ ൅ ሺ݊ ଶ െ ͳሻ ൅ ڮ

7URQJÿy RSD i Ĉ͡ l ch chu̱QW˱˯QJÿ͙i d̩ng m̳u i n i : S͙ l̯n l̿p l̩i ͧ d̩ng m̳u i

9 7Uѭӡng hӧp nhiӅu dҥng mүu và nhiӅu khoҧng nӗQJÿӝ phân tích Ĉӕi vӟLFiFSKѭѫQJSKiSPjSKҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiSEDRJӗm nhiӅu dҥng mүu và nhiӅu khoҧng nӗQJÿӝ thì cҫn thiӃt phҧi thiӃt lұp mӝWFKѭѫQJWUuQKQJKLrQFӭu cө thӇ và thích hӧp ÿӇ có thӇ ÿҧm bҧRWtQKWRiQÿѭӧFÿӝ Ĉ%Ĉ cho phép thӱ mӝt cách ÿҫ\ÿӫ và chính xác 6DXÿk\ OjPӝt sӕ WUѭӡng hӧp có thӇ xҧy ra khi nghiên cӭu SKѭѫQJSKiSYjFiFKJLҧi quyӃt

- Ĉӝ chөm là tӍ lӋ qua mӭFÿӝ phân tích theo phҥm vi nӗQJÿӝ Yjÿӝc lұp vӟi mӛi dҥng mүu 7URQJWUѭӡng hӧSQj\ÿӝ chөPÿѭӧFѭӟFOѭӧng cho tӯng dҥng mүu nghiên cӭXYjÿѭӧc chuyӇn WKjQKÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕLĈyFKtQKOjѭӟFOѭӧQJÿӝ Ĉ% bҵng nghiên cӭXÿӝ chөPTXDÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi có thӇ áp dөng cho tҩt cҧ các mүu trong phҥm vi cӫDSKѭѫQJSKiS [32]

- Ĉӝ chөm tӍ lӋ giӳa các nӗQJÿӝ SKkQWtFKQKѭQJNKiFQKDXOӟn giӳa các dҥng mүu Trong WUѭӡng hӧSQj\ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi tính tҥi các nӗQJÿӝ khác nhau ÿӇ các mүXÿӝc lұp ÿӇ ѭӟFOѭӧQJFiFÿӝ chөm riêng cho tӯng dҥng mүXĈLӅu này có QJKƭDOjFҫQѭӟFOѭӧQJÿӝ Ĉ%Ĉtәng hӧp cho tӯng dҥng mүu [32]

- Ĉӝ chөm là không tӍ lӋ ÿӕi vӟi các mӭc nӗQJÿӝ Nghiên cӭu thӵc nghiӋm có thӇ chӍ ra rҵQJÿӝ chөm là tӍ lӋ tҥi khoҧng nӗQJÿӝ chӍ ӣ mӝt giӟi hҥn mӝt khoҧng nӗng ÿӝ hoһc không ӣ khoҧQJQjR7KrPYjRÿyFyWKӇ khác nhau giӳa các loҥi mүu Trong WUѭӡng hӧp Qj\ѭӟFOѭӧng cho tӯng nhóm mүu và hoһc cho tӯng khoҧng nӗQJÿӝ [33]

1.7.2.2 Nghiên cӭXÿӝ ÿ~QJ- Tính ubias Ĉӝ ÿ~QJÿѭӧFÿiQKJLiWK{QJTXDQJKLrQFӭXÿӝ thu hӗi cӫDSKѭѫQJSKiSĈӝ ÿ~QJ có thӇ ÿiQKJLiWKHRQKLӅu cách: phân tích mүu chuҭn chӭng nhұn (CRMs), mүu thêm chuҭn hoһc dӵa vào kӃt quҧ thӱ nghiӋm thành thҥo hoһc dӵa vào kӃt quҧ thӵc nghiӋP[iFÿӏnh giá trӏ sӱ dөng cӫDSKѭѫQJSKiS 7URQJÿySKѭѫQJSKiSGӵa vào Ĉӝ ÿ~QJÿѭӧFÿӏQKOѭӧng thông qua giá trӏ ubias-ÿӝ chӋch thӇ hiӋn sӵ khác biӋt giӳa giá trӏ ÿRYjJLiWUӏ thӵc NguyrQQKkQJk\UDÿӝ chӋch bӣLÿӝ thu hӗi không phҧi là 100%, các sai sӕ khi thêm chuҭn vào mүu và cҧ sai sӕ cӫa dung dӏch chuҭn ݑ ௕௜௔௦ ൌ ටሺοሻ ଶ ൅ ݑ ௩௢௟ ଶ ൅ ݑ ௖௢௡௖ ଶ

7URQJÿy ': ÿ͡ ch ch cͯa hi u sṷt thu h͛i so vͣi 100% u (vol) ÿ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRcͯa th͋ tích thêm chu̱n u (conc) Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRFͯa ch̭t chu̱n

Giá trӏ uvol ÿѭӧc tính toán dӵa vào quy tҳc FѫEҧn cӫa sӵ lan truyӅn sai sӕ hoһc quy ÿӏnh mһFÿӏnh QKѭVDX [34]: ݑሺݒ݋݈ሻ ൌ ඨ൬ ͳ ξ͵൰ ଶ ൅ ͲǤ ͷ ଶ ൌ ͲǤ͹͸Ψ

Giá trӏ uconc ÿѭӧc tính toán dӵa vào quy tҳFFѫEҧn cӫa sӵ lan truyӅn sai sӕ [35] và giá trӏ nhà sҧn xuҩt cung cҩp hoһc giá trӏ ÿӝ tinh khiӃt cӫa chҩt chuҭn dӵa vào phân bӕ chӳ nhұt ͳ െ ܲ ξ͵ ൈ ͳͲͲ ൌ ܽ ܥ ஼ோெ ൈ ξ͵ൈ ͳͲͲ ൌݑ ௘ ݇

7URQJÿy 3ÿ͡ tinh khi͇t cͯa ch̭t chu̱n a: Dung sai n͛QJÿ͡ dung d͓ch chu̱n CRM

C CRM : N͛QJÿ͡ dung d͓ch chu̱n CRM u e : ÿ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRPͧ r͡ng cͯa ch̭t chu̱n k: h s͙ phͯ W˱˯QJͱng vͣi kho̫ng tin c̵y 95 % (k=2)

ĈӔ,7ѬӦNG VÀ NӜI DUNG NGHIÊN CӬU

ĈӕLWѭӧng nghiên cӭu

ViӋt Nam là mӝt trong nhӳng quӕc gia xuҩt khҭu sҧQOѭӧng gҥo lӟn trên thӃ giӟi Tuy sҧQOѭӧQJOX{QÿӭQJKjQJÿҫXQKѭQJOӧi ích kinh tӃ WKXÿѭӧc tӯ viӋc xuҩt khҭu gҥRNK{QJWѭѫQJ[ӭng vӟi sҧQOѭӧng xuҩt khҭXKjQJQăP [36] Cҫn thiӃt nâng cao chҩWOѭӧng sҧn phҭPÿӗng thӡi kiӇPVRiWGѭOѭӧng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt trong các sҧn phҭm gҥo xuҩt khҭu nhҵm thӓa món cỏc thӏ WUѭӡQJNKyWtQKQKѭFKkXặX1Kұt, 0ƭ4XDÿyWK~Fÿҭy lӧi nhuұQWKXÿѭӧc nhӡ xuҩt khҭu gҥRÿӗng thӡLWăQJYӏ thӃ các sҧn phҭm gҥo cӫa ViӋt Nam HiӋn nay, có nhiӅu loҥi thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt chӭa các hoҥt chҩt nhóm nereistoxin vӟLFiFWrQWKѭѫQJSKҭm khác nhau ÿmÿăQJNtYjÿѭӧc phép sӱ dөng trên cây lúa nhҵm trӏ mӝt sӕ loҥi sâu hҥLVkXÿөc thân, sâu cuӕn lá, rҫy nõu, bӑ WUƭô Cỏc loҥi thuӕFQj\ÿѭӧc sӱ dөng nhiӅXÿӇ trӏ bӋnh trờn cõy lỳa và trong nhiӅu JLDLÿRҥn phát triӇn cӫa cây lúa, dүn tӟi thӵc trҥng tӗQGѭWURQJJҥo ӣ nhiӅu dҥng hoҥt chҩt Vì thӃ viӋc lӵa chӑn nӅn mүu gҥRÿiSӭng và thӓDPmQFiFQKѭFҫu thӵc tӃ Ĉӕi vӟi hӗ tiêu, hiӋn tҥLÿmFyQKӳng sҧn phҭm hӗ tiêu ViӋt Nam xuҩt khҭu qua cỏc thӏ WUѭӡng khú tớnh QKѭFKkXặXYj1Kұt Bҧn'RÿyFyQKLӅXKѭӟng dүn vӅ viӋc sӱ dөng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұWFǊQJQKѭWKӡi gian, liӅXOѭӧng sӱ dөng nhҵPÿҧm bҧo chҩWOѭӧQJYjGѭOѭӧng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұWNK{QJYѭӧt quá mӭc tӕLÿDFKRSKpS Tuy nhiên hiӋn tҥi có rҩt nhiӅu sҧn phҭPWKѭѫQJPҥi khác nhau trên thӏ WUѭӡng phӕi trӝn các thuӕc BVTV nhóm nereistoxin vӟi các hoҥt chҩW NKiF ÿѭӧc cho phép sӱ dөng trờn cõy hӗ WLrXQKѭLPLGDFORSULGbuprofezineô'RÿyYLӋc sӱ dөng thuӕc BVTV cҫn cҭn trӑng tìm hiӇXWUiQKWUѭӡng hӧp tӗQGѭWKXӕc BVTV nhóm nereistoxin trong hҥt tiêu, ҧQKKѭӣQJÿӃn chҩWOѭӧng sҧn phҭm Vì thӃ, hӗ tiêu là mӝWÿӕLWѭӧng thích hӧSÿӇ nghiên cӭu

Theo tiêu chuẩn EU, các thuốc bảo vệ thực vật không được vượt quá 0,01 mg/kg [35, 37] Nghiên cứu này đã tiến hành khảo sát và đánh giá dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trên hai nông sản gạo và hồ tiêu.

Nӝi dung nghiên cӭu

Nӝi dung nghiên cӭX ³.Kҧo sát và xây dӵQJ TX\ WUuQK SKkQ WtFK ÿӗng thӡi các thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt: nereistroxin, cartap, thiocyclam, thiosultap bҵng thiӃt bӏ LC- MS/MS trên nӅn mүu gҥo và hӗ tiêu´ Nӝi dung nghiên cӭu gӗm các phҫQQKѭVDX

- KhҧRViWÿLӅu kiӋn vұn hành thiӃt bӏ LC

- Khҧo sát mҧnh khӕi cӫa các hoҥt chҩt

- Khҧo sát thӡi gian әQÿӏnh cӫa dung dӏch chuҭn

- Khҧo sát quy trình xӱ lý mүu bao gӗm chiӃt và làm sҥch mүu

- ThҭPÿӏQK SKѭѫQJSKiS thông qua: tính chӑn lӑc, khoҧng làm viӋc, giӟi hҥn phát hiӋn và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧQJÿӝ chính xác

- ѬӟFOѭӧQJÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDSKѭѫQJSKiS

MөFÿtFK nghiên cӭu nhҵm xây dӵQJSKѭѫng pháp thích hӧSÿӇ áp dөng vào thӵc tӃ phân tích sҧn phҭm gҥo, hӗ tiêu xuҩt khҭXFǊQJQKѭÿLӅu tra giám sát an toàn thӵc phҭm thӏ WUѭӡng nӝLÿӏa.

THIӂT Bӎ, DӨNG CӨ VÀ HÓA CHҨT

KhҧRViWÿLӅu kiӋn thӵc hiӋn sҳc kí lӓng ghép detector khӕi phә

2.3.1.1 TӕLѭXPҧnh khӕi các hoҥt chҩt

Khҧo sát mҧnh khӕi là quá trình lӵa chӑn thông sӕ thích hӧp vӟi hӋ thӕng thiӃt bӏ ÿDQJVӱ dөng ÿӇ có thӇ phát hiӋn tín hiӋu và ghi lҥi cӫa các hoҥt chҩt cҫn phân tích Mӛi thiӃt bӏ phân tích có nhӳng thông sӕ tӕLѭXNKiFQKDX'RÿyFҫn thӵc hiӋn khҧo ViWÿӇ WuPÿѭӧc các thông sӕ tӕLѭXYӟi thiӃt bӏ sӱ dөng

B̫ng 2.4: Các m̫nh ion ḿ và ion con kh̫o sát

Hoҥt chҩt Ion mҽ Ion con ESI TLTK

Nghiên cứu sử dụng giải pháp tiêm các dung dịch chuẩn trung gian có nồng độ 10 µg/mL của từng mẫu chuẩn vào thiết bị detectors để khởi phát các thông số theo nguyên tắc chuẩn độ Yêu/Không yêu.

- TӕLѭXPҧnh khӕi ion mҽ, khoҧng tӕLѭXEѭӟc nhҧy 0,1

- TӕLѭX VѫEӝ QăQJOѭӧng va chҥm, khoҧng tӕLѭX-50 eV, Eѭӟc nhҧy 5

- TӕLѭXQăQJOѭӧng va chҥPEѭӟc nhҧy 1

- TӕLѭXPҧnh khӕi ion con, khoҧng tӕLѭX Eѭӟc nhҧy 0,1

- TӕLѭXÿLӋn thӃ tӭ cӵc thӭ nhҩWÿӇ chӑn lӑc mҧnh ion mҽ, khoҧng tӕLѭX-

- TӕLѭXÿLӋn thӃ tӭ cӵc thӭ ba ÿӇ chӑn lӑc mҧnh ion con, khoҧng tӕLѭX-50 eV, Eѭӟc nhҧy 1

KhҧRViWSKDWƭQKÿѭӧFÿiQKJLiWK{QJTXDFiF\Ӄu tӕ: hình dҥng peak, thӡi gian OѭX hӋ sӕ NpRÿX{Lÿӝ rӝng chõn peak,ô DӵDYjRÿLӅu kiӋn thӵc tӃ FǊQJQKѭWtQK chҩt cӫa các hoҥt chҩt Lӵa chӑn khҧo sát trên 4 loҥi cӝWSKkQWtFKQKѭVDX&ӝt pha ÿҧo C18 và C8, cӝWWѭѫQJWiFѭDQѭӟc-HILIC hoһc cӝt cacbon graphite-hypercarb

Thành phҫn là các chuӛi dimethyl-n-octadecylsilan (chuӛL&ÿѭӧc liên kӃt vӟi hҥt silica xӕSÿӝ tinh khiӃt cӵc cao (> 99,995% SiO2ÿӗng nhҩt, hình cҫu, diӋn tích bӅ mһWPðJYjNtFKWKѭӟc lӛ xӕp 95 Å

HoҥWÿӝng әQÿӏnh ӣ khoҧng pH rӝng 0-14

9 Cӝt C8 Ĉӝ chӑn lӑc và thӭ tӵ rӱa giҧLWѭѫQJWӵ QKѭ&QKѭQJÿӝ OѭXJLӳ tWKѫQ vӟi các chҩt kém phân cӵc7tQKQăQJQj\ÿһc biӋt hӳu ích khi cҫQÿӝ kӷ Qѭӟc thҩSKѫQÿӇ giӳ lҥi các hӧp chҩt phân tích phân cӵc trung EuQKÿӃn cao CӝW&ÿѭӧc sӱ dөng cho các chҩt phân tích có tính kӷ Qѭӟc trung bình hoһc khi cҫn pha ít kӷ QѭӟFKѫQÿӇ có ÿѭӧFÿӝ OѭXJLӳ tӕWKѫQ

HoҥWÿӝng әQÿӏnh ӣ khoҧng pH 2-9

Cҩu trúc bӅ mһWÿһc biӋt: bao gӗm cҧ FiFÿLӋn tích kPÿLӋQWtFKGѭѫQJQKyPѭD Qѭӟc và chuӛi C kӏ Qѭӟc khiӃn cӝt HILIC kӃt hӧSÿѭӧFFiFÿһFÿLӇm cӫa cҧ sҳc ký pha thuұQSKDÿҧo và sҳc ký ion [38-40] Ӭng dөQJÿӇ phân tích các chҩWSKkQWtFKFyÿӝ phân cӵc cao, khҳc phөFÿѭӧc hҥn chӃ vӅ thӡLJLDQOѭXJLӳ so vӟi các cӝWSKkQWtFKSKDÿҧo [39, 41]

HoҥWÿӝng әQÿӏnh ӣ khoҧng pH rӝng 2-8,5

Thành phҫn 100% cacbon graphite, các nguyên tӱ C ÿѭӧc xӃp theo hình lөc giác QKѭPӝt phân tӱ nhiӅXYzQJWKѫPUҩt lӟn, tҥo thành tҩm phҷng [42]

HoҥWÿӝng әQÿӏnh ӣ khoҧng pH rӝng 0-14

Có khҧ QăQJOѭXJLӳ các cҧ các hoҥt chҩt phân cӵc và kém phân cӵFĈӕi vӟi các hoҥt chҩt kém phân cӵFFѫFKӃ WѭѫQJWiFFӫa cӝt h\SHUFDUEWKHRWѭѫQJWiF9DQ'HU Waal và phө thuӝc nhiӅu vào tính phҷng cӫa cҩu trúc phân tӱ hoҥt chҩWĈӕi vӟi các hoҥt chҩt phân cӵc, cӝt h\SHUFDUEWѭѫQJWiFEӣLWѭѫQJWiFWƭQKÿLӋn, các phҫn mang ÿLӋn trên hoҥt chҩt sӁ ÿҭy hoһc hút các electron trên bӅ mһt lӟp cacbon graphite, thay ÿәi cҩu trúc phҷng cӫa các lӟp cacbon graphit [42]

Cӝt thích hӧp dùng phân tích các hӧp chҩWFyÿӝ phân cӵc tӯ rҩWFDRÿӃn kém [43]

Hình 2.2&˯FK͇ W˱˯QJWiFFͯa các hͫp ch̭WFyÿ͡ phân c͹c cao vͣi c͡t hypercarb

Hình 2.3&˯FK͇ W˱˯QJWiFFͯa các hͫp ch̭t kém phân c͹c vͣi c͡t hypercarb

%ѫPGXQJGӏch chuҭn làm viӋc nӗQJÿӝ 1 mg/mL vào hӋ thӕng khi sӱ dөng các cӝt sҳFNtNKiFQKDXĈiQKJLiYjOӵa chӑn cӝt sҳc ký thích hӧp dӵa vào thӡi gian OѭXFѭӡQJÿӝ tín hiӋu, hình dҥng peak

2.3.1.3 Khҧo sát thӡi gian әQÿӏnh cӫa dung dӏch chuҭn

Khảo sát độ bền của dịch chuẩn trung gian nồng độ 10 Pg/mL và dịch chuẩn làm việc 1 Pg/mL theo TCCS Với dịch chuẩn làm việc nồng độ 1 Pg/mL: thực hiện khảo sát 5 lần lập lại mỗi 3 ngày trong thời gian 30 ngày Dịch chuẩn được bảo quản ở 4oC và được so sánh thời gian bền với dịch chuẩn vừa pha để phân tích ở cùng bậc nồng độ chuẩn gốc Với dịch chuẩn trung gian nồng độ 10 Pg/mL: thực hiện khảo sát 5 lần lập lại mỗi 3 ngày trong thời gian 10 ngày và trong vòng 5 tháng tiếp theo Dịch chuẩn được bảo quản ở 4oC và được so sánh thời gian bền với dịch chuẩn vừa pha để phân tích ở cùng bậc nồng độ chuẩn gốc Các dịch chuẩn vừa pha có nồng độ 1 Pg/mL trong dung dịch đệm Tris-EDTA 1x Kết thúc khảo sát: Nồng độ hoặc diện tích của dịch chuẩn mẫu đo được chênh lệch quá 10% [30] Kết quả giúp xác định khả năng ổn định của dịch chuẩn làm giảm nguy cơ sai lệch khi tiêm lập lại.

H0: NӗQJÿӝ dung dӏch chuҭQFǊYjPӟi khác biӋt không ÿiQJNӇ KD\ÿLӅu kiӋn/thӡi gian bҧo quҧn dung dӏch chuҭn là phù hӧp

H1: NӗQJÿӝ dung dӏch chuҭQFǊYjPӟi khác biӋWÿiQJNӇ KD\ÿLӅu kiӋn/thӡi gian bҧo quҧn dung dӏch chuҭn là không phù hӧp

Khoҧng tin cұy: cho sӵ khác biӋt giӳa giá trӏ trung bình cӫa chuҭQFǊYjPӟLÿѭӧc WtQKQKѭVDX [44]: ܥܫ ൌ ܥҧ ௡௘௪ െ ܥҧ ௢௟ௗ േ ݐ ሾ଴ǤଵǢሺ௡ భ ା௡ మ ିଶሻሿ ൈ ඨݏ ௣ ଶ ൬ͳ ݊ ଵ ൅ ͳ ݊ ଶ ൰

7URQJÿy CI: Kho̫ng tin c̵y cho s͹ khác bi t giͷa hai giá tr͓ trung bình

C new : N͛QJÿ͡ dung d͓ch chu̱n mͣi

C old: N͛QJÿ͡ dung d͓ch chu̱QFǊ s p Ĉ͡ l ch chu̱n chung, ݏ ௣ ൌ ට ௡ భ ൈ௦ ೙೐ೢ మ ା௡ మ ൈ௦ ೚೗೏ మ ሺ௡ భ ିଵሻାሺ௡ మ ିଵሻ s new ÿ͡ l ch chu̱n phân tích l̿p l̩i dung d͓ch chu̱n mͣi s old Ĉ͡ l ch chu̱n phân tích l̿p l̩i dung d͓ch chu̱QFǊ n 1 : s͙ l̯n phân tích l̿p l̩i dung d͓ch chu̱n mͣi n 2 : s͙ l̯n phân tích l̿p l̩i dung d͓ch chu̱QFǊ

KӃt luұn: Giҧ thiӃt H0 ÿѭӧc chҩp nhұn khi giá trӏ CI trong khoҧng ±10%

KhҧRViWÿLӅu kiӋn xӱ lí mүu

Quy trình chung xӱ lý mүu nông sҧQÿӇ phân tích trên thiӃt bӏ LC-MS/MS FѫEҧn gӗm nhiӅu EѭӟFQKѭQJNK{QJEҳt buӝc phҧLFyÿҫ\ÿӫ mӛLEѭӟc trong mӑi quy trình Tùy theo thành phҫn cӫa nӅn mүu nông sҧQFǊQJQKѭWtQKFKҩt hoҥt chҩt mà lӵa chӑn quy trình bao gӗm FiFEѭӟc xӱ lý thích hӧp

Hình 2.4: Quy trình chung x͵ lý m̳u

ViӋc tҥo dүn xuҩt nhҵPÿѭDFiFKRҥt chҩt phân tích trӣ thành dҥng có thӇ dӉ dàng phát hiӋQYjÿӏQKOѭӧQJKѫQEӣLÿҫu dò Có thӇ tҥo dүn xuҩt trong quá trình xӱ lý mүu hoһc tҥo dүn xuҩt sau cӝt phân tích bӣi các thiӃt bӏ phân tích có khҧ QăQJWҥo dүn Ĉӕi vӟLÿҫu dò MS, viӋc tҥo dүn xuҩWWKѭӡng áp dөng vӟi các hoҥt chҩt kém bӅn hoһc kém nhҥy, dүn xuҩt tҥo thành sӁ bӅQKѫQKRһc nhҥ\KѫQWURQJÿLӅu kiӋn phân tích Tuy nhiên thông qua khҧR ViW Fѫ Eҧn cho thҩy các hoҥt chҩt thuӕc BVTV nhóm nereistoxin rҩt nhҥy vӟLÿҫu dò khӕi phә'Rÿy trong khuôn khә luұQYăQQj\, không tiӃn hành nghiên cӭu tҥo dүn xuҩt, thӵc nghiӋm khҧo sát dung môi chiӃt mүu và SKѭѫQJSKiSOjPVҥch mүu

Chuҭn bӏ các mүu thêm chuҭQÿӇ thӵc hiӋn khҧo sát các khҧRViWQKѭVDX&kQ g mүu vào ӕng nhӵa chiӃt mүu 50 mL Thêm thӇ tích dung dӏch chuҭn vào phҫn mүu thӱ ÿmFkQÿӇ WKXÿѭӧc nӗQJÿӝ các chҩt phân tích mong muӕn LҳFÿӅu bҵng máy lҳc tròn WURQJKDLSK~WĈӇ yên mүu ӣ nhiӋWÿӝ phòng trong ít nhҩWSK~WWUѭӟc khi phân tích MүXWKXÿѭӧc là mүu thêm chuҭn ӣ mӭc nӗQJÿӝ 0,05 mg/kg MүXÿѭӧc OѭXWUӳ và bҧo quҧn ӣ nhiӋWÿӝ -18 o C nӃu FKѭDSKkQWtFKQJD\Oұp tӭc [15]

Tỷ lệ hồi thu đạt 70-120% [19] Để tính tỷ lệ hồi thu, tiến hành phân tích các mẫu thêm chuẩn ở 2 mức nồng độ 0,01 mg/kg và 0,1 mg/kg Tỷ lệ hồi thu được tính theo công thức sau: %H = (A - B)/C * 100

7URQJÿy S o : Di n tích peak phân tích m̳u S

S R : Di n tích peak m̳u thêm chu̱n

S Ro : Di n tích peak dung d͓ch chu̱n trong n͉n

2.3.2.1 Khҧo sát dung môi chiӃt

Cuộc khảo sát này tập trung vào ảnh hưởng của nhiều loại dung môi chiết xuất đến tính chất hóa học của các hợp chất thuốc bảo vệ thực vật, bao gồm phân tích quang phổ khối lượng với độ phân giải cao (HRMS), sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối phổ khối (HPLC-MS) và phân tích nhiệt độ nóng chảy (DSC) để so sánh hiệu suất của các loại dung môi, hỗn hợp dung môi và tác nhân khử proton hóa.

Các hӧp chҩWSKkQWtFKÿӅu tan tӕt trong dung môi phân cӵFGRÿyOӵa chӑn các dung môi khҧo sát phân cӵc và phù hӧp vӟL ÿLӅu kiӋn thӵc tӃ: axetonitril (ACN), mHWKDQRO0H2+YjQѭӟc (H2O) và vӟi các tӍ lӋ khác nhau 9uÿһFWUѭQJFӫa nӅn mүu tiêu, gҥo là thӇ tích riêng lӟQGRÿyNKҧo sát hӋ dung môi chiӃt vӟi 10 mL hӋ dung môi cho 5 g mүu Thӵc nghiӋPÿmWLӃn hành nghiên cӭu các hӋ dung môi chiӃt khác nhau vӟi tӍ lӋ 10 mL hӋ dung môi chiӃt cho 5 g mүu

B̫ng 2.5: Các h dung môi chi͇t m̳u kh̫o sát

HӋ dung môi chiӃt Kí hiӋu pH

Thӵc hiӋn phân tích 5 lҫn tҥi 2 mӭc thêm chuҭn 0,01 mg/kg và 0,1 mg/kg HiӋu quҧ cӫa các hӋ GXQJP{LÿѭӧFÿiQKJLiWK{QJTXDÿӝ thu hӗi cӫa các chҩt phân tích 6DXNKLÿmOӵa chӑQÿѭӧc hӋ dung môi chiӃt phù hӧp, tiӃn hành khҧo sát tӍ lӋ dung môi và Oѭӧng mүu (mL dung môi : gram mүu) khác nhau Tӯ các kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi lӵa chӑn tӍ lӋ GXQJP{LYjOѭӧng mүu thích hӧSÿҧm bҧo hiӋu quҧ chiӃt

B̫ng 2.6: Kh̫o sát t͑ l GXQJP{LYjO˱ͫng m̳u

TӍ lӋ GXQJP{LYjOѭӧng mүu Kí hiӋu

1:10 R4 ĈӇ thӵc hiӋQSKkQWtFKOѭӧng mүu sӱ dөng là 5 g, nhҵPÿҧm bҧROѭӧng mүXÿӫ lӟQÿӇ ÿҥi diӋn cho mүXSKkQWtFKÿӗng thӡi không quá nhiӅu gây lãng phí và khó NKăQWURQJWKDRWiF

2.3.2.2 KhҧRViWSKѭѫQJSKiSOjPVҥch

NӅn mүu tiêu và gҥo có thành phҫn phӭc tҥp, khi sӱ dөng dung môi chiӃt, dӏch chiӃt có chӭa các thành phҫQFyÿӝ phân cӵc tӯ WUXQJEuQKÿӃn kém ViӋFEѫPWUӵc tiӃp dӏch chiӃt vào thiӃt bӏ phân tích có tác hҥLY{FǊQJOӟQÿӕi vӟi thiӃt bӏ: khiӃn áp suҩt trong hӋ thӕng tăQJFDRgây bҭn và nghҽt cӝt, giҧm tuәi thӑ hӋ thӕng và cӝt phân tíchJk\KѭKӓng và thiӋt hҥi vӅ kinh tӃ Ngoài ra, bҳt buӝc phҧi vӋ sinh thiӃt bӏ vӟi tҫn suҩWTXiFDRFǊQJJk\JLiQÿRҥn viӋc phân tích, ҧQKKѭӣng trӵc tiӃSÿӃn hiӋu quҧ công viӋF'Rÿy cҫn thiӃt thӵc hiӋn làm sҥch dӏch chiӃt mүXWUѭӟc khi phân tích

Chiết pha rắn (SPE) là một kỹ thuật phân tích tách phân tử giữa pha lỏng và pha rắn Pha rắn là các hạt nhân, được nhúng vào trong các ống nhỏ Pha lỏng chảy qua ống, các thành phần của pha rắn sẽ được giữ lại trên ống Các thành phần này sau đó được rửa giải khỏi pha rắn bằng một dung môi khác phù hợp [45] Nguyên liệu tạo pha rắn là silica, ký hiệu là Si, có khả năng phân tích hiệu quả, dung môi sử dụng ít, dễ tập trung các thành phần cần phân tích nên thuận tiện trong quá trình thu hồi, có thể vận dụng trong nhiều lĩnh vực nhưng giá thành cao.

Quy trình chiӃt pha rҳn gӗPJLDLÿRҥn [45]:

*LDLÿRҥn 1: Hoҥt hóa cӝt chiӃt bҵng dung môi và loҥi bӓ các khí trong cӝt

*LDLÿRҥn 3: Rӱa tҥp chҩt ChӑQGXQJP{LÿӇ hòa tan rӱa giҧi tҥp chҩt

*LDLÿRҥn 4: Rӱa giҧi Chӑn dung môi phù hӧp có thӇ hòa tan rӱa giҧi chҩt cҫn phân tích

ChiӃt pha rҳQSKkQWiQG63(FǊQJQKҵm làm sҥch dung dӏch mүu, kӻ thuұt này dӵa vào các hҥt rҳn có khҧ QăQJgiӳ lҥi các hoҥt chҩt không mong muӕQQKѭFiFFKҩt màu thӵc vұt, tinh dҫXô'ӏch chiӃWÿѭӧc thờm trӵc tiӃp vào bӝt chiӃt pha rҳn phõn tán, lҳc kӻ ÿӇ hҩp phө tҥp chҩt vào bӝt rҳn Kӻ thuұt này chӫ yӃu dӵa vào tính chҩt cӫa hҥt rҳQOѭӧng pha rҳQFǊQJQKѭ thành phҫn dӏch chiӃt [46] Kӻ thuұt chiӃt pha rҳn phân tán dӉ dàng thӵc hiӋn, tuy nhiên mӝt loҥi bӝt chiӃt pha rҳn khó loҥi bӓ hoàn toàn tҥp chҩt, vì vұy trong thӵc tӃ WKѭӡng dùng nhiӅu loҥi bӝt chiӃt pha rҳn vӟi TӍ lӋ thích hӧp NӃXOѭӧng bӝt chiӃt quá ít, không thӇ hҩp phө Oѭӧng lӟn tҥp chҩt trong mүu, QJѭӧc lҥi Oѭӧng bӝt chiӃt quá nhiӅu sӁ hҩp phө cҧ các chҩt phân tích, dүQÿӃn ÿӝ thu hӗi thҩp

DӵDYjRÿLӅu kiӋn thӵc tӃ FǊQJQKѭWtQKFKҩt hoҥt chҩt phân tích, tiӃn hành làm sҥch mүu bҵng nhiӅu loҥi cӝt chiӃt pha rҳn

9 Cӝt chiӃt pha rҳn InertSep PRS, 500 mg (SCX)

InertSep SCX là pha rҳn silica gel vӟi nhóm chӭc benzen sulfonyl propyl trên bӅ mһtGRÿyFӝt có khҧ QăQJOѭXJLӳ hoҥt chҩWWK{QJTXDWѭѫQJWiFWUDRÿәi cation và

WѭѫQJWiFNӏ Qѭӟc Cӝt InertSep PRS là chҩWWUDRÿәi cation mҥnh, phù hӧp vӟi các hӧp chҩWFyWtQKED]ѫ\Ӄu trong dung dӏFKQѭӟc [47]

Hình 2.5: Nhóm chͱc trên b͉ m̿t c͡t chi͇t pha r̷n InertSep PRS

Quy trình làm sҥch: Hoҥt hóa cӝt bҵng lҫQ Oѭӧt 1 mL H2O, 1 mL ACN, 1 mL 0H2+6DXÿy WKrP 2 mL dӏch mүu chiӃt vào cӝt Rӱa tҥp chҩt bҵng 2 mL etyl acetate, làm khô cӝt bҵng N2 khô Gѭӟi áp suҩt thҩp) Rӱa giҧi hoҥt chҩt cҫn phân tích bҵng 2 mL MeOH 1% formic axit Cô cҥn dӏch sau khi rӱa giҧi bҵng hӋ thӕng thәi khô mүu bҵng khí N2VDXÿyKzDWDQEҵng 2 mL MeOH 1% formic axit [47]

9 Cӝt chiӃt pha rҳn Strata FL-PR Florisil (170 Pm, 70 Å), 500 mg

Strata Florisil là chҩt hҩp thө silica biӃn tính có chӭa ion magiê trên bӅ mһt, cho phép giӳ lҥi các hӧp chҩt phân cӵc và halogen hóa phù hӧp vӟi thuӕc trӯ sâu [48] Quy trình làm sҥch: Hoҥt hóa cӝt bҵng lҫQOѭӧt 1 mL H2O, 1 mL ACN và 1 mL MeOH 6DX ÿy WKrP 2 mL dӏch mүu chiӃt vào cӝt Rӱa tҥp chҩt bҵng 2 mL etyl acetate, làm khô cӝt bҵng N2 NK{Gѭӟi áp suҩt thҩp) Rӱa giҧi hoҥt chҩt cҫn phân tích bҵng 2 mL MeOH 1% trifloroacetic axit Cô cҥn dӏch sau khi rӱa giҧi bҵng hӋ thӕng thәi khô mүu bҵng khí N2VDXÿyKzDWDQEҵng 2 mL MeOH 1% formic axit

9 Cӝt chiӃt pha rҳn Strata C18-E (55 Pm, 70 Å), 500 mg

Strata C18-E là chҩt hҩp thө chiӃt pha rҳn C18 (SPE) có khҧ QăQJOѭXJLӳ tӕt ÿӕi vӟi các hoҥt chҩt kém phân cӵc Các nhóm silanol trên bӅ mһt có thӇ WѭѫQJWiFYӟi hoҥt chҩt phân cӵFWX\QKLrQFѭӡQJÿӝ NK{QJÿiQJNӇ Strata C18-E phù hӧp chiӃt các chҩt hoҥt chҩt hӳXFѫNӷ Qѭӟc

Hình 2.6: Nhóm chͱc trên b͉ m̿t c͡t chi͇t pha r̷n Strata C18-E bҵng 2 mL MeOH 1% formic axit Cô cҥn dӏch sau khi rӱa giҧi bҵng hӋ thӕng thәi khô mүu bҵng khí N2VDXÿyKzDWDQEҵng 2 ml MeOH 1% formic axit [49]

9 Cӝt chiӃt pha rҳn Bond Elut-SAX, 500 mg

Bond Elut-SAX chӭDSKDWƭQKOjFKҩt hҩp phө silica trên bӅ mһt có N bұc 4, sӵ OѭX giӳ các chҩt phө thuӝFYjRS+YjFѭӡQJÿӝ ion hóa Các chҩWÿѭӧc giӳ lҥi trên cӝt chӫ yӃu dӵDYjRWѭѫQJWiFJLӳa hai ion trái dҩu Cӝt Bond Elut-SAX là chҩWWUDRÿәi anion mҥnh, phù hӧp vӟi các hӧp chҩWPDQJLRQkPQKѭD[LWFDUER[\OLF [50]

Hình 2.7: Nhóm chͱc trên b͉ m̿t c͡t chi͇t pha r̷n Bond Elut-SAX

THҬ0Ĉӎ1+3+ѬѪ1*3+È3

Tính chӑn lӑc

Thực hiện phân tích 5 lần mẫu thử và chọn một mức ngưỡng là 0,005 mg/kg tương ứng với mỗi năm mẫu Nếu mẫu thử không xuất hiện tín hiệu các hoạt chất phân tích thì tiếp tục chọn mẫu thử khác cho đến khi xuất hiện tín hiệu các hoạt chất phân tích được so sánh.

Ĉѭӡng chuҭn

KhҧRViWÿӝ tuyӃn tính cӫa các hoҥt chҩt trong khoҧng nӗQJÿӝ 0,001-0,5 Pg/mL Xây dӵQJ ÿѭӡng chuҭn trong dung môi và ÿѭӡng chuҭn trong mӛi nӅn mүu ӣ khoҧng nӗQJÿӝ 0,001-0,5 Pg/mL

Dãy dung dӏch chuҭn làm viӋc trong dung môi có nӗQJÿӝ là: 0,001-0,5 Pg/mL ÿѭӧc chuҭn bӏ bҵng cách hút các thӇ tích dung dӏch chuҭn làm viӋc nӗQJÿӝ 0,1 và 1,0 Pg/ml, dung dӏch chuҭn trung gian nӗQJÿӝ 10 Pg/ml, dung dӏch 1% axit formic vào các lӑ ÿӵng mүu dung tích 1,5 mL WѭѫQJӭng theo bҧQJGѭӟLÿk\ ÿyQJFKһp nҳp và lҳFÿӅu

B̫ng 2.9: Cách pha các dung d͓ch chu̱n trong dung môi ĈLӇm chuҭn, àg/ml 0,001 0,005 0,01 0,02 0,05 0,1 0,2 0,5 Dung dӏch chuҭn trung gian 10 Pg/ml, àl

Dung dӏch chuҭn làm viӋc 1 Pg/ml, àl - - 10 20 50 - - -

Dung dӏch chuҭn làm viӋc 0,1 Pg/ml, àl 10 50 - - - -

Dung dӏch 1% axit formic, àl 990 950 990 980 950 990 980 950 Tәng thӇ tớch, àl 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Dãy dung dӏch chuҭn làm viӋc trong nӅn mүu có nӗQJ ÿӝ là: 0,001-0,5 Pg/mL ÿѭӧc chuҭn bӏ WѭѫQJWӵ QKѭWURQJGXQJP{LQKѭQJGQJQӅn mүu trҳng thay cho dung dӏch 1% axit formic

DӵDYjRÿѭӡng chuҭn trong dung môi và trong nӅn mүXÿӇ tính toán ҧQKKѭӣng cӫa nӅn mүu lên tín hiӋu cӫa các hoҥt chҩt phân tích ҦQKKѭӣng nӅn (Matrix effect- ME) là ҧnh KѭӣQJWKѭӡng xuҩt hiӋn trong kӻ thuұt phân tích LC-06ÿһc biӋt khi sӱ dөng nguӗn ion hóa ESI [51] ҦQKKѭӣng nӅQGRWKD\ÿәi hiӋu suҩt ion hóa cӫa chҩt phân tích khi có mһt các hӧp chҩWÿӗng rӱa giҧi trong nӅn chҩt ҦQKKѭӣng nӅn có thӇ WăQJFѭӡng hay triӋt tiêu khҧ QăQJLRQKyD DӵDWUrQÿiQKJLiYӅ ҧQKKѭӣng nӅn mүXÿӇ lӵa chӑn sӱ dөQJÿѭӡng chuҭQÿѭӧc xây dӵng trong dung môi hay trong nӅn mүXÿӇ tính toán kӃt quҧ ҦQKKѭӣng cӫa nӅn mүXÿѭӧc thӇ hiӋn thông qua giá trӏ 0(QKѭVDX ܯܧሺΨሻ ൌ ฬͳ െ ܽ ܽ ଴ ฬ ൈ ͳͲͲ

7URQJÿy a là ÿ͡ d͙c cͯDÿ˱ͥng chu̱n trong n͉n m̳u a 0 là ÿ͡ d͙c cͯDÿ˱ͥng chu̱n trong dung môi ĈiQKJLiҧQKKѭӣng cӫa nӅn mүXQKѭVDX [30]:

- KӃt luұn nӅn mүu ҧQKKѭӣng không ҧQKKѭӣng hay ҧQKKѭӣQJNK{QJÿiQJNӇ ÿӃn khҧ QăQJLRQKóa, tín hiӋu cӫa hoҥt chҩt phân tích khi ME < 20% KKLÿyFy thӇ WtQKWRiQYjÿiQKJLiNӃt quҧ dӵDWUrQÿѭӡng chuҭQÿѭӧc pha trong dung môi

- Ĉӕi vӟLWUѭӡng hӧp giá trӏ ME 20%, nӅn mүu ҧQKKѭӣng ҧQKKѭӣQJÿiQJNӇ ÿӃn khҧ QăQJLRQKyDWtQKLӋu cӫa hoҥt chҩt phân tích, cҫn phҧi xây dӵQJÿѭӡng chuҭn trong nӅn mүXOjPFѫVӣ tính toán kӃt quҧ.

Giӟi hҥn phát hiӋn (LOD) và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧQJÿӏQKOѭӧng (LOQ)

Thӵc hiӋn phân tích lһp lҥi 5 lҫn mүu thêm chuҭn ӣ các mӭc nӗQJÿӝ 0,05; 0,01; 0,003 và 0,001 mg/kg trên tӯng nӅn mүu

Tính toán giá trӏ S/N cho tӯng hoҥt chҩt

Mӭc nӗQJÿӝ thêm chuҭn có giá trӏ S/N ÿiSӭng yêu cҫu FyWKӇ ÿѭӧc lӵa chӑn làm giӟi hҥn phát hiӋn cӫDSKѭѫQJSKiS

Ĉӝ lһp lҥi

TiӃn hành phân tích lһp lҥi 5 lҫn tҥi các mӭc nӗQJÿӝ 0,01 mg/kg và 0,05 mg/kg trên mӛi nӅn mүu

Mүu thêm chuҭQÿѭӧc chuҭn bӏ bҵng cách Ĉӝ ÿ~QJÿѭӧc biӇu thӏ WK{QJTXDÿӝ thu hӗi trung bình (Htb) Ĉӝ chөPÿѭӧc biӇu thӏ WK{QJTXDÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi (RSD%)

ѬӞ&/ѬӦNG ĈӜ +Ð1*ĈҦM BҦ2Ĉ2

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ chөm-u precision

Thuốc có biến động hiệu suất thu hồi trong phạm vi nồng độ 0,003-0,5 mg/kg Nồng độ không hiển thị sự khác biệt đáng kể giữa các mức nồng độ Hiệu suất thu hồi có sự khác biệt giữa các loại mẫu được phân tích với các chủng chất nền khối lượng cao, trong đó pH của dịch chiết cũng ảnh hưởng đến hiệu suất thu hồi và kết quả phân tích.

Dӵa vào phҥm vi phân tích cӫa SKѭѫQJSKiSWKXÿѭӧc giá trӏ ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJ ÿӕi tәng (RSDpool) cho tӯng nӅn mүu, tӯ ÿyWtQKJLiWUӏ uprecision QKѭF{QJWKӭc sau: ݑ ௣௥௘௦௜௖௜௢௡ ൌ ඨσ ܴܵܦ ௣௢௢௟ǡ௜ ଶ ݊

7URQJÿy ܴܵܦ ௣௢௢௟ ೔ : Ĉ͡ l ch chu̱QW˱˯QJÿ͙i t͝ng cͯa n͉n m̳u i n: S͙ n͉n m̳u kh̫o sát

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ-u bias

Ĉӝ ÿ~QJÿѭӧFÿӏQKOѭӧng thông qua giá trӏ ubias-ÿӝ chӋch thӇ hiӋn sӵ khác biӋt giӳa giá trӏ ÿRYjJLiWUӏ thӵc ݑ ௕௜௔௦ ൌ ටሺοሻ ଶ ൅ ݑ ௩௢௟ ଶ ൅ ݑ ௖௢௡௖ ଶ

7URQJÿy ': ÿ͡ ch ch cͯa hi u sṷt thu h͛i so vͣi 100% u (vol) ÿ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRFͯa th͋ tích thêm chu̱n u (conc) Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRFͯa ch̭t chu̱n

2.5.2.1 Ĉӝ chӋch cӫDÿӝ thu hӗi Ĉӝ chӋch thӇ hiӋn sӵ sai lӋch cӫa kӃt quҧ phân tích so vӟi giá trӏ nӗQJÿӝ thұt trong mүu phân tích Dӳ liӋu thҭPÿӏQKSKѭѫQJSKiSWӯ các mүu thêm chuҭQGRÿyFyWKӇ biӃWÿѭӧc nӗQJÿӝ chính xác cӫa các chҩt phân tích trong mүu phân tích Sӱ dөng tҩt cҧ các dӳ liӋXÿӝ thu hӗi ӣ các nӗQJÿӝ và nӅn mүXÿӇ WtQKWRiQÿӝ chӋFKQKѭVDX οൌ ඩ෍ሺܪ ௜ െ ͳͲͲሻ ଶ ݊ ௡ ௜ୀଵ ൌ ඥȁܪഥ െ ͳͲͲȁ ଶ ൅ ܵܦ ଶ

7URQJÿy 'Ĉ͡ ch ch cͯDÿ͡ thu h͛i, %

H i : Hi u sṷt thu h͛i l̯n phân tích thͱ i n: s͙ l̯n phân tích l̿p l̩i ܪഥǣHi u sṷt thu h͛i trung bình

2.5.2.2 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa thӇ tích thêm chuҭn Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧo cӫa thӇ tích thêm chuҭn bӣi sai sӕ cӫa pipet khi hút chuҭn VSLNHGÿѭӧc tính toán WK{QJTXDÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDSLSHWÿѭӧc công bӕ hoһc sau khi hiӋu chuҭn theo phân bӕ chӳ nhұt: ݑ ௩௢௟ ൌ σ ௨ ೛೔೛೐೟ ௏ ೞ೛೔ೖ೐೏ ൈξଷ

7URQJÿy u vol : Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRFͯa th͋ tích thêm chu̱n, %

2.5.2.3 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa nӗQJÿӝ chuҭn

Chuҭn trung gian dùng thêm vào mүu thêm chuҭQÿѭӧc pha tӯ chuҭn rҳn Nӗng ÿӝ chuҭQWUXQJJLDQÿѭӧFWtQKQKѭVDX ܥ ൌ݉ ൈ ݇ ൈ ܲ ൈ ͳͲ ଺ ܸ ௕¯௠௦௧௢௖௞ ൈ ܸ ௖௛௨ኺ௡௦௧௢௖௞ ൈ ͳͲ ିଷ ܸ௕¯௠௖௛௨ኺ௡௧௥௨௡௚௚௜௔௡

7URQJÿy C: n͛QJÿ͡ chu̱n trung gian, Pg/mL m: Kh͙LO˱ͫng chu̱n r̷n, g k: H s͙ chuy͋Qÿ͝i chu̱QWK˱˯QJP̩i và chu̱n phân tích 3Ĉ͡ tinh khi͇t chu̱n r̷n, %

V EÿPVWRFN : Th͋ WtFKEuQKÿ͓nh mͱc pha chu̱n stock, mL

V chu̱n stock : Th͋ tích chu̱n stock dùng pha chu̱n trung gian, PL

V EÿPWUXQJgian : Th͋ WtFKEuQKÿ͓nh mͱc pha chu̱n stock, mL Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa chuҭn trung gian dùng thêm vào mүu thêm chuҭn gây ra bӣi sӵ NK{QJÿҧm bҧo vӅ ÿӝ tinh khiӃt cӫa chuҭn rҳn, khӕLOѭӧng chuҭn cân, bình ÿӏnh mӭc và pipet

Dӵa vào quy tҳFFѫEҧn cӫa sӵ lan truyӅn sai sӕÿӝ không ÿҧm bҧRÿRFӫa nӗng ÿӝ chuҭn uconc ÿѭӧFWtQKQKѭVDX ݑ ௖௢௡௖ ൌ ඨ൬ ݑ ௖௡ ݉ξ͵ ൰ ଶ ൅ ൬ ͳͲͲ െ ܲ ͳͲͲξ͵ ൰ ଶ ൅ ቆ ܽ ௕¯௠௦௧௢௖௞ ܸ ௕¯௠௦௧௢௖௞ ξ͸ ቇ ଶ ൅ ቆ ݑ ௣௜௣௘௧ ܸ ௖௛௨ኺ௡௦௧௢௖௞ ξ͵ ቇ ଶ ൅ ቆ ܽ ௕¯௠௧௥௨௡௚௚௜௔௡ ܸ ௕¯௠௧௥௨௡௚௚௜௔௡ ξ͸ ቇ ଶ

Vì các giá trӏ ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRcông bӕ cho các dөng cө ÿRFyÿѫQYӏ khác QKDX'RÿyFҫn chia cho giá trӏ ÿRTX\YӅ FQJÿѫQYӏ OjÿӇ có thӇ tәng hӧp WKjQKÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿR cӫa nӗQJÿӝ chuҭn. ucân Ojÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa cânÿѭӧc cung cҩp bӣi nhà sҧn xuҩt hoһc dӳ liӋu sau khi hiӋu chuҭn Áp dөng phân bӕ chӳ nhұWÿӇ WtQKWRiQÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRWLrX chuҭn cӫDFkQĈӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa cân phân tích sӱ dөng là ucân=0,0001 g 3Ojÿӝ tinh khiӃt cӫa chuҭQÿѭӧc công bӕ theo chӭng nhұn chuҭn phân tích Áp dөng phân bӕ chӳ nhұWÿӇ WtQKWRiQÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRWLrXFKXҭn cӫDÿӝ tinh khiӃt chuҭn rҳn aEÿP là dung sai cӫDEuQKÿӏnh mӭFÿѭӧc cung cҩp bӣi nhà sҧn xuҩt hoһc dӳ liӋu sau khi hiӋu chuҭn Áp dөng phân bӕ WDPJLiFÿӇ tínKWRiQÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRWLrX chuҭn cӫDEuQKÿӏnh mӭc Dung sai cӫDEuQKÿӏnh mӭc 10 P/ÿѭӧc sӱ dөng trong quy trình là aEÿP= 0,02 mL upipet Ojÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDPLFURSLSHWÿѭӧc cung cҩp bӣi nhà sҧn xuҩt hoһc dӳ liӋu sau khi hiӋu chuҭn Áp dөng phân bӕ chӳ nhұWÿӇ WtQKWRiQÿӝ NK{QJÿҧm bҧo ÿRWLrXFKXҭn cӫDPLFURSLSHWĈӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa micropipet 100 P/ÿѭӧc sӱ dөng trong quy trình là upipet=0,1 PL

&+ѬѪ1* KӂT QUҦ VÀ BÀN LUҰN

Ĉ,ӄU KIӊN VҰN HÀNH THIӂT Bӎ SҲC KÝ GHÉP KHӔI PHӘ

TӕLѭXPҧnh khӕi các hoҥt chҩt

KӃt quҧ tӕLѭXPҧnh khӕi các hoҥt chҩWSKkQWtFKÿѭӧc trình bày tҥi bҧng 3.1

B̫ng 3.1: K͇t qu̫ t͙L˱XP̫nh kh͙i

&DUWDS WURQJP{LWUѭӡQJD[LWÿm ion hóa thành dҥQJLRQ GѭѫQJPҧnh khӕi mҽ PDQJÿLӋQGѭѫQJ>0+@ + tӕLѭXÿѭӧc phù hӧp vӟi khӕLOѭӧng phân tӱ lý thuyӃt Hai mҧnh ion con tӕLѭXÿѭӧc là 73 và 150 phù hӧp vӟi các tài liӋu tham khҧo

Hình 3.1: Phân m̫nh d͹ ÿRiQFͯa cartap, m/z0

1HUHLVWR[LQ FǊQJ LRQ KyD WURQJ P{L WUѭӡng axit Mҧnh ion mҽ PDQJ ÿLӋn tích GѭѫQJQuá trình tӕLѭXÿm[iFÿӏQKÿѭӧc 2 mҧnh khӕLFRQÿiSӭng yêu cҫu vӅ ÿӏnh GDQKYjÿӏQKOѭӧng bҵng khӕi phә Các mҧnh khӕLFRQWuPÿѭӧc FǊQJ phù hӧp vӟi các tài liӋu tham khҧo

Hình 3.2: Phân m̫nh d͹ ÿRiQFͯa nereistoxin, m/z5

Thiocyclam cho mҧnh ion mҽ [M+H] + , do ion hóa tҥo N bұFWURQJP{LWUѭӡng axit Cҧ hai mҧQKLRQFRQÿӅu có tín hiӋu tӕt Quá trình tӕLѭXÿm[iFÿӏQKÿѭӧc 2 mҧnh khӕi FRQ ÿiS ӭng yêu cҫu vӅ ÿӏQK GDQK Yj ÿӏQK Oѭӧng bҵng khӕi phә Các mҧnh khӕLFRQWuPÿѭӧFFǊQJSKKӧp vӟi các tài liӋu tham khҧo

Hình 3.3: Phân m̫nh d͹ ÿRiQFͯa thiocyclam, m/z7

Thiosultap cho mҧnh ion mҽ PDQJÿLӋn tích âm [M-H] - , do sӵ phân ly trong môi WUѭӡng axit Quá trình tӕLѭXÿm[iFÿӏQKÿѭӧc 2 mҧnh khӕLFRQÿiSӭng yêu cҫu vӅ ÿӏQKGDQKYjÿӏQKOѭӧng bҵng khӕi phә Các mҧnh khӕLFRQWuPÿѭӧFFǊQJSKKӧp vӟi các tài liӋu tham khҧo.

Hình 3.4: Phân m̫nh d͹ ÿRiQFͯa thiosultap, m/z5

Hình 3.5: Phân m̫nh d͹ ÿRiQFͯa thiosultap, m/z#0

B: Dung dӏch 5mM amonium format và 0,1% axit formic

Hình 3.6: S̷FNtÿ͛ cͯa 4 ho̩t ch̭t s͵ s͵ dͭng c͡W+,/,&ÿ͋ phân tích

ThӡLJLDQOѭXFӫa cartap, nereistoxin, thiocyclam và thiosultap lҫQOѭӧt là 9,0; 8,8; 7,8 và 7,6 phút Cҧ 4 chҩWÿӅu cho tín hiӋu rҩt lӟn vӟi dung dӏch chuҭn 1 Pg/ml Hình dҥQJSHDNWѭѫQJÿӕLÿӕi xӭng, hӋ sӕ NpRÿX{L EpKѫQ1,5 cho cҧ 4 hoҥt chҩt

- 3KDÿӝng A: Methanol chӭa 5mM amonium format và 0,1% axit formic

Hình 3.7: S̷FNtÿ͛ cͯa 4 ho̩t ch̭t s͵ s͵ dͭng c͡W&ÿ͋ phân tích

Hình 3.8: S̷FNtÿ͛ cͯa 4 ho̩t ch̭t s͵ s͵ dͭng c͡W&ÿ͋ phân tích

Các thành phần nereistoxin, thiocyclam và WKLRVXOWDSÿӅu rҩt lӟn, dùng để xi mạ SHDNÿӕi xӭng Tuy nhiên, trong 4 chҩt EpKѫQ1,5 phút, các thành phần kể trên là các thành phần phụ trên bề mặt SKDWƭQKOjSKDÿҧR'RÿyFҧ cӝW&Yj&ÿӅu không thích hợp để phân tích các thuốc BVTV nhóm nereistoxin.

- 3KDÿӝng A: Methanol chӭa 1% axit formic

Hình 3.9: S̷FNtÿ͛ cͯa 4 ho̩t ch̭t s͵ dͭng c͡t hypercarb ÿ͋ phân tích Ĉӕi vӟi cӝt hypercarb, thӡLJLDQOѭXFӫa 4 chҩt phân tích lҫQOѭӧt khoҧng 12, 16, YjSK~WWѭѫQJӭng vӟLWKLRF\FODPQHUHLVWR[LQFDUWDSYjWKLRVXOWDS&ѭӡQJÿӝ tín hiӋu cӫa các peak nhӓ hѫQQKLӅu so vӟi khi sӱ dөng cӝWSKDÿҧo C8, C18 hay cӝt HILIC BӅ rӝng chân peak lӟQSHDNNK{QJÿӕi xӭQJĈӗng thӡi khi thӵc hiӋn các

WKD\ÿәLÿӕi vӟLSKDÿӝQJFǊQJNK{QJFҧi thiӋn tín hiӋu và hình dҥng peak 'Rÿy SKDWƭQKOjFӝt hypercarb không phù hӧSÿӇ phân tích

7URQJFiFSKDWƭQKNKҧo sát, cӝt HILIC cho các kӃt quҧ tӕt vӅ cҧ hình dáng peak, thӡLJLDQOѭXYjFѭӡQJÿӝ tín hiӋu Cӝt HILIC là thích hӧSÿӇ sӱ dөQJFKRSKѭѫQJ pháp nghiên cӭu.

KӂT QUҦ KHҦO SÁT THӠI GIAN Ә1ĈӎNH CӪA DUNG DӎCH CHUҬN

Dung dӏch chuҭn làm viӋc, 1 Pg/mL

Kết quả tính toán khả năng phục hồi trên môi trường dinh dưỡng chuẩn làm việc 1 µg/mL được thể hiện trong bảng 3.2-3.5 Dữ liệu về thời gian khảo sát, diện tích đỉnh và cách tính toán cố thể được tìm thấy ở phụ lục 1.

B̫ng 3.2: K͇t qu̫ kh̫o sát ÿ͡ b͉n dung d͓ch chu̱n làm vi c 1 Pg/mL, ho̩t ch̭t cartap

KӃt quҧ khҧo sát cho thҩy, hoҥt chҩt cartap có nӗQJÿӝ dung dӏch chuҭn WKD\ÿәi trong thӡi gian bҧo quҧQWKHR[XKѭӟng giҧm dҫn Trong 15 ngày bҧo quҧQÿҫu tiên, nӗQJÿӝ hoҥt chҩWFyWKD\ÿәLQKѭQJYүn nҵm trong giӟi hҥn cho phép là 10% Khi phân tích dung dӏch chuҭn có thӡi gian bҧo quҧn lӟQKѫQQJj\NӃt quҧ tính toán thӇ hiӋn có sӵ khác biӋWÿiQJNӇ giӳa dung dӏch chuҭQFǊYjPӟi

B̫ng 3.3: K͇t qu̫ kh̫o sát ÿ͡ b͉n dung d͓ch chu̱n làm vi c 1 Pg/mL, ho̩t ch̭t nereistoxin

KӃt quҧ khҧo sát cho thҩy, hoҥt chҩt nereistoxin có nӗQJÿӝ dung dӏch chuҭn thay ÿәi trong thӡi gian bҧo quҧQQKѭQJNK{QJWKHR[XKѭӟng nhҩWÿӏnh Trong khoҧng

12 ngày bҧo quҧQÿҫu tiên, sӵ khác biӋt vӅ mһt thӕng kê giӳa chuҭn mӟLYjFǊOj NK{QJÿiQJNӇ Dung dӏch chuҭn có thӡi gian bҧo quҧn lӟQKѫQngày, chênh lӋch nӗQJÿӝ cӫa dung dӏch chuҭQFǊYѭӧt khӓi giӟi hҥn cho phép là 10%

B̫ng 3.4: K͇t qu̫ kh̫o sát ÿ͡ b͉n dung d͓ch chu̱n làm vi c 1 Pg/mL, ho̩t ch̭t thiocyclam

NӗQJÿӝ thiocyclam giҧm dҫn theo thӡi gian bҧo quҧn, và sau 21 ngày bҧo quҧn chênh lӋch nӗQJÿӝ giӳa dung dӏch chuҭQFǊYjPӟi là khác biӋWÿiQJNӇ

B̫ng 3.5: K͇t qu̫ kh̫o sát ÿ͡ b͉n dung d͓ch chu̱n làm vi c 1 Pg/mL, ho̩t ch̭t thiosultap

KӃt quҧ khҧo sát cho thҩy, hoҥt chҩt thiosultap có nӗQJÿӝ dung dӏch chuҭn thay ÿәi trong thӡi gian bҧo quҧQQKѭQJNK{QJWKHR[XKѭӟng nhҩWÿӏnh Trong khoҧng 9 ngày bҧo quҧQÿҫu tiên, sӵ khác biӋt vӅ mһt thӕng kê giӳa dung dӏch chuҭn mӟi và FǊOjNK{QJÿiQJNӇ Khi thӡi gian bҧo quҧn dung dӏch chuҭn lӟn hѫQ9 ngày, chênh lӋch nӗQJÿӝ cӫa dung dӏch chuҭQFǊYѭӧt khӓi giӟi hҥn cho phép là 10%

Dung dӏch chuҭn làm viӋc nӗQJÿӝ 1 PJP/ÿm[Xҩt hiӋn sӵ suy giҧm trong thӡi gian bҧo quҧn Thӡi gian bҧo quҧn mà nӗQJÿӝ dung dӏch chuҭQÿҧm bҧo nҵm trong giӟi hҥn cho phép lҫQOѭӧWOjYjQJj\WѭѫQJӭng vӟi cartap, nereistoxin, thiocyclam và thiosultap Tӯ kӃt quҧ phân tích nêu trên, dung dӏch chuҭn làm viӋc 1Pg/mL không thích hӧSÿӇ bҧo quҧn ӣ 4±2 o C Ĉӗng thӡi, viӋc khҧRViWÿLӅu kiӋn bҧo quҧn ӣ nhiӋWÿӝ thҩSKѫQOjNK{QJNKҧ thi do dung dӏch chuҭQSKDWURQJQѭӟc FǊQJQKѭWӕn kém kinh phí và khó áp dөng trong thӵc tӃ'Rÿy lӵa chӑQSKѭѫQJiQ chuҭn bӏ dung dӏch chuҭn làm viӋc 1 PJP/QJD\WUѭӟc khi sӱ dөng.

Dung dӏch chuҭn trung gian, 10 Pg/mL

diӋn tích peak cө thӇ ÿѭӧc thӇ hiӋn trong phө lөc 1 KӃt quҧ ÿѭӧc thӇ hiӋn trong các bҧng 3.6-3.9

B̫ng 3.6: K͇t qu̫ kh̫o sát ÿ͡ b͉n dung d͓ch chu̱n trung gian 10 Pg/mL, ho̩t ch̭t cartap

Trong vòng thời gian đầu tiên, số lượng người dùng dịch vụ chăm sóc sức khỏe tại nhà tăng mạnh, với số lượng người dùng dịch vụ chăm sóc sức khỏe tại nhà không sử dụng dịch vụ chăm sóc sức khỏe tại phòng khám tăng hơn 7% sau 4 tháng Theo phân tích của một công ty, giá trị dịch vụ chăm sóc sức khỏe tại nhà có thể tăng hơn 10%.

B̫ng 3.7: K͇t qu̫ ÿ͡ b͉n cͯa dung d͓ch chu̱n làm vi c 10 Pg/mL, ho̩t ch̭t nereistoxin

KӃt quҧ phân tích nӗQJÿӝ nereistoxin trong dung dӏch chuҭQWUXQJJLDQFǊYjPӟi WѭѫQJWӵ QKѭNӃt quҧ thӇ hiӋn vӟi cartap Các kӃt quҧ nӗQJÿӝ nereistoxin trong thӡi JLDQOѭXJLӳ nhӓ KѫQQJj\NK{QJFKrQKOӋch quá 5%, kӃt quҧ tính toán giá trӏ CI bao gӗPÿӝ lӋch chuҭQFǊQJNK{QJYѭӧWTXi'RÿyNKLWKӡLJLDQOѭXWUӳ nhӓ KѫQWKiQJQӗQJÿӝ nereistoxin trong dung dӏch chuҭn trung gian vүQÿiSӭng yêu cҫu cӫa SANTE/12682/2019 Khi thӡLJLDQOѭXWUӳ OѫQKѫQWKiQJVӵ WKD\ÿәi nӗng ÿӝ bҳWÿҫXWăQJOrQYjJLiWUӏ &,YѭӧWTXiĈһc biӋt, tҥi này thӭ OѭXWUӳ kӃt quҧ nӗQJÿӝ nereistoxin trong dung dӏch chuҭn FǊWăQJYӑt 116% so vӟi dung dӏch chuҭQ FǊ &y WKӇ lý giҧi nguyên nhân bӣi sӵ phân hӫy mӝt phҫn cartap thành nereistoxin trong dung dӏch chuҭn trung gian

B̫ng 3.8: K͇t qu̫ ÿ͡ b͉n cͯa dung d͓ch chu̱n làm vi c 10 Pg/mL, ho̩t ch̭t thiocyclam

KӃt quҧ kiӇm tra nӗQJÿӝ thiocyclam trong dung dӏch chuҭn trung gian cho kӃt quҧ thiocyclam trong dung dӏch chuҭn trung gian khá әQÿӏnh, WKD\ÿәi không quá 5%

Giá trӏ CI bao gӗPÿӝ phân tán cӫa kӃt quҧ FǊQJNK{QJYѭӧt quá 10%

B̫ng 3.9: K͇t qu̫ ÿ͡ b͉n cͯa dung d͓ch chu̱n làm vi c 10 Pg/mL, ho̩t ch̭t thiosultap

Thiosultap có nӗQJÿӝ chuҭn trung gian әQÿӏnh khi thӡi gian bҧo quҧn nhӓ KѫQ

110 ngày TҥLQJj\OѭXWUӳ thӭ 120, xuҩt hiӋn sӵ khác biӋWYѭӧt quá giӟi hҥn cho phép

CI + là 11,7% Tҥi QJj\OѭXWUӳ thӭ 130, kӃt quҧ lҥi thӇ hiӋn là không có sӵ khác biӋt ÿiQJNӇ, tuy nhiên giá trӏ CI + là 9,54 rҩt gҫn vӟLQJѭӥng cho phép Các kӃt quҧ phân WtFKVDXÿyÿӅXNK{QJÿiSӭng yêu cҫu Tӯ kӃt quҧ phân tích cho thҩ\ÿLӅu kiӋn bҧo quҧn thӵc tӃ chӍ có thӇ OѭXWUӳ thiosultap không quá 110 ngày

Tәng hӧp kӃt quҧ vӅ sӵ WKD\ÿәi nӗQJÿӝ cӫa cartap, nereistoxin, thiocyclam và thiosultap trong dung dӏch chuҭQWUXQJJLDQNKLOѭXWUӳ ӣ nhiӋWÿӝ 4±2 o C cho thҩy:

- Thiocyclam có thӡi gian әQÿӏnh tӕt nhҩt, lӟQKѫQWKiQJ

- Cartap và nereistoxin cho kӃt quҧ WѭѫQJWӵ nhau, kӃt quҧ xuҩt hiӋn sai lӋFKÿiQJ kӇ tҥLQJj\OѭXWUӳ thӭ 130

- 7KLRVXOWDSFyÿӝ әQÿӏnh kém nhҩt, chӍ có thӇ OѭXWUӳ không quá 110 ngày

7KrPYjRÿyYLӋc hҥ thҩp nhiӋWÿӝ bҧo quҧn là không khҧ thi khi dung dӏch chuҭn ÿѭӧc chuҭn bӏ trong Qѭӟc Vì vұy nhҵm ÿҧm bҧRÿӝ chính xác cӫa dung dӏch chuҭn trung gian, giҧm thiӇu sai sӕ ÿӕi vӟi kӃt quҧ phân tích, lӵa chӑn thӡi hҥn sӱ dөng cӫa chuҭn trung gian là 3 tháng ӣ nhiӋWÿӝ 4±2 o C.

KHҦ26È7Ĉ,ӄU KIӊN XӰ LÝ MҮU

Dung môi chiӃt mүu

HiӋu quҧ chiӃt cӫa các hӋ dung môi chiӃWÿѭӧFÿiQKJLiWK{QJTXDKLӋu suҩt thu hӗi Các kӃt quҧ cө thӇ ÿѭӧc thӇ hiӋn trong Bҧng 3.10-3.19

B̫ng 3.10: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E1: H 2 O

0,01 mg/kg 0,1 mg/kg 0,01 mg/kg 0,1 mg/kg

- Cartap thӇ hiӋQÿӝ thu hӗi WѭѫQJÿѭѫQJӣ hai mӭc nӗQJÿӝ thêm chuҭn, trung bình là 18% Ĉӝ tan cӫa cDUWDSWURQJQѭӟc theo lý thuyӃt là rҩt tӕt, tuy nhiên kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi thҩp do tính chҩt kém bӅQWURQJP{LWUѭӡng trung tính và kiӅm

- Nereistoxin Fyÿӝ thu hӗi trong khoҧng tӯ 117-138%, hiӋu suҩt thu hӗi >100% bӣi sӵ chuyӇn hóa cartap thành nereistoxin

- 7KLRF\FODPFKRÿӝ thu hӗi trong khoҧng 28-ÿӝ thu hӗi trung bình là 39% KӃt quҧ cho thҩy, sӱ dөQJGXQJP{LQѭӟFÿӇ chiӃt thiocyclam là không phù hӧp

- Thiosultap cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình 63%, kӃt quҧ WѭѫQJÿӕi tӕt so vӟi các chҩt còn lҥi, tuy nhiên vүQ FKѭD ÿҥt mӭc hiӋu suҩt thu hӗi yêu cҫu 70- 120%

B̫ng 3.11: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E2: H 2 O 0,1% axit formic

HӋ dung môi chiӃt E2 là dung dӏch 0,1% axit formic có pH § 3, cho các kӃt quҧ khҧRViWQKѭVDX

Hàm lượng cartap thủy phân trung bình từ 52-62% Kết quả thử nghiệm cho thấy khi sử dụng dung môi chiết E1, hiệu suất chiết giảm khi pH dung dịch chiết giảm, do pH giảm làm giảm tỷ lệ phân ly của cartap.

- 1HUHLVWR[LQFyÿӝ thu hӗi >100% trong khoҧng tӯ 118-137% sӵ chuyӇn hóa mӝt phҫn cartap thành nereistoxin

- 7KLRF\FODPFKRÿӝ thu hӗi trung bình là 55% KӃt quҧ WѭѫQJÿѭѫQJNKLVӱ dөng dung môi chiӃt E1

- Thiosultap cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình 58% KӃt quҧ WѭѫQJÿѭѫQJNKL sӱ dөng dung môi chiӃt E1

B̫ng 3.12: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E3: H 2 O 1% axit formic

HӋ dung môi chiӃt E3 là dung dӏch 1% axit formic có pH § 1,5, cho các kӃt quҧ khҧRViWQKѭVDX

Kết quả thu hồi đạt 76-97%, cao hơn đáng kể so với mẫu E1 và E2 pH giảm rõ rệt, suy giảm nồng độ cartap Các kết quả phù hợp với tính chất của cartap.

- 1HUHLVWR[LQFyÿӝ thu hӗi trung bình là 99%, ÿӝ thu hӗi riêng lҿ GDRÿӝng 80- 101% Khi pH cӫa dӏch chiӃt khoҧng 1,5 không xuҩt hiӋn hiӋn Wѭӧng chuyӇn hóa cartap thành nHUHLVWR[LQ GR ÿy ÿӝ thu hӗi nHUHLVWR[LQ NK{QJ Yѭӧt quá QKѭWUѭӡng hӧp chiӃt bҵng dung môi E1 và E2

- 7KLRF\FODPFKRÿӝ thu hӗi trung bình là 50% KӃt quҧ WѭѫQJÿѭѫQJNKLVӱ dөng dung môi chiӃt E1 và E2 ViӋFWKD\ÿәi pH dung dӏch chiӃt không làm WKD\ÿәi kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi cӫa thiocyclam

- Thiosultap cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình 69% KӃt quҧ WѭѫQJÿѭѫQJNKL sӱ dөng dung môi chiӃt E1 và E2 ViӋFWKD\ÿәi pH dung dӏch chiӃt không làm WKD\ÿәi kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi cӫa thiosultap

Hình 3.10: K͇t qu̫ kh̫o sát h dung môi chi͇t E1-E3

TKD\ÿәi pH cӫDQѭӟc khi chiӃt mүu, kӃt quҧ cho thҩy:

- KӃt quҧ ÿӝ thu hӗLWѭѫQJÿѭѫQJJLӳa 2 nӅn mүu

- pH cӫa dӏch chiӃt ҧQKKѭӣng rҩt lӟQÿӃQÿӝ thu hӗi cӫa cartap

- Sӵ suy giҧm cӫa chuҭn cartap sӁ ҧQKÿӃQÿӝ thu hӗi cӫa nereistoxin

- KLWKD\ÿәi pH, hiӋu quҧ chiӃt cӫDWKLRF\FODPYjWKLRVXOWDSWKD\ÿәi không ÿiQJNӇ Thiocyclam và thiosultap không cho hiӋu quҧ tӕt khi sӱ dөQJQѭӟc ÿӇ chiӃt

- Trong 3 hӋ dung môi E1-E3, dung môi chiӃt E3, dung dӏch axit formic 1%, cho kӃt quҧ tӕt nhҩt, hiӋu suҩt thu hӗi trung bình cӫa cartap, nereistoxin, thiocyclam và thiosultap lҫQOѭӧt là 84%, 90%, 50% và 69% Các kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình cӫDWKLRF\FODPYjWKLRVXOWDSFKѭDÿҥt yêu cҫu 70-120%

B̫ng 3.13: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E4: MeOH

HӋ dung môi chiӃt E4 là MeOH có pH § 5,5, cho các kӃt quҧ khҧRViWQKѭVDX

- Ĉӝ thu hӗLWUXQJEuQKWѭѫQJÿѭѫQJJLӳa 2 nӅn gҥo và tiêu

Kết quả chiết xuất cho thấy khi sử dụng MeOH làm dung môi chiết, tình trạng suy giảm cartap và một phần chuyển hóa thành nereistoxin vẫn xảy ra Tuy nhiên, hiệu suất thu hồi cartap rất thấp, còn hiệu suất thu hồi nereistoxin lại vượt quá giá trị cho phép.

- Ĉӝ thu hӗi cӫa thiocyclam trong khoҧng 69±ÿӝ hu hӗi trung bình là 75% 7KLRVXOWDSFǊQJWKӇ hiӋQÿӝ thu hӗLWѭѫQJWӵ khoҧng 71±87% Các kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi khҧ quan, tiӃQÿӃn vùng yêu cҫu 70±120%

B̫ng 3.14: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E5: MeOH 0,1% axit formic

HӋ dung môi chiӃt E5 là MeOH 0,1% axit formic có pH § 3,5, cho các kӃt quҧ khҧRViWQKѭVDX

- KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình cӫa cDUWDSWăQJOrQVRYӟi khi sӱ dөng hӋ dung môi E4, phù hӧp vӟi kӃt luұn khi pH giҧm thì sӁ làm giҧm thiӇu sӵ suy giҧm cӫa cartap

- Ĉӕi vӟi nHUHLVWR[LQÿӝ thu hӗi trung bình vүn lӟQKѫQ %

- 7KLRF\FODPFyÿӝ thu hӗi nҵm trong khoҧng 72-91ÿҥt yêu cҫu vӅ ÿӝ thu hӗL.KLWKD\ÿәi pH cӫa dung môi chiӃt tҥRÿLӅu kiӋn nguyên tӱ nLWѫFKX\Ӈn thành nLWѫEұc 4, do dó kӃt quҧ ÿӝ thu hӗLWăQJ khoҧng 10%

- Thiosultap thӇ hiӋQÿӝ thu hӗi trong khoҧng 76-ÿӝ thu hӗi trung bình

HӋ dung môi chiӃt E6 là MeOH 1% axit formic có pH § 2,5, cho các kӃt quҧ khҧo ViWQKѭVDX

- KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình cӫa cDUWDSWăQJOrQQҵm trong khoҧng 63-86%, ÿӝ thu hӗi trung bình 76% Khi pH dung dӏch chiӃt khoҧng 3,5, sӵ suy giҧm cӫa cartap nҵm trong giӟi hҥn cho phép, tuy nhiên vүQFzQFiFWUѭӡng hӧSÿӝ thu hӗi nҵm tҥLÿLӇm giӟi hҥn thҩp nhҩt 63-GRÿyFҫn tiӃp tөc khҧo sát ÿӇ cҧi thiӋn

- Ĉӝ thu hӗi nereistoxin nҵm trong khoҧng 85-108% Khi không có sӵ ҧnh Kѭӣng do cartap phân hӫy thành nereistoxin, kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình cӫa nereistoxin tiӃQÿӃn 100%

- Ĉӝ thu hӗi cӫa thiocyclam cho kӃt quҧ WѭѫQJWӵ khi sӱ dөng hӋ dung môi chiӃt E4 Khi tiӃp tөc giҧm pH cӫa dung dӏch chiӃWÿӝ thu hӗLFyWăQJQKѭQJNK{QJ ÿiQJNӇ

- Ĉӝ thu hӗi cӫDWKLRVXOWDSWKD\ÿәLNK{QJÿing kӇ so vӟi khi sӱ dөng hӋ dung môi chiӃW(Yj(Ĉӝ thu hӗi nҵm trong khoҧng 70-ÿӝ thu hӗi trung bình là 76%

Hình 3.11: K͇t qu̫ kh̫o sát h dung môi chi͇t E4-E6

7KD\ÿәi pH cӫa MeOH khi chiӃt mүu, kӃt quҧ cho thҩy:

- KӃt quҧ ÿӝ thu hӗLWѭѫQJÿѭѫQJJLӳa 2 nӅn mүu gҥo và tiêu

- Ĉӝ thu hӗi cӫa cartap bӏ ҧQKKѭӣng nhiӅu nhҩt bӣi pH cӫa dung dӏch chiӃt Khi giҧm pH dung dӏch chiӃWÿӝ thu hӗi cӫDFDUWDSWăQJÿiQJNӇ tӯ khoҧng 20% ÿӃn 75%

- pH cӫa dung dӏch chiӃt có ҧQKKѭӣQJÿӃQÿӝ thu hӗi cӫa thiocyclam, khi pH dung dӏch chiӃt giҧPÿӝ thu hӗi cӫa WKLRF\FODPWăQJQKҽ tӯ ÿӃn 90%

- 7KLRVXOWDSFKRÿӝ thu hӗi tӕt, lӟQKѫQ70%, pH dung dӏch hҫXQKѭNK{QJҧnh KѭӣQJÿӃQÿӝ thu hӗi Dung môi MeOH ÿѭӧFÿiQKJLiOjSKKӧSÿӇ chiӃt thiosultap

- Trong 3 hӋ dung môi chiӃt, E6: MeOH 1% axit formic cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi tӕt cho cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿҥt yêu cҫu vӅ ÿӝ thu hӗi chҩp nhұn là 70-120%

B̫ng 3.16: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E7: ACN

HӋ dung môi chiӃt E7 là ACN có pH § 5, cho các kӃt quҧ khҧRViWQKѭVDX

- Ĉӝ thu hӗi trung bình cӫa cartap rҩt thҩp, trong khoҧng 8-17% Tҥi pH là 5, cartap vүn có thӇ bӏ suy giҧPÿӗng thӡi khҧ QăQJWDQWURQJGXQJP{LKӳXFѫ cӫDFDUWDSFǊQJUҩt thҩS'RÿyNӃt quҧ phù hӧp vӟi các tính chҩt cӫa hoҥt chҩt

- 1HUHLVWR[LQFyÿӝ thu hӗi trung bình là 18% Mһc dù cartap vүn bӏ chuyӇn hóa thành nereistoxin, tuy nhiên khҧ QăQJ WDQ WURQJ GXQJ P{L KӳX Fѫ Fӫa QHUHLVWR[LQFǊQJUҩt thҩp, dүQÿӃQÿӝ thu hӗi thҩp

- 7KLRF\FODPYjWKLRVXOWDSÿӅXFyÿӝ thu hӗi tӕt, trung bình là 87% ACN thích hӧSÿӇ chiӃt cҧ thiocyclam và thiosultap

B̫ng 3.17: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E8: ACN 0,1% axit formic

HӋ dung môi chiӃt E8 là ACN 0,1% axit formic có pH § 3,5, cho các kӃt quҧ khҧo ViWQKѭVDX

Độ thu hồi trung bình của cartap thường thấp, chỉ khoảng 8-16% Khi giảm pH của dung môi chiết xuất thì độ thu hồi của cartap cao hơn Tuy nhiên, trong trường hợp pH rất thấp thì độ thu hồi của cartap lại bị giảm Dung môi ACN không thích hợp để chiết xuất cartap vì độ thu hồi thường khá thấp.

- 1HUHLVWR[LQFyÿӝ thu hӗi trung bình là 14% KӃt quҧ WѭѫQJWӵ khi sӱ dөng hӋ dung môi chiӃt E7

- 7KLRF\FODPYjWKLRVXOWDSÿӅXFyÿӝ thu hӗi tӕt, trung bình lҫQOѭӧt là 85% và 92% ACN thích hӧSÿӇ chiӃt cҧ thiocyclam và thiosultap 7KD\ÿәi pH cӫa dung dӏch hҫXQKѭNK{QJҧQKKѭӣQJÿӃQÿӝ thu hӗi

B̫ng 3.18: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E9: ACN 1% axit formic

HӋ dung môi chiӃt E9 là ACN 1% axit formic có pH § 2,5, cho các kӃt quҧ khҧo ViWQKѭVDX

- Ĉӝ thu hӗi trung bình cӫa cartap rҩt thҩp, trung bình là 10% Khi giҧm pH cӫa dung môi chiӃt mүX ÿӝ thu hӗi cӫa cartap hҫX QKѭ NK{QJ WKD\ ÿәi Trong WUѭӡng hӧp Qj\ÿӝ thu hӗi cӫa cartap thҩp bӣi dung môi ACN không thích hӧp

- 1HUHLVWR[LQFyÿӝ thu hӗi trung bình là 14% KӃt quҧ WѭѫQJWӵ khi sӱ dөng hӋ dung môi chiӃt E7 và E8

- 7KLRF\FODPYjWKLRVXOWDSÿӅXFyÿӝ thu hӗi tӕt, trung bình lҫQOѭӧt là 85% và 91% ACN thích hӧSÿӇ chiӃt cҧ WKLRF\FODPYjWKLRVXOWDS7KD\ÿәi pH cӫa dung dӏch hҫXQKѭNK{QJҧQKKѭӣQJÿӃQÿӝ thu hӗi

7KD\ÿәi pH cӫa ACN khi chiӃt mүu, kӃt quҧ cho thҩy:

- KӃt quҧ ÿӝ thu hӗLWѭѫQJÿѭѫQJJLӳa 2 nӅn mүu gҥo và tiêu

- Ĉӝ thu hӗi cӫa cartap hҫXQKѭNK{QJWKD\ÿәi KӃt quҧ cho thҩy khi dung môi chiӃt không phù hӧSWKuWKD\ÿәi pH không thӇ cҧi thiӋQÿӝ thu hӗi

- Nereistoxin có ÿӝ thu hӗLFDRKѫQFDUWDSQKѭQJNK{QJÿiQJNӇ vjFǊQJNK{QJ có sӵ khác biӋWÿiQJNӇ NKLWKD\ÿәi pH

- 7KLRF\FODPYjWKLRVXOWDSÿӅu có kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi tӕWÿӕi vӟi cҧ 3 hӋ dung P{LĈӝ thu hӗi trung bình trong khoҧng 85-95%

- Cҧ ba hӋ dung môi chiӃt cho kӃt quҧ WѭѫQJQKDXYӟi cҧ 4 hoҥt chҩW7URQJÿy ÿӝ thu hӗi cӫDWKLRF\FODPYjWKLRVXOWDSÿҥt các yêu cҫu vӅ ÿӝ thu hӗL1Jѭӧc lҥi, kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi rҩt kém vӟi cartap và nereistoxin

B̫ng 3.19: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t b̹ng h dung môi E10: ACN:H 2 O t͑ l 1:1 chͱa 1%F.A

HӋ dung môi chiӃt E10 là ACN:H2O tӍ lӋ 1:1 chӭa 1%F.A có pH § 2, cho các kӃt quҧ khҧRViWQKѭVDX

- KӃt quҧ ÿӝ thu hӗLWѭѫQJÿѭѫQJQKDXӣ 2 nӅn gҥo và tiêu

- Ĉӝ thu hӗi cӫa cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿӅu nҵm trong khoҧng cho phép 70-120%

Hình 3.13: So sánh các h dung môi

TiӃn hành so sánh các hӋ GXQJP{LÿmFKRNӃt quҧ tӕt nhҩt bao gӗm E3, E6, E9 và E10, cho kӃt luұQQKѭVDX

- HӋ dung môi E3: 1ѭӟF ÿѭӧF ÿLӅu chӍnh pH thích hӧS ÿӇ chiӃt cartap và nHUHLVWR[LQÿӝ thu hӗi trung bình 80-90% KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi cӫa thiocyclam và thiosultap còn kém 50-70%

- HӋ dung môi E6: 0H2+ÿѭӧFÿLӅu chӍnh pH vӟi axit thích hӧp cho kӃt quҧ WѭѫQJÿӕi tӕt vӟi cҧ 4 chҩt phân tích, trung bình trong khoҧng 75-ÿҥt yêu cҫu vӅ ÿӝ thu hӗi 70-120%

- HӋ dung môi E9: ACN cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi rҩt tӕWÿӕi vӟi thiocyclam và thiosultap, trung bình 85-ÿҥt yêu cҫu vӅ ÿӝ thu hӗi Tuy nhiên không phù hӧSÿӇ chiӃt cartap và nereistoxin

- HӋ dung môi E10: kӃt quҧ tӕt vӟi cҧ 4 chҩWSKkQWtFKĈһc biӋt kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình cartap tӕWKѫQQKLӅu so vӟi các hӋ dung môi khác KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình trong khoҧng 85-ÿҥt yêu cҫu vӅ ÿӝ thu hӗi 70-120% ĺ HӋ dung môi E10 (ACN:H2O tӍ lӋ 1:1 chӭa 1%F.A) cho kӃt quҧ tӕt nhҩt cho cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿѭӧc lӵa chӑn làm dung môi chiӃt mүu

3.3.2 TӍ lӋ dung môi chiӃt vjOѭӧng mүu

B̫ng 3.20: Ĉ͡ thu h͛i khi chi͇t vͣi t͑ l GXQJP{LO˱ͫng m̳u R1

Hình 3.14: D͓ch chi͇t m̳u vͣi các t͑ l GXQJP{LO˱ͫng m̳u l̯QO˱ͫt là R1, R2, R3, R4

Độ thu hồi màu sắc của dịch chiết nhũ tương rất cao và ổn định Kết quả thu hồi trung bình đạt trong khoảng 85-95% cho cả 4 hoạt chất yêu cầu độ thu hồi >95% Độ thu hồi không phụ thuộc vào cả 4 chỉ thị nhưng tương quan thuận với tỷ lệ 1:2 giữa chất màu: chất mang khi tiến hành khảo sát quy trình làm sạch dịch chiết mẫu huyết tương.

3.3.3.1 Cӝt chiӃt pha rҳn Áp dөng các quy trình làm sҥch QKѭÿmQrXWURQJSKҫQÿӇ khҧo sát

Hình 3.16: D͓ch chi͇t m̳u không làm s̩ch và làm s̩ch theo các quy trình C1,C2,C3,C4 và C5 (tͳ trái qua ph̫i) ÿ͙i vͣi n͉n m̳u tiêu

Dӏch chiӃt mүu sau khi làm sҥch bҵng các quy trình C1-C5, cho thҩy màu sҳc dung dӏFKÿmWURQJKѫQYjFǊQJFyVӵ khác biӋt giӳa các quy trình làm sҥch Theo dõi áp suҩt hӋ thӕQJ NKLEѫPPүXFǊQJWKD\ÿәi Khi không áp dөng quy trình làm sҥch mүXÿӝ chênh lӋch áp suҩWWUѭӟc và sau khi EѫPPүXOrQÿӃn 30 bar Khi áp dөng các quy trình chiӃt C1, C2, C3, C4 vj&ÿӝ chênh lӋch áp suҩt giҧPÿLUҩt nhiӅu khoҧng 5-10 bar

Hình 3.17: Ĉ͡ thu h͛i khi s͵ dͭng các quy trình làm s̩ch C1-C5

Các quy trình làm sҥch cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗLWѭѫQJÿѭѫQJӣ hai nӅn mүu khҧo sát là gҥo và tiêu Khi sӱ dөng quy trình làm sҥch C1-cӝWWUDRÿәi cation, hiӋu suҩt thu hӗi rҩt thҩp Thiosultap ӣ dҥng ion âm không WѭѫQJWiFYjOѭXJLӳ trên cӝt nên WURQJEѭӟc rӱa giҧi tҥp chҩWÿmEӏ mҩWÿL1Jѭӧc lҥi cartap, nereistoxin và thiocyclam ӣ dҥQJLRQGѭѫQJQKѭQJYүn thӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi chӍ khoҧng 15-20% Nguyên QKkQÿѭӧc dӵ ÿRiQOjGRFKѭDWKӇ rӱa giҧi hoàn toàn các chҩt phân tích ra khӓi cӝt làm sҥch Tuy nhirQNKLWăQJWKӇ tích dung dӏch rӱa giҧLFǊQJNK{QJWKӇ cҧi thiӋn hiӋu suҩt thu hӗi Ĉӕi vӟi quy trình làm sҥch C2, ÿӝ thu hӗi cӫa cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿӅu tӕWKѫQVR vӟi quy trình làm sҥch C1 Ĉӝ thu hӗi trung bình trong khoҧng 20-35% Florisil có khҧ QăQJ OѭXJLӳ tѭѫQJÿӕi tӕt vӟi các chҩt phân cӵFGRÿyWKӇ tích và dung môi rӱa giҧi có ҧQKKѭӣng lӟQÿӃQÿӝ thu hӗi Trong quá trình nghiên cӭXÿmNKҧo sát các dung môi rӱa giҧi và các thӇ tích khác nhau, tuy nhiên không thӇ cҧi thiӋn hiӋu suҩt thu hӗi Ĉӕi vӟi quy trình làm sҥch C3 là C18, cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿӅXFyÿӝ phân cӵc cao NK{QJWѭѫQJWiFYjOѭXJLӳ trên cӝt làm sҥch Tuy nhiên, sӱ dөng cӝW&ÿӇ loҥi bӓ các tҥp chҩt khác, tҥp chҩWFyÿӝ phân cӵFWUXQJEuQKÿӃn thҩp sӁ bӏ giӳ lҥi trên cӝt

Quy trình chiӃt C4 sӱ dөng cӝW WUDR ÿәi anion, hiӋu suҩt thu hӗi cӫa cartap, QHUHLVWRL[QYjWKLRF\FODPÿӅu thҩSKѫQCartap, nereistoxin và thiocyclam ӣ dҥQJLRQGѭѫQJQrQNK{QJWѭѫQJWiFYjOѭXJLӳ trên cӝW6$;GRÿyWKӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi thҩp Thiosultap cho hiӋu suҩt thu hӗi khoҧQJGRFKѭDWKӇ rӱa giҧi hoàn toàn thiosultap ra khӓi cӝt làm sҥch Trong quá trình nghiên cӭXÿmNKҧo sát các dung môi rӱa giҧi và các thӇ tích khác nhau, tuy nhiên không thӇ cҧi thiӋn hiӋu suҩt thu hӗi

Quy trình làm sҥch mүu

3.3.3.1 Cӝt chiӃt pha rҳn Áp dөng các quy trình làm sҥch QKѭÿmQrXWURQJSKҫQÿӇ khҧo sát

Hình 3.16: D͓ch chi͇t m̳u không làm s̩ch và làm s̩ch theo các quy trình C1,C2,C3,C4 và C5 (tͳ trái qua ph̫i) ÿ͙i vͣi n͉n m̳u tiêu

Dӏch chiӃt mүu sau khi làm sҥch bҵng các quy trình C1-C5, cho thҩy màu sҳc dung dӏFKÿmWURQJKѫQYjFǊQJFyVӵ khác biӋt giӳa các quy trình làm sҥch Theo dõi áp suҩt hӋ thӕQJ NKLEѫPPүXFǊQJWKD\ÿәi Khi không áp dөng quy trình làm sҥch mүXÿӝ chênh lӋch áp suҩWWUѭӟc và sau khi EѫPPүXOrQÿӃn 30 bar Khi áp dөng các quy trình chiӃt C1, C2, C3, C4 vj&ÿӝ chênh lӋch áp suҩt giҧPÿLUҩt nhiӅu khoҧng 5-10 bar

Hình 3.17: Ĉ͡ thu h͛i khi s͵ dͭng các quy trình làm s̩ch C1-C5

Quy trình làm sạch C1 sử dụng cation trao đổi có hiệu suất thu hồi rất thấp Khi sử dụng dung dịch rửa giải thì có thể cải thiện hiệu suất thu hồi lên khoảng 15-20% Nguyên tắc chung của các dung dịch rửa giải là đưa hết các chất phân tích ra khỏi cột làm sạch Tuy nhiên, chúng chỉ tích tụ trong dung dịch rửa giải chứ không thu hồi hoàn toàn Đối với quy trình làm sạch C2, hiệu quả thu hồi chỉ bằng khoảng 1/4 so với quy trình làm sạch C1, hiệu suất thu hồi trung bình chỉ khoảng 20-35% Florisil có khả năng hấp phụ tốt với các chất phân tích và dung môi rửa giải có ảnh hưởng lớn đến hiệu quả thu hồi Tuy nhiên, không thể cải thiện hiệu suất thu hồi bằng cách thay đổi dung môi rửa giải và các điều kiện khác Đối với quy trình làm sạch C18, có hiệu suất phân tích cao trên cột làm sạch Tuy nhiên, khi sử dụng các loại ống bẫy khác nhau, hiệu suất phân tích cũng khác nhau.

Quy trình chiӃt C4 sӱ dөng cӝW WUDR ÿәi anion, hiӋu suҩt thu hӗi cӫa cartap, QHUHLVWRL[QYjWKLRF\FODPÿӅu thҩSKѫQCartap, nereistoxin và thiocyclam ӣ dҥQJLRQGѭѫQJQrQNK{QJWѭѫQJWiFYjOѭXJLӳ trên cӝW6$;GRÿyWKӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi thҩp Thiosultap cho hiӋu suҩt thu hӗi khoҧQJGRFKѭDWKӇ rӱa giҧi hoàn toàn thiosultap ra khӓi cӝt làm sҥch Trong quá trình nghiên cӭXÿmNKҧo sát các dung môi rӱa giҧi và các thӇ tích khác nhau, tuy nhiên không thӇ cҧi thiӋn hiӋu suҩt thu hӗi

Quy trình chiӃt C5 sӱ dөng cӝt GCB ÿӇ làm sҥch dӏch chiӃt Cҧ 4 chҩt phân tích ÿӅu có hiӋu suҩt thu hӗi tӕt, khoҧng 80-95% Màu sҳc cӫa dӏch chiӃt sau khi làm sҥch bҵng quy trình C5 cho thҩy cӝt làm sҥch GCB hҩp thө màu cӫa dӏch chiӃt mүu rҩt tӕt Trong 5 quy trình chiӃWÿmNKҧo sát, quy trình chiӃt C3 và C5 cho kӃt quҧ ÿӝ thu hӗi tӕt cho cҧ 4 chҩt phân tíchÿӅu có thӇ sӱ dөQJÿӇ làm sҥch dӏch chiӃt

Hình 3.18: Ĉ͡ thu h͛i khi s͵ dͭng các quy trình chi͇t pha r̷n b̹ng PSA

KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi cӫa cҧ 4 chҩWSKkQWtFKWѭѫQJÿѭѫQJWUrQKDLQӅn mүu khҧo sát Cartap thӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi khoҧng 50-70% .KLWăQJOѭӧQJ36$ÿӇ làm sҥch, hiӋu suҩt thu hӗi cӫa cartap giҧm dҫn vӟi cҧ hai nӅn mүu Bҧn chҩt bӝt chiӃt pha rҳn PSA là các aminGRÿyNKLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt pha rҳn sӁ OjPWăQJS+Fӫa dӏch chiӃt ÿѭӧc làm sҥch dүQÿӃn giҧm hiӋu suҩt thu hӗi KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi cӫa cartap tӕt nhҩt khi sӱ dөng quy trình làm sҥch D1, tuy nhiên vүQNK{QJÿҥt yêu cҫu vӅ hiӋu suҩt thu hӗi

1HUHLVWR[LQFyÿӝ thu hӗi trong khoҧng 90-120% Sӵ chuyӇn hóa mӝt phҫn cartap thành neUHLVWR[LQNKLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt pha rҳn PSA khiӃQÿӝ thu hӗi trung bình cӫa nereistoxin lӟQKѫQ KLWăQJOѭӧng bӝt chiӃW36$Oѭӧng cartap bӏ suy giҧPWăQJOrQNKLӃn hiӋu suҩt thu hӗi cӫDQHUHLVWR[LQWăQJGҫn 'RÿyNKLVӱ dөng PSA làm bӝt chiӃt pha rҳn sӁ gây sai sӕ trong kӃt quҧ phân tích

Thiocyclam thӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi khoҧng 40-60% trên nӅn mүu gҥo và 60- 80% trên nӅn mүu tiêu HiӋu suҩt thu hӗi cӫa thiocyclam trên nӅn gҥo thҩSKѫQQӅn tiêu và giҧPNKLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt PSA Có thӇ lý giҧi nguyên nhân khác biӋt là bӣL Oѭӧng tҥp chҩt trong dӏch chiӃt nӅn tiêu nhiӅX KѫQQӅn gҥo NӃu tiӃp tөF WăQJ Oѭӧng bӝt chiӃt, hiӋu suҩt thu hӗi sӁ tiӃp tөc giҧm

Thiosultap có hiӋu suҩt thu hӗi thҩSYjWѭѫQJÿѭѫQJWUrQFҧ hai nӅn mүu, trung bình khoҧng 25% Thiosultap ӣ dҥng ion âm, dӉ GjQJWѭѫQJWiFYӟi amin bұFÿѭӧc ion hóa bӣi axit trong dӏch chiӃW'RÿyWKLRVXOWDSÿmEӏ giӳ trong phҫn bӝt chiӃt pha rҳn, dүQÿӃn hiӋu suҩt thu hӗi thҩp ĺ Quy trình làm sҥch sӱ dөng bӝt chiӃt pha rҳn PSA vӟLOѭӧng bӝt chiӃt phù hӧp thӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi tӕWÿӕi vӟi cartap và nereistoxin,, tuy nhiên kӃt quҧ cӫa hiӋu suҩt thu hӗi thiocyclam và thiosultap kém

Hình 3.19: Ĉ͡ thu h͛i khi s͵ dͭng các quy trình chi͇t pha r̷n b̹ng GCB

Quy trình làm sҥch dӏch chiӃt bҵng bӝt chiӃt pha rҳn GCB thӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi NK{QJWѭѫQJÿѭѫQJQKDXJLӳa 2 nӅn gҥo và tiêu HiӋu suҩt thu hӗi cӫa cҧ 4 chҩt phân tích trong nӅn mүXWLrXÿӅu tӕWKѫQWURQJQӅn mүu gҥo

Cartap có hiӋu suҩt thu hӗi khoҧng 60-80% trong nӅn mүu gҥo và khoҧng 80-90% trong nӅn mүu tiêu .KLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt pha rҳn, hiӋu suҩt thu hӗLWKD\ÿәi theo [XKѭӟng giҧm dҫn Sӵ WKD\ÿәi trong nӅn gҥo rõ ràng và lӟQKѫQVRYӟi nӅn tiêu 1HUHLVWR[LQFǊQJFy kӃt quҧ vӅ ÿӝ thu hӗi khác biӋt giӳa hai nӅn mүu HiӋu suҩt Ĉӝ thu hӗi cӫa thiocyclam YjWKLRVXOWDSÿӅu thҩSKѫQVRYӟi cartap và nereistoxin trong nӅn mүu gҥo, khoҧng 20-Ĉӕi vӟi nӅn mүXWLrXÿӝ thu hӗi cӫa thiocyclam và thiosultap vào khoҧng 70-Ĉӝ thu hӗi cӫa cҧ hai chҩt phân tích trên cҧ hai nӅn mүu ÿӅu giҧm dҫQNKLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt

Bӝt chiӃt pha rҳn GCB có khҧ QăQJWѭѫQJWiFYӟi các chҩt phân cӵc và khҧ QăQJ hҩp thө màu rҩt tӕt NӅn mүu tiêu chӭa nhiӅu tҥp chҩt và sҳc tӕ, bӝt chiӃt pha rҳQÿm hҩp thө các tҥp chҩt trong nӅn mүXYjFǊQJEӣLYuOѭӧng tҥp chҩt lӟn trong nӅn mүu khiӃn bӝt chiӃt pha rҳn không hҩp thө các chҩWSKkQWtFKĈӕi vӟi nӅn mүu gҥo, Oѭӧng tҥp chҩt và sҳc tӕ tWKѫQQKLӅu so vӟi nӅn mүu tiêu khiӃn mӝt phҫn chҩWSKkQWtFKÿm hҩp thө trong bӝt chiӃt pha rҳn ĺ Quy trình làm sҥch sӱ dөng bӝt chiӃt pha rҳn GCB vӟLOѭӧng bӝt chiӃt phù hӧp thích hӧSÿӇ làm sҥch nӅn mүu tiêu, không thích hӧSÿӇ sӱ dөng vӟi nӅn mүu gҥo

Hình 3.20: Ĉ͡ thu h͛i khi s͵ dͭng các quy trình chi͇t pha r̷n b̹ng C18

Quy trình làm sҥch dӏch chiӃt bҵng bӝt chiӃt pha rҳn C18 thӇ hiӋn hiӋu suҩt thu hӗi ÿҥt yêu cҫu vӟi cҧ 4 chҩt phân tích

Cartap có hiӋu suҩt thu hӗi khoҧng 70-.KLWăQJGҫQOѭӧng bӝt chiӃt pha rҳn, hiӋu suҩt thu hӗi hҫXQKѭNK{QJWKD\ÿәLYjFǊQJWKHR[XKѭӟng nhҩWÿӏnh HiӋu suҩt thu hӗi nҵm giӟi hҥn hiӋu suҩt thu hӗi yêu cҫu là 70-120%

HiӋu suҩt thu hӗi cӫa nereistoxin khoҧng 85-.KLWKD\ÿәLOѭӧng bӝt chiӃt pha rҳQ[XKѭӟng hiӋu suҩt thu hӗi cӫa nereisWR[LQFǊQJWѭѫQJWӵ QKѭFDUWDS

7KLRF\FODPFyÿӝ thu hӗi vào khoҧng 80% cho cҧ hai nӅn mүXĈӝ thu hӗi luôn әQÿӏnh ӣ mӭFNK{QJWKD\ÿәLNKLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt

7KLRVXOWDS FǊQJ FKR NӃt quҧ WѭѫQJ Wӵ các chҩW SKkQ WtFK NKiF ÿӝ thu hӗi vào khoҧng 80-100%

Tính chҩt cӫa bӝt chiӃt pha rҳQ&NK{QJWѭѫQJWiFYӟi các chҩWFyÿӝ phân cӵc WUXQJEuQKÿӃn cao, chuӛLFDUERQGjLFǊQJKҫXQKѭNK{QJҧQKKѭӣQJÿӃn pH dung dӏch chiӃWQKѭ36$%ӣi vұ\NKLWăQJOѭӧng bӝt chiӃt không ҧQKKѭӣng ÿӃn hiӋu suҩt thu hӗi, thұm chí có thӇ dӵ ÿRiQUҵng nӃu tiӃp tөFWăQJKLӋu suҩt thu hӗLFǊQJNK{QJ gây ҧQKKѭӣQJÿӃn hiӋu suҩt thu hӗi Tuy nhiên bӣi thӇ tích riêng lӟn cӫa bӝt chiӃt pha rҳn C18, không thӇ tiӃp tөFWăQJOѭӧng bӝt chiӃWÿӇ loҥi bӓ tҥp chҩt nhiӅXKѫQ ĺ Quy trình làm sҥch sӱ dөng bӝt chiӃt pha rҳn C18 vӟi thích hӧSÿӇ làm sҥch cho cҧ nӅn mүu gҥo và tiêu

Hình 3.21: D͓ch chi͇t m̳u không làm s̩ch và làm s̩ch theo các quy trình D4, D5 và D6 (tͳ trái qua ph̫Lÿ͙i vͣi n͉n m̳u tiêu

Dӏch chiӃt mүu sau khi làm sҥch bҵng các quy trình D1-D9, cho thҩy màu sҳc dung dӏch sau khi chiӃt không có sӵ WKD\ÿәi quá rõ rӋt Theo dõi áp suҩt hӋ thӕQJNKLEѫP mүXFǊQJWKD\ÿәi Khi không áp dөng quy trình làm sҥch mүXÿӝ chênh lӋch áp suҩt WUѭӟFYjVDXNKLEѫPPүXOrQÿӃn 30 bar Khi áp dөng các quy trình làm sҥch D1- 'ÿӝ chênh lӋch áp suҩWÿmJLҧPÿL6ӵ giҧPÿӝ chênh lӋch có sӵ khác biӋt giӳa các quy trình và nҵm trong khoҧng 10 bar Khҧ QăQJOjPVҥch bҵng bӝt chiӃt pha rҳn SKkQWiQNpPKѫQVRYӟi sӱ dөng cӝt chiӃt pha rҳn

Quá trình thӵc hiӋn khҧRViWÿmÿѭDUDSKѭѫQJSKiS[ӱ lý và phân tích mүu tӕLѭX và thích hӧp vӟi thӵc tӃ

Quy trình xӱ lý mүu: Mүu phòng thí nghiӋPÿѭӧc nghiӅn nhӓ thành dҥng bӝt tâm trong 4 phút vӟi tӕFÿӝ vòng 4000 vòng/phút 2 mL dӏch chiӃWÿѭӧc làm sҥch bҵng cӝt chiӃt pha rҳn GCB, rӱa giҧi cӝt chiӃt bҵng 2 mL MeOH 1% axit formic ThәLNK{Oѭӧng dӏch rӱa giҧi bҵng hӋ thӕng thәi khô bҵQJNKtQLWѫKRһc các thiӃt bӏ thích hӧp khác) Ĉӏnh mӭc lҥi bҵng 2 mL MeOH 1% axit formic và thӵc hiӋn phân tích trên thiӃt bӏ LC-MS/MS

Hình 3.22: Quy trình x͵ lý m̳u phân tích

- Cӝt phõn tớch lӓng: EC 125/2 NUCLEODUR HILIC (3 àm, 125 x 2 mm)

THҬ0Ĉӎ1+3+ѬѪ1*3+È3

Tính chӑn lӑc

Phân tích mүu trҳng và mүu chuҭn ӣ mӭc nӗQJÿӝ 0,005 mg/kg trên nӅn mүu gҥo cho các kӃt quҧ QKѭVDX:

Hình 3.23: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa cartap trong n͉n g̩o

Tҥi vӏ trí thӡLJLDQOѭXFӫa cartap là 9,9 phút, mүu trҳng không xuҩt hiӋn tín hiӋu 7URQJNKLÿyPүu chuҭn ӣ mӭc nӗQJÿӝ 0,005 mg/kg xuҩt hiӋn tín hiӋu cӫa cartap ӣ cҧ 2 mҧnh ion Các peak tҥp chҩt xuҩt hiӋn vӟi tín hiӋu rҩt nhӓ ӣ khoҧng thӡi gian 7,5 SK~Wÿӕi vӟi mҧnh 238ĺ73 trên nӅn mүu gҥo và không ҧQKKѭӣQJÿӃQWtQKÿһc hiӋu

Hình 3.24: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa nereistoxin trong n͉n g̩o

Nereistoxin có thӡLJLDQOѭXOj9,2 phút, chӍ xuҩt hiӋn tín hiӋu nӅQ ÿӕi vӟi mүu trҳng và xuҩt hiӋn tín hiӋu cҧ 2 mҧnh ion vӟi mүu thêm chuҭn ӣ mӭc nӗQJÿӝ chuҭn 0,005 mg/kg

Hình 3.25: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa thiocyclam trong n͉n g̩o

Thiocyclam có thӡLJLDQOѭXOjSK~W Không xuҩt hiӋn tín hiӋu trong mүu trҳng và xuҩt hiӋn tính hiӋu cҧ 2 mҧnh ion vӟi mүu thêm chuҭn ӣ mӭc nӗQJÿӝ 0,005 mg/kg SҳF Nê ÿӗ xuҩt hiӋn tín hiӋu tҥp chҩt lӟn vӟi mҧnh ĺ ӣ thӡL JLDQ OѭX khoҧng 18 phút và không gây ҧQKKѭӣQJÿӃQÿӝ chӑn lӑc cӫDSKѭѫQJSKiS

Hình 3.26: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa thiosultap trong n͉n g̩o

Thiosultap phát hiện sau 1 phút Sẽ không thấy tín hiệu nếu mẫu thử không chứa 0,005 mg/kg thiosultap khi tăng ion lên 2 lần Cũng không thấy tín hiệu khi tăng ion gấp hai lần, thì tín hiệu có thể thuộc về cartap, nereistoxin hoặc thiosultap.

Phân tích mүu trҳng và mүu chuҭn ӣ mӭc nӗQJÿӝ 0,005 mg/kg trên nӅn mүu tiêu cho các kӃt quҧ QKѭVDX

Hình 3.27: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa cartap trong n͉n tiêu

ThӡLJLDQOѭXFӫa cartap và khoҧng 8,9 phút SҳFNêÿӗ mүu chuҭn xuҩt hiӋn tín hiӋu lӟn, mүu trҳng chӍ có tín hiӋu nӅn Các peak tҥp chҩt xuҩt hiӋn ӣ các khoҧng thӡi JLDQWUѭӟc 8 phút và khoҧng 14 phút, tín hiӋu rҩt thҩp và không ҧQKKѭӣQJÿӃn tính chӑn lӑc cӫDSKѭѫQJSKiSÿӕi vӟi cartap

Hình 3.28: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa nereistoxin trong n͉n tiêu

ThӡLJLDQOѭXFӫa nereistoxin vào khoҧng 8,2 phút SҳFNêÿӗ mүu chuҭn xuҩt hiӋn tín hiӋu lӟn, mүu trҳng chӍ có tín hiӋu nӅn Các peak tҥp chҩt xuҩt hiӋn ӣ các khoҧng thӡi gian 21,5 và 23 phút, tín hiӋu rҩt lӟn vӟi mҧnh khӕi con 61 Tuy nhiên, không ҧQKKѭӣQJÿӃn tính chӑn lӑc cӫDSKѭѫQJSKiSÿӕi vӟi nereistoxin

Hình 3.29: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa thiocyclam trong n͉n tiêu

Nereistoxin liên kết vào khoang thụ thể trong vòng 7,9 phút Sự thay đổi của tín hiệu sinh học rất tuyến tính, tín hiệu nhiễu tương đối ít Có nhiều tín hiệu đỉnh xuất hiện trong khoảng thời gian WKzLJLDQOѭXVDXSK~W Tuy nhiên, các đỉnh tín hiệu này lại cách xa các đỉnh tín hiệu của phân tích tiếp theo nên không đảm bảo tính chính xác khi so sánh với thiocyclam.

Hình 3.30: S̷FNêÿ͛ ÿiQKJLiÿ͡ ch͕n l͕c cͯa thiosultap trong n͉n tiêu

ThӡLJLDQOѭXFӫa nereistoxin vào khoҧng 7,9 phút SҳFNêÿӗ mүu chuҭn xuҩt hiӋn tín hiӋu lӟn, mүu trҳng có xuҩt hiӋn tín hiӋu rҩt nhӓ, nhӓ KѫQOҫn tín hiӋu mүu chuҭn Các peak tҥp chҩt tín hiӋu rҩt nhӓ ӣ khoҧng thӡLJLDQOѭXNKRҧng 7 -7,5 phút, tách hҷn khӓi tín hiӋu peak cӫa thiosultap'RÿyNӃt luұQSKѭѫQJSKiSFyWtQKFKӑn lӑc vӟi thiosultap ĺ KӃt quҧ cho thҩy, cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿӅu có tính chӑn lӑc tӕt trên nӅn mүu gҥo và tiêu, không xuҩt hiӋn tín hiӋu cӫa tҥp chҩt ÿiQJNӇ tҥi thӡLJLDQOѭXFӫa các chҩt phân tích

3.5.2 Ĉѭӡng chuҭn Ĉѭӡng chuҭn có sӵ khác biӋt khi xây dӵng trong dung môi và nӅn mүX7URQJÿy sӵ khác biӋt rõ ràng nhҩWÿѭӧc nhұn thҩy ӣ thiosultap

Hình 3.31Ĉ˱ͥng chu̱n cartap trong dung môi và n͉n m̳u

Hình 3.32Ĉ˱ͥng chu̱n nereistoxin trong dung môi và n͉n m̳u

Hình 3.33Ĉ˱ͥng chu̱n thiocyclam trong dung môi và n͉n m̳u

Hình 3.34Ĉ˱ͥng chu̱n thiocyclam trong dung môi và n͉n m̳u ĈӇ ÿiQKgiá ҧQKKѭӣng cӫa nӅn mүu, tính toán giá trӏ ME tӯ ÿѭӡng chuҭn cө thӇ QKѭEҧng 3.24:

B̫ng 3.24: Ĉ˱ͥng chu̱n và ̫QKK˱ͧng n͉n m̳u cͯa 4 ch̭t phân tích Ĉѭӡng chuҭn HӋ sӕ hӗi quy, R 2 ME (%)

NӅn tiêu yP08247*x-15556 0,997 67 Ĉѭӡng chuҭn xây dӵng trong khoҧng nӗQJÿӝ 0,001-0,5 Pg/mL trong dung môi và nӅn mүXÿӅu tuyӃn tính, hӋ sӕ WѭѫQJTXDQ5 2 0,995 ҦQKKѭӣng nӅn mүu xuҩt hiӋn ӣ cҧ 4 chҩt phân tích trên nӅn mүu gҥo và tiêu Ҧnh Kѭӣng nӅn mүu trong khoҧng 5-67%, mһc dù ҧQKKѭӣng 5,7,11 và 13% là khá nhӓ QKѭQJYүn gây ra các sai sӕ trong quá trình tính toán kӃt quҧ ҦQKKѭӣQJÿӕi vӟi nӅn tiêu lӟQ KѫQ so vӟi nӅn gҥo Trong 4 chҩt phân tích, ҧQK Kѭӣng lӟn nhҩt ÿӕi vӟi thiosultap, 3 chҩt còn lҥi có ҧQKKѭӣng nӅn WѭѫQJÿѭѫQJQKDX Ĉһc biӋt, nereistoxin trong cҧ hai nӅn mүXÿӅu ҧQKKѭӣQJWKHRKѭӟQJWăQJWtQKKLӋu ĈӇ giҧm thiӇu ҧnh Kѭӣng cӫa nӅn mүu, sӱ dөng dung dӏch chuҭn trong nӅn mүXÿӇ tính toán kӃt quҧ phân tích

Thӵc tӃ khҧo sát cho thҩ\ÿѭӡng chuҭn xây dӵng trong nӅn mүu cӫa 4 chҩt phân WtFKÿӅu tuyӃn tính trong khoҧng nӗQJÿӝ tӯ PJNJÿӃn 0,5 mg/kg Tuy nhiên, khi áp dөQJSKѭѫQJSKiSÿӇ phân tích mүu cҫn [HP[pWÿӇ lӵa chӑn khoҧQJÿѭӡng chuҭn phù hӧp vӟi nӗQJÿӝ GѭOѭӧng thuӕc trong mүu thӱ nghiӋm.

Giӟi hҥn phát hiӋn và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng

Hình 3.35: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,001 mg/kg trên n͉n m̳u g̩o

Tҥi mӭc thêm chuҭn 0,001 mg/kg, kӃt quҧ giá trӏ 61WKXÿѭӧFQKѭVDX

- Trên nӅn mүu gҥo, giá trӏ S/N WѭѫQJÿӗng giӳa 5 lҫn lһp lҥi vӟi cҧ 4 chҩt phân tích Giá trӏ 61WѭѫQJÿѭѫQJJLӳa nereistoxin và thiocyclam là bé nhҩt khoҧng

12 Giá trӏ S/N lӟn nhҩWÿӕi vӟi thiosultap là 50 Yjÿӕi vӟi cartap khoҧng 30

- Trên nӅn mүu tiêu, giá trӏ S/N FǊQJFKRNӃt quҧ WѭѫQJÿӗng giӳa 5 lҫn lһp lҥi Giá trӏ 61WѭѫQJÿѭѫQJJLӳa cartap và nereistoxin là bé nhҩt khoҧng 12 Giá trӏ S/N lӟn nhҩWÿӕi vӟi thiosultap là 96 Yjÿӕi vӟi thiocultap khoҧng 40 ĺ7ӯ các kӃt quҧ nêu trên, mӭc nӗQJÿӝ 0,001 mg/kg cho giá trӏ S/N tӕWKѫQVR vӟi mӭc yêu cҫu vӅ giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng vӟi cҧ 4 chҩt phân tích Mӭc nӗQJÿӝ 0,001 PJNJFǊQJnhӓ KѫQQKLӅu yêu cҫu vӅ GѭOѭӧng tӕLÿDFKRSKpSPһFÿӏnh cӫa Châu ặX'RÿyFyWKӇ lӵa chӑn mӭc nӗQJÿӝ 0,001 mg/kg là giӟi hҥn phỏt hiӋn hoһc ÿӏnh Oѭӧng cӫDSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKQj\

Hình 3.37: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,003 mg/kg trên n͉n m̳u g̩o

Hình 3.38: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,003 mg/kg trên n͉n m̳u tiêu

Tҥi mӭc thêm chuҭn 0,003 mg/kg, kӃt quҧ giá trӏ S/N WKXÿѭӧFQKѭVDX

- Trên nӅn mүu gҥo, giá trӏ S/N có sӵ chênh lӋFKÿiQJNӇ giӳa 5 lҫn lһp lҥi Tuy nhiên diӋQWtFKSHDNWKD\ÿәLNK{QJÿiQJNӇ, nên sӵ khác biӋt bӣi ҧQKKѭӣng cӫa tín hiӋu tҥp chҩt Giá trӏ 61WѭѫQJÿѭѫQJJLӳa cartap và nereistoxin là bé nhҩt khoҧng

50 Giá trӏ S/N lӟn nhҩWÿӕi vӟi thiosultap là 274 Yjÿӕi vӟi thiocyclam khoҧng 79

- Trên nӅn mүu tiêu, giá trӏ S/N có sӵ chênh lӋFKÿiQJNӇ giӳa 5 lҫn lһp lҥi, GRÿyOӵa trên giá trӏ S/N nhӓ nhҩt cӫa tӯng hoҥt chҩWÿӇ ÿiQKJLi7X\QKLrQGLӋn tích SHDNWKD\ÿәLNK{QJÿiQJNӇ, nên sӵ khác biӋt bӣi ҧQKKѭӣng cӫa tín hiӋu tҥp chҩt Giá trӏ 61WѭѫQJÿѭѫQJJLӳa cartap và nereistoxin là bé nhҩt khoҧng 11 Giá trӏ S/N lӟn nhҩWÿӕi vӟi thiosultap là 56 Yjÿӕi vӟi thiocyclam khoҧng 26 ĺ7ӯ các kӃt quҧ nêu trên, mӭc nӗQJÿӝ 0,003 mg/kg cho giá trӏ S/N tӕWKѫQVR vӟi mӭc yêu cҫu vӅ giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng vӟi cҧ 4 chҩt phân tích Mӭc nӗQJÿӝ 0,003 PJNJFǊQJÿiSӭng yêu cҫu vӅ GѭOѭӧng tӕLÿDFKRSKpSPһFÿӏnh cӫa Châu Âu Do ÿyFyWKӇ lӵa chӑn mӭc nӗQJÿӝ 0,003 mg/kg làm giӟi hҥn phát hiӋn cӫDSKѭѫQJ pháp

Hình 3.39: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,01 mg/kg, n͉n m̳u g̩o

Hình 3.40: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,01 mg/kg, n͉n m̳u tiêu

- Trên nӅn mүu gҥo, giá trӏ 61OjWѭѫQJÿӗng giӳa 5 lҫn lһp lҥi vӟi cҧ 4 chҩt phân tích Giá trӏ S/N bé nhҩWOjÿӕi vӟi nereistoxin vào khoҧng 27 và lӟn nhҩt ÿӕi thiocyclam khoҧng 300 Các giá trӏ S/N lӟQKѫQQKLӅu so vӟi yêu cҫu tҥi mӭc nӗQJÿӝ LOQ cӫDSKѭѫQJSKiSOj

- Trên nӅn mүu tiêu, giá trӏ S/N có sӵ chênh lӋFKÿiQJNӇ giӳa 5 lҫn lһp lҥi, GRÿyOӵa trên giá trӏ S/N nhӓ nhҩt cӫa tӯng hoҥt chҩWÿӇ ÿiQKJLi Tuy nhiên diӋn WtFKSHDNWKD\ÿәLNK{QJÿiQJNӇ, nên sӵ khác biӋt bӣi ҧQKKѭӣng cӫa tín hiӋu tҥp chҩt Giá trӏ 61WѭѫQJÿѭѫQJJLӳa cartap và nereistoxin là bé nhҩt khoҧng 27 Giá trӏ S/N lӟn nhҩWÿӕi vӟi thiocyclam là 95 Yjÿӕi vӟi thiosultap khoҧng 78 ĺ7ӯ các kӃt quҧ nêu trên, mӭc nӗQJÿӝ 0,01 mg/kg cho giá trӏ S/N tӕWKѫQVRYӟi mӭc yêu cҫu vӅ giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng vӟi cҧ 4 chҩt phân tích Mӭc nӗQJÿӝ 0,01 mg/kg FǊQJÿiSӭng yờu cҫu vӅ GѭOѭӧng tӕLÿDFKRSKpSPһFÿӏnh cӫD&KkXặX'RÿyFy thӇ lӵa chӑn mӭc nӗQJÿӝ 0,01 mg/kg là giӟi hҥn hҥn phát hiӋn hoһFÿӏQKOѭӧng cӫa SKѭѫQJSKiS

Hình 3.41: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,05 mg/kg, n͉n m̳u g̩o

Hình 3.42: Giá tr͓ S/N t̩i mͱc thêm chu̱n 0,05 mg/kg, n͉n m̳u tiêu

Giá trị S/N tối ưu khi xác định nồng độ nereistoxin là khoảng 120 và khoảng 750 cho thiocyclam Trên nền mẫu gốc, giá trị S/N được đánh giá giữa 5 lẫn lặp riêng biệt và 4 suất phân tích riêng biệt, qua đó xác định được giá trị S/N mong muốn là 10.

- Trên nӅn mүu tiêu, giá trӏ S/N giӳa 5 lҫn lһp lҥi có sӵ chênh lӋFKÿiQJNӇ ÿӕi vӟLFDUWDSYjQHUHLVWR[LQQKѭQJWѭѫQJÿӗQJÿӕi vӟi thiocyclam và thiosultap, do ÿyOӵa trên giá trӏ S/N nhӓ nhҩt cӫa tӯng hoҥt chҩWÿӇ ÿiQKJLi*LiWUӏ 61WѭѫQJ ÿѭѫQJJLӳa cartap và nereistoxin là bé nhҩt khoҧng 120 Giá trӏ S/N lӟn nhҩWÿӕi vӟi thiosultap khoҧng 600 ĺ7ӯ các kӃt quҧ nêu trên, mӭc nӗQJÿӝ 0,05mg/kg cho giá trӏ S/N rҩt lӟn, tӕWKѫQ so vӟi mӭc yêu cҫu vӅ giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng vӟi cҧ 4 chҩt phân tích

Vì giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng và phát hiӋn chính xác cӫa mӝWSKѭѫQJSKiSOX{QWKD\ÿәi tùy thuӝFYjRÿӝ әQÿӏnh cӫa hӋ thӕng MөFÿtFK[k\Gӵng SKѭѫQJSKiSQKҵm kiӇm tra, phân tích mүu xuҩt nhұp khҭXĈӗng thӡi, mӭc nӗQJÿӝ 0,01 PJNJÿiSӭng yêu cҫu giӟi hҥn GѭOѭӧng tӕLÿDFKRSKpS-MRL mһFÿӏnh cӫDFKkXặXÿӕi vӟi cỏc chҩt phân tích 'Rÿylӵa chӑn giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng cӫDSKѭѫQJSKiSOj mg/kg, giӟi hҥn phát hiӋn 0,003 mg/kg ÿӇ ÿҧm bҧRWUѭӡng hӧSFiFWKD\ÿәi cӫa hӋ thӕng theo thӡi gian gây sai sót trong kӃt luұn vӅ mүu phân tích.

Ĉӝ lһp lҥi

Thӵc hiӋn phân tích lһp lҥi 5 lҫn mүu thêm chuҭn ӣ 2 mӭc nӗQJÿӝ trong 1 ngày ĈiQKJLiÿӝ lһp lҥi thông qua hiӋu suҩt thu hӗi trung bình và ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi ӣ tӯng mӭc nӗQJÿӝ

Theo yêu cҫu cӫD$2$&ÿӝ thu hӗi chҩp nhұQÿѭӧc ӣ nӗQJÿӝ 10 ppb là 60-115% và ӣ nӗQJÿӝ 100 ppb là 80-110%Ĉӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi ӣ khoҧng nӗQJÿӝ 10 SSENK{QJYѭӧt quá 21% và ӣ khoҧng nӗQJÿӝ 100 SSENK{QJYѭӧt quá 15%

Theo yêu cҫu cӫa SANTE/12682/2019ÿӝ thu hӗi tӯ 70-Yjÿӝ lӋch chuҭn WѭѫQJÿӕLNK{QJYѭӧt quá 20% FKRFiFSKpSSKkQWtFKGѭOѭӧng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt trong thӵc phҭm

B̫ng 3.25: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,01 mg/kg (LOQ) trên n͉n m̳u g̩o

B̫ng 3.26: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,05 mg/kg (5LOQ) trên n͉n m̳u g̩o

B̫ng 3.27: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,01 mg/kg (LOQ) trên n͉n m̳u tiêu

B̫ng 3.28: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,05 mg/kg (5LOQ) trên n͉n m̳u tiêu

KӃt quҧ ÿӝ thu hӗi trung bình cӫa cҧ 4 chҩWSKkQWtFKÿӅu phù hӧp vӟi giӟi hҥn cho phép cӫa cҧ AOAC và SANTE/12682/2019Ĉӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi trên nӅn mүu tiêu lӟQKѫQQӅn mүu gҥo ӣ cҧ 2 mӭc nӗQJÿӝ thêm chuҭQĈӝ phân tán cӫa hiӋu suҩt thu hӗi trong nӅn tiêu lӟQKѫQQKLӅu so vӟi nӅn gҥo, phù hӧp vӟi kӃt quҧ thҭPÿӏnh ҧQKKѭӣng nӅn mүu tiêu lӟQKѫQQKLӅu so vӟi nӅn mүu gҥo Ĉӝ thu hӗi trung bình cӫa các chҩt phân tích ӣ hai mӭc nӗQJÿӝ thêm chuҭn là khác biӋW WX\ QKLrQ NK{QJ WKHR [X Kѭӟng nhҩW ÿӏnh Có thӇ nhұn thҩ\ ÿӝ thu hӗi không bӏ ҧQKKѭӣng bӣi nӗQJÿӝ các chҩt phân tích trong mүu thӱĈӝ lӋch chuҭn WѭѫQJÿӕi tҥi mӭc nӗQJÿӝ thêm chuҭn 0,01 PJNJWѭѫQJÿѭѫQJKRһc thҩSKѫQVRYӟi mӭc nӗng ÿӝ thêm chuҭQPJNJĈӝ phân tán cӫDÿӝ thu hӗi giҧm khi nӗQJÿӝ các chҩt phân tích trong mүu thӱ WăQJOrQ

Ĉӝ tái lһp nӝi bӝ

Thӵc hiӋn phân tích lһp lҥi 5 lҫn mүu thêm chuҭn ӣ 2 mӭc nӗQJÿӝ trong 3 ngày Ĉӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕLYjÿӝ thu hӗi trung buQKÿѭӧc tính toán tӯ giá trӏ ÿӝ thu hӗi trung bình cӫa cҧ 3 ngày phân tích là các thông sӕ ÿһFWUѭQJFKRÿӝ tái lһp nӝi bӝ ĈiQKJLiÿӝ lһp lҥi thông qua hiӋu suҩt thu hӗLWUXQJEuQKYjÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi ӣ tӯng mӭc nӗQJÿӝ

Theo yêu cҫu cӫD$2$&ÿӝ thu hӗi chҩp nhұQÿѭӧc ӣ nӗQJÿӝ 10 ppb là 60-115% và ӣ nӗQJÿӝ 100 ppb là 80-110%Ĉӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi ӣ khoҧng nӗQJÿӝ 10 SSENK{QJYѭӧt quá 21% và ӣ khoҧng nӗQJÿӝ 100 SSENK{QJYѭӧt quá 15%

Theo yêu cҫu cӫa SANTE/12682/2019ÿӝ thu hӗi tӯ 70-Yjÿӝ lӋch chuҭn WѭѫQJÿӕLNK{QJYѭӧt quá 20% FKRFiFSKpSSKkQWtFKGѭOѭӧng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt trong thӵc phҭm

B̫ng 3.29: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,01 mg/kg trên n͉n m̳u g̩o trong 3 ngày

Hoҥt chҩt Ngày 1 Ngày 2 Ngày 3

B̫ng 3.30: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,05 mg/kg trên n͉n m̳u g̩o trong 3 ngày

KӃt quҧ phân tích lһp lҥi tҥi nӗQJÿӝ thêm chuҭn 0,01 mg/kg cho hiӋu suҩt thu hӗi trong khoҧng 71-ÿӝ thu hӗi trung bình 91-103ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi tӯ 10-15% Tҥi nӗQJÿӝ thêm chuҭn 0,05 mg/kg cho hiӋu suҩt thu hӗi trong khoҧng 74- ÿӝ thu hӗi trung bình 89-ÿӝ lӋch chuҭQWѭѫQJÿӕi tӯ 10-15% Các kӃt quҧ khҧo sát ӣ mӭc thêm chuҭn 0,01 mg/kg và 0,05 PJNJÿӅu thӓa các yêu cҫu cӫa AOAC và SANTE/12682/2019,

B̫ng 3.31: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,01 mg/kg trên n͉n m̳u tiêu, 3 ngày

B̫ng 3.32: Ĉ͡ thu h͛i ͧ mͱc thêm chu̱n 0,05 mg/kg trên n͉n m̳u tiêu, 3 ngày

H1 H2 H3 H4 H5 H1 H2 H3 H4 H5 H1 H2 H3 H4 H5 (%) Cartap 95 91 107 97 97 101 85 112 118 85 90 110 74 84 84 95 13 Nereistoxin 102 86 103 103 79 84 71 78 89 70 91 104 98 100 92 90 13 Thiocyclam 105 84 103 103 87 85 77 95 103 74 84 86 98 95 85 91 11 Thiosultap 110 86 91 109 85 107 96 82 99 76 90 102 84 102 94 94 11 Ĉӝ tái lһp nӝi bӝ có thӇ ÿѭӧc tính cho tӯng nӗQJÿӝ, tӯng nӅn mүu hoһc cho toàn bӝ SKѭѫQJ SKiS W\ WKXӝc vào phҥP YL Yj ÿһF ÿLӇm cӫD SKѭѫQJ SKiS SKkQ WtFK PKѭѫQJSKiSSKkQWtFKÿDQJQJKLrQFӭu chӍ bao gӗm hai nӅn mүXÿӗng thӡi không có sӵ khác biӋWÿiQJNӇ vӅ hiӋu suҩt thu hӗi ӣ các mӭc nӗQJÿӝ khác nhau nên có thӇ lӵa chӑQWtQKWRiQÿӝ tái lһp riêng biӋt vӟi tӯng nӅn mүu

B̫ng 3.33: Ĉ͡ tái l̿p n͡i b͡ cͯDSK˱˯QJSKiSÿ͙i vͣi tͳng n͉n m̳u RSD pool

RSD (0,05 mg/kg) RSDpool RSD

Thiosultap 14 15 15 13 11 12 Ĉӝ tái lһp nӝi bӝ cӫa cҧ 4 chҩt khҧo sát trong nӅn mүu gҥRYjWLrXWѭѫQJÿѭѫQJ nhau và vào khoҧng 13% Các kӃt quҧ WѭѫQJÿѭѫQJYӅ ÿӝ tái lһp nӝi bӝ cho thҩ\ÿӝ phân tán cӫa kӃt quҧ SKkQWtFKOjWѭѫQJÿѭѫQJQKDXJLӳa 4 chҩWSKkQWtFKFǊQJQKѭ

Kết quả khảo sát cho thấy loài Nereistoxin được phát hiện lần đầu tiên trong mẫu phân tích Đây là một loại độc tố thuộc nhóm nereistoxin, có thể gây ngứa ngáy và khó chịu khi tiếp xúc.

ѬӞ&/ѬӦ1*ĈӜ +Ð1*ĈҦM BҦ2Ĉ2

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ chөm-u precision

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ chөm ÿѭӧc tәng hӧp tӯ ÿӝ tái lһp nӝi bӝ cӫDSKѭѫQJ pháp trên hai nӅn mүu khҧo sát

B̫ng 3.34: Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRGRÿ͡ chͭm

RSD pool-gҥo RSD pool-tiêu u (precision)

Thiosultap 15 12 13 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRÿӝ chөm cӫa 4 chҩt khҧRViWWѭѫQJÿѭѫQJQKDXWURQJ ÿyJLiWUӏ lӟn nhҩWOjÿӕi vӟi thiosultap KӃt quҧ này tҥRÿLӅu kiӋn thuұn lӧLÿӇ ÿѭDUDFiFSKѭѫQJiQNKҧo sát sҧn phҭm xuҩt khҭu và mүu khҧo sát an toàn thӵc phҭm trên thӏ WUѭӡQJFǊQJQKѭÿѭDUDTX\ӃWÿӏnh vӅ giӟi hҥQKjQKÿӝng khi phát hiӋn GѭOѭӧng thuӕc BVTV nhóm nereistoxin trong mүu phân tích.

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ-u bias

Sӱ dөng tҩt cҧ các dӳ liӋu thҭPÿӏQKSKѭѫQJSKiS trên cҧ hai nӅn mүu ÿӇ WtQKÿӝ chӋch cӫDÿӝ thu hӗi cho tӯng hoҥt chҩt Các dӳ liӋu sӱ dөng tính toán kӃt quҧ ÿm ÿѭӧc trình bày cө thӇ trong bҧng 3.29-3.32 οൌ ඥȁܪഥ െ ͳͲͲȁ ଶ ൅ ܵܦ ଶ

B̫ng 3.35: Ĉ͡ ch ch cͯDÿ͡ thu h͛i ܪഥ SD '

3.6.2.2 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa thӇ tích thêm chuҭn

3KѭѫQJSKiSSKkQWtFKVӱ dөng micropipet dung tích 10-100 P/ÿӇ chuҭn bӏ mүu thêm chuҭn FKRTXiWUuQKÿiQKJLiSKѭѫQJSKiS'RÿyJLiWUӏ uvol ÿѭӧc tính toán QKѭVDX ݑ ௩௢௟ ൌ σ ௨ ೛೔೛೐೟ ௏ ೞ೛೔ೖ೐೏ ൈξଷ =0,26%

Giá trӏ uvol tính toán nhӓ KѫQQKLӅu so vӟi giá trӏ tӕLÿDPһFÿӏnh là 0,76%

3.6.2.3 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa nӗQJÿӝ chuҭn

Tӯ các công thӭFWtQKWRiQÿmWUuQKEj\WURQJSKҫn 2.5.2, giá trӏ uconc ÿѭӧc tính toán cho tӯng chҩt phân tích.

B̫ng 3.36: Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿR cͯa n͛QJÿ͡ chu̱n

KӃt quҧ cho thҩ\ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa nӗQJÿӝ chuҭn ÿѭӧc tính toán tӯ nhiӅu yӃu tӕ khác nhau cho kӃt quҧ khoҧng tӯ 5-6%

Tәng hӧp các giá trӏ uconc, uvol và 'ÿӇ WKXÿѭӧc kӃt quҧ ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa ÿӝ ÿ~QJXbias

B̫ng 3.37: Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRFͯa ÿ͡ ÿ~QJ

Hoҥt chҩt u conc u vol ' u bias

Tӯ bҧng tәng hӧp cho thҩy, thành phҫQ ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRWKӇ tích thêm chuҭn nhӓ KѫQQKLӅu so vӟLÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRQӗng ÿӝ chuҭQĈӗng thӡLÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRQӗQJÿӝ chuҭQFǊQJQKӓ KѫQVRYӟLÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGR ÿӝ chӋch cӫa hiӋu suҩt thu hӗi

Khi [HP[pWWURQJWUѭӡng hӧp tay nghӅ thӱ nghiӋPYLrQOjWѭѫQJÿӗng, yӃu tӕ ҧnh Kѭӣng trӵc tiӃSÿӃQÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRÿRWhӇ tích chuҭQOjÿӝ chính xác cӫa dөng cө thӇ tích KӃt quҧ ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRWKӇ tích thêm chuҭn chӍ chiӃm khoҧng 1,7% ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ'RÿyFҫn hiӋu chuҭn kiӇm tra các dөng cө ÿRWKӇ WtFKÿӇ giҧm thiӇu sai sӕ, tҫn suҩt hiӋu chuҭn kiӃn nghӏ là 1 lҫQQăP Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRQӗQJÿӝ dung dӏch chuҭn chiӃm khoҧng 20% ÿӝ không ÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ KӃt quҧ này lӟQKѫQNKRҧng 5-10 lҫQÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿR do thӇ WtFK'RÿyVDLVӕ do nӗQJÿӝ chuҭn ҧQKKѭӣng lӟQKѫQÿӃQÿӝ chính xác cӫa kӃt quҧ phân tích ViӋc giҧm thiӇu các sai sӕ cӫa nӗQJÿӝ dung dӏch chuҭn sӁ cҧi thiӋn ÿiQJNӇ ÿӝ chính xác cӫa kӃt quҧ phân tích Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRÿӝ chӋch cӫDÿӝ thu hӗi chiӃm khoҧng 80ÿӝ không ÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ Các yӃu tӕ ҧQKKѭӣQJÿӃQÿӝ chӋch cӫDÿӝ thu hӗi là sӵ әn ÿӏnh cӫa quá trình chiӃt và cӫa thiӃt bӏ phân tích Các yӃu tӕ này luôn luôn xuҩt hiӋn trong bҩt kǤ quy trình phân tích nào và không thӇ loҥi bӓ hoàn toàn, chӍ có thӇ thӵc hiӋn các quy trình kiӇm soát chҩWOѭӧng nӝi bӝ ÿӇ WKHRG}LYjÿLӅu chӍnh khi cҫn thiӃt

Có thӇ nghiên cӭu sӱ dөng nӝi chuҭQWURQJTX\WUuQKÿӇ giҧm thiӇXÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRGRÿӝ chӋch cӫa hiӋu suҩt thu hӗi

B̫ng 3.38: Ĉ͡ NK{QJÿ̫m b̫RÿRcͯDSK˱˯QJSKiS

Hoҥt chҩt u conc u vol ' u bias u precision u U

Thiosultap 6,07 0,26 15 16 13 21 42 Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫa 4 chҩt phân tích tӯ 18-ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRPӣ rӝng vào khoҧng 40% Theo các yêu cҫu cӫa SANTE/12682/2019 ÿӕi vӟLSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKÿӏQKOѭӧQJÿDGѭOѭӧng, giá trӏ ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRPӣ rӝng không Yѭӧt quá 50% KӃt quҧ ÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDSKѭѫQJSKiSÿiSӭng yêu cҫu, SKѭѫQJSKiSWKtFKKӧSÿӇ sӱ dөng phân tích thuӕc BVTV nhóm nereistoxin.

&+ѬѪ1* KӂT LUҰN VÀ KIӂN NGHӎ

KӂT LUҰN

ĈӅ tài tiӃn hành khҧRViWSKѭѫQJSKiSÿӏQKOѭӧQJÿDGѭOѭӧng thuӕc BVTV nhóm nereistoxin trong gҥo và hӗ tiêu KӃt quҧ WKXÿѭӧFQKѭVDX

;iFÿӏnh các mҧnh khӕLLRQÿӏQKOѭӧQJYjÿӏnh tính cho tӯng hoҥt chҩt phân tích

3KѭѫQJSKiSSKkQWtFKVӱ dөQJSKDWƭQKOà cӝt EC 125/2 NUCLEODUR HILIC (3 àm, 125 [PPSKDÿӝng là hӋ ACN và dung dӏch chӭa 5mM amonium format, 0,1% axit formic

HӋ dung môi chiӃt là ACN:H2O tӍ lӋ 1:1 chӭD)$FyS+§ 2 Dӏch chiӃWÿѭӧc làm sҥch bҵng cӝt chiӃt pha rҳn GCB-500mg HiӋu suҩt thu hӗi cӫa cҧ 4 chҩt phân tích nҵm trong khoҧng 70-120%

ThҭPÿӏQKSKѭѫQJSKiSÿmWӕLѭXTXDFiFWK{QJVӕÿӝ chӑn lӑc, giӟi hҥn phát hiӋn và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧQJÿӝ lһp lҥLÿӝ tái lһp nӝi bӝ3KѭѫQJSKiSWKӇ hiӋQÿӝ chӑn lӑc tӕt vӟi các chҩt phân tích Giӟi hҥn phát hiӋn và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng cӫa SKѭѫQJSKiSOҫQOѭӧt là 0,003 mg/kg và 0,01 mg/kg trên cҧ hai nӅn gҥo và hҥt hӗ WLrX Ĉӝ lһp lҥL Yj ÿӝ tái lһp nӝi bӝ ÿӅX ÿiS ӭng các yêu cҫu cӫa AOAC và SANTE/12682/2019 ѬӟFOѭӧQJÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRPӣ rӝng cӫa cartap, nereistoxin, thiocyclam và thiosultap lҫQOѭӧt là 40, 40, 36 và 42% ĈӅ WjLÿmQJKLrQFӭu, tӕLѭXSKѭѫQJSKiSSKkQWtFKÿDGѭOѭӧng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt nhóm nereistoxin trong hai nӅn mүu gҥo và hӗ WLrX3KѭѫQJSKiSÿiSӭng các yêu cҫu vӅ hiӋXQăQJWKHR\rXFҫu cӫa SANTE/12682/2019 và AOAC Quy trình xӱ lý và chuҭn bӏ mүu phân tích ÿѫQJLҧn, phù hӧp vӟLÿLӅu kiӋn thӵc tӃ cӫa các phòng thí nghiӋm phân tích Giӟi hҥn phát hiӋQYjÿӏQKOѭӧQJÿiSӭng giӟi hҥQGѭOѭӧng tӕi ÿD-MRL cỏc thӏ WUѭӡng xuҩt khҭu gҥo và hӗ WLrXNKyWtQKQKѭFKkXặXYj1Kұt Bҧn KӃt quҧ SKkQWtFKÿiSӭng yêu cҫu vӅ ÿӝ tin cұ\3KѭѫQJSKiSSKkQWtFKFǊng có thӇ sӱ dөQJ SKkQ WtFK WURQJ FiF FKѭѫQJ WUuQK ÿLӅu tra giám sát an toàn thӵc phҭm thӏ WUѭӡng nӝi ÿӏa.

KIӂN NGHӎ

ĈӅ tài nghiên cӭXÿm ÿҥWÿѭӧc nhiӅu kӃt quҧ tӕt, tuy nhiên ÿӇ nâng cao khҧ QăQJ ӭng dөng cӫDSKѭѫQJSKiScó thӇ tiӃp tөc triӇn khai nghiên cӭXFiFKѭӟng thӵc nghiӋm: x Phân tích mүu thӵc tӃ x Mӣ rӝng nghiên cӭu SKѭѫQJSKiSWUrQFiFQӅn mүu nông sҧn phù hӧp khác x Phân tích ҧQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋQOѭXWUӳ mүXÿӃn kӃt quҧ phân tích x ҦQKKѭӣQJNtFKWKѭӟc hҥt khi nghiӅn mүu ÿӃQÿӝ ÿӗng nhҩt cӫa mүu phân tích x Lұp kӃ hoҥch lҩy mүXFKRFiFFKѭѫQJWUuQKJLiPViWDQWRjQWKӵc phҭPFǊQJQKѭO{KjQJ[Xҩt khҭu

[1] T O NguyӉn, Giáo trình S͵ dͭng thu͙c b̫o v th͹c v̵t Hà NӝL7UѭӡQJĈҥi hӑc Nông nghiӋp Hà Nӝi, 2007

[2] N M Chinh, P V Biên, B C TuyӃn, M T Phөng, và N M Hùng, C̱m nang thu͙c b̫o v th͹c v̵t Tp.Hӗ Chí Minh: Nông nghiӋp, 2012

[3] M L Flint and R Van den Bosch, Introduction to integrated pest management

Berlin, German: Springer Science & Business Media, 2012

[4] D Pimentel, Ecological effects of pesticides on non-target species Washington

D.C., USA: Office of Science and Technology, 1971

[5] M Sakai, "Studies on the insecticidal action of nereistoxin, 4-N, N," Jpn J Appl

[6] C MacBean, The pesticide manual: a world compendium Hampshire, UK:

[7] L P Sharma, M P Kadve, M C Lingaraju, and A G Telang, "Studies on oral subacute toxicity of cartap in male mice," Drug and chemical toxicology, vol 44, no 2, pp 198-206, 2021

[8] T H H Võ, "KhҧRViWGѭOѭӧng thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt nhóm Clo hӳXFѫWURQJ

FjFKXDWURQJÿӏa bàn thành phӕ CҫQ7KѫEҵQJSKѭѫQJSKiSVҳc ký khí ghép khӕi phә," LuұQYăQWKҥFVƭ, 7UѭӡQJĈҥi hӑc CҫQ7Kѫ

[9] I Ferrer and E M Thurman, "Multi-residue method for the analysis of 101 pesticides and their degradates in food and water samples by liquid chromatography/time-of-flight mass spectrometry," Journal of Chromatography

[10] M Mezcua, O Malato, J F Garcia-Reyes, A Molina-Diaz, and A R

Fernandez-Alba, "Accurate-mass databases for comprehensive screening of pesticide residues in food by fast liquid chromatography time-of-flight mass spectrometry," Analytical Chemistry, vol 81, no 3, pp 913-929, 2009

[11] 40 Code of Federal Regulations 180.101, Revised as of July

[12] C Ferrer, M Mezcua, M Martínez-Uroz, L Pareja, A Lozano, and A

Fernández-Alba, "Method development and validation for determination of thiosultap sodium, thiocyclam, and nereistoxin in pepper matrix," Analytical and bioanalytical chemistry, vol 398, no 5, pp 2299-2306, 2010

[13] S H Hansen, S Pedersen-Bjergaard, and K Rasmussen, Introduction to pharmaceutical chemical analysis New York, 86$: John Wiley & Sons,

[14] A Stoppel, "Calculation of Number of Theoretical Plates for Rectifying

Column," Industrial & Engineering Chemistry, vol 38, no 12, pp 1271-1272,

[15] T Kupiec, "Quality-control analytical methods: High-performance liquid chromatography," International journal of pharmaceutical compounding, vol 8, pp 223-227, 2004

[16] M Rambla-Alegre, J Esteve-Romero, and S Carda-Broch, "Is it really necessary to validate an analytical method or not? That is the question," Journal of Chromatography A, vol 1232, pp 101-109, 2012

[17] C Alimentarius (2003) Guidelines on Good Laboratory Practice in Residue

Analysis: CAC/GL 40-1993, Rev 1-2003 Rome: FAO

[18] C S Trҫn, TẖPĈ͓QK3K˱˯QJ3KiS7URQJ3KkQ7tFK+yD+͕c & Vi Sinh V̵t

[19] European Commission, "Technical Guideline on the Evaluation of Extraction

Efficiency of Residue Analytical Methods SANTE 2017/10632, Rev 3, 22 November 2017," 2017

[20] Á Ambrus, "Worked Example for Validation of a Multi-residue," Principles and

[21] European Commission, "Guidance document on analytical quality control and method validation procedures for pesticide residues and analysis in food and feed Document No SANTE/12682/2019 2019

[22] A Fajgelj and Á Ambrus, "Principles and Practices of Method Validation

Proceedings of the Joint AOAC/FAO/IAEA/IUPAC International Workshop, Budapest, Hungary, 4-6 November 1999," in Principles and Practices of Method

Workshop, Budapest, Hungary, 4-6 November 1999., 2000: Royal Society of

[23] "Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results-Part 6:

Use in practice of accuracy values", ISO 5725±6: 1994, 1994

[24] " Ĉӝ chính xác cӫDSKѭѫQJSKiSÿRYjNӃt quҧ ÿR-PhҫQ3KѭѫQJSKiSFѫEҧn

[iFÿӏQKÿӝ lһp lҥLYj ÿӝ tái lһp cӫDSKѭѫQJSKiSÿRWLrXFKXҭn" ViӋt Nam, TCVN 6910-2:2001, 2001

[25] "Ĉӝ chính xác cӫDSKѭѫQJSKiSÿRYjNӃt quҧ ÿR-Phҫn 6: Sӱ dөng các giá trӏ ÿӝ chính xác trong thӵc tӃ" ViӋt Nam, TCVN 6910-6:2002, 2002

[26] Á Ambrus, K Kerekes, H Szemánné-Dobrik, and Z Domák, "Sources of

Random Variation of Pesticide Residue Analytical Results," Journal of AOAC

[27] A Ambrus and D J Hamilton, Food safety assessment of pesticide residues

[28] J Weitzel, S Lee, M Smoot, N Viafara, and M Brodsky, "How to meet ISO-

17025 requirements for method verification," AOAC International, 2017

[29] 50DWXãĤDQG53URNRS*UDSKLFDODQDO\VLVRIUREXVWVWDELOLW\IRUV\VWHPVZLWK parametric uncertainty: an overview," Transactions of the Institute of Measurement and Control, vol 33, no 2, pp 274-290, 2011

[30] European Commission, "Guidance document on pesticide analytical methods for

ULVN DVVHVVPHQW DQG SRVWဨDSSURYDOFRQWURO DQG PRQLWRULQJ purposes 6$17(ဨUHY)HEUXDU\

[31] J Szenczi-Cseh and A Ambrus, "Uncertainty of exposure assessment of consumers to pesticide residues derived from food consumed," Journal of Environmental Science and Health, Part B, vol 52, no 9, pp 658-670, 2017

[32] Á Ambrus, A Zentai, J Sali, and I Ficzere, "Hidden contributors to uncertainty and accuracy of results of residue analysis," Accreditation and quality assurance, vol 16, no 1, pp 3-11, 2011

[33] A Ambrus, "Estimation of sampling uncertainty for determination of pesticide residues in plant commodities," Journal of Environmental Science and Health

[34] B Magnusson, The fitness for purpose of analytical methods: a laboratory guide to method validation and related topics (2014) Eurachem, 2014

[35] V Lindberg, "Uncertainties and error propagation," Manual on Uncertainties,

Graphing and the Vernier Caliper, Part I Rochester Institute of Technology,

[36] P T T Hà và 3+3KѭѫQJ*LҧLSKiSQkQJFDRQăQJOӵc cҥnh tranh trong xuҩt khҭu gҥo ViӋt Nam," LuұQiQWLӃQVƭ7UѭӡQJĈҥi hӑc An Giang, 2014

[37] ( ) 6 $XWKRULW\ 3 0HGLQDဨ3DVWRU DQG * 7ULDFFKLQL 7KH (XURSHDQ

Union report on pesticide residues in food," EFSA Journal, vol 18, no 4, p e06057, 2020

[38] B Buszewski and S Noga, "Hydrophilic interaction liquid chromatography

(HILIC)²a powerful separation technique," Analytical and bioanalytical chemistry, vol 402, no 1, pp 231-247, 2012

[39] M Dolci, "Chromatographic characterization of stationary phases for hydrophilic interaction liquid chromatography," Technical Note, vol 20741,

[40] Z Jiang, N W Smith, P D Ferguson, and M R Taylor, "Novel highly hydrophilic zwitterionic monolithic column for hydrophilic interaction chromatography," Journal of separation science, YROQRဨSS-

[41] M Liu, E X Chen, R Ji, and D Semin, "Stability-indicating hydrophilic interaction liquid chromatography method for highly polar and basic compounds," Journal of chromatography A, vol 1188, no 2, pp 255-263, 2008 [42] U E Bollmann and N Badawi, "A fast and simple SPE-LC-MS/MS procedure for extraction and quantitative analysis of 1, 2, 4-triazole, N, N- dimethylsulfamide, and other small polar organic compounds in groundwater,"

Analytical and Bioanalytical Chemistry, vol 412, no 23, pp 5683-5693, 2020

[43] O Golge, "Validation of Quick Polar Pesticides (QuPPe) Method for

Determination of Eight Polar Pesticides in Cherries by LC-MS/MS," Food

[44] Á Ambrus et al., "Testing the accuracy of analytical standard solutions used for quantitative determination of pesticide residues," Journal of AOAC International, vol 100, no 4, pp 1058-1061, 2017

[45] $ ĩZLU-Ferenc and M Biziuk, "Solid Phase Extraction Technique Trends,

Opportunities and Applications," Polish Journal of Environmental Studies, vol

[46] G Islas, I S Ibarra, P Hernandez, J M Miranda, and A Cepeda, "Dispersive solid phase extraction for the analysis of veterinary drugs applied to food samples: a review," International journal of analytical chemistry, vol 2017,

[47] W Li et al., "HLB-MCX-Based Solid-Phase Extraction Combined with Liquid

Chromatography±Tandem Mass Spectrometry for the Simultaneous Determination of Four Agricultural Antibiotics (Kasugamycin, Validamycin A, Ningnanmycin, and Polyoxin B) Residues in Plant-Origin Foods," Journal of Agricultural and Food Chemistry, vol 68, no 47, pp 14025-14037, 2020

[48] F Dubocq, B B Bổringsdúttir, T Wang, and A Kọrrman, "Comparison of extraction and clean-up methods for comprehensive screening of organic micropollutants in fish using gas chromatography coupled to high-resolution mass spectrometry," Chemosphere, vol 286, p 131743, 2022

[49] A Becalski, B P.-Y Lau, D Lewis, and S W Seaman, "Acrylamide in foods: occurrence, sources, and modeling," Journal of agricultural and food chemistry, vol 51, no 3, pp 802-808, 2003

[50] M Castellari, A Versari, U Spinabelli, S Galassi, and A Amati, "An improved

HPLC method for the analysis of organic acids, carbohydrates, and alcohols in grape musts and wines," Journal of liquid chromatography & related technologies, vol 23, no 13, pp 2047-2056, 2000

[51] A Fajgelj and Á Ambrus, Principles and practices of method validation

London, UK: Royal Society of Chemistry, 2000

PHӨ LӨC Phө lөc 1: KӃt quҧ khҧRViWÿӝ bӅn dung dӏch chuҭn làm viӋc 1 Pg/mL

Ngày phân tích Hoҥt chҩt DiӋn tích dung dӏch chuҭn mӟi DiӋn tích dung dӏch chuҭQFǊ

Phө lөc 2: KӃt quҧ khҧo sát ÿӝ bӅn dung dӏch chuҭn trung gian 10 Pg/mL

Cartap 16502278 16573968 16344449 16748965 16382304 16653974 16259713 16831795 17015314 16125879 Nereistoxin 485766 477288 484588 505760 475178 486127 445971 486279 463854 448617 Thiocyclam 1587352 1589133 1623339 1599052 1573348 1553971 1586172 1665712 1607891 1531792 Thiosultap 128162 127198 132535 127801 124804 128649 125791 126718 130814 128934 Cartap 17946982 16805295 16935607 16758886 16741627 16891245 16627915 15489617 15935124 16087264

Cartap 15963247 15329746 16025973 16127951 15934867 16289427 16079358 15937156 16249210 15834961 Nereistoxin 432694 428961 433648 420579 415397 397826 448219 403792 428941 441391 Thiocyclam 939842 975671 1001536 949614 1100579 902391 1008237 1025367 982349 1059726 Thiosultap 102368 99234 95678 105384 101286 98632 105379 99348 108349 101847 13-11-2019 Cartap 17059872 17534681 17756249 17254638 17358126 16891725 17534981 17098217 16921834 17469127

Cartap 17826145 17239245 16824621 16582462 16921752 16028954 16485472 15787925 16697559 17958246 Nereistoxin 514792 508961 489752 501367 478246 493581 526791 556319 486318 509726 Thiocyclam 1089725 1103792 1056281 1125762 1104328 1143925 1089248 1035482 1067158 1119354 Thiosultap 103854 107914 100561 101267 105864 97854 100539 96582 98246 96854 Cartap 16825642 16658241 17089245 16828925 16348214 15869248 16259314 16089424 15569114 16024952

Phө lөc 3: SҳFNêÿӗ khҧo sát giӟi hҥn phát hiӋQYjÿӏQKOѭӧng, nӅn mүu gҥo

Sample Information Date Acquired : 30-Nov-21 8:29:28 PM

Data File : GAO RE 0.001 L1_003.lcd

Ret.Time:9.178 Conc.:0.000ppm Event:1

Sample Information Date Acquired : 10-Dec-21 6:56:07 PM

Phө lөc 4: SҳFNêÿӗ khҧo sát giӟi hҥn phát hiӋQYjÿӏQKOѭӧng, nӅn mүu tiêu

Phө lөc 5: SҳFNêÿӗ thҭPÿӏnh ÿӝ lһp lҥLYjÿӝ tái lһp, nӅn mүu gҥo

Phө lөc 6: SҳFNêÿӗ thҭPÿӏQKÿӝ lһp lҥi và ÿӝ tái lһp, nӅn mүu tiêu

Tiêu đề	Xây dựng phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên nền gạo và hồ tiêu
Tác giả	Vy Vy, Lұp
Người hướng dẫn	HuǤnh Khỏnh Duy, TS.
Trường học	ĈҤI HӐC QUӔC GIA TP.HCM
Chuyên ngành	Kӻ thuұt húa hӑc
Thể loại	LuұQ YăQ
Năm xuất bản	2022
Thành phố	TP. HӖ CHÍ MINH

Định dạng
Số trang	217
Dung lượng	5,39 MB

Luận văn thạc sĩ Kỹ thuật hóa học: Xây dựng phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên nền gạo và hồ tiêu

THUӔC BҦO Vӊ THӴC VҰT

Thuӕc bҧo vӋ thӵc vұt

Ĉӝ chính xác

ѬӞ&/ѬӦ1ĈӜ +Ð1ĈҦM BҦ2Ĉ2

ĈӏQKQJKƭD

ĈӏQKOѭӧQJÿӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRtӯ dӳ liӋu phê duyӋWSKѭѫQJSKiS

ĈӔ,7ѬӦNG VÀ NӜI DUNG NGHIÊN CӬU

ĈӕLWѭӧng nghiên cӭu

Nӝi dung nghiên cӭu

THIӂT Bӎ, DӨNG CӨ VÀ HÓA CHҨT

KhҧRViWÿLӅu kiӋn thӵc hiӋn sҳc kí lӓng ghép detector khӕi phә

KhҧRViWÿLӅu kiӋn xӱ lí mүu

THҬ0Ĉӎ1+3+ѬѪ1*3+È3

Tính chӑn lӑc

Ĉѭӡng chuҭn

Giӟi hҥn phát hiӋn (LOD) và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧQJÿӏQKOѭӧng (LOQ)

Ĉӝ lһp lҥi

ѬӞ&/ѬӦNG ĈӜ +Ð1*ĈҦM BҦ2Ĉ2

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ chөm-u precision

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ-u bias

Ĉ,ӄU KIӊN VҰN HÀNH THIӂT Bӎ SҲC KÝ GHÉP KHӔI PHӘ

TӕLѭXPҧnh khӕi các hoҥt chҩt

KӂT QUҦ KHҦO SÁT THӠI GIAN Ә1ĈӎNH CӪA DUNG DӎCH CHUҬN

Dung dӏch chuҭn làm viӋc, 1 Pg/mL

Dung dӏch chuҭn trung gian, 10 Pg/mL

KHҦ26È7Ĉ,ӄU KIӊN XӰ LÝ MҮU

Dung môi chiӃt mүu

Quy trình làm sҥch mүu

THҬ0Ĉӎ1+3+ѬѪ1*3+È3

Tính chӑn lӑc

Giӟi hҥn phát hiӋn và giӟi hҥQÿӏQKOѭӧng

Ĉӝ lһp lҥi

Ĉӝ tái lһp nӝi bӝ

ѬӞ&/ѬӦ1ĈӜ +Ð1ĈҦM BҦ2Ĉ2

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ chөm-u precision

Ĉӝ NK{QJÿҧm bҧRÿRFӫDÿӝ ÿ~QJ-u bias

KӂT LUҰN

KIӂN NGHӎ