khóa luận nghiên cứu độc tính cấp và tác dụng bảo vệ gan của viên nang ngũ vị tử schisandra sphenanthera rehder et wills

Mát sá nghiên cāu về tác dụng d°ợc lý chỉ ra Ngũ vß tử có tác dụng cháng viêm gan, cháng oxy hóa, có ho¿t tính cháng khái u và ho¿t tính cháng virus [6].. Thành phÅn hóa hãc Các nghiên c

Đ¾I HàC QUàC GIA HÀ NàI

TR¯àNG Đ¾I HâC Y D¯þC

NGHIÊN CĄU ĐÞC TÍNH CÂP VÀ TÁC DĀNG BÀO VÞ GAN CĂA VIÊN NANG NGi Và Tþ

(Schisandra sphenanthera Rehder et Wils.)

HÀ NÞI - 2023

Đ¾I HàC QUàC GIA HÀ NàI

TR¯àNG Đ¾I HâC Y D¯þC

Ng°ßi thực hiện: NGUYàN THà HÀ CHÂU

NGHIÊN CĄU ĐÞC TÍNH CÂP VÀ TÁC DĀNG BÀO VÞ GAN CĂA VIÊN NANG NGi Và Tþ

(Schisandra sphenanthera Rehder et Wils.)

LàI CÀM ¡N

Trong suát quá trình hác tập, nghiên cāu và hoàn thành khóa luận tát nghiệp, em đã nhận đ°ợc rÃt nhiều sự giúp đỡ tận tình và những lßi khuyên vô cùng quý báu cÿa các thầy, cô giÁng viên Tr°ßng Đ¿i hác Y D°ợc – Đ¿i hác Quác Gia Hà Nái, các cán bá Viện D°ợc liệu cùng gia đình và b¿n bè

Tr°ớc hết em xin trân tráng bày tß lòng biết ¡n, kính tráng tới Ths Nguyễn Thß Ph°ợng khoa D°ợc lý – Hóa sinh, Viện D°ợc liệu, ng°ßi đã trực tiếp h°ớng dẫn, hết lòng chỉ bÁo, tận tình góp ý, t¿o điều kiện, giúp đỡ em trong quá trình thực hiện đề tài để em có thể hoàn thành đề tài mát cách tát nhÃt Cùng với đó, em xin gửi lßi cÁm ¡n chân thành đến các anh, chß cán bá cÿa khoa D°ợc lý – Hóa sinh, Viện D°ợc liệu đã hß trợ, t¿o điều kiện cho em trong suát quá trình nghiên cāu để em có thể thu thập đ°ợc sá liệu hoàn thiện đề tài Em xin chân thành cÁm ¡n Ths Nguyễn Thúc Thu H°¡ng và các thầy cô trong bá môn D°ợc liệu – D°ợc cổ truyền Tr°ßng Đ¿i hác Y D°ợc – Đ¿i hác Quác Gia Hà Nái đã dành nhiều thßi gian, tâm huyết quan tâm, giúp đỡ em trong quá trình hoàn thành khóa luận tát nghiệp Các thầy cô là tÃm g°¡ng sáng về đ¿o đāc và sự tận tâm với nghề cho em hác tập và noi theo

Em xin gửi lßi cÁm ¡n tới Ban giám hiệu, toàn thể các thầy cô Tr°ßng Đ¿i hác Y D°ợc – Đ¿i hác Quác Gia Hà Nái và toàn thể cán bá Viện D°ợc liệu đã t¿o điều kiện cho em có c¡ hái hác tập, nghiên cāu, thực hiện và hoàn thành ch°¡ng trình hác tập

Cuái cùng, em xin gửi lßi cÁm ¡n đến gia đình, b¿n bè luôn á bên c¿nh đáng viên, khích lệ và sát cánh bên em, giúp em có thêm đáng lực để cá gắng trong quá trình hác tập

Sinh viên

Nguyễn Thß Hà Châu

DANH MĀC TĆ VI¾T TÂT

AH Alcohol-associated hepatitis Viêm gan do r°ợu ALP Alkalin phosphatase

ALT Alanin aminotransferase APAP Acetaminophen

AST Aspartat aminotransferase CCl¤ Carbon tetraclorid

CYP450 Cytochrome P450

LD  Lethal dose 0% Liều lớn nhÃt không chết đáng vật thí nghiệm nào LD¥  Lethal dose 50% Liều gây chết 50% đáng vật

thí nghiệm

LD¡   Lethal dose 100% Liều nhß nhÃt làm chết tÃt cÁ đáng vật thí nghiệm

NAPQI N-acetyl-p-benzoquinoeimin PAR Paracetamol

ULN Upper limit of normal Giới h¿n bình th°ßng trên

DANH MĀC CÁC BÀNG

BÁng 2.1 Công thāc viên nang Ngũ vß tử 21BÁng 3.1 Kết quÁ thử đác tính cÃp đ°ßng uáng cÿa viên nang Ngũ vß tử 27BÁng 3.2 Ành h°áng cÿa viên nang Ngũ vß tử lên ho¿t đá AST trong huyết

thanh chuát (n=10) 29

BÁng 3.3 Ành h°áng cÿa viên nang Ngũ vß tử lên ho¿t đá ALT trong huyết

thanh chuát (n=10) 30

DANH MĀC HÌNH ÀNH

Hình 1.1 Mát sá hình Ánh Ngũ vß tử thu t¿i vùng núi Ngác Linh 8

Hình 3.1 Hình Ánh gan đ¿i thể cÿa các lô chuát 28

Hình 3.2 Ho¿t đá AST trong huyết thanh chuát gây đác bái paracetamol 29

Hình 3.3 Ho¿t đá ALT trong huyết thanh chuát gây đác bái paracetamol 31

1.3.1 Tổng quan về nghiên cāu đác tính cÃp 14

1.3.2 Tổng quan về ph°¡ng pháp đánh giá tác dụng bÁo vệ gan 17

CH¯¡NG 2: ĐÞI T¯þNG VÀ PH¯¡NG PHÁP NGHIÊN CĄU 21

2.1 Đái t°ợng nghiên cāu 21

2.2 Vật liệu và trang thiết bß nghiên cāu 21

CH¯¡NG 3: K¾T QUÀ NGHIÊN CĄU 26

3.1 Nghiên cāu đác tính cÃp 26

3.2 Nghiên cāu tác dụng bÁo vệ gan 28

3.2.1 Kết quÁ hình Ánh gan đ¿i thể 28

3.2.2 Kết quÁ đo ho¿t đá AST 29

3.2.3 Kết quÁ đo ho¿t đá ALT 30

CH¯¡NG 4: BÀN LUÀN 32

4.1 Về đác tính cÃp cÿa viên nang Ngũ vß tử 32

4.2 Về tác dụng bÁo vệ gan cÿa viên nang Ngũ vß tử 33

K¾T LUÀN VÀ ĐÀ XUÂT 36

1

à Việt Nam, bệnh gan là mát trong những bệnh th°ßng gặp, trong đó có viêm gan, với phần lớn nguyên nhân do nhiễm virus viêm gan, uáng r°ợu nhiều, nhiễm đác (hóa chÃt, thuác…) Mát nghiên cāu toàn quác gần đây đã chỉ ra rằng, ung th° gan là nguyên nhân gây tử vong do ung th° cao nhÃt á cÁ 2 giới t¿i Việt Nam (chiếm tỷ lệ 31,04% á nam và 19,91% á nữ trên tổng sá các ca tử vong do ung th°) [1] Mặc dù y hác hiện đ¿i đã đ¿t đ°ợc những b°ớc tiến lớn trong việc điều trß bệnh, song việc lựa chán thuác điều trß các bệnh về gan hiện vẫn còn nhiều h¿n chế Bên c¿nh đó, mát sá thuác có nguồn gác hóa d°ợc dùng trong điều trß cũng có khÁ năng gây tổn th°¡ng gan [2, 3] Vì vậy, việc lựa chán sử dụng các lo¿i thuác có nguồn gác tự nhiên là mát vÃn đề đặc biệt đ°ợc quan tâm và đang trá thành xu h°ớng chung cÿa xã hái

Chi Schisandra (Ngũ vß tử) hiện có khoÁng 22 – 25 loài phân bá trên thế giới, chÿ yếu đ°ợc tìm thÃy á Trung Quác Năm 2006, Nguyễn Bá Ho¿t và các cáng sự đã công bá loài Ngũ vß tử có tên khoa hác là Schisandra sphenanthera Rehder & E.H Wilson đ°ợc tìm thÃy á dãy núi Ngác Linh thuác đßa phận hai tỉnh Kon Tum và QuÁng Nam [4] Trong Y hác cổ truyền, Ngũ vß tử là mát vß thuác chữa ho do viêm phế quÁn, hen suyễn, bệnh di máng tinh, tình tr¿ng ra mồ hôi ban đêm, chữa tiểu đ°ßng, bệnh tim đập nhanh hoặc chāng mÃt ngÿ… [5] Mát sá nghiên cāu về tác dụng d°ợc lý chỉ ra Ngũ vß tử có tác dụng cháng viêm gan, cháng oxy hóa, có ho¿t tính cháng khái u và ho¿t tính cháng virus [6] T¿i Việt Nam, đã có mát sá nghiên cāu đánh giá tác dụng cÿa cao chiết toàn phần Ngũ vß tử Tuy nhiên, cho đến nay ch°a có công trình nghiên cāu về đác tính cÃp và tác dụng bÁo vệ gan cÿa viên nang Ngũ vß tử (chāa cao chiết giàu lignan) Để có bằng chāng khoa hác cho việc āng dụng trên nghiên cāu lâm sàng, em thực hiện đề tài: <Nghiên cąu đßc tính cÃp và tác dāng bÁo vß gan căa viên nang Ngj vá tÿ (Schisandra sphenanthera Rehder et Wills.)=

với 2 mục tiêu sau:

1 Đánh giá đác tính cÃp cÿa viên nang Ngũ vß tử trên chuát nhắt trắng 2 Đánh giá tác dụng bÁo vệ gan cÿa viên nang Ngũ vß tử trên mô hình gây

viêm gan cÃp bằng Paracetamol trên chuát nhắt trắng

2

CH¯¡NG 1: TÞNG QUAN 1.1 Tßng quan các bßnh lý vÁ gan

1.1.1 Bßnh lý viêm gan cÃp tính

Viêm gan cÃp là mát khái niệm chỉ tình tr¿ng gan bß tổn th°¡ng cÃp do nhiều tác nhân khác nhau gây nên, tác nhân có thể là virus (các lo¿i virus viêm gan A, B, C,…), vi khuẩn (xoắn khuẩn Leptospira), ký sinh trùng (sát rét), hoặc viêm gan nhiễm đác do các lo¿i hóa chÃt (r°ợu,…) hay do thuác (isoniazid, paracetamol…) [7]

1.1.1.1 Viêm gan virus

Viêm gan virus là mát bệnh nhiễm trùng có tổn th°¡ng thoái hóa, ho¿i tử tế bào gan và những tổn th°¡ng mô đệm trong gan do phÁn āng viêm gây nên [8] Viêm gan virus có 2 thể là viêm gan cÃp tính và viêm gan m¿n tính Các nguyên nhân gây viêm gan virus phổ biến nhÃt là năm lo¿i virus bao gồm: virus viêm gan A, virus viêm gan B, virus viêm gan C, virus viêm gan D, virus viêm gan E Các bệnh liên quan đến nhiễm virus viêm gan A và virus viêm gan E xÁy ra ngay sau khi chúng xâm nhập vào c¡ thể và diễn ra á giai đo¿n cÃp tính Tuy nhiên, trong tr°ßng hợp nhiễm virus viêm gan B và virus viêm gan C thì quá trình lây nhiễm virus có thể tồn t¿i trong mát thßi gian dài, dẫn đến viêm gan m¿n tính và tiến triển thêm thành x¡ gan và ung th° gan [9]

Tổn th°¡ng th°ßng gặp trong viêm gan virus cÃp là viêm gan ho¿i tử từng ổ tế bào gan, đồng thßi với sự đáp āng cÿa tế bào đ¡n nhân, các tế bào ho¿i tử đ°ợc thay thế bằng các tế bào viêm đ¡n nhân Từ đó, các tế bào viêm bß tr°ớng n°ớc hoặc teo nhß, bè gan bß vỡ cùng với sự tăng sinh cÿa các tế bào Kuffer gây ra ā mật, nặng h¡n là ho¿i tử cầu nái hoặc ho¿i tử đám [7] Các biểu hiện ngoài gan nh° phát ban hoặc đau khớp phát triển trong nhiễm virus viêm gan A cÃp tính là rÃt hiếm Nhiễm virus viêm gan B cÃp tính th°ßng á d¿ng cận lâm sàng và không có triệu chāng trong khoÁng 2/3 tr°ßng hợp Trong hầu hết các tr°ßng hợp, các triệu chāng th°ßng không phổ biến trong quá trình nhiễm virus viêm gan C cÃp tính Bệnh nhân nhiễm virus viêm gan C th°ßng tiến triển sang giai đo¿n m¿n tính không hồi phục Nhiễm virus viêm gan E cÃp tính có

1.1.1.2 Viêm gan do thußc

Viêm gan do thuác là tình tr¿ng gan bß viêm, s°ng do nhiễm đác thuác hoặc các chÃt chuyển hóa cÿa nó gây ra Nhiễm đác gan do thuác hay tổn th°¡ng gan do thuác đã trá thành lý do chính gây ra viêm gan cÃp tính, từ đó đặt ra mát thách thāc lâm sàng trong vài thập kỷ qua [11]

C¡ chế bệnh sinh: c¡ chế gây viêm gan cÃp tính do thuác vẫn ch°a biết rõ ràng đái với tÃt cÁ các hợp chÃt Tuy nhiên, có mát c¡ chế d°ßng nh° th°ßng xuyên đ°ợc đề cập tới liên quan đến vai trò chÿ yếu cÿa gan trong quá trình chuyển hóa thuác [12] Hầu hết các thuác tan trong dầu sau khi tới gan, bß chuyển hóa hai lần thành các chÃt chuyển hóa tan trong n°ớc để thÁi trừ qua n°ớc tiểu [7] Quá trình chuyển hóa này đ°ợc thực hiện á gan bằng hai phÁn āng Phân tử thuác bß các men cytochrome P450 (CYP450) oxy hóa, sau đó sÁn phẩm đã oxy hóa sẽ đ°ợc liên hợp thêm mát nhóm phân cực, tan trong n°ớc nh° axit glucuronid, sulphat, glutathion hoặc axit amin [12] Tuy nhiên, các enzym xúc tác cho hai phÁn āng này đều có h¿n, khi đ°a vào c¡ thể cùng mát lúc nhiều lo¿i thuác hoặc mát lo¿i thuác với sá l°ợng lớn sẽ làm v°ợt quá khÁ năng ho¿t đáng cÿa các enzym này gây quá tÁi cho gan, làm nhiễm đác gan

Hầu hết các tr°ßng hợp viêm gan do nhiễm đác thuác đều do mát bÃt th°ßng về chuyển hóa Thuác sau khi đ°ợc oxy hóa, thay vì bß bÃt ho¿t về mặt hóa hác thì l¿i trá thành chÃt trung gian có ho¿t tính m¿nh Kết hợp với các phân tử lớn cÿa các tế bào gan làm tăng nguy c¡ nhiễm đác gan theo hai c¡ chế khác nhau:

4

- Tác đáng trực tiếp lên tế bào gan: Đây là c¡ chế phụ thuác chÿ yếu vào liều l°ợng thuác đ°a vào c¡ thể C¡ chế này gây phá hÿy cÃu trúc tế bào gan và gây ā mật, không kèm theo các biểu hiện ngoài gan Những lần nhiễm đác sau khi dùng l¿i thuác có thßi gian ÿ bệnh t°¡ng tự lần đầu Th°ßng gặp nhÃt là do paracetamol gây ra Trong mát sá tr°ßng hợp ít gặp h¡n có thể do aspirin, tetracyclin và vitamin A

- Tác đáng gián tiếp: Trong c¡ chế này, thuác kết hợp với các phân tử lớn cÿa tế bào gan đóng vai trò nh° mát dß nguyên Tế bào gan có chāa dß nguyên sẽ bß hÿy ho¿i bái các phÁn āng miễn dßch C¡ chế này th°ßng không liên quan đến liều l°ợng thuác, khó dự đoán và có biểu hiện đa d¿ng h¡n Nguyên nhân th°ßng do:

+ Thuác kháng sinh (45,4%): ciprofloxacin, isoniazid, trimethoprim…

sulfamethoxazol-+ Thuác cháng viêm không steroid: Clometacin, Diclofenac…

+ ThÁo d°ợc và thực phẩm bổ sung (16,1%): chiết xuÃt trà xanh, thực phẩm bổ sung dinh d°ỡng đa thành phần

+ Thuác tim m¿ch (10%): statin, amiodaron…

+ Thuác tác đáng lên hệ thần kinh trung °¡ng: valproat, phenytoin… + Thuác cháng ung th°: thuác āc chế tyrosin kinase, thuác āc chế yếu tá ho¿i tử khái u, thuác āc chế alpha, methotrexat…[7, 13]

Các tiêu chuẩn hóa sinh lâm sàng để xác đßnh sự xuÃt hiện cÿa tổn th°¡ng gan do thuác bao gồm ít nhÃt mát trong các tiêu chí sau: 1) ALT tăng ≥ 5 lần ULN (giới h¿n trên bình th°ßng), 2) ALP (alkalin phosphatase) tăng ≥ 2 lần ULN, 3) ALT tăng ≥ 3 lần ULN kèm theo bilirubin tăng > 2 lần ULN

Giá trß R đ°ợc sử dụng để xác đßnh lo¿i tổn th°¡ng gan: R = (ALT/ULN) / (ALP/ULN) + R ≥ 5 phÁn ánh tổn th°¡ng tế bào gan

+ R < 2 t°¡ng āng với tổn th°¡ng tắc mật

+ 2 < R < 5 thể hiện tổn th°¡ng tế bào gan và tắc mật hßn hợp

5

Lo¿i tổn th°¡ng và các biểu hiện lâm sàng có thể thay đổi đái với cùng mát thuác [14]

1.1.1.3 Viêm gan do r°ÿu

Viêm gan do r°ợu (AH) là bệnh viêm gan cÃp tính có tỷ lệ mắc bệnh và tử vong cao đặc biệt á những tình tr¿ng bệnh nghiêm tráng [15] Tỷ lệ tử vong trung bình trong 30 ngày đái với bệnh nhân viêm gan do r°ợu nặng có thể lên tới 17–50% [16, 17]

C¡ chế bệnh sinh: Tổn th°¡ng gan do r°ợu xÁy ra thông qua cÁ tổn th°¡ng tế bào gan trực tiếp và tổn th°¡ng do viêm Chuyển hóa r°ợu cũng làm thay đổi tr¿ng thái oxy hóa khử cÿa tế bào gan, cÁn trá chuyển hóa carbohydrat và lipid góp phần gây ra tình tr¿ng gan nhiễm mỡ R°ợu làm tăng khÁ năng bß tổn th°¡ng cÿa tế bào gan đái với các gác tự do do enzym cÁm āng cytochrome P2E1, rái lo¿n chāc năng cÿa ty l¿p thể, c¿n kiệt kho dự trữ chÃt cháng oxy hóa và huy đáng các tế bào viêm Rái lo¿n chāc năng proteasome cũng đóng mát vai trò trong việc làm trầm tráng thêm tình tr¿ng mÃt cân bằng oxy hóa và tổn th°¡ng tế bào gan [18, 19]

Viêm gan do r°ợu với biểu hiện lâm sàng là vàng da khái phát nhanh cùng với sự tăng nhanh ho¿t đá AST, ALT trong huyết thanh à những bệnh nhân mắc AH th°ßng có bilirubin huyết thanh tăng cao (> 3mg/dL), AST > 50IU/mL và tỷ lệ AST/ALT > 1,5 Tuy nhiên, ho¿t đá AST, ALT th°ßng không v°ợt quá 400IU/mL, đây cũng là mát yếu tá giúp phân biệt AH với các bệnh về gan khác [20]

1.1.2 Bßnh lý viêm gan m¿n tính

Viêm gan m¿n tính là mát trong những tình tr¿ng bệnh lý th°ßng gặp á gan do nhiều nguyên nhân gây ra với biểu hiện viêm và ho¿i tử á gan kéo dài ít nhÃt 6 tháng

Viêm gan m¿n có thể là hậu quÁ cÿa viêm gan cÃp, mặc dù á nhiều tr°ßng hợp bệnh tiến triển mát cách âm thầm và chỉ thể hiện á giai đo¿n m¿n tính Tiến triển cÿa viêm gan m¿n có thể dẫn tới x¡ gan và ung th° gan nguyên phát, đây cũng là nguyên nhân hàng đầu gây tử vong á bệnh nhân viêm gan

6

Có nhiều nguyên nhân dẫn tới viêm gan m¿n tính, th°ßng gặp nhÃt là: - Viêm gan m¿n do virus: Các virus viêm gan B, virus viêm gan C và virus viêm gan D là những virus dễ tiến triển đến viêm gan m¿n th°ßng gặp nhÃt

- Viêm gan m¿n tự miễn

- Viêm gan m¿n do nhiễm đác thuác, hóa chÃt và viêm gan m¿n do r°ợu - Viêm gan m¿n không rõ nguyên nhân hoặc có nguồn gác ẩn

Chāc năng gan á những bệnh nhân mắc viêm gan m¿n tính có sự thay đổi nhiều:

- Bilirubin tăng cÁ trực tiếp và gián tiếp

- Ho¿t đá enzym ALT, AST th°ßng tăng gÃp 5 lần bình th°ßng

- Gammaglobulin (G) tăng nh°ng albumin (A) giÁm, tỉ lệ A/G rÃt thÃp - Tỉ lệ prothrombin giÁm

- Phosphatase kiềm tăng [21-23]

1.1.3 Bßnh lý x¢ gan

X¡ gan là bệnh lý m¿n tính gây tổn th°¡ng lan tßa á các tiểu thùy gan, đặc tr°ng bái quá trình x¡ hóa, đÁo lán cÃu trúc các tiểu thùy và m¿ch máu trong gan Hình thái hác cÿa x¡ gan là kết hợp cÿa 3 quá trình đồng thßi hoặc nái tiếp: 1) Viêm, ho¿i tử tế bào nhu mô gan; 2) Sự tăng sinh x¡ cÿa tổ chāc liên kết t¿o sẹo x¡ hóa; 3) Sự hình thành các h¿t tái t¿o từ tế bào gan còn nguyên vẹn làm đÁo lán cÃu trúc bình th°ßng dẫn đến hình thành các u, cục trong nhu mô gan [24]

X¡ gan bắt nguồn từ nhiều nguyên nhân khác nhau: th°ßng gặp nhÃt là do viêm gan B, C và do r°ợu [25] Tổn th°¡ng áng mật cũng có thể gây x¡ gan nh° tắc nghẽn áng mật, x¡ hóa đ°ßng mật nguyên phát Bên c¿nh đó, nhiều tr°ßng hợp x¡ gan không rõ nguyên nhân, có thể do các bệnh gan nhiễm mỡ không do r°ợu [26] Ngoài ra, còn có mát sá nguyên nhân khác có thể dẫn tới x¡ gan nh°: viêm gan tự miễn, các bệnh di truyền (x¡ hóa nang, thiếu alpha-1

Biểu hiện cận lâm sàng cÿa x¡ gan đặc tr°ng bái chỉ sá sinh hóa:

- Protid máu giÁm đặc biệt thành phần albumin (A) máu giÁm, trong khi đó gamma globulin (G) tăng, tỷ lệ A/G nhß h¡n 1 Các globulin miễn dßch IgG, IgM tăng cao

- Ā mật: bilirubin máu tăng cao cÁ liên hợp và bilirubin tự do, phosphatase kiềm tăng

- Rái lo¿n đông máu: prothrombin giÁm

- Ho¿t đá enzym transaminase AST, ALT tăng do ho¿i tử tế bào gan - Công thāc máu: có thể có thiếu máu nếu có xuÃt huyết tiêu hóa, thiếu máu nh°ợc sắc māc đá nặng Đặc biệt, sá l°ợng tiểu cầu giÁm, sá l°ợng b¿ch cầu có thể giÁm [24]

8

1.2 Tßng quan vÁ Ngj vá tÿ Ngãc Linh 1.2.1 Phân lo¿i thực vÁt

Ngũ vß tử có tên khoa hác là Schisandra sphenanthera Rehd et Wils

Tên khác: Ngũ vß tử Ngác Linh, ngũ vß tử nam

Vß trí trong phân lo¿i hệ tháng thực vật cÿa Ngũ vß tử nh° sau: Giới: Plantae

Bá: Illiciales

Há: Schisandraceae Chi: Schisandra

Loài: Schisandra sphenanthera

Hình 1.1 Mát sá hình Ánh Ngũ vß tử thu t¿i vùng núi Ngác Linh

(A – Hoa; B – Quả chưa chín; C – Quả chín)

1.2.2 Đặc đißm thực vÁt

Cây Ngũ vß tử Ngác Linh (Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.) là

lo¿i cây thân leo gß, dài 3 – 5m Toàn cây không lông, rÃt ít gặp á mặt trên gân, mặt d°ới có lông nhß, mềm, th°a thớt Khi cây đâm chồi vào tháng 2, vẩy chồi có lông mềm Cành nhß có màu cánh gián Thân cành có nát sần, cành non h¡i có c¿nh Lá mác so le, hình trāng đÁo, ráng h¡n về cuái lá, gác hình nêm, đỉnh nhán, kích th°ớc lá trung bình dài 5 – 11 cm, ráng 3 – 7 cm Mặt trên lá xanh đậm, mặt d°ới lá nh¿t màu h¡n Mép lá có răng c°a, thô về cuái lá Lá có gân

9

hình lông chim Cuáng lá màu hồng nh¿t, dài 2 – 3cm Gân lá 4 – 5 đôi, lồi á mặt d°ới, h¡i lõm á mặt trên Hoa đ¡n tính, khác gác, tràng có 6 – 9 cánh, màu vàng trắng, có mùi th¡m, nhß 5 Hoa mác á nách lá, cuáng dài 2 – 4 cm, gác có vẩy dài 3 – 4 mm Cánh hoa 5 – 9 màu cam, hình trāng đÁo d¿ng tròn dài, kích th°ớc 6 – 12 x 5 – 8 mm Hoa đực nhß nhiều, thành bó, hình trāng đÁo, đ°ßng kính 4 – 5 mm Đế hoa lồi hình trụ tròn, nhß nhiều, ô phÃn h°ớng nái, 2 ô Hoa cái có 30 – 60 tâm bì tập hợp thành bó hình cầu d¿ng trāng, đ°ßng kính 5 cm Trục đế hoa tập hợp quÁ dài 6 – 17 cm, đ°ßng kính 4 mm, cuáng quá dài 5 – 10 cm QuÁ máng khi chín có màu hồng sau đß sẫm, hình cầu d¿ng trāng đ°ßng kính 5 – 7 mm H¿t tròn màu vàng, hình thận 8 dài 4 mm, ráng 3,8 mm, rán h¿t hình chữ V, vß h¿t l°ng có vân sần sùi [27, 28]

1.2.3 Phân bß

Schisandra sphenanthera th°ßng mác tự nhiên trên s°ßn núi hoặc dác theo bß sông t¿i các tỉnh á miền trung và miền nam Trung Quác nh°: An Huy, Quý Châu, Hà Nam, Hồ Nam, Vân Nam… Ngoài ra, cây còn phân bá á các quác gia nh° Ân Đá, Hoa Kỳ, Nhật BÁn, Hàn Quác [29]

T¿i Việt Nam, Ngũ vß tử Ngác Linh mát loài mới đ°ợc phát hiện những năm gần đây và đ°ợc phân bá chÿ yếu á trên dãy núi Ngác Linh á hai tỉnh Kon Tum và QuÁng Nam Ngoài ra, cây cũng đ°ợc tìm thÃy á các tỉnh miền núi cao nh° Cao Bằng, Lào Cai, Yên Bái, Thanh Hoá… [30]

1.2.4 Thành phÅn hóa hãc

Các nghiên cāu á trên thế giới nói chung và Việt Nam nói riêng về thành phần hóa hác cÿa Ngũ vß tử đã chỉ ra sự có mặt cÿa các lignan, các terpernoid và các tinh dầu dễ bay h¡i…

- Thành phần hóa hác trong thân cành: Đß Tiến Lâm đã phân lập đ°ợc các hợp chÃt: β-sitosterol, β-sitosterol-3-O-β-D

- Thành phần hóa hác trong rễ cây: Năm 2015, KhÁn Giang và các cáng sự đã phân lập thành công mát sá lignan mới có trong rễ cây Ngũ vß tử nh° schiglaucin B, schiglaucin A, epoxyzuonin A, talaumidin, myristargenol A [31]

- Thành phần hóa hác trong quÁ:

10

+ QuÁ cÿa cây Ngũ vß tử có chāa tinh dầu mùi chanh gồm 30% secquiterpen, 20% aldehyd và aceton Ngoài ra, còn có các tinh dầu dễ bay h¡i khác [32]

+ Thành phần chính cÿa quÁ cây Ngũ vß tử là các dẫn chÃt lignan đ°ợc phân lo¿i thành 5 nhóm bao gồm lignan dibenzocyclooctadien, lignan spirobenzofuranoid dibenzocycloactadien, lignan 4 – aryltetralin, lignan 2,3 – dimethyl – 1,4 – diarylbutan và lignan 2,5 – diaryltetrahydrofuran [33] Mát sá lignan đ°ợc phân lập từ quÁ Ngũ vß tử nh°: gomisin U, schisantherin A (gomisin A), schisantherin B (gomisin B), schisantherin C – E, deoxychisandrin (schisandrin A)… [33, 34]

+ Có 3 triterpen đ°ợc phân lập từ quÁ Ngũ vß tử bao gồm acid schizandronic, acid anwuweizic và schisanol [33]

+ Các nghiên cāu về thành phần hóa hác cÿa quÁ cây Ngũ vß tử Ngác Linh á Việt Nam đã phân lập đ°ợc nhiều terpenoid nh°: Trong nghiên cāu cÿa Bùi Thß Bằng và các cáng sự đã phân lập đ°ợc cÃu trúc hóa hác cÿa β-sitosterol [35] Năm 2014, Trần Thanh Hà và các cáng sự cũng phân lập và xác đßnh đ°ợc 4 hợp chÃt terpenoid là β-sitosterol, acid coccinic, acid ursolic, daucosterol [32] Trần Quang H°ng và các cáng sự cũng phân lập đ°ợc 3 hợp chÃt hóa hác trong đó có 1 hợp chÃt nortriterpenoid là henridilacton [36]

+ Do sự chênh lệch về vĩ đá và sự khác biệt về điều kiện tự nhiên nh° khí hậu, thổ nh°ỡng mà thành phần hóa hác cÿa cùng mát loài giữa các vùng có thể khác nhau Những nghiên cāu gần đây cho thÃy, trong quÁ Ngũ vß tử Ngác Linh á Việt Nam thì những lignan chiếm hàm l°ợng cao là các hợp chÃt nh° schisandrin (0,271 – 0,528 %), gomisin B (0,095 – 0,553 %) và schisandrin A (0,082 – 0,208 %) [4, 35, 37]

1.2.5 Tác dāng d°ÿc lý

1.2.5.1 Theo y hãc cß truyÁn

Tính vß, quy kinh: Theo Đông y, bá phận đ°ợc sử dụng phổ biến nhÃt cÿa cây Ngũ vß tử là quÁ chín ph¡i khô có vß chua, mặn, tính ôn, không đác Quy vào hai kinh phế, thận

Mát sá bài thuác y hác cổ truyền có chāa Ngũ vß tử:

- Trß ho có đßm, khó thá: Chia Ngũ vß tử và phèn chua thành các phần bằng nhau, mßi phần 9g, tán thành bát nhß, sắc uáng mßi ngày mát thang

- Chữa liệt d°¡ng: Ngũ vß tử, chi t¡ hồng, ng°u tÃt mßi vß 30g đ°ợc chia thành các phần bằng nhau, tán nhß, trán với mật ong Uáng 3 lần mát ngày

- Trß tiêu chÁy: G¿o tẻ, nhục đậu khÃu, ngũ vß tử, hoàng thổ mßi vß 30g Tán nhß, trán đều, chia thành các phần 6g, trán với canh để uáng, ngày ba lần - Trß chāng ra mồ hôi đêm khi ngÿ: Ngũ vß tử 30g, nghiền thành bát, trán với n°ớc t¿o hßn hợp bát dính, lÃy vÁi buác vào bụng, đi ngÿ Đến r¿ng sang thì cái ra, làm mát đến hai đêm [39]

- Chữa suy nh°ợc c¡ thể do phế khí h°: Ngũ vß tử 10g, thục đßa, tử uyển, tang b¿ch bì mßi vß 12g, đÁng sâm, hoàng kì mßi vß 10g Sắc uáng mßi ngày mát thang

- Chữa hen suyễn á ng°ßi già: Ngũ vß tử 10g, m¿ch môn 16g, sa sâm 12g, ng°u tÃt 12 Sắc uáng mßi ngày mát thang [40]

1.2.5.2 Theo y hãc hißn đ¿i

Nhằm phát huy những thành tựu từ y hác cổ truyền tr°ớc đây, các nghiên cāu hiện đ¿i không ngừng đ°ợc thực hiện nhằm hiểu biết rõ h¡n về tác dụng d°ợc lý cÿa Ngũ vß tử Các nghiên cāu về ho¿t tính sinh hác cÿa Ngũ vß tử đ°ợc thực hiện ráng rãi á trên thế giới nói chung và á Việt Nam nói riêng

12

Tác dāng bÁo vß gan

Nhiều nghiên cāu đã chāng minh polysaccharid từ Ngũ vß tử có tác dụng bÁo vệ gan Năm 2019, Chen và các cáng sự đã phát hiện ra polysaccharid đ°ợc phân lập từ quÁ Ngũ vß tử khô có khÁ năng āc chế sự tăng sinh và gây ra quá trình chết theo ch°¡ng trình cÿa các tế bào khái u gan [27] Năm 2016, Wang cũng đã chāng minh đ°ợc tác dụng cÿa polysaccharid đ°ợc phân lập từ quÁ Ngũ vß tử trên mô hình chuát mắc bệnh viêm gan nhiễm mỡ không do r°ợu với māc liều 100mg/kg/ngày trong vòng 12 tuần Kết quÁ cho thÃy chỉ sá men gan AST, ALT lần l°ợt giÁm 15,5% và 20,1% Đồng thßi, nó còn làm giÁm hàm l°ợng triglycerid, cholesterol toàn phần lần l°ợt là 27% và 28,3%, làm giÁm thoái hóa mỡ và ho¿i tử tế bào gan [41]

Lignan là thành phần chính cÿa Ngũ vß tử Mát sá lignan đ°ợc phân lập từ quÁ Ngũ vß tử nh° deoxyschizandrin, gomisin A, schizandrin C… có tác dụng bÁo vệ gan bao gồm kháng virus gây viêm gan đặc biệt là viêm gan B, cháng viêm gan nhiễm mỡ, x¡ gan, ung th° gan Các hợp chÃt này đã đ°ợc chāng minh về đặc tính cháng oxy hóa m¿nh, cùng với đó là khÁ năng làm giÁm ho¿t đá AST, ALT huyết thanh [42] Mát nghiên cāu năm 2019 trên tế bào và đáng vật cũng đã chāng minh rằng lignan có trong quÁ Ngũ vß tử có hiệu quÁ trong việc bÁo vệ gan cháng l¿i tổn th°¡ng do xenobiotic gây ra Ngoài ra, nó còn giúp điều hòa ho¿t đáng cÿa enzym CYP450, cháng oxy hóa, cháng viêm và tăng tác đá tái t¿o gan [43] Năm 2016, Chen đã phân lập thành công 3 lignan và 8 chÃt chuyển hóa liên quan từ quÁ Ngũ vß tử Kết quÁ nghiên cāu tiết lá rằng 5 hợp chÃt trong sá đó thể hiện ho¿t tính cháng oxy hóa đáng kể [44]

Năm 2016, Xi Li đã đánh giá tác dụng tái t¿o và phục hồi chāc năng gan cÿa Ngũ vß tử trên mô hình chuát bß cắt bß mát phần gan Kết quÁ đã chāng minh chiết xuÃt quÁ cÿa cây này làm tăng đáng kể tỷ lệ tráng l°ợng gan trên c¡ thể cÿa chuát đã bß cắt bß mát phần gan Nghiên cāu cũng chỉ ra rằng, Schisandrol đ°ợc phân lập từ quÁ Ngũ vß tử có khÁ năng thúc đẩy sự phục hồi khái l°ợng gan và tăng sá l°ợng tế bào gan đ°ợc tái t¿o sau khi phẫu thuật cắt bß mát phần gan [45]

13

Năm 2017, Zeng và các cáng sự đã báo cáo về tác dụng bÁo vệ cháng l¿i tổn th°¡ng gan m¿n tính và cÃp tính do r°ợu cÿa viên nang Ngũ vß tử bằng cách làm giÁm stress oxy hóa và cÁi thiện hệ tháng phòng thÿ cháng oxy hóa thông qua kích ho¿t con đ°ßng NRF2-ARE [46]

T¿i Việt Nam, cũng có nhiều nghiên cāu về tác dụng điều trß bệnh gan cÿa quÁ Ngũ vß tử Ngác Linh Năm 2006, Nguyễn Bá Ho¿t và các cáng sự đã chāng minh đ°ợc quÁ Ngũ vß tử cũng có tác dụng trong điều trß viêm gan siêu vi m¿n, bÁo vệ thận, cháng oxy hóa và nhiều tác dụng khác [4] Năm 2022, mát nhóm nghiên cāu t¿i Viện D°ợc liệu đã đánh giá tác dụng bÁo vệ gan trên mô hình gây viêm gan cÃp bằng paracetamol cÿa cao chiết Ngũ vß tử Ngác Linh Kết quÁ cÿa nghiên cāu này cho thÃy, cho chuát uáng cao chiết Ngũ vß tử liều 500mg/kg chia 2 lần mát ngày có làm giÁm sự tăng ho¿t đá enzym AST, ALT gây ra bái PAR Tuy nhiên, khÁ năng làm giÁm chỉ thật sự có ý nghĩa khi sử dụng cao chiết Ngũ vß tử liều 1000mg/kg chia 2 lần mát ngày làm giÁm 52,6% AST và 50,2% ALT [47]

Tác dāng chßng oxy hóa

Có rÃt nhiều nghiên cāu đã chỉ ra tác dụng cháng oxy hóa cÿa các hợp chÃt polysaccharid có trong Ngũ vß tử Năm 2017, Niu và các cáng sự đã tiến hành các thí nghiệm trong áng nghiệm và phát hiện ra các polysaccharid tan trong n°ớc đ°ợc phân lập từ quÁ khô chín cÿa Ngũ vß tử có các đặc tính cháng oxy hóa đáng kể à nồng đá 1 mg/mL, đặc tính cháng oxy hóa và đá thÁi trừ các gác tự do lần l°ợt là 62,08%, 39,27% và 41,83% [27] Ngoài ra, các hợp chÃt polyphenol đ°ợc phân lập từ Ngũ vß tử nh°: flavonoids, acid phenolic và lignan cũng đã đ°ợc báo cáo là có tác dụng cháng oxy hóa Bên c¿nh đó, cũng có nhiều nghiên cāu nói về hiệu quÁ cháng oxy hóa cÿa quÁ Ngũ vß tử theo c¡ chế gác tự do [48, 49]

Năm 2015, KhÁn Giang và các cáng sự đã báo cáo về các lignan tìm đ°ợc trong rễ cÿa Ngũ vß tử có vai trò trong ho¿t đáng cháng oxy hóa [31] Bên c¿nh đó, nhiều nghiên cāu đã chỉ ra tác dụng cháng oxy hóa cÿa các hợp chÃt polysaccharid, polyphenol, lignan đ°ợc tìm thÃy từ quÁ Ngũ vß tử [50]

Tác dāng trên tuÅn hoàn

14

Năm 1949, K.V Drake, V.A Ephimova, L.N Markova đã chāng minh rằng với liều nhß và liều trung bình cÿa Ngũ vß tử d¿ng n°ớc hãm khi tiêm vào m¿ch máu có tác dụng làm tăng ho¿t đáng cÿa hệ tháng tim m¿ch á những đáng vật máu nóng, làm tăng huyết áp và tăng biên đá co bóp tim [38]

Tác dāng trên thÅn kinh

Năm 1955, V.A Ephimova đã nghiên cāu tác dụng cÿa Ngũ vß tử đái với khÁ năng kích thích cÿa hệ tháng thần kinh c¡ trên những ng°ßi 18-54 tuổi Kết quÁ cho thÃy, 11 trên tổng sá 13 ng°ßi uáng Ngũ vß tử thÃy tăng khÁ năng kích thích thần kinh c¡, cùng với đó chāc năng cÿa hệ thần kinh ngo¿i vi cũng đ°ợc tăng c°ßng

Ngũ vß tử Ngác Linh kết hợp với Táo gai (Ziziphus spinosa) và Đ°¡ng quy (Angelica sinensis) giúp tăng sinh tế bào thần kinh, có thể ngăn ngừa tế bào thần kinh suy thoái, cháng co giật do cafein và tăng tác dụng cÿa strychnin Ngũ vß tử Ngác Linh còn đ°ợc dùng làm thuác an thần trß mÃt ngÿ, giúp làm sáng mắt và tăng giác quan xúc giác [40]

Tác dāng chßng ung th°

Các polysaccharid cÿa Ngũ vß tử đã đ°ợc báo cáo về tác dụng cháng l¿i các ho¿t đáng cÿa tế bào ung th° trên cÁ in vitro và in vivo [40] Các ho¿t chÃt phân lập từ quÁ Ngũ vß tử đã chāng minh đ°ợc tác dụng cháng ung th° trong điều trß ung th° thận, ung th° gan, ung th° h¿ch với c¡ chế tác dụng chÿ yếu là kích thích tế bào miễn dßch cháng l¿i sự tăng sinh cÿa các khái u [27]

1.3 Mô hình nghiên cąu đßc tính cÃp và đánh giá tác dāng bÁo vß gan trên thực nghißm

1.3.1 Tßng quan vÁ nghiên cąu đßc tính cÃp 1.3.1.1 Māc tiêu

Đác tính cÃp cÿa thuác là đác tính xÁy ra sau khi dùng thuác mát lần đến ba lần mát ngày Nghiên cāu đác tính cÃp cÿa thuác trên đáng vật thí nghiệm với mục đích chính là xác đßnh liều làm chết 50% đáng vật thí nghiệm trong những điều kiện nhÃt đßnh và đ°ợc kí hiệu là LD50 (lethal dose 50%) LD50 là mát thông sá rÃt quan tráng để đánh giá đác tính cÿa mát thuác Biết LD50 mới

15

xác đßnh đ°ợc chỉ sá điều trß, mát thông sá rÃt quan tráng để quyết đßnh xem có nên đ°a thuác vào dùng trên ng°ßi hay không Từ đó, đề ra ph°¡ng h°ớng dùng liều thí nghiệm d°ợc lý mát cách đúng đắn [51]

1.3.1.2 Đßng vÁt thí nghißm

Nghiên cāu đác tính cÃp có thể đ°ợc tiến hành trên 2 loài đáng vật thí nghiệm, loài gặm nhÃm (chuát nhắt trắng hoặc chuát cáng trắng) và loài không gặm nhÃm (chó hoặc khỉ) Tuy nhiên, các nghiên cāu đác tính cÃp á Việt Nam th°ßng chỉ sử dụng chuát nhắt trắng làm đáng vật nghiên cāu [52]

Có thể chỉ thử trên các con đực hoặc chỉ thử trên các con cái Cũng có thể dùng cÁ đực, cÁ cái, khi đó nên chia đều sá l°ợng đực cái cho các lô PhÁi dùng các con vật khße m¿nh, đã tr°áng thành hoặc sắp tr°áng thành Không dùng các con vật già, có thai hoặc đang cho con bú Không dùng các con vật bß bệnh [51]

1.3.1.3 Mô hình thÿ nghißm đßc tính cÃp

Đáng vật thí nghiệm (ĐVTN) th°ßng dùng là chuát nhắt trắng tr°áng thành, cÁ 2 giáng, đ°ợc chia thành từng lô, mßi lô khoÁng 10 con, ít nhÃt là 5 lô Trong đó có mát lô dùng liều LD0 (Lethal dose 0%) là liều lớn nhÃt không chết con vật nào và mát lô dùng liều LD100 (Lethal dose 100%) là liều nhß nhÃt làm tÃt cÁ các con vật đều chết Có ít nhÃt 3 lô nữa dùng 3 liều khác nhau trong khoÁng từ LD0 đến LD100 Với chuát nhắt trắng, thể tích uáng tát nhÃt là từ 0,2 – 0,5 ml cho mát con chuát nặng khoÁng 20g Chuát đ°ợc uáng thuác bằng kim h¡i cong có đầu tù với đá dài đ°a vào đến d¿ dày chuát Chuát đ°ợc nhßn ăn khoÁng 12 giß tr°ớc khi uáng thuác, vẫn uáng n°ớc đầy đÿ Theo dõi sá chuát chết trong 72 giß đầu và tình tr¿ng chung cÿa chuát trong 7 ngày sau khi uáng thuác [53]

1.3.1.4 Chß tiêu đánh giá

Theo dõi ĐVTN trong vòng 7 ngày sau khi dùng thuác Thßi gian theo dõi có thể ngắn h¡n (5 ngày) nếu thÃy các biểu hiện ngá đác đã hết, hoặc kéo dài h¡n (14 ngày) nếu biểu hiện ngá đác ch°a rõ ràng hoặc cần theo dõi thêm

- Xác đßnh sá l°ợng ĐVTN có biểu hiện ngá đác, thßi gian bắt đầu thể hiện triệu chāng đác, thßi gian kéo dài các triệu chāng, khÁ năng hồi phục

- Sá l°ợng ĐVTN bß chết, thßi gian chết āng với mßi māc liều đã thử - Chết tiên đoán: Những ĐVTN á tình tr¿ng suy kiệt, hÃp hái kéo dài, không có khÁ năng sáng sót (ĐVTN không thể ăn uáng trong khoÁng thßi gian theo dõi, đ°ợc tiên đoán là sẽ chết), thì đ°ợc tính nh° là tr°ßng hợp ĐVTN bß chết [51]

1.3.1.5 Ph°¢ng pháp tính �㔋�㔃�㗓�㗎

Việc xác đßnh LD50 vô cùng khó khăn, vì rÃt khó tìm đ°ợc mát liều khi thử l¿i có mát nửa sá con vật chết và mát nửa sá con vật sáng Có rÃt nhiều ph°¡ng pháp tính LD50 đ°ợc cÁi tiến từ ph°¡ng pháp tính cÿa Behrens năm 1929 Điển hình là:

- Ph°¡ng pháp Behrens – Kärber: Đây là ph°¡ng pháp áp dụng phép tính sá hác theo trß sá cÿa liều thử chā không thông qua logarit nên rÃt đ¡n giÁn NhÃt là khi không tính sai sá chuẩn hoặc đá tin cậy mà chỉ xác đßnh trß sá cÿa LD50 theo công thāc Tuy ph°¡ng pháp này cũng có sai sá nh°ng á māc chÃp nhận đ°ợc Đây cũng là ph°¡ng pháp đ°ợc sử dụng trong đề tài này

- Ph°¡ng pháp Behrens và ph°¡ng pháp Reed – Muench: Đều dựa vào 2 liều gây chết gần LD50 nhÃt để tính ra LD50 Behrens tính sự tăng giÁm liều

- Ph°¡ng pháp Thompson: còn đ°ợc gái là ph°¡ng pháp sá trung bình chuyển dßch và ph°¡ng pháp này hoàn toàn dựa vào phép tính sá hác để tính LD50 và giới h¿n đá tin cậy [51]

1.3.2 Tßng quan vÁ ph°¢ng pháp đánh giá tác dāng bÁo vß gan

Để đánh giá tác dụng bÁo vệ gan cÿa thuác, tr°ớc hết phÁi xây dựng đ°ợc mô hình gây viêm gan thực nghiệm Hiện nay đã có mát sá nghiên cāu trên thế giới xây dựng thành công mô hình gây viêm gan virus B, viêm gan virus C, viêm gan virus D trên chuát thông qua việc cÃy ghép tế bào gan ng°ßi vào gan cÿa chuát có thể t¿o ra gan chuát nhân và gây nhiễm virus viêm gan trên chính những con chuát đã đ°ợc cÃy ghép này [54] Trong điều kiện nghiên cāu t¿i Việt Nam, rÃt khó để áp dụng mô hình nghiên cāu này

Để nghiên cāu thuác có tác dụng bÁo vệ gan, các tác giÁ trong và ngoài n°ớc th°ßng dùng các mô hình gây viêm gan cÃp bằng thuác hoặc hóa chÃt, đánh giá tác dụng cÿa mẫu thử qua tác dụng đái kháng với tác dụng gây tổn th°¡ng do các chÃt đác trên gan Có nhiều lo¿i thuác/ hóa chÃt đ°ợc các tác giÁ sử dụng để gây mô hình viêm gan nh° PAR, carbon tetrachloride, D-galactosamin, erythromycin estolat, aflatoxin B, thioacetamid TÃt cÁ các mô hình trên đều đã đ°ợc chāng minh rõ ràng về c¡ chế gây tổn th°¡ng gan, việc lựa chán mô hình nào tùy thuác vào mục tiêu và điều kiện nghiên cāu thực tế

1.3.2.1 Mô hình gây viêm gan bằng tác nhân carbon tetraclorid

Gây tổn th°¡ng gan do carbon tetraclorid (CCl¤) là mát mô hình rÃt cổ điển đ°ợc sử dụng ráng rãi để sàng lác thuác bÁo vệ gan Mô hình gây viêm gan bằng CCl¤ đ°ợc tiến hành trên nhiều đáng vật nh° chuát nhắt, chuát cáng, thß [55]