1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học

57 1 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Tiêu đề Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn Bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men Natto
Tác giả Hoàng Thị Lan Thương, Mai Thành Luân, Nguyễn Thị Mai, Nghiêm Thị Hương, Phạm Thị Thanh Bình
Trường học Trường Đại học Hồng Đức
Chuyên ngành Nông Lâm Ngư Nghiệp
Thể loại Báo cáo tổng kết đề tài nghiên cứu khoa học cấp cơ sở
Năm xuất bản 2023
Thành phố Thanh Hóa
Định dạng
Số trang 57
Dung lượng 1,64 MB

Cấu trúc

  • 1. Thông tin chung (9)
  • 2. Mục tiêu đề tài (9)
  • 3. Đóng góp mới của đề tài (9)
  • 4. Kết quả nghiên cứu (9)
  • 5. Sản phẩm của đề tài (10)
  • 6. Hiệu quả, phương thức chuyển giao và khả năng ứng dụng (11)
  • MỞ ĐẦU (12)
    • 1. Tính cấp thiết của để tài (12)
    • 3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài (13)
    • 4. Đóng góp mới của đề tài (14)
    • Chương 1. TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU (15)
      • 1.1. Tổng quan tình hình nghiên cứu (15)
        • 1.1.1. Giới thiệu về chi Bacillus và ứng dụng trong lên men thực phẩm (15)
        • 1.1.2. Nghiên cứu vai trò của sản phẩm Natto đối với sức khỏe con người (16)
    • Chương 2. ĐỐI TƯỢNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU (20)
      • 2.1. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu (20)
        • 2.1.1. Đối tƣợng nghiên cứu (0)
        • 2.1.2. Phạm vi nghiên cứu (20)
      • 2.2. Nội dung nghiên cứu (20)
      • 2.3. Phương pháp nghiên cứu (20)
        • 2.3.1. Phương pháp phân lập và làm thuần vi khuẩn Bacillus subtilis từ men (20)
        • 2.3.3. Phương pháp định danh xác định loài vi khuẩn Bacillus subtilis (22)
        • 2.3.4. Phương pháp bố trí thí nghiệm xác định yếu tố môi trường nuôi cấy thích hợp với khả năng nhân nhanh sinh khối của loài vi khuẩn Bacillus subtilis (23)
        • 2.3.5. Phương pháp bố trí thí nghiệm xác định các điều kiện tối ưu để lên men đậu tương sản xuất Natto (26)
        • 2.3.6. Phương pháp xác định mật độ vi khuẩn (27)
        • 2.3.7. Phương pháp nhuộm Gram vi khuẩn (28)
        • 2.3.8. Phương pháp xử lý số liệu (28)
        • 2.3.9. Tiêu chuẩn cơ sở đối với thực phẩm lên men Natto-HDU (29)
    • CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN (31)
      • 3.1. Phân lập và làm thuần loài vi khuẩn lên men đậu tương tạo sản phẩm Natto (31)
        • 3.1.1. Hình thái và đặc điểm của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 phân lập đƣợc (31)
      • 3.2. Định danh vi khuẩn BL-3 dựa vào giải trình tự 16S rRNA (32)
      • 3.3. Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân nhanh sinh khối loài vi khuẩn (33)
        • 3.3.1. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến khả năng nhân nhanh sinh khối của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 (33)
        • 3.3.2. Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy đến khả năng nhân nhanh sinh khối của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 (35)
        • 3.3.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy đến khả năng nhân nhanh sinh khối của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 (36)
  • TÀI LIỆU THAM KHẢO (53)

Nội dung

Trang 1 TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC KHOA NÔNG LÂM NGƢ NGHIỆP BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH SINH KHỐI

Thông tin chung

- Tên đề tài: “Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn Bacillus subtilis var natto, sử dụng tạo sản phẩm lên men Natto tại trường Đại học Hồng Đức”

- Thời gian thực hiện: 12 tháng, từ tháng 12/2021 – 12/2022

- Cơ quan quản lý đề tài: Trường Đại học Hồng Đức

- Cơ quan chủ trì đề tài: Khoa Nông Lâm Ngƣ nghiệp

- Chủ nhiệm đề tài: Th.S Hoàng Thị Lan Thương

- Đơn vị công tác: Bộ môn Khoa học Cây trồng, Khoa Nông Lâm Ngƣ nghiệp

- Điện thoại: 0978784686; Email: hoangthilanthuong@hdu.edu.vn

Mục tiêu đề tài

- Phân lập, làm thuần và đề xuất quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn

Bacillus subtilis sử dụng sản xuất thực phẩm Natto

- Xây dựng đƣợc quy trình sản xuất thử nghiệm quy mô phòng thí nghiệm thực phẩm Natto từ nguồn vi sinh tuyển chọn đƣợc.

Đóng góp mới của đề tài

Phân lập, làm thuần và sử dụng chủng vi sinh vật Bacillus subtilis để sản xuất thực phẩm lên men đậu tương Natto, một trong những thực phẩm lên men đƣợc sử dụng lâu đời và phổ biến ở Nhật Bản Sản phẩm đƣợc chứng minh tác dụng tốt đến sức khỏe con người, nâng cao sức đề kháng trước các bệnh cảm cúm, cải thiện hệ tiêu hóa và giảm thiểu nguy cơ mắc bệnh đột quỵ.

Kết quả nghiên cứu

Vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 đƣợc phân lập từ men vi sinh lên men

Natto và từ đậu tương lên men, có hình que, Gram (+), hình thành bào tử sau 72 giờ nuôi cấy trên môi trường King’s B Khuẩn lạc có hình tròn, màu trắng sữa, mặt hơi gồ ghề, có mép răng cưa, đường kính của khuẩn lạc từ 3-11 mm sau 48 giờ nuôi cấy ở điều kiện nhiệt độ 30 o C Hình dạng khuẩn lạc khá tương đồng với chi Bacillus

- Kết quả định danh bằng phương pháp giải trình tự DNA cho thấy, loài vi khuẩn phân lập đƣợc đƣợc xác định là loài vi khuẩn Bacillus subtilis

Các kết quả thí nghiệm nhân nhanh sinh khối loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 phân lập cho thấy, môi trường King’s B hoặc Luria-Bertani (LB) hoàn toàn có thể sử dụng làm môi trường nhân nhanh sinh khối loài vi khuẩn này Nhiệt độ thích hợp cho việc nhân nuôi loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 từ 35-38 o C, thời gian nuôi 48 giờ trong điều kiện tối, trên máy lắc 120 vòng/ phút Mật độ khuẩn lạc của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 đạt trên 1x10 9 cfu/ml, hoàn toàn có thể sử dụng làm men vi sinh ở dạng nước và dạng rắn điều chỉnh mật độ khuẩn lạc phù hợp để phục vụ sản xuất đậu tương lên men Natto

Các kết quả thí nghiệm lên men đậu tương từ nguồn men vi khuẩn

Bacillus subtilis BL-3 cho thấy, sử dụng liều lượng men 1ml/ 100g đậu tương với mật độ vi khuẩn 1x10 6 cfu/ml ở điều kiện nhiệt độ 39 o C trong thời gian 20-

24 giờ là những điều kiện thích hợp để lên men đậu tương tạo thành phẩm Natto.

Sản phẩm của đề tài

- Báo cáo khoa học tổng kết đề tài

- 01 bài báo đăng tạp chí chuyên ngành ghi danh trường Đại học Hồng Đức

- Vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 thuần sử dụng lên men tạo sản phẩm

- Quy trình nhân nhanh sinh khối tạo men vi sinh từ nguồn vi khuẩn

- Quy trình cơ sở sản xuất thực phẩm Natto từ nguồn men sản xuất

- Sản phẩm nghiên cứu phục vụ đào tạo:

- Hướng dẫn sinh viên nghiên cứu khoa học đạt giải nhất toàn trường, đƣợc chọn gửi đi thi đề tài nghiên cứu khoa học sinh viên cấp Bộ.

Hiệu quả, phương thức chuyển giao và khả năng ứng dụng

* Hiệu quả của đề tài:

- Đề tài phân lập và làm thuần chủng vi khuẩn Bacillus subtilis có khả năng lên men trên đậu tương thành thực phẩm lên men Natto giúp nâng cao giá trị hạt đậu tương sau thu hoạch (tăng khoảng 25-30 lần), góp phần vào chuỗi chế biến và bảo quản sau thu hoạch cho nông sản Việt Nam

- Giúp người Việt Nam tiếp cận được những sản phẩm lên men tốt cho sức khỏe đã và đang được người Nhật Bản sử dụng phổ biến, góp phần tăng cường giao lưu văn hóa ẩm thực Việt-Nhật

- Đề tài cũng xây dựng ra quy trình cơ sở sản xuất men vi sinh lên men Natto cung cấp tới các đơn vị sản xuất có nhu cầu sản xuất thực phẩm này trên địa bàn cả nước

- Đề tài xây dựng ra quy trình cơ sở sản xuất thực phẩm lên men Natto quy mô phòng thí nghiệm nhằm đáp ứng nhu cầu về sản phẩm tốt cho sức khỏe trên thị trường hiện nay.

* Phương thức chuyển giao của đề tài:

- Kết quả nghiên cứu của đề tài đƣợc công bố trong Báo cáo tổng kết và Bài báo khoa học đăng trên tạp chí trong nước bằng tiếng Việt, có thể sử dụng nhƣ tài liệu tham khảo cho các nghiên cứu và ứng dụng khác.

Ngày đăng: 27/03/2024, 09:07

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
[1] Chantawannakul P., Oncharoena A., Klanbuta K., Chukeatiroteb E. and Lumyonga S. Characterization of proteases of Bacillus subtilis strain 38 isolated from traditionally fermented soybean in Northern Thailand Sách, tạp chí
Tiêu đề: Bacillus subtilis
[2] Holsworth, D. R. E, Nattokinase and Cardiovascular Health [Report]. H30. New Mexico. [Accessed 19 July, 2013] Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nattokinase and Cardiovascular Health
[3] Hosoi T. and K. Kiuchi, Natto - a food made by fermenting cooked soybeans with Bacillus subtilis (Natto). In E. R. Farnworth (Ed.), Handbook of fermented functional foods (pp. 227–245). New York, NY:CRC Press, 2003 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Natto - a food made by fermenting cooked soybeans with Bacillus subtilis (Natto)
[8] Parte A.C., LPSN--list of prokaryotic names with standing in nomenclature. Nucleic Acids Res 42: D613-616, 2014 Sách, tạp chí
Tiêu đề: LPSN--list of prokaryotic names with standing in nomenclature
[10] Phƣợng L.T.B., V.T. Hạnh, T.T. Phong, L.T. Hƣng, T.T.H. Vân, L.T. Hương. Phân lập và tuyển chọn một số chủng Bacillus sinh tổng hợp Nattokinase. Tạp chí sinh học, 34 (3SE): 99-104, 2012 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Phân lập và tuyển chọn một số chủng Bacillus sinh tổng hợp Nattokinase
[11] Radhakrishnan R., A. Hashem and F. Abd_Allah Elsayed, Bacillus: A Biological Tool for Crop Improvement through Bio-Molecular Changes in Adverse Environments. Front. Physiol. 8:667. doi:10.3389/fphys.2017.00667, 2017 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Bacillus: A Biological Tool for Crop Improvement through Bio-Molecular Changes in Adverse Environments. Front
[4] Kanintra S. and H. Pao-Chuan, Isolating Bacillus subtilis and optimizing its fermentative medium for GABA and Nattokinase production. CyTA – Journal of Food, 2014, Vol. 12, No. 3, 282–290,http://dx.doi.org/10.1080/19476337.2013.848472 Link
[5] Lan Nguyen Viet, et al. Study on disease patterns in inpatient patients at Vietnam Heart Institute during 2003-2007. Vietnam Cardiol 2010 2010;(52):11–8, http://vnha.org.vn/tapchi/Tap-chi-tim-mach-so-52.pdf[6] Mami Oba, Wen Rongduo, Akatsuki Saito, Tamaki Okabayashi, Tomoko Link
[14] Sumi, H., Hamada, H., Nakanishi, N., & Hiratani, H. (1990). Enhancement of fibrinolytic activity in plasma by oral administration of Nattokinase. Acta Haematology, 84, 139–143.https://doi.org/10.1159/000205051 Link
[7] Meruvu H., Vangalapati M., 2011. Nattokinase: A Review on Fibrinolytic Enzyme, International Journal of Chemical, Environmental and Pharmaceutical Research, 2(1): 61-66 Khác
[12] Shouyong J., C. Zhilin, W. Christina, L. Yangyang, F.F. Mohamed, Z. Zhenyu and L. Jinshan, Isolation and optimal fermentation condition of the Bacillus subtilis Subsp. Natto strain WTC016 for Nattokinase production. Fermentation 2019, 5, 92; doi:10.3390/fermentation5040092 Khác
[13] Shrestha, A. K., Dahal, N. R., & Ndungutse, V. (2010). Bacillus fermentation of soybean: A review. Journal of Food Science and Technology Nepal, 6, 1–9 Khác
[15] Sumi, H., Hamada, H., Tsushima, H., Mihara, H., & Muriki, H. (1987). A novel fibrinolytic enzyme (Nattokinase) in the vegetable cheese Natto: a typical and popular soybean food in the Japanese diet. Experientia, 43 (10), 1110-1111 Khác
[16] Sumi, H.; Imai, M.; Naito, S.; Yatagai, C.; Yanagisawa, Y.; Yoshida, E. Nattokinase as thermally stable and broad spectrum enzyme. J. Thromb.Haemost. 2010, 8, 62 Khác

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Sơ đồ bố trí thí nghiệm nhƣ sau: - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Sơ đồ b ố trí thí nghiệm nhƣ sau: (Trang 25)
3.1.1. Hình thái và đặc điểm của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 phân lập được - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
3.1.1. Hình thái và đặc điểm của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 phân lập được (Trang 31)
Hình 3.1.2. Tế bào Gram dương của vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 dưới kính - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.1.2. Tế bào Gram dương của vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 dưới kính (Trang 32)
Hình 3.1.3. Định danh vi khuẩn phân lập Bacillus subtilis BL-3  bằng phương  pháp giải trình tự gen 16S rRNA - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.1.3. Định danh vi khuẩn phân lập Bacillus subtilis BL-3 bằng phương pháp giải trình tự gen 16S rRNA (Trang 33)
Hình 3.3.1. Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy tới khả năng nhân nhanh sinh khối  của vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.3.1. Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy tới khả năng nhân nhanh sinh khối của vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 (Trang 35)
Hình 3.3.2. Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy tới khả năng nhân nhanh sinh  khối của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 trên môi trường King’s B lỏng - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.3.2. Ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy tới khả năng nhân nhanh sinh khối của loài vi khuẩn Bacillus subtilis BL-3 trên môi trường King’s B lỏng (Trang 36)
Bảng 3.3.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy tới khả năng nhân nhanh sinh - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Bảng 3.3.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy tới khả năng nhân nhanh sinh (Trang 37)
Hình 3.3.4. Tóm tắt quy trình kỹ thuật nhân nuôi sinh khối loài vi khuẩn - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.3.4. Tóm tắt quy trình kỹ thuật nhân nuôi sinh khối loài vi khuẩn (Trang 38)
Bảng 3.4.1. Ảnh hưởng của mật độ đến quá trình lên men đậu tương - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Bảng 3.4.1. Ảnh hưởng của mật độ đến quá trình lên men đậu tương (Trang 42)
Hình 3.4.1. Ảnh hưởng của nồng độ đến quá trình lên men đậu tương - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.4.1. Ảnh hưởng của nồng độ đến quá trình lên men đậu tương (Trang 43)
Bảng 3.4.2. Ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến quá trình lên men - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Bảng 3.4.2. Ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến quá trình lên men (Trang 44)
Hình 3.4.2 Thí nghiệm ảnh hưởng của nồng độ đến quá trình lên men - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.4.2 Thí nghiệm ảnh hưởng của nồng độ đến quá trình lên men (Trang 44)
Hình 3.4.4. Thí nghiệm ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến quá trình lên - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.4.4. Thí nghiệm ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến quá trình lên (Trang 45)
Hình 3.4.3 Ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến quá trình lên men đậu tương  Đối với cả 3 liều lƣợng men sử dụng, nhìn chung mật độ vi khuẩn trong  sản phẩm đều xấp xỉ đạt 10 9  cfu/g trở lên, lớp bọc vi khuẩn phía trên bề mặt giá  thể đậu tương trắng, đ - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.4.3 Ảnh hưởng của liều lượng vi khuẩn đến quá trình lên men đậu tương Đối với cả 3 liều lƣợng men sử dụng, nhìn chung mật độ vi khuẩn trong sản phẩm đều xấp xỉ đạt 10 9 cfu/g trở lên, lớp bọc vi khuẩn phía trên bề mặt giá thể đậu tương trắng, đ (Trang 45)
Hình 3.4.5. Ảnh hưởng của nhiệt độ ủ đến quá trình lên men - Nghiên cứu phân lập, tuyển chọn và xây dựng quy trình nhân nhanh sinh khối vi khuẩn bacillus subtilis var natto sử dụng tạo sản phẩm lên men natto tại trường đại học
Hình 3.4.5. Ảnh hưởng của nhiệt độ ủ đến quá trình lên men (Trang 46)

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w