Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên GiangNghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của một số loài thực vật tại tỉnh Kiên Giang
BÞ GIÁO DĀC VÀ ĐÀO T¾O TR¯âNG Đ¾I HàC CÄN TH¡ HUþNH KIM Y¾N NGHIÊN CĄU THÀNH PHÄN HÓA HàC VÀ HO¾T TÍNH SINH HàC CĂA MÞT Sà THĂC VÂT T¾I TäNH KIÊN GIANG LUÂN ÁN TI¾N S) CÂP TR¯âNG CHUYÊN NGÀNH: HÓA HĀU C¡ Mà Sà: 9440114 NM 2024 BÞ GIÁO DĀC VÀ ĐÀO T¾O TR¯âNG Đ¾I HàC CÄN TH¡ HUþNH KIM Y¾N Mà Sà NCS: P1719001 NGHIÊN CĄU THÀNH PHÄN HÓA HàC VÀ HO¾T TÍNH SINH HàC CĂA MÞT Sà THĂC VÂT T¾I TäNH KIÊN GIANG LUÂN ÁN TI¾N S) CÂP TR¯âNG CHUYÊN NGÀNH: HÓA HĀU C¡ Mà Sà: 9440114 NG¯âI H¯àNG DÀN PGS TS NGUYàN TRàNG TUÂN PGS TS TRÄN THANH M¾N NM 2024 LâI CÀM ¡N Trong suát quá trình thăc hián luÁn án, tôi đã học hßi thêm đ°ÿc rÃt nhiÃu kiÁn thąc, kinh nghiám và kỹ năng chuyên môn từ Quý Thầy Cô Vái tÃm lòng trân trọng và biÁt ¢n sâu sÃc, tôi xin gÿi lãi cÁm ¢n đÁn: Thầy PGS.TS Nguyßn Trọng Tuân và PGS.TS Trần Thanh MÁn đã dành nhiÃu thãi gian, công sąc và tÁn tình h°áng d¿n tôi trong thãi gian thăc hián luÁn án và theo học t¿i tr°ãng Xin đ°ÿc gÿi lãi cÁm ¢n đÁn Cô PGS.TS Bùi Thị Bÿu Huê, Thầy TS Lê Thanh Ph°ác, Cô PGS.TS Tôn Nā Liên H°¢ng, Cô PGS.TS Đái Thị Xuân Trang, Thầy PGS.TS Ngô Thanh Phong, Thầy TS Trần Quang Đá, đã giÁng d¿y và truyÃn đ¿t kinh nghiám quý báu cho tôi hoàn thành các học phần Xin đ°ÿc gÿi lãi cÁm ¢n đÁn TS Nguyßn Quác Châu Thanh đã hỗ trÿ nhiát tình và chia s¿ nhāng kinh nghiám quý báu trong quá trình học tÁp Đßng thãi, tôi xin cÁm ¢n toàn thể Thầy Cô Khoa Khoa học Tă nhiên, tr°ãng Đ¿i học Cần Th¢, đã giúp đỡ và t¿o điÃu kián thuÁn lÿi để tôi có thể hoàn thành nghiên cąu Bên c¿nh đó, tôi xin cÁm ¢n chân thành đÁn ThS.Tr°¢ng Thị Tú Trân, TS Ngô Trọng Nghĩa và các Thầy Cô Khoa Nông Nghiáp và Phát triển Nông Thôn, Tr°ãng Đ¿i học Kiên Giang đã chia sẻ công viác và luôn t¿o điÃu kián thuÁn lÿi cho tôi yên tâm hoàn thành luÁn án Chân thành cÁm ¢n các em ThS Triáu Phú HÁu, ThS Mã Hāu Đ¿t, ThS Cháng Kim Thiên Đąc và các em sinh viên láp Hóa d°ÿc K43, K44, K45, K46 đã đßng hành cùng tôi trong quá trình nghiên cąu và thăc hián luÁn án Kính gÿi lòng biÁt ¢n sâu sÃc đÁn Cha, Mẹ đã sinh thành và nuôi d¿y con khôn lán nh° ngày nay CÁm ¢n Chßng và con gái luôn t¿o niÃm tin giúp tôi v°ÿt qua khó khăn để hoàn thành °ác m¢ căa mình Sau cùng, gÿi lãi yêu th°¢ng nhÃt đÁn các thành viên trong gia đình luôn giúp đỡ, ăng hß, đßng viên tôi rÃt nhiÃu trong suát thãi gian học tÁp Xin chân thành cÁm ¢n./ Cần thơ, ngày 22 tháng 02 năm 2024 Nghiên cąu sinh Huÿnh Kim Y¿n i TÓM TÄT Kiên Giang có há sinh thái đa d¿ng vái nhiÃu loài thăc vÁt đ°ÿc sÿ dāng làm thuác Trong nghiên cąu này, 23 loài thăc vÁt thu hái t¿i mßt sá huyán căa tỉnh Kiên Giang đ°ÿc ngâm chiÁt vái dung môi ethanol 96○ Các cao chiÁt ethanol đ°ÿc tiÁn hành đánh giá ho¿t tính kháng oxi hóa in vitro để chọn lăa loài thăc vÁt có ho¿t tính m¿nh KÁt quÁ sàng lọc cho thÃy cây Lý (Syzygium jambos), Luân thùy cambot (Spirolobium cambodianum) và Chùm đuông (Sphaerocoryne affinis) có ho¿t tính kháng oxi hóa m¿nh å bán ph°¢ng pháp thÿ nghiám là DPPH, ABTS●+, RP và TAC vái giá trị EC50 trong khoÁng 4,89 ‒ 46,33 µg/mL T°¢ng tă, ba loài thăc vÁt này cũng thể hián ho¿t tính kháng khuẩn m¿nh vái giá trị MIC trong khoÁng 80 ‒ 640 µg/mL và hàm l°ÿng táng polyphenol 570,36 ‒ 857,24 mg GAE/g cao chiÁt, hàm l°ÿng flavonoid 413,18 ‒ 798,71 mg QE/g cao chiÁt Vì vÁy, chúng đ°ÿc chọn để tiÁp tāc nghiên cąu thêm thành phần hóa học và ho¿t tính sinh học Từ lá Lý (S jambos) đã phân lÁp đ°ÿc 10 hÿp chÃt tinh khiÁt gßm stigmasterol (SJ1), 5((8'Z,11'Z,14'Z)-heptadeca-8',11',14'-trien-1-yl) benzene-1,3-diol (SJ2), β- sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (SJ3), quercetin (SJ4), 2-phenyl-4H-chromen-4- one (SJ5), myricetin (SJ6), gallic acid (SJ7), caffeic acid (SJ8), chavicol β-D- glucopyranoside (SJ9), rutin (SJ10) Trong đó ba hÿp chÃt gßm SJ2 , SJ5, SJ9 lần đầu tiên phân lÁp từ loài thăc vÁt này Các cao chiÁt và mßt sá hÿp chÃt nh° gallic acid, caffeic acid, quercetin, myricetin từ lá cây Lý (S jambos) đ°ÿc đánh giá ho¿t tính cháng stress oxi hóa trên tÁ bào đ¿i thăc bào RAW264.7 KÁt quÁ cho thÃy cao chiÁt ethyl acetate và các hÿp chÃt có khÁ năng tăng c°ãng să biểu hián căa gen kháng oxi hóa, thông qua viác thúc đẩy con đ°ãng truyÃn tín hiáu Nrf2/HO-1 Ngoài ra, hÿp chÃt myricetin, quercetin cũng thể hián ho¿t tính kháng oxi hóa m¿nh å ph°¢ng pháp DPPH, ABTS●+ vái giá trị EC50 trong khoÁng 2,67 ‒ 30,53 µg/mL Từ lá Luân thùy cambot (S cambodianum) đã phân lÁp đ°ÿc 10 hÿp chÃt tinh khiÁt gßm 27-p-Z-coumaroyloxyursolic acid (SC1), lupeol (SC2), p-hydroxybenzoic acid (SC3), ursolic acid (SC4), tectoquinone (SC5), daucosterol (SC6), asiatic acid (SC7), 1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3S,4R,9Z)-2-[(2'R)-2'-hydroxytetracosanoylamino]- octadec-9-en-1,3,4-triol (SC9), naringenin (SC8), quercetin (SC10) Đặc biát, các hÿp chÃt này lần đầu tiên đ°ÿc phân lÁp trong chi Spirolobium Ngoài ra, cao chiÁt ethanol từ lá cây Luân thùy cambot thể hián ho¿t tính cháng stress oxi hóa in vivo trên mô hình rußi giÃm vì thąc ăn bá sung cao chiÁt làm tăng tuái thọ căa rußi giÃm Bên c¿nh đó, các hÿp chÃt SC2, SC4, SC7 kháng khuẩn Streptococcus agalactiae, Aeromonas hydrophila, Aeromonas dhakensis, Edwardsiella ictaluri vái giá trị MIC là 25 ‒ 1500 µ g/mL Từ trái Chùm đuông (S affinis) đã phân lÁp đ°ÿc 6 hÿp chÃt tinh khiÁt gßm pinocembrin (SA1), naringenin (SA2), p-coumaric acid (SA3), caffeic acid (SA4), 5- (E)-caffeoylquinic acid (SA5), 5-O-p-coumaroylquinic acid methyl este (SA6) T°¢ng ii tă, từ lá Chùm đuông (S affinis) đã phân lÁp đ°ÿc 7 hÿp chÃt tinh khiÁt gßm allantoin (SAL1), (+)-catechin (SAL2), apigenin (SAL3), rutin (SAL4), isatin (SAL5), 3- hydroxy-3-(2-oxopropyl)indolin-2-one (SAL6), nicotiflorin (SAL7) Trong đó, 11 hÿp chÃt này lần đầu tiên đ°ÿc phân lÁp trong chi Sphaerocoryne là SA2, SA3, SA4, SA5, SA6, SAL1, SAL3, SAL4, SAL5, SAL6, SAL7 Bên c¿nh đó, cao chiÁt ethanol từ lá và trái Chùm đuông đ°ÿc đánh giá ho¿t tính stress oxi hóa in vivo (trong điÃu kián stress oxi hóa do hydrogen peroxide 10% và paraquat 20 mM) KÁt quÁ cho thÃy tuái thọ căa rußi giÃm nuôi trong môi tr°ãng bá sung cao chiÁt đ°ÿc kéo dài h¢n so vái môi tr°ãng đái chąng Các kÁt quÁ nghiên cąu này góp phần cung cÃp thêm c¢ så khoa học cho các nghiên cąu sâu h¢n để t¿o ra các sÁn phẩm ąng dāng trong lĩnh văc hóa d°ÿc Từ đó cung cÃp c¢ så khoa học định h°áng cho viác khai thác sÿ dāng và bÁo tßn ngußn tài nguyên thăc vÁt mßt cách hÿp lý iii ABSTRACT Kien Giang province, Vietnam, has a diverse ecosystem with many plant species used as medicine In this study, 23 plant species collected in this province were extracted by using ethanol 96○ The extracts were evaluated for in vitro antioxidant activity to select plant species with strong antioxidant activity The results showed that the extract of Syzygium jambos, Spirolobium cambodianum and Sphaerocoryne affinis had strong antioxidant activities in four assays (DPPH, ABTS●+, RP and TAC) with EC50 values of 4.89 ‒ 46.33 µg/mL Similarly, these extracts also showed strong antibacterial activity (Streptococcus agalactiae, Aeromonas hydrophila, Aeromonas dhakensis, Edwardsiella ictaluri) with MIC values in the range of 80 ‒ 640 µg/mL Total polyphenol and flavonoid content of these extracts were 570.36 ‒ 857.24 mg GAE/g extract and 413.18 ‒ 798.71 mg QE/g extract, respectively Therefore, they were selected for further research on their chemical composition and biological activities Ten compounds have been isolated from S jambos leaves including stigmasterol (SJ1), 5((8'Z,11'Z,14'Z)-heptadeca-8',11',14'-trien-1-yl) benzene-1,3-diol (SJ2), β- sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (SJ3), quercetin (SJ4), 2-phenyl-4H-chromen-4- one (SJ5), myricetin (SJ6), gallic acid (SJ7), caffeic acid (SJ8), chavicol β-D- glucopyranoside (SJ9), rutin (SJ10) Three compounds, namely 5((8'Z,11'Z,14'Z)- heptadeca-8',11',14'-trien-1-yl) benzene-1,3-diol (SJ2), 2-phenyl-4H-chromen-4-one (SJ5), chavicol β-D-glucopyranoside (SJ9) were isolated for the first time from this plant species Extracts (ethanol and ethyl acetate extract from leaves) and some compounds from S jambos leaves, namely quercetin (SJ4), myricetin (SJ6), gallic acid (SJ7) and caffeic acid (SJ8), were evaluated for their anti-oxidative stress activity on RAW264.7 macrophage cells The results showed that ethyl acetate extract and all compounds had the ability to enhance the expression of antioxidant genes, through promoting the Nrf2/HO-1 signaling pathway In addition, myricetin and quercetin compounds also showed strong antioxidant activity in DPPH and ABTS●+ assays with EC50 values of 2.67 ‒ 30.53 µg/mL Ten compounds have been isolated from S cambodianum leaves including p-Z- coumaroyloxyursolic acid (SC1), lupeol (SC2), p-hydroxybenzoic acid (SC3), ursolic acid (SC4), tectoquinone (SC5), daucosterol (SC6), asiatic acid (SC7), 1-O-β-D- glucopyranosyl-(2S,3S,4R,9Z)-2-[(2'R)-2'-hydroxytetracosanoylamino]-octadec-9-en- 1,3,4-triol (SC9), naringenin (SC8), quercetin (SC10) Interestingly, all of these compounds were isolated for the first time in Spirolobium genus Ethanol extract from S cambodianum leaves showed anti-oxidative stress activity in vivo in a fruit fly model Lupeol (SC2), ursolic acid (SC4) and asiatic acid (SC7) were antibacterial against Streptococcus agalactiae, Aeromonas hydrophila, Aeromonas dhakensis, Edwardsiella ictaluri with MIC values of 25 ‒ 1500 µg/mL Six compounds have been isolated from S affinis fruits including pinocembrin (SA1), naringenin (SA2), p-coumaric acid (SA3), caffeic acid (SA4), 5-(E)- iv caffeoylquinic acid (SA5), 5-O-p-coumaroylquinic acid methyl este (SA6) Seven compounds were isolated from S affinis leaves including allantoin (SAL1), (+)-catechin (SAL2), apigenin (SAL3), rutin (SAL4), isatin (SAL5), 3-hydroxy-3-(2- oxopropyl)indolin-2-one (SAL6), nicotiflorin (SAL7) There were 11 compounds, namely SA2, SA3, SA4, SA5, SA6, SAL1, SAL3, SAL4, SAL5, SAL6 and SAL7, were isolated for the first time in Sphaerocoryne genus Ethanol extracts from S affinis leaves and fruits were evaluated for oxidative stress activity in vivo using fruit fly model The results showed that the lifespan of fruit flies increased in the treatments supplemented with the extracts as compared the control one (without the extracts) The results obtained from this study provide scientific information for further research and development of products to improve human health In addition, it provides a scientific basis to guide the reasonable exploitation, use and conservation of natural plant resources v MĀC LĀC LâI CÀM ¡N - i TÓM TÂT - ii ABSTRACT iv LâI CAM ĐOAN vi DANH SÁCH BÀNG xii DANH SÁCH HÌNH xiv DANH MĀC CÁC KÝ HIàU, CHĀ VIÀT TÂT xvii CH¯¡NG 1 GIàI THIàU 1 1.1 Đặt vÃn đà -1 1.2 Māc tiêu căa luÁn án -2 1.3 Nßi dung nghiên cąu -2 1.4 Ph¿m vi và đái t°ÿng nghiên cąu 2 1.4.1 Đái t°ÿng nghiên cąu -2 1.4.2 Ph¿m vi nghiên cąu 3 1.5 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thăc tiển căa nghiên cąu -3 1.5.1 Ý nghĩa khoa học -3 1.5.1 Ý nghĩa thăc tißn -3 1.6 Tính mái căa luÁn án -4 CH¯¡NG 2 TàNG QUAN TÀI LIàU -5 2.1 Mßt sá loài thăc vÁt đ°ÿc sÿ dāng trong nghiên cąu sàng lọc -5 2.1.1 Acanthus ebracteatus (Ô rô) 6 2.1.2 Acorus calamus (Thăy x°¢ng bß) -7 2.1.3 Ananas comosus (Khóm) 8 2.1.4 Artemisia vulgaris (NgÁi cąu) 9 2.1.5 Bidens pilosa (XuyÁn chi) 9 2.1.6 Costus speciosus (Cát lßi) - 10 2.1.7 Combretum quadrangulare (Trâm bầu) - 11 2.1.8 Glycosmis citrifolia (B°åi bung) - 11 2.1.9 Lumnitzera littorea (Cóc đß) - 12 2.1.10 Lumnitzera racemosa (Cóc trÃng) 13 2.1.11 Lycopodiella cenua (Thông đÃt) 14 2.1.12 Marsilea quadrifolia (Rau bÿ) 14 2.1.13 Mimosa pigra (Mai d°¢ng) - 15 vii 2.1.14 Pandanus tectorius (Dąa gai) - 16 2.1.15 Pistia stratiotes (Bèo cái) 16 2.1.16 Pouzolzia zeylanica (Bọ mÃm) - 17 2.1.17 Rhizophora apiculata (Đ°ác đôi) 18 2.1.18 Senna alata (Mußng trâu) - 18 2.1.19 Stachytarpheta jamaicensis (Đuôi chußt) - 19 2.1.20 Volkameria inermis (Ngọc nā biển) 19 2.2 Táng quan và chi Syzygium và loài Syzygium jambos - 20 2.2.1 Giái thiáu và chi Syzygium 20 2.2.2 Táng quan và Syzygium jambos 29 2.3.1 Giái thiáu và chi Spirolobium 34 2.3.2 Táng quan và Spirolobium cambodianum 35 2.4 Táng quan và chi Sphaerocoryne và loài Sphaerocoryne affinis 36 2.4.1 Giái thiáu và chi Sphaerocoryne - 36 2.4.2 Táng quan và Sphaerocoryne affinis 39 2.5 Rußi giÃm và sÿ dāng mô hình rußi giÃm trong nghiên cąu khoa học 46 2.5.1 Rußi giÃm - 46 2.5.2 Sÿ dāng mô hình rußi giÃm trong nghiên cąu khoa học 48 2.6 Táng quan và tình hình sÿ dāng thăc vÁt trong thăy sÁn - 49 2.6.1 Mßt sá vi khuẩn gây bánh trên đßng vÁt thăy sÁn - 49 2.6.2 Tình hình nghiên cąu sÿ dāng thăc vÁt trong điÃu trị bánh cho đßng vÁt thăy sÁn - 50 2.7 Táng quan và kháng oxi hóa 51 2.7.1 Khái quát và gác tă do - 51 2.7.2 ChÃt kháng oxi hóa - 52 2.7.3 Stress oxi hóa - 52 2.7.4 Táng quan và mßt sá mô hình kháng oxi hóa 52 CH¯¡NG 3 PH¯¡NG PHÁP NGHIÊN CĄU VÀ THĂC NGHIàM 56 3.1 Ph°¢ng pháp nghiên cąu 56 3.1.1 M¿u thăc vÁt, hóa chÃt và thiÁt bị 56 3.1.2 Ph°¢ng pháp điÃu chÁ 24 lo¿i cao táng - 57 3.1.3 Ph°¢ng pháp định tính, định l°ÿng thành phần hóa học 57 3.1.4 Ph°¢ng pháp phân lÁp các hÿp chÃt - 59 3.1.5 Ph°¢ng pháp xác định cÃu trúc - 60 3.1.6 Ph°¢ng pháp thÿ nghiám ho¿t tính sinh học - 60 viii