Đánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệmĐánh giá hiệu quả của môi trường đơn bước, đa bước với nồng độ oxy khác nhau tới sự phát triển của phôi và phát sinh chất thải trong thụ tinh ống nghiệm
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Nguyễn Linh Chi ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CỦA MÔI TRƯỜNG ĐƠN BƯỚC, ĐA BƯỚC VỚI NỒNG ĐỘ OXY KHÁC NHAU TỚI SỰ PHÁT TRIỂN CỦA PHÔI VÀ PHÁT SINH CHẤT THẢI TRONG THỤ TINH ỐNG NGHIỆM Chuyên ngành: Khoa học môi trường Mã số: 9440301.01 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ KHOA HỌC MÔI TRƯỜNG Hà Nội – 2024 Cơng trình hồn thành tại: Trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Ngô Thị Tường Châu GS.TS Nguyễn Đình Tảo Phản biện: Phản biện: Phản biện: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ họp Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQGHN vào hồi ngày tháng năm 20 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia Việt Nam; - Trung tâm Thư viện Tri thức số, Đại học Quốc gia Hà Nội MỞ ĐẦU Tính cấp thiết nghiên cứu Theo báo cáo Tổ chức Y tế giới WHO năm 2023, giới người trưởng thành có người vơ sinh Tại Việt Nam, có khoảng 7,7% cặp vợ chồng độ tuổi sinh đẻ bị vô sinh, muộn tỷ lệ tiếp tục gia tăng, nghiên cứu khoa học hỗ trợ sinh sản cần đẩy mạnh Thực chất, để đạt chu kỳ thành công kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm (IVF) phụ thuộc vào nhiều yếu tố, mơi trường ni phơi nồng độ oxy yếu tố ảnh hưởng trực tiếp đến phát triển phôi gây nhiều tranh luận Kết nghiên cứu cho thấy, với điều kiện nuôi phôi khác nhau, mang đến thành cơng ni phơi mơi trường nhân tạo, nhiên có khác tỷ lệ thành công theo giai đoạn phát triển phơi Điều cần thiết phải có thêm nghiên cứu nhằm làm sáng tỏ vấn đề này, đặc biệt nghiên cứu cách hệ thống tổng thể đánh giá kết hợp điều kiện khác (về môi trường đơn bước/đa bước nồng độ oxy 5%/20%) đến phát triển phôi IVF Bên cạnh đó, vấn đề phát sinh chất thải trình thực IVF cần nghiên cứu Hiện nay, phân loại chất thải trở thành nội dung trọng tâm công tác quản lý chất thải y tế Việc phân loại chất thải góp phần giảm thiểu nguy phát tán vi sinh vật gây bệnh tác nhân có độc tính Đồng thời, kết nghiên cứu chất thải giúp cho TTHTSS có phương án thu gom, vận chuyển xử lý chất thải sau IVF cách phù hợp Mục tiêu luận án - Mục tiêu tổng quát: Lựa chọn điều kiện môi trường tối ưu cho phát triển phôi đồng thời giảm thiểu ảnh hưởng (nếu có) việc xả chất thải sau thực kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm (IVF) - Mục tiêu cụ thể: (i) Đánh giá hiệu môi trường nuôi phôi (đơn bước, đa bước) tới giai đoạn phát triển phôi IVF (ii) Đánh giá hiệu nồng độ oxy (5%, 20%) tới phát triển phôi IVF (iii) Đánh giá hiệu đồng thời môi trường nuôi phôi (đơn bước đa bước) với nồng độ oxy khác (5% 20%) tới phát triển phôi IVF (iv) Đánh giá ảnh hưởng môi trường nuôi phôi với nồng độ oxy khác đến phát sinh chất thải IVF Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn luận án - Ý nghĩa khoa học: Kết nghiên cứu luận án góp phần bổ sung sở liệu chứng khoa học hiệu việc sử dụng loại môi trường nuôi phôi (đơn bước đa bước), nồng độ oxy khác (5% 20%) tủ nuôi phôi, hiệu đồng thời việc kết hợp môi trường nuôi (đơn bước đa bước) với nồng độ oxy khác tới phát triển phôi IVF Bên cạnh đó, luận án góp phần cung cấp thông tin ban đầu đặc điểm chất thải phát sinh trình thực IVF - Ý nghĩa thực tiễn: Kết nghiên cứu luận án góp phần định hướng lựa chọn điều kiện nuôi phôi tối ưu cho giai đoạn phát triển phôi, nhằm cải thiện tỷ lệ thành công chu kỳ IVF Đồng thời, luận án sử dụng làm tài liệu tham khảo có giá trị cho TTHTSS, công ty sản xuất môi trường nuôi phôi hệ thống tủ nuôi phôi việc lựa chọn đổi mới, nâng cao sản phẩm chuyên biệt việc nuôi phôi lên giai đoạn phơi nang Ngồi ra, dựa vào kết phân tích đặc điểm chất thải phát sinh IVF, TTHTSS đề xuất thay đổi phương pháp thu gom, lưu giữ, vận chuyển chất thải áp dụng, phù hợp với Quy định quản lý chất thải y tế phạm vi khuôn viên sở y tế Bộ Y tế ban hành (Thông tư số 20/2021/TT-BYT) hạn chế tối đa kinh phí phải trả cho hoạt động Những đóng góp luận án (i) Là cơng trình nghiên cứu Việt Nam đánh giá hiệu đồng thời yếu tố: môi trường nuôi phôi (đơn bước đa bước) nồng độ oxy tủ nuôi phôi (5% 20%), từ lựa chọn điều kiện nuôi phôi tối ưu cho phát triển phôi (ii) Là cơng trình nghiên cứu Việt Nam đánh giá phát sinh chất thải IVF, đồng thời cung cấp sở khoa học cho việc phân loại, thu gom chất thải sau IVF TTHTSS CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái quát phát triển phôi môi trường tự nhiên Sự hình thành phát triển phôi tự nhiên diễn nhờ hormone quan bên người phụ nữ Đầu tiên trứng thụ tinh vị trí 1/3 ngồi vịi trứng, sau hợp tử phơi hình thành di chuyển dần xuống làm tổ buồng tử cung Mỗi giai đoạn phát triển khác nhau, phôi tiếp xúc với hệ môi trường khác (dịch vịi trứng, dịch tử cung) Phơi vào khoang tử cung vào khoảng ngày thứ sau thụ tinh, phơi giai đoạn cuối phơi dâu đầu phơi nang Hình 1.3 Sơ đồ phát triển phôi tiền làm tổ 1.2 Thụ tinh ống nghiệm trình phát triển phôi thụ tinh ống nghiệm Quy trình bao gồm kích thích nang nỗn, chọc hút noãn, cho tinh trùng thụ tinh với noãn ni thành phơi Sau đó, số phơi chuyển trở lại vào buồng tử cung Kỹ thuật thực thành công giới lần năm 1978 thành công lần Việt nam năm 1998 Hình 1.4 Hệ thống ni phơi phịng Labo Hệ thống nuôi phôi bao gồm môi trường nuôi phôi, dụng cụ nuôi, tủ nuôi hệ thống 1.3 Sơ lược tình hình nghiên cứu sử dụng mơi trường đơn bước/đa bước nồng độ oxy 5%/20% IVF 1.3.1 Môi trường đơn bước/đa bước Nghiên cứu Deng cộng (2020) chứng minh phơi ni mơi trường đơn bước có tỷ lệ dị bội cao đáng kể so sánh với môi trường đa bước phụ nữ 38 tuổi Đối với phụ nữ từ 38 tuổi trở lên, khơng có khác biệt tỷ lệ dị bội so sánh hai loại môi trường tỷ lệ hình thành phơi nang cao môi trường đơn bước Tỷ lệ dị bội cao bệnh nhân trẻ tuổi môi trường đơn bước cho thấy thay đổi thành phần môi trường gây thay đổi số lượng gen phôi dị bội giai đoạn phân cắt sớm, sau ảnh hưởng đến hình thành phơi nang Ngồi ra, nghiên cứu Picton (2010) kết luận khác biệt có ý nghĩa phơi bình thường phơi bất thường mặt di truyền vào ngày 2–3 IVF Vì vậy, cần nhiều nghiên cứu cho môi trường đơn bước môi trường đa bước để đạt kết chắn hiệu sử dụng hai loại môi trường 1.3.2 Nồng độ oxy 5% 20% Đã có nghiên cứu ảnh hưởng oxy theo giai đoạn phát triển phôi cho thấy kết gây tranh cãi Nghiên cứu Ciray cộng (2009) tế bào trứng mẹ kết luận nồng độ O2 5% cải thiện đáng kể tổng số phôi nang chất lượng phôi ngày ngày Kea cộng (2007) cho thấy nồng độ oxy khác không ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh, hình thành chất lượng phơi bào, có khác biệt có ý nghĩa thống kê phân loại phôi vào ngày thứ 3, phôi tốt nuôi nồng độ oxy thấp Gần đây, có số nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên đánh giá hiệu nồng độ oxy tới phát triển phơi, điển hình nghiên cứu Herbemont cộng (2021), Yang cộng (2016), Guo cộng (2014) Ciray cộng (2009) cho thấy tỷ lệ phôi phát triển lên ngày ngày khác khơng có ý nghĩa thống kê ni phơi nồng độ oxy 5% 20% 1.4 Sơ lược vấn đề phát sinh quản lý chất thải IVF Hiện nay, IVF phát triển rộng rãi, nhiều trung tâm IVF giới Việt Nam đời Việc sử dụng môi trường nuôi đơn bước hay đa bước tùy vào lựa chọn trung tâm Trong lĩnh vực hỗ trợ sinh sản, chuyên gia tập trung tối ưu hố mơi trường cho phát triển phơi mà chưa có nghiên cứu đề cập đến vấn đề phát sinh chất thải trình thực IVF, chưa đánh giá chất thải tiêu cho trình lựa chọn sản phẩm tối ưu IVF 𝑛: kích thước mẫu (cỡ mẫu); 𝑍𝛼⁄2: Giá trị phân vị 𝛼2 phân phối chuẩn tắc với độ tin cậy 95% (tức 𝛼 = 0,05), nhận 𝑍𝛼⁄2 = −1,962; 𝑝̂: xác suất (tỷ lệ) hình thành phơi nang Theo Hong cộng (2020), tỷ lệ hình thành phơi nang chu kỳ IVF ICSI 56%, lấy 𝑝̂ = 0,56; 𝜀: độ dài khoảng tin cậy, nghiên cứu lấy 𝜀 = 0,05, tương ứng 5% Thay vào công thức ta nhận 𝑛 = 380, cỡ mẫu phôi nghiên cứu tối thiểu 380 phôi 2.3.2 Thiết kế nghiên cứu Sử dụng nghiên cứu tiến cứu mơ tả cắt ngang có so sánh nhóm nghiên cứu theo sơ đồ biểu diễn Hình 2.1 Có thể mơ tả khái qt sau: 1) Lựa chọn bệnh nhân đủ điều kiện: có tuổi phụ nữ < 37 tuổi thời điểm làm IVF, số nội tiết AMH > 1,2 ng/mL số AFC ≥ 05 2) Hợp tử (tạo thành sau kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn) ni mơi trường ni dưỡng (đơn bước/đa bước) tủ nuôi (với nồng độ oxy 5%/20%) theo lựa chọn ngẫu nhiên Sau đó, bệnh nhân tích vào cụ thể phiếu đồng thuận tham gia nghiên cứu: - Sử dụng nồng độ oxy 5% 20% để nuôi phôi theo ngày chẵn ngày lẻ tháng: + Ngày chẵn: phôi nuôi nồng độ oxy cao + Ngày lẻ: phôi nuôi nồng độ oxy thấp - Sử dụng môi trường nuôi phôi đơn bước đa bước để nuôi phôi theo buổi ngày: + Buổi sáng: phôi nuôi môi trường đơn bước + Buổi chiều: phôi nuôi môi trường đa bước Kết nhận nhóm nghiên cứu 3) Đánh giá chất lượng phôi ngày ngày theo đồng thuận Istanbul Lựa chọn phôi nang loại tốt trung bình để sinh thiết mẫu tiến hành sàng lọc phôi, so sánh kết nhóm nghiên cứu 4) Thu gom loại chất thải môi trường nuôi phôi IVF vào ống ly tâm Eppendorf ml tiến hành phân tích thành phần loại chất thải mơi trường nuôi phôi Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 10 2.3.3 Phương pháp đánh giá phôi a) Đánh giá chất lượng phôi giai đoạn phân chia ngày 3: Chất lượng phơi ngày đánh giá dựa vào hình thái phôi theo đồng thuận Istanbul với phân thành loại tốt, trung bình xấu b) Đánh giá phôi giai đoạn phôi phôi ngày 5: Trong đánh giá chất lượng phôi giai đoạn phôi nang (phôi ngày 5), mốc thời gian quan sát tốt thông qua hội thảo đồng thuận Istanbul 116 ± sau ICSI Phôi nang đánh giá dựa vào tiêu chuẩn Istanbul phụ thuộc vào độ phát triển rộng khoang phôi chứa dịch tượng thoát màng Theo hệ thống đánh giá này, ICM TE chia thành loại A, B C dựa vào số lượng gắn kết tế bào, phân loại phơi nang thành loại tốt, trung bình xấu theo phân loại Gardner 2.3.4 Phương pháp thu phân tích mẫu chất thải mơi trường ni phôi IVF - Thu mẫu chất thải môi trường nuôi phôi: sau nuôi phôi ngày ngày 5, chất thải thu gom vào ống Eppendorf 5ml bảo quản lạnh Các lượng loại chất thải môi trường nuôi phôi thu tối thiểu từ 800 phôi để đảm bảo đủ lượng mẫu cần thiết cho việc phân tích thành phần chất thải - Phân tích thành phần chất thải môi trường nuôi phôi: Thành phần chất thải mơi trường ni phơi phân tích hệ thống máy Au5800 (hãng Beckman Coulter) Bệnh viện Quân Y 103, Học viện Quân Y (160 Phùng Hưng, Phúc La, Hà Đông, Hà Nội) Các số phân tích bao gồm Na+ (mmol/); K+ (g/l); 11 Cl- (mmol/l); Mg (mmol/l); Ca toàn phần (mmol/l); P (mmol/l); NH3 (umol/L); protein (g/l); cholesterol (mmol/l); triglyceride (mmol/l); glucose (mmol/l); acid lactic (mmol/l) 2.3.5 Phương pháp thu thập, quản lý, phân tích xử lý số liệu a) Thu thập quản lý số liệu Toàn 341 chu kỳ IVF nhóm nghiên cứu lập hồ sơ có sổ tay nghiên cứu bệnh án nghiên cứu riêng biệt Các số liệu bệnh án nghiên cứu sổ tay nghiên cứu 341 chu kỳ IVF tổng hợp từ bệnh án gốc; sổ theo dõi kết thụ tinh ống nghiệm TTHTSS- Bệnh viện Đa khoa 16A Hà Đơng b) Phân tích xử lý số liệu Tất số liệu thu từ kết nuôi cấy phôi bệnh nhân, sau số hóa phân tích, thống kê, xử lý số liệu phần mềm chuyên dụng Matlab R2021a, phát triển Mathworks (bao gồm liệu mã bệnh nhân, số lượng noãn, số lượng phôi, chất lượng phôi, ghi nhật ký lab thụ tinh ống nghiệm trung tâm) 2.3.6 Khía cạnh đạo đức nghiên cứu Nghiên cứu phê duyệt hội đồng Y đức bệnh viện theo định số: 136 /2019/IRB-16Ahadong vào ngày tháng năm 2019 (Phụ lục 1) Tất số liệu thông tin nghiên cứu luận án tuân thủ yêu cầu nghiêm ngặt sau: - Trong luận án này, tất liệu nghiên cứu lấy từ bệnh nhân với đồng ý tự nguyện tham gia nghiên cứu đối tượng nghiên cứu cho phép sử dụng liệu TTHTSS - Bệnh viện Đa khoa 16A Hà Đông 12 - Tất số liệu thu thập sử dụng cho nghiên cứu thông báo lại cho Trường Bệnh viện - Các quy trình kỹ thuật, thủ tục hành lĩnh vực Hỗ trợ sinh sản tuân thủ nghiêm ngặt theo quy định pháp luật hành, đảm bảo chất lượng, số lượng phôi tốt cho bệnh nhân, đảm bảo không xảy sai sót suốt q trình thụ tinh ống nghiệm bệnh nhân Nghiên cứu không ảnh hưởng tới quy trình điều trị chất lượng phôi bệnh nhân 13 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 3.1 Ảnh hưởng môi trường đơn bước đa bước đến phát triển phôi IVF 3.1.1 Số lượng chất lượng phôi ngày Tỷ lệ phôi loại trung bình nhóm nghiên cứu chiếm cao nhất, 50% tổng số phôi chu kỳ Tỷ lệ phôi nuôi môi trường đơn bước cho kết cao nhóm cịn lại nồng độ oxy Tuy nhiên, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (𝑝 > 0,05) Kết tương tự với kết López-Pelayo cộng (2018), Abdala cộng (2021) cho loại môi trường (đơn bước hay đa bước) không tạo nên khác biệt tỷ lệ phôi tốt nuôi phôi lên ngày 3.1.2 Số lượng chất lượng phôi nang (phôi ngày 5) Chất lượng phơi nang nhóm nghiên cứu chủ yếu phôi tốt Số lượng phôi nang loại tốt trung bình cao loại xấu nhóm nghiên cứu Khi so sánh chất lượng phôi nang cặp nhóm nghiên cứu nồng độ oxy cho thấy số lượng phơi nang loại tốt trung bình nhóm ni mơi trường đơn bước cao so với môi trường đa bước Kết tương tự với kết nghiên cứu Abdala cộng (2021), cụ thể là: - Kết số lượng phơi loại xấu nhóm ni mơi trường đa bước cao nhóm còn lại dù chênh lệch số lượng phơi xấu nhóm chưa có ý nghĩa thống kê (𝑝 = 0,06243) tiệm cận gần ngưỡng 𝑝 = 0,05 Điều cho thấy, nuôi cấy phôi môi trường đơn bước tốt môi trường đa bước - Khi so sánh kết nuôi phôi điều kiện nồng độ oxy thấp, kết cho thấy phơi loại xấu nhóm khơng có 14 khác biệt Tổng số lượng phôi ngày phôi loại tốt, loại trung bình nhóm khác biệt có ý nghĩa thống kê (𝑝 < 0,05) Theo đó, ni phơi mơi trường đơn bước cho số lượng phơi tốt số lượng phơi trung bình cao nhóm còn lại Điều cho thấy, ni cấy phôi môi trường đơn bước tốt môi trường đa bước Kết cho tương tự với kết nghiên cứu Jie deng cộng (2020) 3.2 Ảnh hưởng nồng độ oxy 20% 5% tới phát triển phôi IVF 3.2.1 Số lượng chất lượng phôi ngày Chất lượng phơi ngày bốn nhóm nghiên cứu chủ yếu phơi tốt trung bình Loại phơi trung bình có số lượng phơi nhiều nhóm, loại phơi xấu có số lượng phơi tất nhóm Bên cạnh đó, so sánh chất lượng phôi ngày cặp hai nhóm nghiên cứu loại mơi trường đơn bước hay đa bước, khơng có khác biệt loại phơi tốt, trung bình, xấu số lượng phơi trung bình/chu kỳ (với 𝑝 > 0,05) 3.2.2 Tỷ lệ hình thành phơi nang Tỷ lệ phát triển lên phơi nang ngày từ phơi có phân hóa rõ rệt nồng độ oxy 5% 20% nuôi môi trường đơn bước, có ý nghĩa thống kê với 𝑝 < 0,05, cụ thể: tỷ lệ hình thành phơi nang từ ngày từ ngày nhóm oxy 5% cao nhóm còn lại (80,14%> 74,32% 67,32%> 62,16%) Kết tương tự với kết nghiên cứu Gomes cộng (2011), De los Santos cộng (2013), Kovacic cộng (2008) nuôi phôi nồng độ oxy thấp cho tỷ lệ hình thành phơi nang cao có ý nghĩa thống kê so với ni phơi nồng độ oxy khơng khí 15 Bên cạnh đó, ni nồng độ oxy 5% cho kết tỷ lệ phôi nang loại tốt tỷ lệ phơi loại trung bình cao nhóm 20%, khơng có ý nghĩa thống kê với 𝑝 > 0,05 Xét tỷ lệ phôi loại “xấu” kết thu có ý nghĩa thống kê (𝑝 < 0,05) so sánh cặp nhóm nghiên cứu, với tỷ lệ cao nhóm oxy 20% (22,68% > 16,02% 29,03% > 21,38%) Điều cho phép đánh giá phần việc ni môi trường đơn bước nồng độ oxy thấp mang kết tốt cho phôi 3.3 Đánh giá hiệu đồng thời môi trường đơn bước đa bước với nồng độ oxy khác tới phát triển phôi IVF 3.3.1 Tỷ lệ hình thành phơi nang nhóm nghiên cứu Trong nghiên cứu này, bệnh nhân coi trung tâm, thơng tin nỗn, thụ tinh phôi thông báo ngày cho bệnh nhân Để đảm bảo an tồn cho nguồn phơi bệnh nhân, chọn bệnh nhân có nỗn ngày chọc hút Xét tỷ lệ phôi loại “xấu” kết thu có ý nghĩa thống kê (𝑝 < 0,05) so sánh nhóm nghiên cứu, với tỷ lệ cao đạt 29,03%/chu kỳ nhóm ni cấy mơi trường đa bước, nồng độ oxy cao tỷ lệ thấp mức 16,02%/chu kỳ nuôi cấy môi trường đơn bước, nồng độ oxy 5% Điều cho phép đánh giá phần việc nuôi môi trường đơn bước với nồng độ oxy thấp mang kết tốt cho phơi Ở nhóm nghiên cứu, số lượng phơi trung bình ngày khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (𝑝 > 0,05) Tuy nhiên, kết cho thấy tỷ lệ phôi nuôi cấy từ ngày phát triển lên thành phơi nang nhóm nghiên cứu, tỷ lệ nuôi cấy thành công 16 thành phôi nang từ phơi ngày có khác biệt có ý nghĩa thống kê (𝑝 < 0,05) chứng minh nhóm ni phơi nồng độ oxy thấp có số lượng phơi ni tiếp ngày cao so với nhóm ni phơi nồng độ oxy 20% 3.3.2 Kết sàng lọc PGT phôi nang Sự khác biệt số lượng phơi ngày trung bình sàng lọc chu kỳ nhóm nghiên cứu khơng có ý nghĩa thống kê, số lượng phơi sàng lọc nhóm giao động khoảng 4-5 phơi chu kỳ Sự khác biệt số lượng phôi bất thường trung bình chu kỳ tỷ lệ phơi bất thường cho kết có ý nghĩa thống kê 𝑝 < 0,05 Tỷ lệ phôi bất thường cao nhóm ni phơi nồng độ oxy cao 20% với môi trường đa bước, mức 46,02%, thấp nhóm oxy thấp 5%, đơn bước mức 30,74% Nếu xét riêng cặp nhóm mơi trường ni (nhóm I, III nhóm II, IV): nồng độ oxy thấp cho kết phôi bất thường nhiễm sắc thể nhóm còn lại Kết giải thích nồng độ oxy cao tạo nhiều gốc oxy tự (trong điều kiện bình thường có khoảng – 4% phân tử oxy chuyển thành gốc tự do) Các gốc tự nhân tố khử phản ứng cực mạnh gây độc cho sinh hoá tế bào, bao gồm gen di truyền Các DNA mẫn cảm với thay đổi tác động chất oxy hóa này, chúng khơng có protein histon bảo vệ khơng có hệ thống sửa chữa sai sót Điều dễ dẫn đến hậu làm gia tăng tỷ lệ đột biến, gây ảnh hưởng đến trình phiên mã RNA trình mã thân DNA DNA đột biến tổng hợp nên protein bất thường, thân protein đích 17