Nghiên ứu ảnh hưởng ủa vận tố gió và kết ấu ơ khí đến đặ tính tản nhiệt ủa thiết bị siterouter

Trang 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI.... ĐẶNG THÙY LINHNGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH PHIP 2-AMINO-1-METHYL-6-PHENYLIMIDAZO[4,5-B] PYRIDINE VÀ MEIQX 2

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI

ĐẶNG THÙY LINH

NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH

PHIP (2-AMINO-1-METHYL-6-PHENYLIMIDAZO[4,5-B] PYRIDINE) VÀ MEIQX (2-AMINO-3,8-DIMETHYLIMIDAZO[4,5-F] QUINOXALINE),

THỰC PHẨM ĐÃ CHẾ BIẾN.

LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

HÀ NỘI – 2019

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI

ĐẶNG THÙY LINH

NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH

PHIP (2-AMINO-1-METHYL-6-PHENYLIMIDAZO[4,5-B] PYRIDINE) VÀ MEIQX (2-AMINO-3,8-DIMETHYLIMIDAZO[4,5-F] QUINOXALINE),

HÀ NỘI - 2019

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

L ỜI CAM ĐOAN

phương pháp phân tích PhIP (2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]

pyridine) và MeIQx (2-Amino-3,8-dimethylimidazo[4,5-f]quinoxaline), kh o sát ả

s ự tích lũy của chúng trong m t s ộ ốthự c phẩm đãchế ế bi n” là công trình nghiên

c u và sáng t o do tôi th c hi i s ng d n c a PGS.TS Nguy n Th Minh

Tú S li u và k t qu trong lu n

b trong b t kì m t công trình khoa h c nào khác M i k t qu tham kh u có ghi rõ ngu n g c Và tôi xin ch u trách nhi m v i lu

Hà N i, Ngày 20 tháng Tác gi

ng Thu Linh

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

LỜI CẢM ƠN

Trong quá trình h c t p và nghiên c i h c Bách Khoa Hà N

n nh ng th y cô Vi n Công ngh sinh h c và Công ngh th c p

i h c Bách Khoa Hà N n tình gi ng d y, trang b cho em nh n

th c quý báu trong nh ng c qua, giúp chúng em có m t n n t ng ki n th c

ng d n và góp ý ki n c a PGS.TS Nguy n Th Minh Tú, PGS.TS Nguy n Quang Trung, th c s Hoàng H i Linh- Trung tâm nghiên c u và chuy n giao công ngh -

t nghi p

c u ph c v các nghiên c u quan sát trong khoa h c s c kh e Vi

c ch n v n không tránh kh i nh ng thi u sót Em kính mong

Xin chân thành c

Hà N i, tháng 3

H c viên th c hi n

ng Thùy Linh

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

M C L C L

L I C

DANH M C CÁC KÍ HI U VÀ CH VI T T T 1

DANH M C B NG 2

DANH M C HÌNH V 3

T V 5

1 Lý do ch tài 5

2 M u 5

3 Ph m vi nghiên c u 6

4 N i dung nghiên c u 6

NG QUAN 7

1.1 Gi i thi u v Heterocyclic amines 7

1.1.1 H p ch t PhIP 8

1.1.2 H p ch t MeIQx 11

1.2 Các y u t n s hình thành HCAs trong th t 13

1.2.1 HCAs trong th t bò n u b

1.2.2 HCAs trong th t l n n u b

1.2.3 HCAs trong th t gà n u b

1.2.4 HCAs trong cá n u b

1.3 HCAs và s c kh i 19

1.4 c ký l ng ghép kh i ph 21

1.4.1 Nguyên t c 22

1.4.2 C c lo u dò khi ph 23

1.4.3 t ghi ph 25

1.5 Các nghiên c u v Heterocyclic amines 26

, V T LI U

2.1 nghiên c u 29

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

2.2 ng và v t li u nghiên c u 29

2.2.1 ng nghiên c u 29

2.2.2 Thi t b , hoá ch t 29

2.3 u

2.3.1 pháp xây d 2.3.2 o sát thói quen s d ng th c ph m giàu protein và lipid t i D Tr ng Du (Hà Nam) và l y m u th c ph m

2.3.3 ng PhIP và MeIQx trong m u th c ph m giàu protein và lip bi n nhi cao 39

T QU 40

3.1 K t qu xây d ng LC/MS/MS 40

3.1.1 K t qu kh u ki n ch y trên LC

3.1.2 K t qu kh u ki n ch y kh i ph 48

3.1.3 K t qu th

K t qu nh hi u su t thu h i c m u lý 3.2 K t qu kh o sát thói quen s d ng th c ph m giàu protein và lipid t i D Tr ch ng Du (Hà Nam) và l y m u th c ph m 5

3.2.1 K t qu kh o sát thói quen s d ng th c ph m giàu protein và lipid t i D Tr ch ng Du (Hà Nam) 53

3.2.2 K t qu l y m u th c ph m 61

K T LU N VÀ KI N 63

TÀI LI U THAM KH O 65

PH L C 1

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

DANH MỤ C CÁC KÍ HI U VÀ CH Ệ Ữ VIẾ T T T Ắ

Ký hi u và ch

quinoxaline

imidazo[4,5-f] quinoxaline

2-amino-1-Metyl-6-pyridine

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

DANH MỤC BẢNG

3 B ng 1.3: S thành PHIP và MeIQx[19] ng c a nhi và th i gian n 13

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

ĐẶT V N Đ Ấ Ề

1 Lý do chọn đề tài

Nh ng nguyên li u th c ph m có thành ph n hóa h c s b bi i sau quá trình

ch bi n nhi t Ngoài s t n th t v m ng thì m t s h p ch t khi k

v i nhau u ki n nhi t cao s sinh ra nh ng h p ch t m i không t

i Heterocyclic amines (HCAs) là nh ng h p ch

r ng tiêu th các lo i th ng, chiên càng nhi

nghiên c u các h p ch t HCAs ng c a nó có trong th c ph

bi n c bi t là th c ph m chiên, rá ng) nh m tìm hi u m i nguy c a nó tron

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

ph m giàu protein và lipid bi n áp d ng t i phòng thí nghi m Vi t Nam

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN1.1 Giới thiệu v Heterocyclic amines ề

Heterocyclic amines (HCAs) là nh ng h p ch t amin d c hình thành t

amino-3,4-dimetyl-imidazo [4,5-b] quinolin (MeIQ),

2-amino-1-Metyl-6-phenylimidazo [4,5-b] pyridin (PhIP) S t bi n gen gây ra b i HCAs trong th t

ng cách s d ng th nghi6]

c phân thành hai nhóm chính là : + Aminoimidazozoarenes (AIAs)

+ Aminocarbolines [8]

Hình 1.1 : Công thức cấ ạ u t o c a mủ ột số chất ch a IQ[7] ứAIAs là nhóm ch t heterocyclic quan tr ng nh t trong th c ph m n u chín

Chúng có m t nhóm imidazo liên k t v i m t quinolin, m t quinoxalin ho c

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

(IQ)-t ph n ng c a các axi(IQ)-t amin (IQ)-t

Aminocarbolines hay còn g i là các h p ch t không ph i IQ ho c HCAs pyrolytic

c hình thành trong ph n ng nhi t phân c a axit amin và protein nhi t

oC)[24] Công th c c u t o c a m t s h p ch t thu c nhóm này:

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

u tra th c ph m v i s có m t c a nhi u axit amin d vòng

c tìm th y là ph bi n nh t [19] Theo nghiên c u c

c hình thành t

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

h p ph n ng u ki n khô, nóng g m có Phenylalanine và Creatine theo th

B ng 1.1: Nả ồng độ ủ c a PhIP trong một số thức ăn

15 15,7 38,1 42,5 69,2 1,7-23 nd-18 2-73

Turesky et al (1989) Felton et al (1986b) Wakabayashi et al (1992) Wakabayashi et al (1992) Wakabayashi et al (1992) Zhang et al (1988) Gross & Grüter (1992) Gross & Grüter (1992) Gross & Grüter (1992)

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

u nghiên c u v s hình thành MeIQx trong th c ph m Theo nghiên

hình thành t h n h p c a Glycine, Glucose và Creatine

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

tr c ti ng tiêu hóa, không phát hi n th y MeIQx trên 3 b nh nhân nghiên

c li t kê trong b ng sau

B ng 1.2: Nả ồng độ ủ c a MeIQx trong m t s ộ ốthức ăn

28 1,01 6,44 1,4-5

< 1-4,6

<1 0,8 2,33

Gross et al (1990) Murray et al (1988) Turesky et al (1989) Felton et al (1984) Turesky et al (1988a) Felton et al (1986)

Wakabayashi et al (1992) Gross et al (1989)

Hargraves & Pari (1983) Wakabayashi et al (1992)

K t luế ận: PhIP và MeIQx là 2 h p chợ ất HCAs thường được nghiên c u Chúng ứ

được đưa vào cơ thể qua th c ph m c bi t trong các lo i thự ẩ đặ ệ ạ ịt đã qua chế bi n ế ở

nhiệt độcao (nướng, rán) như thịt bò, lợn, gà, cá,… Thành ph n các lo i axit amine, ầ ạ

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

creatine trong thị t và cách th c n u có vai trò quyứ ấ ết định đến s hình thành HCAs ự

trong thự c ph m ẩ

1.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hình thành HCAs trong th ịt

và MeIQx trong m u th t bò xay ép mi

bò xay ép mi ng chiên ch a 15% ch t béo k t qu trong b ng sau

B ng 1.3 S ả : ự ảnh hưở ng c a nhiủ ệt độ và th i gian nờ ấu đến s hình thành ự PhIP và

Nd

Nd 0,25 ± 0,1 1,8 ± 0,7

Nd 0,15 ± 0,1 1,9 ± 0,2 9,8 ± 2,2

1,3 ± 0,7 1,3 ± 0,1 7,8 ± 4,7

32 ± 10

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

liu, gi m táo và các lo i gia v khác làm gi m n PhIP t n 99% k

ng c gà trong 10, 20, 30 ho c 40 phút (Salmon et al 1997) Khi so sánh gi a th t

các lo i th t khác B ng 1.4 cho th y n c a PhIP và MeIQx trong m t s món

bi n t th t bò

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

B ng 1.4: Nả ồng độ PhIP và MeIQx trong thịt bò được chế ế bi n

ch bi n thchín

Th t bò rán ch o Tái

Chín v a Chín k Chín r t k

1,9

nd 6,5 23,2

1,3 1,9 4,1 8,2

Chín v a Chín k Chín r t k

6,1 2,1 4,6 7,1

nd

nd 1,7 1,5

Chín v a Chín k Chín r t k

2,5 4,7 7,3 30,0

0,2 0,6 0,8 2,7

Ph

1.2.2 HCAs trong thị ợt l n nấu bằng các phương pháp khác nhau

Theo nghiên c u c a Sinha và c ng s 1998, b ng 1.5 cho th y n PhIP

225oC trong nghiên c u có 84 m u cá, th t ch bi n nhi t b

175

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

Tóm l i, so vạ ới hàm lượng PhIP và MeIQx trong th t bò thì th t l n thị ị ợ ấp hơn nhiều

Hàm lượng PhIP trong m u thẫ ịt bò rán và nướng là t không phát hiừ ện đến 30ng/g

Còn trong m u thẫ ịt l n rán là không phát hiợ ện đến 2,3 ng/g, hàm lượng MeIQx trong

thị t bò rán và nướng là t không phát hiừ ện đến 8,2 ng/g, trong th t l n rán là không ị ợ

phát hiện đến 3,8 ng/g Trong m u th t lẫ ị ợn rán, hàm lượng PhIP cũng nhiều hơn so

với hàm lượng MeIQx

1.2.3 HCAs trong thịt gà nấu bằng các phương pháp khác nhau

nh n HCAs trong chân gà chiên 200oC trong 10 phút, n PhIP là 0,21ng/g, MeIQx là 0,13ng/g (Chen and Yang 1998) B ng 1.6 cho th y n c a

c khnghiên c u khác cho th y có ít PhIP trong th t gà Solyakov và Skog

ng BBQ, Trong s 30 m u gà phân tích, có 15 m u không th phát hi n th y

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

ng, phát hi n th y n PhIP là 31,5ng/g và MeIQx là 0,9ng/g sau k

khác, n PhIP gi m xu ng còn 4ng/g (Knize et al 1997a, 1997b)

B ng 1.6: N nả ồ g độ PhIP và MeIQx trong ức gà được chế ế bi n bằng các phương

pháp khác nhau [22]

bichín

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

p, trong kho ng không phát hi

bò

Kết luậ PhIP và MeIQx là 2 lo i HCAs ph bi n nh t trong th c phn: ạ ổ ế ấ ự ẩm đã qua

chế ế bi n ở nhi t đ cao (trên 150ệ ộ oC), đặc bi t có nhi u trong các lo i thệ ề ạ ịt đỏ nướng,

rán như thịt bò, th t l n, gà Do vị ợ ậy, đối tượng nghiên cứu đượ ực l a ch n là các lo i ọ ạ

thực phẩ m nhóm th t, cá chiên rán ị

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

1.3 HCAs và sức khỏe con người

Trong quá trình ch bi n th c ph c bi t là trong quá trình gia nhi t s x y ra các ph n ng hóa h c gi a các ch t có trong th c ph m t o ra các s n ph m ph

chuy n hóa có th t bi n gen, t o ra nh

n nguy

và PhIP gây ra ung

h i Tuy nhiên, các nghiên c u v

tác nhân c th liên quan Ngoài HCAs, các ch

c hình thành trong quá trình n u

(nghiên c u c a Th n báo cáo k t qu cho b n v

c u này quan sát th y m t m i quan h li u - ng Tuy nhiên, s liên quan gi a PhIp và các tuy i tràng trong nghiên c u c

th ng kê n a sau khi ki m soát MeIQx và DiMeIQx M t nghiên c u cho th y, có

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

tiêu th th p HCA và / ho c th t và th ng (t c là nghiên c u v

ng kê (ORs trong nghiên c u v

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

nhi u nghiên c u Các HCAs riêng bi t có m i liên h m t thi t v i nhau và v i nhi u thành ph n trong th t n u chín, bao g m protein, ch ng v t, nitrosamines vcác ch t khác không ph i HCAs c hình thành trong quá trình n u, ch ng h

K t lu n:ế ậ Trên th giế ới đã có nhiều nghiên c u v ứ ề HCAs và đã chỉ ra được kh ả

năng gây ung thư của nó Tuy nhiên, hi n nay t i Vi t nam vệ ạ ệ ẫn chưa có công bố nào

v nề ồng độ gây ung thư, cũng như những quy định v ề kiể m soát HCAs trong thực

phẩm Do v y, nh ng nghiên c u v ậ ữ ứ ề hàm lượng, đánh giá sự tích lu ỹ HCAs trong cơ

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

-quét này thành m t

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

nguyên t nhanh d ng liên t c (CF-FAB), c nghiên c u v ng d

m n cu i thp nhiên 80, m i c s t ph th t s v i k thu t ion h a t i p

su t kh quy n (Atmospheric Pressure Ionization API)

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

Hình 1.5: Sơ đồ quá trình phân tích LCQ- MS

v

c

FT-MS b n ch

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

bay qua c ng m t qu ng d i trong m t ng không c ng

y ch

ng s c t ch riêng nhau ra t y theo gi tr m/z c a ch ng, v c t p

trung t i b ph n thu nh n t n hi u Do th ch c a c c ion ch c ch nhau

r t ng n, 10-7 giây, nên m y c n c h th n t c c nh c th phân bi t

c c c ion

u d t c c (m t hoc ba t c c) c nh y cao trong phân t ng m t

ch t bi t, t c nhiu phân m nh trong ch MS/MS, c th l c ki u

t phân t ung h a tr (neutral loss), th ch h p cho phân tc ng c c ch

phân tích khi ch t phân tích có n l n

Selected Ion Monitoring (SIM)

y không th nh n danh hay so sánh v

SRM (Selected Reaction Monitoring) v à MRM (Multiple Reaction Monitoring)

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

sinh ra, cô l p m t m nh ion con c

MRM: trên th c t , do yêu c u v m t k thu i v i phân t ng nên c c ion

con c ng t hai tr lên, do v y k thu t ghi ph MRM thông d ng

u tiên, cô l p ion c n ch n (ion m ) t c c th nh t, phân m nh ion

cô l t i t c c th 2 (th c ch t l bu ng va ch c c c ion con, cô l p

hai (ho c nhi u) ion con c n quan tâm t c c th ba v u d ph t hi n

[26]

1.5 Các nghiên cứu về Heterocyclic amines

u c

typhimurium c a Sugimura (1994) cho th t bi n, phá h y DNA

Nh ng k t qu nghiên c u ch ra r ng tiêu th càng nhi u các lo i th ng, chiê

c tràng, tuy n t y, và tuy n ti

c nh n bi t trong th c ph m b

pháp này s d ng máy dò diod và máy dò hu

-HPLC cho phép phát hi n trong gi i h n là 1 ng/g PhIP

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

M n c hoà tan trong methanol, tách HCAs b ng ch t h p ph blu

- Phân tích HPLC: c t semi-preparative TSKgel ODS-120A, Dung môi

Acetonitrile trong 25nM H3PO4/Na2HPO4, pH=2, t dòng ch y 2ml/phút,

K t qu :ế ả

DiMelQxSalmonella typhimurium

Nghiên c u 2:

Theo M.G.Knize và c ng s (1995) d a

HCAs b ng dichlomethane 5% toluen

- M u humberger c r a và làm s ch nhi u l n qua ng PRS r a v i HCl

h p th Bond Elut C18 catridges (100mg) s d ng aminonium acetate (0,5m, pH=8,0)

r a, tách thu HCAs b ng MeOH-NH4OH (9: 1, v / v)

- u ki n phân tích HPLC: Tách chi t HPLC trên m t c t TSK gel

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

™, v i m ng là triethyl-amin phosphate (0,01M, pH 3,6) (dung môi A) và

chênh l ch tuy n tính (5-15% B t

h th ng HPLC 2010 v i m t WISP t ng l y m u, mô hình 996 máy dò màng

c l p trình phát hu nh quang Hewlett-Packard 1Nghiên c u 3:

th c ph m qua ch bi n nhi

b t Extrelut resin, r a resin qua c c nh i bông th y tinh b ng n-hexan

MeOH trong ng SPE- MCX

Ngoài nh ng nghiên c u v tác h i cữ ứ ề ạ ủa HCAs đối v i s c khớ ứ ỏe con người thì nhiều

nhà nghiên cứu đã đư ra phương pháp phân tích HCAs Tách chiếa t pha r n là ắ

phương pháp được s dử ụng để cô l p HCAs trong m u th c phậ ẫ ự ẩm Phương pháp

LC/MS/MS đượ ử ụng đểc s d phân tích hàm lượng HCAs vì có độ nh y cao và cho kết ậ

qu ả đáng tin cậy

K t lu n: ế ậ Đến nay, th giế ới đã đạt được nhi u thành t u trong vi c nghiên c u v ề ự ệ ứ ề

HCAs Tuy nhiên t i ạ Việ t Nam, vẫn chưa có quy định v nề ồng độ HCAs trong th c ự

ph m, m i nguy c a nó trong ẩ ố ủ thự c ph m hay ẩ ảnh hưởng của HCAs đến s c kh e con ứ ỏ

ngườ , cũng như hàm lượi ng gây độc trong th c ph m Hiự ẩ ện nay đã có nhiều phương

pháp phân tích hiện đại nhưng phương pháp phân tích sắc ký l ng k t h p v i khỏ ế ợ ớ ối

ph ổ được s d ng ph biử ụ ổ ến hơn và đã cho kết qu i v i các nghiên c u ả đố ớ ứ ở nước

ngoài do v y nghiên c u này s dậ ứ ử ụng phương pháp LC/MS/MS, đầu dò khối phổ Ion

T rap, sử ụ d ng ngu n ESI nghiên c u phân tích ồ để ứ PhIP và MeIQx trong một số thực

phẩm đã qua chếbiế n.

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

CHƯƠNG 2 SƠ ĐỒ, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU:

1 Xây d ng quy trình phân tích PhIP và

MeIQx trong th c ph m giàu protein và

h bi n nhi

1.1 Xây d ng quy trình phân tích PhIP và MeIQx b

pháp LC/MS/MS 1.2 Th

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

B ng 2.1: Danh sách hóa chả ất sử ụ d ng

#695092-500ML

>=99.7%

>=99.7

HPLC grade, for HPLC-UV, 10mM

grade

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

2.3.1 Phương pháp xây dựng phương pháp phân tích PhIP và MeIQx

a Phương pháp khảo sát các điều kiện ch y trên LC ạ

- H s c ký l ng ghép kh i ph : UHPLC-UltiMate, LCQ-Fleet Ion Trap

gi ng nhau, ng th i k t h p v i tài li u tham kh o v

trên ph n m m Xcaliber, hút 10µl dung d ch h n h p 2 ch t chu n PhIP (250ppb) và

hi u và l a ch u ki n thích h p

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

B ng 2.2: B ng kh o sát ả ả ả ảnh hưởng điều ki n c a dung môi ệ ủ

Ngoài ra axit formic còn n quá trình tách HCAs Do v y, ta ti n hành

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

b Phương pháp khảo sát điều ki n ch y kh i ph (MS/MS) ệ ạ ố ổ

dò t ng trên máy

 Khả o sát quá trình quét ph các ion ch t chu n và n i chu n ổ ấ ẩ ộ ẩ

- Chu n b dung d ch c a riêng t ng ch t PhIP, MeIQx PhIP-d3 và MeIQx-d3

- Trên ph n m m, ch n các thông s thích h u ch nh kho ng kh

full scan

 Khảo sát năng lượ ng phân m nh c a các ti n ion ả ủ ề

- Chu n b các dung d ch h n h p 2 ch t chu n PhIP và MeIQx v i n l

t là 250ppb và 250ppb

Luận văn tố t nghi p GVHD: PGS.TS Nguy n Th Minh Tú ệ ễ ị

Clt: N th c t PhIP, MeIQx c tiêm vào m u chu n