Trang 1 PHÂN LẬP VÀ ĐỊNH DANH NẤM Fusarium spp.. GÂY BỆNH THỐI RỄ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬTiểu luận mơn họcTRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SINH HỌC
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC Tiểu luận môn học PHÂN LẬP VÀ ĐỊNH DANH NẤM Fusarium spp GÂY BỆNH THỐI RỄ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ GVHD Sinh viên thực hiện: Nhóm TS Huỳnh Văn Biết Nguyễn Thị Lan Anh Đỗ Ngọc Bảo Chân Phạm Thị Mỹ Hạnh Tp Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 10 năm 2023 1 ĐẶT VẤN ĐỀ ● Nông nghiệp trụ đỡ kinh tế, đảm bảo an ninh lương thực ● Bệnh trồng gây tổn thất lớn tới nông nghiệp ● Nấm gây hại chiếm 11.6% thiệt hại bệnh năm 90 kỉ XX ĐẶT VẤN ĐỀ ● Fusarium spp loại nấm sợi gây bệnh thường thấy thực vật độc tố mycotoxin ● Gây bệnh: héo tắc mạch, thối rễ, thân lõi ngô, thối cổ thối củ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU ● Phân lập định danh nấm Fusarium spp điều kiện in vitro ● Đánh giá khả gây hại cho trồng NỘI DUNG THỰC HIỆN ● Nội dung 1: Phân lập nấm Fusarium môi trường nuôi cấy PDA từ cam huyện Quỳ Hợp, tỉnh Nghệ An ● Nội dung 2: Định danh loài nấm Fusarium phân lập dựa vào đặc điểm hình thái ● Nội dung 3: Giải trình tự loài nấm định danh kỹ thuật PCR điện di gel agarose TỔNG QUAN NẤM FUSARIUM Nấm Fusarium phân loại: - Giới : Mycetae (Fungi) - Ngành : Ascomycota - Lớp : Sordariomycetes - Bộ : Hypocreales - Họ : Nectriaceae - Chi : Fusarium Hình 2.1 Fusarium spp mơi trường ni cấy in vitro PHƯƠNG PHÁP THỰC HIỆN ● Xử lý mẫu cắt đoạn nhúng 5mm cồn 70 ngâm Javel Rửa với nước cất vô trùng PHƯƠNG PHÁP THỰC HIỆN ● Phân lập 1µg/ml ampcillline streptomycin enystatine 28°C 3-4 ngày Mơi trường Làm WA Quan sát hình thái PHƯƠNG PHÁP THỰC HIỆN ● Ly trích DNA - Điện di Ly trích DNA Khuyếch đại Phương pháp Sanger So sánh với NCBI Định danh nấm KẾT QUẢ ● Trên đĩa petri có khuẩn lạc nấm có sợi nấm màu trắng bông, tơi xốp, mịn, sợi mỏng, rìa ngồi có màu hồng tím ● Quan sát hình thái độ phóng đại 40X nhận thấy: sợi nấm dạng hình sợi, khơng có vách ngăn, bào tử lớn hình lưỡi liềm, số hình sợi dài ● Sản phẩm PCR dịng nấm giải trình tự theo phương pháp Sanger so sánh kết ngân hàng gen NCBI, kết 30 mẫu nhiễm nấm thuộc chi Fusarium 10 TÀI LIỆU THAM KHẢO Đãng, B Q., Hiển, P H., Chí, C V., Huyền, L T., Lan, N T B & Toàn, N T (2021) Quản lý dịch hại tổng hợp bệnh vàng thối rễ hiệu cho vườn cam thâm canh huyện Quỳ Hợp, tỉnh Nghệ An Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, 125(04), 97-104 Hùng, T N., Hằng, Đ T V., & Huy, N Đ (2020) Bệnh héo vàng (Fusarium oxysporum f sp cubense) hại chuối tiêu Việt Nam Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, 18(5), 315-322 Hường, N T T., Bình, N T & Hương, N T (2021) Phân lập đánh giá khả đối kháng số chủng nấm nấm Fusarium sp gây bệnh họ bầu bí Tạp chí Khoa học Trường Đại học Hồng Đức, 55, 11 Hiệu, N Đ., Uyên, N T K., Chi, V T Q., Mai, N N., Trang, N T T & Nghĩa, N A (2018) Định danh loài nấm Fusarium spp gây bệnh thối vỏ cao su Việt Nam Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, 18(4), 74-81 Kalman, B., Abraham, D., Graph, S., Perl-Treves, R., Meller Harel, Y., & Degani, O (2020) Isolation and identification of Fusarium spp., the causal agents of onion (Allium cepa) basal rot in Northeastern Israel Biology, 9(4), 69 Arie, T (2019) Fusarium diseases of cultivated plants, control, diagnosis, and molecular and genetic studies Journal of pesticide science, 44(4), 275-281 11