Ttnctptn chiều thứ 6 ca 3 nhóm 2 bài 1

Do đó,sự phát triển của nấm men có thể đo được bằng cách đo sự sản sinh CO2.Giả thuyết được đặt ra là: Ho: Không có sự khác biệt đáng kể giữa lượng khíCO2 sinh ra khi nấm men sử dụng ngu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC



BÁO CÁO THỰC TẬP

THỬ NGHIỆM VÀ PHÂN TÍCH DỮ LIỆU

DINH DƯỠNG CỦA NẤM MEN Nhóm 2 – Chiều thứ 6 ca 3

Giảng viên hướng dẫn : TS Lê Thị Diệu Trang

Sinh viên thực hiện:

1 Nguyễn Lan Anh 21126009 DH21SHB

2 Huỳnh Ngọc Thùy Dương 21126037 DH21SHB

3 Phạm Thị Mỹ Hạnh 21126054 DH21SHB

4 Nguyễn Nhật Hòa 21126347 DH21SHB

5 Thạch Vinh 21126259 DH21SHB

TP.Hồ Chí Minh, tháng 03 năm 2023

MỤC LỤC

CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 2

1.1 Đặt vấn đề 2

1.2 Mục tiêu đề tài 2

1.3 Nội dung đề tài 2

CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2

2.1 Nấm men 2

2.1.1 Phân loại 3

2.1.2 Nguồn gốc 3

2.1.3 Đặc điểm hình thái 4

2.1.4 Đặc điểm sinh học 4

2.1.5 Lợi ích và tác hại của nấm men 4

2.1.6 Ứng dụng 5

2.2 Môi trường đổ ống 6

2.2.1 Môi trường Pepton 5% (nghiệm thức chứa protein) 6

2.2.2 Môi trường Maltose 5% (nghiệm thức chứa đường) 6

2.2.3 Môi trường nước 5% (nghiệm thức đối chứng) 6

CHƯƠNG 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 6

3.1 Thời gian thực hiện 6

3.2 Mục tiêu 6

3.3 Vật liệu và đối tượng 6

3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 6

3.3.2 Vật liệu nghiên cứu 6

3.3.3 Dụng cụ và thiết bị 7

3.4 Phương pháp nghiên cứu 7

3.4.1 Cách bố trí thí nghiệm 7

3.4.2 Các bước thực hiện 7

CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ THẢO LUẬN 8

4.1 Kết quả và thảo luận 8

4.1.1 Kết quả 8

4.1.2 Xử lý số liệu 9

4.2 Thảo luận 14

CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN 15

5.1 Kết luận 15

5.2 Nghị luận 15

5.3 Đề xuất 15

CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Khi nấm men lên men thức ăn, CO2 được tạo ra như một sản phẩm phụ Do đó,

sự phát triển của nấm men có thể đo được bằng cách đo sự sản sinh CO2

Giả thuyết được đặt ra là: Ho: Không có sự khác biệt đáng kể giữa lượng khí

CO2 sinh ra khi nấm men sử dụng nguồn thức ăn là carbonhydrate và lượng khí CO2

sinh ra khi nấm men sử dụng nguồn thức ăn là đạm

1.2 Mục tiêu đề tài

Kiểm tra giả thuyết: “Không có sự khác biệt đáng kể giữa lượng khí CO2 sinh ra khi nấm men sử dụng nguồn thức ăn là đường và lượng khí CO2 sinh ra khi nấm men

sử dụng nguồn thức ăn là đạm”

1.3 Nội dung đề tài

Tiến hành thí nghiệm mức độ hấp thụ các nguồn dinh dưỡng của nấm men yeast Thu thập và phân tích dữ liệu Thông qua các dữ liệu đã phân tích, bác bỏ hoặc chấp nhận giả thuyết Ho

CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Nấm men

Nấm men là nhóm vi sinh vật gần gũi với loài người từ xưa đến nay Các sản phẩm của chúng, như rượu, bia, rượu vang và nhiều dạng đồ uống khác ngày càng nhiều và dường như chưa bao giờ đáp ứng đủ nhu cầu của con người Ngoài ra, tế bào nấm men rất giàu protein - được coi là nguồn protein đơn bào (SCP) rất quí giá Hiện nay nguồn này đang là nguồn dinh dưỡng gián tiếp qua chăn nuôi tới con người Hy vọng rằng trong thời gian không xa nguồn protein tinh sạch tách từ nấm men sẽ cho chúng ta những món ăn nhân tạo giống như các sản phẩm thịt, cá, trứng… và như vậy, tương lai của ngành sản xuất này sẽ vô cùng rộng lớn

Nấm men là nhóm nấm cơ thể đơn bào hoặc tập hợp đơn bào, nhân chuẩn, hiển

vi Nấm men có thể thuộc về hai lớp nấm: nấm túi (Ascomycetes) và nấm bất toàn (Deutero-mecetes hoặc Fungi imperfect) Nấm men là sinh vật đơn bào hiển vi, tế bào

cơ bản giống như ở động vật, thực vật So sánh cấu tạo tế bào nấm men với vi khuẩn ta thấy có sự tiến hoá nhẩy vọt từ nhân sơ đến nhân chuẩn Cùng với sự tiến hoá về nhân

và cơ chế phân chia (nhân có màng, có các thể nhiễm sắc, phân bào có tơ…) ở cơ thể nhân chuẩn xuất hiện nhiều thể không thấy ở thể nhân sơ, như ti thể, lục lạp v.v… Tế bào nấm men có thành phần và cấu tạo phức tạp Trong tế bào có các cấu tử - tiểu thể

và có thể chia thành: các cơ quan nội bào hay cơ quan tử của tế bào và các chất chứa

trong tế bào hay các thể vùi của tế bào (inclusion).

Hình 1: Nấm men Saccharomyces cerevisiae (Nguồn: nptyeast.vn)

2.1.1 Phân loại

Phần lớn các loài men thuộc về ngành Nấm túi (Ascomycota), mặc dù có một số loài thuộc về ngành Nấm đảm (Basidiomycota) Trên 1.000 loài nấm men đã được miêu tả Loài nấm men được con người sử dụng phổ biến nhất là Saccharomyces cerevisiae, nó được dùng để sản xuất rượu vang, bánh mì và bia từ hàng nghìn năm trước.

2.1.2 Nguồn gốc

Từ 'men' xuất phát từ tiếng Anh cổ gist, gyst, và từ gốc Ấn-Âu yes-, có nghĩa là 'đun sôi', 'bọt' hoặc 'bong bóng' Vi khuẩn nấm men có lẽ là một trong những sinh vật được thuần hóa sớm nhất Các nhà khảo cổ đào bới tàn tích Ai Cập đã tìm thấy những viên đá mài và buồng nướng sớm cho bánh mì nuôi men, cũng như bản vẽ của các tiệm bánh và nhà máy bia 4.000 năm tuổi Các tàu được nghiên cứu từ một số địa điểm khảo cổ ở Israel đã được tìm thấy có chứa các khuẩn lạc nấm men tồn tại qua nhiều thiên niên kỷ, cung cấp bằng chứng sinh học trực tiếp đầu tiên về việc sử dụng nấm men trong các nền văn hóa sơ khai Năm 1857, nhà vi sinh vật học người Pháp Louis Pasteur đã chỉ ra rằng bằng cách sủi bọt oxy vào nước dùng men, sự phát triển của tế bào có thể tăng lên, nhưng quá trình lên men bị ức chế - một quan sát sau này được gọi

là 'hiệu ứng Pasteur' Trong bài báo "Mémoire sur la fermentation alcoolique", Pasteur

đã chứng minh rằng quá trình lên men rượu được thực hiện bởi nấm men sống chứ không phải bởi chất xúc tác hóa học

2.1.3 Đặc điểm hình thái

Nấm men là các loại nấm đơn bào có hình dạng phong phú như hình cầu, hình oval, hình trứng, một số có dạng hình que Trong canh trường (môi trường nuôi cấy), nấm men đứng riêng lẻ hoặc kết tụ lại với nhau thành từng quần thể

Mỗi chủng nấm men có độ pH và nhiệt độ phát triển khác nhau, nhưng nhìn chung, đối với quá trình lên men, pH tối ưu là 4,5 – 5,0 Nếu tăng độ pH, quá trình lên men sẽ dễ bị nhiễm khuẩn hơn

2.1.4 Đặc điểm sinh học

Các loài men có thể là các vi sinh vật hiếu khí bắt buộc hoặc là các vi sinh vật

kỵ khí không bắt buộc Hiện nay người ta vẫn chưa thấy có men thuộc loại kỵ khí bắt buộc Khi thiếu oxy, các loài men tạo ra năng lượng cho chúng bằng cách chuyển hóa các cacbohyđrat thành dioxide cacbon và ethanol (rượu) hoặc axít lactic Trong sản xuất rượu, bia thì người ta thu lấy êtanol, còn trong việc sản xuất bánh mỳ thì dioxide cacbon tạo ra độ xốp cho bánh mỳ và phần lớn êtanol bị bay hơi

Men có thể sinh sản vô tính thông qua mọc chồi hoặc hữu tính thông qua sự hình thành của nang bào tử Trong quá trình sinh sản vô tính, chồi mới phát triển từ men mẹ khi các điều kiện thích hợp và sau đó, khi chồi đạt tới kích thước của men trưởng thành thì nó tách ra khỏi men mẹ Khi các điều kiện dinh dưỡng kém các men

có khả năng sinh sản hữu tính sẽ tạo ra các nang bào tử Các men không có khả năng

đạt được chu trình sinh sản hữu tính đầy đủ được phân loại trong chi Candida.

Tốc độ sinh trưởng của nấm men phụ thuộc nhiều vào yếu tố môi trường như: nhiệt độ, độ pH, cơ chất,

2.1.5 Lợi ích và tác hại của nấm men

2.1.5.1 Lợi ích

Nấm men được ứng dụng nhiều trong lĩnh vực sản xuất thực phẩm, thực phẩm chức năng, chế phẩm sinh học…

Nấm men được sử dụng trong quá trình sản xuất ethanol cho đồ uống có cồn Điều đó sẽ tạo ra chất men trong bánh và thực phẩm bổ sung dinh dưỡng dành riêng cho những ai an chay Cấu trúc tế bào đơn giản của chúng cũng được nghiên cứu để trở thành một trong những nguồn tài nguyên quý giá Những nguồn này được dành riêng cho các nhà di truyền học Họ có thể sử dụng chúng để nghiên cứu các quá trình như sao chép DNA và tái tổ hợp

2.1.5.2 Tác hại

Một số loài nấm men có thể gây hại cho cơ thể Chúng sinh ra chất chuyển hóa

độc hại có tên gọi là mycotoxin Hầu hết các độc tố này là những hợp chất ổn định

không bị phá hủy trong quá trình nấu ăn và chế biến thực phẩm

Một số loài nấm men có thể gây nhiễm trùng ở những nhóm người có suy giảm miễn dịch như người già suy nhược, người nhiễm HIV hay những bệnh nhân đang điều trị xạ trị, hóa chất, và kháng sinh Nấm men Candida cũng có thể gây bệnh nhiễm nấm Candida ở người

 Nấm men là một loại nấm vừa độc vừa hại cho cơ thể

2.1.6 Ứng dụng

Lĩnh vực thực phẩm: đồ uống có cồn, làm bánh, nước ngọt có ga,…

Lĩnh vực thực phẩm chức năng: Men được sử dụng như một thành phần trong thực phẩm để tạo vị umami , giống như cách sử dụng bột ngọt (MSG) và giống như bột ngọt, thường chứa axit glutamic tự do

Lĩnh vực men vi sinh: Một số chất bổ sung men vi sinh sử dụng men S boulardii để duy trì và phục hồi hệ thực vật tự nhiên trong đường tiêu hóa S boulardii

đã được chứng minh là làm giảm các triệu chứng tiêu chảy cấp tính, giảm khả năng

nhiễm trùng do Clostridium difficile (thường được xác định đơn giản là C difficile hoặc C diff), giảm nhu động ruột trong hội chứng ruột kích thích tiêu chảy chiếm ưu

thế bệnh nhân, và giảm tỷ lệ mắc bệnh tiêu chảy liên quan đến kháng sinh -HIV/AIDS

Lĩnh vực xử lý sinh học: Một số loại men có thể tìm thấy ứng dụng tiềm năng trong lĩnh vực xử lý sinh học vd: phân hủy nước thải của nhà máy dầu cọ, tiềm năng

của nó như một chất hấp thụ sinh học kim loại nặng, Saccharomyces cerevisiae có khả

năng xử lý sinh học các chất ô nhiễm độc hại như asen từ nước thải công nghiệp

Lĩnh vực nghiên cứu khoa học: Một số loại nấm men, đặc biệt là S cerevisiae

và S pombe, đã được sử dụng rộng rãi trong di truyền học và sinh học tế bào, phần lớn

bởi vì chúng là các tế bào nhân thực đơn giản , phục vụ như một mô hình cho tất cả các sinh vật nhân chuẩn, bao gồm cả con người, để nghiên cứu các quá trình cơ bản của tế bào như như chu kỳ tế bào, sao chép DNA, tái tổ hợp, phân chia tế bào và trao đổi chất

2.2 Môi trường đổ ống

2.2.1 Môi trường Pepton 5% (nghiệm thức chứa protein)

Pepton được sử dụng là nguồn protein cung cấp cho nấm men hoạt động Nghiệm thức này dùng để xác định mức độ tăng trưởng của nấm men khi sử dụng

nguồn dinh dưỡng protein.

2.2.2 Môi trường Maltose 5% (nghiệm thức chứa đường)

Maltose (đường mạch nha) là nguồn cung cấp đường cho nấm men hoạt động Nghiệm thức này dùng để xác định mức độ tăng trưởng của nấm men khi sử dụng nguồn dinh dưỡng là đường

2.2.3 Môi trường nước 5% (nghiệm thức đối chứng)

Môi trường nước ở đây là nghiệm thức đối chứng Trong môi trường này, nước cất là nguồn dinh dưỡng của nấm men Nghiệm thức này dùng để so sánh, đối chiếu về

sự tăng trưởng của nấm men so với các môi trường còn lại

 Sự tăng trưởng của nấm men ở tất cả môi trường đều được đo bằng lượng CO2

tạo ra

CHƯƠNG 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Thời gian thực hiện

- Thời gian: Vào lúc 13h30 chiều thứ 6, ngày 24/03/2023

- Địa điểm: Tại phòng BIO317, tòa nhà A1, Đại học Nông Lâm TP HCM 3.2 Mục tiêu

Đánh giá loại thức ăn thích hợp với sự sinh trưởng Saccharomyces sp.

Đối tượng nghiên cứu là., một loại nấm men vi sinh dùng trong chăn nuôi Trong bài thực hành này, ta tiến hành thí nghiệm sự hấp thu của nấm men với 3 môi trường: mantose (đường), pepton (protein) và nước cất (đối chứng)

3.3 Vật liệu và đối tượng

3.3.1 Đối tượng nghiên cứu

- Nấm men Saccharomyces.

3.3.2 Vật liệu nghiên cứu

- Nấm men Saccharomyces.

3.3.3 Dụng cụ và thiết bị

- Thiết bị: Nồi hấp, tủ cấy, tủ sấy,…

- Dụng cụ thí nghiệm.

- Vật tư tiêu hao

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Cách bố trí thí nghiệm

Các thí nghiệm được tổ chức tốt để trả lời các câu hỏi yêu cầu các câu hỏi phải được trình bày lại dưới dạng các giả thuyết có thể kiểm tra được Giả thuyết là một phát biểu nêu rõ mối quan hệ giữa các biến số sinh học Một giả thuyết tốt xác định sinh vật hoặc quá trình đang được điều tra, xác định các biến đang được ghi lại và ngụ

ý các biến sẽ được so sánh như thế nào Giả thuyết là một tuyên bố chứ không phải là một câu hỏi và việc phân tích dữ liệu thử nghiệm của bạn cuối cùng sẽ xác định xem bạn chấp nhận hay bác bỏ giả thuyết của mình Trung tâm của khoa học là thu thập và phân tích dữ liệu thực nghiệm dẫn đến việc bác bỏ hoặc chấp nhận các giả thuyết liên quan đến các câu hỏi mà chúng ta muốn trả lời

Trong bài tập này, bạn sẽ làm thí nghiệm mức độ hấp thụ các nguồn dinh dưỡng của nấm men yeast Khi nấm men lên men thức ăn, CO2 được tạo ra như một sản phẩm phụ Do đó, chúng ta có thể đo sự phát triển của nấm men bằng cách đo sự sản sinh

CO2

Một giả thuyết được đặt ra là: Ho: Không có sự khác biệt đáng kể giữa lượng khí CO2 sinh ra khi nấm men sử dụng nguồn thức ăn là lượng khí CO2 sinh ra khi nấm men sử dụng nguồn thức ăn là đạm Đây là cách phổ biến nhất để nêu một giả thuyết

rõ ràng và có thể kiểm tra được Trong thí nghiệm này, giả thuyết Ho có thể:

(1) Xác định nấm men là sinh vật, quần thể hoặc nhóm mà chúng ta muốn tìm hiểu

(2) Xác định sản xuất CO2 là biến được đo lường

(3) Dẫn trực tiếp đến một thử nghiệm để đánh giá các biến và so sánh các

phương tiện của các phép đo được lặp lại.

3.4.2 Các bước thực hiện

Bước 1: Ghi nhãn các ống nghiệm là C1 – C5, M1 – M5, và P1 – P5

Bước 2: Thêm 5 mL nước cất vào mỗi ống nghiệm từ C1 – C5 Đây là các lần lặp lại của nghiệm thức đối chứng

Bước 3: Cho vào ống nghiệm M1 – M5, mỗi ống nghiệm 5 mL dung dịch glucozơ 5% Đây là các lần lặp lại của nghiệm thức nguồn thức ăn là mantose

Bước 4: Thêm vào ống nghiệm P1 – P5, mỗi ống nghiệm 5 mL dung dịch pepton 5% Đây là lần lặp lại của nghiệm thức nguồn thức ăn protein

Bước 5: Chuẩn bị dịch huyền phù nấm men 5% từ bột Dried yeast

Bước 6: Đổ đầy hoàn toàn thể tích còn lại trong mỗi ống nghiệm bằng huyền phù nấm men đã được chuẩn bị

Bước 7: Đậy kín ống nghiệm bằng giấy parafin

Bước 8: Đặt các ống vào giá và ủ ở 50°C

Bước 9: Đo chiều cao (mm) của bọt khí CO2 tích lũy sau 10, 20, 40 và 60 phút Ghi lại kết quả của bạn trong Worksheet 1 và vẽ biểu đồ

CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ THẢO LUẬN

4.1 Kết quả và thảo luận

4.1.1 Kết quả

Sau khi thực hiện thí nghiệm theo quy trình đo chiều cao (mm) của bọt khí CO2

tích lũy sau 10, 20, 40 và 60 phút Đã ghi nhận được kết quả như sau:

Ống chứa peptton:

Sau 10 phút Sau 20 phút Sau 40 phút Sau 60 phút

Ống chứa Mantose:

Sau 10 phút Sau 20 phút Sau 40 phút Sau 60 phút

Ống chứa nước:

Sau 10 phút Sau 20 phút Sau 40 phút Sau 60 phút 4.1.2 Xử lý số liệu

4.1.2.1 Nghiệm thức 1: Ống chứa pepton

Bảng 1: Chiều cao (mm) của cột khí CO2 sinh ra trong ống nghiệm P1 – P5

Thời gian

(phút)

P1 (mm)

P2 (mm)

P3 (mm)

P4 (mm)

P5 (mm)

- Giá trị TB của lượng CO2 sinh ra: 0,7

- Ghi lại giá trị TB cho các lần lặp lại của đối chứng:

+ Lần 1 (10 phút): 0

+ Lần 2 (20 phút): 0

+ Lần 3 (40 phút): 0

+ Lần 4 (60 phút): 2,8

Hình 2: Biểu đồ lượng CO2 sinh ra trong P1 – P5

Bảng 2 Độ lệch chuẩn của cột khí CO2 ở nghiệm thức 1

CO 2 (mm) (1) Trung bình (2)

Độ lệch (sd)

(1)-(2)

Bình phương

độ lệch (sd) 2

Tính giá trị phương sai:

Phương sai = Tổng bình phương độ lệch N−1 =76,8

Độ lệch chuẩn SD =√19,2=4.38

Vậy lượng CO2 sinh ra khi cho nấm men phân giải pepton trong 60 phút qua 5 lần lặp lại là 19,2 ± 4.38

4.1.2.2 Nghiệm thức 2: Ống chứa mantose

Bảng 3: Chiều cao (mm) của cột khí CO2 sinh ra trong ống nghiệm M1 – M5

Thời gian

(phút)

M1 (mm)

M2 (mm)

M3 (mm)

M4 (mm)

M5 (mm)

20 0 0 0 0 0

- Giá trị TB của lượng CO2 sinh ra: 0

- Ghi lại giá trị TB cho các lần lặp lại của đối chứng:

+ Lần 1 (10 phút): 0

+ Lần 2 (20 phút): 0

+ Lần 3 (40 phút): 0

+ Lần 4 (60 phút): 0

Hình 3: Biểu đồ lượng CO2 sinh ra trong M1 – M5

Bảng 4 Độ lệch chuẩn của cột khí CO2 ở nghiệm thức 2

CO 2 (mm) (1) Trung bình (2)

Độ lệch (sd)

(1)-(2)

Bình phương

độ lệch (sd) 2

Tính giá trị phương sai: