Tb và ktcnsh báo cáo chiều thứ 3 nhóm 1 phân lập và định danh nấm có khả năng phân hủy nhựa pe

Trang 5 Xác định một số chủng nấm có khả năng phân hủy nhựa PE.. Một số nghiên cứu trước đây về nấm phân hủy PENấm Enzyme Kỹ thuật, đánh giá phân tích NguồnAlternaria alternata Gao et a

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

Tp Hồ Chí Minh, ngày 24 tháng 10 năm 2023

Sinh viên thực hiện: 21126325 Lý Gia Hân

21126413 Dương Võ Phương Ngân

21126482 Đặng Thị Bảo Quyên

PHÂN LẬP VÀ ĐỊNH DANH MỘT SỐ CHỦNG NẤM

CÓ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY NHỰA POLYETHYLENE

GVHD: TS Huỳnh Văn Biết

I Giới thiệu Nguồn ảnh: vtv.vn

2

Ô NHIỄM RÁC THẢI NHỰA

I Giới thiệu I Giới thiệu

Rác thải

nhựa

• Khoảng 500 tỉ đến 1000 tỉ túi

nhựa được tiêu thụ

• Năm 2020, khoảng 367 triệu

Xác định một số chủng nấm có khả năng phân hủy nhựa PE

Mục tiêu

4

I Giới thiệu

Bảng 1 Một số nghiên cứu trước đây về nấm phân hủy PE

(Paço et al., 2017) Zalerion maritimum

Manganese peroxidase

FTIR, XRD, GC-MS, GPC, SEM, Genomic, RNA Seq,

FTIR-ATR NMR Spectroscopy, SEM,

optical & electron microscopy

Enzyme assays, Protein purification, HT-GPC,

-2 Nội dung nghiên cứu

PHÂN HỦY PE

• Hình thái + Đại thể

+ Phân tích kết quả chụp SEM

6

Đại thể

Hình 3 Phanerodontia

chrysosporium

Ủ ở 37 độ C quan sát trong 21 ngày

+ Ghi nhận đặc điểm đặc trưng

+ Mô tả hình thái khuẩn lạc: màu sắc, hình dạng, vòng đồng tâm

+ Tốc độ sinh trưởng

8

==> Kết quả mô tả tương tự với

mô tả của các nghiên cứu trước đây

(Burds.) Hjortstam &; Ryvarden

2010

Vi thể

3 Phương pháp nghiên cứu

3.2 Định danh hình thái

• Lactophenol cotton blue (LPCB) nhuộm màu

• Kính hiển vi với độ phóng đại 40X, 100X

Hình 4 Phanerodontia chrysosporium

a-c Conidiophores phân nhánh mang conidia cuối

d–f Conidia bị cụt ở một đầu (bào tử đơn)

hoặc cả hai đầu (bào tử đốt)

g–h Bào tử bào tử có thành dày (Thanh= 5 μm)m)

+ Quan sát cấu trúc của sợi nấm, chiều rộng, vách ngăn

+ Hình dạng, kích thước bào tử

+ Cành sinh bào tử+ Cấu trúc đặc trưng

9

(Burds.) Hjortstam &; Ryvarden

2010

==> Kết quả mô tả tương tự với

mô tả của các nghiên cứu đây

3 Thu thập - phân lập - định danh

3.3 Định danh sinh học phân tử

Chuẩn bị

mẫu nấm

10

11

12

• Thêm Chloroform theo tỷ lệ 1:1

20 phút

13

Ly tâm

• Rửa 3 lần với Ethanol 70%

• 500μm)L dd đệm

ly giải

• Tỷ lệ dung dịch nổi và ethanol 95%

3 Thu thập - phân lập - định danh

3.3 Định danh phân tử

• ITS1F (F)

• ITS4 (R)

CHU TRÌNH NHIỆT

Bảng 2: Các đoạn mồi được sử dụng trong nghiên cứu

Bảng 3: Chu trình nhiệt của phản ứng PCR

Nguồn: doi:10.1371/journal.pone.0097629.t001

Nguồn: doi:10.1080/12298093.2022.2152951 14

ĐIỆN DI PHÂN TÍCH DNA

3 Thu thập - phân lập - định danh

3.3 Định danh phân tử

• Máy phân tích ADN ABI 3730XL

được sử dụng bằng kỹ thuật điện

di mao quản gel (CGE) : gel

• Tất cả các trình tự đều được làm bằng ứng dụng FinchTV v.1.4 và được xác

4 Đánh giá khả năng phân hủy PE

+ CFBSDA: Bổ sung 15g agar vào 1L môi trường LCFSDA

+ LCFSDA: Nước cất 1L, Peptone 10g, PE 1g

16

Phương pháp phân tích

các chỉ tiêu

Khảo sát tấm PE trong môi trường LCFSDA

Phân tích kết quả chụp SEM

17

18

Hình 8 Kết quả chụp tấm PE dưới

kính hiển vi điện tử SEM

Nguồn: Đặng Thị Ngọc Sang và ctv (2020)

Hình 7 Khảo sát sự thay đổi của

tấm PE trong môi trường LCFSDA

Ống nghiệm 1: Mẫu không có chủng nấm

Ống nghiệm 2: Mẫu có chủng

nấm

19

4.3 Kết quả dự kiến

• Xác định được các chủng có khả năng sinh trưởng trên môi trường đặc hiệu có bổ sung PE

• Nghiên cứu này sẽ sàng lọc được chủng có tiềm năng phân hủy PE cao để tiến

hành các thực nghiệm tiếp theo.

4 Đánh giá khả năng phân hủy PE

• Thử nghiệm kiểm tra độc tính các chủng

nấm để ứng dụng phát triển một số giải

pháp giải quyết các vấn đề ô nhiễm môi

trường do nhựa gây ra.

TÀI LIỆU THAM KHẢO

1 Yang, J., Yang, Y., Wu, W.-M., Zhao, J., & Jiang, L (2014) Evidence of Polyethylene

Biodegradation by Bacterial Strains from the Guts of Plastic-Eating Waxworms Environmental Science &

5 Dang Thi Ngoc Sang, Le Thi Cuc Dung, & Nguyen Thuy Huong (2020) Isolating, screening and selecting

polyethylen able of degrading microorganisms Ho Chi Minh City University of Education Journal of Science, 17(11), 2198-2209

CẢM ƠN THẦY

VÀ CÁC BẠN

ĐÃ CHÚ Ý LẮNG

NGHE!