Trang 1 ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LIÊN QUAN ĐẾN KHẢ NĂNG THÚC ĐẨY Trang 4 TỔNG QUAN01 Trang 8 chuyển đổi nitơ thành dạng cây có thể sử dụng được và quá trình này được gọi là cố định N2
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LIÊN QUAN ĐẾN KHẢ NĂNG THÚC ĐẨY TĂNG TRƯỞNG THỰC VẬT CỦA MỘT SỐ DÒNG XẠ KHUẨN Streptomyces spp TP, HỒ CHÍ MINH, 11/2023 1 Nội dung 1 Tổng quan 2 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu THÀNH VIÊN NHÓM HỌ VÀ TÊN MSSV Cao Minh Trực 21126559 Nguyễn Văn Tân 21126493 Phạm Nhật Trường 21126562 01 TỔNG QUAN 4 Giới thiệu về Streptomyces • Vi khuẩn gram dương dạng sợi • Tạo ra các hợp chất có hoạt tính sinh học như các hợp chất kháng khuẩn, chống ký sinh trùng và ức chế miễn dịch thông qua chuyển hóa thứ cấp 5 MỐI LIÊN HỆ VỚI THỰC VẬT CÓ MỐI LIÊN HỆ CÓ LỢI VỚI THỰC VẬT, GIÚP CẢI THIỆN SỰ PHÁT TRIỂN CỦA THỰC VẬT VÀ BẢO VỆ CHỐNG LẠI SÂU BỆNH 6 CƠ CHẾ THÚC ĐẨY TĂNG TRƯỞNG THỰC VẬT CỦA STREPTOMYCES TRỰC TIẾP GIÁN TIẾP • Cố định nito • Đối kháng • Hòa tan các hợp chất • Sản xuất siderophore • Enzyme phân hủy chứa phosphorus • Hòa tan các hợp chất thành tế bào • Sản xuất kháng sinh chứa kali 0 CỐ ĐỊNH NITO SỰ HOÀ TAN chuyển đổi nitơ thành dạng 0 PHOTPHORUS cây có thể sử dụng được và Sự hòa tan photphat là sự khoáng hóa 1quá trình này được gọi là cố 2photphat từ đất bởi phosphatase hoặc định N2 sinh học phosphohydrolase 0 SỰ HOÀ TAN KALI Kali là chất dinh dưỡng đa lượng 3cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển của cây trồng GIÁN TIẾP ĐỐI KHÁNG SẢN XUẤT ENZYME PHÂN SIDEROPHORE HỦY THÀNH TẾ BÀO 9 Sự sản sinh Indole Acetic Acid (IAA) • IAA là auxin tự nhiên phổ biến nhất được tìm thấy ở thực vật và có tác động tích cực đối với sự phát triển của rễ Có tới 80% vi khuẩn vùng rễ có thể tổng hợp IAA • IAA vi khuẩn nới lỏng thành tế bào rễ và dẫn tới sự gia tăng lượng dịch tiết rễ, cung cấp thêm chất dinh dưỡng cho sự tăng trưởng của vi khuẩn • Tryptophan (Trp) là một amino acid thường được tìm thấy trong dịch tiết rễ, là tiền chất cho việc sinh tổng hợp IAA bởi vi khuẩn 10 STRESS PHI SINH HỌC Cây trồng có thể bị stress do nhiều nguyên nhân: 11 02 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1 VẬT LIỆU MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY • Tryptone soya broth (TSB) • Tryptone soya agar (TSA) • Môi trường Pikovskaya Agar • Môi trường King B CÁC LOẠI THUỐC THỬ • Thuốc thử Salkowskii • Thuốc thử Lugol PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU • Khảo sát • Nghiên cứu khả năng thúc đẩy tăng trưởng cho cây trồng • Nghiên cứu khả năng chống chịu stress mặn 1 KHẢO SÁT KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN STREPTOMYCES SPP BẰNG PHƯƠNG PHÁP INDOLEPHENOL BLUE Máy lắc 60 vòng/phút phenol + NH4+ 1 mL dịch vi khuẩn đã ĐO Nhiệt độ phòng > màu xanh ly tâm OD 48h 4 mL H2O 636 5 mL Hypocloride nm buffer 5 mL thuốc thử 1 Phenol Nitroprusside KHẢO SÁT KHẢ NĂNG TỔNG HỢP IAA BẰNG PHƯƠNG PHÁP SALKOWSKI 0,1% Tryptophan 3 ngày đem dịch ly tâm 2 ml dịch trong cho 125 vòng/phút 3500 vòng/phút trong 20 vào 8 ml thuốc thử Tối, 30°C , 72 giờ phút Salkowski KHẢO SÁT KHẢ NĂNG HÒA TAN PHOTPHO OD600nm = Cấy tại 3 điểm Ủ ở 30°C trong 0,5 mỗi điểm 0,5µL 3 ngày Pikovskaya Agar KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SINH CÁC ENZYME NGOẠI BÀO 37º 5000 vòng/phút ở 4ºC C 40 µl dịch ly tâm King B agar Nghiên cứu khả năng thúc đẩy của vi khuẩn đến nảy mầm hạt cà chua Hạt cà chua được khử trùng Ngâm trong huyền phù vi khuẩn (OD600nm = 0,1), trong 60 phút 30 hạt được gieo lên đĩa Petritẩm 10mL nước cất hoặc các dung dịch NaCl 75mM và 150mM Ủ các đĩa ở (25±1) °C NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỔI KIẾN TRÚC RỄ Sau 7 ngày đồng nuôi cấy, sử dụng kính hiển vi quang học để quan sát bộ rễ của cà chua trên đĩa thạch Phân tích các thông số: • Tổng chiều dài bộ rễ • Chiều dài rễ chính • Chiều dài trung bình lông rễ