Bài báo khoa học rau ngổ trâu đinh thị ngọc tuyền 1

Trang 1 ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN CƠNG NGHỆ TRONG Q TRÌNH TRÍCH LY CÁC HỢP CHẤT SINH HỌC TỪ RAU NGỔ TRÂU VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME CELLULASE Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.. TÓ

Kỷ yếu Hội thảo Khoa học ẢNH HƯỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN CƠNG NGHỆ TRONG Q TRÌNH TRÍCH LY CÁC HỢP CHẤT SINH HỌC TỪ RAU NGỔ TRÂU VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME CELLULASE Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths Trần Chí Hải Trường Đại học Cơng nghiệp Thực phẩm Thành phố Hồ Chí Minh * Email: tuyenngoc1812001@gmail.com Ngày nhận bài:… ; Ngày chấp nhận đăng: … TÓM TẮT Nghiên cứu nhằm khảo sát điều kiện ảnh hưởng đến q trình trích ly hợp chất sinh học từ rau ngổ trâu (Enhydra fluctuans Lour) với hỗ trợ enzyme cellulase Mẫu bột rau ngổ trâu khảo sát trích ly yếu tố tỉ lệ enzyme/nguyên liệu (0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 µL/g), pH (3, 4, 5, 6), thời gian trích ly (30, 60, 90, 120, 150, 180 phút), nhiệt độ (40, 45, 50, 55, 60oC) Hàm mục tiêu thí nghiệm đánh giá thơng qua hàm lượng triterpenoid tổng hàm lượng polyphenol tổng dịch chiết thu Kết cho thấy, điều kiện trích ly phù hợp tỉ lệ enzyme cellulase/nguyên liệu 50 μL/g, pH môi trường với tỉ lệ nguyên liệu dung môi 1/20 (w/v) 50oC Tại điều kiện này, hàm lượng triterpenoid hàm lượng polyphenol đạt 142,02 ± 0,49 4,14 ± 0,01 mg/g chất khơ Ngồi ra, dịch chiết thu có khả kháng oxy hóa theo DPPH tương đương 20 ± 0,124 mg Trolox/mL Từ khóa: Enhydra fluctuans Lour, enzyme cellulase, khả kháng oxy hóa, polyphenol, triterpenoid MỞ ĐẦU Rau ngổ trâu (Enhydra fluctuans Lour) thuộc họ Cúc Asteraceae (Compositae) loại thân thảo, ăn được, phân bố vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Lá cưa, thuôn dài tuyến tính, khơng cuống đối diện, dài 2,5 – 7,6 cm Thân cao 0,3 - 0,6 m, thon dài, có rễ đơn phân đôi đốt [1] Ở Việt Nam, chúng biết đến với tên gọi ngổ đắng, cúc thơm, …, mọc phổ biến đầm lầy, ruộng rau, nơi có độ ẩm cao, … Đặc biệt, vào mùa nước miền Tây, rau ngổ trâu phát triển nhanh chiếm sản lượng lớn năm Các mơ hình trồng rau mùa nước góp phần cải thiện đời sống người dân nơi Thông thường, rau ngổ trâu thường sử dụng loại rau dùng bữa ăn hàng ngày người dân miền Tây hay trồng làm cảnh thủy sinh Bên cạnh đó, loại thuốc dân gian quý Việt Nam giới Theo vài nghiên cứu, người ta nhận thấy rau ngổ trâu có chứa hợp chất polyphenol, lutein, saponin, triterpenoid, … Và có cơng dụng điều trị số bệnh tiêu đờm, giảm ho, có tính giải độc điều trị số bệnh viêm, bệnh da, thủy đậu [2] Trích ly hợp chất hoạt tính sinh học từ thực vật với hỗ trợ enzyme giải pháp thay tiềm cho phương pháp trích ly dựa dung mơi thơng thường Trích ly với hỗ trợ enzyme dựa khả vốn có enzyme để xúc tác phản ứng Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.Trần Chí Hải với tính đặc hiệu, tính chọn lọc khả hoạt động điều kiện xử lý ơn hịa nước [3] Phương pháp thân thiện với mơi trường có khả ứng dụng cao công nghệ thực phẩm công nghệ điều chế hợp chất dược phẩm [4] Tại Việt Nam, việc khảo sát trình trích ly hợp chất sinh học với hỗ trợ enzyme rau ngổ trâu chưa có nhiều nghiên cứu Vì vậy, nhằm bổ sung thêm liệu khoa học q trình trích ly có hỗ trợ enzyme loại nguyên liệu này, tạo sản phẩm thực phẩm chức năng, dược phẩm mới, nghiên cứu tiến hành đánh giá ảnh hưởng số điều kiện công nghệ tỉ lệ enzyme/nguyên liệu, pH, nhiệt độ thời gian xử lý enzyme đến trình thu nhận hợp chất sinh học có rau ngổ trâu NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu 2.1.1 Nguyên liệu Rau ngổ trâu thu mua trang trại trồng rau thuộc ấp Đai Tèn, xã Lương Hòa A, huyện Châu Thành, tỉnh Trà Vinh Nguyên liệu chọn lựa rau ngổ già, thu hoạch sau - tuần từ gieo trồng, nhằm thu hợp chất sinh học cao Rau ngổ trâu sau thu nhận làm sạch, loại bỏ tạp chất (trứng ốc, thân hư, dập, úng), phân loại, phơi khô, nghiền nhỏ sàng qua rây 0,3 mm Mẫu nguyên liệu sau xử lý đạt độ ẩm 4,5 ± 0,1% Cuối cùng, bột cho vào túi zip tráng bạc hai mặt bảo quản - 5oC trước sử dụng 2.1.2 Hóa chất thiết bị Enzyme Viscozyme L hãng Novozymes (hỗn hợp β-glucanase, pectinase, hemicellulase xylanase); hoạt động động vùng; pH 4,5 – 5,5, nhiệt độ từ 40oC – 50oC; có hoạt lực 100 FBG/g Thuốc thử Folin-Ciocalteu (Merck), 2,2-Diphenyl-1picrylhydrazyl (DPPH) (Merck), vanillin 99,5% (Himedia), acid perchloric (Alpha Chemika), ethanol 99,5%, ethyl acetat, acid acetic, acid gallic, acid oleanolic Các hóa chất khác loại dùng cho phân tích Thiết bị sử dụng: thiết bị đo pH để bàn SI Analytics Lab 855, thiết bị khuấy từ gia nhiệt IKA C-MAG HS 7, bể ổn nhiệt Memmert WNB22 (Đức), thiết bị ly tâm Hermle Z206A (Đức), thiết bị cô quay chân không Eyela (Nhật Bản), Máy đo quang phổ UV-VIS Jenway 7305 với dải bước sóng 198 đến 1000 nm, đồ truyền quang đến 199,9%, độ xác ± 1% T, ± 0,01 ABS mức độ hấp thụ 1000 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng thông số công nghệ đến q trình trích ly có hỗ trợ enzyme Bột rau ngổ trâu cân xác 2,00g, phối trộn với nước cất tỉ lệ 1/20 (w/v), điều chỉnh pH acid HCl 1N base KOH 10% điều nhiệt bể ổn nhiệt nhiệt độ khảo sát (khoảng phút) Sau đó, hỗn hợp bổ sung enzyme cellulase, tính thời gian ủ mẫu Mẫu sau xử lý enzyme bổ sung ethanol tinh khiết đến nồng độ 70%, trích ly pH 5, thời gian 120 phút, nhiệt độ 45ºC Kết thúc thời gian trích ly, mẫu ly tâm tách cặn 5000 vịng/phút 15 phút Dịch trích xác định thể tích ống đong 50 mL, bảo quản lọ chứa mẫu xác định tiêu cần theo dõi 2.2.2 Bố trí thí nghiệm Trong nghiên cứu này, bốn thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ enzyme/nguyên liệu, pH môi trường, nhiệt độ thời gian xử lí quy trình trích ly hợp chất sinh học từ rau ngổ trâu với hỗ trợ enzyme cellulase sẽ tiến hành liên tiếp để chọn điểm thích hợp cho yếu tố khảo sát − Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ enzyme/nguyên liệu đến trình trích ly Các tỉ lệ enzyme/nguyên liệu lựa chọn để tiến hành thí nghiệm khảo sát bao gồm 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 µL/g nguyên liệu điều kiện trích ly cố định pH 4,5, nhiệt độ 45oC 120 phút − Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng pH môi trường đến trình trích ly Các điểm pH lựa chọn để khảo sát pH 3, 4, 5, điều kiện trích ly cố định nhiệt độ 45oC vịng 120 phút với tỉ lệ enzyme/nguyên liệu chọn từ thí nghiệm − Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ xử lí đến trình trích ly Các điểm nhiệt độ lựa chọn khảo sát khoảng từ 40oC đến 60oC với bước nhảy 5oC, với tỉ lệ enzyme/nguyên liệu pH xử lí cố định từ kết hai thí nghiệm thời gian ủ mẫu 120 phút − Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng thời gian xử lí enzyme đến trình trích ly Thời gian khảo sát chọn khoảng từ 30 đến 180 phút, bước nhảy thời gian 30 phút Các điều kiện nồng độ enzyme, pH nhiệt độ cố định từ thí nghiệm 2.2.2 Cơ đặc dịch chiết Dịch chiết thu từ q trình trích ly sẽ đem cô quay chân không nhiệt độ 50oC 45 phút áp suất 150mmHg thiết bị Eyela (Nhật Bản) đến hệ số cô đặc thể tích 10 lần tiến hành đo khả kháng oxy hóa DPPH theo hàm lượng chất kháng oxy hóa tương đương nồng độ chất kháng oxy hóa chuẩn Trolox phân tích thành phần hóa học phương pháp sắc ký khí – khối phổ GC-MS 2.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 2.3.1 Phương pháp phân tích Xác định hàm lượng triterpenoid tổng phương pháp quang phổ so màu bước sóng 550 nm với chất chuẩn acid oleanolic [5] Xác định hàm lượng polyphenol tổng theo phương pháp quang phổ so màu bước sóng 765 nm với chất chuẩn acid gallic [6] Xác định khả chống oxy hóa theo DPPH xác định theo phương pháp Tarbart cộng với số thay đổi [7] Hỗn hợp sau phản ứng đo độ hấp thu bước sóng 517 nm với chất chuẩn Trolox Phân tích sắc ký ghép khối phổ: Dịch chiết phân tích thành phần hóa học phương pháp sắc ký khí – khối phổ (GC – MS) theo nghiên cứu Mohd F A Bakar Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.Trần Chí Hải cộng với số hiệu chỉnh [8] Dịch chiết sau cô đặc làm khô Na2SO4, bơm vào hệ thống sắc ký Agilent 7890A ghép với khối phổ (công nghệ Agilent) Quá trình phân tách mẫu diễn cột DB-5MS (30ml.x0,25 mm i.d., bề dày 0,25m) Điều kiện hoạt động hệ thống GC – MS theo trình tự sau: nhiệt độ tăng từ 50 – 260oC với tốc độ 10 oC/phút, sau giữ đẳng nhiệt 10 phút Mẫu sẽ bơm vào thiết bị với thể tích L, khí heli khí mang, tốc độ 1ml/phút Phổ sắc ký vận hành 70 eV, tổng thời gian thực cho trình sắc ký 35 phút Những hợp chất định danh GC – MS sẽ so sánh với hợp chất nằm liệu ngân hàng NIST 2.3.2 Phương pháp xử lý số liệu Trong nghiên cứu này, thí nghiệm tiến hành lặp lại lần, kết trình bày dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Phân tích phương sai nhân tố kiểm định LSD để đánh giá khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa 5% tiến hành phần mềm phân tích số liệu Minitab 18 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng của tỉ lệ enzyme/nguyên liệu đến quá trình trích ly triterpenoid polyphenol từ rau ngổ trâu với hỗ trợ của enzyme cellulase Hình Ảnh hưởng tỉ lệ enzyme/nguyên liệu đến hàm lượng chất trích ly (Các kí tự giống cột hàm mục tiêu thể khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê với mức ý nghĩa 5%) Hình cho thấy tỉ lệ enzyme/nguyên liệu từ – 70 µL/g, hàm lượng triterpenoid polyphenol tăng cao tới tỉ lệ 50 µL/g, tỉ lệ 50 µL/g hàm lượng triterpenoid đạt 136,53 ± 0,59 mg/g hàm lượng polyphenol đạt 3,72 ± 0,02 mg/g Nhưng sau đó, hàm lượng hợp chất sinh học không tăng thêm đáng kể tỉ lệ enzyme/nguyên liệu tăng Mẫu sử dụng tỉ lệ enzyme/nguyên liệu 50 µL/g, hàm lượng triterpenoid polyphenol tăng thêm 1,084 0,16% so với mẫu khơng xử lí enzyme điều kiện Điều cho thấy, tỉ lệ enzyme/nguyên liệu 50 µL/g tỉ lệ enzyme/nguyên liệu cần thiết để trình trích ly triterpenoid polyphenol từ rau ngổ trâu đạt hiệu trích ly tốt nhất, việc tăng thêm lượng enzyme cellulase sau khơng cần thiết vì sẽ tăng thêm kinh phí, làm giảm hiệu kinh tế quy trình trích ly hợp chất sinh học từ rau ngổ trâu với hỗ trợ enzyme cellulase Khi tỉ lệ enzyme/nguyên liệu tăng từ đến 50 µL/g thì hàm lượng triterpenoid polyphenol tăng cao hoạt động phân cắt enzyme cellulase "phá vỡ" phân tử cellulose thành monosaccharide "đường đơn" β-glucose, thành polysaccharide ngắn oligosaccharide Về nguyên tắc, với lượng chất xác định, tỉ lệ enzyme/nguyên liệu tăng thì hiệu suất phản ứng enzyme tăng Tuy nhiên tăng tỉ lệ enzyme/nguyên liệu, lượng enzyme tăng cao so với lượng chất có sẵn dẫn đến hiệu suất phản ứng sẽ không tăng lượng enzyme dư thừa so với lượng chất có sẵn nên không đủ chất cho enzyme hoạt động, đồng thời dẫn đến cạnh tranh chất [9-10] 3.2 Kết khảo sát ảnh hưởng của pH mơi trường đến quá trình trích ly triterpenoid polyphenol từ rau ngổ trâu với hỗ trợ của enzyme cellulase Hình Ảnh hưởng pH đến trình trích ly hợp chất sinh học với hỗ trợ enzyme cellulase (Các kí tự giống cột hàm mục tiêu thể khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê với mức ý nghĩa 5%) Qua trình khảo sát cho thấy, pH tăng từ pH lên pH 6, mẫu xử lí enzyme thì hàm lượng hợp chất sinh học tăng cao, đạt giá trị cực đại pH với hàm lượng triterpenoid polyphenol trung bình thu 134,48 ± 1,75 mg/g 3,70 ± 0,02 mg/g, tăng 1,19% hàm lượng triterpenoid 0,16% hàm lượng polyphenol so với mẫu giá trị pH Điều cho thấy, khả hoạt động enzyme cellulase sử dụng khảo sát hoạt động tốt vùng acid yếu pH - hoạt động tốt pH Qua thấy enzyme bị ức chế pH môi trường tăng dần trung tính, làm giảm khả phân cắt cellulose tế bào rau ngổ thành monosaccharide, làm giảm hiệu trích ly Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.Trần Chí Hải 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ mơi trường trích ly đến quá trình trích ly triterpenoid polyphenol từ rau ngổ trâu với hỗ trợ của enzyme cellulase Hình Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến trình trích ly hợp chất sinh học với hỗ trợ enzyme cellulase (Các kí tự giống cột hàm mục tiêu thể khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê với mức ý nghĩa 5%) Kết thí nghiệm cho thấy, nhiệt độ tăng từ 40oC lên 50oC, hàm lượng hợp chất sinh học tăng cao Ở 50oC, hàm lượng hợp chất sinh học đạt giá trị cực đại 145,11 ± 1,18 mg/g triterpenoid 4,56 ± 0,04 mg/g polyphenol (Hình 3) Qua biểu đồ (Hình 3) cho thấy nhiệt độ ảnh hưởng lớn đến hoạt động enzyme cellulase, nhiệt độ tăng làm cho cấu tử chuyển động nhanh hơn, hịa tan khả khuếch tán cấu tử từ nguyên liệu vào dung môi sẽ tăng giảm độ nhớt dung môi, tăng khả truyền khối xâm nhập dung môi vào tế bào (Al-Farsi & Lee, 2008) [11] Mặt khác, theo Mohamad et al (2010), nhiệt độ tăng làm giảm rào cản tế bào suy yếu thành màng tế bào, kết làm dung môi dễ dàng tiếp xúc với hoạt chất, làm tăng khả trích ly [12] Tuy nhiên, phản ứng với tham gia enzyme, gia tăng nhiệt độ q cao q trình trích ly làm biến tính enzyme, làm biến đổi trung tâm hoạt động enzyme, khiến phản ứng xúc tác enzyme không thực Enzyme cellulase Viscozyme L sử dụng thí nghiệm cho khoảng nhiệt độ hoạt động tốt khoảng nhiệt độ tương đối rộng từ 40ºC đến 60ºC, hoạt động tốt nhiệt độ 50ºC 3.4 Kết khảo sát ảnh hưởng của thời gian đến quá trình trích ly triterpenoid polyphenol từ rau ngổ trâu với hỗ rợ của enzyme cellulase Hình Ảnh hưởng thời gian trích ly đến hàm lượng hợp chất sinh học dịch trích ly rau ngổ trâu (Các kí tự giống cột hàm mục tiêu thể khác biệt khơng có ý nghĩa mặt thống kê với mức ý nghĩa 5%) Tại thời điểm 30 phút hàm lượng hợp chất sinh học 108,40 ± 1,03 mg/g 3,72 ± 0,00 mg/g sau tăng lên 0,310% 0,11% sau 120 phút, cho thấy hoạt động phân cắt thành tế bào enzyme cellulase diễn tương đối mạnh, giúp cho triterpenoid polyphenol hồ tan vào dịch trích ly tốt Về ngun tắc, kéo dài thời gian thì hiệu suất trích ly cao, điều thể qua kết thí nghiệm Song, tiếp tục kéo dài thời gian, thì hàm lượng polyphenol tăng thời gian trích kéo dài đến 150 phút có dấu hiệu giảm nhẹ kéo dài thời gian chiết 180 phút, hàm lượng triterpenoid khơng tăng thêm mà có xu hướng giảm nhẹ (Hình 4) Điều lí giải sau 120 phút trích ly hàm lượng hợp chất sinh học đạt trạng thái cân bên bên ngồi tế bào nên q trình trích ly chậm lại Bên cạnh đó, triterpenoid dễ bị oxy hóa kéo dài thời gian trích ly kèm nhiệt độ cao [13], điều lý giải cho kết 3.6 Khả kháng oxy hóa Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.Trần Chí Hải Hình Phân tích GC - MS dịch rau ngổ trâu Dịch chiết rau ngổ trâu sau cô quay chân không đạt hàm lượng triterpenoid polyphenol 543,07 ± 1,57 mg/g 19,16 ± 0,04 mg/g, tiến hành xác định khả kháng oxy hóa theo DPPH Kết cho thấy khả kháng oxy hóa dịch chiết với hỗ trợ enzyme đạt 20,47 ± 0,12 mg Trolox/mL, cao gấp đôi so với mẫu trích ly chiết ethanol Điều tác dụng enzyme, phần cấu trúc tế bào nguyên liệu phá vỡ hợp chất sinh học có khả kháng oxy hóa nằm bên tế bào sẽ dễ dàng ngồi theo dung mơi Ngồi ra, phân tích phương pháp sắc ký khí - khối phổ (GC - MS), dịch chiết có chứa 2-Hydroxy-4-methylbenzaldehyde; 3,5-Dihydroxy-6-methyl-2,3-dihydro-4H-pyran4-one; 1,3-Dioxol-2-one,4,5-dimethyl; 5-Hydroxymethylfurfural; acid quinic (Hình 4, Bảng 2) Đây hợp chất có khả kháng oxy hóa, phịng ngừa ung thư, hỗ trợ điều trị đái tháo đường [14-17] Điều chứng tỏ rau ngổ trâu có tiềm việc sử dụng làm thuốc kháng oxy hóa [18] Bảng Thành phần hợp chất hóa học dịch chiết rau ngổ trâu trích ly với hỗ trợ enzyme cellulase Peak Hợp chất Thời gian (phút) Cơng thức Diện tích peak (%) 2-Hydroxy-4methylbenzaldehyde 24,02 C8H8O2 6,41 3,5-Dihydroxy-6-methyl-2,3dihydro-4H-pyran-4-one 18,06 C6H8O4 3,13 1,3-Dioxol-2-one,4,5-dimethyl 14,19 C6H8O2 1,11 5-Hydroxymethylfurfural 15,18 C5H6O3 1,54 Acid quinic 13,34 C3H8O3 0,89 KẾT LUẬN Quá trình trích ly với hỗ trợ enzyme cho thấy enzyme giúp tăng cường khả thu hồi hoạt chất sinh học, từ dẫn đến tăng sản lượng giảm giá thành loại hợp chất Nghiên cứu phương pháp ngâm chiết khảo sát ảnh hưởng dung mơi đến q trình trích ly hợp chất sinh học với kết quả: Mẫu rau ngổ trâu khô sau xử lý sẽ trích ly với hỗ trợ enzyme theo tỉ lệ enzyme/nguyên liệu 50 μL/g, pH môi trường với tỉ lệ nguyên liệu dung môi 1/20 (w/v) 50oC sẽ thu dịch chiết có hàm lượng triterpenoid tổng polyphenol tổng cao là: 142,02 ± 0,49 4,14 ± 0,01 mg/g CK Dịch chiết rau ngổ trâu trích ly với hỗ trợ enzyme có khả kháng oxy hóa tốt so với dịch chiết trích ly phương pháp dung môi Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.Trần Chí Hải TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 Ali, R., Billah, M., Hassan, M., & Dewan, S M R (2013) Enhydra fluctuans Lour: a review Research Journal of Pharmacy and Technology, 6(9), 927-929 Kirtikar KR and Basu BD (2002) Indian Medicinal Plants Delhi: Sri Satguru Publications Gardossi, L., Poulsen, P B., Ballesteros, A., Hult, K., Švedas, V K., VasićRački, Đ., & Halling, P J (2010) Guidelines for reporting of biocatalytic reactions Trends in biotechnology, 28(4), 171-180 Meyer, A S (2010) Enzyme technology for precision functional food ingredient processes Annals of the New York Academy of Sciences, 1190(1), 126-132 Hadidi M., Ibarz A & Pagan J - Optimisation and kinetic study of the ultrasonic-assisted extraction of total saponins from alfalfa (Medicago sativa) and its bioaccessibility using the response surface methodology, Food Chemistry 309 (2020) 125786 Vuong, Q.V., Hirun, S., Roach, P D., Bowyer, M C., Phillips, P.A., and Scarlett, C.J., 2013 - Effect of extraction conditions on total phenolic compounds and antioxidant activities of Carica papaya leaf aqueous extracts Journal of Herbal Medicine Tarbart J., Kever, C., Pincemail, J., Defraigne, J O and Dommes, J (2009) Comparative antioxidant capacities of phenolic compounds mea-sured by various tests Food Chemistry, 113,pp 1226-1233 Mohd Fadzelly Abu Bakar et al., - Phytochemical Composition and Biological Activities of Selected Wild Berries (Rubus moluccanus L., R.fraxinifolius Poir., and R alpestris Blume 2016 W Sattler et al, The effect of enzyme concentration on the rate of the hydrolysis of cellulose, Vol N T H., Huyền, P T N., Thảo, N T T., Trọng, T., & Nguyên, H T T Q TỐI ƯU HĨA ĐIỀU KIỆN TRÍCH LY THU NHẬN TRITERPENSAPONIN TỪ RAU ĐẮNG BIỂN (Bacopa Monnieri (L.) WETTST) BẰNG ENZYME CELLULASE Al-Farsi, M.A and Lee, C.Y., 2008 Optimization of phenolics and dietary fibre extraction from date seeds Food Chemistry 108: 977-985 Mohamad, M., Ali M.W and Ahmad, A., 2010 Modelling for extraction of major phytochemical components from Eurycoma longifolia Journal of Applied Sciences, 10:2572-2577 Nguyễn Minh Anh, Phan Nguyễn Cẩm Chướng, Nguyễn Đức Việt, Trần Đỗ Đạt, Lữ Thị Mộng Thy, Huỳnh Ngọc Oanh, Hoàng Minh Nam, Mai Thanh Phong, and Nguyễn Hữu Hiếu " Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly triterpenoid từ nấm linh chi (ganoderma lucidum) phương pháp enzyme có hỗ trợ siêu âm" Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Thực phẩm 22 (1) (2022) 101-111 14 Thangam, R., Gokul, S., Sathuvan, M., Suresh, V., & Sivasubramanian, S (2019) A novel antioxidant rich compound 2-hydroxy 4-methylbenzaldehyde from Decalepis arayalpathra induces apoptosis in breast cancer cells Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, 21, 101339 15 Uchegbu, R I., Ahuchaogu, A A., Amanze, K O., & Ibe, C O (2017) Chemical constituents analysis of the leaves of Bryophyllum pinnatum by GCMS AASCIT Journal of Chemistry, 3(3), 19-22 16 Aina, D A., & Fagbemi, K O In vitro antioxidant activities and quantitative chemical composition of alcohol-based extracts of fruit pulp: A comparative study Adansonia digitata 17 Hung, T M., Na, M., Thuong, P T., Su, N D., Sok, D., Song, K S., & Bae, K (2006) Antioxidant activity of caffeoylquinic acid derivatives from the roots of Dipsacus asper Wall Journal of ethnopharmacology, 108(2), 188-192 18 Huỳnh Anh Duy, Bùi Mỹ Linh Lâm Thị Ngọc Giàu (2017b) Khảo sát thành phần hóa học Rau ngổ (Enhydra fluctuans Lour., Asteraceae) Tạp chí Dược học, (492), 53-56 Đinh Thị Ngọc Tuyền, Cao Thị Mai Hương, Ths.Trần Chí Hải ABSTRACT EFFECTS OF TECHNOLOGY CONDITIONS ON ENZYME - ASSISTED EXTRACTION OF BIOLOGICAL COMPOUNDS FROM ENHYDRA FLUCTUANS LOUR This study is intended to evaluate the technology conditions affecting the extraction of biological compounds from Enhydra fluctuans Lour Enhydra fluctuans Lour powder were investigated and extracted at the enzyme/substrate ratio factors (0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 µL/g), pH (3, 4, 5, 6), extraction time (30, 60, 90, 120, 150, 180 minutes), temperature (40, 45, 50, 55, 60oC) The results of each experiment were evaluated through the total triterpenoid content and the total polyphenol content of the extracted extracts The results showed that the suitable extraction conditions of cellulase enzyme obtained triterpenoid and polyphenol content in Enhydra fluctuans Lour respectively: 142,02 ± 0,49 mg/g and 4,14 ± 0,01 mg/g at the condition: enzyme/material ratio 50 μL/g, pH of extraction with solvent material ratio 1/20 (w/v) at 50oC for hours The obtained extract had an antioxidant capacity according to DPPH equivalent to 20,47 ± 0,12 mg Trolox/mL Keywords: antioxidant capacity, enzyme cellulase, Enhydra fluctuans Lour, polyphenols, triterpenoids