CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS .... Các nguồn tài liệu cho thấy cây chùm ruột là một loài cây được phân bố khá phổ biến ở các nước nhiệt đới gi
TỔNG QUAN
GI ỚI THIỆU VỀ CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS
Tên thông thường: cây chùm ruột
Tên gọi khác: cây tầm ruột hay cây tầm giuộc
Thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae)
Tên khoa học: Phyllanthus acidus
Hình 1.1 Cây chùm ruột 1.1.2 Phân bố
Cây chùm ruột có nguồn gốc từ Madagasca, sau đó di nhập vào nhiều nước vùng châu Á, châu Phi
Phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Ở Việt Nam, cây chùm ruột được trồng phổ biến ở miền Nam
Cây chùm ruột, theo nghiên cứu của Phạm Hoàng Hộ, Đỗ Tất Lợi, Đỗ Huy Bích và cộng sự, là loại cây nhỏ, cao từ 3–5 m, với thân nhẵn và cành có vỏ màu xám nhạt Cành non có màu lục nhạt, trong khi cành già có màu xám và nhiều vết sẹo do lá rụng để lại Lá của cây chùm ruột thuộc loại lá kép, mọc so le, với cuống dài và lá chét mỏng, mềm, có kích thước dài 4–5 cm và rộng 18–20 mm Gốc lá bầu, tròn, đầu phiến lá nhọn, mặt dưới màu xám nhạt, gân lá rõ ràng ở cả hai mặt Cụm hoa mọc ở kẽ lá đã rụng, dài từ 6–15 cm, với cuống mảnh có cạnh; hoa nhỏ màu đỏ, bao gồm cả hoa cái và hoa đực.
Khóa luận quản trị nhân lực mô tả cây có hoa đực với đài 4 răng và 4 nhị rời, trong khi hoa cái có 4 lá đài và bầu 4 ô, thường mọc thành cụm từ 4–7 hoa ở mỗi mấu tròn Quả của cây này là chùm ruột mọng, có khía, chia thành 4 mảnh, đường kính khoảng 5 mm và cuống quả dài khoảng 7 mm Khi chín, quả có màu vàng nhạt, vị chua và hơi ngọt, có thể ăn được.
1.1.4 Công dụng của cây chùm ruột trong y học cổ truyền
Theo Đỗ Tất Lợi, Đỗ Huy Bích và cộng sự, cây chùm ruột trong y học cổ truyền được sử dụng để chữa trị nhiều bệnh ngoài da Lá cây thường được nấu thành nước tắm để trị lở ngứa và mề đay, trong khi vỏ thân cây giúp tiêu hạch độc, ung nhọt, và tiêu đờm ở phổi, cũng như chữa ghẻ, loét và vết thương chảy máu Ngoài ra, vỏ cây còn được ngậm để giảm đau răng và đau họng, và bột vỏ cây ngâm giấm có tác dụng chữa bệnh trĩ Rễ và vỏ cây có độc, được người Malaysia dùng để xông hít chữa ho và nhức đầu, trong khi người dân đảo Giava sử dụng với liều lượng nhỏ để chữa hen suyễn.
Vỏ rễ sắc đặc hoặc ngâm rượu, bôi chữa vảy nến (psoriasis) Tuy nhiên, không được dùng rễ và vỏ rễ ở dạng uống [21,22]
CÁC NGHIÊN C ỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CHÙM
Nghiên cứu về cây chùm ruột Phyllanthus acidus đã chỉ ra sự hiện diện của nhiều nhóm hợp chất như alkaloid, flavonoid, lactone, steroid, terpenoid, lignan và tannin, trong đó lignan, triterpene, alkaloid và tannin là những hợp chất phổ biến nhất Các nghiên cứu hóa thực vật đầu tiên về cây này đã phát hiện và công bố sự cô lập của các triterpene và phytosterol từ những năm 1908 đến 1982.
Các hợp chất triterpene đã được cô lập thuộc khung oleane như β-amyrin (22), khung lupane như lupeol
(23) và khung cyclopropyl-hexacyclic triterpenoid như phyllanthol (24) Trong khi đó, các hợp chất sterol chủ yếu có khung sitosterol và các glycoside của chúng
Trong 15 năm qua, nghiên cứu về cây chùm ruột Phyllanthus acidus đã phát hiện và cô lập một nhóm hợp chất norbisabolane sesquiterpenoid Các hợp chất này thể hiện hoạt tính sinh học đa dạng, mở ra tiềm năng ứng dụng trong y học và các lĩnh vực khác.
2000) [8,19] Năm 2000, hai hợp chất phyllanthusol A (2) và B (3) đã được cô lập, có khung
Khóa luận quản trị nhân lực sườn serquiterpenoid loại norbisabolane gắn các phân tử đường glucosyl và mannosamine-
N-acetate (Vongvanich và cộng sự, 2000) [19] Tuy nhiên, đến năm 2014, cùng với sự cô lập
Đến nay, đã có 21 hợp chất norbisabolane được cô lập, bao gồm các hợp chất phyllanthusol A và B đã được xác nhận cấu trúc Các hợp chất này chứa hai đơn vị đường là glucopyranosyl và glucosamine-N-acetate, với tên gọi tương ứng là phyllanthacidoid A-T (1-21), trong đó có hai hợp chất phyllantacidoid S (20) và T.
Các hợp chất phyllanthacidoid, chiếm khoảng 1 mg/g trong rễ cây chùm ruột, có cấu trúc khung sườn tricyclo[3.1.1.1] độc đáo so với các hợp chất đã được cô lập trước đây Quá trình chiết xuất và phân tích hàm lượng của phyllanthacidoid A và B đã được xác nhận thông qua phương pháp điện di (capillary electrophoresis).
2010, các hợp chất kaemferol (28), adenosine (29), 4-hydroxybenzoic acid (30), hypogallic acid (31), caffeic acid (32) được cô lập từ cao n-butanol của lá cây chùm ruột (Leeya và cộng sự, 2010) [7]
CÁC NGHIÊN C ỨU VỀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY CHÙM RUỘT
Những nghiên cứu về hoạt tính sinh học trên cao chiết các bộ phận của cây chùm ruột
Phyllanthus acidus cũng khá phổ biến, như hoạt tính kháng khuẩn (Menlendez và cộng sự,
Nghiên cứu đã chỉ ra rằng các hợp chất tự nhiên có khả năng kháng nấm (Satish và cộng sự, 2009) và kháng ký sinh trùng giun đũa trên thực vật (Mackeen và cộng sự, 1997) Ngoài ra, một số nghiên cứu cũng đã xác định tác dụng điều trị bệnh sơ nang (Sousa và cộng sự, 2007; Santhosh và cộng sự, 2011) và chữa trị tổn thương gan (Nilesh và cộng sự, 2011) Đặc biệt, các hợp chất này còn giúp giảm nhẹ mỡ ở các mô, tạng, cũng như giảm lipid trong huyết thanh và gan của chuột lang trong vòng 6 tuần.
Các hợp chất thuộc khung sườn norbisabolane đã được nghiên cứu về độc tính tế bào và khả năng kháng virus viêm gan siêu vi B (HBV), với giá trị IC50 dao động từ 0.8 đến 36.0 àM (Chongsa và cộng sự, 2014; Lv và cộng sự, 2014; Vongvanich và cộng sự).
Khóa luận quản trị nhân lực
TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS
Năm 2014, Nguyễn Thái Thế đã thành công trong việc cô lập các hợp chất phenylbutanoid và diphenylheptanoid, bao gồm một hợp chất diphenylpentanoid mới Đến nay, các hợp chất có cấu trúc phenylbutanoid và phenylheptanoid vẫn chưa được công bố trong chi Phyllanthus Các hợp chất được cô lập bao gồm glochodinone, 4-[4’-(O-β-D-glucopyranosyl)phenyl-2-butanone và 1-[4’-(O-β-D-glucopyranosyl)phenyl]-5-[4”-(O-β-D-glucopyranosyl)phenyl]-3-pentanone.
Năm 2015, trong tóm tắt kết quả nghiên cứu đề tài luận văn Thạc sĩ của Võ Thị Như
Thảo đã nghiên cứu về việc tách chiết và xác định thành phần hóa học của vỏ thân cây chùm ruột Tam Kỳ, tỉnh Quảng Nam, với kết quả cho thấy độ ẩm của nguyên liệu bột khô là 8.87% và hàm lượng tro trung bình đạt 5.00% Các dịch chiết n-hexane, chloroform và etyl acetat lần lượt chứa 15, 9 và 14 cấu tử hữu cơ, bao gồm các nhóm hợp chất như acid hữu cơ, ester, vitamin và sterol Ngoài ra, nghiên cứu cũng thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của bột vỏ cây chùm ruột trên hai dòng vi khuẩn Bacillus subtilis và Klebsiella Tuy nhiên, tác giả chưa xác định được cấu trúc của hợp chất nào cô lập từ vỏ cây chùm ruột, và các kết quả này vẫn chưa có trong các báo cáo khoa học tại Việt Nam.
Khóa luận quản trị nhân lực
12.N-Ac-GlcN H 13.N-Ac-GlcN OH 14.Glc OH
Khóa luận quản trị nhân lực
Hình 1.2 Một số hợp chất cô lập từ cây Phyllanthus acidus
Khóa luận quản trị nhân lực
Hình 1.2 Một số hợp chất cô lập từ cây Phyllanthus acidus (tiếp)
Khóa luận quản trị nhân lực
THỰC NGHIỆM
LY TRÍCH VÀ CÔ L ẬP CÁC HỢP CHẤT
Vào tháng 4 năm 2014, rễ chùm ruột được thu hái tại tỉnh Bình Thuận, sau đó được rửa sạch, loại bỏ phần sâu bệnh, chặt nhỏ và phơi khô trong bóng râm Cuối cùng, rễ được nghiền thành bột và tiến hành đun chiết để phân lập các hợp chất.
Khóa luận quản trị nhân lực
2.2.2 Điều chế các loại cao
Sau khi xử lý, thu được 20.0 kg nguyên liệu dạng bột, được đun hồi lưu trong ethanol ở 80 °C trong 30 phút cho mỗi bình cầu 1000 ml Phần bã rắn được lọc bỏ, sau đó cô quay phần dịch dưới áp suất thấp để thu được 1.0 kg cao ethanol thô Một nửa lượng cao ethanol thô này được hòa tan bằng methanol nóng, tạo ra 300.0 g dịch methanol Cuối cùng, tiến hành sắc ký cột pha thuận nhiều lần bằng hệ dung môi n-hexane: ethyl acetate: methanol với độ phân cực tăng dần, thu được các phân đoạn tương ứng.
Bảng 2.1 Sắc kí cột trên dịch methanol
2.2.3 Cô lập các hợp chất hữu cơ trong cao hexane
Trên phân đoạn H1 (2.0 g), sắc kí cột silica gel được thực hiện với hệ dung môi n-hexane: ethyl acetate (9:1), thu được 4 phân đoạn H1.1 (125.0 mg), H1.2 (250.0 mg), H1.3 (152.0 mg) và H1.4 (150.0 mg) Tiếp theo, từ phân đoạn H1.2, SKC silica gel được thực hiện và giải ly bằng hệ dung môi n-hexane: methanol (100:0.2), thu được 3 phân đoạn H1.2.1 (60.0 mg).
H1.2.2 (55.0 mg) và H1.2.3 (75.0 mg) Trên phân đoạn H1.2.1 thực hiện SKC và giải ly bằng hệ dung môi n-hexane: methanol (100:0.2) thu được hợp chất T1A (Sơ đồ 2.1)
Trên phân đoạn H1.2.3 thực hiện SKC silica gel và giải ly bằng hệ dung môi n-hexane: methanol (100:0.2) thu được hợp chất CRT3A (Sơ đồ 2.1).
Khóa luận quản trị nhân lực
Sơ đồ 2.1 Quá trình trích ly và cô lập hợp chất từ rễ cây chùm ruột
Làm sạch, để khô, nghiền nhỏ
Bột khô (20.0 kg) Đun hồi lưu trong ethanol ở 80 o C trong 30 phút
Bỏ phần rắn, cô quay phần dịch
Cao ethanol thô (1.0 kg) Phần còn lại
Hòa tan một nửa cao tổng bằng methanol nóng
Phần dịch methanol (300.0 g) Phần bã còn lại (200.0 g)
Sắc kí cột Giải li bằng các dung môi khác nhau
H:EA (95:5) H:EA (9: 1) H:EA (8:2) H:EA (5:5) EA EA:Me (5:5) Me
Khóa luận quản trị nhân lực