Tối ưu hóa điều kiện trích ly các hợp chất sinh học trong lá ổi rừng bằng phương pháp có hỗ trợ sóng siêu âm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGÀNH CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM TỐI ƯU HĨA ĐIỀU KIỆN TRÍCH LY CÁC HỢP CHẤT SINH HỌC TRONG LÁ ỔI RỪNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP CÓ HỖ TRỢ SÓNG SIÊU ÂM GVHD: GVC.THS ĐẶNG THỊ NGỌC DUNG PGS.TS NGUYỄN QUANG VINH SVTH : PHẠM HUY HOÀNG SKL009248 Tp Hồ Chí Minh, tháng 12/2022 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC VÀ THỰC PHẨM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP MÃ SỐ: 2022-18116169 TỐI ƯU HÓA ĐIỀU KIỆN TRÍCH LY CÁC HỢP CHẤT SINH HỌC TRONG LÁ ỔI RỪNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP CÓ HỖ TRỢ SÓNG SIÊU ÂM GVHD: GVC.ThS ĐẶNG THỊ NGỌC DUNG PGS.TS NGUYỄN QUANG VINH SVTH: PHẠM HUY HOÀNG MSSV: 18116169 THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 12/2022 NHIỆM VỤ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Phạm Huy Hoàng MSSV: 18116169 Ngành: Cơng nghệ thực phẩm Tên khóa luận: Tối ưu hóa điều kiện trích ly hợp chất sinh học ổi rừng phương pháp có hỗ trợ sóng siêu âm Nhiệm vụ khóa luận: - Tổng quan ổi, thành phần hóa học, cơng dụng ổi, hoạt tính sinh học, tình hình nghiên cứu nước ngồi nước hợp chất có hoạt tính sinh học ổi - Tổng quan hợp chất polyphenol, flavonoid, hoạt tính chống oxy hóa khả ức chế α-amylase α-glucosidase ổi rừng, phương pháp xác định, phương pháp định tính định lượng chất hoạt tính sinh học - Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly hợp chất sinh học từ ổi rừng: nồng độ dung môi chiết, thời gian, tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết - Tối ưu hóa q trình trích ly hợp chất sinh học có ổi rừng với thơng số tối ưu yếu tố khảo sát - Đưa khuyến nghị để nghiên cứu công nghệ khoa học thực tiễn Ngày giao nhiệm vụ khóa luận: 09/2022 Ngày hồn thành khóa luận: 10/02/2023 Họ tên người hướng dẫn 1: GVC.ThS Đặng Thị Ngọc Dung Phần hướng dẫn: Tồn khóa luận Họ tên người hướng dẫn 2: PGS.TS Nguyễn Quang Vinh Phần hướng dẫn: Tồn khóa luận Nội dung yêu cầu đồ án tốt nghiệp thông qua Trưởng Bộ môn Công nghệ Thực phẩm Tp.HCM, ngày 10 tháng 02 năm 2023 Trưởng Bộ môn (Ký ghi rõ họ tên) Người hướng dẫn (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CẢM ƠN Chúng tơi xin chân thành cảm ơn Khoa Cơng nghệ Hóa học & Thực phẩm trường Đại học Sư Phạm Kỹ Thuật TPHCM Viện Công nghệ Sinh học - trường đại học Tây Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho học tập thực tốt đề tài tốt nghiệp Chúng xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới ThS Đặng Thị Ngọc Dung thầy PGS.TS Nguyễn Quang Vinh tận tình đồng hướng dẫn bảo chúng tơi q trình thực đề tài Những đóng góp Cơ Thầy có ý nghĩa quan trọng luận văn chúng tơi, bên cạnh cịn hành trang tiếp bước cho chúng tơi quãng đường dài sau Do chưa có nhiều kinh nghiệm làm đề tài hạn chế kiến thức nên khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót q trình nghiên cứu trình bày Chúng tơi mong nhận thơng cảm, góp ý, nhận xét tận tình bảo Qúy Thầy Cơ để khóa luận hồn thiện Chúng xin chân thành cảm ơn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết đạt khóa luận sản phẩm riêng cá nhân tơi, có hỗ trợ từ Cơ ThS Đặng Thị Ngọc Dung Thầy PGS.TS Nguyễn Quang Vinh Các nội dung nghiên cứu kết đề tài trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu trước Những số liệu bảng biểu phục vụ cho việc phân tích, nhận xét đánh giá tơi thu thập từ nguồn khác có ghi phần tài liệu tham khảo Nếu phát có gian lận nào, tơi xin hồn toàn chịu trách nhiệm trước Hội đồng kết luận văn Ngày 09 tháng 02 năm 2023 Ký tên ii iii iv v vi 𝑌 = 54.72 + 5.72𝑋1 + 1.41𝑋2 + 3.86𝑋3 + 0.5009𝑋1 𝑋2 − 3.36𝑋1 𝑋3 − 0.3558𝑋2 𝑋3 − 2.59𝑋12 − 4.59𝑋22 − 3.71𝑋32 Sau loại bỏ hệ số hồi quy không đảm bảo độ tin cậy khỏi mô hình, phương trình hồi quy thể ảnh hưởng biến đến hoạt tính chống oxy hóa thơng qua khả trung hòa gốc tự ABTS viết lại sau: 𝑌 = 54.72 + 5.72𝑋1 + 1.41𝑋2 + 3.86𝑋3 − 4.59𝑋22 − 3.71𝑋32 (Trong đó: Y,X1,X2,X3 Hoạt tính chống oxy hóa thơng qua khả trung hòa gốc tự ABTS; Nồng độ dung môi chiết; Thời gian; Tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết) (a) (b) (c) Hình 4.9 Bề mặt đáp ứng thể tương quan khả kháng oxy hóa thơng qua khả trung hịa gốc tự ABTS với yếu tố (a) Bề mặt đáp ứng tương tác nồng độ dung môi thời gian, (b) Bề mặt đáp ứng tương tác nồng độ dung môi tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu, (c) Bề mặt đáp ứng tương tác thời gian tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu 67 Mối quan hệ điều kiện trích ly với hoạt tính chống oxy hóa thơng qua khả trung hịa gốc tự ABTS ổi mơ tả hình 4.9 Cụ thể: X1 X3 có tương tác mạnh đến hàm mục tiêu, cịn X2 có mức độ ảnh hưởng thấp Khi tăng nồng độ dung môi tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết cao hoạt tính chống oxy hóa thơng qua khả trung hịa gốc tự ABTS có xu hướng giảm xuống (tương tự khả trung hòa gốc tự DPPH), nhiên giảm nồng độ dung môi không lớn không đáng kể so với tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết Các thơng số thời gian khơng có ảnh hưởng đáng kể, tương tác bậc biến (X22) có ảnh hưởng đáng kể đến hàm mục tiêu, cụ thể tăng thời gian chiết dài hoạt tính chống oxy hóa chúng giảm theo, kết tương đồng với khả kháng oxy hóa dựa khả trung hịa DPPH Hoạt tính chống oxy hóa ổi thu điều kiện chiết tối ưu dựa vào khả trung hòa gốc tự 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) ABTS phép thử nhằm xác định hoạt tính chống oxy hóa sử dụng phổ biến nghiên cứu chất chống oxy hóa Khả khử gốc tự DPPH xác định theo phương pháp Fu Shieh (2002) với vài hiệu chỉnh nhỏ Cụ thể khoảng 20 - 140µl dịch chiết pha lỗng đến nồng độ thích hợp trộn với nước cất để đạt thể tích tổng cộng 3mL, sau thêm 1mL dụng dịch DPPH 0.1M lắc để yên bóng tối 30 phút Ngoài ra, khả thu gốc tự DPPH ABTS phép phân tích để đánh giá hoạt tính chống oxy hóa in vitro thường sử dụng nghiên cứu, có đến 90% nghiên cứu sử dụng phép phân tích (Joon-Kwan Takayuki, 2009) Từ số liệu bảng 4.5, giá trị khả chống oxy hóa chất có dịch chiết ổi nằm khoảng 20.494 (mgTE/g dw) đến 44.900 (mgTE/g dw) DPPH, 30.880 (mgTE/g dw) đến 56.081 (mgTE/g dw) ABTS Điều cho thấy khả trung hòa gốc tự ABTS tốt so với DPPH Ngược lại so với nghiên cứu Nguyen Quang Vinh cộng (2022) việc trích ly hợp chất phenolic có ổi ảnh hưởng đến hoạt tính chống oxy hóa, cụ thể 1313,72 (mgTE/g dw) DPPH 344.74 (mgTE/g dw) đới với ABTS Kết cho giá trị kháng oxy hóa cao nhiều lần so với báo cáo khả thu gốc tự DPPH tốt so với ABTS Những khác biệt phương pháp đo khác nhau, ổi khác độ tuổi – mùa thu hái, vị trí địa lý trồng nguyên nhân lớn kể đến 68 cách bảo quản ổi đông lạnh sau thu hái (như đề cập phần trích ly hàm lượng polyphenol) Nhiều nghiên cứu có mối tương quan chặt chẽ hàm lượng polyphenol với hoạt tính chống oxy hóa (Suganya cộng sự, 2007; Hui-Yin Chen cộng sự, 2007; Trương Tuyết Mai cộng sự, 2010; Nguyễn Xuân Duy cộng sự, 2013) Nhìn chung, khả khử gốc tự DPPH ABTS dịch chiết ổi phụ thuộc vào nồng độ hay nói cách khác nồng độ tăng khả khử gốc tự DPPH ABTS tăng Khi so sánh với chất chống oxy hóa thương mại Ascorbic Trolox giá trị IC50, IC50 ổi 2.1 µg/mL cao so với Ascorbic Trolox 1.3 µg/mL 1.6 µg/mL Tức khả kháng oxy hóa ổi thấp so với chất chống oxy hóa thương mại, Ascorbic Trolox hai chất chống oxy hóa dạng tinh khiết mạnh – dịch chiết ổi dịch chiết thô, chưa đạt độ tinh khiết cao Vì vậy, muốn thiện hoạt tính khử gốc tự DPPH ABTS ổi, cần thực thêm bước để tinh dịch chiết sau trích ly (Nguyễn Xuân Duy cộng sự, 2013) ❖ Xác định kiểm chứng điều kiện tối ưu Thông qua phần mềm Design Expert 12, điều kiện trích ly tối ưu trích ly polyphenol từ ổi rừng phương pháp siêu âm sau: nồng độ dung môi chiết 53.7253 (%), thời gian 9.687 (phút), tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết 10.801 (mL/g) Để kiểm tra kết quả, tiến hành thực mẫu kiểm chứng trích ly điều kiện tối ưu Kết đo tiêu mẫu kiểm chứng thể bảng 4.18 Kết mẫu kiểm chứng nằm khoảng dự đoán tính mơ hình với độ tin cậy 95% Kết cho thấy phù hợp mô hình xây dựng so với thực nghiệm 69 Bảng 4.18 So sánh kết từ mơ hình thực nghiệm Mơ hình 95% PI low Thực nghiệm 95% PI Phần trăm high chênh lệch (%) TPC (mg 52.799 44.911 53.859 60.686 2.008% 28.894 22.554 28.518 35.234 1.300% 0.564 0.038 0.533 0.821 5.519% 0.083 0.055 0.079 0.111 4.188% 45.937 39.028 46.038 52.846 0.219% 56.832 44.299 56.978 69.364 0.257% GAE/g dw) TFC (mg QE/g dw) α-amylase (IC50, mg/mL) αglucosidase (IC50, mg/mL) DPPH (TE/g dw) ABTS (TE/g dw) Kết từ bảng 4.18 cho thấy kết thực nghiệm nằm khoảng tin cậy 95% từ giá trị thấp đến giá trị cao phần mềm dự đoán gần với kết mơ hình dự đốn, phần trăm chênh lệch kết từ mơ hình dự đốn thực nghiệm cho giá trị từ 0.219% - 5.519% điều chứng minh mơ hình kết tối ưu sử dụng quy mơ thực nghiệm Như vậy, kết luận rằng, số liệu từ bảng tối ưu 4.5 hợp lý, hiệu suất trích ly hợp chất sinh học khơng có khác biệt lớn so với kết thu từ mơ hình 70 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Tóm lại, nghiên cứu tối ưu thơng số q trình chiết xuất hợp chất có hoạt tính sinh học ổi với giá trị sau: nồng độ dung môi chiết 53.7253 (%), thời gian 9.687 (phút), tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết 10.801 (mL/g) Nghiên cứu cho thấy ảnh hưởng đáng kể nhiệt độ trình bảo quản nguyên liệu đến hàm lượng chất sinh học ổi Tuy nhiên, ảnh hưởng giảm lớn đến hàm mục tiêu so với nghiên cứu tương tự trước 5.2 Kiến nghị Nguyên liệu sau thu hoạch nên tiến hành xử lý sơ bộ, sau sấy bảo quản tủ đông để đảm bảo thành phần hợp chất có hoạt tính sinh học ổi Tiếp tục nghiên cứu, khảo sát phương pháp bảo quản nguyên liệu thực vật sau thu hái, nhằm làm giàu bảo quản tối ưu hợp chất có hoạt tính ổi nói riêng nguồn thực vật khác nói chung Đồng thời, phát triển quy mô nghiên cứu thông số để ứng dụng nhiều quy mô sản xuất Phát triển sản phẩm thực phẩm khác ứng dụng từ cao chiết ổi để bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO A M Metwally, A A Omar, F M Harraz & Sohafy, S M El (2010) Phytochemical investigation and antimicrobial activity of Psidium guajava L leaves Phcog Mag, 212228 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2950385/ Adeyemi, Stephen 0., Akanji M.A., O S A (2009) Ethanolic leaf extract of Psidium guajava: Phyto- chemical and trypanocidal activity in rats infected with Trypanosoma brucei brucei 3(5), 420–423 Baby Joseph (2011) REVIEW ON NUTRITIONAL , MEDICINAL AND PHARMACOLOGICAL PROPERTIES OF GUAVA (PSIDIUM GUAJAVA LINN) 53– 64 Bàng Nghiêm (2021) Tổng quan ổi https://nongnghiep.vn/Tổng+quan+về+cây+ổisearch/from-to-sign-/ Beckstrom Sternberg S M (1994) The phytochemical database National Germplasm Resources Laboratory (NGRL), Agricultural Research Service (ARS), U.S Department of Agriculture Bích, Đ H (2008) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam (tập II) Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật Castro H.I., Rodrıguez L.I., Ferreira S.R.S and Parada F.J (2011) Integrated utilization of guava (Psidium guajava ): antioxidant activity of phenolic extracts obtained from guava seeds with supercritical CO2-ethanol Journal of the Brazilian Chemical Society 22(12), 2383-2390 doi: 10.1590/S0103-50532011001200020 Cracolice, M S., & Peters, E I (2020) An Active Learning Approach (Vol 15, Issue 2) Cuong Xuan Dang, Trần Thị Thanh Vân, Vũ Ngọc Bội, Bùi Minh Lý (2014) Nghiên cứu chiết Phlorotannin với hoạt tính chống oxy hóa từ rong nâu Sargassum mcclurei phương pháp ngâm dầm có hỗ trợ vi sóng Vol 52 135-141 https://doi.org/10.15625/0866-708X/52/2/3178 Đái Thị Xuân Trang, Phạm Thị Lan Anh, Trần Thanh Mến, Bùi Tuấn Anh (2012) Khảo sát khả điều trị bệnh tiểu đường cao chiết ổi (Psidium guajava L.) Tạp chí khoa học, 163-171 Dent M, Dragovi-Uzelac V, Peni M, Brncic M, Bosiljkov T, et al (2013) The effect of extraction solvents, temperature and time on the composition and mass fraction of 72 polyphenols in Dalmatian wild sage (Salvia officinalis L.) extracts 51: 84 Food Technol Biotech 51(10), 84 Đoàn Thị Ngân, Lê Trần Thảo Nguyên, Hoàng Hồng Hạnh, Bùi Minh Quang, Nguyễn Lê Tuyên, & Lê Văn Minh (2018) Ứng dụng lưu chất CO2 siêu tới hạn nghiên cứu sản xuất Journal of Science and Technology Hồ Bá Vương, Nguyễn Xuân Duy, & Nguyễn Anh Tuấn (2015) Tối ưu hóa chiết Polyphenol từ ổi phương pháp bề mặt đáp ứng Tạp Chí Khoa Học Phát Triển 13(7), 1144–1152 http://www.vnua.edu.vn/tapchi/Upload/30112015-TC so7.2015 30.11_10.pdf Hsiao-Wen Huang, Chiao-Ping Hsu, Binghuei Barry Yang, & Chung-Yi Wang (2013) Advances in the extraction of natural ingredients by high pressure extraction technology 33(1), 54–62 https://doi.org/10.1016/j.tifs.2013.07.001 Isela Lavilla, & Carlos Bendicho (2017) Fundamentals of Ultrasound-Assisted Extraction In Water Extraction of Bioactive Compounds (pp 291–316) Plants to Drug Development https://doi.org/10.1016/B978-0-12-809380-1.00011-5 J.M., R M A and P (2013) Natural Product Extraction Principles and Applications RSC Green Chemistry https://doi.org/10.1039/9781849737579-fp001 Joseph B., P R M (2011) Phytochemical and Biopharmaceutical Aspects of Psidium guajava (L.) Essential Oil: A Review Research Journal of Medicinal Plant 5(4), 432– 442 Kwon, Y.-I.I., D.A Vattem, and K Shetty (2006) Evaluation of clonal herbs of Lamiaceae species for management of diabetes and hypertension Asia pacific journal of clinical nutrition 15(1), 107 Lại Thị Ngọc Hà, Vũ Thị Thoan, Trần Văn Hiểu (2012) Polyphenol từ ổi: hàm lượng, khả kháng oxi hóa điều kiện tách chiết Tạp chí Dinh dưỡng Thực phẩm 8(4) Luo You, Peng Bin, Liu Yan, Wu Yanan, W Z (2018) Ultrasound extraction of 66 polysaccharides from guava leaves and their antioxidant and antiglycation activity Process Biochemistry.73, 228-234 Manosroi J P Dhumtanom, A M (2005) Anti-proliferative activity of essential oil extracted from Thai medicinal plants on KB and P388 cell lines Cancer Lett 235, 114– 120 73 Miller, A L (1996) Antioxidant flavonoids: Structure, function and clinical usage Alternative Medicine Review, 1(2), 103–111 Monique S J Simmonds & Victor R Preedy (2015) Nutritional Composition of Fruit Cultivars Nguyen Quang Vinh and Jong-Bang Eun (2011) Antioxidant activity of solvent extracts from Vietnamese medicinal plants Journal of Medicinal Plant Research 5(13), 27982811 Nguyễn Xuân Duy Hồ Bá Vương (2013) Hoạt tính chống oxi hóa ức chế enzyme polyphenoloxidase số loại thực vật ăn Việt Nam Tạp chí Khoa học Phát triển 11(3), 364-372 Phạm Hữu Tiến, Võ Ngọc Thi, Mai Lệ Huyền, Vũ Trần Thiên Vũ, Phạm Yến Cẩm Mi (2021) Sở Y tế TPHCM – BT Nghiên cứu tình hình tiền đái tháo đường bệnh nhân tăng huyết áp yếu tố liên quan Phung M Phan, Phuc T D Nguyen, Phuc H Nguyen, Vo T T Vo, & Anh T Vu (2021) Optimization of extraction conditions of flavonoids from Houttuynia cordata Thumb leaves Faculty of Chemical Engineering and Food Technolog Pommer, C V & Murakami, K R N (2009) Breeding guava (Psidium guajava L.) Bredding Plantation Tree Crops: Tropical Species, 83-120 https://doi.org/10.1007/978-0-387-71201-7-3 Premi, M., & Sharma, H K (2017) Effect of extraction conditions on the bioactive compounds from Moringa oleifera (PKM 1) seeds and their identification using LC– MS Journal of Food Measurement and Characterization 11(1), 213–225 https://doi.org/10.1007/s11694-016-9388-y Qian He, N V (2004) Antioxidant power of phytochemicals from Psidium guajava leaf Journal of Zhejiang University Science 5(6), 676–683 https://doi.org/10.1631/jzus.2004.0676 Quang-Vinh Nguyen, Bich Huyen, B T., Minh-Dinh Tran, Minh-Trung Nguyen, ManhDung Doan, Anh-Dzung Nguyen, Tam Minh Le, Van-Cuong Tran, & Tri-Nhut Pham (2022) Impact of Different Drying Temperatures on In Vitro Antioxidant and 67 Antidiabetic Activities and Phenolic Compounds of Wild Guava Leaves Collected in the Central Highland of Vietnam Natural Product Communications 17(4) https://doi.org/10.1177/1934578X221095349 74 Rice-Evans, C A., Miller, N J., & Paganga, G (1996) Structure antioxidant activity relationship of flavonoids and phenolic acids Free Radical Biololgy & Medicine, 20, 933-956 Rostagno M.A and Prado J.M (2013) Natural Product Extraction Principles and Applications The Royal Society of Chemistry, 230 - 275 Sebaugh, J L (2011) Guidelines for accurate EC50/IC50 estimation Pharmaceutical Statistics 10(2), 128–134 https://doi.org/10.1002/pst.426 Shirur Dakappa Shruthi, Adhikari Roshan, Timilsina Sanjay Sharma & Sajjekhan Sunita (2013) A REVIEW ON THE MEDICINAL PLANT PSIDIUM GUAJAVA LINN (MYRTACEAE) In Journal of Drug Delivery & Therapeutics (Vol 2013, Issue 3, pp 162-168) https://jddtonline.info Suganya Tachakittirungrod, Siriporn Okonogi, S C (2007) Study on antioxidant activity of certain plants in Thailand : Mechanism of antioxidant action of guava leaf extract 103, 381–388 https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2006.07.034 Trần Thị Hồng Châu (2020) Khảo sát ảnh hưởng nồng độ dung mơi (ethanol) đến q trình trích ly thu nhận polyphenol từ vỏ mãng cầu ta (Annona squamosa L.) CO2 siêu tới hạn Tạp chí Cơng thương 73-80 Viljem Vek, Oven, P., & Poljanšek, I (2017) Comparison of two extraction and two chromatographic methods in analysis of beech wood extractives Springer-Verlag GmbH Germany https://doi.org/10.1007/s00107-017-1216-5 Viljem Vek, Oven, P., & Poljanšek, I (2017) Comparison of two extraction and two chromatographic methods in analysis of beech wood extractives Springer-Verlag GmbH Germany https://doi.org/10.1007/s00107-017-1216-5 Vivekananda Mandal, Yogesh Mohan, & S Hemalatha (2007) Microwave Assisted Extraction-An Innovative and Promising Extraction Tool for Medicinal Plant Research Pharmacognosy Reviews 1(1), 7–18 Wang, H., Du, Y., Song, H (2010) α-Glucosidase α-Amylase inhibitory activities of guava leaves Food Chem 123, 6-15 Witayapan Nantitanon, Songwut Yotsawimonwat, S O (2010) Factors influencing antioxidant activities and total phenolic content of guava leaf extract LWT - Food Science and Technology 43(7), 1095–1103 https://doi.org/10.1016/j.lwt.2010.02.015 75 Yee P Lim, Sook F Pang, Mashitah M Yusoff, Siti K Abdul Mudalip, Jolius Gimbun (2019) Correlation between the extraction yield of mangiferin to the antioxidant activity, total phenolic and total flavonoid content of Phaleria macrocarpa fruits Journal of Applied Research on Medicinal and Aromatic Plants 14, 100224 Yoriko Deguchi, K M (2010) Anti-hyperglycemic and anti-hyperlipidemic effects of guava leaf extract 1–10 Zeng, W., Li, F., Wu, C., Ge, Y., Yu, R., Wu, X., Shen, L., Liu, Y., & Li, J (2020) Optimization of ultrasound-assisted aqueous extraction of polyphenols from Psidium guajava leaves using response surface methodology Separation Science and Technology (Philadelphia) https://doi.org/10.1080/01496395.2019.1574830 76 55(4), 728–738 PHỤ LỤC Phụ lục Bảng khảo sát thơng số trích ly đơn yếu tố Nồng độ dung Thời Tỉ lệ dung môi methanol gian môi/nguyên liệu (%) (phút) (mL/g) 40 20 10 50 20 10 60 20 10 50 10 50 10 10 50 15 10 50 20 10 50 10 50 10 7.5 10 50 10 12.5 11 50 10 15 STT Phụ lục Độ ẩm bột ổi Đĩa petri (g) 39.314 39.172 33.191 Bột + đĩa (trước sấy) (g) 44.315 44.172 38.191 Bột + đĩa (sau sấy) (g) 43.883 43.778 37.795 Độ ẩm (%) 8.633 7.880 7.919 Độ ẩm trung bình (%) 8.144 ± 0.502 77 Phụ lục Kết thí nghiệm sàng lọc nồng độ dung môi chiết Nồng độ dung môi Thời gian methanol (phút) Tỉ lệ dung môi/nguyên liệu (mL/g) (%) TPC (mg GAE/g dw) DPPH ABTS (TE/g (TE/g dw) dw) 40 20 10 48.939a 19.672a 27.715a 50 20 10 54.700b 34.878b 52.644b 60 20 10 46.945c 30.610c 47.271c Phụ lục Kết thí nghiệm sàng lọc thời gian chiết Nồng độ dung Thời Tỉ lệ dung TPC môi methanol gian môi/nguyên (mg GAE/g (%) (phút) liệu (mL/g) dw) 50 10 41.460a 29.831a 33.149a 50 10 10 57.005b 44.798b 55.133b 50 15 10 56.198c 35.592c 53.111c 50 20 10 53.559d 33.142d 51.945d DPPH (TE/g dw) ABTS (TE/g dw) Phụ lục Kết thí nghiệm sàng lọc tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu chiết Nồng độ dung môi methanol (%) Thời gian (phút) Tỉ lệ dung môi/nguyên liệu (mL/g) TPC DPPH ABTS (mg GAE/g dw) (TE/g dw) (TE/g dw) 50 10 27.379a 36.995a 39.876a 50 10 7.5 37.727b 38.767b 48.123b 50 10 10 56.390c 44.798c 55.133c 50 10 12.5 54.331d 40.441d 50.729d 50 10 15 49.722e 39.289e 46.352e 78 Phụ lục Đường chuẩn acid gallic Đường chuẩn polyphenol 1.2 y = 9.4431x + 0.0297 R² = 0.9938 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Phụ lục Đường chuẩn quercetin Đường chuẩn flavonoid 0.1 0.09 0.08 y = 0.8471x + 0.0081 R² = 0.9972 0.07 0.06 0.05 0.04 0.03 0.02 0.01 0 0.02 0.04 0.06 79 0.08 0.1 0.12 Phụ lục Đường chuẩn Trolox đo DPPH Đường chuẩn Trolox 90 y = 70.647x + 10.328 R² = 0.9763 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.2 Phụ lục Đường chuẩn Trolox đo ABTS Đường chuẩn Trolox y = 554.82x + 10.022 R² = 0.9928 100 90 80 Axis Title 70 60 50 40 30 20 10 0 0.02 0.04 0.06 0.08 80 0.1 0.12 0.14 0.16 S K L 0