Trang 1 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM HOÀNG VĂN SƠN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA DỊCH TIÊU CHẢY CẤP TRÊN LỢN PORCINE EPIDEMIC DIARRHEA - PED TẠI TỈNH THANH HÓA VÀ GIẢI PHÁP PHÒ
HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM HỒNG VĂN SƠN LU ẬN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ ÁN CỦA DỊCH TIÊU CHẢY CẤP TRÊN LỢN ẾN TI (PORCINE EPIDEMIC DIARRHEA - PED) TẠI TỈNH THANH HÓA VÀ GIẢI PHÁP PHÒNG TRỊ SĨ H N KI TẾ LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2021 HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM HỒNG VĂN SƠN LU ẬN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ ÁN CỦADỊCH TIÊU CHẢY CẤP TRÊN LỢN ẾN TI (PORCINE EPIDEMIC DIARRHEA - PED) TẠI TỈNH THANH HÓA VÀ GIẢI PHÁP PHÒNG TRỊ SĨ H N KI : Bệnh lý học chữa bệnh vật nuôi Mã số : 64 01 02 TẾ Ngành Người hướng dẫn khoa học : PGS.TS Phạm Ngọc Thạch GS.TS Nguyễn Thị Lan HÀ NỘI - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận án cảm ơn, thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Tác giả luận án LU ẬN Hoàng Văn Sơn ÁN ẾN TI SĨ H N KI TẾ i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, cố gắng thân, nhận quan tâm giúp đỡ tổ chức, quan, nhà khoa học, thầy hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp người thân gia đình Trước hết, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc hướng dẫn, giúp đỡ chân tình đầy trách nhiệm hết lịng khoa học PGS.TS Phạm Ngọc Thạch GS.TS Nguyễn Thị Lan LU Nhân dịp này, xin cảm ơn giúp đỡ Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Phòng thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ sinh học Thú y Bộ môn Nội - Chẩn - Dược - Độc chất, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi ẬN suốt thời gian học tập hoàn thành luận án Học viện ÁN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Q thầy cơ, quan, nhà khoa học, bạn bè đồng nghiệp công tác khoa Nông Lâm Ngư nghiệp, Trường Đại học Hồng Đức tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian qua TI Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới tập thể Lãnh đạo nhân viên ẾN SĨ Công ty RTD, Công ty CP Nông sản thực phẩm Việt Hưng, Công ty CP đầu tư phát triển chăn ni Hoằng Hóa, Cơng ty CP chăn nuôi chuyển giao công nghệ Yên Định trang trại lợn tỉnh Thanh Hoá KI H N Xin chân thành cảm ơn người thân gia đình, ln quan tâm tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ mặt, động viên khuyến khích tơi hồn thành luận án TẾ Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Nghiên cứu sinh Hoàng Văn Sơn ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng viii Danh mục hình ix Danh mục ảnh x Trích yếu luận án xi LU Thesis abstract xiii ẬN Phần Mở đầu .1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu .2 ÁN 1.1 TI 1.2.1 Mục tiêu chung .2 1.3 ẾN 1.2.2 Mục tiêu cụ thể .2 Đối tượng địa điểm nghiên cứu SĨ 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu KI 1.3.2 Phạm vi nghiên cứu Những đóng góp đề tài 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án H N 1.4 TẾ 1.5.1 Ý nghĩa khoa học luận án .3 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn luận án .3 Phần Tổng quan tài liệu .4 2.1 Sơ lược địa bàn nghiên cứu 2.1.1 Vị trí địa lý 2.1.2 Đặc điểm địa hình 2.1.3 Đặc điểm khí hậu 2.1.4 Tình hình phát triển chăn ni lợn 2.2 Những nghiên cứu hội chứng tiêu chảy 2.2.1 Khái niệm tiêu chảy 2.2.2 Nguyên nhân gây Hội chứng tiêu chảy gia súc iii 2.2.3 Cơ chế hậu tiêu chảy 2.2.4 Bệnh lý lâm sàng hội chứng tiêu chảy 11 2.3 Tình hình nghiên cứu dịch tiêu chảy cấp lợn (Porcine epidemic diarrhea - PED) 11 2.3.1 Lịch sử bệnh 11 2.3.2 Tình hình nghiên cứu dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) giới 12 2.3.3 Tình hình nghiên cứu dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) Việt Nam 13 2.4 Một số đặc điểm virus PED 16 2.4.1 Phân loại .16 2.4.2 Hình thái cấu trúc 17 LU 2.4.3 Đặc tính sinh học PEDV .19 2.4.4 Tính chất ni cấy .20 ẬN 2.5 Hiểu biết dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) 20 ÁN 2.5.1 Dịch tễ học 20 2.5.2 Cơ chế sinh bệnh 21 TI 2.5.3 Triệu chứng 22 ẾN 2.5.4 Bệnh tích .23 SĨ 2.5.5 Hậu dịch tiêu chảy cấp lợn 25 2.5.6 Chẩn đoán 27 KI 2.5.7 Phòng điều trị 30 N Máu chức máu 33 TẾ 2.6 H 2.5.8 Cơ sở khoa học thuốc dùng điều trị 32 2.6.1 Huyết tương 34 2.6.2 Thành phần có hình máu 34 Phần Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 37 3.1 Đối tượng nghiên cứu 37 3.2 Địa điểm nghiên cứu 37 3.3 Thời gian nghiên cứu 37 3.4 Trang thiết bị, dụng cụ vật liệu nghiên cứu 37 3.4.1 Trang thiết bị dụng cụ nghiên cứu 37 3.4.2 Vật liệu nghiên cứu .37 3.4.3 Hóa chất 38 iv 3.5 Nội dung nghiên cứu 38 3.5.1 Tình hình dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) Thanh Hoá 38 3.5.2 Một số đặc điểm bệnh lý lợn mắc dịch tiêu chảy cấp Thanh Hoá 39 3.5.3 Thử nghiệm biện pháp phòngtrị dịch tiêu chảy cấp lợn(PED) 39 3.6 Phương pháp nghiên cứu 39 3.6.1 Phương pháp xác định tình hình dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) .39 3.6.2 Phương pháp mổ khám bệnh tích đại thể 42 3.6.3 Phương pháp làm tiêu vi thể 43 3.6.4 Phương pháp xác định tiêu huyết học .45 3.6.5 Phương pháp kiểm tra tính mẫn cảm E coli phân lập từ phân lợn mắc LU bệnh tiêu chảy với số thuốc kháng sinh .46 3.6.6 Phương pháp chế chế phẩm ―Gut feedback‖ 47 ẬN 3.6.7 Quy trình sử dụng chế phẩm ―Gut feedback‖ phịng dịch tiêu chảy cấp 47 ÁN 3.6.8 Xác định kháng thể PED huyết sau sử dụng chế phẩm ―Gut feedback‖ 48 TI 3.6.9 Điều trị thử nghiệm lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) 49 ẾN 3.6.10 Phương pháp xử lý số liệu 50 4.1 SĨ Phần Kết thảo luận .51 Tình hình dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) Thanh Hoá 51 KI 4.1.1 Tình hình chăn ni lợn Thanh Hố giai đoạn từ năm 2016 đến 2019 51 N H 4.1.2 Tình hình mắc PED đàn lợn huyện tỉnh Thanh Hoá .52 TẾ 4.1.3 Tình hình dịch tiêu chảy cấp theo đối tượng lợn ni Thanh Hố 54 4.1.4 Tình hình lợn mắc dịch tiêu chảy cấp theo mùa năm Thanh Hố 56 4.1.5 Tình hình lợn mắc dịch tiêu chảy cấp theo quy mô đàn Thanh Hoá .59 4.2 Đặc điểm bệnh lý lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) Thanh Hoá 61 4.2.1 Triệu chứng lâm sàng lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) .61 4.2.2 Chỉ tiêu lâm sàng lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) 64 4.2.3 Bệnh tích lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) 66 4.2.4 Các tiêu sinh lý máu lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) 77 4.2.5 Các tiêu sinh hoá máu lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) .88 4.3 Thử nghiệm biện pháp phòng trị dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) 95 4.3.1 Phòng dịch tiêu chảy cấp lợn (PED) phương pháp ―Gut feedback‖ .95 v 4.3.2 Điều trị thử nghiệm lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) 99 Phần Kết luận kiến nghị 107 5.1 Kết luận .107 5.2 Kiến nghị 108 Danh mục cơng trình công bố liên quan đến luận án .109 Tài liệu tham khảo 110 Phụ lục 126 LU ẬN ÁN ẾN TI SĨ H N KI TẾ vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Viết đầy đủ CFR Case Fatality Rate EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay EM Electron microscope EVD Epidemic viral diarhea IgA Immunoglobulin A IgG Immunoglobulin G LU Immunoglobulin M IgY Yolk Immunoglobulin ISH RNA Porcine epidemic diarrhea Porcine epidemic diarrhea virus ẾN PEDV Mortality Rate TI PED In situ hybridization ÁN MR ẬN IgM Axit ribonucleic SĨ Reverse transcription polymerase chain reaction TGE Transmissible gastroenteritis TGEV Transmissible gastroenteritis virus UTR Untranslated region H N KI RT-PCR TẾ vii DANH MỤC BẢNG Tên bảng TT Trang 2.1 Các loại vacxin PED cấp phép thương mại .31 3.1 Hệ thống máy chuyển đúc mẫu tự động gồm 12 bình 43 3.2 Đánh giá đường kính vịng vơ khuẩn theo hãng Oxiod 46 4.1 Tình hình chăn ni lợn Thanh Hoá giai đoạn 2016 - 2019 51 4.2 Tình hình mắc dịch tiêu chảy cấp đối tượng lợn Thanh Hoá .55 4.3 Tình hình lợn mắc dịch tiêu chảy cấp theo quy mơ đàn Thanh Hố .60 4.4 Thân nhiệt, tần số hô hấp tim đập lợn khoẻ lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) đàn lợn thuộc tỉnh Thanh Hoá 65 Bệnh tích đại thể lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) ni Thanh Hố 67 4.6 Kết nghiên cứu bệnh tích vi thể ruột lợn mắc tiêu chảy cấp (PED) LU 4.5 ẬN đàn lợn tỉnh Thanh Hoá 72 Số lượng, tỷ khối thể tích bình qn hồng cầu lợn khoẻ lợn mắc ÁN 4.7 PED nuôi tỉnh Thanh Hoá 79 Sức kháng hồng cầu lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) tỉnh Thanh Hoá 81 4.9 Hàm lượng huyết sắc tố, nồng độ huyết sắc tố trung bình, lượng huyết sắc tố ẾN TI 4.8 trung bình hồng cầu lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) ni SĨ Thanh Hố 84 KI 4.10 Số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu lợn khoẻ lợn mắc PED nuôi N tỉnh Thanh Hoá 87 H 4.11 Hàm lượng protein tổng số tiểu phần protein huyết lợn TẾ mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) ni Thanh Hố 88 4.12 Phản ứng Gros hàm lượng đường huyết lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) tỉnh Thanh Hoá 92 4.13 Độ dự trữ kiềm máu hàm lượng Natri, Kali huyết lợn mắc dịch tiêu chảy cấp (PED) tỉnh Thanh Hoá .94 4.14 Thời gian sử dụng ―gut feedback‖ lợn nái mang thai tuần thứ 13 (n=60) 96 4.15 Hàm lượng kháng thể PED huyết lợn nái thí nghiệm .97 4.16 Kết kiểm tra tính mẫn cảm chủng E coli phân lập từ phân lợn mắc bệnh tiêu chảy với số loại kháng sinh (n=27) 100 4.17 Kết điều trị thử nghiệm lợn mắc PED đàn lợn tỉnh Thanh Hoá 101 4.18 Một số tiêu hiệu điều trị .106 viii Observations Pooled Variance Hypothesized Mean Difference Df t Stat P(T