Lịch sử nghiên cứu
Lịch sử tăng huyết áp đã có từ lâu, với những khái niệm đầu tiên xuất hiện trong y học Ayurvedic của Trung Quốc và Ấn Độ cổ đại Chất lượng mạch của một cá nhân, được bác sĩ cảm nhận qua việc sờ nắn, phản ánh tình trạng của hệ thống tim mạch Thuật ngữ "mạch nặng" có thể coi là một cách diễn đạt sớm về tăng huyết áp hiện đại Đặc biệt, đóng góp của Akbar Mahomed là rất quan trọng trong việc phát triển khái niệm hiện đại về tăng huyết áp, và bất kỳ bài viết nào về lịch sử của nó đều cần nhấn mạnh điều này.
Vào cuối thế kỷ 19, bác sĩ người Ấn Độ gốc Ireland Frederick Akbar Mahomed đã mô tả tình trạng "tăng huyết áp vô căn" Tuy nhiên, khái niệm hiện đại về tăng huyết áp chỉ được hình thành vào đầu thế kỷ 20 với sự phát triển của máy đo huyết áp thủy ngân và phương pháp xác định huyết áp qua âm Korotkoff Đến giữa thế kỷ 20, việc kiểm tra huyết áp đã trở thành một phần quan trọng trong khám sức khỏe định kỳ Dù vậy, tăng huyết áp chưa được xem là một căn bệnh nghiêm trọng; ví dụ, Tổng thống Franklin D Roosevelt vẫn được xác nhận sức khỏe tốt mặc dù huyết áp của ông lên tới ~220/120 Tuy nhiên, cái chết của ông đã làm nổi bật mối nguy hiểm của bệnh tăng huyết áp, khiến nó được nhìn nhận như một căn bệnh chết người.
Ba năm sau khi Roosevelt qua đời, Tổng thống Truman đã ký Đạo luật Tim mạch Quốc gia, mở ra cơ hội cho nghiên cứu về các bệnh tim Đạo luật này đã dẫn đến nhiều nghiên cứu quan trọng, trong đó có Nghiên cứu về tim Framingham.
Nghiên cứu của Framingham đã chỉ ra rằng tăng huyết áp và tăng lipid máu liên quan đến nhiều bệnh tim mạch như đột quỵ, suy tim và đau tim, dẫn đến tử vong sớm Trước khi có các nghiên cứu này, nhiều công ty bảo hiểm đã bắt đầu đo huyết áp trong các kiểm tra sức khỏe Các nghiên cứu của Hiệp hội Actuarial Hoa Kỳ cũng cho thấy tỷ lệ mắc bệnh và tử vong cao hơn ở những người có huyết áp cao Tuy nhiên, trong những năm 1960, vẫn còn tranh cãi trong cộng đồng y tế về việc có cần điều trị tăng huyết áp vô căn hay không, vì nó được coi là một phần không thể tránh khỏi của quá trình lão hóa Việc điều trị bằng thuốc vào thời điểm đó thường gây ra nhiều đau khổ cho bệnh nhân hơn là không điều trị Một bài xã luận năm 1965 trên Archive of Internal Medicine đã thể hiện quan điểm trái ngược về việc tăng huyết áp vô căn có phải là một tình trạng lành tính hay một căn bệnh chết người Cuối cùng, một số phát triển may mắn đã diễn ra cùng thời điểm, giúp giải quyết cuộc tranh cãi này.
Thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên có đối chứng giả dược (RCT) đầu tiên trong lịch sử y học được tiến hành bởi Hội đồng nghiên cứu y tế (MRC của
Vào năm 1948, Vương quốc Anh đã tiến hành nghiên cứu về hiệu quả của streptomycin trong việc điều trị bệnh lao, cung cấp công cụ khoa học để chứng minh tính hiệu quả của các phương pháp điều trị.
Thiazide và các hợp chất giống thiazide, phát triển từ phân tử sulpha, đã được phát hiện có đặc tính natriuretic Chlorothiazide là loại thuốc đầu tiên xuất hiện, tiếp theo là hydrochlorothiazide và chlorthalidone Những loại thuốc này cho thấy tác dụng hạ huyết áp mạnh mẽ Các nghiên cứu nhỏ đã chứng minh khả năng dung nạp và hiệu quả của nhóm thuốc thiazide trong việc hạ huyết áp.
Arthur Guyton, một nhà sinh lý học thận nổi tiếng, đã phát triển lý thuyết về natri niệu áp lực, trong đó ông đưa ra giả thuyết rằng các đường cong natri niệu áp lực bất thường có thể giải thích cho tất cả các loại tăng huyết áp.
Các Trung tâm Y tế của Cơ quan Quản lý Cựu chiến binh, một chuỗi bệnh viện liên bang chuyên chăm sóc cựu chiến binh, đã mở rộng sứ mệnh của mình bằng cách bổ sung các mục tiêu nghiên cứu y học Chương trình hợp tác nghiên cứu này nhằm nâng cao chất lượng chăm sóc lâm sàng và giáo dục y tế cho các cựu chiến binh.
Hệ thống bệnh viện VA đã chính thức hoạt động, với nhiều cơ sở trải dài khắp Hoa Kỳ, giúp việc quản lý và thực hiện các nghiên cứu lâm sàng lớn đa trung tâm trở nên nhanh chóng và thuận lợi hơn.
Sự phát triển trong điều trị tăng huyết áp đã dẫn đến thử nghiệm điều trị đa trung tâm đầu tiên, được công bố trên JAMA năm 1967 Vào cuối thế kỷ 19 và giữa thế kỷ 20, nhiều phương pháp điều trị được áp dụng nhưng hiệu quả rất hạn chế và thường gây khó chịu cho bệnh nhân Các liệu pháp thời kỳ này bao gồm hạn chế natri, cắt bỏ giao cảm, và liệu pháp pyrogen Natri thiocyanate, hóa chất đầu tiên điều trị tăng huyết áp, được sử dụng từ năm 1900 nhưng gặp nhiều tác dụng phụ Các phương pháp hỗ trợ khác như thuốc an thần, bismuth, và bromua cũng được sử dụng nhưng không hiệu quả cao Sau Chiến tranh thế giới thứ hai, tetramethylammonium chloride và hexamethonium trở thành những lựa chọn phổ biến, cùng với hydralazine và reserpine, một loại thuốc có nguồn gốc từ Rauvolfia serpentina.
Vào những năm 1950, một bước đột phá lớn trong y học đã diễn ra với sự phát hiện của thuốc lợi tiểu đường uống được dung nạp tốt, cụ thể là chlorothiazide (Diuril) Thuốc này, được phát triển từ sulfanilamide kháng sinh, đã chính thức có mặt trên thị trường vào năm 1958 Sự phát triển này đã được hỗ trợ bởi một thử nghiệm ngẫu nhiên có kiểm soát.
Cơ quan quản lý cựu chiến binh đã ngừng nghiên cứu so sánh hydrochlorothiazide, reserpine và hydralazine với giả dược sớm do những người không được điều trị phát triển nhiều biến chứng, coi việc từ chối điều trị là phi đạo đức Nghiên cứu tiếp tục cho thấy việc điều trị, ngay cả ở những người bị tăng huyết áp nhẹ, làm giảm hơn một nửa nguy cơ tử vong do bệnh tim mạch Năm 1975, Giải thưởng Lasker Special Public Health Award được trao cho nhóm phát triển chlorothiazide Kết quả nghiên cứu đã thúc đẩy các chiến dịch y tế công cộng nâng cao nhận thức về tăng huyết áp và khuyến khích việc đo và điều trị huyết áp cao, góp phần vào việc giảm 50% đột quỵ và bệnh tim thiếu máu cục bộ từ năm 1972 đến năm 1994.
Nhiều loại thuốc điều trị tăng huyết áp đã được phát triển, trong đó thuốc chẹn beta, do bác sĩ người Anh James W Black nghiên cứu vào đầu những năm 1960, ban đầu được sử dụng cho chứng đau thắt ngực nhưng sau đó được phát hiện có tác dụng hạ huyết áp James W Black đã được vinh danh với giải thưởng Lasker năm 1976 và giải Nobel về Sinh lý học và Y học.
Vào năm 1988, các nghiên cứu đã dẫn đến việc phát hiện nhóm thuốc hạ huyết áp mới, bao gồm thuốc chẹn kênh calci, với verapamil là thành viên đầu tiên Ban đầu, verapamil được cho là thuốc chẹn beta và được sử dụng cho chứng đau thắt ngực, nhưng sau đó đã được xác nhận có khả năng làm giảm huyết áp thông qua cơ chế khác Hệ thống renin–angiotensin đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh huyết áp, dẫn đến sự phát triển của các chất ức chế men chuyển angiotensin (ACE) Captopril, một hoạt chất uống, đã được mô tả vào năm 1977, mở đường cho sự phát triển của nhiều chất ức chế ACE khác Gần đây, thuốc hạ huyết áp mới như chất ức chế thụ thể angiotensin và chất ức chế renin cũng đã được giới thiệu.
Hình 1.1 Các mốc thời gian về việc nghiên cứu phát triển thuốc điều
Phân loại
Thuốc tác động trên hệ Renin-Angiotensin-Aldosterone (RAA)
Nhóm I: chứa sulfhydryl (-SH): Captopril, Zofenopril
Nhóm II: chứa dicarboxylic: Enalapril, Lisinopril, Benazepril
Nhóm III: chứa phospho: Fosinopril
Thuốc ức chế thụ thể angiotensin (ARB): Losartan, Telmisartan…
Thuốc chẹn kênh calci
Dihydropyridine (DHP): Tác động chủ yếu ở động mạch Ví dụ
Phenylalkylamine: Chủ yếu tác động trên cơ tim Ví dụ: Gallopamil,
Benzothiazepine: Có tác dụng trên cả cơ tim và động mạch Ví dụ:Clentiazem, Diltiazem,…
Thuốc giãn mạch trực tiếp
Thuốc dùng điều trị cơn cao huyết áp: Natri nitroprusiat, Diazoxid…
Thuốc chẹn β-adrenergic
Ví dụ: Metoprolol, Bisoprolol, Atenolol.
Thuốc lợi tiểu
Thuốc lợi tiểu nhóm thiazid:
Thuốc lợi tiểu thiazide: Chlorothiazid Benzthiazid
Thuốc lợi tiểu hydrothiazid: Naturetin, Naqua, Renese, Anhydron,….
Dẫn chất của acid 5-sulfamoyl-2/3-aminobenzoic: Furosemid, Bumetanid
Dẫn chất của 4-amino-3-pyridylsulfonylurea: Torsemid
Các acid phenoxyacetic: Acid ethacrynic
Thuốc lợi tiểu giữ K + : Spironolacton.triamteren, Amilorid HCl,
Thẩm thấu: Mannitol, Isosorbid, glycerol, urea,…
Nhóm xanthin: cafein, theobromine, theophylin
CÔNG THỨC, TÍNH CHẤT, LIÊN QUAN CẤU TRÚC TÁC DỤNG THUỐC ĐIỀU TRỊ TĂNG HUYẾT ÁP NHÓM ỨC CHẾ
Giới thiệu chung
Thuốc ức chế men chuyển (ACEI) là một nhóm thuốc tác động lên hệ thống renin-angiotensin-aldosterone (RAA), chủ yếu được sử dụng trong điều trị tăng huyết áp Ngoài tác dụng hạ huyết áp, ACEI còn mang lại lợi ích cho sức khỏe tim mạch.
Dưới đây là sơ đồ của hệ Renin-Angiotensin-Aldosterone (RAA) và vị trí tác dụng của một vài loại thuốc thuộc phân nhóm này:
Hình 2.1 Sơ đồ của hệ Renin-Angiotensin-Aldosterone (RAA)
Angiotansinogen được sản xuất tại gan là một dạng tiền chất của Angiotensin
Khi cơ thể thiếu hụt Angiotensin, dưới tác dụng của Renin (sản xuất tại phức hợp cận cầu thận), tiền chất Angiotensinogen được chuyển thành Angiotensin I
Sau đó, dưới tác dụng của enzyme chuyển hóa (ACE-Angiotensin Converting Enzyme), Angiotensin I được chuyển thành Angiotensin II.
Angiotensin II liên kết với receptor AT1 trên tủy thượng thận, kích thích tủy thượng thận tiết ra Aldosterone.
Cơ chế gây tăng huyết áp của hệ RAA:
Angiotensin II là chất chủ chốt trong cơ chế tăng huyết áp của hệ RAA, liên kết với receptor AT1 để gây co mạch ngoại vi Hệ thống Angiotensin II-AT1 không chỉ làm tăng huyết áp mà còn kích thích tuyến yên tiết ADH, dẫn đến việc tủy thượng thận tăng cường sản xuất Aldosterone.
Aldosterone do tủy thượng thận tiết ra có tác dụng giữ muối và giữ nước, gây tăng thể tích tuần hoàn từ đó làm tăng huyết áp.
Enzyme ACE không chỉ tham gia vào việc điều chỉnh huyết áp mà còn xúc tác cho phản ứng chuyển hóa bradykinin thành prostaglandin, từ đó làm bất hoạt bradykinin, một chất giãn mạch quan trọng Điều này góp phần vào quá trình tăng huyết áp.
Mặc dù các cơ chế này giúp duy trì sự cân bằng trong cơ thể, nhưng khi chúng bị rối loạn, sẽ dẫn đến tình trạng tăng huyết áp quá mức, gây hại cho sức khỏe.
Cần tác dụng vào hệ này để làm giảm huyết áp xuống Từ cơ chế trên, ta có thể nhìn ra được một vài đích tác dụng của thuốc:
Tác động vào Renin: Aliskiren (ức chế renin trực tiếp).
Tác động vào men chuyển ACE.
Vị trí tác động của các thuốc ức chế men chuyển (ACEI):
Ngăn cản sự sản sinh ra ACE: rất khó thực hiện vì không thể biết được là khi nào ACE sẽ được tiết ra.
Bất hoạt ACE thông qua việc tạo ra cơ chất giả giúp ngăn chặn sự gắn kết của Angiotensin I với ACE Khi Angiotensin I không thể gắn vào ACE, quá trình chuyển đổi thành Angiotensin II bị cản trở, dẫn đến việc không hình thành các tác nhân gây tăng huyết áp, từ đó giúp hạ huyết áp Đây là cơ chế chính của các thuốc ức chế ACE (ACEI).
Phân loại
Theo cấu trúc hóa học
Nhóm I: chứa sulfhydryl (-SH): captopril, zofenopril…
Nhóm II: chứa dicarboxylic: enalapril, lisinopril, benazepril…
Nhóm III: chứa phospho: fosinopril.
Tác dụng
Suy tim, rối loạn chức năng thất trái, cải thiện sống còn sau nhồi máu cơ tim, suy thận do tiểu đường.
Tác dụng không mong muốn: Hạ huyết áp, ho (do brandykinin không được giáng hóa tích tụ ở phổi gây ho), tăng K+, suy thận cấp, dị ứng, phù mạch…
Tắc cả 2 động mạch thận, hẹp động mạch chủ nặng.
Tiền sử hạ huyết áp.
Phụ nữ có thai (vì thuốc qua được hàng rào nhau thai, có thể gây quái thai).
Quá trình nghiên cứu phát triển thuốc
Xét chất ức chế men chuyển đường uống đầu tiên được tìm ra đó làCaptopril:
Cấu trúc hóa học này sở hữu những đặc điểm đặc biệt cho phép ức chế enzym chuyển angiotensin (ACE) Để hiểu rõ hơn, chúng ta cần xem xét cấu trúc của ACE và vị trí kết nối với receptor.
Hình 2.2 Sơ đồ biểu diễn cấu trúc của ACE và vị trí gắn với receptor
Trong cấu trúc của ACE, có nhiều vị trí để gắn, nhưng cần chú ý đến hai vị trí quan trọng nhất, giúp ACE thể hiện tác dụng xúc tác của nó.
Zn 2+ đóng vai trò quan trọng trong cấu trúc của cation, vì vậy khi xây dựng công thức thuốc, cần chú ý đặc biệt đến hai vị trí này Bên cạnh đó, còn nhiều vị trí phụ trợ khác giúp tăng cường tác dụng của enzyme.
Acid amin proline đã được phát hiện với một dị vòng N 5 cạnh và một nhóm COOH, có khả năng gắn vào 2 vị trí của ACE Do đó, để cấu trúc thuốc có thể gắn kết và bất hoạt ACE, việc tích hợp cấu trúc proline là điều cần thiết.
ACE xúc tác quá trình chuyển đổi Angiotensin I (10 acid amin) thành Angiotensin II (8 acid amin) bằng cách cắt bỏ 2 acid amin Do đó, khoảng cách giữa hai vị trí của Zn2+ và cation phải tương ứng với độ dài của 2 acid amin.
Phải kéo dài proline để nó liên kết được với vị trí Zn 2+
Acid succinic đã được gắn thêm với L-proline: Nhóm COOH tại C 1 của acid succinic tạo liên kết amid CO-NH với nhóm NH của proline.
Nhóm COOH của acid succinic liên kết với Zn 2+, trong khi COOH của proline kết nối với cation, dẫn đến sự xuất hiện tác dụng ức chế ACE, mặc dù mức độ ức chế còn khá yếu.
Người ta nhận ra khi thêm CH 3 vào vị trí C 2 của acid succinic thì làm tăng tác dụng của ACE lên, ta có chất:
Tăng chiều dài chuỗi acid succinic không làm thay đổi hoạt tính.
Thay đổi nhóm COOH liên kết với Zn 2+ của acid succinic bằng nhóm -
SH làm tăng tác dụng ức chế enzyme lên nhiều lần.
Bột kết tinh trắng ngà, biến màu/không khí, ánh sáng
Phổ IR đặc trưng => ĐT
Tính acid: Tan/dd kiềm => + muối KL => tủa, màu => ĐT => ĐL đo kiềm
Tính khử: Do nhóm SH (-1e) => ĐT, ĐL đo I 2
Chỉ định: Điều trị tăng huyết áp, suy tim, rối loạn chức năng thất trái
(sau nhồi máu cơ tim), suy thận do tiểu đường.
Tuy nhiên thì vì là thuốc đầu tiên của nhóm này được đưa vào sử dụng nên Catopril cũng không tránh khỏi nhiều thiếu sót
Nhóm -SH rất dễ tạo cầu nối disulfid với nhau làm giảm độ bền của thuốc.
Hình 2.3 Captopril tạo dạng dimer hoặc liên hợp với Cystein
Nhóm -SH không chỉ gây kích ứng niêm mạc mà còn có mùi vị khó chịu giống như vị kim loại, điều này tạo ra khó khăn khi sử dụng thuốc qua đường uống.
Thay thế nhóm -SH của Captopril mà không làm mất đi tác dụng của nó: Thay CH 2 -SH bằng Alanine:
Thêm nhóm có khả năng liên kết với vị trí phụ trợ của ACE giúp tăng tác dụng ức chế ACE Thay nhóm CH 3 của Alaline bằng nhóm
Nhóm này có liên kết kị nước và tương tác Van der Waals, dẫn đến ái lực cao với ACE hơn so với Captopril Đây là cấu trúc hóa học đặc trưng của Enalaprilate.
Enalaprilate là một sản phẩm có hoạt tính hiệu quả trong điều trị tăng huyết áp, nhưng do cấu trúc phân cực, nó không bền và chỉ có thể sử dụng qua đường tiêm Điều này gây ra bất tiện lớn, vì thuốc điều trị cao huyết áp thường được sử dụng hàng ngày qua đường uống.
Vậy nên một thay đổi nhỏ trong công thức nhưng lại hoàn toàn giải quyết được vấn đề này đó là ester hóa nhóm COOH của Alanine thành COOC 2 H 5
Nhóm COOC 2 H 5 có khả năng thâm nhập vào vùng thân dầu của ACE, giúp kéo dài hiệu quả của thuốc hơn so với Enalaprilate, do đó có thể được sử dụng qua đường uống.
Enalapril là dạng tiền thuốc, vì nhóm COOH đã bị chuyển đổi thành ester, làm mất khả năng liên kết với Zn 2+ Khi vào cơ thể, COOC2H5 sẽ được chuyển đổi trở lại thành COOH, lúc này thuốc mới phát huy tác dụng.
Bột kết tinh trắng; tan ít / nước, tan / ethanol.
IR đặc trưng, UV (+), góc quay cực riêng -> ĐT
Nhân thơm: UV -> ĐT, ĐL HPLC
Tính acid (-COOH): ->ĐL đo kiềm
Tan/dd kiềm, +KL -> tủa, màu -> ĐT
Tính base (NH): -> Chế phẩm dạng muối maleat.
Tan/dd acid vô cơ, + TT alcaloid -> ĐT
Chỉ định: Đây là tiền thuốc của Enalaprilate, điều trị tăng huyết áp, suy tim, rối loạn chức năng thất trái.
Một thay đổi khác trong nghiên cứu cải thiện tác dụng của Enalaprilate là thay vì ester hóa nhóm COOH thì chúng ta lại thay nhóm CH 3 bằng nhóm
H 2 N(CH 2 ) 4 tạo acid amin thứ 2 là lysine.
Lisinopril có khả năng hấp thu tốt qua đường uống mặc dù có tính chất thân nước Tại tá tràng, dưới ảnh hưởng của pH, hai nhóm amin của lisinopril tồn tại dưới dạng ion dương, trong khi hai nhóm acid ở dạng ion âm Sự kết hợp của các ion mang điện tích trái dấu này tạo ra các cặp ion, giúp phân tử Lisinopril có tính chất giống như phân tử trung hòa điện, từ đó dễ dàng thẩm thấu qua màng tế bào.
Bột kết tinh màu trắng, tan/dd kiềm loãng.
UV (+), IR đặc trưng, góc quay cực riêng.
Tính acid (-COOH): tan/dd kiềm, tác dụng với muối tạo muối mới (có tủa, màu); định lượng bằng pp đo kiềm.
Tính base (-NH): tạo tủa với TT chung của alcaloid.
Amin mạch thẳng bậc 1: tạo màu với TT Ninhydrin.
Chỉ định: Điều trị tăng huyết áp, suy tim, cải thiện sống còn sau nhồi máu cơ tim.
Vòng proline có thể thay đổi rất nhiều mà không làm mất đi tác dụng của thuốc:
Thêm một vòng cyclopenta: Ramipril
Thêm một vòng cyclohexan: Perindopril
Dạng tiền thuốc được điều chế dưới dạng este hóa nhằm tăng cường khả năng hấp thụ qua đường uống Khi vào cơ thể, hợp chất này sẽ được thủy phân bởi enzyme esterase, chuyển đổi thành nhóm acid tự do.
Hệ dị vòng đã bão hòa các nỗi đôi, tăng lực liên kết Val der Waals với các túi thân dầu.
Không có nhân thơm, giảm tương tác với 1 túi thân dầu.
Fosinopril có sự thay đổi đáng kể với vòng proline, khi nhóm liên kết với Zn 2+ được thay thế bằng nhóm Phosphinyl O=P-OH Việc chọn Phospho thay vì nguyên tử khác là do kích thước của Phospho phù hợp để duy trì khoảng cách giữa hai vị trí gắn với Zn 2+ và cation, điều này rất quan trọng cho hoạt động của thuốc ức chế ACE.
Bột kết tinh trắng; tan ít / nước, tan / ethanol
Tính acid (-COOH): tan/đ kiềm, tác dụng với muối tạo muối mới (có tủa,
Chỉ định: Điều trị tăng huyết áp, suy tim.
Liên quan cấu trúc tác dụng (SAR)
Từ những phần được trình bày ở trên, ta có thể tóm tắt lại liên quan cấu trúc tác dụng của các thuốc ức chế men chuyển (ACEI) như sau:
Hình 2.4 Cấu trúc tác dụng của các thuốc ức chế men chuyển
Nhóm ethylbenzyl: gắn với vùng phụ trợ của ACE, giúp tăng ái lực của thuốc với ACE, không có ở captopril
Dị vòng N: thường là dị vòng proline Trên vòng có nhóm carboxyl -
Nhóm -COOH ở đầu C trên cơ chất của ACE, cụ thể là angiotensin I, có vai trò quan trọng trong việc gắn kết với vị trí cation của enzyme ACE Bên cạnh đó, nhóm COOH còn giúp bảo vệ liên kết amid khỏi sự thủy phân của enzyme trong cơ thể, từ đó tăng cường độ bền của thuốc trong quá trình điều trị Thêm vào đó, có thể thay thế vòng proline bằng các vòng khác như cyclopentan (ramipril) hoặc cyclohexan (fosinopril) mà không làm giảm hiệu quả của thuốc.
R thường là nhóm methyl để mô phỏng mạch nhánh của alanine, hoặc có thể là ethyl hoặc n-buthyl amine (lisinopril) Việc thay thế bằng H2N(CH2)4 giúp tăng sinh khả dụng đường uống.
Khu vực liên kết với nguyên tử kẽm (Zn) có thể bao gồm nhóm sulfhydrid (captopril), dicarboxylate (lisinopril, enalapril) hoặc phosphonate (fosinopril) Nhóm NH trong khu vực này đóng vai trò quan trọng, vì nếu thiếu hoặc không có cấu trúc thay thế phù hợp (như phosphinyl), hiệu quả của thuốc có thể giảm đến 400 lần.
KIỂM NGHIỆM RAMIPRIL
Công thức
Tên khoa học: Acid (2S, 3aS, 6aS, S)-1-[(S)-2-[[(S)-1-(ethoxycarbonyl)-
3-phenylpropyl]amino]propanoyl]octahydrocyclopenta[b]pyrrol-2-carboxylic,
Ramipril là thuốc ức chế men chuyển (ACEI) nhóm II chứa dicarboxylic.
Tính chất
Bột kết tinh trắng hay gần như trắng.
Hơi tan trong nước, dễ tan trong methanol.
Định tính
A Phổ hấp thụ hồng ngoại của chế phẩm phải phù hợp với phổ hấp thụ hồng ngoại của ramipril chuẩn
B Phải đáp ứng phép thử Góc quay cực riêng Độ trong và màu sắc của dung dịch Hòa tan 0,1 g chế phẩm trong methanol (TT) và pha loãng thành 10ml với cùng dung môi Dung dịch phải trong và không màu
Từ +32,0 o đến +38,0 o tính theo chế phẩm đã làm khô.
Hòa tan 0,250 g chế phẩm trong hỗn hợp dung môi gồm 14 thể tích dung dịch acid hydrochloric 25% (TT) và 86 thể tích methanol (TT) vừa đủ 25,0 ml.
C.Phản ứng của nhóm chức acid Tạo dung dịch muối có màu với ion kim loại nặng D.Tính base của nhóm NH
Tạo tủa với thuốc thử chung của alcaloid
Thử tinh khiết
3.4.1 Phương pháp sắc ký lỏng
Hòa tan 2,0 g natri perclorat trong 0,5 ml triethylamine và 800 ml nước, sau đó điều chỉnh pH về 3,6 bằng acid phosphoric Cuối cùng, thêm 200 ml acetonitril và trộn đều.
Pha động B được thực hiện bằng cách hòa tan 2,0 g natri perclorat trong hỗn hợp gồm 0,5 ml triethylamine và 300 ml nước, sau đó điều chỉnh pH về 2,6 bằng acid phosphoric Cuối cùng, thêm 700 ml acetonitril vào hỗn hợp và trộn đều.
Dung dịch thử: Hòa tan 20,0 mg chế phẩm trong pha động A và pha loãng thành 20,0 ml với cùng pha động.
Dung dịch đối chiếu được chuẩn bị bằng cách hòa tan 5 mg của từng tạp chất A, B, C và D chuẩn của ramipril trong 5 ml dung dịch thử Sau đó, dung dịch này được pha loãng đến 10,0 ml bằng pha động B.
Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 5,0 ml dung dịch thử thành 100,0 ml bằng pha động B Pha loãng 5,0 ml dung dịch này thành 50,0 ml bằng pha động B
Dung dịch đối chiếu (3): Pha loãng 1,0 ml dung dịch đối chiếu (2) thành 10,0 ml bằng pha động B. Điều kiện sắc ký:
Cột kích thước (25 cm x 4,0 mm) được nhồi pha tĩnh C (3μm)
Detector quang phổ tử ngoại ở bước song 210 nm.
Tốc độ dòng: 1,0 ml/min.
Thể tích tiêm: 10 μl Cách tiến hành: Tiến hành sắc ký theo chương trình dung môi như sau:
Hình 3.1 Chương trình dung môi
Để kiểm tra tính phù hợp của hệ thống, cần cân bằng cột bằng hỗn hợp 90% pha động A và 10% pha động B trong ít nhất 35 phút Nếu không thu được đường nền thích hợp, hãy sử dụng triethylamine có độ tinh khiết cao hơn Tiêm dung dịch đối chiếu (3) và điều chỉnh độ nhạy của hệ thống để xuất hiện pic trên sắc ký đồ Tiến hành tiêm lần lượt dung dịch đối chiếu (1), dung dịch đối chiếu (2) và dung dịch thử Phép thử chỉ có giá trị khi độ phân giải giữa các pic tương ứng với tạp chất A và ramipril trên sắc ký đồ từ dung dịch đối chiếu (1) ít nhất là 3,0; pic chính từ dung dịch đối chiếu (3) có tỉ lệ tín hiệu/nhiễu tối thiểu là 3; và hệ số đối xứng pic chính từ dung dịch thử nằm trong khoảng 0,8 đến 2,0.
Thời gian lưu của tạp chất A khoảng 14 phút, ramipril khoảng 18 phút, tạp chất B khoảng 22 phút, toluene khoảng 24 phút, tạp chất C khoảng 26 phút và tạp chất D khoảng 28 phút.
Trên sắc ký đồ thu được từ dung dịch thử, diện tích của pic tương ứng với tạp chất C được nhân với hệ số hiệu chỉnh là 2,4.
Trên sắc ký đồ từ dung dịch thử, diện tích các pic tương ứng với tạp chất A, B, C và D không được vượt quá 0,5% diện tích pic chính trên sắc ký đồ từ dung dịch đối chiếu Đồng thời, diện tích của bất kỳ pic nào khác ngoài pic chính và các pic tạp chất A, B, C, D cũng cần được kiểm soát.
B, C và D không được lớn hơn 0,2 lần diện tích của pic chính trên sắc ký đồ thu được từ dung dịch đối chiếu (2) (0,1%); tổng diện tích các pic trừ pic chính, không được lớn hơn 2 lần diện tích pic chính trên sắc ký đồ thu được từ dung dịch đối chiếu (2) (1,0%) Bỏ qua các pic có diện tích nhỏ hơn diện tích của pic chính trên sắc ký đồ thu được từ dung dịch đối chiếu (3).
Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử yêu cầu nồng độ không vượt quá 20 phần triệu Để chuẩn bị dung dịch thử, hòa tan 0,200 g chế phẩm trong hỗn hợp 0,3 thể tích acid nitric (TT) và 99,7 thể tích nước Kết quả thu được các dung dịch chứa 0,02 μg, 0,03 μg và 0,05 μg paladi/ml, có thể sử dụng sau khi pha loãng.
Dung dịch mẫu trắng được chuẩn bị bằng cách hòa tan 0,150 g magnesi nitrat (TT) trong hỗn hợp dung môi, bao gồm 0,3 thể tích acid nitric (TT) và 99,7 thể tích nước Sau đó, dung dịch này được pha loãng đến thể tích 100,0 ml bằng cùng một hỗn hợp dung môi.
Để tiến hành thí nghiệm, tiêm lần lượt 20 μl dung dịch thử, dung dịch chuẩn và 10 μl dung dịch mẫu trắng Đo độ hấp thụ tại bước sóng 247,6 nm bằng đèn cathod rỗng paladi làm nguồn bức xạ, kết hợp với lò graphit và đài truyền quang có độ phân giải 1 nm.
3.4.4 Mất khối lượng do làm khô
(1,000 g; trong chân không hoàn toàn, 60 o C; 4h)
Định lượng
Để tiến hành, hòa tan 0,300 g chế phẩm trong 25 ml methanol và thêm 25 ml nước Sau đó, chuẩn độ bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N, xác định điểm tương đương bằng phương pháp chuẩn độ đo điện thế, đồng thời thực hiện mẫu trắng.
1ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 N (CĐ) tương đương 41,65 mg
Phương pháp đo phổ tử ngoại (do có nhân thơm).