Luận án xác định đột biến gen gla, gaa và đặc điểm di truyền của bệnh fabry và pompe

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Y họ c NGUYỄN THỊ PHƯƠNG THẢO Lu ận án tiế n sĩ XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN GLA, GAA VÀ ĐẶC ĐIỂM DI TRUYỀN CỦA BỆNH FABRY VÀ POMPE LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI c NGUYỄN THỊ PHƯƠNG THẢO án tiế n sĩ Y họ XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN GLA, GAA VÀ ĐẶC ĐIỂM DI TRUYỀN CỦA BỆNH FABRY VÀ POMPE Lu ận Chuyên ngành : Hóa sinh y học Mã số : 9720101 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC GS.TS Tạ Thành Văn PGS.TS Hoàng Thị Ngọc Lan HÀ NỘI - 2023 LỜI CẢM ƠN Với tình cảm chân thành lịng biết ơn sâu sắc, cho phép gửi lời cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo sau đại học, Bộ mơn Hóa sinh, Trung tâm gen - protein - Trường Đại học Y Hà Nội; Ban Giám đốc, Khoa Khám bệnh - Bệnh viện Tim Hà Nội; Ban Giám đốc, Trung tâm Nội tiết- Chuyển hóa - Di truyền Liệu pháp phân tử - Bệnh viện Nhi Trung ương quan tâm, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình tơi học tập tiến hành nghiên cứu để tơi hồn thành luận án c Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS.TS Tạ họ Thành Văn PGS.TS Hoàng Thị Ngọc Lan – người thầy tận tình Y hướng dẫn, dìu dắt tơi q trình học tập, công tác chuyên môn nghề sĩ nghiệp bảo giúp tơi giải nhiều khó khăn, vướng mắc q n trình thực nghiên cứu, giúp tơi hồn thành luận án tiế Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô hội đồng sở Các thầy cô án cho nhiều ý kiến đóng góp q báu, nhiệt tình bảo, giúp đỡ tơi Lu ận q trình hồn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô, anh chị trước, bạn bè đồng nghiệp nhiệt tình bảo, giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận án Sau nữa, tơi xin dành tình u thương lịng biết ơn đến người thân gia đình, bạn bè chia sẻ, chỗ dựa vững để thực hồn thành luận án Hà Nơi, ngày tháng năm 2023 Tác giả luận án Nguyễn Thị Phương Thảo LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Thị Phương Thảo, nghiên cứu sinh khóa 33 Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Hóa sinh y học, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn thầy GS.TS Tạ Thành Văn PGS.TS Hồng Thị Ngọc Lan Cơng trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam c Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, họ trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi Y nghiên cứu Lu ận án tiế n sĩ Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Người viết cam đoan Nguyễn Thị Phương Thảo CÁC CHỮ VIẾT TẮT Cặp base Giọt máu khô Acid deoxyribonucleic Nghiệm pháp enzyme thay bệnh Fabry họ c Ghép tế bào gốc tạo máu Lu ận LVI Left ventricular index LVMI Left ventricular mass index LVPWd Left ventricular posterior wall diastolic MLPA Multiplex ligation-dependent probe amplification MS Mass spectrometry NST PCR Polymerase Chain Reaction SNP Bệnh Pompe khởi phát sớm Trình tự nối Bệnh Pompe khởi phát muộn Bệnh rối loạn tích đọng tiêu thể Chỉ số khối thất trái Chỉ số khối thất trái Độ dày thành sau thất trái tâm trương Y sĩ n án IOPD IVS LOPD LSD B natriuretic peptide Base pair Dried blood spot Deoxyribonucleic acid Enzyme replacement therapy Fabry disease Alpha-glucosidase A Globotriaosylceramide Alpha-galactosidase A Hematopoietic stem cell transplantation Infantile Onset Pompe Disease Intervening sequence Late Onset Pompe Disease Lysosomal stogage diease tiế BNP Bp DBS DNA ERT FD GAA Gb3 GLA HSCT Single Nucleotide Đo khối phổ Nhiễm sắc thể Phản ứng tổng hợp chuỗi Polymerase Đa hình đơn nucleotid Polymorphism VUS Variants uncertain signification Biến thể chưa rõ ý nghĩa MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀ I LIỆU 1.1 Rố i loa ̣n dự trữ tiêu thể 1.1.1 Đa ̣i cương 1.1.2 Chẩn đoán LSDs 1.1.3 Điều trị LSDs 1.1.4 Các phương pháp sàng lọc bệnh LSDs 1.2 Bệnh Fabry c 1.2.1 Biểu lâm sàng Fabry họ 1.2.2 Di truyền học phân tử Fabry 11 Y 1.2.3 Liên quan kiểu gen kiểu hình 18 sĩ 1.2.4 Chẩn đoán sàng lọc Fabry 21 tiế n 1.3 Bệnh Pompe 26 1.3.1 Biểu lâm sàng Pompe 28 án 1.3.2 Di truyền học phân tử Pompe 28 Lu ận 1.3.3 Mối liên quan kiểu gen kiểu hình 31 1.3.4 Chẩn đoán sàng lọc Pompe 32 1.4 Các phương pháp sinh học phân tử xác định đột biến gen GLA, GAA 34 1.4.1 Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) 35 1.4.2 Giải trình tự gen trực tiếp 36 1.4.3 Giải trình tự gen hệ NGS 37 1.4.4 Dự đoán khả gây bệnh đột biến phần mềm tin sinh học 37 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 2.1 Đối tượng nghiên cứu 40 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 41 2.3 Phương pháp nghiên cứu 42 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu 42 2.3.2 Cỡ mẫu nghiên cứu 42 2.3.3 Phương pháp thu thập mẫu 42 2.3.4 Các biến số nghiên cứu 44 2.3.5 Sơ đồ nghiên cứu 45 2.3.6 Phương tiện nghiên cứu 46 2.3.7 Quy trình kỹ thuật đo hoạt độ enzyme 50 2.3.8 Quy trình giải trình tự trực tiếp tìm đột biến gen GLA GAA 52 2.4 Thu thập xử lý số liệu 58 2.4.1 Công cụ thu thập số liệu 58 họ c 2.4.2 Quy trình thu thập số liệu 58 2.4.3 Xử lý số liệu 58 Y 2.4.4 Khống chế sai số 59 sĩ 2.5 Đạo đức nghiên cứu 59 tiế n CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 60 3.1 Đặc điểm chung đối tượng tham gia nghiên cứu 60 án 3.1.1 Bệnh Fabry 60 Lu ận 3.1.2 Bệnh Pompe 61 3.2 Kết đo hoạt độ enzyme 62 3.2.1 Hoạt độ enzyme GLA người bệnh nghi ngờ Fabry 62 3.2.2 Kết hoạt độ enzyme GAA người bệnh nghi ngờ Pompe 63 3.3 Kết phân tích gen tìm đột biến 64 3.3.1 Kết phân tích gen GLA 64 3.3.2 Kết giải trình tự gen người bệnh nghi ngờ Pompe 71 3.4 Phát người lành mang gen thành viên gia đình người bệnh 79 3.4.1 Phát người lành mang gen thành viên gia đình người bệnh Fabry 79 3.4.2 Phát người lành mang gen thành viên gia đình người bệnh Pompe 83 3.5 Đặc điểm lâm sàng người bệnh Fabry Pompe 93 3.5.1 Đặc điểm lâm sàng người bệnh Fabry 93 3.5.2 Đặc điểm lâm sàng người bệnh Pompe 93 CHƯƠNG BÀN LUẬN 96 4.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 96 4.1.1 Đặc điểm chung tuổi giới bệnh Fabry 96 4.1.2 Đặc điểm chung tuổi giới bệnh Pompe 98 4.2 Biến đổi hoạt độ enzyme GLA, GAA người bệnh tham gia nghiên cứu 98 4.2.1 Hoạt độ enzyme GLA 98 4.2.2 Hoạt độ enzyme GAA người bệnh nghi ngờ Pompe 100 họ c 4.3 Các đột biến gen GLA, GAA người bệnh Fabry Pompe 100 4.3.1 Các đột biến gen GLA 100 Y 4.3.2 Các đột biến gen GAA 103 n sĩ 4.4 Phát người lành mang gen thành viên gia đình người bệnh tiế tham gia nghiên cứu 113 4.4.1 Phát người lành mang gen thành viên gia đình người án bệnh Fabry 113 Lu ận 4.4.2 Phát người lành mang gen thành viên gia đình người bệnh Pompe 114 4.5 Biểu lâm sàng người bệnh Fabry Pompe 123 4.5.1 Biểu lâm sàng người bệnh Fabry 123 4.5.2 Đặc điểm lâm sàng bệnh Pompe 124 KẾT LUẬN 127 KHUYẾN NGHỊ 128 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Phân bố loại đột biến gen GLA 15 Bảng 1.2: Các SNP gen GLA 17 Bảng 1.3 Phân bố loại đột biến gen GAA 30 Bảng 2.1 Trình tự mồi gen GLA sử dụng nghiên cứu 48 Bảng 2.2 Trình tự mồi để khuếch đại gen GAA 49 Bảng 2.3: Thành phần phản ứng PCR khuếch đại exon gen GLA 53 Bảng 2.4: Chu trình nhiệt phản ứng PCR khuếch đại gen GLA 54 Bảng 2.5 Thành phần phản ứng PCR cho giải trình tự gen GLA 55 Bảng 2.6 Chu trình nhiệt phản ứng PCR cho giải trình tự gen GLA 55 Bảng 2.7: Thành phần phản ứng PCR khuếch đại gen GAA 56 Bảng 2.8: Chu trình nhiệt khuếch đại gen GAA 56 Bảng 2.9: Thành phần phản ứng PCR giải trình tự gen GAA 57 tiế n sĩ Y họ c Bảng 1.1: Bảng 2.10: Chu trình nhiệt PCR giải trình tự gen GAA 57 Phân bố theo giới nhóm người bệnh tham gia nghiên cứu 61 Bảng 3.2: Phân bố theo tuổi khởi phát người bệnh Pompe Lu ận án Bảng 3.1: nghiên cứu 61 Bảng 3.3: Phân bố theo giới người bệnh Pompe nghiên cứu 62 Bảng 3.4: Kết đo hoạt độ enzyme GLA 62 Bảng 3.5: Kết đo hoạt độ enzyme GAA 64 Bảng 3.6: Kết giải trình tự gen GLA 27 mẫu có hoạt độ enzyme thấp 66 Bảng 3.7 Dự đoán khả gây bệnh đột biến phầm mềm tin sinh học 69 Bảng 3.8: Kết hoạt độ enzyme theo loại đột biến 70 Bảng 3.9: Kết giả trình tự gen GAA đối tượng nghiên cứu 73 Bảng 3.10 Tần suất xuất đột biến nghiên cứu 76 Bảng 3.11 Kết dự đoán khả gây bệnh đột biến c.625T>C phần mền tin sinh học 77 Bảng 3.12: Kết đo hoạt độ enzyme GLA từ mẫu máu toàn phần 79 Bảng 3.13: Kết đo hoạt độ enzyme GLA từ giấy thấm DBS 80 Bảng 3.14: Kết đo hoạt độ enzyme kết giải trình tự exon gia đình người bệnh mã số VN.06 82 Bảng 3.15: Tỷ lệ thành viên mang đột biến qua hệ 92 Bảng 3.16: Triệu chứng lâm sàng khởi phát người bệnh 93 Bảng 3.17: Biến đổi số tim ngực LVMI Xquang tim phổi họ c siêu âm tim 94 Bảng 3.18: Kết hoạt độ enzyme CK, ALT người bệnh Lu ận án tiế n sĩ Y nghiên cứu 95 B3 Gia đình có chẩn đốn Fabry/ Pompe? Có Khơng …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… D2 D3 D4 D5 D6 án CẬN LÂM SÀNG: XQ tim phổi: Lu ận D D1 tiế n sĩ Y họ c Quan hệ với người bệnh C TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG C1 Lý đến khám Chiều cao Cân nặng Nhịp tim C2 Triệu chứng lâm sàng người bệnh khởi phát Khó thở Tím tái Yếu Lưỡi dày Bú C3 Thời điểm xuất triệu chứng lâm sàng khởi phát Siêu âm tim: …………………… Chỉ số tim ngực …………………… Độ dày thất trái (LVI) Chỉ số khối thất trái (LVMI) Bề dày thành sau thất trái tâm trương (LVPWd) Hóa sinh máu: …………………… CK ALT GAA …………………… GLA …………………… KQ giải trình tự gen …………………… Ngày …… tháng…… năm… Người thu thập thông tin PHỤ LỤC DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM16 họ c Năm sinh 2015-2016 1998 1990 1965 1969 1989 1989 2009 2015 2019 1970 1975 2005 1995 2018 1993 tiế n sĩ Y Họ tên Nguyễn Phương T Nguyễn Thị L Nguyễn Huy D Nguyễn Huy C Khiếu Thị Đ Nguyễn Thị H Nguyễn Văn K Nguyễn Thị Thùy L Nguyễn Thùy D Nguyễn Anh T Nguyễn Đức Q Nguyễn Thị Kim L Nguyễn Đức Đ Nguyễn Thị Diệp A Nguyễn Khánh N Nguyễn Văn K án Ký hiệu Pom 16.0 Pom 16.1 Pom 16.2 Pom 16.3 Pom 16.4 Pom 16.5 Pom 16.6 Pom 16.7 Pom 16.8 Pom 16.9 Pom 16.10 Pom 16.11 Pom 16.12 Pom 16.13 Pom 16.14 Pom 16.15 Quan hệ với BN Bênh nhân Mẹ Bố Ông nội Bà nội Chị gái bố Anh rể bố Cô (bố) Chị họ Anh họ Ông ngoại Bà Ngoại Cậu Bác gái (mẹ) Chị họ Chồng bác gái(mẹ) Lu ận STT 10 11 12 13 14 15 16 DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM17 STT 10 11 Ký hiệu Pom 17.0 Pom 17.1 Pom 17.2 Pom 17.3 Pom 17.4 Pom 17.5 Pom 17.6 Pom 17.7 Pom 17.8 Pom 17.9 Pom 17.10 Họ tên Phùng Quang T Phùng Minh C Lê Thị Thu V Phùng Thị M Nguyễn Văn T Phùng Văn T Kiều Thị Như Q Kiều Văn C Nguyễn Thị T Kiều Thị Hồng N Kiều Ngọc D Năm sinh 2020 1970 1972 1995 1994 1995 2000 1976 1982 2007 2011 Quan hệ với BN Bênh nhân Ông nội Bà nội Chị gái chồng Anh rể chồng Bố Mẹ Ông ngoại Bà ngoại Em gái (vợ) Cậu DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM18 STT Ký hiệu Năm sinh Họ tên Quan hệ với BN Pom 18.0 Phạm Tú Anh 2007 Bênh nhân Pom 18.1 Phạm Cơng T 1961 Ơng nội Pom 18.2 Hà Thị D 1962 Bà nội Pom 18.3 Phan Văn M 1955 Ông ngoại Pom 18.4 Nguyễn Thị P 1957 Bà ngoại Pom 18.5 Phạm Minh T 1988 Bố Pom 18.6 Phan Thị Thu H 1988 Mẹ Pom 18.7 Phạm Anh Đ 2013 Em trai Y họ c sĩ DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU STT Ký hiệu tiế n CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM19 Họ tên Pom 19.0 Đặng Anh T Pom 19.1 Đặng Văn D Pom 19.2 án Năm sinh Quan hệ với BN Bênh nhân Bố Ngô Thị Thanh T 1987 Mẹ Pom 19.3 Đặng Nhật M 2012 Anh trai Pom 19.4 Đặng văn T 1954 Ông nội Pom 19.5 Nguyễn Thị N 1955 Bà nội Pom 19.6 Ngô Văn T 1961 Ông ngoại Pom 19.7 Man Thị M 1963 Bà ngoại Pom 19.8 Đặng Văn L 1980 Anh trai bố 10 Pom 19.9 Đặng Hải N 2008 Anh họ 11 Pom 19.10 Đặng Hào N 2009 Anh họ 12 Pom 19.11 Ngơ Chí C 1992 Cậu 13 Pom 19.12 Nguyễn Thị A 1996 Vợ cậu 14 Pom 19.13 Nguyễn Thị H 1989 Chị dâu bố Lu ận 1985 DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM20 STT Ký hiệu Năm sinh Họ tên Quan hệ với BN Pom 20.0 Nguyễn Ngọc D 2018 Bênh nhân Pom 20.1 Nguyễn Thị L 1995 Mẹ Pom 20.2 Nguyễn Minh Q 2003 Cậu Pom 20.3 Nguyễn Thùy D 2002 Em gái mẹ Pom 20.4 Tạ Thị H 1970 Bà nội Pom 20.5 Nguyễn Thị H 1974 Bà Ngoại Pom 20.6 Nguyễn Văn Q 1971 Ông ngoại Pom 20.7 Nguyễn Hữu H 1993 Bố Y họ c sĩ DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU tiế n CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM21 Pom 21.0 Nguyễn Nhật N Năm sinh 2018 Pom 21.1 Nguyễn Hà A 2008 Cô Pom 21.2 Nguyễn Thị L 1971 Bà Nội Pom 21.3 Nguyễn Ngọc Khánh L 2003 Cô Pom 21.4 Nguyễn Việt L 1970 Ông nội Pom 21.5 Lê Thị H 1980 Bà ngoại Pom 21.6 Đào Minh Triết 2021 Em họ Pom 21.8 Nguyễn Thị Mỹ D 1998 Mẹ Pom 21.9 Nguyễn Việt D 1994 Bố 10 Pom 21.10 Nguyễn Tuấn V 2002 Cậu 11 Pom 21.11 Nguyễn Văn C 1975 Ông ngoại 12 Pom 21.12 Đào Tiến T 1990 Em rể bố 13 Pom 21.13 Nguyễn Thị Thu H 1992 Em gái bố Họ tên án Ký hiệu Lu ận STT Quan hệ với BN Bênh nhân DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH POM22 STT Ký hiệu Pom 22.0 Pom 22.1 Pom 22.2 Pom 22.3 Pom 22.4 Pom 22.5 Pom 22.6 Họ tên Nguyễn Mạnh D Nguyễn Văn T Nguyễn Văn T Nguyễn Thị Thu H Nguyễn Thị L Bùi Thị Đ Bùi Thị Thu V Pom 22.7 Nguyễn Hồng T Pom 22.8 Nguyễn Quốc T Năm sinh 2020 1996 1968 1993 1994 1972 1973 c 1992 Ông ngoại n sĩ Y họ 1967 Quan hệ với BN Bênh nhân Cậu Ông nội Mẹ Em gái bố Bà Ngoại Bà nội Bố tiế DANH SÁCH CÁC THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU Ký hiệu VN.0055.0 VN.0055.1 VN.0055.2 VN.0055.3 VN.0055.4 VN.0055.5 VN.0055.6 Họ tên VN.0055 Nhữ Thị L Nguyễn Văn H Nguyễn Văn T Nguyễn Thảo N Nhữ Văn K Nguyễn Thị T Năm sinh VN.0055.7 Nguyễn Văn C 1970 Quan hệ với BN Con - Bênh nhân Đối tượng nghiên cứu Chồng Em trai chồng Con gái Bố Mẹ Bố chồng VN.0055.8 Nguyễn Thị H 1972 Mẹ Chồng Lu ận STT án CỦA GIA ĐÌNH NGƯỜI BỆNH VN0055 1993 1991 1993 2017 1968 1968 PHỤ LỤC KẾT QUẢ GIẢI TRÌNH TỰ GEN CỦA CÁC THÀNH VIÊN TRONG GIA ĐÌNH Gia đình người bệnh mã số VN.06 Kết giải trình tự gen Nữ Nam Nữ Nam Nữ Nam Nữ Nam Nam c.178 C>T – dị hợp tử c.178 C>T Không phát đột biến Không phát đột biến c.178 C>T dị hợp tử c.178 C>T c.178 C>T dị hợp tử c.178 C>T c.178 C>T c Giới tính họ Mã số người bệnh VN.01 VN.02 VN.03 VN.04 VN.05 VN.06 VN.07 VN.08 VN.09 Y STT tiế Đột biến STT Mã số n sĩ Gia đình người bệnh mã số Pom16 Đồng/dị hợp tử Pom 16.1 c.1933G>C(p.Asp645His) Pom 16.2 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 16.3 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 16.4 E14 bình thường Pom 16.5 c.1933G>C(p.Asp645His) Pom 16.6 E14 bình thường Pom 16.7 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 16.8 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 16.9 E14 bình thường Lu ận án 10 Pom 16.10 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Dị hợp tử Dị hợp tử 11 Pom 16.11 E14 bình thường 12 Pom 16.12 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử 13 Pom 16.13 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử 14 Pom 16.14 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Gia đình bênh nhân mã sơ Pom17 STT Mã số Đột biến Đồng/dị hợp tử Dị hợp tử Pom 17.1 c.1933G>C(p.Asp645His) Pom 17.2 E14 bình thường Pom 17.3 c.1933G>C(p.Asp645His) Pom 17.4 E14 bình thường Pom 17.5 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 17.6 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 17.7 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 17.8 E14 bình thường Pom 17.9 c.1933G>C(p.Asp645His) sĩ Y họ c Dị hợp tử Dị hợp tử tiế n 10 Pom 17.10 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử STT Mã số Lu ận án Gia đình người bệnh mã số Pom18 Đột biến Đồng/dị hợp tử Pom 17.1 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 17.2 E14 bình thường Pom 17.3 c.1933G>C(p.Asp645His) Pom 17.4 E14 bình thường Pom 17.5 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 17.6 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Pom 17.7 c.1933G>C(p.Asp645His) Dị hợp tử Dị hợp tử Gia đình người bệnh mã số Pom19 Đột biến c.1735G>A(P.E579K) c.2040+1G>T c.2040+1G>T E14 bình thường, c.1735G>A(P.E579K) E14 bình thường, c.1735G>A(P.E579K) c.2040+1G>T E14 bình thường, E12 bình thường E14 bình thường, c.1735G>A(P.E579K) E14 bình thường, E12 bình thường E14 bình thường, E12 bình thường E14 bình thường, E12 bình thường E14 bình thường, E12 bình thường E14 bình thường, E12 bình thường E14 bình thường, E12 bình thường STT Mã số Gia đình người bệnh mã số Pom20 Đột biến Đồng/dị hợp tử Đồng/dị hợp tử dị hợp tử dị hợp tử dị hợp tử dị hợp tử dị hợp tử dị hợp tử Lu ận án tiế n sĩ Y họ c STT Mã số Pom 19.0 Pom 19.1 Pom 19.2 Pom 19.3 Pom 19.4 Pom 19.5 Pom 19.6 Pom 19.7 Pom 19.8 10 Pom 19.9 11 Pom 19.10 12 Pom 19.11 13 Pom 19.12 c 1411_1414del(p.Glu471Profs*5) E9 dị hợp tử Pom 20.0 c.1735G>A(C579K)dị hợp E12 Pom 20.1 c.1735G>A(E579K) dị hợp tử Pom 20.2 c.1735G>A(E579K) dị hợp tử Pom 20.3 E12, E9 bình thường Pom 20.4 c.1411delGAGA dị hợp tử Pom 20.5 c.1735G>A(E579K) dị hợp tử Pom 20.6 E12, E9 bình thường Pom 20.7 c.1411delGAGA dị hợp tử Gia đình người bệnh mã số Pom21 STT Mã số Đột biến Đồng/dị hợp tử Đồng hợp Pom 21.0 c.625T>C (p.Tyr209His) Pom 21.1 E3 bình thường Pom 21.2 E3 bình thường Pom 21.3 c.625T>C (p.Tyr209His) dị hợp tử Pom 21.4 c.625T>C (p.Tyr209His) dị hợp tử Pom 21.5 E3 bình thường Pom 21.6 c.625T>C (p.Tyr209His) dị hợp tử Pom 21.8 c.625T>C (Y209H) dị hợp tử Pom 21.9 c.625T>C (p.Tyr209His) họ c sĩ Y 10 Pom 21.10 E3 bình thường dị hợp tử dị hợp tử n 11 Pom 21.11 c.625T>C (p.Tyr209His) dị hợp tiế 12 Pom 21.12 E3 bình thường dị hợp tử Lu ận án 13 Pom 21.13 c.625T>C (Y209H) dị hợp Gia đình người bệnh mã số Pom22 STT Mã số Đột biến Đồng/dị hợp tử Pom 22.0 c.1933G>C(p.Asp645His) đồng hợp tử Pom 22.1 c.1933G>C(p.Asp645His) dị hợp tử Pom 22.2 c.1933G>C(p.Asp645His) dị hợp tử Pom 22.3 c.1933G>C(p.Asp645His) dị hợp tử Pom 22.4 c.1933G>C(p.Asp645His) dị hợp tử Pom 22.5 c.1933G>C(p.Asp645His) dị hợp tử Pom 22.6 E14 bình thường Pom 22.7 c.1933G>C(p.Asp645His) dị hợp Pom 22.8 E14 bình thường dị hợp tử Gia đình người bệnh mã số VN0055 Đột biến STT Mã số Đồng/dị hợp tử VN.0055.0 VN.0055.1 c.2040+1G>T dị hợp tử VN.0055.2 c.2040+1G>T dị hợp tử VN.0055.3 bình thường VN.0055.4 c.2040+1G>T dị hợp tử VN.0055.5 c.2040+1G>T dị hợp tử VN.0055.6 bình thường VN.0055.7 c.2040+1G>T VN.0055.8 bình thường Lu ận án tiế n sĩ Y họ c dị hợp tử PHỤ LỤC Hình ảnh điện di exon genGAA Hình ảnh điện di Exon 2.2 (424bp) Hình ảnh điện di Exon (343bp) Hình ảnh điện di Exon 17 Exon 4,5 Y họ c Hình ảnh điện di Exon 2.1 (420bp) Lu ận án tiế n sĩ (618bp) Hình ảnh điện di Exon (249bp) Hình ảnh điện di Exon 7,8 (441bp) Hình ảnh điện di Exon (333bp) Hình ảnh điện di Exon 10,11 (450bp) Hình ảnh điện di Exon 13 (287bp) tiế n sĩ Y họ c Hình ảnh điện di Exon 12 (502bp) Hình ảnh điện di Exon 15 (343bp) Lu ận án Hình ảnh điện di Exon 14 (286bp) Hình ảnh điện di Exon 16 (415bp) Hình ảnh điện di Exon 6, exon 15, exon 20 (416bp) PHỤ LỤC Một số hình ảnh kết giải trinh tự genGLA họ c Hình ảnh biến thể 5’UTR -12 G>A Lu ận án tiế n sĩ Y Hình ảnh biến thể 5’UTR -10 C>T Hình ảnh biến thể IVS1 +17 A>G Một số hình ảnh kết giải trinh tự genGAA Hình ảnh SNP 2065G>A (p.Glu689Lys) z án tiế n sĩ Y họ c Hình ảnh đột biến 2818-2819delTinsCAG Lu ận Hình ảnh đột biến c.2173C>T p.Arg725Asn Hình ảnh đột biến c.625T>C p.Tyr209His Hình ảnh đột biến c.1735 G>A p.Glu579Lys Lu ận án tiế n sĩ Y họ c Hình ảnh đột biến c.736delT p.Leu246fs