Nghiên cứu phân lập, cấu trúc và hoạt tính sinh học của polysaccharide từ quả bí đỏ chi cucurbita

ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ Nghiên cứu phân lập, cấu trúc hoạt tính sinh học polysaccharide từ bí đỏ chi Cucurbita ĐỖ THỊ BIỂN bien.dt211204m@sis.hust.edu.vn Ngành Kỹ thuật hóa học Giảng viên hướng dẫn:     Viện:  HÀ NỘI, 05/2023 CNG HÒA XÃ HI CH T NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN XÁC NHẬN CHỈNH SỬA LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên tác giả luận văn :  Th Bin Đề tài luận văn: Nghiên cu phân lp, cu trúc hot tính sinh hc ca polysaccharide t qu  chi Cucurbita Chuyên ngành: K thut hóa hc Mã số SV: 20211204M Tác ging dn khoa hc Hng chm lun tác gi a cha, b sung luheo biên bn hp Hng ngày 14/04/2023 vi ni dung sau: - Chnh sa li li t, li in n tồn - Chnh sa li phn Kt lun: Ti phn kt lun 3, 4,     2  - Tài liu tham kho: Sa li cách vit cho thng nht, khp li trích dn cho phù hp vi s th t tài liu tham kho -  Tng quan: Phân chia li vic phân nhóm cht cho phù hp - t qu tho lun: Kt qu nghiên cu cu trúc: Sa li cho phù hp vi tín hiu thc  Giáo viên hướng dẫn Tác giả luận văn TS H ng  Th Bin PGS TS Thành Th Thu Thy CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG  Mẫu 1c ĐỀ TÀI LUẬN VĂN Nghiên cu phân lp, cu trúc hot tính sinh hc ca polysaccharide t qu bí  chi Cucurbita ng dn Ký ghi rõ h tên TS H ng PGS TS Thành Th Thu Thy Lời cảm ơn Tơi xin bày t lịng bichân thành nht ti TS H ng PGS TS Thành Th Thu Thng d tơi hồn thành lu Tơi xin cy Vin K thut Hóa hc- i hc Bách Khoa Hà Ni nói chung, B mơn Cơng ngh c Bo v thc v tu kin giúp tơi hồn thành hc phn ca lu tc cn thit   ng dng- Vin Hóa hc- Vin Hàn lâm Khoa hc Công ngh Viu kin v thi gian trang thit b  tơi có th hồn thành lua Tóm tắt nội dung luận văn Polysaccharide t  có tính chc bit hot tính sinh hc phong phú c s dng rng rãi nhiu ngành kinh t Viu thành phn hóa hc, ct tính sinh hc ca polysaccharide t bí  thuc chi Cucurbita nhm góp phn hồn thing nghiên cu m rng kh ng dng ca ngu Vit Nam Lum phn chính: T ng quan tài lic v  chi Cucurbita Phân lp kho sát hot tính sinh hc ca polysaccharide t mu tht qu bí  chi Cucurbita (Cucurbita moschata D Cucurbita pepo L.nh thành phn cu trúc ca 01 polysaccharide phân lc Qua trình nghiên cu, bng  pháp sc ký (GPC) ph (IR, NMR) kho sát hot tính sinh hc theo quy c công b c kt qu sau: Phân lp tinh ch polysaccharide t qu  loài C moschata D C pepo L vc có hot tính chng oxy hóa, hot tính h ng huyt tt Polysaccharide phân lp t loài C moschata D bt acid thuc dng pectin Cu trúc hóa hc ca gm mc cu thành bi acid poly-α-ᴅ-Galacturonic α-L-Rhamnopyranose, mch nhánh Galactc liên kt vi mch ti v trí C-2 ca Galacturonic Pectin nà methoxyl hóa thp vi DE= 23.3 HC VIÊN Ký ghi rõ h tên  Th Bin MỤC LỤC M U NG QUAN 1.1 Tng quan v h bu bí Chi Cucurbita Loài Cucurbita moschata D Cucurbita pepo L 1.2 Thành phn hóa hc có qu  Polysaccharide Các cht khác 1.3 Ngun l 14 1.4 Polysaccharide polysaccharide chit xut t qu  15 Tng quan v polysaccharide 16 Polysaccharide t qu  18  NGHIÊN CU 23 2.1 ng nghiên cu 23 2.2 Hóa cht thit b 23 Hóa cht 23 Thit b 23 2.3 t tách 24 t 24  ct 24 Quá trình chit thc vt 24 2.4 t tính sinh hc 26 ng vt thc nghim (in vivo) 26 c ch enzyme α-glucosidase 26 2.5 nh cu trúc 27 c ký thm thu gel (GPC) 27  hng ngoi (IR) 27  cng t ht nhân (NMR) 28 C NGHIM 30 3.1 Thu thp x lí mu 30 Mi 30 Mu khô 30 3.2 Chit tách tinh ch polysaccharide t  chi Cucurbita 30 Chic 30 Chit acid 31 Tinh ch polysaccharide thô 32 3.3 nh thành phn hóa hc ca polysaccharide 32 nh thành phng 32 ng uronic acid 33 3.4 t tính sinh hc 33 t tính chng oxy hóa 33 t tính chng ting 33 3.5 nh cu trúc 35 c ký thm thu gel (GPC) 35  hng ngoi (IR) 35  cng t ht nhân (NMR) 35 T QU VÀ THO LUN 36 4.1 Kt qu chit tách polysaccharide t  chi Cucurbita 36 4.2 Kt qu phân tích thành phn hóa hc 37 4.3 Kt qu t tính sinh hc 38 Kt qu t tính chng oxy hóa 38 Kt qu t tính chng ting 38 4.4 Kt qu nghiên cu cu trúc 40 Kt qu trng phân t s phân b trng phân t 40 Kt qu nghiên cu cu trúc 40 NG PHÁT TRIN C  47 KT LUN 47 TÀI LIU THAM KHO 48 PH LC PH CÁC HP CHC 56 PH LC CƠNG TRÌNH KHOA HC CƠNG B TRONG KHN KH LU 71 TÓM TT LUN  TH 76 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hnh 1.1 Hình nh mt s   Vit Nam Hnh 1.2 Polysaccharide phân lp t dch chit ki Hnh 1.3 D u s dng pectin ca M n 2014÷2025 15 Hnh 1.4 Mt s  ng gp 16 Hnh 1.5 Các cu trúc không gian ca Galactose 17 Hnh 1.6 Pectin dn xut ca 19 Hnh 1.7 Kh ng DPPH c vitamin C 21 Hnh 1.8 Tác dng chng li gc t OH ca  vitamin C 22 Hm ca mu bí C moschata D (a) C pepo L (b) nghiên cu 23 Hnh 2.2 a, H thng chit nóng h-b, H thng chit nóng kt hp cánh khuy 25 Hnh 3.1 X lý m 30 Hnh 4.1 Ph NMR ca polysaccharide P1 phân lc 36 Hnh 4.2 Ph NMR ca polysaccharide P2 phân lc 37 Hnh 4.3 Ph NMR ca polysaccharide P3 phân lc 37 Hnh 4.4 Ph NMR ca polysaccharide P4 phân lc 37 Hnh 4.5 S GPC ca polysaccharide phân lc 40 Hnh 4.6 Ph IR ca pectin phân lp t  chi Cucurbita 41 Hnh 4.7 Ph 1H NMR a) 13 C NMR b) ca pectin phân lc 42 Hnh 4.8 Ph COSY ca pectin phân lc 43 Hnh 4.9 Ph HSQC ca pectin phân lc 44 Hnh 4.10 Ph HMBC ca pectin phân lc 45 Hnh 4.11 Cu trúc ca pectin P2 phân lp t dch chit acid C moschata D 46 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ   khi ca thit b GPC 27   chic ca th chi Cucurbita 31   chit acid ca th chi Cucurbita 32 DANH MỤC BẢNG B chuyn dch hóa hc δ (ppm) t  d liu sugabase ca dng glucose, galactose xylose dung môi D2 O 29 Bng 4.1 Kt qu phân lp polysaccharide t  chi Cucurbita 36 Bng 4.2 Kt qu th hot tính chng oxy hóa ca P2 phân lc 38 Bng 4.3 Khng ca chuc sau thí nghim 38 Bng 4.4 N ng huyt máu chuc sau thí nghim 39 Bng 4.5 Kh c ch enzyme α-glucosidase ca mu nghiên cu 39 Bng 4.6 Kt qu phân tích IR c 41 Bng 4.7: Các thành phng ca P 43 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN Kí hiệu Tiếng Anh Diễn giải BALB Balb Chng chut bch t c ni cy phịng thí nghim BHA Butylated HydroxyAnisole Butylated HydroxyAnisole BHT Butylated HydroxyToluene Butylated HydroxyToluene 13 Carbon-13 nuclear magnetic Ph cng t ht nhân 13 C resonance spectroscopy C-NMR Correlation spectroscosy Ph COSY DE Dextrose Equivalent  ng Dextrose- S g  ng D-glucoza 100g cht khô ca sn phm DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl DSS Sodium 2,2-Dimtely-2- Sodium 2,2-Dimtely-2Silapentane-5Sulfonate Silapentane-5Sulfonate GalA Galacturonic Acid Galacturonic Acid Gal Galactose Galactose Galp Galactopyranose Galactopyranose GPC Gel Permeation Chromatography Sc ký thm thu gel Gluc Glucose HMBC Heteronuclear Cohence H- Proton nuclear magnetic Ph cng hng t ht nhân H resonance spectroscopy COSY NMR Glucose Mutiple Bond Ph    ht nhân qua nhiu liên kt HG Homogalacturonan Homogalacturonan HSQC Heteronuclear single- quantum Ph    ht nhân qua mt liên kt coherence IC 50 Inhibitory concentration at 50% N c ch i tng th nghim IR Infrared spectroscopy Ph hng ngoi LM Low Methoxyl Methoxyl thp Mn Number average molecular mass Kh ng phân t trung bình s Mw Weight average molecular mass Kh ng phân t trung bình khi NMR Nuclear magnetic spectroscopy resonance RID Refractive Index Detector Detector ch s khúc x TFA Trifluoroacetic acid Trifluoroacetic acid Ph cng t ht nhân