Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
Địa điểm nghiên cứu
- Trung tâm nghiên cứu và phát triển giống lợn hạt nhân Thụy Phương trực thuộc Trung tâm nghiên cứu lợn Thụy Phương Địa chỉ: Phường Thụy Phương, Quận Bắc Từ Liêm, Hà Nội.
- Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh học – Khoa thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam Địa chỉ: Giảng đường B, Học việnNông nghiệp Việt Nam.
Thời gian nghiên cứu
- Thời gian nghiên cứu: Từ tháng 07/2016 đến tháng 08/2017.
- Lợn nái được theo dõi từ khi chuyển lên chuồng đẻ (trước dự đẻ 3 ngày) đến khi phối giống có chửa lứa tiếp theo.
Đối tượng nghiên cứu
- Nái được nuôi tại Trung tâm nghiên cứu và phát triển giống lợn hạt nhân Thụy Phương sinh sản trong khoảng thời gian từ tháng07/2016 đến hết tháng 06/2017; Đàn lợn con được sinh ra từ những lợn nái được nghiên cứu, đang trong giai đoạn theo mẹ.
Nội dung nghiên cứu
3.4.1 Khảo sát tỷ lệ mắc hội chứng MMA ở lợn nái sau sinh
- Tỷ lệ mắc hội chứng MMA trong quý 3 và 4 năm 2016; quý 1 và 2 năm 2017;
- Tỷ lệ mắc hội chứng MMA theo lứa đẻ;
3.4.2 Ảnh hưởng của hội chứng MMA đến năng suất sinh sản của lợn nái
- Thời gian động dục lại (ngày);
- Tỷ lệ động dục lại (%);
- Tỷ lệ thụ thai ở lợn nái (%);
- Số lợn con sinh ra còn sống/ổ sau 24 giờ (con);
- Trọng lượng lợn con sơ sinh (kg/con);
- Số lợn con cai sữa/ổ (con);
- Khối lượng cai sữa trung bình (kg/con).
- Trạng thái mệt mỏi, kém ăn
- Dịch viêm (lượng, màu, mùi)
3.4.4 Biến đổi sinh lý, sinh hóa máu
- Sự thay đổi một số chỉ tiêu sinh lý máu của nái mắc MMA;
- Sự thay đổi một số chỉ tiêu sinh hóa máu của nái mắc MMA. 3.4.5 Thử nghiệm phác đồ điều trị hội chứng MMA
Thử nghiệm điều trị hội chứng qua 3 phác đồ.
Phương pháp nghiên cứu
3.5.1 Điều tra tỷ lệ mắc hội chứng MMA
- Xác định tỷ lệ lợn nái mắc hội chứng MMA căn cứ hồ sơ theo dõi lợn nái tại cơ sở nghiên cứu, kết hợp với theo dõi trực tiếp;
* Chẩn đoán viêm tử cung:
Chẩn đoán viêm tử cung dựa vào tính chất dịch viêm, quan sát: màu, mùi Dịch viêm tử cung có màu trắng xám, trắng sữa hoặc màu hồng, nâu đỏ; mùi tanh, tanh thối hoặc thối khắm.
Kiểm tra viêm vú lợn bằng phản ứng nước oxy già (H 2 O 2 ) với men catalaze và peroxydaza, cách tiến hàng như sau:
Sát trùng bầu vú lợn bằng cồn 70 0 C, vắt bỏ vài tia sữa đầu, sau đó lấy 1ml sữa cho vào khay thử, nhỏ vài giọt nước oxy già, trộn đều rồi quan sát, dựa vào mức độ sủi bọt của sữa và vào sự đổi màu của chất chỉ thị màu phenolphtalein, ta có thể kết luận:
+ Âm tính (không viêm vú): nếu sữa không sủi bọt và chất chỉ thị màu không đổi màu;
+ Dương tính (viêm vú) nếu sữa có sủi bọt, chất chỉ thị màu chuyển từ màu trắng sang màu hồng.
3.5.2 Phương pháp xác định các biến đổi lâm sàng nái mắc MMA
Sử dụng phương pháp thường quy để kiểm tra triệu chứng lâm sàng của những lợn nái mắc hội chứng MMA (tất cả lợn nái được kiểm tra lâm sàng 3 ngày trước khi đẻ và 3 ngày đầu tiên sau khi đẻ với các biểu hiện lâm sàng:
+ Đo thân nhiệt: Thân nhiệt được đo bằng nhiệt kế thủy ngân, đo qua trực tràng vào sáng và chiều;
+ Theo dõi tần số hô hấp: Quan sát động tác hít thở qua thành bụng. + Đánh giá mức độ viêm tử cung: Quan sát dịch viêm tử cung có màu trắng xám, trắng sữa hoặc màu hồng, nâu đỏ; mùi tanh, tanh thối hoặc thối khắm
+ Lượng sữa: Sữa ít hoặc mất sữa, biểu hiện ở lợn mẹ là nằm úp bụng xuống sàn, tránh cho con bú, đàn lợn con kêu rít do đói.
* Phương pháp lấy mẫu máu: máu được lấy từ vịnh tĩnh mạch cổ ở lợn sau đẻ 24-48 giờ Máu phải được lấy vào buổi sáng trước khi cho lợn ăn Cố định lợn, lấy 5ml máu từ vịnh tĩnh mạch cổ bằng xi lanh vô trùng rồi cho vào ống nghiệm, đậy nắp, ghi nhãn mác, bảo quản ở 2-8 0 C, vận chuyển đến phòng thí nghiệm Đối với lợn mắc bệnh, tiến hành lấy mẫu máu vào thời điểm khi quan sát thấy các biểu hiện bệnh trên lâm sàng.
Các chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa máu của nái trong nghiên cứu được xác định bằng hệ thống xét nghiệm tự động: Hema Screen 18 (xác định các chỉ tiêu sinh lý) và mấy Cell-Dyn 3700 Abbott Hoa Kỳ (xác định các chỉ tiêu sinh hóa) tại Phòng thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ sinh học – Khoa thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam.
+ Chỉ tiêu sinh lý máu: Số lượng hồng cầu (10 6 /mm 3 ); Hàm lượng Hb (g/dL); Thể tích bình quân hồng cầu (fL); Tỷ khối huyết cầu; Nồng độ huyết sắc tố (g/dL); Lượng huyết sắc tố trong một hồng cầu (Pg); Số lượng bạch cầu (10 3 /mm 3) ; Công thức bạch cầu (%).
+ Chỉ tiêu sinh hóa máu: Protein tổng số; Các tiểu phần protein (g%). 3.5.4 Thử nghiệm điều trị hội chứng MMA
Với mục tiêu tìm ra phương pháp điều trị có hiệu quả, giúp cơ sở chăn nuôi ứng dụng điều trị hội chứng MMA ở lợn nái sinh sản, đề tài tiến hành thử nghiệm điều trị bằng 3 phác đồ điều trị và đánh giá kết quả điều trị của từng phác đồ
Dựa vào hiểu biết về nguyên nhân gây bệnh, tình hình sử dụng thuốc tại Trung tâm với các dạng thuốc thú y thông dụng được phép lưu hành trên thị trường, đang được sử dụng dùng để điều trị các triệu chứng bệnh của hội chứng MMA Đề tài tiến hành đưa ra 3 phác đồ điều trị sử dụng những chế phẩm chứa kháng sinh có tác dụng với vi khuẩn E.coli, Staphylococcus spp, Streptococcus spp, Salmonella spp, Pseudomonas spp để điều trị, đây là những vi khuẩn chủ yếu gây ra hội chứng MMA (Lê Minh Chí và Nguyễn Như Pho, 1985; Gevaert et al., 2006) Ngoài ra dùng kết hợp với thuốc kháng viêm, hạ sốt, dung dịch sát trùng tử cung, âm đạo, các sản phẩm hỗ trợ sinh sản và vitamin Các phác đồ điều trị được bố trí như sau:
Thuốc tiêm có chứa thành phần chính là Amoxicillin trihydrate + gentamycin, 1ml/20 kg thể trọng, tiêm bắp 2 ngày/ 1 lần.
PGF2α: 10mg/nái, tiêm 1 lần duy nhất vào ngày đầu tiên quá trình điều trị Thụt rửa tử cung bằng dung dịch iodine 10%; dùng 10ml iodine 10% pha với 1 lít nước, tiến hành thụt rửa 2 lần/ ngày chia ra 2 buổi sáng và chiều.
Tiêm hỗ trợ Vitamin tổng hợp, hạ sốt, kháng viêm; ngày 1 lần. Liệu trình 3 - 5 ngày
Thuốc tiêm có chứa thành phần kháng sinh chính là Amoxicillin trihydrate + gentamycin (giống phác đồ 1): 1ml/20 kg thể trọng, tiêm bắp 2 ngày 1 lần
Oxitocin: 30 IU/nái, tiêm 1 lần duy nhất vào ngày đầu tiên quá trình điều trị Thụt rửa tử cung bằng dung dịch iodine 10%; dùng 10ml iodine 10% pha với 1 lít nước, tiến hành thụt rửa 2 lần/ ngày chia ra 2 buổi sáng và chiều.
Tiêm hỗ trợ Vitamin tổng hợp, hạ sốt, kháng viêm; ngày 1 lần. Liệu trình 3 - 5 ngày
Thuốc tiêm có chứa thành phần kháng sinh chính là Amoxicillin trihydrate + gentamycin (giống phác đồ 1): 1ml/20 kg thể trọng, tiêm bắp 2 ngày 1 lần
Thụt rửa tử cung bằng dung dịch iodine 10%; dùng 10ml iodine 10% pha với 1 lít nước, tiến hành thụt rửa 2 lần/ ngày chia ra 2 buổi sáng và chiều.Tiêm hỗ trợ Vitamin tổng hợp, hạ sốt, kháng viêm; ngày 1 lần.
Sử dụng cùng một kháng sinh cho cả 3 phác đồ, sử dụng các chế phẩm có chứa hocmon sinh sản khác nhau để đánh giá ý nghĩa của mỗi loại lên khả năng phục hồi và kết quả điều trị.
Thử nghiệm được thực hiện trên 45 lợn nái mắc bệnh, mỗi phác đồ thực hiện trên 15 nái mắc bệnh Trong số nái điều trị , nái đẻ lứa đầu và các lứa đẻ sau, nái mắc bệnh ở các thể được chia đều cho các phác đồ, đảm bảo yếu tố đồng đều về điều kiện vệ sinh chuồng trại cũng như chế độ chăm sóc nuôi dưỡng, hộ lý Thời gian điều trị quy định tối đa là 5 ngày.
Xử lý số liệu
- Tất cả các số liệu đều được theo dõi, ghi chép và xử lý bằng phần mềm Excel 2007; phân tích thống kê bằng phần mềm Minitab 16.0.
Tổng số nái mắc bệnh Tổng số nái theo dõi
- Thời gian động dục lại sau cai sữa: Là thời gian tính từ khi lợn mẹ dừng cho con bú đến khi động dục lại.
- Số lợn con sinh ra: Tổng số lợn con sinh ra của số nái khảo sát.
- Trung bình số lợn con sinh ra còn sống sau 24 giờ/ổ =
(tổng số lợn con sinh ra – số lợn con chết trước 24 giờ)/ số ổ đẻ.
- Số lợn con cai sữa: Tổng số lợn con còn sống khi cai sữa của tổng số nái khảo sát.
Số lợn con cai sữa + Trung bình số lợn con cai sữa/ổ =
