(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá tác dụng ức chế enzyme α glucosidase của loài địa hoàng (rehmannia glutinosa)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Họ tên: Nguyễn Thị Dung TÊN ĐỀ TÀI LUẬN VĂN: “NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME αα-GLUCOSIDASEGLUCOSIDASE CỦA LOÀI ĐỊA HOÀNG (REHMANNIA GLUTINOSA)" LUẬN αVĂN αTHẠC αSĨ αHÓA αHỌC Hà Nội -GLUCOSIDASE 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Họ tên: Nguyễn Thị Dung TÊN ĐỀ TÀI LUẬN VĂN: “NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYME αα-GLUCOSIDASEGLUCOSIDASE CỦA LỒI ĐỊA HỒNG (REHMANNIA GLUTINOSA)" Chun ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN αVĂN αTHẠC αSĨ αHÓA αHỌC NGƢỜI αHƢỚNG αDẪN αKHOA αHỌC: αTS αVũ αKim αThƣ Hà Nội -GLUCOSIDASE 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi αlà αNguyễn αThị αDung, αHọc αviên αcao αhọc αlớp αCHE α2019B, αHọc αviện αKhoa học αvà αCơng αnghệ, αchun αngành αHóa αhữu αcơ, αmã αsố αhọc αviên α19803028 αxin cam αđoan: Đây αlà αluận αvăn αdo αbản αthân αtôi αtrực αtiếp αthực αhiện αdƣới αsự αhƣớng αdẫn α αTS αVũ αKim αThƣ Cơng αtrình αnày αkhơng αtrùng αlặp αvới αbất αkì αnghiên αcứu αnào αkhác αđƣợc α cơng αbố αtại αViệt αNam Các αsố αliệu αvà αthông αtin αnghiên αcứu αlà αhồn αtồn αchính αxác, αtrung αthực αkhách αquan, αđã αđƣợc αxác αnhận αvà αchấp αthuận αcủa αcơ αsở αnơi αnghiên αcứu Tơi αxin αhồn αtồn αchịu αtrách αnhiệm αtrƣớc αpháp αluật αvề αnhững αcam αkết αnày Hà Nội, ngày… tháng… năm 2021 Ngƣời αviết αcam αđoan Nguyễn Thị Dung LỜI CẢM ƠN Luận αvăn αđƣợc αhoàn αthành αtại αViện αHóa αsinh αbiển, αViện αHàn αlâm αKhoa học αvà αCông αnghệ αViệt αNam αtrong αkhuôn αkhổ αđề αtài αKhoa học Công nghệ cấp Bộ αmã αsố αB2020-GLUCOSIDASEMDA-GLUCOSIDASE09 Lời αđầu αtiên, αem αxin αbày αtỏ αlòng αbiết αơn αsâu αsắc αtới αTS Vũ Kim Thƣ ngƣời αđã αtận αtình αhƣớng αdẫn αvà αgiúp αđỡ αem αtrong αsuốt αquá αtrình αnghiên αcứu αhồn αthành αluận αvăn Em αxin αđƣợc αgửi αlời αcảm αơn αchân αthành αtới αPGS.TS Phan Văn Kiệm αtồn αthể αcán αbộ αphịng αNghiên αcứu αcấu αtrúc α- αViện αHóa αsinh αbiển, αViện Hàn αlâm αKhoa αhọc αvà αCơng αnghệ αViệt αNam αđã αnhiệt αtình αchỉ αbảo, αtạo αmọi αđiều kiện αgiúp αđỡ αem αtrong αthời αgian αnghiên αcứu Em αxin αđƣợc αgửi αlời αcảm αơn αtới αBan αlãnh αđạo αHọc αviện αKhoa αhọc αvà Cơng αnghệ αcùng αtồn αthể αcác αgiảng αviên αkhoa αHóa, αgiảng αviên αcủa αHọc αviện αdạy αdỗ αvà αchỉ αbảo αem αtrong αsuốt αquá αtrình αhọc αtập αtại αHọc αviện Em αxin αđƣợc αgửi αlời αcảm αơn αtới αBan αlãnh αđạo αTrung αtâm αNghiên αcứu αvà chuyển αgiao αCông αnghệ α- αViện αHàn αlâm αKhoa αhọc αvà αCông αnghệ αViệt αNam αđã tạo αđiều αkiện αthuận αlợi αcho αem αcó αthời αgian αtheo αhọc αkhóa αhọc αnày Cuối αcùng, αem αxin αđƣợc αgửi αlời αcảm αơn αtới αgia αđình, αbạn αbè αvà αngƣời thân αđã αluôn αở αbên αđộng αviên, αgiúp αđỡ αem αtrong αquá αtrình αem αhọc αtập αvà nghiên αcứu Hà Nội, ngày … tháng 11 năm 2021 Học αviên Nguyễn Thị Dung DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu C-NMR Tiếng Anh Carbon-13 αNuclear αMagnetic Resonance αSpectroscopy Distortionless αEnhancement αby Polarisation αTransfer Diễn giải Phổ αcộng αhƣởng αtừ αhạt nhân α13C Phổ αDEPT DMSO H-NMR Dimethylsulfoxide Proton αNuclear αMagnetic αResonance Spectroscopy (CH3)2SO Phổ αcộng αhƣởng αtừ αhạt nhân αproton IC50 Inhibitory αconcentratrion αat α50% HMBC Heteronuclear αmultiple αBond Connectivity High αResolution αElectronspray Ionization αMass αSpectrum Nồng αđộ αức αchế α50% đối αtƣợng αthử αnghiệm Phổ αtƣơng αtác αdị αhạt nhân αqua αnhiều αliên αkết Phổ αkhối αlƣợng αphân giải αcao αphun αmù αđiện tử Phổ αtƣơng αtác αdị αhạt nhân αqua αmột αliên αkết Phổ αNOESY 13 DEPT HR-ESIMS HSQC TLC Heteronuclear αSingle- αQuantum Coherence Nuclear αOverhauser αEnhancement Spectroscopy Thin αlayer αchromatography TMS c.c Tetramethylsilane Chromatography αcolumn Si(CH3)4 Cột αsắc αkí D E M A W ARG3D3 ARG6D3 ARG6 ARG12C1 Dichloromethane Ethyl αacetate Methanol Acetone Water CH2Cl2 CH3COOC2H5 CH3OH (CH3)2CO H2O Hợp αchất αRG1 Hợp αchất αRG2 Hợp αchất αRG3 Hợp αchất αRG4 NOESY ARG7 Sắc αký αlớp αmỏng Hợp αchất αRG5 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng α2.1 αTrang αthiết αbị αthí αnghiệm 11 Bảng α3.1 αSố αliệu αphổ αNMR αcủa αhợp αchất αRG1 αvà αhợp αchất αso αsánh 24 Bảng α3.2 αSố αliệu αphổ αNMR αcủa αhợp αchất αRG2 αvà αhợp αchất αso αsánh 28 Bảng α3.3 αSố αliệu αphổ αNMR αcủa αhợp αchất αRG3 αvà αhợp αchất αtham αkhảo 35 Bảng α3.4 αSố αliệu αphổ αNMR αcủa αhợp αchất αRG4 αvà αchất αso αsánh 41 Bảng α3.5 αSố αliệu αphổ αNMR αcủa αhợp αchất αRG5 αvà αhợp αchất αtham αkhảo 46 Bảng α3.6 αTác αđộng αức αchế -glucosidase αcủa αmẫu αnghiên αcứu 48 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình α1.1 αMột αsố αhình αảnh αvề αlồi αĐịa αhồng Hình α3.1 αCấu αtrúc αhóa αhọc αcủa αhợp αchất αRG1 αvà αcủa αhợp αchất αso αsánh 18 Hình 3.2 Phổ HR-GLUCOSIDASEESI-GLUCOSIDASEMS hợp chất RG1 18 Hình 3.3 Phổ 1H-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG1 .19 Hình 3.4 Phổ 13C-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG1 20 Hình 3.5 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG1 20 Hình 3.6 Phổ HMBC hợp chất RG1 21 Hình 3.7 Phổ HSQC hợp chất RG1 21 Hình 3.8 Phổ NOESY hợp chất RG1 23 Hình 3.9 Phổ CD hợp chất RG1 23 Hình α3.10 αCấu αtrúc αcủa αhợp αchất αRG2 αvà αcủa αhợp αchất αso αsánh 25 Hình 3.11 Phổ HR-GLUCOSIDASEESI-GLUCOSIDASEMS hợp chất RG2 .26 Hình 3.12 Phổ 1H-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG2 .26 Hình 3.13 Phổ 13C-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG2 27 Hình 3.14 Phổ HSQC hợp chất RG2 28 Hình 3.15 Phổ NOESY hợp chất RG2 .30 Hình 3.16 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG2 30 Hình 3.17 Phổ HMBC hợp chất RG2 31 Hình 3.18 Phổ CD hợp chất RG2 .32 Hình 3.19 Cấu trúc hóa học hợp chất RG3 .32 Hình 3.20 Phổ 1H-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG3 .33 Hình 3.21 Phổ 13C-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG3 33 Hình 3.22 Phổ HSQC hợp chất RG3 34 Hình 3.23 Phổ HMBC hợp chất RG3 35 Hình 3.24 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG3 37 Hình 3.25 Cấu trúc hóa học hợp chất RG4 .37 Hình 3.26 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG4 38 Hình 3.27 Phổ 1H-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG4 .38 Hình 3.28 Phổ 13C-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG4 39 Hình 3.29 Phổ HMBC hợp chất RG4 40 Hình 3.30 Phổ HSQC hợp chất RG4 40 Hình 3.31 Cấu trúc hóa học hợp chất RG5 .43 Hình 3.32 Một số tƣơng tác HMBC hợp chất RG5 43 Hình 3.33 Phổ 1H-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG5 .44 Hình 3.34 Phổ 13C-GLUCOSIDASENMR hợp chất RG5 44 Hình 3.35 Phổ HMBC hợp chất RG5 45 Hình 3.36 Phổ HSQC hợp chất RG5 48 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 THÔNG TIN VỀ LOÀI ĐỊA HOÀNG (REHMANNIA GLUTINOSA) αỞ αVIỆT αNAM 1.1.1 αĐặc αđiểm αthực αvật 1.1.2 αTác αdụng αchữa αbệnh αtrong αdân αgian 1.2 αMỘT αSỐ αCƠNG αTRÌNH αNGHIÊN αCỨU αTRONG αVÀ αNGỒI NƢỚC 1.2.1 αMột αsố αnghiên αcứu αtrong αnƣớc 1.2.2 αMột αsố αnghiên αcứu αtrên αthế αgiới .6 1.3 αTÁC αDỤNG αHẠ αĐƢỜNG αHUYẾT αCỦA αLOÀI αĐỊA αHOÀNG CHƢƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 αMẪU αNGHIÊN αCỨU 11 2.2 αNGUYÊN αVẬT αLIỆU 11 2.3 αPHƢƠNG αPHÁP αNGHIÊN αCỨU .11 2.3.1 αSắc αký αlớp αmỏng α(TLC) 11 2.3.2 αSắc αký αcột α(CC) 12 2.4 αPHƢƠNG αPHÁP αXÁC αĐỊNH αCẤU αTRÚC αCÁC αHỢP αCHẤT .12 2.4.1 αĐộ αquay αcực α([]D) 12 2.4.2 αPhổ αkhối αlƣợng αphân αgiải αcao αHR-ESI-MS 12 2.4.3 αPhổ αcộng αhƣởng αtừ αnhân α(NMR) 12 2.5 αTHỰC αNGHIỆM 13 2.6 αTHÔNG αSỐ αVẬT αLÍ αVÀ αDỮ αKIỆN αPHỔ αCỦA αCÁC αHỢP αCHẤT α α15 2.6.1 αHợp αchất αRG1 α(hợp αchất αmới) 15 2.6.2 αHợp αchất αRG2 α(hợp αchất αmới) 15 2.6.3 Hợp chất RG3 16 2.6.4 Hợp chất RG4 16 2.6.5 Hợp chất RG5 16 2.7 αPHƢƠNG αPHÁP αĐÁNH αGIÁ αTÁC αDỤNG αỨC αCHẾ αENZYM ααGLUCOSIDASE .16 2.7.1 αVật αliệu 16 2.7.2 αPhƣơng αpháp .16 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG1 18 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG2 25 3.3 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG3 32 3.4 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG4 37 3.5 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT RG5 43 3.6 αTÁC αDỤNG αỨC αCHẾ αENZYME αα-GLUCOSIDASE .48 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC .56 Bài αbáo αPhytochemistry αLetters, α43, α208-211, α2021 56 KẾT αQUẢ αGIÁM αĐỊNH αTÊN αKHOA αHỌC αMẪU αTHỰC αVẬT 60 Phụ lục 1.1-GLUCOSIDASE1.22: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG1 61 Phụ lục 2.1-GLUCOSIDASE2.19: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG2 72 Phụ lục 3.1-GLUCOSIDASE3.16: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG3 82 Phụ lục 4.1-GLUCOSIDASE4.16: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG4 90 Phụ lục 5.1-GLUCOSIDASE5.18: CÁC PHỔ CỦA HỢP CHẤT RG5 98