Tóm tắt: Nghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uống

Nghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uốngNghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) và ứng dụng trong đồ uống

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG ĐẶNG BỬU TÙNG THIỆN NGHIÊN CỨU THU NHẬN POLYPHENOL, CHLOROPHYLL TỪ RAU MÁ THÌA (Centella asiatica (L.) Urb) VÀ ỨNG DỤNG TRONG ĐỒ UỐNG TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ KHÁNH HỊA – 2023 i Cơng trình được hồn thành Trường Đại học Nha Trang Huớng dẫn khoa học: PGS TS Ngô Đăng Nghĩa PGS TS Vũ Ngọc Bội Phản biện 1: GS TS Nguyễn Anh Dũng Phản biện 2: GS TS Nguyễn Thị Hiền Phản biện 3: PGS TS Nguyễn Thị Hoài Trâm Luận án được bảo vệ Hội đồng đánh gia luận án cấp trường, họp Trường Đại học Nha Trang vào ngày tháng năm 2023 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Thư viện Trường Đại học Nha Trang ii MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Các thảo dược, hợp chất thiên nhiên có hoạt tí nh sinh học quan tâm sử dụng y học, thực phẩm, mỹ phẩm, nông nghiệp Rau má (Centella asiatica (L.) Urb) thuộc họ Hoa tán làloài rau, loài thảo dược biết đến cótác dụng tăng cường trínhớ, hỗ trợ để điều trị bệnh ngồi da, giải độc gan, cóhoạt tí nh chống oxy hóa cao Có nhiều đặc tính lànhờ rau mácóchứa hợp chất hóa học tác dụng tốt thể, polyphenol, chlorophyll vàdẫn xuất chúng đáng quan tâm Đã có nhiều nghiên cứu cho thấy, việc người sử dụng thực phẩm, thảo dược giàu polyphenol, chlorophyll tốt cho sức khỏe, có tác dụng giảm nguy mắc bệnh tật, phòng ngừa bệnh ung thư, kéo dài tuổi thọ Các đặc tính sinh học vàlợi í ch polyphenol, chlorophyll sức khỏe người giới quan tâm nghiên cứu vàsản xuất sản phẩm cóhoạt chất chống oxy hóa nhằm mang lại sức khỏe cho người Trong hướng nghiên cứu lĩnh vực công nghệ thực phẩm sản xuất thực phẩm giàu polyphenol, chlorophyll cóhoạt tính chống oxy hóa nhằm đem lại lợi í ch cho sức khỏe người khuyến khích vàcónhiều tiềm Từ lý tơi thực đề tài luận án: “Nghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll từ rau má thìa (Centella asiatica (L.) Urb) ứng dụng đồ uống” Mục tiêu luận án Xây dựng quy trình thu nhận polyphenol, chlorophyll có hoạt tí nh chống oxy hóa từ rau máthìa (Centella asiatica (L.) Urb) trồng Nha Trang - Khánh Hòa vàtạo bột rau másấy phun chứa hợp chất polyphenol, chlorophyll cóhoạt tí nh chống oxy hóa từ rau máthìa nhằm định hướng ứng dụng đồ uống thay cho sản phẩm nước uống rau mátruyền thống Đối tượng nghiên cứu Nguyên liệu nghiên cứu chiết tách polyphenol, chlorophyll cóhoạt tính chống oxy hóa làrau máthì a (Centella Asiatica (L.)), thu thập ngẫu nhiên từ ruộng rau máở giai đoạn 75 ngày tuổi Dịch chiết rau máthìa điều kiện tối ưu lànguyên liệu dùng để nghiên cứu sấy phun tạo bột rau máchứa polyphenol, chlorophyll cóhoạt tí nh chống oxy hóa Phạm vi nghiên cứu Nghiên cứu xác định điều kiện tối ưu cho trình tách chiết polyphenol, chlorophyll cóhoạt tí nh chống oxy hóa từ rau mátrồng Nha Trang - Khánh Hòa; Nghiên cứu xác định điều kiện tối ưu cho trình sấy phun tạo bột rau má chứa polyphenol, chlorophyll cóhoạt tính chống oxy hóa; Nghiên cứu bảo quản bột rau máchứa polyphenol, chlorophyll cóhoạt tí nh chống oxy hóa Phương pháp nghiên cứu Để nghiên cứu thu nhận polyphenol, chlorophyll có hoạt tính chống oxy hóa từ rau má a (Centella asiatica (L.) Urb), luận án sử dụng phương pháp nghiên cứu tiêu chuẩn giới vàViệt Nam, cósử dụng phần mềm xử lýsố liệu, phần mềm tối ưu hóa uy tí n nhằm đảm bảo kết thínghiệm có độ tin cậy cao Kết cấu luận án Luận án gồm 165 trang, 25 trang tổng quan, 28 trang phương pháp nghiên cứu, 91 trang kết nghiên cứu, trang kết luận vàkiến nghị, 20 bảng số liệu, 88 hì nh, 184 tài liệu tham khảo (tiếng Việt 20 tài liệu, tiếng Anh 164 tài liệu) và10 trang phụ lục CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu rau má thìa, polyphenol, chlorophyll hoạt tính chống oxy hóa Rau má thìa với tên khoa học Centella Asiatica (L.) Urb (Hoặc Hydrocotyle asiatica (L.) Urb.) Loài có nhiều hợp chất hóa học có hoạt tí nh tốt, có nhiều polyphenol tồn hai nhóm flavonoid acid phenolic; có chlorophyll A chlorophyll B Cùng với hoat chất trên, rau máthì a cónhiều hoạt tí nh như: bảo vệ tế bào da, niêm mạc dày, tế bào thần kinh; làm giảm phát triển khối u, giảm nguy điều trị bênh tiểu đường, giảm ung thư gan, ung thư vú, có hoạt tí nh kháng vi sinh vật, hoạt tí nh chống oxy hóa Việc nghiên cứu nhằm thu hồi polyphenol, chlorophyll có hoạt tí nh chống oxy hóa từ rau má thìa để sử dụng lĩnh vực nói chung lĩnh vực thực phẩm nói riêng làphùhợp với nhu cầu sống hiên 1.2 Chiết tách polyphenol, chlorophyll Để chiết polyphenol, chlorophyll cóthể sử dụng nguyên lýchiết Rắn - Lỏng Trong trì nh chiết phải xem xét độ phân cực, chất hóa học đối tượng cần chiết để chọn dung môi chiết phùhợp, cụ thể người ta thường sử dụng dung mơi có độ phân cực cao để chiết như: methanol, ethanol, acetone Và trì nh chiết xét đến yếu tố tác động như: nhiệt độ, thời gian, tỷ lệ DM/NL, pH Bên cạnh đó, q trình chiết sử dụng yếu tố vật lý để hỗ trợ như: sóng siêu âm, vi sóng, điện trường, áp suất thủy tĩnh 1.3 Sấy phun tạo bột rau má chứa polyphenol, chlorophyll Sấy phun làquátrình khử nước giọt chất lỏng làm phân tán với kí ch thước nhỏ dịng khơng khí nóng thu bột dạng hạt mịn, khơ Để thực kỹ thuật này, người ta dịch hóa nguyên liệu, phun dịch nguyên liệu thành hạt nhỏ môi trường nhiệt độ cao để tách sấy khơ chất khơ, chuyển chúng dạng bột nhanh chóng nhờ máy sấy phun Kỹ thuật sấy phun tạo nên diện tí ch bề mặt lớn dạng giọt chất lỏng nhỏ, mịn thơng qua qtrình phân tử hóa dịch sấy buồng sấy, cho sản phẩm dạng hạt bột vàhình cầu Để có bột rau mácóchất lượng, có đặc tí nh lýhóa tốt thìthiết bị sấy phun phải đảm bảo đặc tính kỹ thuật, phải chọn kỹ thuật điều kiện sấy phun phù hợp Chất lượng sản phẩm bột kỹ thuật sấy phun phụ thuộc vào chất mang, điều kiện sấy gồm: nồng độ dịch sấy, nhiệt độ khơng khí đầu vào đầu ra, lưu lượng dòng cấp liệu, lưu lượng khí nén, lưu lượng khíkhơ, loại cấu phun vàtốc độ phun 1.4 Một số nghiên cứu ứng dụng polyphenol, chlorophyll Các hợp chất polyphenol ứng dụng nhiều lĩnh vực công nghệ thực phẩm chúng lànhững chất hoạt động giữ vai tròchủ đạo định đến hương vị, màu sắc sản phẩm thực phẩm; tham gia vào quátrì nh tạo cấu tử thơm mới, tạo nên mùi thơm đặc biệt cho thực phẩm; quan tâm nhiều lĩnh vực đồ uống có nguồn gốc từ thực vật vìchúng cóhoạt tính chống oxy hóa, đặc biệt phenolics coi làchất chống oxy hóa mạnh mẽ Ngồi ra, polyphenol cịn ứng dụng nhiều lĩnh vực y học cố truyển, y học hỗ trợ trị bệnh Chlorophyll làphụ gia thực phẩm sử dụng tạo màu xanh látự nhiên cho loại thực phẩm bánh, kẹo, gia vị, nước giải khát, dùng sản xuất thực phẩm có chức có chlorophyll nước uống, viên uống diệp lục tố Chlorophyll chế phẩm mỹ phẩm cótác dụng chống oxy hóa, thuốc khử mùi thể, làm giảm hôi miệng, hôi nách, hôi chân; kem dưỡng da, mặt nạ làm đẹp da, xà phòng, kem đánh CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU Rau má thìa (Centella asiatica (L), Urban), thuộc giới Plantae, Apiales, họ Apiaceae, phân họ Mackinlayoideae vàchi Centella mọc Nha Trang - Khánh Hòa 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1 Sơ đồ thí nghiệm tổng quát Rau máthìa (Centella asiatica (L.) Urb) Định danh lồi kỹ thuật gen DNA Xác định số chất cóhoạt tính sinh học Xác định thành phần sinh hóa Xác định tuổi thu hoạch Nghiên cứu chiết rút Xác định hàm lượng polyphenol, chlorophyll hoạt tính chống oxy hóa theo thời gian thu hoạch - Xác định: cách thức chiết, dung môi, nồng độ dung môi, nhiệt độ, thời gian vàtỷ lệ DM/NL - Tối ưu công đoạn chiết theo mơ hình BoxBehnken Dịch chiết Nghiên cứu sấy phun - Xác định: chất mang, tốc độ đĩa phun, nồng độ chất mang, áp suất khínén, nhiệt độ sấy - Tối ưu hóa cơng đọan sấy phun theo mơhình Box-Behnken Bột rau má Đánh giá đặc tính bột: độ tan, kích thước bột, số đa phân tán, đặc tính nhiệt Xác định cơng thức bột đồ uống rau má Nghiên cứu bảo quản Thời gian bảo quản: nhiệt độ phịng điều kiện lạnh Sản phẩm Hình 2.1 Sơ đồ thínghiệm tổng qt Mẫu rau máthìa xử lý, sấy khô, nghiền nhỏ thành bột lưu trữ Sau mẫu phân tích, đánh giá thành phần dinh dưỡng bản, hàm lượng polyphenol, chlorophyll vàhoạt tính chống oxy hóa Q trình tách chiết khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến thu nhận hợp chất polyphenol, chlorophyll có hoạt tính chống oxy hóa từ rau má thìa; gồm yếu tố ảnh hưởng đến qtrình chiết: phương thức chiết, dung mơi chiết, nhiệt độ chiết, thời gian chiết, tỷ lệ DM/NL, nồng độ dung môi, pH dung dịch chiết Dịch chiết sau nghiên cứu sấy phun tạo bột, xác định đặc tính vàchất lượng thu bột rau máthì a 2.2.2 Phương pháp định danh, xử lý mẫu phân tích hóa học - Định danh rau má thìa thực tách chiết DNA tổng số dựa quy trì nh CTAB Kurt Weising có cải tiến, giải trì nh tự gen theo phương pháp Sanger kết giải trình tự hiệu chỉnh phần mềm BioEdit version 7.2.6.1 - Xử lý mẫu thực theo Gunathilake vàCs, (2002) - Xác định độ ẩm rau máthì a theo Dược điển Việt Nam V, tập (phụ lục 9.6; PL203) - Xác định hàm lượng tro tồn phần rau má thìa theo Dược điển Việt Nam V, tập (phụ lục 9.8; PL204) - Định lượng hoạt tính chống oxy hóa tổng theo Prieto cộng (1999) với chất chuẩn làacid ascorbic vàđo độ hấp thụ quang máy quang phổ UV-VIS bước sóng 695nm - Định lượng hoạt tính khử sắt theo Zhu vàcộng với chất chuẩn làsắt (II) sunphat FeSO4 (2002) đo độ hấp thụ quang máy quang phổ UV-VIS bước sóng 655 nm - Xác định hoạt tính bắt gốc tự DPPH theo Brand-Williams vàcộng (1995) đo độ hấp thụ quang máy quang phổ UV-VIS bước sóng 517nm - Định lượng polyphenol theo phương pháp Folin - Ciocalteu (Singleton vàCs, 1999) với acid gallic làchất chuẩn vàđo độ hấp thụ quang máy quang phổ UV-VIS bước sóng 755 nm - Định lượng chlorophyll theo Lichtenthaler H K (1987) dung môi ethanol 95%, đo độ hấp thụ dịch chiết máy quang phổ UV-VIS bước sóng 664 nm và648 nm - Xác định độ tan bột sấy phun thực theo Dược điển Việt Nam V, (2017) - Xác định đường kính hạt trung bì nh vàchỉ số phân tán đo kỹ thuật tán xạ ánh sáng động (DLS: Dynamic Light Scattering) theo tiêu chuẩn ISO 22412 (2008) (Technical Committee ISO/TC 24, 2017) - Phân tích nhiệt vi sai DSC (Differential scanning calorimetry) thực thiết bị phân tích nhiệt quét vi sai bù lượng DSC-60, Shimadzu, Nhật - Xác định hàm lượng thành phần kim loại: Xác định thủy ngân (Hg) theo QCVN 8-2: 2011/BYT, xác định Cadmi (Cd) theo QCVN 8-2: 2011/BYT, xác định chì (Pb) theo QCVN 8-2: 2011/BYT xác định Arsen (As) theo QCVN 8-2: 2011/BYT 2.2.3 Phương pháp phân tích vi sinh vật - Xác định Salmonella theo QCVN 8-3: 2012/BYT - Xác định Escherichia coli theo QCVN 8-3: 2012/BYT 2.3 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU Số liệu thực nghiệm thu nhận phương pháp thống kê Mỗi thínghiệm tiến hành lần, lần mẫu vàkết làtrung bì nh cộng lần thínghiệm Tí nh tốn, vẽ đồ thị, xử lýkết quả, phân tích phương sai ANOVA, kiểm tra khác biệt phần mềm Minitab 18.0 vàphân tích liệu, thiết kế tối ưu hóa phần mềm Design Expert 12.0 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 ĐỊNH DANH VÀ PHÂN TÍCH MỘT SỐ THÀNH PHẦN HĨA HỌC CHỦ YẾU CỦA RAU MÁ THÌA 3.1.1 Định danh rau máthìa Mẫu rau má thực tách chiết DNA theo quy trình CTAB I, quy trình cócải biên việc bổ sung SDS vào thành phần đệm phân lập Tiến hành tách vànhân 02 gene matK vàITS1–5.8S–ITS2 Tất sản phẩm quátrì nh nhân phản ứng PCR với mồi đặc hiệu có từ DNA tách chiết từ mẫu giải trình tự thu Kết đọc trình tự gene đoạn matK đoạn 5.8S rDNA Kết cho thấy trì nh tự thu mẫu nghiên cứu có mức độ tương đồng cao với trì nh tự vùng matK (98,44%- 98,76%) vàvùng ITS (98,21-100%) loài Centella asiatica có sẵn NCBI Vậy mẫu nghiên cứu thuộc lồi rau má a (Centella asiatica (L.) Urban), làm sở cho nghiên cứu 3.1.2 Phân tích số thành phần hóa học chủ yếu rau má thìa Phân tích cho thấy hàm lượng polyphenol, chlorophyll vàtriterpenoid cótrong rau má a mọc Khánh Hịa cao so với loài số quốc gia có cơng bố Malaysia, Ấn độ cao số loài rau má khác mọc Khánh Hịa Hydrocotyle verticillata Thunb., Hydrocotyle javanica Thunb Ngồi ra, rau máthìa mọc Khánh Hịa chứa nhiều thành phần dinh dưỡng như: protein, chất béo, carbohydrate, vitamin vàcác khoáng chất (bảng 3.1) Bảng 3.1 Các thành phần quang hóa dinh dưỡng rau máthì a Thành phần hóa học Polyphenol Chlorophyll Triterpenoid Protein Chất béo Carbohydrate Đơn vị mg acid galic/g khô mg/g khô mg acid oleanolic/g khô g/100g khô g/100g khô g/100g khô Chất xơ Khống g/100g khơ g/100g khơ Hàm lượng 13,56 ±0,20 4,73 ±0,03 5,90 ±0,02 11,32±0,12 3,15±0,01 28,42±0,02 42,80±0,12 3,62±0,09 3.1.3 Xác định thời gian thu hoạch rau má Thời gian thu hoạch rau má a có ảnh hưởng đến hàm lượng polyphenol chlorophyll Hơn nữa, nghiên cứu cho thấy có tương quan mạnh hàm lượng polyphenol, chlorophyll với loại hoạt tí nh chống oxy hóa Thời gian thu hoạch rau máthì a ảnh hưởng đến hàm lượng polyphenol, chlorophyll vàcác hoạt tính chống oxy hóa, kết thể hì nh 3.1÷3.3 6.0 5.10a Hàm lượng polyphenol (mg acid galic/g khô) 20.0 4.95a 4.81ab 3.71e 16.0 14.16a 11.30d 12.0 12.19c 4.43cd 4.60bc 13.18b 13.83ab 4.26d 4.0 11.77cd 6.97e 8.0 5.0 3.0 2.0 4.0 1.0 Polyphenol Chlorophyll 0.0 Hàm lượng chlorophyll (mg/g khô) 24.0 0.0 30 45 60 75 90 105 120 Độ tuổi thu hoạch (ngày) Hì nh 3.1 Ảnh hưởng thời gian thu hoạch đến hàm lượng polyphenol vàchlorophyll dịch chiết rau má 20.60b 21.50ab 25.0 22.89a 21.13b 20.48b 8.0 6.0 13.16d 4.0 6.06a 5.54b 5.74ab 5.35b 5.42b 18.07c 20.0 15.0 4.47c 3.92d 10.0 Hoạt tính chống oxy hóa tổng 2.0 5.0 Hoạt tính khử sắt (mg FeSO4/g khơ) Hoạt tính chống oxy hóa tổng (mg acid ascorbic/g khơ) 10.0 Hoạt tính khử sắt 0.0 0.0 30 45 60 75 90 105 120 Độ tuổi thu hoạch (ngày) Hì nh 3.2 Ảnh hưởng thời gian thu hoạch đến hoạt tính chống oxy hóa tổng vàhoạt tính khử sắt dịch chiết rau má Hoạt tính bắt gốc tự DPPH (%) 100 79.48a 80 74.82ab 70.80b 60.05c 60 58.46cd 52.57d 52.17d 40 20 30 45 60 75 90 105 120 Độ tuổi thu hoạch (ngày) Hì nh 3.3 Ảnh hưởng thời gian thu hoạch đến hoạt tính bắt gốc tự DPPH dịch chiết rau má Qua phân tích cho thấy thời gian thu hoạch thí ch hợp cho rau má a dùng làm nguyên liệu thu nhận polyphenol, chlorophyll co hoạt tí nh sinh học là75 ngày 3.2 NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT POLYPHENOL VÀ CHLOROPHYLL TỪ RAU MÁ THÌA 3.2.1 Yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết tách polyphenol, chlorophyll có hoạt tính chống oxy hóa từ rau má thìa - Phương thức vàdung môi chiết: Kết nghiên cứu cho thấy phương thức chiết có hỗ trợ sóng siêu âm cho hàm lượng polyphenol, chlorophyll, hoạt tính chống oxy hóa tổng hoạt tính khử sắt cao so với phương thức chiết hồi lưu ngâm chiết Về dung mơi chiết, q trình khảo sát dung mơi có độ phân cực khác cho thấy dung môi ethanol cho hàm lượng polyphenol, chlorophyll hoạt tính chống oxy hóa cao, làlựa chọn phù hợp để chiết hợp chất polyphenol, chlorophyll có hoạt tính chống oxy hóa từ rau máthì a - Nồng độ dung mơi: Hàm lượng polyphenol, chlorophyll vàcác hoạt tí nh chống oxy hóa dịch chiết thay đổi theo nồng độ dung mơi ethanol từ 75÷99,5(%) Nồng độ ethanol qtrình chiết polyphenol chlorophyll cho hàm lượng cao là95% 85%; cho hoạt tính chống oxy hóa tổng hoạt tí nh khử sắt cao 95% 90% Kết nghiên cứu chọn nồng độ dung môi ethanol là95% phù hợp để lựa chọn chiết hợp chất polyphenol, chlorophyll cóhoạt tính chống oxy hóa từ rau máthì a - Xác định nhiệt độ chiết: Nhiệt độ chiết có tác động mạnh đến hàm lượng polyphenol, chlorophyll vàhoạt tính chống oxy hóa tổng, hoạt tí nh khử sắt dịch chiết, chúng biến đổi thay đổi nhiệt độ chiết từ 30÷80 (oC) Kết nghiên cứu chọn nhiệt độ chiết 60oC làphù hợp để chiết hợp chất polyphenol, chlorophyll cóhoạt tí nh chống oxy hóa từ rau máthì a - Xác định thời gian chiết: Qua kết nghiên cứu cho thấy hàm lượng polyphenol, chlorophyll vàhoạt tính chống oxy hóa tổng, hoạt tí nh khử sắt dịch chiết nhiệt độ chiết khác có khác biệt mang ý nghĩa thống kê(p