Khóa luận nghiên cứu hệ protein ở các bệnh nhân đái tháo đường tuýp ii có biến chứng võng mạc

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC ======  ====== NGUYỄN THỊ UYÊN NGHIÊN CỨU HỆ PROTEIN Ở CÁC BỆNH NHÂN ĐÁI THÁO ĐƯỜNG TUÝP II CÓ BIẾN CHỨNG VÕNG MẠC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC HÀ NỘI - 2023 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC ======  ====== NGUYỄN THỊ UYÊN NGHIÊN CỨU HỆ PROTEIN Ở CÁC BỆNH NHÂN ĐÁI THÁO ĐƯỜNG TUÝP II CÓ BIẾN CHỨNG VÕNG MẠC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (NGÀNH DƯỢC HỌC) Khóa : QH.2018.Y Người hướng dẫn 1: ThS.BSNT HỒ MỸ DUNG Người hướng dẫn 2: TS BÙI PHƯƠNG THẢO HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Khóa luận kết trình học tập, rèn luyện em trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội Trong trình nghiên cứu hồn thành, khóa luận này, em nhận nhiều giúp đỡ quý báu từ thầy cô trường Đại học Y Dược trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Trước hết, em xin bày tỏ lòng biết sâu sắc tới ThS.BSNT Hồ Mỹ Dung TS Bùi Phương Thảo - người hết lịng tận tình, bảo em q trình làm khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn đề tài “Hợp tác nghiên cứu kỹ thuật định lượng số biomarker bệnh nhân bị bệnh võng mạc mắt đái tháo đường”, mã số nhiệm vụ NĐT.69/CHN/19 – Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội hỗ trợ để em thực nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Bộ môn Y Dược học sở, trường Đại học Y Dược Khoa Sinh học, trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện cho em thực khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè động viên, giúp đỡ em trình học tập làm đề tài tốt nghiệp Trong trình làm khóa luận khơng tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận góp ý thầy để khóa luận em hồn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 23 tháng 05 năm 2023 Sinh viên Nguyễn Thị Uyên DANH MỤC VIẾT TẮT Tên viết tắt Tên đầy đủ APO Apoprotein BMI Chỉ số khối thể (Body mass index) CRP Protein phản ứng C (C reactive protein) DKD Bệnh thận đái tháo đường ĐTĐ Đái tháo đường HDL-C Cholesterol lipoprotein tỉ trọng cao (High Density Lipoprotein Cholesterol) IDF Hiệp hội đái tháo đường Thế giới (International Diabetes Federation) KVMĐTĐ Đái tháo đường khơng có biến chứng võng mạc LDL-C Cholesterol lipoprotein tỉ trọng cao thấp (Low density lipoprotein cholesterol) MS Khối phổ (Mass spectrometry) SAA Amyloid huyết A (Serum Amyloid A) VM Võng mạc VMĐTĐ Võng mạc đái tháo đường DANH MỤC HÌNH Hình 3-1: Biểu đồ phân bố giới nhóm 18 Hình 3-2: Các protein đại diện cho nhóm bệnh nhân 21 Hình 3-3: Mạng lưới tương tác protein nhóm 23 Hình 3-4: Chức protein nhóm .25 Hình 3-5: Chức 26 protein nhóm đại diện nhóm biến chứng võng mạc 26 Hình 3-6: Vị trí nhóm protein đại diện có biến chứng võng mạc .27 Hình 3-7: Vị trí 68 protein đại diện nhóm khơng biến chứng võng mạc 28 Hình 3-8: Vị trí biểu protein 29 Hình 4-1: Dấu ấn sinh học bệnh võng mạc đái tháo đường [60] 32 DANH MỤC BẢNG Bảng 1-1: Phân loại bệnh VMĐTĐ theo Hiệp hội Nhãn khoa Quốc tế (ICO) năm 2017 [10] Bảng 2-1: Các biến số nghiên cứu 12 Bảng 2-2: Phân loại BMI theo tiêu chuẩn WHO áp dụng cho người Châu Á[44] 13 Bảng 3-1: Đặc điểm phân bố tuổi bệnh nhân 17 Bảng 3-2: Đặc điểm thời gian mắc bệnh nhóm bệnh nhân .18 Bảng 3-3: Chỉ số nhịp tim, huyết áp bệnh nhân 19 Bảng 3-4: Các thông số cận lâm sàng nhóm bệnh nhân 20 Bảng 3-5: Danh sách 26 protein đại diện nhóm bệnh nhân ĐTĐ có biến chứng võng mạc 21 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC HÌNH VẼ DANH MỤC BẢNG BIỂU ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan bệnh đái tháo đường 1.1.1 Định nghĩa dịch tễ học 1.1.2 Biến chứng bệnh ĐTĐ 1.2 Bệnh võng mạc đái tháo đường .4 1.2.1 Định nghĩa dịch tễ học 1.2.2 Cơ chế bệnh sinh tiến triển bệnh võng mạc đái tháo đường .5 1.2.3 Các phương pháp chẩn đoán bệnh võng mạc đái tháo đường .7 1.3 Proteomic phát dấu ấn sinh học .7 1.3.1 Giới thiệu chung proteomic phương pháp .7 1.3.2 Kỹ thuật thông lượng cao: Khối phổ 1.3.3 Ứng dụng proteomic phát dấu ấn sinh học 1.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 11 CHƯƠNG - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 12 2.2 Đối tượng nghiên cứu 12 2.2.1 Tiêu chuẩn lựa chọn .12 2.2.2 Tiêu chuẩn loại trừ .12 2.3 Thiết kế nghiên cứu .12 2.4 Phương pháp nghiên cứu .12 2.4.1 Các biến số nghiên cứu 12 2.4.2 Cách đánh giá biến số nghiên cứu 13 2.4.3 Quy trình phân tích hệ protein .15 2.4.4 Xử lý số liệu 15 2.4.5 Đạo đức nghiên cứu .16 CHƯƠNG - KẾT QUẢ 17 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu .17 3.1.1 Đặc điểm lâm sàng .17 3.1.2 Đặc điểm cận lâm sàng 20 3.2 Kết phát protein nhóm bệnh nhân .20 3.2.1 Định danh protein nhóm 20 3.2.2 Kết phân tích tương tác protein nhóm 23 3.3 Phân tích chức năng, vị trí protein nhóm 24 3.3.1 Kết phân tích chức protein nhóm 24 3.3.2 Kết phân tích vị trí biểu 27 CHƯƠNG - BÀN LUẬN .30 4.1 Đặc điểm chung nhóm đối tượng nghiên cứu 30 4.2 Các protein đặc trưng nhóm bệnh nhân 32 4.3 Chức vị trí biểu protein 35 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Đái tháo đường (ĐTĐ) rối loạn chuyển hóa mạn tính ảnh hưởng đến 400 triệu người tồn giới có xu hướng ngày gia tăng [1] Tăng đường huyết lâu dài dẫn đến nguy biến chứng mạch máu lớn mạch máu nhỏ người bệnh đái tháo đường, gây gánh nặng mặt sức khỏe, tài xã hội Các biến chứng mạch máu nhỏ đái tháo đường có liên quan đến suy yếu rối loạn chức lâu dài quan có võng mạc, có khả dẫn đến mù lòa, gọi tắt bệnh lý võng mạc đái tháo đường (VMĐTĐ) Những bệnh nhân có biến chứng VMĐTĐ chủ yếu bệnh nhân ĐTĐ tuýp tỉ lệ bệnh ĐTĐ tuýp chiếm 90% số người bệnh [2] Biến chứng thường xuất bệnh nhân ĐTĐ giai đoạn muộn, hầu hết bệnh nhân hội chẩn đoán điều trị sớm để đạt hiệu cải thiện lâm sàng Năm 2021, theo báo cáo Hiệp hội đái tháo đường giới (International Diabetes Federation - IDF), tỷ lệ bệnh ĐTĐ người lớn tăng gấp lần so với năm 2000, từ 151 triệu người lên 537 triệu người (chiếm 10,5% dân số giới) [3] Các số thống kê có đến 20% người bị ĐTĐ tuýp thời gian tiến triển bệnh gặp phải biến chứng võng mạc Hơn nữa, biến chứng võng mạc diễn tiến nhanh nghiêm trọng người bệnh sau tuổi 40 Vì thế, việc chẩn đốn phát bệnh sớm chiến lược điều trị bắt buộc để giảm bớt tiến triển cải thiện kết biến chứng [4] Trong bệnh đái tháo đường, lượng đường máu tăng cao làm thay đổi chế cân nội môi, dẫn đến thay đổi môi trường protein quan trọng với chức tế bào Những thay đổi mặt biểu chất trung gian gây viêm phân tử kết dính bạch cầu có liên quan đến tiến triển bệnh lý VMĐTĐ Việc hiểu rõ thay đổi protein xảy trình tiến triển VMĐTĐ cung cấp nhìn sâu sắc chế bệnh sinh, từ phát triển liệu pháp điều trị Hiện nay, chẩn đoán VMĐTĐ chủ yếu dựa thăm khám lâm sàng kỹ thuật chẩn đốn hình ảnh với bước như: khám tổng quát khám đáy mắt, soi đáy mắt, chụp mạch huỳnh quang kỹ thuật số chụp cắt lớp võng mạc Tuy nhiên điểm hạn chế kỹ thuật chẩn đốn bệnh thường giai đoạn muộn khó theo dõi tiến triển bệnh Hiện nay, với phát triển công nghệ, dấu ấn sinh học (biomaker) có chất protein nghiên cứu có liên quan mật thiết tới tiến triển VMĐTĐ HbA1c, protein phản ứng C (CRP), Homocysteine, VEGF… Proteomics hay kỹ thuật phân tích hệ protein có liên quan đến việc ứng dụng cơng nghệ để xác định định lượng protein tổng thể có tế bào, mơ sinh vật Nó bổ sung cho cơng nghệ “omics” khác genomics (phân tích hệ gen) transcriptomics (phân tích hệ mARN) để giải thích danh tính protein sinh vật, đồng thời nhận biết cấu trúc chức loại protein cụ thể Để phục vụ cho trình phân tích hệ protein, tiến đáng ý kỹ thuật khối phổ (Mass spectrometry- MS) cho phép phân tích sâu xác định nhiều protein với tốc độ nhanh [5] Ngồi ra, cơng nghệ MS hữu ích việc xác định sửa đổi sau dịch mã biến thể protein Nghiên cứu proteomics có ý nghĩa lớn việc phát định lượng biomakers việc chẩn đoán sớm theo dõi tiến triển bệnh VMĐTĐ Chính chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu hệ protein bệnh nhân đái tháo đường tuýp II có biến chứng võng mạc” nhằm mục tiêu: Phát protein bệnh nhân đái tháo đường tuýp II có biến chứng võng mạc Phân tích hệ protein bệnh nhân đái tháo đường tuýp II có biến chứng võng mạc với bệnh nhân đái tháo đường II khơng có biến chứng võng mạc 4.2 Các protein đặc trưng nhóm bệnh nhân Những tiến đáng ý kỹ thuật khối phổ (MS) cho phép phân tích sâu xác định nhiều protein với tốc độ nhanh Ngồi ra, cơng nghệ MS hữu ích việc xác định sửa đổi sau dịch mã biến thể protein Nhiều nghiên cứu thực mẫu từ bệnh nhân VMĐTĐ bao gồm nước mắt, giác mạc, thủy dịch, thủy tinh thể, võng mạc huyết cách sử dụng phương pháp proteomic điện di gel khác biệt hai chiều (2D- DIGE) kết hợp với MS, SDS-PAGE kết hợp với MS, sắc ký lỏng kết hợp với MS (LCMS/MS) xét nghiệm miễn dịch ELISA Một số dấu ấn sinh học đại diện VMĐTĐ xác định, bao gồm thành phần bổ sung C3, phân tử bám dính tế bào (ICAM-1), interleukin-6 (IL-6), protein amyloid A huyết (SAA), yếu tố tăng trưởng nội mơ mạch máu (VEGF) Hình 4-1: Dấu ấn sinh học bệnh võng mạc đái tháo đường [60] Qua phân tích hệ protein nhóm bệnh nhân VMĐTĐ KVMĐTĐ, cho thấy nhóm protein đại diện cho có biến chứng võng mạc khơng có biến chứng nhóm protein chung Nhóm protein đại diện cho biến chứng võng mạc gồm 26 protein là: SHBG, GPLD1, C1QA, IGHV4-38-2, C4BPA, CD44, APOA1, SAA1, LCAT, APCS, 32 CYP11B1, PPBP, PF4, FGG, KRTAP9-8, FGB, IGF2BP3, CPNE1, GPX3, F138, APOA4, CIRL, CPN1, KLKB1, BCHE, CPN2 Trong protein có biều tương tác cao là: C4BPA, APCS, APOA1, APOA4, SAA1, LCAT, FGB, FGG, F138, C1QA Khi so sánh với nghiên cứu khác, chúng tơi nhận thấy có số protein tương đồng xuất huyết bệnh nhân VMĐTĐ APOA (APOA1, APOA4), SAA Apolipoprotein nhóm protein huyết tương liên kết với lipid để tạo thành lipoprotein Là thành phần cấu trúc quan trọng lipoprotein phân tử lưỡng tính, apolipoprotein điều chỉnh trình vận chuyển phân phối lipoprotein, thúc đẩy gắn kết lipoprotein với thụ thể bề mặt tế bào, giúp hòa tan lipid, tăng cường khả hấp thu lipid tế bào đóng vai trị đồng yếu tố enzyme tế bào chuyển hóa lipoprotein Apolipoprotein A1 (APOA1), protein 243– axit amin, thành phần apolipoprotein HDL-C, APOA-2 thành phần protein dồi thứ hai phân tử HDL-C APOA-1 có đặc tính chống viêm chống huyết khối Nó ức chế q trình oxy hóa LDL, giảm tổn thương trơn mạch máu tế bào nội mô, đồng thời giúp ức chế xơ vữa động mạch [61] Cơ chế tác dụng bảo vệ APOA-1 APOA-2 làm tăng tiết insulin tế bào β giảm nồng độ glucose huyết tương [62] Các nghiên cứu công nhận APOA1 APOA-II có tác dụng bảo vệ VMĐTĐ [61, 63, 64] So với nghiên cứu APOA1 nghiên cứu APOA2 cịn chưa nhiều Mới đây, năm 2022, nghiên cứu nhóm Xinyuan kết luận APOA-2 đóng vai trị bảo vệ chế bệnh sinh VMĐTĐ [65], dự đoán mục tiêu phân tử cho bệnh VMĐTĐ Mới đây, năm 2022, nghiên cứu nhóm Xinyuan kết luận APOA-2 đóng vai trị bảo vệ chế bệnh sinh VMĐTĐ [65], dự mục tiêu phân tử cho VMĐTĐ SAA (Serum Amyloid A) protein giai đoạn cấp tính đáp ứng viêm, nhiễm trùng q trình khơng viêm nhiễm SAA sản xuất chủ yếu tế bào gan kích thích thích hợp, amyloid huyết ngồi gan tổng hợp có liên quan đến sinh bệnh học số bệnh viêm mãn tính, bao gồm xơ vữa động mạch, bệnh Alzheimer, viêm khớp số biến thể ung thư bạch cầu đơn nhân, tế bào nội mô, nguyên bào sợi, v.v Trong bệnh ĐTĐ, tình trạng viêm mãn tính khác, nồng độ amyloid A huyết tăng liên tục Nghiên cứu nhóm Lee Mi-Sook năm 2006 amyloid A huyết làm tăng hình thành mạch thơng qua việc tạo tăng sinh nội mô, 33 di cư, hình thành ống hoạt động nảy mầm ống nghiệm [66] Nghiên cứu khác liên quan đến q trình viêm phát triển cuả VMĐTĐ Ngồi hai protein trên, số protein khác xuất danh sách protein đại diện cho VMĐTĐ nghiên cứu có nghiên cứu lại chứng tỏ protein liên quan đến VMĐTĐ Vào năm 2018, nhóm Na AO nghiên cứu mối quan hệ globulin liên kết với hormone giới tính (SHBG) huyết bệnh ĐTĐ tuýp có biến chứng võng mạc [67] Từ nhóm đến kết luận việc giảm SHBG khiến tỷ lệ bệnh nhân có biến chứng VM tăng lên đáng kể Chính tỷ lệ SHBG thấp yếu tố nguy VMĐTĐ GLDP1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) protein được nghiên cứu dấu ấn sinh học cho ĐTĐ tuýp [68] Tuy nhiên chưa có nghiên cứu riêng biệt protein liên quan đến biến chứng VM C1QA (Complement C1q A) protein nằm hệ thống bổ thể, đóng vai trị quan trọng cân nội mô võng mạc Tuy nhiên nghiên cứu Helsinki năm 2020 lại cho protein lại không tham gia chế bệnh sinh VMĐTĐ [69] Ngược lại, số bổ thể khác C3, CFH lại có vai trị quan trọng biến chứng VM LCAT mã hóa lecithin cholesterol acyltransferase, loại enzyme cần thiết cho hấp thu cholesterol HDL Ở võng mạc người chuột, LCAT tìm thấy biểu lớp tế bào hạch võng mạc lớp plexiform bên [70] Người ta cho LCAT ester hóa cholesterol võng mạc người chuột điều kiện hạ cholesterol máu bình thường [70] Sự dư thừa cholesterol ester hóa (EC) gây độc cho tế bào cảm quang, dẫn đến thối hóa điểm vàng tuổi tác, vai trò LCAT EC VMĐTĐ chưa rõ ràng BCHE (Butyrylcholinesterase) loại enzyme có huyết tương chất dịch thể khác động vật Nó thủy phân hợp chất chứa este cacboxylic axit photphoric kỵ nước ưa nước Nghiên cứu Jacksonville năm 2007 [71] so sánh trình tự axit amin BCHE với protein đóng vai trò chất ức chế tân mạch tương đồng tìm thấy với chất ức chế Nghiên cứu bệnh VMĐTĐ khởi phát sớm thường thấy 34 bệnh nhân đủ BCHE huyết Điều cho thấy BChE hoạt động chất ức chế tân mạch gây biến chứng VM Nghiên cứu gần vào năm 2023 Rong Yu [72] có kết luận BCHE yếu tố nguy VMĐTĐ KLKB1 (Kallikrein B1) protease serine giống trypsin thực trình phân cắt chọn lọc Lys-Arg Arg-Ser peptide KLKB1 tham gia hệ thống kallikrein–kinin (KKS), có tác dụng điều chỉnh số q trình sinh lý, chẳng hạn viêm, đơng máu, đau, tăng sinh tế bào giãn mạch Theo AF Abdel-Magid - ACS Medicinal Chemistry Letters (2023), chất ức chế chọn lọc KLKB1 đề xuất chất điều trị, ức chế, cải thiện số bệnh có VMĐTĐ [73] 4.3 Chức vị trí biểu protein Trong nghiên cứu chúng tôi, nhóm protein đại diện cho biến chứng võng mạc có liên quan chủ yếu đến trình sinh tổng hợp: trình sinh tổng hợp lypoprotein, trình chuyển hóa lypoprotein, q trình sinh tổng hợp alcolhol, tham gia vào phản ứng khác phản ứng viêm cấp tính, phản ứng với vết thương, phản ứng với hóa chất, phản ứng với ion kim loại,… Vào năm 2012, nghiên cứu phân tích dấu ấn sinh học bệnh nhân VMĐTĐ bệnh viện Đài Loan cho kết hầu hết protein xác định có chức liên quan đến phản ứng viêm (22%) đông máu (37%) 91% protein biểu khác biệt xác định protein tiết [74] Vào năm 2015, nghiên cứu khác Bệnh viện Đại học Helsinki, Phần Lan, mẫu phân tích Protein nước bọt định theo ba cách phân loại khác nhau: phân loại thành phần tế bào, phân loại trình sinh học phân loại chức phân tử [100] Trong 15% protein chuyển hóa, 13% tham gia vào q trình điều hịa trình sinh học 12% protein phản ứng với kích thích Có tới 29% protein liên quan đến liên kết protein, 18% cho thấy hoạt động xúc tác 11% liên quan đến liên kết ion kim loại [75] Nghiên cứu 2018, First Affiliated Hospital of Soochow University thủy tinh thể cho thấy protein đại diện cho biến chứng võng mạc chủ yếu tham gia vào trình bao gồm nhập bào qua trung gian thụ thể, phản ứng miễn dịch bẩm sinh, hoạt hóa bổ thể, đường cổ điển, hoạt hóa bổ thể Fc đường truyền tín hiệu thụ thể -epsilon Ngồi ra, q trình sinh học riêng biệt nhóm điều hịa tiêu cực hoạt động endopeptidase, phản ứng miễn dịch, giải độc oxy hóa tế bào, 35 kết dính tế bào, điều hịa tiêu cực q trình apoptotic, q trình dị hóa hydro peroxide phản ứng viêm[76] Khi so sánh với nghiên cứu khác, nghiên cứu cho thấy mặt vai trị chức protein có điểm giống khác Điều giải thích protein đại diện cho biến chứng võng mạc tìm thấy nghiên cứu có protein giống khác Thiếu sót, điểm hạn chế nghiên cứu Nghiên cứu dừng mức độ định tính, định danh protein có huyết người bệnh, chưa định lượng nồng độ protein này, dịch sinh học khác nước mắt, dịch nhãn cầu Tuy nhiên kết nghiên cứu mang lại gợi ý ban đầu đặc điểm hệ protein bệnh nhân ĐTĐ có biến chứng võng mạc, mở hướng nghiên cứu để xác định rõ dấu ấn sinh học đặc trưng cho bệnh lý 36 KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu bàn luận, rút số kết luận sau: Về việc phát protein bệnh nhân đái tháo đường tuýp II có biến chứng võng mạc - Có 26 protein phát đại diện cho nhóm biến chứng võng mạc bao gồm: SHBG, GPLD1, C1QA, IGHV4-38-2, C4BPA, CD44, APOA1, SAA1, LCAT, APCS, CYP11B1, PPBP, PF4, FGG, KRTAP9-8, FGB, IGF2BP3, CPNE1, GPX3, F138, APOA4, CIRL, CPN1, KLKB1, BCHE, CPN2 Trong protein có mức độ tương tác cao với protein khác là: C4BPA, APCS, APOA1, APOA4, SAA1, LCAT, FGB, FGG, F138, C1QA - Có 68 protein khơng đại diện cho bệnh VMĐTĐ 90 protein chung nhóm bệnh nhân Đặc điểm hệ protein bệnh nhân - Phân tích chức cho thấy nhóm đại diện chủ yếu có chức liên quan đến q trình sinh tổng hợp phản ứng chuyển hóa khác nhau, nhóm khơng đại diện liên quan nhiều đến việc vận chuyển trình thần kinh - Về vị trí biểu hiện, nhóm protein đại diện cho bệnh VMĐTĐ chủ yếu biểu võng mạc, nhóm protein khơng đại diện cho VMĐTĐ khơng có đặc điểm 37 ĐỀ XUẤT Từ kết nghiên cứu thu điểm hạn chế nghiên cứu, đưa số đề xuất sau: Tiếp tục tiến hành nghiên cứu sâu protein đại diện cho VMĐTĐ để tìm hiểu thêm vai trị chúng việc sàng lọc bệnh Tiến hành nghiên cứu đặc điểm hệ protein dịch sinh học khác bệnh nhân VMĐTĐ nước mắt, dịch nhãn cầu… để bổ sung đầy đủ hệ protein định lượng biomakers bệnh nhân VMĐTĐ 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Xie, Z and X Xiao, Novel biomarkers and therapeutic approaches for diabetic retinopathy and nephropathy: Recent progress and future perspectives Front Endocrinol (Lausanne), 2022 13: p 1065856 Ren, J., et al., Diabetic retinopathy: Involved cells, biomarkers, and treatments Frontiers in Pharmacology, 2022 13 Magliano, D and E.J Boyko, IDF Diabetes Atlas 2021: International Diabetes Federation Singh, R.P., et al., Advances in the treatment of diabetic retinopathy Journal of Diabetes and its Complications, 2019 33(12): p 107417 Aslam, B., et al., Proteomics: technologies and their applications Journal of chromatographic science, 2016: p 1-15 Bộ Y tế, Số 5481 /QĐ-BYT QUYẾT ĐỊNH Về việc ban hành tài liệu chun mơn “Hướng dẫn chẩn đốn điều trị đái tháo đường típ 2020 Cole, J.B and J.C Florez, Genetics of diabetes mellitus and diabetes complications Nature reviews nephrology, 2020 16(7): p 377-390 Bộ Y tế, Quyết định số 2558/QĐ-BYT ngày 20/09/2022 Bộ trưởng Bộ Y tế việc ban hành tài liệu chuyên môn "Hướng dẫn chẩn đoán, điều trị quản lý Bệnh võng mạc đái tháo đường" 2022 Akter, S., et al., Prevalence of diabetes and prediabetes and their risk factors among Bangladeshi adults: a nationwide survey Bulletin of the World Health Organization, 2014 92: p 204-213A Muqit, M.M., et al., Trends in diabetic retinopathy, visual acuity, and treatment outcomes for patients living with diabetes in a fundus photograph– based diabetic retinopathy screening program in Bangladesh JAMA network open, 2019 2(11): p e1916285-e1916285 Organization, W.H., Strengthening diagnosis and treatment of diabetic retinopathy in SEA Region 2020 Lottspeich, F., Introduction to proteomics Proteomics: Methods and Protocols, 2009: p 3-10 Canales, R.D., et al., Evaluation of DNA microarray results with quantitative gene expression platforms Nature biotechnology, 2006 24(9): p 1115-1122 Cox, J and M Mann, Is proteomics the new genomics? Cell, 2007 130(3): p 395-398 Dunn, M.J., Gel electrophoresis of proteins 2014: Elsevier Sutandy, F.R., et al., Overview of protein microarrays Current protocols in protein science, 2013 72(1): p 27.1 1-27.1 16 Yates III, J.R., A century of mass spectrometry: from atoms to proteomes Nature Methods, 2011 8(8): p 633-637 Smith, S., The Cambridge encyclopedia of life sciences 1985, WileyBlackwell Shiio, Y and R Aebersold, Quantitative proteome analysis using isotopecoded affinity tags and mass spectrometry Nature protocols, 2006 1(1): p 139-145 Ong, S and M Mann, Quantitative Proteomics by Mass Spectrometry 2006 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 Kroksveen, A.C., et al., Quantitative proteomics suggests decrease in the secretogranin ‐ cerebrospinal fluid levels during the disease course of multiple sclerosis Proteomics, 2015 15(19): p 3361-3369 Smyth, M and J Martin, x Ray crystallography Molecular Pathology, 2000 53(1): p Cui, M., C Cheng, and L Zhang, High-throughput proteomics: a methodological mini-review Laboratory Investigation, 2022 102(11): p 1170-1181 Han, X., A Aslanian, and J.R Yates III, Mass spectrometry for proteomics Current opinion in chemical biology, 2008 12(5): p 483-490 Domon, B and R Aebersold, Mass spectrometry and protein analysis science, 2006 312(5771): p 212-217 Paik, S., et al., A multigene assay to predict recurrence of tamoxifen-treated, node-negative breast cancer New England Journal of Medicine, 2004 351(27): p 2817-2826 Imperiale, T.F., et al., Multitarget stool DNA testing for colorectal-cancer screening New England Journal of Medicine, 2014 370(14): p 1287-1297 Safaei, A., et al., Breast cancer biomarker discovery: Proteomics and genomics approaches International Journal of Cancer Management, 2013 6(Supplement) Peyvandi, H., et al., Introducing potential key proteins and pathways in human laryngeal cancer: a system biology approach Iranian Journal of Pharmaceutical Research: IJPR, 2018 17(1): p 415 Wu, J., Y.-d Chen, and W Gu, Urinary proteomics as a novel tool for biomarker discovery in kidney diseases Journal of Zhejiang University Science B, 2010 11(4): p 227-237 Zamanian-Azodi, M., et al., Application of proteomics in cancer study American Journal of Cancer Science, 2013 2(2): p 116-134 Song, J., et al., Relationship between C-reactive protein level and diabetic retinopathy: a systematic review and meta-analysis PLoS One, 2015 10(12): p e0144406 Tawfik, A., et al., Homocysteine: a potential biomarker for diabetic retinopathy Journal of clinical medicine, 2019 8(1): p 121 Xu, J., et al., Involvement of advanced glycation end products in the pathogenesis of diabetic retinopathy Cellular Physiology and Biochemistry, 2018 48(2): p 705-717 Gopalakrishnan, V., P Purushothaman, and A Bhaskar, Proteomic analysis of plasma proteins in diabetic retinopathy patients by two dimensional electrophoresis and MALDI-Tof-MS Journal of Diabetes and its Complications, 2015 29(7): p 928-936 Jenkins, A.J., et al., Biomarkers in diabetic retinopathy The review of diabetic studies: RDS, 2015 12(1-2): p 159 Han, L., et al., The associations between VEGF gene polymorphisms and diabetic retinopathy susceptibility: a meta-analysis of 11 case-control studies Journal of diabetes research, 2014 2014 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 Praidou, A., et al., Vitreous and serum levels of platelet-derived growth factor and their correlation in patients with proliferative diabetic retinopathy Current Eye Research, 2009 34(2): p 152-161 Ogata, N., et al., Unbalanced vitreous levels of pigment epithelium-derived factor and vascular endothelial growth factor in diabetic retinopathy American journal of ophthalmology, 2002 134(3): p 348-353 Binh, V.T and D.T.N Huy, Further Analysis on Characteristic of Diabetic Reinopathy-A Case in Thai Binh Province in Vietnam NeuroQuantology, 2021 19(6): p 61-67 Nguyen, P.T., et al., An optimal deep learning based computer-aided diagnosis system for diabetic retinopathy Comput Mater Contin, 2021 66(3): p 2815-2830 Nguyen, H., et al., Designing a learning model for mobile vision to detect diabetic retinopathy based on the improvement of MobileNetV2 International Journal of Digital Enterprise Technology, 2022 2(1): p 38-53 Olawoye, O., et al., A short online course successfully trains non-ophthalmic diabetic retinopathy graders to recognize glaucomatous optic nerves in lowresource settings Investigative Ophthalmology & Visual Science, 2022 63(7): p 1654–A0149-1654–A0149 Vardell, E., Global health observatory data repository Medical reference services quarterly, 2020 39(1): p 67-74 Lin, K.Y., et al., Update in the epidemiology, risk factors, screening, and treatment of diabetic retinopathy Journal of diabetes investigation, 2021 12(8): p 1322-1325 Shukla, U and K Tripathy, Diabetic retinopathy StatPearls Treasure Island (FL): StatPearls Publishing, 2022 Varma, R., et al., Biologic risk factors associated with diabetic retinopathy: the Los Angeles Latino Eye Study Ophthalmology, 2007 114(7): p 13321340 Stratton, I., et al., UKPDS 50: risk factors for incidence and progression of retinopathy in Type II diabetes over years from diagnosis Diabetologia, 2001 44: p 156-163 van Leiden, H.A., et al., Risk factors for incident retinopathy in a diabetic and nondiabetic population: the Hoorn study Archives of ophthalmology, 2003 121(2): p 245-251 De Block, C.E., I.H De Leeuw, and L.F Van Gaal, Impact of overweight on chronic microvascular complications in type diabetic patients Diabetes care, 2005 28(7): p 1649-1655 Azeze, T.K., M.M Sisay, and E.G Zeleke, Incidence of diabetes retinopathy and determinants of time to diabetes retinopathy among diabetes patients at Tikur Anbessa Hospital, Ethiopia: a retrospective follow up study BMC research notes, 2018 11(1): p 1-6 Gelcho, G.N and F.S Gari, Time to Diabetic Retinopathy and Its Risk Factors among Diabetes Mellitus Patients in Jimma University Medical Center, 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 Jimma, Southwest Ethiopia Ethiopian Journal of Health Sciences, 2022 32(5): p 937-946 Rajalakshmi, R., et al., Prevalence and risk factors for diabetic retinopathy in Asian Indians with young onset type and type diabetes Journal of Diabetes and its Complications, 2014 28(3): p 291-297 Wong, T.Y., et al., Diabetic retinopathy in a multi-ethnic cohort in the United States American journal of ophthalmology, 2006 141(3): p 446-455 e1 Klein, R., B.E Klein, and S.E Moss, Is obesity related to microvascular and macrovascular complications in diabetes?: The Wisconsin Epidemiologic Study of Diabetic Retinopathy Archives of internal medicine, 1997 157(6): p 650-656 Tomić, M., et al., Inflammation, haemostatic disturbance, and obesity: possible link to pathogenesis of diabetic retinopathy in type diabetes Mediators of inflammation, 2013 2013 Group, U.P.D.S., Risks of progression of retinopathy and vision loss related to tightblood pressure control in type diabetes mellitus: UKPDS 69 Archives of ophthalmology, 2004 122(11): p 1631-1640 Zhang, X., et al., The association of serum creatinine and estimated glomerular filtration rate variability with diabetic retinopathy in Asians with type diabetes: A nested case–control study Diabetes and Vascular Disease Research, 2018 15(6): p 548-558 Wat, N., R.L Wong, and I.Y Wong, Associations between diabetic retinopathy and systemic risk factors Hong Kong Medical Journal, 2016 22(6): p 589 Ferrara, M., et al., Diabetic Retinopathy: Soluble and Imaging Ocular Biomarkers Journal of Clinical Medicine, 2023 12(3): p 912 Gordon, S.M., et al., High density lipoprotein: it's not just about lipid transport anymore Trends in Endocrinology & Metabolism, 2011 22(1): p 9-15 Fryirs, M.A., et al., Effects of high-density lipoproteins on pancreatic β-cell insulin secretion Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology, 2010 30(8): p 1642-1648 Simó, R., et al., Apolipoprotein A1 is overexpressed in the retina of diabetic patients American journal of ophthalmology, 2009 147(2): p 319-325 e1 Simó, R., et al., Elevation of apolipoprotein AI and apolipoprotein H levels in the vitreous fluid and overexpression in the retina of diabetic patients Archives of Ophthalmology, 2008 126(8): p 1076-1081 Zhang, X., et al., Plasma apolipoproteins predicting the occurrence and severity of diabetic retinopathy in patients with type diabetes mellitus Frontiers in Endocrinology, 2022: p 1436 Lee, M.-S., et al., Serum amyloid A binding to formyl peptide receptor-like induces synovial hyperplasia and angiogenesis The Journal of Immunology, 2006 177(8): p 5585-5594 AO, N., et al., Correlation between sex hormone binding globulin and type diabetes retinopathy Journal of Chinese Physician, 2018: p 191-194 68 69 70 71 72 73 74 75 76 von Toerne, C., et al., MASP1, THBS1, GPLD1 and ApoA-IV are novel biomarkers associated with prediabetes: the KORA F4 study Diabetologia, 2016 59: p 1882-1892 Shahulhameed, S., et al., A systematic investigation on complement pathway activation in diabetic retinopathy Frontiers in Immunology, 2020 11: p 154 Saadane, A., et al., Retinal hypercholesterolemia triggers cholesterol accumulation and esterification in photoreceptor cells Journal of Biological Chemistry, 2016 291(39): p 20427-20439 Divakar, C., A.A Rao, and R.B Korrapati Computational Protein Sequences Analysis for Diabetic Retinopathy-A Bio Informatics Study in Allied Academies International Conference Academy of Management Information and Decision Sciences Proceedings 2007 Citeseer Yu, R., et al., Serum cholinesterase is associated with incident diabetic retinopathy: the Shanghai Nicheng cohort study Nutrition & Metabolism, 2023 20(1): p 1-9 Abdel-Magid, A.F., Plasma Kallikrein Inhibitors as Potential Treatment for Diabetic Macular Edema, Retinal Vein Occlusion, Hereditary Angioedema and Other Related Diseases 2023, ACS Publications Lu, C.-H., et al., Proteomic analysis of retinopathy-related plasma biomarkers in diabetic patients Archives of biochemistry and biophysics, 2013 529(2): p 146-156 Chee, C.S., et al., Association of potential salivary biomarkers with diabetic retinopathy and its severity in type-2 diabetes mellitus: a proteomic analysis by mass spectrometry PeerJ, 2016 4: p e2022 Li, J., Q Lu, and P Lu, Quantitative proteomics analysis of vitreous body from type diabetic patients with proliferative diabetic retinopathy BMC ophthalmology, 2018 18: p 1-12 PHỤ LỤC PHIẾU THU THẬP THƠNG TIN BỆNH NHÂN I HÀNH CHÍNH Họ tên: Mã BA: Tuổi (Năm sinh) Giới tính: Nam☐ Nữ ☐ Điện thoại Nghề nghiệp Dân tộc:………………………… Địa chỉ: Thành thị ☐ Nông thôn☐ Ngày vào viện: Ngày viện: ……………… 10 Ngày làm bệnh án: 11 Ngày khám định kỳ (Ngoại trú): …………………………………………… 12 Số ngày điều trị (Tính đến thời điểm làm bệnh án): ………………………… II Chẩn đoán (Của Bệnh viện) III Hỏi bệnh 1.Lý vào viện: ……………………………………………………………………………………… Khám định kỳ: Khác: Bệnh sử: -Thời gian phát triệu chứng: -Diễn biến triệu chứng: Tiền sử (Thời gian phát hiện+Thuốc điều trị) -Thời gian mang bệnh ĐTĐ: năm 15 năm ☐ -Thời gian mang bệnh khác: năm 15 năm ☐ Biến chứng võng mạc: Có ☐ Khơng ☐ III Khám bệnh -Dấu hiệu sinh tồn : -Thể trạng: Mạch:…… l/phút Cân nặng:…… kg Huyết áp:… mmHg Chiều cao: ……cm Nhiệt độ: … oC BMI: ……… Xét nghiệm cận lâm sàng: Glucose (mmol/L) Ure (mmol/L) Creatinin (µmol/L) Protein tồn phần (g/L) Albumin (g/L) Acid uric (µmol/L) Cholesterol (mmol/L) Triglycerit (mmol/L) HDL-C (mmol/L) LDL-C(mmol/L) HbA1C (%) PHỤ LỤC 2: DANH SÁCH BỆNH NHÂN STT Mã NC Họ tên bệnh nhâm NCE43 Nguyễn Thị N NCE53 Nguyễn Thị Mai H NCE57 Nguyễn Thị N NCE65 Vũ Thị L NCE74 Lưu Thị T NCE84 Phan Châu T NCE94 Nông Thị M NCE111 Nguyễn Thị C NCE118 Phạm Thị xuân T 10 NCE2 Nguyễn Hữu Ư 11 NCE9 Nguyễn Thị T 12 NCE11 Đỗ Thị T 13 NCE13 Hoàng Thị C 14 NCE18 Nguyễn Thị M 15 NCE33 Trần Thị M 16 NCE34 Đặng Văn T 17 NCE45 Chu Thị T 18 NCE49 Nguyễn Thị P