Nghiên cứu tạo chế phẩm vi sinh và bước đầu ứng dụng trong xử lý nước thải là giết mổ trên mô hình lọc sinh học dùng bung ngược (usbf)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGUYỄN THẾ TRUNG NGHIÊN CỨU TẠO CHẾ PHẨM VI SINH VÀ BƢỚC ĐẦU ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƢỚC THẢI LÒ GIẾT MỔ TRÊN MƠ HÌNH LỌC SINH HỌC DỊNG BÙN NGƢỢC (USBF) LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thái Nguyên - 2013 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGUYỄN THẾ TRUNG NGHIÊN CỨU TẠO CHẾ PHẨM VI SINH VÀ BƢỚC ĐẦU ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƢỚC THẢI LỊ GIẾT MỔ TRÊN MƠ HÌNH LỌC SINH HỌC DỊNG BÙN NGƢỢC (USBF) Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã Số: 60 42 02 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS PHÍ QUYẾT TIẾN Thái Nguyên - 2013 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết báo cáo trung thực chƣa đƣợc sử dụng báo khoa học Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực báo cáo đƣợc cảm ơn ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, tháng năm 2013 Học viên thực Nguyễn Thế Trung Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ ii LỜI CẢM ƠN Trước hết, với tất lịng, tơi xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành, sâu sắc tới TS Phí Quyết Tiến nhóm nghiên cứu tận tình hướng dẫn dìu dắt tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận văn ộ Phịng Cơng nghệ lên men, Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam - người giúp đỡ bảo tơi tận tình q trình thực luận văn Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy cô Viện sau đại học – Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện, giúp đỡ suốt thời gian học tậ Bên cạnh đó, tơi xin cảm ơn người thân gia đình bạn bè tạo điều kiện động viên giúp đỡ vật chất tinh thần để hồn thành luận văn Với lịng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quý báu đó! Hà Nộ 28 tháng 08 năm 2013 Học viên Nguyễn Thế Trung Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT A2/O Araerobic/anoxic/oxic (kỵ khí/thiếu khí/hiếu khí) A/O Anoxic/oxic (thiếu khí/hiếu khí) BOD Nhu cầu oxy sinh hóa (Biochemical Oxygen Demand) BOD5 Nhu cầu oxy sinh hóa ngày COD Nhu cầu oxy hóa học (Chemical Oxygen Demand) CRT Chất thải rắn DO Hàm lƣợng oxy hòa tan nƣớc (Dissolved Oxygen) E.M Các vi sinh vật hữu hiệu – (Effective Microorganisms) EPA Cục Bảo vệ Môi trƣờng Mỹ FAO Tổ chức Lƣơng thực Nông nghiệp Liên Hiệp Quốc GAC Carbon hoạt tính (Granular Activated Carbon) HRT Thời gian lƣu thủy lực (Hydraulic Retention Time) MLSS Hàm lƣợng sinh khối N Nitơ P Photpho SBR Bể phản ứng hoạt động gián đoạn (Sequencing Batch Reactor) TSS Chất rắn lơ lửng T-N Tổng nito (mg/l) T-P Tổng photpho (mg/l) TS Tổng chất rắn TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam UASB Bể xử lý sinh học dòng chảy ngƣợc qua tầng bùn kỵ khí (Upflow Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ iv Anearobic Sludge Blanket) USBF Lọc dòng ngƣợc bùn sinh học (Upflow Sludge Blanket Filtration) Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ v MỤC LỤC MỤC LỤC v DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH ix A MỞ ĐẦU B NỘI DUNG CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đặc tính nƣớc thải giết mổ 1.2 Đánh giá tình trạng xử lý nƣớc thải giết mổ 1.2.1 Tình trạng xử lý nƣớc thải lị giết mổ giới 1.2.2 Tình trạng xử lý nƣớc thải lị giết mổ Việt Nam 1.3 Các phƣơng pháp xử lý nƣớc thải giết mổ 11 1.3.1 Phƣơng pháp lý học 11 1.3.2 Phƣơng pháp xử lý hóa lý 12 1.3.3 Phƣơng pháp sinh học 13 1.4 Các nhóm vi sinh vật ứng dụng xử lý nƣớc thải 14 1.4.1 Vi sinh vật phân giải protein 14 1.4.2 Vi sinh vật chuyển hóa phospho 15 1.4.3 Vi sinh vật phân giải tinh bột 16 1.4.4 Vi sinh vật phân giải lipid 17 1.5 Sơ lƣợc công nghệ lọc sinh học dòng bùn ngƣợc - USBF 17 1.5.1 Công nghệ lọc sinh học dòng bùn ngƣợc – USBF 17 1.5.2 Các nhóm vi sinh vật ứng dụng hệ thống USBF 22 1.5.3 Một số kết ứng dụng công nghệ USBF xử lý nƣớc thải Việt Nam 24 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 27 2.1 Vật liệu 27 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ vi 2.2 Hóa chất 27 2.3 Thiết bị 27 2.4 Môi trƣờng nuôi cấy 28 2.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 28 2.5.1 Lấy mẫu phân tích vi sinh vật tổng số nƣớc thải 28 2.5.2 Phân lập vi khuẩn xử lý P N điều kiện hiếu khí 30 2.5.3 Nghiên cứu đặc điểm sinh học chủng đƣợc tuyển chọn 30 2.5.4 Phân loại vi khuẩn phân tích trình tự gen 16S rDNA 33 2.5.6 Tạo chế phẩm vi sinh 37 2.5.7 Bảo quản chế phẩm 38 2.5.8 Phƣơng pháp phân tích nƣớc thải 38 2.5.9 Khởi động hệ thống bùn áp dụng cho mơ hình USBF 41 2.5.10 Đánh giá hiệu sử dụng chế phẩm vi sinh mơ hình USBF 43 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 Nghiên cứu tạo chế phẩm sinh học có khả ứng dụng mơ hình USBF 44 3.1.1 Phân lập tuyển chọn chủng vi khuẩn thích hợp cho nghiên cứu 44 3.1.2 Nghiên cứu điều kiện môi trƣờng tối ƣu, lên men nuôi cấy tạo sinh khối thu chế phẩm sinh học 58 3.1.3 Xây dựng quy trình tạo chế phẩm vi sinh 63 3.1.4 Bảo quản đánh giá hoạt lực chế phẩm 67 3.2 Bƣớc đầu ứng dụng chế phẩm vi sinh mơ hình USBF xử lý nƣớc thải lò giết mổ 70 3.2.1 Công nghệ hệ thống xử lý nƣớc thải theo cơng nghệ USBF phịng thí nghiệm 70 3.2.2 Thử nghiệm chế phẩm mơ hình USBF với nƣớc thải lị giết mổ 72 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN 78 TÀI LIỆU THAM KHẢO 79 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ vii Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Số liệu trung bình thành phần tính chất nƣớc thải giết mổ gia súc gia cầm .5 Bảng 1.2 Tổng hợp thành phần nƣớc thải giết mổ số nƣớc giới .7 Bảng 2.1 Trình tự mồi 27F 14R 34 Bảng 2.2 Các phƣơng pháp phân tích nƣớc thải sử dụng nghiên cứu 38 Bảng 3.1 Thành phần vi sinh vật có mẫu nƣớc thải giết mổ 44 Bảng 3.2 Khả xử lý P, N ba chủng vi khuẩn đƣợc lựa chọn bùn sinh học điều kiện hiếu khí sau 24 45 Bảng 3.3 Đặc điểm ni cấy hình thái ba chủng vi khuẩn PK1.19, ND1.15 ND1.9 46 Bảng 3.7 Khả sinh tổng hợp enzyme ngoại bào ba chủng vi khuẩn PK1.19, ND1.15, ND1.9 53 Bảng 3.8 Khả sinh trƣởng ba chủng lựa chọn số môi trƣờng 58 Bảng 3.9 Ảnh hƣởng pH ban đầu đến sinh trƣởng ba chủng lựa chọn 59 Bảng 3.10 Ảnh hƣởng nhiệt độ đến khả sinh trƣởng ba chủng vi khuẩn P plecoglossicida PK 1.19, B amyloliquefaciens ND1.15, P putida ND1.9 60 Bảng 3.11 Ảnh hƣởng tích dịch thể tích bình ni chủng lựa 61 Bảng 3.12 Biến động mật độ vi khuẩn theo thời gian điều kiện bảo quản .69 khác 69 Bảng 3.13 Sinh trƣởng phát triển vi khuẩn chế phẩm sau hoạt hóa 69 Bảng 3.14 Kết phân tích thành phần nƣớc thải giết mổ 73 Bảng 3.15 Đánh giá hiệu xử lý nƣớc thải giết mổ lợn mơ hình USBF dung tích 50 lít bổ sung chế phẩm vi sinh 75 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 84 Kính hiển vi Olympus CHD -2 Nhật Bản Kính hiển vi điện tử quét Nhật Bản Máy đo pH Mettler Toledo, Thụy Sỹ Cân phân tích Thụy Sỹ Nồi hấp khử trùng ALP MC-40DP, Nhật Bản Tủ ấm Trung Quốc Tủ cấy vô trùng ESCO, Pháp Máy li tâm Eppendorf, Đức Máy Vortex Rotolab OSI, Mỹ Tủ lạnh sâu Sanyo, Nhật Bản Bể ổn nhiệt Teche OSI, Mỹ Máy lắc ổn nhiệt Hàn Quốc Máy PCR Applied Biosystem AC9700, Mỹ Máy soi gel BIO-RAD, Mỹ Một số thiết bị chuyên dụng phịng thí nghiệm khác Mơi trƣờng ni cấy sử dụng nghiên cứu - Môi trƣờng Pikovskaya (g/l): Cao nấm men 0,5; Dextrose 10,0; Ca3(PO4)2 5,0; (NH4)2SO4 0,5; KCl 0,2; MgSO4 0,1; MnSO4 0,0001; FeSO4 0,0001; agar 20,0 - Môi trƣờng nƣớc thải (g/l): Nƣớc thải (COD = 500 mg/ml) 1000ml; NH4Cl 0,3; KH2PO4 1,5; Na2HPO4.7H2O 7,9; Na2C4H4O4 6H2O 27; pH 7,5 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 85 - Môi trƣờng MPA (g/l): Cao thịt 5,0; Pepton 10,0; NaCl 5,0; Thạch 15,0; Nƣớc cất 1000 ml; pH= 7,0 ±0,2 - Môi trƣờng MRS (g/l): Pepton 10,0; cao thịt 10,0; cao nấm men 8,0; CH3COONa 5,0; KH2PO4; Amonium citrate 2,0; MgSO4.7H2O 0,2; MnSO4 H2O 0,04; Tween 80 ml; CaCO3 10,0; pH 6,0 – 6,5 - Môi trƣờng AM1 (g/l): Glucoza 10,0; rỉ đƣờng 20,0; ure 5,0; KH2PO4 1,0; MgSO4.7H2O 0,2; Na2CO3 10,0; H2O 1000 ml - Môi trƣờng AM2 (g/l): Tinh bột 10,0; ure 5,0; KH2PO4 1,0; MgSO4.7H2O 0,2; Na2CO3 10,0; H2O 1000 ml - Môi trƣờng MP (g/l): Pepton 10,0; cao thịt 5,0; NaCl 5,0; H2O 1000 ml - Môi trƣờng LB (Luria-Bertani) (g/l): Cao nấm men 5,0; Tryptone 10,0; NaCl 5,0; Glucoza 1,0; Nƣớc cất 1000 ml; pH 7,0 - Môi trƣờng MT3 (g/l): Glucoza 10,0; cao nấm men 5,0; KH2PO4 1,0; MgSO4.7H2O 0,2; Na2CO3 10,0; agar 20,0; H2O 1000 ml - Môi trƣờng MT4 (g/l): Glucoza 10,0; cao nấm men 5,0; KH2PO4 1,0; MgSO4.7H2O 0,2; Na2CO3 10,0; H2O 1000 ml - Môi trƣờng MT5 (g/l): Glucoza 10,0; pepton 5,0; cao nấm men 5,0; KH2PO4 1,0; MgSO4.7H2O 0,2; Na2CO3 10,0; H2O 1000 ml - Mơi trƣờng phospho khó tan: Glucose 10,0; Ca3PO4 5,0; (NH4)2SO4 0,5; KCl 0,2; MgSO4.7H2O 0,1; MnSO4 0,0001; FeSO4 0,0001; cao men 0,5; Thạch 18,0; Nƣớc cất 1000 ml; pH= 7,0 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 86 Phụ lục * Một số phƣơng pháp nghiên cứu sử dụng đề tài Nhuộm Gram Nguyên tắc: Sự bắt màu nhuộm tế bào vi khuẩn trình hấp thụ, khả bắt màu tế bào vi khuẩn có liên quan đến muối Magie axit ribonucleic Khi nhuộm phức tạp, muối có phản ứng với thuốc thử loại triphenylmetan (gelatinviolet cryatan violet metylviolet) chịu đƣợc tác dụng cồn Nghĩa không màu dƣới tác dụng cồn, vi khuẩn nhƣ gọi vi khuẩn Gram (+), ngƣợc lại vi khuẩn không giữ đƣợc màu xử lý gọi Gram (-) Cách tiến hành: - Làm tiêu vi khuẩn - Cố định vết bôi Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 87 - Nhuộm tím gential (gential violet) cách nhỏ tím gential lên vết bôi Giữ 1-2 phút - Xả nƣớc cho sạch, hơ khơ Sau nhỏ lugol lên tiêu để phút lại xả nƣớc, để khô - Tiếp theo nhỏ cồn 95% lên tiêu vòng 30-60 giây - Rửa lại nƣớc, để khô - Nhuộm bổ sung dung dịch Fucshin loãng phút - Cuối rửa lại nƣớc sạch, đợi khơ đem quan sát dƣới kính hiển vi vật kính dầu Kết quả: Vi khuẩn Gram (+) có màu tím, Gram (-) có màu hồng [1] Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 88 Xác định pH, DO - Giá trị pH đƣợc xác định máy đo pH 320 Mettler Toledo, Thụy Sỹ theo hƣớng dẫn nhà sản xuất - Đo DO máy đo oxy hòa tan (DO probe, New Brunswick Scientific, Mỹ) theo hƣớng dẫn nhà sản xuất Xác định chất rắn lơ lửng (SS) Các chất rắn lơ lửng (các chất huyền phù) chất rắn không tan nƣớc Hàm lƣợng chất lơ lửng (SS) lƣợng khơ phần chất rắn cịn lại giấy lọc sợi thủy tinh lọc 100 ml mẫu qua phễu lọc sấy khô 1050C (thƣờng giờ) khối lƣợng không đổi (mg/l) Cơng thức tính tính SS: SS (mg/L) = (Ws – Wd) x 1000/V Trong đó: Wd : Trọng lƣợng ban đầu giấy lọc Ws : Trọng lƣợng giấy lọc sau lọc mẫu V : Thể tích mẫu đƣợc lọc 1000: Hệ số quy đổi lít Xác định COD COD (Chemical oxygen demand): nhu cầu ơxy hóa học lƣợng oxy có Kali bicromat (K2Cr2O7) dùng để oxy hoá chất hữu nƣớc Chỉ số COD đƣợc sử dụng rộng rãi để đo gián tiếp khối lƣợng hợp chất hữu có nƣớc Phần lớn ứng dụng COD xác định khối lƣợng chất ô nhiễm hữu tìm thấy nƣớc bề mặt (ví dụ sông hay hồ), làm cho COD phép đo hữu ích chất lƣợng nƣớc Nó đƣợc biểu diễn theo đơn vị đo miligam lít (mg/L), khối lƣợng ơxy cần tiêu hao lít dung dịch Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 89 Xác định COD ngƣời ta thƣờng sử dụng chất oxy hố mạnh mơi trƣơng axit Chất oxy hoá đƣợc dùng K2Cr2O7 Cách làm [18]: Pha dung dịch làm COD dung dịch muối FAS: + Cho 5,5g AgSO4 vào lít dung dịch acid H2SO4 đặc để 1- ngày để AgSO4 tan hồn tồn + Pha dung dịch K2Cr2O7 0,01N: hịa tan 12,259g K2Cr2O7 sấy khơ 1030C vào lít nƣớc cất Dung dịch làm COD bao gồm ml acid H2SO4 có AgSO4 + ml dung dịch K2Cr2O7 0,01N + Pha dung dịch FAS 0,025N: hòa tan 9,8g (NH4)2Fe(SO4)2.6H2O vào 1000 ml nƣớc cất sau thêm ml acid H2SO4 + Pha thuốc thử F e r r o i n : H ò a t a n , g , - p h e n a l t h r o l i n e m o n o h y d r a t e v , g F e S O H2O vào 100 ml nƣớc cất Cho ml mẫu vào ống COD có chứa sẵn ml dung dịch làm COD Làm thêm mẫu trắng mẫu thử không nƣớc cất Thực tƣơng tự nhƣ bƣớc làm mẫu Xếp ống nghiệm mẫu mẫu trắng vào giá inox đặt vào tủ sấy nhiệt độ 1500C Mẫu thử để nhiệt độ phòng, đƣợc dùng để định phân lại nồng độ dung dịch FAS (vì dung dịch FAS có nồng độ khơng ổn định theo thời gian) Để mẫu nguội đến nhiệt độ phòng Thêm giọt thị ferroin định phân dung dịch FAS 0,01N đến dung dịch vừa chuyển từ màu lam lục sang màu nâu đỏ, ghi thể tích B dung dịch FAS vừa dùng Định phân mẫu trắng ghi nhận thể tích A dung dịch FAS dùng định phân Tính kết Định chuẩn lại nồng độ dung dịch FAS 0,01N: Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 90 + Chuẩn độ mẫu thử nhƣ CFAS = (Vmẫu thử x 0,1)/ VFAS Tính kết quả: COD (mg/l) = (A - B) x x 1000 x CFAS / Vm Trong đó: Vmẫu thử : số ml K2Cr2O7 dùng làm mẫu thử VFAS: số ml dung dịch FAS chuẩn độ mẫu thử A : Số ml dung dịch muối FAS dùng để chuẩn độ mẫu trắng B : Số ml dung dịch muối FAS dùng để chuẩn độ mẫu thực CFAS: Nồng độ đƣơng lƣợng dung dịch muối FAS Vm: Số ml mẫu dùng Xác định BOD BOD (Biochemical Oxygen Demand): Nhu cầu ôxy hóa sinh học hay nhu cầu ơxy sinh học lƣợng oxy cần cung cấp để oxy hoá chất hữu nƣớc vi khuẩn BOD số đồng thời thủ tục đƣợc sử dụng để xác định xem sinh vật sử dụng hết ôxy nƣớc nhanh hay chậm nhƣ Nó đƣợc sử dụng quản lý khảo sát chất lƣợng nƣớc nhƣ sinh thái học hay khoa học mơi trƣờng BOD5 : Để Oxy hố hết chất hữu nƣớc thƣờng phải 20 ngày 200C Để đơn giản ngƣời ta lấy số BOD sau Oxy hoá ngày, ký hiệu BOD5 Sau ngày có khoảng 80% chất hữu bị oxy hoá Phương pháp xác định BOD: Thử nghiệm BOD đƣợc thực cách hịa lỗng mẫu nƣớc thử với nƣớc khử ion bão hịa ơxy, thêm lƣợng cố định vi sinh vật mầm giống, đo lƣợng ơxy hịa tan đậy chặt nắp mẫu thử để ngăn ngừa ôxy khơng cho hịa tan thêm (từ ngồi khơng khí) Mẫu thử đƣợc giữ nhiệt độ 200C bóng tối để Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 91 ngăn chặn quang hợp (nguồn bổ sung thêm ơxy ngồi dự kiến) vịng ngày sau đo lại lƣợng ơxy hịa tan Khác biệt lƣợng DO (ơxy hịa tan) cuối lƣợng DO ban đầu giá trị BOD Giá trị BOD mẫu đối chứng đƣợc trừ từ giá trị BOD mẫu thử để chỉnh sai số nhằm đƣa giá trị BOD xác mẫu thử Ngày việc đo BOD đƣợc thực phƣơng pháp chai đo BOD Oxitop: Đặt chai tủ 200C ngày, BOD đƣợc đo tự động nhiệt độ đạt đến 200C Giá trị BOD đƣợc ghi tự động sau 24 Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 92 Phụ lục * Hình ảnh thiết bị hình ảnh trình thực đề tài Thiết bị lên men Bioflo 110 (New Brunswick, Mỹ) đƣợc sử dụng lên men thu sinh khối vi khuẩn tạo chế phẩm sinh học Mơ hình USBF dung tích 50l q trình vận hành Phịng thí nghiệm Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 93 A B Kiểm tra khả lắng nƣớc thải sau 15 phút Trong đó: A: mẫu đối chứng sử khơng sử dụng chế phẩm sinh học; B: mẫu sử dụng chế phẩm sinh học Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 94 Phụ lục * Kết giải tự gen 16S DNA ba chủng vi khuẩn sử dụng nghiên cứu Trình tự gen 16S DNA từ chủng ND1.9 GCGAGGGCTGCTCTTGATCGCGGCGGACGGGGTGAGTATGCCTAGGAA TCTGCCTGGTAGTGGGGGACAACGTTTCGAAAGGAACGCTAATACCGC ATACGTCCTACGGGAGAAAGCAGGGGACCTTCGGGCCTTGCGCTATCA GATGAGCCTAGGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAA GGCGACGATCCGTAACTGGTCTGAGAGGATGATCAGTCACACTGGAAC TGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGG ACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGT CTTCGGATTGTAAAGCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGCAGTAAGCTAA TACCTTGCTGTTTTGACGTTACCGACAGAATAAGCACCGGCTAACTCTG TGCCAGCAGCCGCGGTAATACAGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTA CTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGTTCGTTAAGTTGGATGTGAAAGC CCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATCCAAAACTGGCGAGCTAGAGTAC GGTAGAGGGTGGTGGAATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATAT AGGAAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACCACCTGGACTGATACTGACA CTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAG TCCACGCCGTAAACGATGTCAACTAGCCGTTGGAATCCTTGAGATTTTA GTGGCGCAGCTAACGCATTAAGTTGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCA AGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGC ATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGCCTTGACAT GCAGAGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTGCCTTCGGGAACTCTGACACA GGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGT CCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTAGTTACCAGCACGTTATGGTGG GCACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAAGGTGGGGGAT Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 95 GACGTCAAGTCATCATGGCCCCTTACCGCCTGGGCTACAACCTTGCTAC AATGGTCGGTACAAAGGGGTGGCGAACCCGCCAGTTGGACCTAATCTC AAAAAACGAATAGAGTTCCCGATCCCAATCTTGCACTCCCACTCGCTGG AAGTCGAATCCCTTGTATTCCCCAACCACAATGCCACGTGAGACATTCC GGCTCGCCACCCCCCCTGTCAAAACTGACGGCAGAAAGAAAGAGGAAG GACAGGACAGAACAACAAAAACAAATTTGGGGAACCAGCCAGCAATG GATGCGGACGGAACGGATCATTCAGTTACGCTACCGGCAAGTACTATA CGAGCAGGACATTGCAAC Trình tự gen 16S DNA từ chủng ND1.15 GTCGCGGAACGGCGAGCATGTCATGCGAGTCGAGCGGACAGATGGGAG CTTGCTCCCTGATGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACC TGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGAT GGTTGTCTGAACCGCATGGTTCAGACATAAAAGGTGGCTTCGGCTACCA CTTACAGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTC ACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACT GGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAAT Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 96 CTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATG AAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCCGT TCAAATAGGGCGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTA ACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCG GAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTG AAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTG AGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTA GAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTCTCTGGTCTGTAAC TGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACGCT GGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAAGGGGGTTTCCG CCCCTTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTAC GGTCGCAAGATTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCAGCACAATCG GTGGAGCATGTCGTTAAATTCGTAGCAACGCAAAGATCCTTACCAGGGC TTGACATCATCTGACAATCCTATACATAGGACGTCCCCTTCAGGGGCCG ACTTACTTGGAGGGGCATGGTTTCTTCCCCATCAAGCCAGGTTAACGTT GGGTAAATCCTCCTAATGACGCCACCCTTGGTCCTAAGTAGCTATCATT CATTTGGGGAAATTTCATTTGGTTGCCGCCGAAAAAAAAAAGGAAAGG GTGGTGAAAACCCCAAATGGCCAAGCCCCCTTTTAAGCGGGGGTAACC AACCGGGCTCATTTGGGAAGGAAAAAAGGCCCCCAAAACCAAAGGGTG GCGGGGCCCCCCAAAATTTGTTTCCGTAGGGACCCCTTTTTGGC Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 97 Trình tự gen 16S DNA từ chủng PK 1.19 GGCATGGCGCGCTACCATGCAGTCGAGCGGATGACGGGAGCTTGCTCC TTGATTCAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCCTAGGAATCTGCCTGGTAG TGGGGGACAACGTTTCGAAAGGAACGCTAATACCGCATACGTCCTACG GGAGAAAGCAGGGGACCTTCGGGCCTTGCGCTATCAGATGAGCCTAGG TCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGATCCGT AACTGGTCTGAGAGGATGATCAGTCACACTGGAACTGAGACACGGTCC AGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAA GCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAA GCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGCAGTAAGTTAATACCTTGCTGTTTTG ACGTTACCGACAGAATAAGCACCGGCTAACTCTGTGCCAGCAGCCGCG GTAATACAGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCG CGCGTAGGTGGTTCGTTAAGTTGGATGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTG GGAACTGCATCCAAAACTGGCGAGCTAGAGTACGGTAGAGGGTGGTGG AATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATAGGAAGGAACACCAG Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/ 98 TGGCGAAGGCGACCACCTGGACTGATACTGACACTGAGGTGCGAAAGC GTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACG ATGTCAACTAGCCGTTGGAATCCTTGAGATTTTAGTGGCGCAGCTAACG CATTAAGTTGACCGCCTGGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAA ATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGGTTTAATT CGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGCCTTGACATGCAGAGAACTTT CCAGAAAATTGGATTGGGTGCCTTTCGGGAACTCTGACCACAGGTGCTT GCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCCTGAAAATGTTTGGGTTAAGTCCCG TAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTAGTTACCAGCACGGTTATGGTGGGCA CTCTTAAGGAGACTGCCGGTGACAACCCGAGGAAAGGGGTGGGGGATG AACGTCCAAGTAATCATGGGCCCTTACCGGCCGGGGCTAACACCGTGCT ACAATGGTCGGTTAC Số hóa trung tâm học liệu http://lrc.tnu.edu.vn/