Đánh giá sự bộc lộ phức hợp miễn dịch và kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang trong chẩn đoán bệnh viêm cầu thận lupus

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC NGUYỄN THỊ NGỌC LAN ĐÁNH GIÁ SỰ BỘC LỘ PHỨC HỢP MIỄN DỊCH VÀ KỸ THUẬT CẮT, NHUỘM MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG TRONG CHẨN ĐOÁN BỆNH VIÊM CẦU THẬN LUPUS KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC HÀ NỘI – 2023 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC NGUYỄN THỊ NGỌC LAN ĐÁNH GIÁ SỰ BỘC LỘ PHỨC HỢP MIỄN DỊCH VÀ KỸ THUẬT CẮT, NHUỘM MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG TRONG CHẨN ĐOÁN BỆNH VIÊM CẦU THẬN LUPUS KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC Khoá: QH.2019.Y Người hướng dẫn: TS BS Phạm Hoàng Ngọc Hoa ThS Vũ Thị Thu Hảo HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn tới Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo & Cơng tác Học sinh Sinh viên, Phịng ban môn thuộc trường Đại Học Y Dược – Đại học Quốc gia Hà Nội tạo hội cho em học tập, tu dưỡng rèn luyện kỹ chuyên môn trường Bệnh viện Bạch Mai Cùng với nỗ lực thân, em hồn thành khố luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc Trung tâm Giải phẫu bệnh – Tế bào học tập thể thầy cô, anh chị kỹ thuật viên giúp đỡ em thời gian học tập nghiên cứu Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS BS Phạm Hoàng Ngọc Hoa ThS Vũ Thị Thu Hảo – người bảo, hướng dẫn tận tình, cho em nhiều ý kiến nhận xét truyền đạt cho em tinh thần học hỏi làm việc nghiêm túc suốt trình thực khoá luận Em xin cảm ơn bác sĩ Thành ln dành thời gian giúp em q trình thu thập số liệu anh KTV Thẩm Lê Tự Cường hỗ trợ, giám sát giúp đỡ em nhiệt tình trình triển khai kỹ thuật đề tài Cuối cùng, xin gửi lời biết ơn tới bố mẹ, người thân gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ suốt trình học tập thực đề tài Do kiến thức cịn hạn hẹp nên khơng tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận ý kiến đóng góp q thầy, để khố luận tốt nghiệp em hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn Hà Nội, ngày 21 tháng 05 năm 2023 Sinh viên Nguyễn Thị Ngọc Lan i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT C Complement (Bổ thể) H&E Hematoxylin – Eosin Ig Immunoglobulin (Globulin miễn dịch) ISN International Society of Nephrology (Hiệp hội Thận học Quốc tế) KHVĐT Kính hiển vi điện tử KHVHQ Kính hiển vi huỳnh quang KHVQH Kính hiển vi quang học KN Kháng nguyên KT Kháng thể LBĐHT Lupus ban đỏ hệ thống MDHQ Miễn dịch huỳnh quang NSX Nhà sản xuất PAS Periodic Acid – Schiff PBS Phosphate Buffer Saline PHMD Phức hợp miễn dịch RPS Renal Pathology Society (Hiệp hội Bệnh học Thận) VCTL Viêm cầu thận Lupus ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ vi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Viêm cầu thận Lupus 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Dịch tễ học 1.1.3 Nguyên nhân 1.1.4 Cơ chế gây bệnh viêm cầu thận Lupus 1.1.5 Vai trò globulin miễn dịch (IgA, IgG, IgM) bổ thể (C3, C4, C1q) viêm cầu thận Lupus 1.1.6 Tình hình nghiên cứu bộc lộ phức hợp miễn dịch Việt Nam giới 1.1.7 Phân loại mô bệnh học viêm cầu thận Lupus 1.1.8 Các phương pháp chẩn đoán 1.2 Kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang 10 1.2.1 Kỹ thuật cắt lạnh 10 1.2.2 Kỹ thuật nhuộm miễn dịch huỳnh quang 11 1.2.3 Vai trò kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch quang hỗ trợ chẩn đoán viêm thận Lupus 14 1.2.4 Ảnh hưởng kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang chẩn đoán bệnh viêm cầu thận Lupus 15 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 17 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 17 2.1.3 Cỡ mẫu 17 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 iii 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 18 2.2.2 Các biến số số 18 2.2.3 Quy trình nghiên cứu 19 2.3 Xử lý số liệu 20 2.4 Thời gian địa điểm nghiên cứu 21 2.5 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 21 CHƯƠNG KẾT QUẢ 22 3.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 22 3.2 Phân loại mô bệnh học viêm cầu thận Lupus 24 3.3 Sự bộc lộ phức hợp miễn dịch viêm cầu thận Lupus 25 3.4 Một số yếu tố cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang ảnh hưởng tới chẩn đoán viêm cầu thận Lupus 28 3.4.1 Kỹ thuật cắt lạnh 28 3.4.2 Kỹ thuật nhuộm miễn dịch huỳnh quang 29 CHƯƠNG BÀN LUẬN 32 4.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 32 4.1.1 Đặc điểm giới 32 4.1.2 Đặc điểm tuổi 32 4.2 Phân loại mô bệnh học viêm cầu thận Lupus 32 4.3 Sự bộc lộ phức hợp miễn dịch viêm cầu thận Lupus 33 4.4 Một số yếu tố kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang ảnh hưởng tới chẩn đoán viêm cầu thận Lupus 35 4.4.1 Kỹ thuật cắt lạnh 35 4.4.2 Kỹ thuật nhuộm miễn dịch huỳnh quang 37 4.5 Hạn chế nghiên cứu 40 KẾT LUẬN 41 KIẾN NGHỊ 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HOẠ iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Phân bố nhóm tuổi theo giới 23 Bảng 3.2 Phân loại mô bệnh học VCTL theo phân loại ISN/RPS 2003 24 Bảng 3.3 Phân bố cường độ lắng đọng PHMD KHVHQ 25 Bảng 3.4 Phân bố lắng đọng PHMD dương tính class 26 Bảng 3.5 Phân bố lắng đọng tất PHMD dương tính class 27 Bảng 3.6 Phân tích lỗi kỹ thuật cắt theo mức độ 28 Bảng 3.7 Phân tích mức độ PHMD 30 Bảng 4.1 So sánh với số kết nghiên cứu tác giả khác 33 Bảng 4.2 Ảnh hưởng kỹ thuật cắt đến chẩn đoán ……… …………… 35 Bảng 4.3 Nguyên nhân cách khắc phục mốt số lỗi kỹ thuật cắt … 36 Bảng 4.4 Một số lỗi dẫn đến mảnh cắt bị nền, nguyên nhân cách khắc phục … ……………… …………………………………………………… 38 Bảng 4.5 Một số lỗi dẫn đến mảnh cắt không bắt màu/ bắt màu yếu, nguyên nhân cách khắc phục…………… …… …………………………39 v DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Phân bố theo giới 22 Biểu đồ 3.2 Phân bố theo nhóm tuổi 23 Biểu đồ 3.3 Phân bố lắng đọng PHMD KHVHQ 25 Biểu đồ 3.4 Phân bố mức độ lỗi kỹ thuật cắt 28 Biểu đồ 3.5 Phân bố mức độ PHMD 29 Biểu đồ 3.6 Phân bố mức độ không bắt màu/ bắt màu yếu PHMD 30 vi ĐẶT VẤN ĐỀ Lupus ban đỏ hệ thống (LBĐHT) đặc trưng rối loạn chức hệ thống miễn dịch không đồng mặt lâm sàng, biểu triệu chứng thận, da liễu, thần kinh tim mạch [1] Trong đó, khoảng 60% bệnh nhân Lupus phát triển viêm thận Lupus liên quan đến lâm sàng vào thời điểm q trình mắc bệnh họ [2] Viêm thận Lupus nguyên nhân gây bệnh chí tử vong bệnh nhân Lupus ban đỏ hệ thống Trong viêm thận Lupus, bệnh liên quan đến phức hợp miễn dịch, lắng đọng đâu nephron bao gồm tổn thương cầu thận, ống thận, mô kẽ mạch máu [3] Đặc biệt, tổn thương thận đặc trưng lắng đọng cầu thận phức hợp miễn dịch hình thành tự kháng thể IgG, IgM, IgA bổ thể C3, C4, C1q xác định phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang Trong nửa kỷ qua, miễn dịch huỳnh quang lát cắt đông lạnh tiêu chuẩn vàng để đánh giá hóa mơ miễn dịch mẫu sinh thiết thận [4,5] Cùng với phương pháp nhuộm thường quy Hematoxylin – Eosin (HE), Periodic Acid Schiff (PAS) hay phương pháp nhuộm đặc biệt như: màu Masson, Bạc Jones Methenamine chẩn đoán bệnh thận đặc biệt viêm cầu thận Lupus phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang ưu tiên hàng đầu Viêm cầu thận Lupus có lưu hành, lắng đọng phức hợp miễn dịch vị trí khác nên nhuộm bộc lộ loại globulin miễn dịch hay bổ thể quan sát kính hiển vi huỳnh quang khác Các nghiên cứu viêm thận Lupus hay viêm cầu thận Lupus chủ yếu liên quan mặt lâm sàng, phương pháp điều trị,…; số cơng trình nghiên cứu liên quan đến phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang với bộc lộ kháng nguyên viêm thận như: nghiên cứu Saira Javeed, Sinniah R, Banfi G, Đỗ Thị Liệu, Phạm Hoàng Ngọc Hoa, Nghiêm Trung Dũng… cho thấy phần lớn phức hợp miễn dịch có IgA, IgM, IgG bổ thể C3, C4, C1q quan sát sau nhuộm miễn dịch huỳnh quang với tỉ lệ khác so với bệnh thận khác Trong đó, đa số tỉ lệ phức hợp miễn dịch IgG, C1q, C3 chiếm tỉ lệ lớn tỉ lệ bổ thể C4 nhỏ điều có khác không đáng kể nghiên cứu Miễn dịch huỳnh quang phương pháp nhuộm đặc biệt, nên sở có điều kiện để thực Việc đưa kết chẩn đoán quan trọng tiên lượng điều trị viêm cầu thận Lupus giai đoạn khác bệnh nên cần phải đảm bảo tốt kỹ thuật thực trước để có tiêu nhuộm phương pháp miễn dịch huỳnh quang đạt tiêu chuẩn Trong trình thực kỹ thuật cần có sai sót cơng đoạn dẫn tới chẩn đốn âm tính giả dương tính giả ảnh hưởng đến chất lượng điều trị gây nguy hiểm cho bệnh nhân không tiên lượng sớm Đồng thời, nghiên cứu bộc lộ phức hợp miễn dịch cịn hạn chế vậy, tơi tiến hành đề tài: “Đánh giá bộc lộ phức hợp miễn dịch kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang chẩn đoán bệnh viêm cầu thận Lupus” với hai mục tiêu: Đánh giá bộc lộ phức hợp miễn dịch mảnh sinh thiết thận phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang bệnh nhân viêm cầu thận Lupus Đánh giá số yếu tố kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang ảnh hưởng đến chẩn đoán bệnh viêm cầu thận Lupus nhuộm MDHQ xong đánh giá tiêu mức độ chủ yếu mức độ nhẹ Khi bị dẫn đến trường hợp dương tính giả, nhiên VCTL PHMD IgG hay gặp chiếm tỉ lệ cao nên IgG bị sau nhuộm mức độ nhẹ khơng ảnh hưởng nhiều đến chẩn đốn bệnh 4.4.2.2 Mảnh cắt không bắt màu/ bắt màu yếu Trong 29 trường hợp có 23 trường hợp có PHMD khơng bắt màu/bắt màu yếu Tình trạng khơng bắt màu/ bắt màu yếu tất thành phần mảnh cắt bao gồm chứng nội (màng đáy ống thận, mạch máu, mô kẽ) không bắt màu/ bắt màu yếu, khác với âm tính phần cầu thận khơng bắt màu chứng nội bắt màu Có PHMD chiếm tỉ lệ cao C4 (82.6%), tiếp đến IgA (60.8%) cuối IgM (52.1%), lại IgG, C3 C1q chiếm tỉ lệ thấp với 4.3% (1 trường hợp) Không bắt màu/ bắt màu yếu dẫn đến nhầm với chẩn đốn âm tính giả khó đánh giá phần cầu thận không bắt màu thật hay giả kết ảnh hưởng đến bệnh nhân không chẩn đốn xác tình trạng bệnh Bảng 4.5 Một số lỗi dẫn đến mảnh cắt khơng bắt màu/ bắt màu yếu, nguyên nhân cách khắc phục Một số lỗi dẫn đến mảnh cắt không bắt màu/ bắt màu yếu Nguyên nhân Khắc phục Thời gian nhuộm Quá ngắn Nhuộm thời gian, tăng thời gian lên Thời gian ủ Quá ngắn Tăng thời gian ủ Nồng độ kháng thể pha Quá loãng Pha nồng độ khuyến cáo NSX Thời gian bảo quản lâu dẫn tới chất lượng Thời gian, nhiệt độ bảo KT không đảm bảo → quản kháng thể bắt cặp không đặc hiệu, không bắt cặp 39 Theo dõi hạn sử dụng hoá chất thường xuyên đảm bảo hoá chất chưa hết hạn, điều chỉnh nhiệt độ tủ lạnh 2-8 ºC - Nhiệt độ bảo quản không đảm bảo Nhiệt độ môi trường Quá lạnh so với quy Điều chỉnh lại điều hoà định → kết hợp nhiệt độ phù hợp 20KN KT diễn chậm 25ºC không xảy phản ứng kết hợp KNKT Đậy nắp nhuộm Không đậy nắp → bay Đậy nắp đảm bảo nắp màu fluorescence được đậy kín, ánh sáng gắn KT không lọt vào Trong trường hợp mảnh cắt không bắt màu/ bắt màu yếu dẫn đến việc khơng chắn dương tính/ âm tính thật hay giả lấy lại bệnh phẩm lưu ngăn đá để nhuộm lại MDHQ thực nhuộm bệnh nhân khác mà chắn dương tính, phải loại PHMQ để làm mẫu chứng Tuy nhiên mảnh cắt lạnh lưu ngắn hạn, lại có PHMD C4 dương tính đẹp nên thực tế khơng phải lúc có mẫu dương tính lưu 4.5 Hạn chế nghiên cứu - Nghiên cứu thực với cỡ mẫu nhỏ bệnh viêm cầu thận Lupus khơng gặp thường xun trung tâm (trung bình 100 trường hợp/năm) - Không thực trực tiếp mẫu bệnh nhân mảnh sinh thiết thận bệnh nhân nhỏ kèm theo điều kiện hố chất, sinh phẩm đắt tiền nên sinh viên khơng thực kỹ thuật thực giám sát kỹ thuật viên trung tâm nhằm có tiêu nhuộm đạt kết tối ưu cho chẩn đoán - Kỹ thuật cắt lạnh nhuộm miễn dịch huỳnh quang kỹ thuật đặc biệt nên nghiên cứu đánh giá số yếu tố kỹ thuật ảnh hưởng đến chẩn đoán mức độ khác Kỹ thuật thực thủ công nên chắn khơng có cố xảy cần tiến hành thêm nghiên cứu để tìm hiểu nguyên nhân 40 KẾT LUẬN Qua nghiên cứu 47 bệnh nhân chẩn đoán VCTL lâm sàng bệnh viện Bạch Mai từ tháng 10/2022 đến hết tháng 03/2023, rút số kết luận sau: Sự bộc lộ PHMD mảnh sinh thiết bệnh nhân VCTL - Sự lắng đọng loại PHMD khác nhau, thứ tự PHMD chiếm tỉ lệ cao đến thấp sau: IgG (93.6%), C1q (91.5%), C3 (89.4%), IgM (46.8%), IgA (42.5%) C4 (34%) có tỉ lệ “full house” 25.5% - Các PHMD chủ yếu tập trung class III, IV, V class lại (I, II VI) Tuy nhiên, class lắng đọng PHMD khơng có khác biệt so với tỉ lệ phân bố chung, IgG, C1q C3 chiếm tỉ lệ cao với đa số tỉ lệ >90%; IgM IgA mức trung bình C4 chiếm tỉ lệ thấp Một số yếu tố kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang ảnh hưởng đến chẩn đoán bệnh VCTL - Trong kỹ thuật cắt, phân bố lỗi mức độ khác nhau, đó: mảnh cắt bị rách, xước chiếm tỉ lệ cao (55.2%), tiếp mảnh cắt bị gấp, co lại (34.5%) mảnh cắt bị bong chiếm tỉ lệ thấp (20.7%) Tất lỗi hầu hết tập trung mức độ nhẹ - Trong kỹ thuật nhuộm: + Trên tổng 29 trường hợp có 18 trường hợp gặp lỗi bị sau nhuộm: IgG (88.9%), chiếm tỉ lệ cao so với PHMD lại, tiếp IgA (22.0%), IgM (11.0%) C3 (11.0%) cuối C4 (5.5%) C1q (5.5%) Mức độ bị PHMD tập trung chủ yếu mức độ nhẹ, mức độ vừa số trường hợp gặp không đáng kể + Trên tổng 29 trường hợp có 23 trường hợp có PHMD khơng bắt màu/ bắt màu yếu, C4 (82.6%) có tỉ lệ cao nhất, tiếp IgA (60.8%), IgM (52.1%) cuối IgG, C3 C1q có tỉ lệ thấp với 4.3% 41 - Kỹ thuật cắt, nhuộm MDHQ kỹ thuật có hữu ích, hỗ trợ cho kỹ thuật cắt, nhuộm thông thường khác chẩn đốn bệnh VCTL dựa vào hình ảnh, vị trí lắng đọng PHMD - Cũng kỹ thuật khác kỹ thuật cắt nhuộm bị ảnh hưởng nhiều yếu tố tác động Trên vài lỗi kỹ thuật đánh giá tiêu quan sát qua KHVHQ, kỹ thuật viên cần phải nắm kiến thức ngun lý, quy trình, lỗi xảy cách khắc phục phù hợp để có tiêu đạt chất lượng tốt 42 KIẾN NGHỊ Qua nghiên cứu tơi có số khuyến nghị sau: Mảnh sinh thiết thận cho phương pháp nhuộm MDHQ cần có cầu thận, nhiên để phục vụ cho phương pháp nhuộm khác số lượng cầu thận sinh thiết nhiều tốt để đánh giá tổn thương cầu thận cách xác Phương pháp nhuộm MDHQ mảnh sinh thiết thận có ý nghĩa đánh giá bộc lộ PHMD bệnh viêm cầu thận Lupus, từ quan sát quan sát vị trí tổn thương cầu thận qua lắng đọng PHMD Khuyến khích sử dụng phương pháp nhuộm MDHQ nhiều sở y tế đồng thời kết hợp với phương pháp nhuộm khác bao gồm: H&E, PAS, Bạc Jones Methenamine, màu Masson Kỹ thuật cắt, nhuộm MDHQ ảnh hưởng trực tiếp đến chẩn đốn viêm cầu thận Lupus thơng qua hình ảnh quan sát KHVHQ, thao tác cần thực cách tỉ mỉ, cẩn thận nhằm tạo tiêu đạt chất lượng cao phục vụ cho chẩn đoán 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 15 Yu H, Nagafuchi Y, Fujio K Clinical and Immunological Biomarkers for Systemic Lupus Erythematosus Biomolecules Jun 22 2021;11(7) Saxena R, Mahajan T, Mohan C Lupus nephritis: current update Arthritis research & therapy 2011;13(5):240 Giannico G, Fogo AB Lupus nephritis: is the kidney biopsy currently necessary in the management of lupus nephritis? Clinical journal of the American Society of Nephrology : CJASN Jan 2013;8(1):138-45 Mölne J, Breimer ME, Svalander Immunoperoxidase versus immunofluorescence in the assessment of human renal biopsies American journal of kidney diseases : the official journal of the National Kidney Foundation Apr 2005;45(4):674-83 M K Immune complex Atlas of diagnostic immunohistopathology 1990; Musa R, Brent LH, Qurie A Lupus Nephritis StatPearls 2022 Zahir ST, Hosseini E Pathologic features of renal biopsies based on H & E, immunofluorescence and electron microscopy Romanian journal of internal medicine = Revue roumaine de medecine interne Oct-Dec 2014;52(4):263-8 Schifferli JA, Ng YC, Peters DK The role of complement and its receptor in the elimination of immune complexes The New England journal of medicine Aug 21 1986;315(8):488-95 Markowitz GS The ISN/RPS 2003 classification of lupus nephritis: An assessment at years 2007; Ceccarelli F, Perricone C, Borgiani P Genetic Factors in Systemic Lupus Erythematosus: Contribution to Disease Phenotype Journal of Immunology Research 2015:11 Đặng Thu Hương, Nguyễn Tất Thắng Tỉ lệ kháng thể kháng Nucleosome Lupus ban đỏ hệ thống – mối liên quan kháng thể kháng Nucleosome với ANA, Anti Ds DNA độ hoạt động bệnh Tạp chí Y Học TP Hồ Chí Minh 2013; Đỗ Thị Liệu Nghiên cứu đối chiếu lâm sàng mô bệnh học thận bệnh nhân viêm thận bệnh lupus ban đỏ hệ thống Luận án Tiến sĩ y học, Học viện Quân Y 2001; M.K C Developments in the clinical understanding of lupus Arthritis research & therapy 2009:245 George Bertsias, Ricard Cervera, Dimitrios T Boumpas Systemic Lupus Erythematosus: Pathogenesis and Clinical Features EULAR Textbook on Rheumatic Diseases 2012:476-505 Deng Y, Tsao B.P Genes and Genetics in Human Systemic Lupus Erythematosus Systemic Lupus Erythematosus 2016:69-76 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Levy D.M, Kamphuis S Systemic lupus erythematosus in children and adolescents Pediatr Clin North Am 2012; M.S L Chapter 53 - Childhood-Onset Systemic Lupus Erythematosus A2 - Tsokos, George C Systemic Lupus Erythematosus 2016; Lech M, Anders HJ The pathogenesis of lupus nephritis J Am Soc Nephrol Sep 2013;24(9):1357-66 Heidelberger M Quantitative chemical studies on complement or alexin: I A method The Journal of experimental medicine May 31 1941;73(6):681-94 Walport, M J Complement and systemic lupus erythematosus Arthritis research 2002;4 Suppl 3(Suppl 3):S279-93 Phạm Hoàng Ngọc Hoa Áp dụng phân loại ISN/RPS 2003 đối chiếu với số biểu lâm sàng, cận lâm sàng viêm cầu thận lupus Luận văn Thạc sĩ, Trường Đại học Y Hà Nội 2015; Nghiêm Trung Dũng Nghiên cứu đánh giá mức độ hoạt động, tổn thương mô bệnh học tính đa hình thái gen STAT4, IRF5, CDKN1A viêm thận Lupus Luận án Tiến sĩ y học, Trường Đại học Y Hà Nội 2018; Sinniah, PH Phong Lupus nephritis: correlation between light, electron microscopic and immunofluorescent findings and renal function Clinical nephrology Aug 1976;6(2):340-51 Banfi G, Mazzucco G, Barbiano di Belgiojoso G, et al Morphological parameters in lupus nephritis: their relevance for classification and relationship with clinical and histological findings and outcome The Quarterly journal of medicine May 1985;55(217):153-68 Saira Javeed, Safana Sadaf, Saima Batool, Ayma Batool, Zubaria Rafique, Akhtar S Spectrum of Morphological and Immunofluorescence Patterns in Lupus Nephritis: A Single Institutional Study 2022; Grishman E, Gerber MA, Churg J Patterns of renal injury in systemic lupus erythematosus: light and immunofluorescence microscopic observations American journal of kidney diseases : the official journal of the National Kidney Foundation Jul 1982;2(1 Suppl 1):135-41 Bộ Y tế Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành giải phẫu bệnh, tế bào học Nhà xuất Y học 2016 Schwartzman-Morris J, Putterman C Gender differences in the pathogenesis and outcome of lupus and of lupus nephritis Clin Dev Immunol 2012; Mina R, Brunner HI Pediatric lupus are there differences in presentation, genetics, response to therapy, and damage accrual compared with adult lupus? Rheum Dis Clin North Am 2010; Danchenko N, Satia JA, Anthony MS Epidemiology of systemic lupus erythematosus: a comparison of worldwide disease burden Lupus 2006; 31 32 33 34 Nguyễn Thị Thu Hương Đánh giá hoạt động bệnh lupus ban đỏ theo số SLEDAI so sánh với số số khác Luận văn Thạc sĩ, Chuyên ngành nội khoa, Trường Đại học Y Hà Nội 2010; IG Okpechi, CR Swanepoel, N Tiffin ea Clinicopathological insights into lupus nephritis in South Africans: a study of 251 patients Lupus 2012; Wafaey Gomaa, Sami Bahlas, Wael Habhab ea Clinicopathological characteristics of lupus nephritis in Western region of Saudi Arabia: An experience from two tertiary medical centres Journal of Microscopy and Ultrastructure 2014; Cameron JS Lupus Nephritis Journal of the American Society of Nephrolog 1999; PHỤ LỤC Phiếu điền thông tin số yếu tố cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang ảnh hưởng đến chẩn đoán VCTL MỘT SỐ YẾU TỐ KỸ THUẬT ẢNH HƯỞNG ĐẾN CHẨN ĐOÁN VIÊM CẦU THẬN LUPUS Ngày/tháng/năm: Họ tên: Mã BN: Giới tính: Tuổi/năm sinh: Yếu tố ảnh hưởng kỹ thuật cắt Yếu tố ảnh hưởng Khơng Có Mức độ nhẹ Mức độ vừa Mức độ nặng Gấp, co lại Mảnh cắt Rách, xước Bong Yếu tố ảnh hưởng kỹ thuật nhuộm Nền IgG IgA IgM C3 C4 C1q IgG IgA IgM C3 C4 C1q Mức độ nhẹ Có Mức độ vừa Mức độ nặng Khơng Khơng bắt màu/ bắt màu yếu Có Khơng Phiếu điền thơng tin bộc lộ phức hợp miễn dịch SỰ BỘC LỘ PHỨC HỢP MIỄN DỊCH Ngày/tháng/năm: Họ tên: Mã BN: Giới tính: Tuổi/năm sinh: Số cầu thận: Chẩn đốn mơ bệnh học theo class: Sự bộc lộ PHMD loại kháng thể bổ thể: Mức độ 1+ 2+ 3+ -/+ - IgG IgA IgM C3 C4 C1q MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HOẠ Một số ảnh nhuộm miễn dịch huỳnh quang Ảnh Nhuộm MDHQ x400 IgG Ảnh Nhuộm MDHQ x400 C3 Ảnh Nhuộm MDHQ x400 IgM Ảnh 4: Nhuộm MDHQ x200 C1q Một số ảnh lỗi kỹ thuật cắt, nhuộm miễn dịch huỳnh quang 2.1 Mảnh cắt bị 2.2 Mảnh cắt bị bong 2.3 Mảnh cắt bị rách, xước 2.4 Mảnh cắt không bắt màu/ bắt màu yếu