Nghiên cứu và ứng dụng công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu bệnh bằng các chế phẩm vi khuẩn và nấm

4£ 72- 2£//& #(7/17£ BỘ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG CHƯƠNG TRÌNH CƠNG NGHỆ SINH HỌC QUỐC GIA KC - 08 BAO CAO TONG KET NAM 1991 - 1995 ĐỀ TÀI: "NGHIÊN CỨU VÀ ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU BỆNH BANG CAC CHẾ PHAM VI KHUAN VA NAM" (KC 08 - 14) Chu nhiém dé tai: PGS.TS Truong Thanh Gian Cơ quan chủ trì để tài: — Viện Bảo vệ thực vật BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT LG : HA NOI 1995 & 0639 AG 7.7 LOE CEI ô 11 Trang I ẮẰẦỒẶẮẶẠA.A., Mục tiêu đề tài KC 08 - 14 Q1 Các nhánh nghiên nh sec cứu chủ nhiệm nhánh thuộc đề tài Danh sách quan khoa học cán tham gia đề tài San phẩm khoa học đề tài KC 08-14 .se 11 1n .Kết triển khai ứng dụng chế phẩm đề tài tao sản xuất nông lâm nghiỆp co NH0 144 61t k0 HH ch gu A CÁC KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI KC 08-14 TRONG NAM 1991-1995 II IL Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm trừ sâu hại trồng nông lâm nghiệp virút 1.1 Nghiên cứu tạo công nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng 1.1.1 Nghiên cứu xây dựng mơ hình MTTANT cải tiến thành phần phù hợp với điều kiện nước ta 12 , 1.1.2 Chọn tạo trì giống sâu mẹ phịng '†hí nghiệm 1.1.3 Nghiên cứu phương pháp công cụ để sản xuất Noe loat trùng 1.2.1 Thu thập phân lập nguồn virut tring 1.2.2 Tạo sử dụng chế phẩm virút côn trùng nuôi MTTANT phòng Q ST HT .1.2.3 Tạo sử dụng chế phẩm virút phương pháp 14 thY CONG ti CHO ceecccssecccssecesesseeessssesstusessssesssssasecsssescesseeeseses 1.2.4 Kiểm tra chất lượng đánh giá sinh học chế phẩm Virút đưỢC LẠO TA Il HH HH g1 neo Nghiên cứu công nghệ sản xuất thuốc trừ sáu nấm Metarrhizium va Beauveria dé ứng dụng phòng trừ SƠ sảu hại cáy KrỒNg TH H e e 2.1 Thu thập chọn lọc chủng nấm sâu hại .ec< 2.2 Tuyển chọn chủng nấm có hoạt tính diệt sâu cao 2.3 Nghiên cứu công nghệ sản xuất chế phẩm cccccsccrec 2.4 Nghiên cứu thí nghiệm số đối tượng sâu hại 18 HH Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sùth ( CKS) chống năm gáy bệnh tFỒNg Ăn re 20 3.1 Phân lập tuyển chọn xạ khuẩn 52s SnnEnn 3.1.1 Phân lập xạ khuẩn hoạt tính kháng sinh chúng 3.1.2 Tuyển chọn chủng xạ khuẩn sinh chất kháng sinh ( CKS) chống nấm mốc gây bệnh kho vin, đạo ôn lúa A 3.4 Nghiên cứu thu nhận bào tử sản xuất chế phẩm bào tử IY Nghiên cứu nấm có ích Trichoderma 55 ne o 23 4.1 Thu thập, phân lập nguồn nấm 2-2 SSSESS2E51 E5En se 4.2 Tuyển chọn chủng Trichoderma có tính đối kháng cao 4.3 Nghiên cứu môi trường để sản xuất sinh khối lớn 4.4 Khả ứng dụng nấm Trichoderma để phòng trừ số bệnh nấm hại trồng 0s n SH na 4.4.1 Kiểm tra phòng ose SE s-ctc B NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CÁC KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI KC 08-14 25 ta °oO E Go z > BR &, > < œ, Nv Về chế phẩm virút trừ SAU cccssssecssesssesssseessesesssscsssesssusessesceseecsees Be - Về xạ khuẩn sinh chất kháng sinh Streptomyces - Về nấm đối kháng Trichoderma - Về tạo giống sản xuất Bt mơi trường lên men thích hợp in K thối CỔ rễ Ở ạc HH2 01212211 E115 cst 3.2 Nghiên cứu khả sinh tổng hợp chất kháng sinh chủng chọn lọc 3.3 Tìm hiểu khả ứng dụng xạ khuẩn C KET LUAN VA KIEN NGHI csscccccssssssscssssssesesssseesssssecssssasevsesesssesesssseccesssees 30 LỜI GIỚI THIỆU Đề tài “ Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu bệnh chế phẩm vi khuẩn nấm”, mã số KC-08 -l4 thuộc Chương trình cơng nghệ sinh học Quốc gia KC -08 tiến hành năm 1991-1995, Đề tài KC-08-14 hoàn toàn mẻ, nước ta phấn đấu tiến lên cơng nghiệp hố đại hố, phải hình thành nên nơng nghiệp bền vững Nghị Trung ương Đảng Cộng sản Việt Nam đề Đề tài KC-08-14 Bộ Khoa học Công nghệ Mơi trường Ban Chủ nhiệm Chương trình CNSHQG KC-0% giao cho Viện Bảo vệ thực vật, thuộc Bộ Nông nghiệp Công nghiệp Thực phẩm quan chủ trì đề tài, có tham gia Viện Công nghệ sinh học thuộc Trung tâm Khoa học Tự nhiên Công nghệ Quốc gia, Trung tâm nghiên cứu Vĩ sinh vật ứng dụng thuộc trường Đại học Tổng hợp Hà Nội, Viện Di truyền Nông nghiệp Bộ Nông nghiệp Công nghiệp Thực phẩm hợp tác chặt chế có hiệu Phân viện Công nghệ Sinh học Viện Sinh học Nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh quan, địa phương tiến hành Đề tài KC-08-14, thử nghiệm nước " năm nghiên cứu “ước đầu tạo công nghệ sản xuất ứng dụng số thuốc sinh học (Biopesticide) trừ sâu bệnh hại trồng nông, lâm nghiệp, làm tiền đề cho phát triển rộng rãi phương pháp sinh học bảo vệ trồng, gắn chặt công tác bảo vệ thực vật bảo vệ môi trường nước ta Con người, lúc hết, địi hỏi nguồn khơng khí để thớ, nước để uống, thực phẩm không độc để ãn trao đổi nước với nước khác hành tính Các sinh vật xung quanh phải tồn phát triển Chúng hy vọng đề tài khoa học KC-08-14 với kết ban đầu góp phần nhỏ bé vào mục tiêu cao Chủ nhiệm đề tài KC-08-14 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực đề tài KC-08-14, luôn quan tâm đạo giúp đỡ Bộ Khoa học Công nghệ Môi trường (Vụ RD TCTH), Ban Chủ nhiệm chương trình KC-08, Thứ trưởng Bộ Nơng nghiệp Công nghiệp thực phẩm Nguyễn Thiện Luân - Chủ nhiệm chương trình Vụ Văn xã Bộ Tài chính, GS.TS Lê Dỗn Diên - Viện trưởng Viện Cơng nghệ sau thu hoạch - quan quản lý Chương trình, giúp đỡ tận tình PGS-PTS Lê Văn Thuyết - Viện trưởng phòng chức nãng Viện Bảo vệ Thực vật, hợp tác chặt chế có hiệu Trung tâm Nhiệt đới Việt Xơ, Viện Công nghệ Sinh học, Viện Di truyền nông nghiệp, Trung tâm nghiên cứu v1 sinh học ứng dụng Đại học Tổng hợp Hà Nội, Phân Viện Công nghệ Sinh học - Viện Sinh học Nhiệt đới Thành phố Hồ Chí Minh, quan đạo sản xuất địa phương, nơi tiến hành thử nghiệm xây dựng mơ hình sử dụng thuốc sinh học Thay mật tập thể nghiên cứu đề tài KC-08-14, xin chân thành cảm ơn quan tâm giúp đỡ quý báu Có thành thể tập bão cáo khoa học cố gắng, lao động mệt mỏi tận tâm các«„giáo sư, phó giáo sư, tiến sĩ, phó tiến sĩ khoa học, kỹ sư nhân viên phòng thí nghiệm thực đề tài Nhân danh chủ nhiệm đề tài KC-08-14, xin ghi nhận chân thành cám ơn bạn Thay mặt tập thể cần thực đề tài, xin bày tỏ lòng biết ơn nhà khoa học đạo sản xuất dành thời gian đọc góp ý iến cho báo cáo Chủ nhiệm đề tài KC-08-14 * MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI KC 08 - 14 Đồ tài KC 08 - 14 tiến hành nghiên cứu nhằm Tạo công nghệ sản xuất công nghệ sử dụng thuốc sinh học trừ sâu bệnh (biopesticide)hai cay trồn g nông lâm nghiệp trên sở virút, vi khuẩn, nấm kháng sinh sẵn có nước ta, triển khai áp dụng thử nghiệm hệ thống tổng hợp phòn g trừ sâu bệnh (PM), hạn chế sử dụng thuốc hố học trừ sâu bệnh, chống nhiê m mơi trường, tránh bẩn độc cho nông “sản phẩm, bảo vệ sức khoẻ người tăng cường chất lượng hàng hố nơng sản xuất * CAC NOI DUNG NGHIEN CUU CUA DE TAL L Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm virút trừ sâu hại Cây trồng nông lâm nghiệp: sâu xanh, sâu khoang, sâu keo đa lắng, sâu đo xanh sâu róm thông Nghiên cứu công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu nấm Metarrhizium Beauveria để ứng dụng phòng trừ số sâu hại: sâu đo xanh, bọ rầy nâu hại lúa, châu chấu mía ngơ ce Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sinh chống bệnh đạo ôn, khô văn thối cổ rễ Nghiên cứu nấm có ích Trichoderma chống bệnh khơ văn ngô héo rũ lạc Nghiên cưú tạo giống sản xuất BT (Bac illus thuringiensis) công nghệ lên men phù hợp với điều kiện Việt Nam Nội dung | cấp kinh phí nghiên cứu năm 199]-1995 Nội dung 3, 4, cấp kinh phí hoạt động 1991-1993 sau bị ngừng thiếu kinh phí + Kinh phí cấp nam (1991 - 1995) Nam 1991 Nam 1992 _ Năm 1993 - triéu déng - 70 - 100 „ “ Nam 1994 - Nam 1995 - 80 60 “ ‘ad Cong nam : 317 triéu đồng CÁC NHÁNH NGHIÊN CỨU VÀ CÁC CHỦ NHIỆM NHÁNH THUỘC ĐỀ TÀI KC-08-14 Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm virus trừ sâu hại trồng nông lâm nghiệp: Chủ nhiệm: PTS - Trần Quang Tấn, Phó Gián đốc Trung tâm đấu tranh Sinh học - Viện Bảo vệ thực vật - Nghiên cứu công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu nấm Metarrhizium Beauveria để ứng dụng phòng trừ số sâu hại trồng Chủ nhiệm: PTS - Phạm Thị Thuy, tưởng phịng Thí nghiệm Nấm trùng - Trung tâm Đấu tranh sinh học- Viện Báo vệ thực vật Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sinh chống Nấm gây bệnh đạo ôn thối cổ rễ Chủ nhiệm: PTS Lẻ Gia Hy, Phịng Di truyền VSV Viện Cơng nghệ Sinh học thuộc Trung tàm Khoa học Từ nhiên Công nghệ Quoc gia - Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sinh chống nấm-gây bệnh khô văn thối cổ rễ Chủ nhiệm: PGŒS.PIS Phạm Văn Ty, Phó Giám dốc Trung tâm nghiền cứu ví sinh vật học ứng dụng, trường Đại học Tổng hợp Hà NÓI - Nghiên cứu tạo giống sản xuất BT (Bacilius thuringiensis) với môi trường lên men phù hợp với điều kiện Việt Nam Chủ nhiệm: PTS-Nguyễn Đình Lạc Trưởng phịng Di truyền Công nghệ vĩ sinh Viên Dĩ tuyền Nông nghiệp Nghiên cứu nấm có ich Trichoderma Thực hiện: KS Trin Thi Thuần, Lê Minh Thĩ, Dương Thị Hồng - Bộ môn + bệnh - Viện Bảo vệ thực vật DANH SÁCH CÁC CƠ QUAN KHOA HỌC VÀ CÁN BỘ THAM GIA ĐỀ TÀI: L Viện bảo vệ thực vật - Bộ Nông nghiệp Công nghiệp Thực phẩm: PGS.TS Trương Thanh Giản PGS.PTS Lê Văn Thuyết PTS Tran Quang Tan PTS Nguyén Van Thiéng KS Nguyén Dau Toan KS Tran Dinh Pha Thac si Nguyén Thi Diép KS Dao Thi Hué KS Huynh Thi Hué KS Pham Thi Hanh KS Lé Thị Hiền Phung Thi Hoa Mai Phuong Dung Lê Thị Dung Phí Thu Hà x Nguyễn Văn Trọng Vũ Thị Hiên PTS Phạm Thị Thuỳ KS Nguyễn Hoài Bắc KS Đồng Thị Thanh KS Trần Thanh Tháp KS Hồng Cơng Điền KS Trần Thị Thuần KS Lé Minh Thi Duong Thi Hong I- Viện công nghệ sinh học- Trung tâm khoa học tự nhiên công nghệ Quốc Gia: PTS Lê Gia Hy PTS Ngơ Đình Quang Bính KS Phạm Kim Dung KS Pham Bich Hong KS Nguyén Quynh Chau KS Va Thi Nhung KS Pham Minh Huong KS Nguyén Hong Ha HI- Trung tâm nghiên cứu vi sinh vật học ứng dụng, Trường đại hoc tổng hợp Hà Nội PGS-PTS Phạm Văn Ty PTS Lé Mai Huong Lê Việt Hùng Thái Mỹ Hạnh PGS Tir Minh Kosong Củ nhãn Dao Huyén Luong IV- Viện di truyền Nông nghiệp- Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm: cee PTS Nguyén Dinh Lac V- Phân Viện công nghệ sinh học - Viện sinh học nhiệt đới Thành phố Hồ Chí Minh: PTS- Đồn Thị Bích KS- Lê Tấn Đức KS- Phạm Ngọc Triết —— * SAN PHAM KHOA HOC CUA DE TAI KC-08-14 TRONG NAM 1991-1995 + Vị rút trùng: - Hàng năm có báo cáo khoa học nuôi côn trùng va tao ché FE: phẩm vi rút trừ sâu Hội nghị khoa học Viện bảo vệ thực vật, đánh giá đạt loại - Báo cáo “ Kết nghiên cứu sản xuất ứng dụng NPV sâu róm thơng để phịng trừ đối tượng sâu hại rừng thơng Thanh Hố” Hội đồng khoa học - Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm loai kha, 1994 đánh giá đạt - Được cấp độc quyền sáng chế “ MTTANT không agar nuôi côn trùng cánh phấn Lepidoptera, số I66 ngày 2/8/1993 - Được Ban tổ chức Hội thi sáng tạo kỹ thuật toàn quốc 1991 cấp khen đoạt giải ` Œ/Ä/ pháp công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm virus try sau “ - Xây dựng quy trình sản xuất sử dụng chế phẩm virus phương pháp thủ công chỗ để trừ sâu đo xanh sâu róm thơng cnn - Xây dựng phương pháp thống “Đánh giá chất lượng kiểm tra sinh học chế phẩm virus trừ sâu” - Có mẫu virus đơng khơ sâu xanh-Heliothis armigera sâu khoang- Spodoptera litura lưu giữ Viện Bảo vệ thực vật - Đã chuyển giao cơng nghệ hình thành xưởng sản xuất chế phẩm virut trừ sâu theo truyền Việt Nam - Đã chuyển giao công nghệ tạo mơ hình sản xuất ứng dụng phẩm virut trừ sâu róm thơng Thanh Hố chế - Đã chuyển giao cơng nghệ tạo mơ hình sản suất ứng dụng chế phẩm virut trừ sâu keo da láng Phân Viện Công nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh - Truyền thụ phương pháp ni sâu sản xuất chế phẩm virut trừ sâu cho phịng thí nghiệm Trung tâm Bơng Nha Hố, Ninh Thuận - Đã có II cơng trình đăng tạp chí nước - Đã hướng dẫn sinh viên đại học, l thạc sĩ nghiên cứu sinh công nghệ nuôi sâu tạo chế phẩm virus trừ sâu +Nấm trùng: - Đã có cơng trình đăng Tạp chí Khoa học nước cơng trình đăng tạp chí nước ngồi - Đã hướng dẫn sinh viên trường Đại học Nông nghiệp Ï, sinh viên trường Đại học Quốc gia phân lập ứng dụng Nấm côn trùng phịng trừ rầy nâu bọ xít hại lúa + Xa khuẩn: - Đã có I4 cơng trình đãng tạp chí khoa học nước - Một luận văn phó tiến sĩ sinh học (đã bảo vệ) -Đã hướng dẫn 14 sinh viên, nghiên cứu sinh * KẾT QUA TRIEN KHAI ỨNG DỤNG CÁC CHẾ PHAM CUA DE TÀI TẠO RA TRONG SẢN XUẤT NÔNG LÂM NGHIỆP: + Chế phẩm virut trừ sâu: - Hướng dẫn sử dụng chế phẩm virut trừ sâu Nông trường Tô Hiệu - Sơn La: 300 ha, Sông bé : 200 ha, 1992 - 1993 - Hướng dẫn sử dụng chế phẩm virut trừ sâu khoang rau tai Hợp tác xã Mai Dịch - Từ Liêm - Hà Nội đậu đỗ Đông Anh - Ha Noi: 50 , 1993 - 1994 - Hướng dẫn sử dụng chế phẩm virut trừ sâu keo da láng đỗ tương xuân, xuân hè Xuân Canh, Ngọc Chi -Đông Anh - Hà Nội : 20 ha, 1993 - 1994 - Sử dụng chế phẩm virut trừ sâu keo da láng đậu xanh Long Khanh - Đồng Nai : ha, 1994 - Sử dụng chế phẩm virut trừ sâu khoang đậu phụng Củ Chi Thành phố Hồ Chí Minh Tràng Bảng - Tây Ninh: ha, 1995 , - Hướng dẫn sản xuất sử dụng chế phẩm virut trừ sâưx†o xanh đay Châu Giang - Hải Hưng Thọ An -Đan Phượng- Hà Tây : khoảng 100 ha, 1992 - 1993 - (994 - Hướng dẫn (cùng Tram Bảo vệ rừng Thanh Hoá) sản xuất sử dụng chế phẩm virus trừ sâu róm thơng lâm trường Hà Trung, Tĩnh Gia, Thạch Thành Hàm Rồng, Sâm Sơn - Thanh Hoá: 500 ha, 1993 - 1994 + Chế phẩm nấm côn trùng: - Sử dụng thử chế phẩm năm Ma Bb_ trừ sâu đo xanh Liên Khê - Chau Giang - Hai Hung: 0,2 ha, 1992 - 1993 - Sử dụng thử chế phẩm nấm trừ rây nâu Trác Văn, Duy Tiên, Nam Ha: 0,1 ha, 1994 - Sử dung chế phẩm Mf Bb trừ cào cào hại ngơ, mía Bầu Lâm, Xun Mộc Ngãi Giao, Chầu Đức tỉnh Bà Rịa Ving Tau: 110 1994 1995 - Sử dụng chế phâm MỸ trừ cào cào Đồng Nai: 5ha, 1994 - 1995, - Sử dụng thử chế phẩm MỸ Bb trừ rầy sâu hại lúa Phước Thạch, Châu Thành, Tiền Giang: 0,3ha, 1995 + Chế phẩm bào tử xạ khuẩn: - Sử dụng thử chế phẩm bào tự xạ khuẩn trừ khô văn lúa, ngô ngoại thành Hà Nội 0,2ha, 1993 + Chế phẩm Bi: - Sử dụng thử chế phẩm Bi trừ sâu tơ, sâu xanh, sâu xanh bướm trắng cai bap tai mai Dịch, Từ Liêm - Hà Nội: 0,Sha, 1992 - 1993 10 A CÁC KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI KC-08-14 TRONG NAM 1991 - 1995: Cac két qua nghién ctu va ting dung cua dé tai KC-08-14 năm qua trình bầy cụ thể báo cáo khoa học nhánh đề tài nêu phần đặt vấn đề, tình hình nghiên cứu nước, vật liệu phương pháp nghiên cứu kết luận Ø báo cáo này, xin giới thiệu tổng quát kết nghiên cứu mặt đề tài, có nhận xét đánh giá sau phần kết luận chung có kiến nghị vơi Nhà nước đầu tư phát triển đề tài năm tới I NGHIÊN CỨU CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VÀ ỨNG DỤNG CHẾ PHẨM VIRUT TRỪ SÂU HẠI CÂY TRỒNG NÔNG, LÂM NGHIỆP Khác với công nghệ sản xuất chế phẩm sinh học trừ sâu khác công nghệ sản xuất hàng loạt chế phẩm virut trừ sâu có hai khả tạo sinh khối lớn virut: - Nhân virut thể sống côn trùng (in vivo) - Nhân virut nuôi cấy tế bào côn trig (in vitro) Đối với virut nhân nghệ phẩm Phân chun tính cơng nghệ tách dịng tế bào trùng virus nuôi cấy tế bào công nghệ phức tạp địi hỏi trình độ cơng cao với đầu tư lớn Tuy nhiên, để đáp ứng nhu cầu số lượng lớn chế virut trừ sâu tương lai năm 1994 - 1995 phịng Thí nghiệm Viện cơng nghệ sinh học - Viện Sinh học nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh chúng tơi bước đầu tiếp cận làm quen thăm dò với dòng tế bào S.f (Sâu keo Spodoptera frugiperda, nguồn Mỹ) để tìm hiểu khả nhân virut “in vitro” điều kiện nước ta Theo nội dung nghiên cứu đề tài ký hợp đồng với Nhà nước giai đoạn [991 - 1995, tiếp tục sâu vào công nghệ tạo thành sinh khối lớn virut thể sống côn trùng (ïn vivo) Như vậy, điều kiện tiên công nghệ sản xuất hàng loạt chế phẩm virur trừ sâu phải có khối lượng lớn trùng sống Trong Š năm qua, đề tài song song tiến hành nghiên cứu theo hướng: II lồng bướm 25 cặp, ngày cho 4000 - 6000 trứng Với số lượng này, bướm đẻ 4-5 ngày liền Tỷ lệ sâu non nở cao: 98-00% Tính từ năm 1991 dén nay, lần Việt Nam trì giống sâu xanh liên tục 62 hệ phịng thí nghiệm giữ tính ưu việt sức sống khả tái sinh sản - Gidng sau keo da lang Spodoptera litura Fabr: Spodoptera exigua Hubner va sau khoang - Với mơi trường thức án có chất lượng phương pháp cho bướm đẻ nâng cao sức sống sâu non, thời gian sống khả nang sinh san cua bướm Trên môi trường có thành phần chủ yếu giá đỗ xanh tảo Spiruline, đại lượng tử vong sâu keo da láng thấp MTTANT cũ (Agar- C), (xem bang 4) K tương ứng 0,9851/1,9660 Trọng lượng nhộng ổ bình quân: 98 + 4,2 mg Trọng lượng nhộng Q binh quan: [11 + 3,9 mg Có đợt ni mùa khơ phía Nam, mg/con phía Bắc đạt tối da 82 mg/con nhiều nhịng trái đạt tới 150 Kha nang sinh san cao (xem bảng sơ đồ I); Bình quân số trứng đẻ cập MTTANT Agar - C: 596 quả, Agar - M: 903 -Ở giống sâu khoang tìm thấy thơng số có đại lượng tương tự (bang 7) 1.1.3 Nghiên cứu phương pháp công cụ để sản xuất hàng loạt côn trùng Sau có MTTANT thích hợp chọn tạo giống trùng sản xuất, q trình triển khai sản xuất hàng loạt, đề tài tiến hành nghiên cứu chế tạo công cụ, thiết bị nuôi sâu từ vật liệu, vật dụng sẵn có ngồi thi trường bướm Đề tài thiết kế kiểu lồng khép kín, tự động, thuận lợi cho vũ hoá đẻ thu trứng dễ dàng, trứng không hư hại, bướm không bị tổn thương, sử dụng thức ăn tốt, kéo dài thời gian sống nâng cao sức đẻ bướm, sản lượng trứng đạt nhiều Trứng xử lý xông hoi Formaline túi ni long don giản Sâu non nở đến cuối tuổi đầu tuổi nuôi MTANT mặt đĩa Petri nhựa úp lên phiến kính lồng chồng lên Từ tuổi tách chuyển sang lọ nhựa có săn MTTANT đựng rổ nhựa vuông lớn xếp chông lên Sâu tiếp tục làm nhộng lọ nhựa, không dùng khung nhựa chia ô Nga số nước khác Đề tài thiết kế công cụ xay nghiền (lõi ngõ, đậu đỗ), tách nước bã bia, bã đậu phụ, phơi sấy nguyên liệu quấy trộn thức ăn đảm bảo sản xuất hàng loạt côn trùng quy mô khác Ở bảng cho thấy số lượng sâu xanh nuôi năm sau: Nai 1990 - 28.010 Nam 1992 - 189.280 Nam 1994 - 1.709.480 Riêng tháng có sản phẩm cao năm 1994 šố lượng sâu sản Xuất bang ca nam(1990 - 1993) gop lai ine 1.2 Nghiên cứu công nghệ sản xuất ứng dụng chế phẩm virut trừ sâu: 1.21 Thu thập phân lập nguồn viut côn trùng: Được hướng dẫn giúp đỡ chuyên gia Vưbornov R (Trung tâm nhiệt đới Việt Xô), 1991 -'1992 chuyên gia thu thập phân lập I4 chúng virut 13 loại sâu hại lúa, ngô, khoai, đậu đỗ, rau hành, cà chua, thầu đầu, cam quýt, bông, đay, thông nhựa Những chủng virut phân lập thuộc nhóm NPV (Nuclear polyhedrosis virus) họ Baculoviridae, riêng loài sâu khoang - Spodoptera litura Fabr phân lập thêm dạng hạt GV (Granular virus) Dưới chủng virut thu thập phân lập (xem bảng 9) 14 1.2.2 Tao va st dung ché phém virut bang cén trùng nuôi MTTANT phong Trong năm, đề tài tiến hành nghiên cứu đồng để xác định thông số kỹ thuật, điều kiện cần thiết để sản xuất, bảo quản ứng dụng chế phẩm sản xuất 4) Xác định nồng độ gây nhiễm vữut cho sâu non để tạo sinh khối lớn virut: Đối với loài sâu nêu trên, nồng độ gây nhiễm virut thích hợp ban đầu 2-4.10” - 2-4.10” PIB/ml Trong thí nghiệm với sâu xanh, nồng độ gây nhiễm cho sinh khối virut cao 2,16.10” PIB/ml nhiệt độ trung bình 28-29°c độ ẩm tương đối 75-85% (xem bảng 10) , Với sâu khoang 3,5.10’ PIB/ml Với sâu keo da láng 3,2.10” PIB/mI Qua kiểm tra thấy nồng độ xác định, sâu không aS chết sớm trọng lượng sâu chết bệnh chưa đạt tới mức tối đa ty lệ vào nhộng thấp, khơng ảnh hưởng đến khối lượng sâu,chết bệnh, đó.bao sinh khối virut cho lớn b) Xác định tuổi sâu khí gây nhiễm vữut để đạt khỏi lượng chả luong cao: Qua thí nghiệm kiểm tra thực tế sản xuất nhiều hệ chúng tơi thấy lồi sâu gây nhiễm virut cuối tuổi đầu tuổi cho kết cao khối lượng chất lượng(xem bảng 1Ì a,b) ©) Ảnh hưởng nhiệt độ phịng đến q trình tạo khối virut: Nhiệt độ phịng thí nghiệm nơi sản xuất ảnh hưởng lớn đến trình tạo sinh khối virut Qua năm theo dõi cho thấy nhiệt độ 28-30c ẩm độ trung bình 80%, thời gian sâu chết bệnh ngắn (9,5 - 10,1 ngày) cho sinh khối virut cao (xem bảng 12) d) Ảnh hưởng phương pháp bảo quân đến chất lượng chế phẩm: Kết cho thấy chế phẩm giữ điều kiện nhiệt độ thấp 5-l2”c tháng hiệu lực làm chết sâu 85%, điều kiện tự nhiên tháng - 69,7- 76,3% (xem bảng 13) đ) Ảnh hưởng chat Phu gia chống tỉa cực tím, gây loang bám dính: Qua nghiên cứu, thử nghiệm dùng đường đỏ, mực tàu đầu đậu nành nguyên vật liệu sẵn có nước ta để làm chất phụ gia chế thuốc Vì phịng thí nghiệm thiếu thiết bị kiểm tra xác, nên chúng tơi tiến hành thí nghiệm thực tế đồng ruộng để so sánh tác động dịch thé tho + glycerine địch thể pha chế với chất phụ gia khác Các thử nghiệm tiến hành đồng tỉnh Sông Bé Kết thể bảng 14 Tóm lại, năm qua thừa hương kết trước đây, đề tài mở rộng nghiên cứu nhiều mật có kết để tạo cơng nghệ sản xuất chế phẩm virus trừ sâu sở loại côn trùng nuôi MTTANT phịng Dưới mơ hình cơng nghệ sản xuất theo dây chuyền chế phẩm virut thẻ sống cửa côn trùng- in vivo (xem sơ đồ 3) Mô hình triển khai xưởng sinh học Thành phố Hồ Chí Minh 1.23 Tạo sử dụng chế phẩm virut phương pháp thủ công chỗ Song song với việc nghiền cứu tạo công nghệ sản xuất chế phâm cịn trùng ni MT†TANT nhà, đề tài tiến hành nghiên cứu tạo chế phẩm phương pháp thủ công chỗ theo hướng ”a (trang 9) Các đối tượng sâu hại nghiên cứu sâu đo xanh - Anomis flava rom thong - Dendrolimus punctatus Walk Đây Fabr va sau loài sâu hại nguy thường xuất với số lượng lớn, phát sinh thành dịch diện tích hiểm rộng, gây tổn thất nặng nề cho đay thông nhựa Dựa đặc điểm sinh học loài sâu sở kết nghiên cứu đạt được, xây dựng quy trink kỹ thuật sản xuất hướng dẫn cho nông dân công nhân lâm trường sản xuất sử dụng chế phẩm virus tự tạo để trừ có hiệu lồi sâu Đây phương pháp rẻ tiền, dễ làm phổ cập tới người lao động "chế tạo chỗ - sử dụng chỗ” Phương pháp thực với lồi sâu ăn tập trung, có mật độ: cao điều kiện thu thập dễ dàng, hoàn toàn phụ thuộc vào biến động số lượng quân thể sâu hại tự nhiên thời gian Kết cụ thể miêu tả báo cáo khoa học Dưới mơ hình tạo chế phẩm virut trừ sâu thủ công (xem sơ đồ 4), triển khai Châu Giang- Hải Hưng lâm trường trồng thơng Thanh Hố (co su tham gia Trạm Bảo vệ rừng Thanh Hoa) 1.24 Kiếm tra chất lượng đánh giá sinh học chế phẩm tạo ra: virus a Trong phòng: Các chế phẩm tạo tiến hành kiểm tra để xác định thông số kỹ thuật chế phẩm virut trừ sâu, trước hết số lượng PIB (Polyhedral Inclusion Body) đơn vị mi (nếu dịch thể) gr (dạng bột) Song song, xác dinh LCs, (Lethal concentrat ion) cla m6i ché phẩm pha phát triển sâu kiểm tra Các kết kiểm tra phòng cho thấy tác động chế phẩm virus tạo đạt hiệu tốt, sâu xanh - 63 3, - 76,36% ( tuổi 3-5), 89,9 - 98,2 % (tuổi ] -2), sau r6m thong-61,4 - 72,7% (ở tuổi 3-4), tuổi I- đạt 90,6-97,8%; sau xanh - 76-92% (tuổi 3-4) b Ngoài đồng: Tuy theo cay mia vu, loai sau hién dién trén déng ruộng, vác thử nghiệm cho thấy chế phẩm virut có khả nang lam giảm số *ượng quần thể sâu hại trén dong tir 53,2-66,1% (đối với sâu xanh); 74,62- 81.77 (sâu khoang); 52,2- 83,3 % (sâu róm thơng); 59.4 - 68,7 % (sâu đo xanh), 52,43- 87% (sâu keo da láng) Qua nhiều lần thử nghiệm cho thấy tác động chế phẩm virut điều kiện sinh thái phía Nam mạnh phía Bắc nước ta Như sâu keo da láng, Hà Nội sau ngày tỷ lệ tử vong đạt 32,43 - 87%, thi Ca Chi, Thanh Ho Chi Minh với nồng độ PIB mức độ tử vong đạt 81,34-95,5% Thời gian sâu ủ bệnh chết nhanh (Chi tiết kết xin xem bảng số liệu báo cáo khoa học kèm theo) Trên sở kết kiểm tra hiệu lực chế phẩm tạo phịng ngồi đồng, tham khảo thêm tài liệu nước ngoài, đề tài xây dựng “Phương phán thống kiếm tra chất lượng đánh giá sinh học chế phẩm virut tạo ra” 17 II NGHIÊN CỨU CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT THUỐC TRỪ SÂU BẰNG NẤM METARRHIZIUM VÀ BEAUVERIA TRỪ MỘT SỐ SÂU HẠI CÂY TRỒNG ĐỂ ỨNG DỤNG PHÒNG Trong giai đoạn từ năm 1991 - 1995, nhánh đề tài tiến hành nghiên cứu tìm hiểu sốÏlồi nấm trùng nước ta, chủ yếu loài Metarrhizium Beauveria, thu thập chọn lọc chủng phân bố loài sâu hại trồng, xác định hoạt tính khả phát triển chúng môi trường với nguyên vật liệu, hố chất sẵn có nước ta, tạo sinh khối lớn chế thuốc thử nghiệm phòng trừ số sâu hại ướt dây kết qúa nghiên cứu đạt duoc nam nam qua: 2.1 Thu thập chọn lọc chủng nấm sâu hại: Từ năm 1992 - 1995, qua thu thập nguồn nấm côn trùng trồng khác nhau, phân lập chủng nấm Metarhizium anisoplideSork (Ma), | chung Metarrhizium (Bb) flavoviridae {MP chủng Beauveria bassiana từ lồi sâu hại lúa ngơ đay, bơng rau (xem bảng 15) Sơ qua bảng cho chúng tơi có nhận xét rần nước ta nguồn nấm côn trùng tự nhiên phong phú việc nghiên cứu vơng nghệ sản xuất hàng loạt lồi nấm góp phần hạn chế số lượng quần thể sâu hai các-điều kiện sinh thái ấm nước ta cần thiết 2.2 Tuyển chọn chủng có hoạt tính diệt sâu cao: Qua nghiên cứu tìm hiểu khả phát triển, sinh bào tử hoạt tính côn trùng từ chủng nấm thu thập nhánh đề tài tiến hành chọn lọc, xếp loại để giúp cho việc nghiên cứu công nghệ sản xuất thử nghiệm thuận lợi sau 2.3 Nghiên cứu công nghệ sản xuất chế phẩm: Sau tuyển chọn xếp loại theo hoạt tính chủng nấm, nhánh đề tài đưa sơ đồ tối ưu để sản xuất sinh khối nấm điều kiện phịng thí nghiệm có Kết qủa nghiên cứu tạo sinh khối nấm nấm Metarr hizium Beauveria trình bảy bảng I6 Qua số liệu cho thấy với môi trường thực phân lập, nhân giống tạo sinh khối chủng nấm cho số lượng bào tử cao Trên sở kết qủa chọn mơi trường tối ưu để I8 | | tiến hành sản xuất thử (xem tập báo cáo khoa học nhánh đề tài này, trang 28 - 33) 2.4 Nghiên cứu thử nghiệm số đối tượng sâu hại: Rầy nâu hại lúa, sâu đo xanh hại đay cách, cào cào châu chấu phía Nam : 241 Rầy nâu hại lúa: *a Thử nghiệm phòng: Xác định ngưỡng nồng độ bào tử gây chết nấm Metarrhizium anisopliae rầy nâu tuổi Qua thử nghiệm cho thấy từ ngưỡng 200 triệu bào tử trở lên có hiệu diệt rây nâu tuổi 3, ngưỡng 500 triệu bao ti / mi hiéu qua diét ray nau dat 78,5%, sau thi nghiệm nấm mọc lại thể ray dat tới 59,3% Ngưỡng sau (xem bang 17) 500 triệu bào tử / ml chọn để tiếp tục thử nghiệm b Thu nghiém dong ruộng: Theo báo cáo nhánh đề tài xác nhận địa phương thử nghiệm chế phẩm nấm côn trùng chế phẩm sản xuất có tác động hạn chế số lượng quần thể sâu hại Như ray nau NHaparvata lugens Stal lúa vụ Nam Hà, sau phun chiêm xuân 1O ngày 1993 - 1994 HTX rầy bị bệnh Metarrhizium anisopliae) va 65,2 % (với nấm nấm Trác Văn, Duy Tiên chết tới 68,1% Beauverla bassiana) Nấm (với nấm kéo dài tác động hạn chế số lượng rầy nâu ngày sau Qua điều tra cịn cho thấy chế phẩm chưa có ảnh hưởng đến lồi trùng ký sinh ăn thịt bọ xít mù xanh nhện Lycosa- bang 18-1) Đối với sâu đo xanh - Anomis flava Fabr hat day cach HTX Liên Khe, Châu Giang, Hải Hưng, kết thử nghiệm hai vụ day cua nim 1992 va 1993 déu cho hiéu luc diét sau cao (xem bang 18-2) sâu chết cao vào 712 Năm 1992, ndém Metarrihizium sau ngay, hiéu qua dat 78%, thi nghiém nam sau sau LŨ ngày đạt 76,92% Nấm Beauveria bassiana cho hiệu sinh học tương tự Đặc điểm bật phun thuốc Ma Bb vào mật độ sâu đo xanh cao lúc điều kiện ôn, ẩm độ thuận lợi cho nấm lây lan nhanh làm cho số lượng quần thể sâu hại bị bệnh cao Ở thử nghiệm phòng trừ cào cào ngơ, mía chế phẩm Mf Bb phía nam tỉnh Bà Rịa - Vũng Tàu Đồng Nai cho thấy tác động 19 nấm MỸ hạn chế rõ số lượng quần thể cào cào nơi đó, (xem bảng 18-3) Như năm 1994 xã Bàu Lâm, huyện Xuân Mộc - Bà Rịa - Vũng Tàu sau phun 20 ngày trở lượng mưa kéo dài, độ ẩm cao làm tăng hiệu lực chế phẩm nấm hiệu diệt sâu kéo dài giai đoạn trưởng thành cào cào Sang năm 1995, điều kiện thời tiết mưa muộn lượng mưa nên hạn chế lây lan nấm Đồng Nai, Bà Rịa - Vũng Tàu phun chế phẩm chậm (do cào cào phát sinh chậm hơn), sau phun có mưa, sau 28 ngày cào cào bị bệnh lên tới 67,82% , II NGHIÊN CỨU XẠ KHUẨN GÂY BỆNH CÂY TRỒNG + SINH CHẤT KHÁNG CHỐNG „ SINH (CKSYNAM Nhánh đề tài quan thực hiện: Viện Công nghệ sinh học thuộc Trung tam KHTN va CNQG Trung tâm nghiên cứu vi sinh vật ứng dụng thuộc Trường Đại học tổng hợp Hà Nội Thời gian thực : [99] - 1993, Đướt dây kc† nghiên cứu : 3.1 Phân lập tuyển chọn xạ khuẩn: 3.L1 Phân lập xạ khuẩn hoạt tính kháng sinh chúng: Từ hàng ngàn mẫu đất thuộc địa bàn khác nhau, nhánh đề tài phân lập khiết 2402 chủng xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces, có 1358 chung có hoạt tính kháng sinh Tỷ lệ chủng có hoạt tính chiếm 48.1336,53%, có 20% có khả chống nấm( bảng L9) Kết nghiên cứu tính đối kháng 1782 chủng xạ khuẩn phân lập cho thấy : 34.8% ức chế vi khuẩn Gram dương(+), I,9%- Gram âm (-), 7,5% úc chế nấm men 46,2% ức chế nấm mốc 3.1.2 Tuyển chọn chủng xạ khuẩn sinh chất kháng sinh (KCS) chống nấm mốc gây bệnh khô vần, bệnh đạo ôn lúa thối có rễ con: Từ chủng xạ khuẩn có hoạt tính kháng sinh, nhánh đề tài chọn số chủng có khả chống nấm gây bệnh khô van- Rhizoctonia solani, thối cỏ rễ-Fusarium oxysporum bệnh đạo ôn hại lúa-Piricularia oryzae Đó chủng: 5820, TH, 8P, TH, I34P, 18 THTN 23 TH, 47C Chúng 5820 có hoạt phổ rộng Chúng TH4 47C có khả chống loài nấm kế gây bệnh nguy hiểm phổ biến trồng nông, lâm nghiệp, đặc biệt chống bệnh đạo ôn lúa Chẳng có khả chịu nhiệt ( nhiệt độ sinh trưởng f max - 55” C), sinh trưởng tốt quanh năm vùng đất nhiệt đới Chung 18 ua man, có hoạt tính chống bệnh đạo ơn Hai chủng TH4 47C I8 có nhiều thuận lợi sinh học việc tạo chế phẩm sinh học chống bệnh trồng (xem bang 20.21) 3.2 Nghiên cứu khả sinh tổng hợp chất kháng sinh chủng chọn lọc: ¿# Ching Streptomyces 5820: Môi trường lên men thích hợp có glucoza, maltoza, bột đậu tương (NH,);S0, ihe h ị NaCl va CaCQ; Nhiệt độ lên men thích hợp: 28-30°C pH: Nồng độ oxy hồ tan Tuổi giống : 6,1 - 6,4 mg/líVphút : 24-36 giờ, lượng giống: 5~-k0% Chất kháng sinh đạt cực đại 96-120 lên men dat 1050-1120 đv/ml Kết tách chiết, tỉnh chế số tính chất hố lý kháng sinh chống nấm chủng 5820 nhánh đề tài trình bày báo cáo (trang 26-32) i Chung TH, 47C: q Mơi trường lên men thích hợp có glucoza,tinh bột tan lactoza, bột đậu tương, NaC] CaC0; Nhiệt độ lên men thích hợp: 35-37°C ị pH=7 Nồng độ o xy hoà tan Tuổi giống : 6,6 mg/lit/phut : 24-36 giờ, lượng giống : 5-10% Chất kháng sinh cực đại 120 - 144 lên men đạt 920-925 dv/ml Phần lớn chất kháng sin hŒrên 90%) nằm sinh khối thuận lợi cho việc tách chiết, thu hồi tạo chế phẩm Kết lên men tách chiết, tình chế chất kháng sinh tính chất hố lý tính chất sinh học chất kháng sinh chủng THỊ, 47C trình bày báo cáo khoa học nhánh đề tài (trang 33-38 ) Trên sở kết xây dựng quy trình thích hợp để tách chiết tính chế chất kháng sinh 3.3 Tìm hiểu khả ứng dụng xạ khuẩn : Các kết qủa nghiên cứu ảnh hưởng chất kháng sinh chứng Streptomyces 5820 va TH, 47C dén độ nẩy mầm hạt giống, sinh trưởng phát triển cây, tác động diệt nấm gây bệnh thơng non nhà kính, bệnh đạo ôn hại lúa thối rễ cà chua mô tả báo cáo (40-46) cho thấy khả ứng dụng trongtương lai xạ khuẩn phân lập, tuyển chọn phịng trừ bệnh hại trơng nước ta Chất kháng sinh chủng nơng thích khả nẩy mầm hạt giống sinh bảng 22) Sử dụng dịch nuôi chủng 5820 để Fusarium oxysporum lam ty lé mde bénh cia độ thích hợp tác động kích trưởng phát triển (xem xử lý hạt thơng bị nhiễm giống cịn 23,3% so vớt.50% đối chứng (xem bảng 23) Nếu xử lý đất có nhiễm Fusa rium oxysporum trudc gieo làm giảm đáng kể tỷ lệ mắc bệnh thối rẻ (Xèm bảng 24) Chất kháng sinh 5820 có khả hạn chế thối cỏ rễ cà chua (xem bảng 25) 3.4 Nghiên cứu thu nhân bào tử sản xuất chế phẩm bào tử: Song song với việc nghiên cứu tách chiết tỉnh chế kháng sinh, nhánh đề tài tiến hành nghiên cứu thu nhận bào tử sản xuất chế phẩm bào tử đề thử nghiệm trừ bệnh trồng Trong điều kiện nhiệt độ 28-30°C, độ ẩm 50%, môi trường nuôi cấy đơn giản: cám trấu (1:1) môi trường gạo hấp, sau 7-10 ngày nuôi, cho số lượng bào tử tới 10'2g/, Với môi trường sản xuất thử 60 kg chế phẩm bào tử (chuyển cho Viện Bảo vệ thực vật Hà Nội) để thử nghiệm điều kiện đồng ruộng Qua thử nghiệm cho thấy chế phẩm bào tử có khả hạn chế bệnh khô vần rõ rệt so với đối chứng Song, hiệu lực hạn chế bệnh đạt 60-70% mức Viladimicin 22 IV NGHIÊN CỨU NẤM CÓ ÍCH TRICHODERMA Nhánh đề tài Bộ môn Bệnh Viện bảo vệ thực vật thực thời gian 1991-1993, sau phải ngừng lại thiếu kinh phí Tuy nhiên thời gian ngắn đạt kết tốt để định hướng cho phát triển đề tài sau 4.1 Thu thập, phân lập nguồn nấm Từ mẫu đất tàn dư trồng phân lập thu thập nguồn nấm Trichoderma Các chủng nấm Trichoderma phân bố rộng đất trơng màu có mặt tàn dư trồng điều kiện tự nhiên (xem bang 26) Môi trường phân lập tốt cho phát triển nấm xác định môi trường Tra-pech 4.2 Tuyển chọn chủng Trichoderma có tính đối kháng cao: Qua nghiên cứu bước đầu rút nguồn nấm Trichoderma có khả phát triển nhanh khống chế mạnh phát triển năm bệnh hại trông Năm ngày sau cấy nấm Trichoderma ức chế chùm lên nam gay bệnh trông làm cho chúng phát triển Qua nuôi cấy đánh giá khả đối kháng cho thấy nấm Trichodermä harzianum có tác động mạnh có tốc độ phát triển nhanh chủng năm chọn tuyên: Trichoderma harzianum Trichoderma trén cay ngô Trichoderma trén cay Ita (xem bang 27) 4.3 Nghiên cứu môi trường để sản xuất sinh khối lớn Kết nghiên cứu cho thấy sử dụng nguôn nguyên liệu chất thải ngũ vốc chất thải công nghiệp chế biến đường, chất thai cong nghiệp thực phẩm rượu, bia để sản xuất sinh khối nấm Trichoderma, mơi trường :ừ bã mía, bã đậu phụ, lõi ngơ, cám gạo, thóc thử nghiệm cho số lượng bào tử lớn (bảng 28) Bã đậu phụ môi trường cho nấm = Trichoderma phát triển tốt nhất, đạt 7,5 x0 ? bào tử/g khó bảo quản Mơi trường có t2 ‘a triển vọng để sản xuất sinh khối lớn thuận lợi cám gạo thóc Hai mơi hũ VĂN: os at , > Z BA ~ ` trường cho số lượng bào tử tương đối cao: 3,5xI0” 3,2x10” bào tử/g 4.4 Kha nang ứng dụng nấm Trichoderma để phòng trừ số bệnh nấm hại trồng 4.4.1 Kiểm tra phòng Qua kết phòng cho thấy nấm Trichoderma có khả khống chế số bệnh hại nguy hiểm trông như: Rhizoctonia Húa, ngô: Fusarium va Aspergillus trén lac Tác động nấm Trichoderma bệnh khô văn lúa, ngỏ hạn chế -_ khả hình thành phát triển hạch nấm ngăn chăn có hiệu lây lan bệnh (Xem bảng 29) Hiện ức chế hình thành phát triển hạch nấm khơ van lúa: 96%, khô văn ngô: 98% Đối với Fusarium khả ức chế nấm: 56, 1-76,4% (xem bảng 30-a) Cịn nấm Aspergillus hiệu ức chế đạt cao: Chủng Trichoderma lia 73,5% Trichoderma ngò - 75% Trichoderma harzinanum- 79%(xem bảng 30-b) 4.4.2 Ung dung chế phẩm nấm Trichoderma đồng ruộng: # Phịng trừ bệnh khó vần hại ngỏ HTX Song Phượng -Đan phượng - Hà Tây diện tích 50 HTX Phước Thạch- Tiền giang diện tích 20 Lượng chế phẩm : 48,6 kg Bón với gieo hạt đặt bầu ngô, cho hiệu ức chế nấm khô văn bảo đảm suất + Phòng trừ bệnh héo lạc năm Aspergillus gây : Bón chế phẩm vào đất trước gieo hạt với liều lượng: 100g/m”, 200g/m” 300g/m” Qua đợt điều tra cho thấy công thức 100g/m” tỷ lệ bệnh xuất lhiện gây héo thấp so với đối chứng: liều lượng cao 200- 300g/m” khong thay có triệu chứng bệnh, củ lạc bị thối không đáng kể, Năng suất lạc lô xử lý chế phẩm Trichuderma cao lô đối chứng (xem bảng 31) V NGHIÊN CỨU GIỐNG SẢN XUẤT Bt VÀ MƠI TRƯỜNG LÊN MEN THÍCH HỢP Cũng nhánh nghiên cứu xạ khuẩn, nấm Trichoderma, nhánh để tài phải dừng lại thiếu kinh phí Tuy nhiên, s au năm thực nghiên cứu thu thập 30 chủng BT có khả nang diệt trừ nhiều lồi sâu hại mang tính dặc hiệu khác nhau: sử dụng số tác nhân lý hoá để ổn định nâng cao hoạt tính chúng: nghiên cứu sử dụng số nguyên liệu có nước để làm môi trường sản xuất chế phẩm đậu tương, khô lạc, bột cá, ngô v.v ; nghiên cứu qui trình cơng nghệ lên men bình lên men cỡ 2,5,10 lit để xác định thông số kỹ thuật ảnh hưởng độ pH, nhu cầu C02, thành phần chất môi trường, ảnh hưởng dạng chế phẩm đến thời gian bảo quản sử dụng thực tế đồng ruộng Nhánh đề tài có kết việc tạo chế phẩm hai dạng: dịch thể bột khơ, rong có kết nghiên cứu chất phụ gia bám dính, gây loang ưốn định Các chế phẩm tạo thử nghiệm đồng, phịng trừ lồi sâu tơ sâu xanh bướm trắng hại họ HTX Mai dịch Từ Liêm Hà Nội : Hiệu thử nghiệm đánh giá so sánh với thuốc trừ sâu sinh học Liên xô (cũ): Bitoxibacilin Lepidocid Hoạt lực mẫu chế thử không mẫu thuốc sinh học kế Những số liệu thể báo cáo khoa học Viện di truyền nơng nghiệp( Phịng di truyền cơng nghệ vi sinh) B NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CÁC KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI KC-O8-14: Về chế phẩm virut trừ sâu Nghiên cứu tạo công nghệ sản xuất chế phẩm virus trừ sâu bao gồm cung đoạn đối lập nhau, song song tiến hành lúc đối tượng: côn trùng (macro) virut (micro) với phương pháp hoàn toàn khác Tuy t1 nhánh đề tài, hình thành nhóm nghiên cứu cách ly, thể phức tạp trình nghiên cứu Qua kết năm cho thấy tính đồng chặt chẽ nhánh nghiên cứu Để đạt mục tiêu cuối có cơng nghệ sản xuất chế phẩm, trước hết phải nghiên cứu dặc tính sinh học, sinh thái học sâu yếu tố thúc đẩy hạn chế số lượng quần thể, sở xây dựng mơ hình thức ăn nhân tạo, điều kiện phù hợp với dạng côn trùng phòng chọn tạo ra, nghiên cứu tạo mơ hình cơng cụ thích hợp cho sản xuất hàng loạt điều kiện Việt Nam Với kết nghiên cứu, nhánh đề tài xây dựng qui trình cơng nghệ từ tạo giống, đến chế biến MTTANT sản xuất hàng loạt để có sinh khối lớn côn trùng cung cấp cho nuôi cấy virut Mặt khác, nhánh đề tài thu thập phân lập nguồn virut sâu hại, xác định hoạt tính chúng thể sâu sống, nghiên cứu thông số kỹ thuật để tạo sinh khối lớn virut - nguồn tạo chế phẩm virut trừ sâu Với kết nghiên cứu nhánh đề tài di tới mục tiêu cuối xây dựng qui trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm, thử nghiệm triển khai sử dụng phòng trừ lồi sâu hại đồng ruộng Những thành cơng chun gia nước ngồi (Pháp, Mỹ, Đức, Anh, Ostrâylia, Trung quốc ), đến thăm cơng trình nghiên cứu nơi sản xuất hàng loạt, đánh giá cao Hầu tất phươï pháp tiến hành, mơ hình, cơng cụ, công nghệ sản xuất: hàng loạt sang tạo Việt Nam Chính chun gia Nga Mơnasturskii A Trung tâm Nhiệt đới Việt Xô, người _ cộng tác nghiên cứu phịng thí nghiệm ni sâu phải nói: “ Xhơng thể sản xuất trừng hàng loạt (Việt Nam) được” Nhưng thực tế, đề tài thể kết nghiên cứu thực tế Việt Nam, hình thành xưởng sản xuất với sản lượng trùng lớn đến trì 62 hệ nhà với giống trùng có sức sống tốt, trọng lượng thể khả tái sinh sản cao dap ứng yêu cầu sản xuất chế phẩm Những sáng tạo nuôi sâu, năm 1993 nhà nước cấp độc quyền sáng chế, Về công nghệ tạo chế phẩm virut cấp đoạt giải Hội th sáng tạo toàn quốc 1991 26 Bên cạnh thành cơng sáng tạo nghiên cứu công nghệ khâu (côn trùng virut) cịn tồn vấn đề cần có giải pháp kỹ thuật khác phục để nâng cao chất lượng chế phẩm hạ giá thành mà người sản xuất trồng chấp nhận Như vậy, khâu công nghệ sử dụng đồng ruộng cần nghiên cứu sâu Đó vấn đề sau đây: ~ Phải tiến hành sâu rộng việc thu nhập nguồn gien virut vùng sinh thái khác nhau, tuyến chọn nguồn có độc tính cao, khảo sát tỉnh độc điều kiện trì nguồn phịng để tạo chế phẩm có chất lượng cao - Phải tiêu chuẩn hoá chế phẩm, bao gồm lượng PIB/g PIB/ml, chất phụ gia thích hợp chống tia cực tím mật trời, đảm bảo độ gây loang, độ bám dính, tính ổn định bảo quản sử dụng đồng ruộng - Điều kiện sinh thái nước ta phức tạp, mưa nắng thất thường, cơng nghệ sử dụng chế phẩm phải nghiên cứu sâu công cụ phun rải đảm bảo phân bố đồng hại tròng tồn lưu chế phẩm đồng ruộng - Phải nghiên cứu hồn thiện cơng đoạn cơng nghệ thích hợp ñữa để nâng cao chất lượng chế phẩm, tiết kiệm lượng nhân vật lực để hạ giá thành sản xuất thương mại hố sản phẩm có hiệu thực Trên vấn đề cần lưu ý tiếp tục nghiên cưứ thời gian tới công nghệ sản xuất sử dụng chế phẩm virus trừ sâu hại.cây trồng nông, lâm nghiệp Về chế phẩm nấm côn trùng: Trong trình tiến hành đề tài giai đoạn nghiên cứu phân lập nguồn nấm 1991-1995, nhánh đề tài BĐeauveria ngưồn Metarrhizium, nghiên cứu sản xuất chế phẩm bào tử hai loài nấm môi trường nguyên vật liệu sẵn có rẻ tiền nước ta, thử ughiệm có kết chế phẩm bảo tử trừ số loài sâu hại thực tế đồng ruộng đạt kết quả, ray nâu hại lúa, sâu đo xanh hại đay đặc biệt cào cào ngơ, mía tỉnh phía Nam 27 Việc nghiên cứu sử dụng nấm Beauveria trước có số quan khoa học trường đại học tiến hành (Trường đại học Lâm nghiệp, Viên Lâm nghiệp, Trung tâm Bảo vệ rừng Thanh Hố) để trừ sâu rồm thơng, kết chưa ổn định Nguyên nhân chủ yếu độ ẩm phối, chưa phát huy tác dụng nấm tự nhiên Trong năm qua,việc nghiên cứu tạo chế phẩm bào tử có thành công, lần sử dụng nấm Beauveria Metarrhizium để trừ sâu nông nghiệp bước đầu có hiệu Các dẫn liệu cho thấy rõ tác dụng nấm điều kiện đồng lúa nước nhiệt đới với ray nau Cả lồi có khả hạn chế số lượng quần thể rầy nâu ruộng lúa Đối với cào cào ngơ, mía trồng cạn - khả phát triển nấm tự nhiên tác động hạn chế số lượng quần thể loài sâu (như cào cào) chưa ổn định Hiệu kỹ thuật năm 1994 va [995 thé khác Nguyên nhân chủ yếu độ ẩm không khí phối Về mặt cơng nghệ sản xuất mức độ thủ cơng, sản xuất lượng để thử nghiệm hiệu quả, chưa có nhiều sở khoa học thông số kỹ thuật để sản xuất số lượng lớn có tính cơng nghiệp đáp ứng nhu cầu diện rộng tròng Để phát huy tính ưu việt hai lồi nấm trùng điều kiện nống ẩm nước ta, nghiên cứu cần mở rộng sâu vào mặt: - Thu thập tuyển chọn ngưồn nấm có hoat tính sinh học cao, có khả nang han ché mạnh số lượng quần thể sâu hại điều kiện vùng sinh thái khác - Phải sâu vào mặt nghiên cứu dặc điểm sinh học vật lý nấm, làm sở cho công nghệ lên men tạo sinh khối lớn, công nghệ sử dụng chế phẩm đồng ruộng - Phải có thơng số kỹ thuật xác để xây dựng tiêu chuẩn, nâng cao chất lượng chế phẩm phòng trừ sâu hại trồng nước ta Về xa khuẩn sinh chất kháng sinh Streptomyces: Trong thời gian tiến hành nghiên cứu, nhánh đề tài thu kết qua sau đây: - Đã nghiên cứu tính đối kháng chủng xạ khuẩn phân lập từ mẫu đất Việt Nam Từ chọn chủng có khả đối kháng với nấm gây bệnh đạo ôn, khô văn thối cô rễ - Đã nghiên cứu đạc điểm sinh học phân loại đến lồi chủng xạ khuẩn có nhiều triển vọng ứng dụng đấu tranh sinh học - Đã nghiên cứu khả sinh tổng hợp chất kháng sinh chủng S.hygros-copicus 5820 Streptomyces sp TH, 47.Đã xác định điều kiện mỏi trường lên men thích hợp, qui trình tách chiết tỉnh chế chất kháng sinh tính chất hố lý sinh học chúng Lần nước ta, nhánh đề tài tạo sản phẩm chất kháng sinh chế phẩm bào tử để thử nghiệm phòng trừ số bệnh nguy hiểm trồng Về mặt bản, nhánh đề tài sâu với phương pháp chuẩn có sáng tạo điều kiện hạn chế kinh phí trang thiết bị thí nghiệm nước ta Về nấm đối kháng Trichoderma Cũng thiếu kinh phi nén nghiên cứu nấm đối kháng Trichoderma phải dừng lại Tuy thời gian kinh phí có hạn nhóm đề tài sae thu kết báo cáo phần - Đã phân lập nguồn nấm Trichoderma tuyển chọn lồi nấm có hoạt tính đối kháng cao lồi nấm nguy hiểm gây bệnh trồng: khơ văn lúa ngô, thối cỏ rễ héo rũ lạc - Đã nghiên cứu môi trường nhân tạo nguyên liệu sẵn có nước ta để tạo chế phẩm bào tử thử nghiệm phòng trừ bệnh nêu thực tế đồng ruộng Những kết nghiên cứu góp phần định hướng cho việc nghiên cứu tao chế phẩm sinh học sử dụng hệ thông tổng hợp (IPM) bảo vệ trồng thời gian tới Về tạo giống sản xuất Bt môi trường lên men thích hợp Những kết nghiên cứu đề tài góp phần định hướng việc mở rộng nghiên cứu tạo chế phẩm sinh học có hoạt tính cao, sử dụng có hệ thống tổng hợp bảo vệ trồng, dặc biệt vùng Mau Ch ăn tươi có sản phẩm C KET LUAN VA KIEN NGHI LUAN: Trong báo cáo khoa học nhánh đề tài rút kết b từ kết nghiên cứu thời gian qua Ở báo cáo này, chúng tơi xịn có số kết luận chung sau: ` - Các sản phẩm khoa học triển khai ứng dụng thực tiền sản xudt trịng trình bày tóm tất phần đầu báo cáo cho thấy đề tài KC - 08 - 14 giai đoạn 1991 - 1995 da bam sát mục tiêu nội dung tiến độ thời gian đề hợp đồng ký kết với Nhà nước - Đã nghiên cứu tạo công nghệ sản xuất sinh khối trùng MTTANT lồi sâu (sâu xanh, sâu khoang sâu keo da láng) công nghệ sản xuất chế phẩm virus trừ loại sâu - Đã xây dựng mơ hình với quy trình kỹ thuật.sản xuất thủ cơng chỗ chế phẩm virus trừ lồi sâu róm thơng sâu đo xanh hại đay cách - Đã nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật sản xuất chế phẩm bào tử loài nấm Beauveria Metarrhizium trừ rây nâu hại lúa, sâu đo xanh cào cào tỉnh phía Nam - Đã nghiên cứu quy trình cơng nghệ tách chiết, lọc chất kháng sinh sản xuất chế phẩm bào tử chủng xạ khuẩn Streptomyces 5820 va TH, 47 để phịng trừ bệnh đạo ơn hại lúa, bệnh khỏ văn lúa ngô bệnh thối cổ rễ thông - Đã nghiên cứu quy trình kỹ thuật sản xuất chế phẩm bào tử nấm đối kháng Trichoderma ứng dụng phịng trừ bệnh khơ văn lúa héo rũ lạc - Đã nghiên cứu tạo giống sản xuất BT công nghệ lên men môi ; trường thích hợp Việt nam Tất chế phẩm sinh (các học thuốc trừ sâu bệnh sinh học - biopesticide) tạo triển khai ứng dụng thử nghiệm thực tế Qo tạ) ¡ đồng ruộng nhiều vùng trồng nông lâm nghiệp nước ta, khẳng định vị trí chế phẩm phương pháp sinh học- sở hệ thống tổng hợp bảo vệ trồng (IPM), đặc biệt vùng trồng có quần thể sâu hai chống thuốc hoá học cần phải đảm bảo sạchc nông sản phẩm (như vùng sản xuất rau xanh, hoa ăn tươi hàng hoá xuất khẩu) Các kết nghiên cứu thể động sáng tạo đội ngũ cán khoa học việc khai thác sử dụng tiềm thiên nhiên gắn chặt công tác bảo vệ thực vật với bảo Vệ môi trường sống nước ta ‡ KIẾN NGHỊ : ` Đề tài KC 08-14 đề tài mang tính thời đại Nó gắn chặt cơng tác bảo vệ thực vật bảo vệ mơi trường sống góp phần bảo đảm suất sản lượng trồng nông, lâm nghiệp, chống ô nhiễm môi trường, tránh bẩn độc cho nông sản phẩm, bảo vệ sức khoẻ người, tăng cường chất lượng hàng hố nơng sản xuất nâng cao thành phần sinh vật có ích thiên nhiên Trên sở kết nghiên cứu đạt ứng dụng thực tế đồng ruộng rừng năm qua, với tiềm nãng sáng tạo đội ngũ cán khoa học nước ta nay, cốixin số kiến nghị với Nhà nước sau : Cho tiếp tục thực đề tài nam 1996 2000 để hoàn thiện cơng nghệ sản xuất có mở rộng việc ứng dụng thực tế điều i kiện sinh thái khác nước ta, thuốc virút trừ sâu keo da láng, sâu Ẵ , khoang, sâu róm thơng, sau đó, thuốc nấm Beauveria Metarrhizium trừ sâu, :-_ nấm có ích Trichoderma số xạ khuẩn trừ bệnh đạo ôn lúa, bệnh khô văn ; thối cổ rễ trồng đổ có qui trình tách chiết kháng sinh hoạc cơng nghệ sản xuất E ché phẩm bào tử Đầu tư kinh phí thích đáng năm tới để mở rộng nghiên cứu Ệ tạo công nghệ sản xuất sử dụng thuốc trừ sâu bệnh sinh học (biopesticide) È vùng trồng tập trung, đặc biệt Vùng rau ãn tươi, công : nghiệp xuất có giá trị vùng trồng bị lồi sâu hại liên kháng thuốc hố học, đáp ứng nhu cầu sản xuất đời sống, góp phần yi hình thành nơng nghiệp bền vững nước ta Nghị i cia Trung ương Đảng Cộng sản Việt Nam đề Bing 1: Thanh phan cic MTTANT nuôi số loài sảu ho Noctuidae - BG Lepidoptera (1991 - 1995) tit [+ Bã đâu phụ bia Đột đầu xanh | | | i TAgar-M pte [tr | + Lõi ngô + t+] 2MM* | Bột ngỏ Loat moi wudng thitc an | 2MM-CT | non agar SX | Agar-C +l+l+l Tén phan Giá dỗ xanh | Bột đầu tương Sita bor Kho dau cam Men BYK-Nga Men bia VN ty phan Men thức án gia súc PVN Tao Spirulina Đường kính : puF Ascorbic acid Poiv-B Tocopherol Dau dau nanh S&ptomvcin sulfate Con thuc pham Benzoic acid Sorbic acid Acetic acid + Formaline 40% + FLO loc i + + + “MTTANT : Nhà nước cặp bang dộc quyền sáng chế số 166 ngày 2/8/1995 - Được xem môi trường kiểu chuẩn cho sau 32 | Đảng : Các tiêu sinh học giống sau xanh chọn tạo phịng thí nghiệm 1992 - 1993, Cơng thức | Sâu sống chọn tạo T1-3(% ) ị T+-Ó (2) ị Trọng luợng Bướm bình song (%} | nhong (mg) Trứng thụ thường (%) tinh l bướm | ¡0.05 C7(lai | 45.08 ngược C6) | 6.97 C9dai =| 54.74 ngược CL) | 344 P ¡ Nhộng | Cl |3726= he 20) 727 C6 whe | 36.97 he 1) | Sâu sống 0,05 |91191203 90.87 3.47 93.59 3.01 9380 218 mm [77.35 ! 4.68 | 85,92 12.97 LÒ lở iQ | 279.25 | 299.25] 65.11 310.0 17.76 | 321.25) 6582 | 9138 | 3.16 |9118 [31025 |32150|73.12 LÍ ĐĨ p 18.02 | 13120 13250 |7277 mm Loos 1301 33 1731 Ì1632 10.05 Ì- ( quả) med | 65.27 | 850.0 lo01l4 | ysa25 | 72.73 | 1404.5 172434 - | 13910 : ị | | | Bảng : Đại lượng tư vong sâu xanh - Heliothis armigcra hệ 49.50 31,52 duoe nuoi trén MTTANT non_agar ( SX), 1994 Giai doan phat Thé he 49 triển sâu : Đại SL sau | Đại | lượng từ | sống lượng thuong | bình „ Sâu non T3 | Sau non T4 149 | „ Sâu non T5 M8 Sâu non tuổi6 147 Nhòng Nhong bình ¡ _ thường | Bướm bình thường | | Thế hẻ 5l Số lượng sâu sống (con) lã4 TRnnhọng Thé he 50 147 ¡40 110 104 *K |vongK |bình thường | | 00330 j ( con) 154 ¡0.0067 | | 0.0068 | f | | K | 0.0048 143] L 02412 H§ 0.0561 109 ˆ ¡0.3926 | 0.2179 | | 0.0536 0.3456 kK G50 80% cho sinh khối NPV cao sâu chết bệnh với thời gian ngắn 9,5 - 10,1 ngày) Điều giải thích tháng nóng thích hợp cho việc ni sâu sản xuất NPV d Anh hưởng chế dộ bảo quản đến chất lượng chế phẩm NPV Để chế phẩm NPV trở thành hàng hố chúng tơi tiến hành nghiên cứu chế độ bảo quản chế phẩm NPV : tủ lạnh, điều kiện phòng (ram, mát) Qua thí nghiệm thấy chế phẩm NPV giữ tủ lạnh tháng có hiệu lực làm chết sâu từ 85,33 - 94,66%, diéu kiện bình thường phịng thí nghiệm dịch thể NPV để tháng làm chết sâu từ 69,7 - 76,3% ˆ Song song với việc nhân nuôi hàng loạt sâu keo da láng, sâu xanh sâu khoang phòng thí nghiệm để tạo chế phẩm NPV chúng tơi cịn tiến hành nghiên cứu khả tạo chế phẩm NPV phương pháp thủ công sâu xanh (Anomis flava Fabr) sâu róm thơng (Dendrolimus punctatus Walk) Đây loại sâu thường phát thành dịch tự nhiên đay, thông với diện rộng với số lượng lớn Lợi dùng đặc điểm tiến hành nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật san xuất chế phẩm NPV hai đối tượng sâu hại phương pháp thủ công, thuận tiện, đễ làm phổ cập đến người nông dân Đây phương pháp rẻ tiên thực vài loài sâu ăn tập trung có mật độ cao điều kiện thu thập sâu dễ dàng Đây hướng thụ động, hoàn toàn phụ thuộc vào biến động số lượng sâu hai tự nhiên Kết qủa nghiên cứu cụ thể miêu tả kỹ báo cáo khoa học kèm theo FT có 7õ C Thí nghiệm ngồi đồng : Với mục đích xây dựng quy trình sử dụng chế phẩm NPV để trừ sâu hại thuộc cánh vảy (Lepidoptera) trồng nông, lâm nghiệp,chúng tơi tiến hành thí nghiệm thử hiệu lực trừ sâu NPV sâu keo da láng, sâu xanh, sâu khoang, sâu đo xanh, sâu róm thơng đồng ruộng Tuỷ điều kiện mùa vụ, tuỳ theo loại sâu, tuổi sâu thử nghiệm cho thấy chế phẩm NPV có hiệu lực trừ sân đồng ruộng từ 53,2 - 66,1% (đối với sâu xanh);52,43 - 87% (đối với sâu keo da láng); 74,62 - 81,77% (đối với sâu khoang); 55,2 - 83,3% (đối với sâu rớm thông) Các kết cụ thể minh hoạ báo cáo khoa học kèm theo D Kết triển khai sử dụng NPV san xuất : Từ 1991 - 1995 nhóm đề tài kết hợp với quan địa phương triển khai ứng dụng chế phẩm NPV để phịng trừ sâu hại bơng thuốc lá, đay, rau đậu đô, thông - Dùng NPV để trừ sâu xanh nông trường Tô Hiệu (Sơn 1a) khoảng 300 Sông Bé 200 ine - Dang NPV trừ sâu khoang rau Mai Dịch (Từ liêm),đậu đỗ Đông Anh (Hà nội) khoảng 50 - Tập huấn hướng dẫn sử dụng NPV trừ sâu keo da láng đỗ tương xuân, Xuân - Hè Xuân canh, Ngọc (Đông anh) 20 - Tập huấn, hướng dẫn nông dân sản xuất sử dụng NPV sâu đo xanh phương pháp thủ công để trừ đối tượng hại đay Châu Giang (Hải Hưng), Thọ An (Đan Phượng, Hà Tay) năm 100 - Cùng trạm bảo vệ rừng Thanh hoá tiến hành hướng dẫn lâm trường sản xuất sur dung NPV sau rom thong bang phương pháp thủ công dạng dịch thể dạng bột để trừ đối tượng hại diện tích 500 thơng lam trường Hà Trung, Tĩnh Gia, Thạch Thành, khu đổi thông Hàm Rồng, Sảm Sơn (Thanh Hoá) E Sản phẩm khoa học : Qua năm thực đề tài nghiên cứu NPV (thuộc KC - 08 - 14) nhóm để tài có báo cáo khoa học trình bày kết nghiên cứu nội dung tham gia đề tài Các báo cáo thông qua đạt loại Hội nghị khoa học hàng năm Viện Bảo vệ thực vật Có báo cáo (về NPV sâu róm thơng kết nghiên cứu tạo cơng nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng để tạo chế phẩm vi rút từ sâu hại) Hội đồng khoa học Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm năm 1993, 1994 đánh giá đạt loại cho phép triển khai rộng phục vụ công tác bảo vệ thực vật trồng nơng, lâm nghiệp - Có quy trình hướng dẫn nơng dân sản xuất sử dụng NPV phương pháp thủ công để trừ sâu đo xanh, sâu rom thong IV KET LUAN VA DE NGHI: A Kết luận : Đã nghiên cứu số đặc tính sinh học sinh thái sâu xanh sâu keo da láng, sâu đo xanh, sâu róm thông, sâu khoang phục vụ cho việc nhân, nuôi hàng loạt đối tượng hại (trừ sâu đo xanh, sâu róm thơng) phịng trừ chúng ~ Cải tiến, hồn thiện mơi trường thức ãn nhân tạo để nuôi hàng loạt côn trùng điều kiện Việt nam Có quy trình kỹ thuật cơng nghệ ni trùng với số lượng lớn phịng thí nghiệm , Đã phân lập dược loại virút gây bệnh thối nhữn cho sâu xanh, sâu keo đa lắng, sâu khoang sâu xanh sau rém thong Có thơng số kỹ thuật việc tạo chế phẩm NPV loại sâu (nông độ nhiễm virút ban đầu, tuổi sâu nhiễm NPV, chế độ bảo quan NPV, anh hưởng ôn, ẩm độ đến trình tạo chế phẩm NPV ) Xác lập quy trình tạo sử dụng chế phẩm NPV sâu đo xanh sâu róm thơng phương pháp thủ cơng áp dụng có kết trừ đối tượng sâu hại 7 Có kết bước đầu việc sử dụng NPV để trừ đối tượng u hại quy mơ mở rộng ngồi đồng ruộng, sâu chống thuốc hoá học sâu xanh (Heliothis armigera Hữbn.) Đã tính giá thành vài chế phẩm NPV (sâu xanh sâu róm thơng) làm sở cho việc đánh giá hiệu kinh tế sử dụng NPV trừ sâu hại Cần đầu tư thích dáng sở vật chất, trang thiết bị nhằm ổn định việc sản xuất hàng loạt côn trùng tạo chế phẩm NPV với chất lượng cao để phục vụ công tác Bảo vệ thực vật nông, lâm nghiệp Nhà nước cần trợ giá cho sở nghiên cứu khoa học, sở sản xuất chế phẩm sử dụng chế phẩm với biện pháp sinh học khác với mục đích bảo vệ sức khoe người, động vật giữ gìn môi sinh./ [ r | KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU TẠO CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT HÀNG LOẠT CÔN TRUNG DE TAO CHE PHAM VIRUT TRU SAU HAI Chủ nhiệm đề tài KC - 08-14 PGS - TS Truong Thanh Gian va CTV* L DAT VẤN ĐỀ : Nghiên cứu tạo sử dụng chế phẩm sinh học trừ sâu nói chung, vùng trồng có lồi chống thuốc dùng thuốc hố học hiệu nghiệm nói riêng, cấp thiết Qua thực tiến sản xuất nhiều nam tren giới nước ta, chế phẩm sinh học có hiệu cao ổn định chế phẩm vi rút, Hiện nay, để tạo chế phẩm vi rút trừ sâu, tuỳ theo đối tượng sâu hại, người ta tiến hành theo hai hướng sau day : Sử dụng nguồn lớn trùng ngồi tự nhiên, gây dịch vi rút nhân tạo chỗ, thu thập sâu bệnh chế thuốc, thu thập sâu sống cấy vi rút cas phòng tạo chế phẩm Theo hướng này, dé làm rẻ tiền hơn, thực vài lồi sâu dn tập trung, có mật độ cao điều kiện thu thập sau dễ dàng Đây hướng thụ động, hoàn toàn phụ thuộc vào biến động số lượng sâu hại tự nhiên Nghiên cứu tạo công nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng, cấy vi rút gây bệnh cho chúng tạo sinh khối lớn vi rút phòng Theo hướng này, phức tạp tốn hơn, lại chủ động, nghiên cứu tạo công nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng Từ năm 1987 - 1988, Viện bảo vệ thực vat, Trung tam bong Nha Hố tiến hành nghiên cứu nuôi số loài sâu xanh - Heliothis armigera, sâu * PTS Trần Quang Tấn; PTS Nguyên Thiếng| Thạc sĩ Nguyễn Thị Diệp, KS Nguyễn Dau Toan; KS Trin Đình Phả: KS Đào Thị Huê;|KS Huỳnh Thị Huệ| KS Phạm Thị Hạnh; Phùng Thị Hoa; Phí Thị Hà: Mai Phương Dung Nguyễn Trung Dũng da láng - Spodoptera exigua, sâu khoang - Spodoptera litura môi trường ăn nhân tạo agar theo công thức phổ biến giới để chế thuốc "NPV" "thử nghiệm trừ loại Nhưng kết nghiên cứu chưa triển khai rộng được, Trung tâm Nha Hố để tài nuôi sâu xanh chế thuốc NPV Tiểu : ban trồng trọt - Bảo vệ thực vật Hội đồng khoa học Bộ nông nghiệp Công F nghiệp thực phẩm công nhận tiến kỹ thuật vùng sản xuất È Vải Từ cuối năm 1989 đến tháng 12/1991 Viện bảo vệ thực vật phối hợp với Trung tâm nhiệt đới Viẹt.Xo(Bo Quốc phòng)tiến hành nghiên cứu quy ' mô lớn với mục tiêu tạo chế phẩm vi rút, đặc biệt sâu xanh, có _ tham gia hai chuyên gia Nga Monasturski A Vưbomov R.(chủ nhiệm đề tài phối hợp PGS-TS Trương Thanh Giản - Viện bảo vệ thực vật) Các kết nghiên cứu phối hợp tạo sở tiếp tục nghiên cứu sản xuất côn trùng hàng loạt để chế thuốc vi rút trừ sâu hại sau Kiểm định lại công nghệ sản xuất côn trùng hàng loạt nhằm thực dự án sản xuất thử - thử nghiệm (P) chế phẩm vi rút trừ sâu xanh, Viện bảo vệ thực vật nhận thấy cần phải nghiên cứu hồn thiện cơng nghệ với nội dung chủ yếu sau : Phải tiến hành hồn thiện mơi trường thức ăn nhân tạo khơng agar thích hợp hơn, dễ chế biến, rẻ tiên không phụ thuộc vào nguyên vật liệu nước ngồi Phải tạo,chọn giống trùng phịng có sức sống tốt có khả tái sinh sản cao Phải xác định lại thông số kỹ thuật điều kiện gây nhiễm bệnh vi rút cho côn trùng sản xuất môi trường thức ăn nhân tạo (MTTANT) cải tiến để nâng cao hoạt tính vi rút chế phẩm tạo Có sản xuất lượng lớn chế phẩm vi rút có chất lượng trừ sâu hại Đó mục tiêu đề tài KC-08-14 thuộc chương trình Cơng nghệ sinh học quốc gia KC - 08 Thứ trưởng Nguyễn Thiện Luân làm chủ nhiệm chương trình Il VẬT LIỆU VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : Về nguồn sâu : Đã thu thập từ tháng 2/1990 Hoài Đức - Hà Tay, 8/1990 Nha Hố Ninh Thuận, 2/1992 Từ Liêm - Hà Nội 2 Về môi trường thức ãn nhân tạo (MTTANT) lấy môi trường agar tiêu : chuẩn môi trường không agar - 2M làm sở so sánh Về phương pháp nuôi sâu : theo phương pháp báo cáo năm 1991 tham khảo phương pháp ni sâu phịng thí nghiệm Tucson (Patana, 1984); dẫn phương pháp nuôi sâu xanh MTTANT MY agar Viện bảo vệ thực vạt (Liên xô cũ), 1986; Đồng thiết bị để nuôi hàng loạt sâu xanh (tạp chí BVTV - Liên xơ cũ, 10/1986); Cẩm nang nuôi sâu hàng loạt (Monasturski A., 1991) Về phương pháp chọn tạo giống trùng phịng vận dụng phương pháp lai loài (Emst Mayr, 1990), Ivanova, 1974; Petrov P, 1976, Ching chun Li, 1976, Gulaiev, 1977); dẫn phương pháp nghiên cứu biến dị di tryền lồi với chun hố thức ăn (VI, 1978); Hoạt tính nhịp điệu ngày đêm trùng họ Noctuidae - Lepidoptera (Cravelinco V, 1986) A Nguồn sâu xanh hoá nhà B Nguồn sâu xanh thu từ ngồi tự nhiên ni phòng hệ Sau lai A x B thu F1, tiếp tục cho lai ngược (Backcross) để khác phục tính khơng thụ tỉnh trứng tăng cường cho lai tính chất mong muốn q trình hố nhà MTTANT Ký hiệu công thức lai lai ngược : C1 Giống sâu xanh ni phịng liên tục 20 hẹ C6 Giống sâu xanh ni phịng hệ C¡ Con lai lai ngược với bố mẹ C6 C9 Con lai lai ngược với bố mẹ C1 Đánh giá chất lượng giống sâu theo tiêu sinh học, dùng toắn hệ thống kê lập bảng sống với hai yếu tố : yếu tố K (độ tử vong), yếu tố R (mức độ sinh sản) Xác định đại lượng tái sinh sản Ro Ro = Lx mx, dé: Lx - phân bướm sống biên độ ngày tuổi biết x mx - khả sinh sản đặc thù bướm ngày tuổi biết Các số liệu báo cáo xử lý thống kê sinh vật học 6 Về phần vi rút - Các phương pháp nghiên cứu, đánh giá phòng, ; đồng theo dẫn phương pháp Viện phương pháp sinh học bảo vệ thực vật (Kishinhốp, 1987), Viện VIR (1986); tham khảo phương pháp nhốp, dẫn tập tuyển : vi rút côn tring ho Noetuidae - lepidoptera, Kishi 1982; Tarasevich L.M, 1975); Trukhri M.G, 1982; P.H.Smits, 1987 ` H1 KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU : Cải tiến hồn thiện mơi trường thức ăn nhân tạo 2M nuôi sâu xanh Heliothis armigera : Thừa kế kết nghiên cứu MTTANT khơng agar năm 1990 thay 1991, phịng thí nghiệm tiến hành nghiên cứu cải tiến hoàn thiện nhằm hồn tồn ngun,vật liệu nước ngồi, tăng cường sức kháng trùng vi rút thể ẩn chống mốc meo thắng có 4m khong khí cao khơng thể khống chế Thành phần môi trường thức ăn nhân tạo không agar - 2M 2MM cải tiến) ghi bang Bảng : Thành phần MTTANT không agar nuôi sâu xanh + Lỗi ngô ”2MM - Khô dầu hướng dương + Khô dầu cắm - + Men tinh ché BVK-Nga + + Men bia Việt Nam - + + Bot dau tuong Tocopherol - Ascobic acid + + lt Benzoic acid + + Formaline + + Nước t+ + + + Bot dau xanh + / + + + Bã đậu phụ Bã bia 2M + Tên thành phẩm (2M Như vay, MTTANT khong agar - 2MMI thay khô dâu hướng dương khô dâu cám, giảm lượng bột đậu xanh, them lượng nhỏ bột dau tương xử lý loại mỡ, thay men tỉnh chế BVK (Nga) men bia Việt nam, thêm Tocopherol, giảm lượng nước, đồng thời thiết kế máy trọn để đảm bảo độ đồng thành phần vi lượng khối lượng thức ăn lớn, hạn chế ' phát triển cục nấm mốc vào thời gian có độ ẩm khơng khí cao Các tiêu sinh học sâu xanh nuôi MTTANT không agar 2MM t thể Bang : Các tiêu sinh học sâu xanh môi trường TANT - 2MM (x + Sx t 0,05) (Vien bao vé thuc vat 1992 - 1993) Sau sống tuổi | MTTANT 13 tuổi 4-6 nuôi tập thể | nuôi cá thể Agar 2M 2MM P Trọng lượng nhộng Sâu sống | Kha nang bình | để trứng (mg) Nhộng Bướm baổ sống thường (%) (qua) 916,8 (%) (%) (%) 80,5 79,8 76,7 271,9 285,0 93,1 7,37 6,18 4,82 10,4 14,4 4,35 78,7 82,6 88,5 302,2 315,7 93,4 7,74 6,18 3,01 17,42 9,31 2,43 79,5 912 93,5 329,3 3332 93,6 9,21 1,76 1,72 1,72 14,9 2,62 0,05 0,05 0,01 0,05 0,05 0,05 930,3 1307,6 0,05 Trên bảng cho thấy tỷ lệ sâu sống tuổi 1-3 nudi tap thé dia Petri MTTANT nhau, nhộng tuổi 4-6 nuôi cá thể lọ penixilin sức sống sâu mơi trường 2MM cao hơn, từ tỷ lệ sống nhộng trọng lượng nhộng đực cao Từ tiêu sinh học giai đoạn phát triển tiền trưởng thành môi trường 2MM cao, nên số bướm bình thường thống kê nhau, ảnh hưởng lớn đến kha nang dé trứng thụ tỉnh bướm cái, Qua trình ni sâu MTTAN T 2MM hai năm 1992 - 1993 theo dõi thấy rõ độ tử vong sâu giai đoạn phát triển thấp, tốc độ phát triển 20 hệ gần Sức sống sâu cao hạn chế phát sinh thể ẩn vi rút Do thay đổi số thành phân phương pháp chế biến hạn chế nấm mốc phát triển, thời kỳ làm nhộng khung nhựa chia Nấm mốc phát sinh giúp cho sâu ăn hết thức ăn, lớn nhanh, phân tiết khô khong gay nhiễm môi trường sinh sống sâu, đặc biệt giai đoạn nhộng Nếu năm 1990 - 1991 có thời gian suy thối quần thể sâu xanh phịng tưởng khơng thể vực lại ngày, hệ nối tiếp độ tử vong côn trùng cao, nim 1992 - 1993 co ban hạn chế Tóm lại, MTTANT 2MM thực tăng cường sức sống sâu xanh ảnh hưởng tốt đến khả tái sinh sản chúng (theo số liệu thống kê lập bảng yeu tố K yếu tố R) 2, Chọn tạo giống sâu xanh có sức sống tốt khả tái sinh sản cao : Từ hệ thứ 12 - 15, phịng thí nghiệm nhận thấy rõ suy thối dân quần thể sâu xanh ni môi trường TANT không agar - 2M Sự suy thối thể rõ khơng sức đẻ bướm giảm mạnh, mà lượng trứng thụ tỉnh giảm mạnh Thời gian sống bướm nói chung co lại, đặc biệt thời gian tái sinh sản chúng ngắn Bướm vũ hố bị quai dị nhiều chóng chết; số lượng bướm bị dính đơi tăng lên Xuất nhiều bướm di dạng, hình thái lệch khỏi hình thái phân loại Song song với việc nghiên cứu cải tiến hoàn thiện MTTANT 2M, tiến hành chọn tạo giống sâu xanh phòng với mục tiêu tăng sức sống khả nang tai sinh sản, mà năm 1990 - 1991 chưa thực Trước hết, từ hệ 16, 17, 18 chọn cá thể đực, có sức sống tốt, đẻ nhiều trứng thụ tỉnh hơn, tức cá thể cịn có khả tái sinh sản Đồng thời, từ cá thể đực, tốt thu từ tự nhiên : chọn cặp bướm có độ sinh sản cao để chuẩn bị cho lai Chọn cặp bướm đực cho lai theo công thức, công thức 30 - 50 cặp lL A Bx A Bx xX A B x8 A Bướm chọn lọc từ quần thể sâu xanh phòng B Bướm chọn từ quần thể sâu xanh tự nhiên A Mỗi cặp bướm ghép vao lo thuy tinh 0.5 - [ lít miệng lọ bịt vải màn, đặt bàn chống kiến với điều Kiện On,am độ phòng Hàng ngày, kiểm tra thu trứng Lấy trứng ngày đầu cặp đẻ trứng thụ tỉnh làm vật liệu lai tiếp Nhong trứng thụ tỉnh xử lý dung dịch 0.5% 0.03% Sodium hypochlorite Sau nuôi MTFANT-2MM KMnSO, chia làm hai giai đoạn : Nuôi tập thể đĩa Petri (tuổi 1-3),cuối tuổi chọn cá thể đồng độ lớn hoạt động hình thái để chuyển sang nuôi cá thể, Nuôi cá thể lọ pếnixilin (tuổi - 6) cuối tuổi chọn lọc cá thể đồng đều, đủ tiêu chuẩn trọng lượng, hoạt tính, hình thái đưa vào khung nhựa chia ô cho làm nhộng Sau hơa nhộng - ngày thu nhộng, xử lý hố chất phân loại đực cái, cân chọn cá thể nhộng đồng độ lớn trọng lượng, hoạt động hình thái Tất cá thể cặp bố,me phải để riêng Để đánh giã khác biệt di truyền cần phải tiến hành theo cá tiêu sinh học sau: - Tốc độ phát triển, mức sống còn, trọng lượng, tỷ lệ đực,cái tối ưu, khả đẻ trứng trứng thụ tĩnh đạng bố mẹ, lai F1 F2 lai gược với dạng bố mẹ (theo bảng sống với yếu tố K va kha nang tai sinh san theo bảng yếu tố R) Theo trình tự trên, năm 1992 phịng thí nghiệm ni sâu Viện bảo vệ thực vật nhận lai FI cặp bố mẹ theo cơng 'Í thức lai nêu Chúng tơi rút lai tốt nhất, có sức sống cao khả {nang tái sinh sẩn cao cho lai ngược với dạng b6,me tot Mỗi công thức ! nhắc lại 10 lần Từ cặp lai, lai ngược lặp lại nhiều lần, chúng Tôi rút hai cặp lai có ưu lai tốt đảm bảo mục tiêu chọn tạo giống 'có sức sống tốt khả tái sinh sản cao, liên tục ổn định quanh năm Đó cập C7 C9 C7 công thức lai ngược lại lai F1 với dạng bố,mẹ thu từ tự nhiên ni hệ phịng (C6) C9 công thức lai ngược lai FL với giống sâu chọn lọc từ quản thể sau xanh phịng thí nghiệm ni 20 hệ (C1) Các tiêu sinh học giống sâu xanh chọn tạo phịng thí nghiệm Viện bảo vệ thực vật năm 1992 1993 thể bảng Trước hết phân tích tiêu sinh học giai đoạn phát triển tiền trưởng thành Tỷ lệ sâu sống tuổi 1- nuôi tập thể đĩa Petri công thức rút có khác Cùng MTTANT điều kiện phịng thí nghiệm C9 có sức sống cao (54,74%), C7 (45,03) cịn CI C6 sâu có sức sống gần nhau, (P 0,05) Từ tuổi đến hết tuổi 6, sức sống công thức không khác nhiều, kết luận trước Yếu tố K,yếu tố tử vong pha phát triển thường thấp có nhiều trường hợp yếu tố K = Nhưng sang giai đoạn nhộng lại khác, C7 C9 nhộng có sức sống cao C1 Có, hai cơng thức nhộng có sức sống nhau,sức sống thấp nhộng C1 Về trọng lượng nhộng thể tương tự Sang đến thời kỳ tái sinh sản, khung cảnh lai rõ Bướm bình thường tỷ lệ đực đạt tối ưu g3: Các tiêu sinh học giống sâu xanh chọn tạo phịng thí nghiệm Viện bảo vệ thực vật năm 1992 - 1993 € công thức chọn tạo giống | tập thể (4) thể (%) 77,35 279,25 +2,93 (Thé he 20) | +7,27 93,87 36,97 C6 (Thế hệ !) | +!0,05 | +3,01 93,59 45,03 C7 ` +4,68 85,92 +2,97 91,38 +11,0 310,00 +17/76 310,25 91,18 312,00 37,26 Cl (ai ngược |+697 | 43,01 cọ 54,74 93,18 với C6) (ainguoc | 48.44 với C1) 0,05 P TE (mg) (%) ni cá 91,19 q ni Bướm bình thường | Trứng thụ tính (%) Trọng lượng nhộng Sâu tuổi | Sau tudi | Nhong sống 4-6 1-3 | 65,11 65,27 850.5 165,82 69,14 954.35 | 73,17 72,73 1404.5 325,00 | 72,77 72,54 1391,0 - - | 299,25 +15,4 | 321,25 | +12,13 | 321,50 [43,16 | 14.86 | +18,02 |+302 [43,02 0,05 | 417,31 | +16,32 0,01 0,05 0,05 (1/1) thể C9 Ở C7 tỷ lệ gần sát với tỷ lệ đực, tối ưu, số lượng bướm thấp kích thước bướm nhỏ Tỷ lệ đực, C6 lệch khỏi tỷ lệ tối ưu giống với thời kỳ đầu đưa C] vào hố phịng Ở cột cuối bảng số lượng trứng thụ tỉnh trung bình bướm cái, C9 C7 cao Đây kết giống sâu xanh chọn tạo phòng năm qua, với MTTANT không agar cải tiến 2MM tạo công nghệ sản xuất côn trùng hàng loạt phục vụ cho việc tạo chế phẩm vi rút trừ sâu hại Số lượng sâu xanh nuôi gây nhiễm vi rút tạo chế phẩm trừ sâu qua nãm sau : Bảng : Số lượng sâu xanh ni phịng thí nghiệm Viện BVTV Số lượng sâu (con } Năm Trên MTTANT-2M giống (hợp tác TT nhiệt đới Việt Xô) chọn tạo (thời gian thực dự án P Viện) 28.010 42.042 - “ 189.280 80.448 1990 1991 1992 1993 (đến đầu tháng 4) Cộng Trên MTTANT - 2MM 70.052 269.728 |, I bahh ¿2 (qua) IY KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ : Kết luận : Qua kết nghiên cứu tạo công nghệ sản xuất côn trùng hàng loạt để phục vụ cho việc tạo chế phẩm virút trừ sâu hại nêu _ phần trên, chúng tơi có số kết luận đề nghị sau : Đã cải tiến hồn thiện MTTANT khơng agar - 2MM hồn tồn với nguyên liệu phụ, phế liệu sẵn có Việt nam MTTANT rẻ tiền, dễ chế biến hiệu nuôi sâu cao Đã chọn tạo giống sâu xanh - Heliothis armigera thích nghi với MTTANT khong agar - 2MM co sire sOng cao va kha nang tai sinh sản lớn đáp ứng yêu cầu sản xuất côn trùng hàng loạt liên tục quanh nam Đã xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng tạo chế phẩm vi rút sâu xanh thông qua sản xuất thử nghiệm có kết qua Chế phẩm vi rút sâu xanh sản xuất sở quy trình cơng nghệ trên, thực tế đồng ruộng (cây vải Sơn la - Đồng nai - Sông Bé) khống chế phá hại loài sâu nguy hiểm này, bảo vệ suất trồng §Š Giá thành lần phun cho mot héc ta so với nước ngồi thi thấp (thuốc Elcar Mỹ - 22 la cho lần phun/ha), với sản xuất ta cao, lớn lâu đài đảm bảo nang suat tréng cao, tranh duoc nhiém môi trường bảo vệ quần thể sinh vật có ích ngồi tự nhiên Đề nghị : Trong thời gian đầu, giá thành sản xuất cịn cao, người nơng dân chưa quen sử dụng chế phẩm sinh học này, tâm lý người nông dân muốn phun sâu chết ngay, mà chế phẩm vi rút lại tác động chậm, Nhà nước cần có sách trợ giá để khuyến khích nơng dân quen dân việc sử dụng chế phẩm trình sản xuất trồng, vùng trồng có lồi sâu chống thuốc hố học thuốc hố học khơng cịn ý nghĩa bảo vệ Mật khác mục tiêu bảo vệ môi trường, bảo vệ quần thể sinh vật có ích quần lạc nơng nghiệp cần phải có sách khuyến khích Về mặt nghiên cứu khoa học, vấn dé khó khăn phức tạp, khơng thể sớm chiều giải xong được, cần có đầu tư Nhà nước thích đáng lĩnh vực khoa học (cả khoa học ứng dụng) công nghệ này./ KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU TẠO VÀ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM NPV TRỪ SÂU XANH ( HELIOTHIS ARMIGERA HUBN.) TREN BONG PGS.TS Truong Thanh Gian PTS Trần Quang Tấn KS Nguyễn Đậu Toàn CTV* Vào cuối kỷ XIX người ta phát bệnh thối nhữn sâu hại virus, khai sinh ngành bệnh virus trùng Cũng từ giới biết sử dụng virus tác nhân gây bệnh cho sâu hại cấu phòng trừ tổng hợp cho trồng, hạn chế đến mức thấp sử dụng hợp lý thuốc sâu hoá học, bảo vệ sức khoẻ người gia súc, tránh ô nhiễm môi trường Một số nước giới Liên xô(cũ ), Mỹ, Đức, Nhật sử dụng vài chế phẩm từ virus để trừ ấu trùng số sâu hại thuộc cánh vay, chang han Lien x0(cil) di dung virus EKC dé tnt sau x4m bắp cải; virus - D để trừ sâu róm thơng; virus ABB tri sau bướm cánh trắng Mỹ; virus H.A trừ sâu xanh hại Ở nước ta cụ thể Viện Bảo vệ thực Vật năm gần dây cộng tác với số quan( Trung tâm nhiệt đới Việt Xo, Trung tâm nghiên cứu Nhahð) tiến hành nghiên cứu virus phòng trừ số sâu hại thuộc cánh vảy bơng, đay, thuốc đạu đỗ với kết khả quan Trong báo cáo nhóm đề tài trình bày kết nghiên cứu tạo sử dụng chế phẩm NPV trừ sâu xanh ( Heliothis amig era Hữbn) DAT VẤN ĐỀ I† Trong thời đại việc nghiên cứu bệnh virus côn trùng chuyển sang giai đoạn san xuất chế phẩm virus thông qua việc nuôi cấy mô nhiễm hàng loạt ấu trùng sâu hại virus chuyên tính gây bệnh điều kiện định Như chúng biết, để tạo sinh khối virus lớn phải có nhiều sâu non nhiễm virus chết bệnh trọng lượng tối đa Điều liên quan mật thiết đến nồng độ nhiễm virus ban đầu, tuổi sâu đem nhiễm số yếu tố khác nhiệt độ, ẩm đọ, ánh sáng Chính vi vậy, để phục vụ cho việc tạo sinh khối virus số lượng lớn nhóm đề tài tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng vai yếu tố kể đến trình tạo sinh khối NPV sâu xanh : - Thăm dò nồng độ nhiễm NPV tối ưu cho sâu xanh - Xác định tuổi sâu non thích hợp nhiễm NPV - Ảnh hưởng nhiệt độ phịng thí nghiệm đến việc tạo sinh khối NPV ‘ Ngồi ra,nhóm để tài cịn tiến hành thử nghiệm phịng ngồi đồng để xác định hiệu lực chế phẩm NPV trừ sâu xanh hại số vùng trồng nước ta Sau kết nghiên cứu thu nhận được: "PTS Nguyén Van Thiéng} KS Tran Dinh Pha; Thacsi Nguyén Thi Diép; KS Dao Thi Hud; KS Pham Thị Hạnh;|KS Huỳnh Thị Hệ Phùng Thị Hoa;|Lé Thi Dung) Mai Phuong Dung; Phí Thi Hà; Nguyên Trung Dũng; Vũ Thị Hiện §VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - Sâu non nuôi cá thể lọ pênicillin để loại trừ việc chúng ăn thịt ni thức ăn nhân tạo thích hợp,sản xuất từ phụ phẩm rẻ Kên, dễ kiếm điều kiện Việt nam - Trong thí nghiệm xác định tuổi sâu non thích hợp nhiễm NPV chúng Hồi thực công thức ba độ tuổi sâu xanh (I.I V,V) - Ở thí nghiệm thăm dị nồng độ nhiễm NPV tối ưu cho sâu xanh chúng Rồi dùng sâu non cuối tuổi TV đầu tuổi V để nhiễm virus, - Thức ăn nhân tạo trộn với dịch thể NPV trước nuôi sâu theo tỉ le 0,1 ml NPV/ gr thitc an - Theo dõi nhiệt độ ( tính trung bình tháng) để xác định ảnh hưởng nhiệt độ phịng đến q trình tạo sinh khối NPV : - Tiến hành theo dõi, kiểm tra thí nghiệm từ ngày thứ ba sau nhiễm Hi Thu gom để riêng sâu bị chết NPV, Để khoảng 7- 10 ngày kngấu, sau đem nghiền nhỏ máy xay thích hợp cối nghiên Lọc 3X0 man nhiéu lớp để loại bỏ cặn bã ( xác sâu) Tiến hành li tâm dung dịch (3000 vòng /phút) vòng 30 phút để loại bổ cặn bã lần trở cho qua lọc › - Đếm PIB (pol/ml) dịch thể NPV thông qua bảng đếm hồng câu tren pkinh hiển vĩ quang học xác định đương lượng sâu bệnh E : - Cho thêm 50% "nhiệt độ thích hợp giicêrin, chất phụ gia báo quản dịch thể NPV - Để thử hiệu lực chế phẩm NPV sâu xanh phịng trừ đối tượng hại ngồi đồng tiến hành phưn dịch thể NPV với nồng độ khuyến cáo địa phương khác nhau, tiến hành theo dõi so sánh cơng thức với - Các thí nghiệm thực với ba lần nhắc lại Tính tốn số liệu theo | phương pháp thống kê thông dụng I KET QUA THI NGHIEM Thí nghiệm xác định nơng độ nhiễm NPV tối ưu cho sâu xanh để tạo a chế phẩm virus Trong thí nghiệm chúng tơi tiến hành xác định ảnh hưởng ‡ nồng độ nhiễm virus khác ban đầu đến thời gian, số lượng sâu chết bệnh ¡ tác yếu tố cấu thành sinh khối NPV (số sâu chết NPV, trọng lượng đương Ì lượng sau chết bệnh) Kết thí nghiệm trình bày bảng I È Qua bang | va qua thi nghiệm thấy: - Ở nồng độ nhiễm NPV thấp (2,16 x 104pol/ml: 2,16 x105pol/ml) su xanh chết muộn ( từ 5-6 ngày sau nhiễm virus trở đi) số sâu vào ¿nhộng nhiều ( 70%, 60%) so với sâu thí nghiệm cơng thức có nồng độ ¡nhiễm NPV cao ( 2.16 x 108 pol/mk: 2,16 x 102pol/ml) Điều giải ghich sau : nồng độ nhiễm virus thấp, lượng virus thức ăn ưa đủ để sâu chết ngày đầu, thời gian ủ bệnh kéo dài, đa sơ ;82u non vào nhộng nên sinh khối virus thu - Ở công thức với nồng độ nhiễm virus ban đâu cao (2,16 x 108 pol/ml; 2,16 x 103 pol/ml) sâu lại chết bệnh sớm (từ ngày thứ ba sau nhiễm virus trở đi) mà trọng lượng sâu chết chưa đạt mức tối đa sinh ul 00°£ = Surg < L169 = ony gy WS8- SL: '3o6£ -8£: duryi yung Jung top Suon; Op ury - duryi yurq Sunn Op 1ổH|N - Lt 800 800 Of ứ Of A nỆP AI!ofO | = Lorx 917 A NýP AI !9 | A REP AL 10ND | - SH) 819 0°06 ees 80°0 o01X 912 YL OONN > 67 Ie ST A HẸP AIIORĐ| (u/¡od) nựp urq SMITA uugryu Op SUON gOTX OTT gOTX OT‘ LOTx ¢9°y g0lx 76'0 C8 ÚC € S S 800 001 U91 g0Íx [01 91 S ees U91 % c01X 91“£ LOTx 707 A GP AT tong I 0È Lor 80°0 oe ¿l LOX OFT 00 p01X 91“ 009 ATED ATIOND| OVE 0E ee 800 ¿0l 799 l£ 00¿ A TẸP A[ IORO | „ 80002 tò STUIA UIẠINU 1D uoU ngs lon], 0C I (a8) (ngs /fod) | yudq iyo (uoa) yusq 1949 nes eo 1% Sưỡn‡ nụs 8uôn| 11 Stony Os 8uong Suö1[, STULA Op YUaq INY NES Os FUT lou Yuls O8}) YUL) enb usp AdN tội Op sugu ens suony yuy: F ONVE 'ÁC661~166T 'A.LAN töIA ) 8u tụi 8uoqd 8uoä (uo2/13) (uo3/13) STUIA STLHA uiạrqu uIgiyu TÚ] 3011 | 2011] SOY 903 nes nys Suony | 8udny os đưỏ1[, 80°0 t€ 6š 996 c0IXI90|ˆ % (uos) suo] OS | suOYe Os UOT, (uqnH 0128Huẩ1t0 SI10119H ) yurX nes AUN NPV không thu nhiều Qua tính tốn chúng tơi thấy nồng độ Mi NPV thích hợp bạn đầu cho sâu xanh 2,16 x 107 pol/ml điều kiện Xd trung bình tháng 25-290c, ẩm độ tương đối 75-85% Pc Thi nghiệm xác định tuổi sâu non thích hợp nhiễm vừữus cho sáu i để tạo chế phẩm fF; Với thí nghiệm tiến hành nhiễm NPV sâu xanh độ khác với nồng độ nhiễm virus thích hợp để tìm hiểu ảnh hưởng tuổi sâu đem nhiễm đến thời gian yếu tố cấu thành sinh khối virus (số đỹ sâu chết bệnh, trọng lượng đương lượng sâu chết bệnh) F- Kết thí nghiệm trình bày bảng2 F Qua bang qua thí nghiệm chúng tơi thấy (uổi II sâu xanh chết ph h sớm (4 ngày sau nhiễm NPV ) chết tập trung vào ngày thứ 6,7 § nhiễm, cịn tuổi IV V sâu chết muộn chết tập trung vào ngày thứ sau nhiễm Tuy nhiên tuổi V,sâu vào nhộng nhiều so với sâu thí Rjệm tuổi III IV Các tiêu cấu thành sinh khối NPV nhiễm sâu xanh li IV cho cao Điều giải thích sau: với nồng độ „sức chống chịu tuổi nhỏ với NPV so với sâu tuổi lớn nên Kí bệnh sớm cho sinh khối NPV đại đa số sâu chết bệnh a dat trọng lượng tối đa Còn sâu tuổi lớn ( tuổi V) thi sau vào nhong liêu đạt tới độ tuổi chuẩn bị bước vào tiền nhộng lượng virus sinh ng co thé su chưa đủ để làm sâu chết bệnh NPV Đây kết làm sở cho việc chọn thời điểm phun chế phâm trừ sâu hại ngồi đồng q trình tạo sinh khối NPV phịng thí Khiệm Theo chúng tơi,để tạo sinh khối NPV với hiệu cao phòng thí Nhiệm nhiễm sau xanh cuối tuổi TV đầu tuổi IV thích hợp Ảnh hưởng nhiệt độ phịng thí nghiệm đến q trừùth tao khối NPV sâu xanh ị Để xác định ảnh hưởng nhiệt độ phịng thí nghiệm đến q trình igo sinh khối NPV sâu xanh chúng tơi theo dõi nhiệt độ trung bình tháng pong nam va cdc yéu tố cấu thành sinh khối NPV ( tỉ lệ % sâu chết thu hỏi trọng g đương lượng sâu chết bệnh) Kết trình bày bảng hình Iva F : - Qua bảng Š ta thấy nhiệt độ phịng thí nghiệm có ảnh hưởng lớn n qúa trình tạo sinh khối NPV sâu xanh, cụ thể: - Những thắng có nhiệt độ phòng tháng hời gian nhiễm virus 55,6.7,8,.9 nim) thi sâu xanh ngắn so với tháng nhiệt độ thấp Kháng 1,2.3) từ 4-5 ngày Điều giải thích sau : nhiệt độ trung bình long phịng thí nghiệm thang 5,6,7.8,9 đạt mức tối ưu (27-289c ) cho sâu anh phat triển, thời gian nhiêmvirus chúng rút ngắn lại Day Mấn đề có ý nghĩa lớn dây chuyển sản xuất NPV khả quay vòng đụng cụ nhiễm virus nhanh hơn, tiết kiệm thời gian Ngồi cịn cho phép Ehúng ta chọn thời điểm phun NPV thích hợp, nâng cao hiệu trừ sâu hại hgoài đồng 7⁄01Ợ 3C puny vena ivy OUT Up “ye Op Lộ HA— 9% 0°06 99/ 67 tš ¡ tế t0U ¿00 600 0E ỌC 0C ¿0LX 912 ¿0IX 912 LO1X 917 HI AI A yoga nya g0IX 8E£ Ig 9°96 VI Supyl yuig Sty L g0IX [c£ ge 2J6£-9£ : t'ce t gOlX 61 P69 = Bueqd< [£“¿= 2841 001 I wugryu op SuọN nựp ƯỚQ SILHIA nys Ion], urqu IU (ruod}) rE (15) qua - (uo2) (nes/jod) % (uo2) ƒ uiệiu8u (uo3) % (002/48) SRHA tượigu 1U 2O nụs | ri nựs sudn] suory | Buon, os | suon| os SIMIA OP YU9q INYO NYS 0s Sug], suony | quộa 102 nụs JUS NWS PO WI os sudn] suong | 8uôn| 8uỏi1, đuouqu os Bug], — = (€661-1661 “ALA USIA) wdrysu rụi 8uotd 8uo1) (UqnH 81981ue st4io1JaH) quex IS SIMIA JO3 WUIS OẺ] {UHH] enb uap sIMIA tì g!yu Wop nes 19m) eno duony quy : ONY ungusueee BẢNG : Ảnh hưởng nhiệt độ phịng thí nghiệm đến q trình tạo sinh khối NPV sâu xanh (Viện bvrv 1991-1992), Tháng năm Nhiệt độ trung binh Thời gian nhiém Ti le sau bệnh thu 24.4 20,2 20.1 23,3 24.5 26.9 28.5 28.6 29,9 28.4 25.9 22,3 11,0 14.6 16,5 14,0 11,9 11.3 10.2 95 10,1 10.2 11,5 13,4 68.2 65,6 61,8 68,3 71,0 77,0 80,0 82.0 81,6 77,0 71,0 69,0 tháng (Ôc) | virus(ngày) | 12/1991 1/1992 2/92 3/92 4/92 5/92 6/92 7/92 8/92 9/92 10/92 11/92 Trong Duong lượng sâu | lượng sâu hồi (%) chết bệnh | chết bệnh (gr/30 sâu) | 3.9 3,2 3.0 3,6 37 43 4.5 4.5 42 40 3.8 3.3 (PIB/sau) 3,75 2,53 2.01 3,04 4,61 4.93 5.64 5,72 5,61 5,42 4,93 4.80 x x x x x x x x x x x x 108 108 108 108 108 108 108 108 108 108 108 108 Trong tháng có nhiệt độ cao : tiêu cấu thành suất sinh khối NPV sâu xanh (tỉ lệ % sâu chết bệnh thu hồi, trọng lượng đương lượng sâu bệnh) cao so với tháng có nhiệt độ thấp tháng lạnh sâu nhiễm NPV chậm lớn sâu chết bệnh có khối lượng ít-hơn Ty Le Sau chit bens 184 tha Adi ế,m— 164 AGG6 th + ~ (%) | ! “+ | 14.0 “8 œ tts 404 L , 10.2, ⁄4./ is c2 a5 n PT 2⁄9 1⁄2 >3 ~ SEF GF 12 01 Thavig Tredg har HÌNH 1: Mối tương quan giưã thời gian nhiễm virus tháng năm 2 2z + SF £€ F Vo Thang Tomy ram HÌNH : Mối tương quan giưã tỉ lệ sâu bệnh chết thu hồi tháng nam Thử hiệu lực NPV sâu xanh phịng đồng bơng Để phục vụ cho việc sử dụng NPV sâu xanh hệ thống tổng hợp phịng trừ sâu xanh hại bơng số trồng khác đồng ruộng, chúng tiến hành thử hiệu lực NPV sâu xanh điều kiện phòng thí nghiệm bơng non dùng để ni sâu xanh nhúng dịch thể NPV nồng _ khuyến cáo Tiến hành theo dõi tiêu thí nghiệm từ ngày thứ sau nhiễm trở Kết thí nghiệm trình bày bảng BẢNG4: Hiệu lực trừ sâu xanh (Heliothis armigera Hiibn) NPV sâu xanh phịng thí nghiệm (Viện BVTV 1992-1993) tơi Lá độ lây, Thời Tuổi gian Số lượng Thời gian sâu thí | làm thí nghiệm nghiệw | nghiệm (con) sâu thí Nông độ phun NPV (PIB/ha) sâu chết Sau chết bệnh Tháng 8/1993 | ILI Đối chứng LU 30 30 30 30 4,2 x 1012 | 42x 1012 | 46x 1012 Nước lã khác bệnh sau phun SO (ngày) | lượng % (con) Tháng 8/1992 | TH Thang 9/1992 | ILI Nhộng chết 5 - Fthuc =21,72> Fbang =18,51 23 19 76,6 63,3 - - 21 70,0 SO lượng (con) 11 30 % 23,4 36,7 30,0 100,0 Qua bảng thấy : dịch thể NPV sâu xanh có tác dụng gây bệnh cho sâu xanh, sâu xanh thí nghiệm chết từ ngày thứ sau phun NPV trở tỉ Ệ sâu chết bệnh đạt từ 63,3 - 76,6% điều kiện phòng thí nghiệm (nhiệt độ trung bình 28-29Oc, ẩm độ 75-85% ) ‘ Ngồi thí nghiệm thử hiệu lực NPV sâu xanh phịng thí nghiệm, năm 1992, 1993 tiến hành phun NPV trừ sâu xanh diện rộng Nông trường Tô hiệu (Sơn la) sông Bé Kết điều tra trình bày bảng BANG 3: Hiệu lực trừ sâu xanh (Heliothis armigera Htibn) cua NPV sau xanh đồng địa phương khác nhan (Sơn La, Song Bé, 1992-1993), Tuổi Nơi điều tra -Đội -Đội -Đội -Đội 26/3 (Tơ hiệu) Na Bó (To hiệu) Bắc Quang (Tô hiệu) Sông Lô (Tô hiệu) Tháng, Nông năm điều tra 9/1992 9/1992 9/1992 9/1992 sâu xanh phun NPV sâu xanh phun (PIB/ha) | ! | | NPV : xanh chết Tỉ lệ sâu chết phun NPV | bệnh sau | bệnh (con/m?) phun NPV sảu NPV | xanh(‘%) 433x102 | LH, II 4.33x 1012 | Lim 433x 1012 |I 1.1m 433x 1012 | 11.1 12 - Đội Bắc Quang (Tô hiệu) | 9/1992 | 391xi017ƑTT.TT -Đội Nà Bó (Tơ hiệu) 9/1992 | 3.91x1012 | IN,1 -Soc Bung (song Bé) 9/1992 | 426x1012 | Lani -Thanh Luong (song Bé) 9/1992 | 4,26x10!2 | 1m im Qua bảng thấy : Trên ruộng NPV Sâu Mật độ sâu trước (ngäv) 4 mã 4 59.7 66.1 62.3 _ 332 L 59.2 64.6 472 554 sâu xanh có hiệu lực gây bệnh thối nhãn cho sâu xanh tuổi I, I IIE te 33,2-66,1% Cùng với biện pháp khác hệ thống tổng hợp trừ sâu xanh (Heliothis armige Hữbn) chế phẩm NPV sâu xanh góp phần hạn chế đáng kể số lượng sâu xanh đồng ruộng giảm đến mức thấp việc dùng thuốc sâu hố học tránh nhiễm mơi trường, bảo vệ sức khoẻ người quân thể thiên định sâu hại hệ sinh thái đồng ruộng Để phục vụ cho việc hạch toán kinh tế trình tạo chế phẩm NPV sâu Xanh sử dụng đồng ruộng, chúng tơi bước đầu theo dõi, thử nghiệm, tính tốn giá thành lần phun NPV sâu xanh Sau kết thu ANG : Tính giá thành sản xuất chế phẩm NPV sâu xanh phun cho bông/ lân nhiễm virus ) « PHAN NUOI SAU: phun (tương đương 500 sâu chuẩn chết sau Để sản xuất 1000 sáu tuổi IV, V dem nhiễm virus để thu hồi 500 thất bệnh tiều chuẩn cần - Nuôi ghép Bướm : 1/4 công lao động - Thu trứng, đếm, cắt trứng : 1⁄4 công lao động - Xếp đĩa Petri, xếp trứng, lau rửa kha y đĩa đặt thức ăn : 0.5 co -Chãm nom, tách sâu tuổi III nuôi cá thể (Bao gồm xếp lọ cho tl ; an vao lo penicillin, tach sau ):2 cong, - Chon sau tudi IV, V dem nhiém virus ( bao gồm kiểm tra sâu tiêu chuẩn nhiễm virus, chon va nhat sau di nhiễm ) : cong k - Rửa, sấy lọ penicillin (bao gồm rửa lọ sau ngâm với loãng, cho vào sấy lấy lọ ra) : công -Chạy vật tư, mua thức an sấy, ngh iền nấu thức an nhân tạo cong i Cộng công lao động : công x 10.000đ/công = 60.000 đ Thúc án nhân tạo, * Agar (nuôi từ tuổi I đến hết tuổi ID : 50 dia Petri x 5sr/đĩa x 8000 đ/kg thức ăn agar = 2000 d *2 MM: 1.500 1o penicillin (1.500 sau) x 1.5gr/lọ = 2.5 kg 2,5 kg x 3000đ/kg thức ăn 2MMI =12.500 Cộng tiền thức ăn nhân tạo nuôi sâu từ tuổi I đến tuổi IV 14.500đ, B PHAN NHIEM VIRUS VA TAO CHE PHA M NPV (CHO 1.000 SAU DEM NHIEM 1._.Céng lao động : - Xếp lọ pênicillin, cho thức ăn vào lo va tha sau: | cong - Kiểm tra sâu chết gắp, thu hồi sâu chết bệnh : Ï công - Rửa lọ sấy lọ peniciliin :Ì cơng - Nghiên lọc chế phẩm, đếm PIB : cong Ị i 2,Thức ăn (2MM) : Cộng công :3 cong x 10.0004 = 30.0004 gr /lo pénicillin/ sau x 1000 sau = 4000 sr = kg Thành tiền : kg x 5.000đ/kg= 90000 €C CÁC LOẠI VẬT TƯ KHÁC : 1.Xô :500đ Điện - Dùng để sấy 2.000 lọ pênicillin, 50 đĩa Pêtri hết 1,5 kw x = 4.5 kwh -Sấy, nghiên thức ăn, tủ lạnh lò sưởi điều hoà nhiệt độ : 2,5 kwh Cộn g điện : kwh x 450 d/kwh =4050 d Nước : 0.5 m3 x 800đ/m3 =400 đ 4 Vật tu rẻ tiền mau hỏng (rổ tre, xút, xà phòng ) : 3.000 đ :10.000đ Các vật tư khác, phụ gia D TONG CONG Cong lam Điện chị tiêu khác Thức ăn nhân tạo :90.000đ : 17.950đ : 34.500đ Cộng 142.450đ Như : Giá thành chế phẩm NPV sâu xanh phun lần cho bảo đảm sâu xanh tuổi ï, H, III chết từ 55-60% 142.450đ (chưa kể phần khấu hao tài sản trang thiết bị) Qua việc sản xuất,thử nghiệm sử dụng chế phẩm NPV sâu xanh điện rộng phòng trừ sâu xanh hại năm qua thấy tính phức tạp tốn hướng tạo chế phẩm virus công nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng, chủ động nghiên cứu tạo cơng nghệ có hiệu qua Ngoài thời gian đầu, giá thành sản xuất cịn cao, người nơng dân chưa quen sử dụng chế phẩm sinh học này, tâm lý người nông dan muốn sâu hại chết ngay, mà chế phẩm virus lại tác động chậm, thời tiết điều kiện ngoại cảnh tác động nhiều đến việc sử dụng chế phẩm virus trừ sâu hại mục đích bao vệ môi trường, bảo vệ người quần thể sinh vật có ích quản lạc nơng nghiệp tương lai ngành bảo vệ thực vật nên trọng đầu tư thích đáng cho hướng nghiên cứu Tóm lại chế phẩm NPV có số ưu, nhược điểm sau : a cư mem BẢNG : Một vài ưu, nhược điểm chế phẩm virus trừ sâu hại UU DIEM NHƯỢC ĐIỂM :| Hiệu lực trừ sâu non (tuổi I II HI) từ ‡ -Hiệu lực trừ sâu tuổi lớn (IV, V.VI) ¡| 55-60% ¡| Khơng gây nhiễm mơi trường - Tác động diét sau hai chậm (5-7 ;| Không gây hại cho người gia súc | ngày sau phun) :| quần thể sinh vật có ích - Dễ bị điều kiện ngoại cảnh tác động - Có tác dụng diệt sâu hại hệ | làm giảm hiệu lực | sau thông qua trứng sâu (khoảng » - Khó bao quan va giá thành cao 20%) - Người nông dân chưa muốn sử dụng -Có hiệu lực với sâu chống thuốc hố | vi sau khơng chết sau phun học Trong q trình nghiên cứu thử nghiệm chế phẩm NPV trir sau hại thực dây chuyền sản xuất chế phẩm virus trừ sâu xanh (Heliothis armigera Hubn) Sau lược trình sơ đồ cơng nghệ : 3ơ đồ 1: Dây chuyên sản xuất chế phẩm virus trừ sâu xanh (Heliothis armigera Hubn) tren bong Bộ phận sản xuất giống mẹ: -Nuôi sâu từ tuổi I đến VI -Nhong, thu gid nhong -Nuôi ghép bướm -Thu trứng | Ỳ Bộ phận sản xuất côn trùng hàng loạt : Bộ phận chế biến -Ấp trứng sâu thức ăn -Nuôi sâu cá thể (IV-V), rủ ey hdl eeu hàng loạt -Thu sâu đủ tiêu chuẩn nhiễm chuyển sang bổ & foal phan gay nhiém virus Ỳ cho sau; -Gay nhiém virus cho sâu non - Thu sâu chết virus chuyển sang phận chế thuốc NPV < no Ị ⁄ | Bộ phận chế thuốc, kiểm tra chất lượng bảo quản, đóng gói | | Bộ phận gây nhiễm virus —>| ị Bo pian rua môi trường |——Ï _ _Nuôi sau tập thể (1-]D) nhân tạo phân Fo5 bang (4,76) Bs Qua rd, bảng thấy : SRT bát đầu chết bệnh từ ngày thứ sau phun NPV trở ng dg NPV phun cao tỉ lệ sâu chết bệnh cao Như phun NPV sâu ém thông sạng dạng dịch thể sản xuất phương pháp thủ cơng có tác dụng han hế quần thể SRT rừng thông (từ 73,9 - 83,3%) biện pháp bảo vệ thực gật khác ngăn chặn nạn "cháy" rừng thông SRT gây Dựa theo kết đây, tiến hành thí nghiệm phun NPV sâu róm thong dang dich thể với nồng độ x 1012 PIB/ha SRT tuổi IV, tuổi V (là tuổi ‘sau pha hai thơng nghiêm trọng) Kết thí nghiệm trình bày bảng BANG 4: : HIỆU LỰC TRỪ SRT (TUỔI IV, V) CUA NPV — SAU ROM THONG DANG DICH THE (HAM RONG - 1993 ) Nồng độ phun | Mât độ sâu J Lượng dung : (PIB/ha) ' | trước phun |_ dịch phun (con/cay) (ift/ha) Đối chứng 273 Không phun 8x tol 302 | 400 TỶ lệ sâu chết bệnh sau phun (%) 14 ngày 2,5 3,1 5,9 36.2 61,2 715 F thực (24,32) >Fos bảng (19,00) Phân tích bảng thấy : Phun NPV sâu róm thơng dạng dịch thể có hiệu lực gây bệnh với SRT tuổi lớn (IV V),tỉ lệ sâu chết bệnh sau ngày từ 6], 71,5%, nhiên sâu chết chậm tỉ lệ sâu chết bệnh thấp so với phun NPV trir SRT tudi nho (LILID Tiếp theo kết cho tiến hành phun NPV sau rom thong dạng dịch thể điện rộng (20 ha) đồi thơng khu vực Hàm rồng, Thanh hố Kết điều tra trình bày bảng BANG 5: HIEU LUC TRU SRT (TUOI I, I, Il) CUA NPV SAU ROM THONG DANG DICH THE (HAM RONG 7/1993) Nong độ phun | Mật độ sâu | Lương dung (PIB/ha) trước phun | dịch phun (con/cây) (Ift/ha) TỶ lệ sâu chết bệnh sau 2,8 Đối chứng | 259 Không phun 21 x 1012 | 396 400 18,5 F thực (26,72) >Fos bảng (19,00) 46,2 phun (%) 14 ngày 5,5 | 72,5 Qua bảng thấy : Trên diện rộng, phun NPV sâu róm thơng dạng dịch thể fn lam sâu chết bệnh với tỉ lệ cao (72,5%) Như lứa rộ SRT, chúng dùng NPV sâu róm thơng dạng dịch thể để phịng trừ đối tượng sâu hại b/ Dùng NPV sâu róm thơng đạng bột Như trình bày, để tiện cho việc bảo quản chế phẩm, chuyên chở dễ dàng w di òi đốc, thiếu nguồn nước sit dung NPV trừ SRT, năm 1994 tiến sản xuất thử NPV sâu róm thơng đạng bột thử nghiệm hiệu lực ng phịng rừng thơng lâm trường Hà Trung, Thanh hóa Thí nghiệm phòng tiến hành sau : - Ngất cành thông tươi để lồng lưới cỡ lớn phun NPV sâu róm thơng dạng bột dạng dịch thể, sau thả sâu non vào theo công thức sau : Đối chứng CT, : Cho SRT ăn thông không phun NPV : Phun NPV đạng dịch thể theo tỉ lệ 20 mi/100 sâu CT; CT3 } : Phun NPV dạng bột theo tỉ lệ 20 gr/100 sâu : Phun - NPV dạng bột theo tỉ lệ 40 gr/100 sâu Mỗi công thức lần nhấc lại Theo dõi sâu chết bệnh từ ngày thứ sau phun NPV trở Kết thí nghiệm trình bày bảng Phân tích bang thấy : NPV sâu róm thơng dạng bột có tác dụng trừ SRT 'mối I, I, TH (ti lệ sâu chết bệnh từ 58,6 - 61,4%) hiệu lực thấp so với NPV dang dich thể (72,7%) Vì để đảm bảo hiệu lực diệt sâu chúng ta.cần phải tăng ' rồng độ phun NPV dạng bột lên ‘BANG 6: h THỬ HIỆU LỰC CỦA NPV SÂU RĨM THƠNG DẠNG BỘT TRONG PHÒNG (TRAM DU BAO SAU BENH RUNG THANH HOA - 5/1994) VỚI SRT TUỔI I, II, III THẾ HỆ II | Cơng thức Lượng chế _ thí nghiệm Số sâu phẩm thí nghiệm NPV ding Đối chứng (con) TÌ lệ sâu chết bênh sau xử lý (%) 14 ngày - 100 2,3 3,1 dịch thể 20 ml 100 30,6 53,5 72,7 Chế phẩm bột 20gr 100 18,1 43,8 61,4 ŸChế phẩm bột 40 gr 100 22,4 46,7 58,6 Phun ˆ- Ở lứa sâu thứ TH năm tiếp tục lặp lại thí nghiệm phịn g Kết thí nghiệm trình bày bảng THU HIEU LUC CUA NPV SAU ROM THO NG DANG BOT TRONG PHÒNG VỚI SRT TUỔI I, II, II THẾ HỆ II (TR AM DU BAO SAU BỆNH RỪNG THANH HOA 10/1994) Cong thite ì Luong ché thí nghiệm phẩm NPV dung ' Đối chứng Số sâu thí nghiệm (con) Tỉ lệ sâu chết bênh sau xử lý (%) 14 ngày 24 - 100 20 ml 100 26,2 49,7 Chế phẩm bột 68,3 20 gy 100 15,6 38,5 Chế phẩm bột 58,6 40 gr 100 18,3 41,7 60,4 dm dang dich thé | Qua bảng thấy : Hiệu lực NPV sâu róm thơng dạng bột SRT hệ Ul thí nghiệm phịng thấp so với thí nghiệm lứa sâu hệ II lúc ếng 10) ôn, ẩm độ lầm cho sâu chết bệnh chậm nên hiệu lệt hộ trung bình thang 10 26,7°C,4m d6 trung binh tháng 68,2%) Dựa kết thí nghiệm phịng chúng tơi bố trí thí nghiệm ngồ i g thơng với qui mơ nhỏ để xác định hiệu lực NPV sâu róm thơng dang bột Thí Thanh hóa lứa sâu thứ II với công J ụ Đối chứng : Không phun CT, : Phun NPV dạng dịch thể với nồng độ 5,3 x 1012 PIB/ “CT, - : Phun NPV dang bot véi liều lượng kg/h a CT; : Phun NPV dạng bột với liều lượng 10 kg/ha Mỗi công thức lần nhắc lại, lần nhắc lại diện tích Kết thí hiệm trình bày bảng HIỆU LỰC TRỪ SRT THẾ THẾ II CUA NPV SAU ROM THÔNG DẠNG BỘT (LÂM TRƯỜNG HÀ TRUNG, THANH HOA - 7/1994) lợ thức Nồng độ, nghiệm Mật độ sâu | liều lượng phun | trước phun Tỉ lệ sâu chết bênh sau phun (%) ngày 10 ngày 15 ngày (con/edy) chứng Không phun 312 3,1 3,6 3,1 NPV dich the” 5,3x10!° PIB/ha 279 41,3 MPV dich tha” 59,1 71,2 kg/ha 301 21,2 43,3 59,2 V dịch the” 10 kg/ha 297 26,7 46,2 61,3 F thuc (8,17) > Fos bảng (4,76) Qua bảng thấy diện tích thí nghiệm nhỏ NPV sâu róm thơng đạng bột g có khả nãng làm giảm quần thể sâu hại (từ 59,2 - 61,3% ).Ở công thức phun Úkg/ha cho biếtkết cao phun kg/ha Ở hệ thứ II SRT ching tơi lập lại thí nghiệm khu đồi ông Hàm rồng, Thanh hóa Kết thể bảng HIỆU LỰC TRỪ SRT THE HE III CUA NPV SAU ROM THONG DANG BOT (HAM RONG, THANH HOA - 10/1994) Cơng thức thí Nồng đạ, liều nghiệm lượng phun ¡ chứng không phun Phun NPV dich thé | 5,3 x 10!2PIB/ha Phun NPV dang bot | kg/ha Phun NPV dang bot | 10kg/ha Mat độ sâu trước Phun (cor/cây) 76 §I 68 93 F thực (5,28) > Fos bang (4,76) TỈ lệ sâu chết bệnh sau phun (%) ngày | 10 ngày | 2,6 39,3 19,3 23,6 3,2 48,1 38,6 41,1 15 ngày 3,0 68,4 56,2 58,8 Qua bảng thấy : Hiệu lực trừ SRT hệ HI NPV sâu róm t hơng dạng bột ng tương tự thí nghiệm Hà trung Ngồi việc làm thí nghiệm điện hẹp chúng tơi cùngTr ạm dự báo sâu bệnh ừng Thanh hóa lâm trường Hà trung tiến hành phun NPV ng bột dạng dịch qui mô rộng để ghi nhận bảng Qua bảng 10 thấy kg/ha thơng g sử dựng NPV phịng trừ SRT hệ II HI năm 1994 Kết điều 10 sử dụng NPV sâu róm thông diện rộng với liều lượng cho hiệu diệt sâu trừ 55,2 - 58,4%, nhiên không cao dạng dịch thể :_ỨNG DỤNG NPV SÂU RĨM THƠNG TRỪ SRT LỨA II,HI TẠI THANH HÓA - 1994 tmsử dụng | Liều lượng | Mật độ sâu | Diện chsử | Tỉ lệ sâu chết bệnh sau gróm thong phun trước phun | dụng NPV (ha) phun (2o) (con/cây) ;Hà trung kg/ha 321 25,7 18,7 393 | 75,5 am rong kg/ha 236 20,6 16,1 37,6 | 55,2 trung kg/ha 207 32,8 21.1 36,7 | 58,4 Tính giá thành sản xuất sử dụng cầu NPV sâu róm thơng Qua q trình thí nghiệm, theo dõi, tính tốn anh hóa chúng tơi tiến hành xác định giá thành sản a thông dạng dịch thé va kg ché phdm NPV dang kinh tế dùng chế phẩm sinh học để trừ - Kết trình bày bảng I1 12 Trạm dự báo sâu bệnh rừng xuất Ilít chế-phẩm NPV sâu bot làm sở cho viéc tinh SRT thay thuốc sâu hóa » Qua bảng I1 12 thấy giá thành sản xuất sử dụng NPV sâu róm thơng ang bột thấp so với NPV dạng dịch thể Phun NPV đạng bột đỡ tốn phun NPV dạng dịch thể 45.000đ/ha | lần phun Tuy nhiên cần phải nghiên cứu cải Miến qui trình kỹ thuật tạo sử dụng NPV sau r6m thông dạng bột để tăng hiệu trừ sâu dạng chế phẩm Cùng qua bảng 12 thấy,so với việc dùng thuốc sâu hóa học sử dụng NPV đỡ tốn hơn, chưa kể lợi ích đùng chế phẩm NPV bảo vệ sức khoẻ người, gia súc, côn trùng có ích khơng nhiễm mơi trường BANG 11: GIÁ THÀNH SẢN XUẤT CỦA NPV SÂU ROM THONG DỊCH THE NPV SAU ROM THONG , nguyên vật liệu Tiền (đ) g thu sâu chết bệnh in, loc, ly tam gia 3.000 Cộng 30.000 z ` DUNG, ‘ GIA THANH SU ` CỦA NPV SÂU RÓM A ^ THÔNG TRÊN IHA THÔNG/MỘT LẦN PHUN VÀ SO VỚI THUỐC SÂU HÓA HỌC vật tư ox kg phun, xang công gánh nước È khác, khấu hao| NPV dang dich thé Tiền (đ) |Công, vật tư 96.000 40.800 113.000 |- Ché phim NPV |(2 lit) |- ca máy - Công gánh nước | 56.462 |- Công phun 306.262 Cộng b, thùng gánh nước ) Cộng - Cơng sản xuất (trộn, phơi, hong, nghiền, đóng, gói ) 32.500 Thuốc sâu hóa học ˆ 1.000 1.000 2.000 Cộng m 22.000 1.500 1.500 ~ Túi ni lông, nhãn - Điện sản xuất 1.000 dung cu Tiền (đ) - NPV dịch thể - Bot tan - Phụ gia 1.000 500 Én sản xuất, bảo quản BANG 12: Công, nguyên vật liệu 15.000 5000 8.000 bì (chai lọ) , mắc KG NPV DANG BỘT Tiền (đ) 65.000 40.000 100.000 80.000 285.000 NPV dang bét |Công, vật tư ” |- Ché phim NPV (Skg) |- ca may |- Công phun Cộng Tiền (đ) 150.000 50.000 40.000 240.000 6í Tác dụng biện pháp sinh học trừ SRT đến quần thể trùng có ich đồi thông Qua theo dõi năm đồi thông Thanh hóa chúng tơi nhận thấy trứng sâu róm thơng thường bị ong đen ong mắt đỏ ký sinh mức độ khác Chúng tiến hành điều tra khả ký sinh trứng ong đen hai vùng đặc trưng : vùng không dùng thuốc sâu hóa học từ 1992 đến (Hà trung, Hàm rồng, Sam sơn)và vùng dùng thuốc sâu hóa học hàng năm để trừ SRT (lnh gia) Kết điều tra trình bày bảng 13 BANG 13: KẾT QUẢ ĐIỀU TRA TỈ LỆ KÝ SINH CỦA ONG ĐEN TREN TRUNG SRT O THANH HÓA (NAM 1994) Thé SRT Ti lé ong den ky sinh trén trứng SRT (%) năm Tinh gia I 42,6 45,8 51,3 I 55,6 40,1 44,2 52,6 In 54,3 28,3 35,7 45,8 IV 45,7 30,7 316 422 41,4 HaTrung | Hamrong | | Sâm Sơn Qua bảng I3 thấy vùng dùng NPV tác nhân sinh học 'Beauveria) tỉ lẹ ong đen ký sinh trứng SRT cao (31,6 - 35,6%) nhiều Ying dùng thuốc sâu hóa học để trừ SRT (30.7 - 42,6% ) Điều lý giải biện pháp sinh học có tác dụng làm tăng khả ký sinh ong đen SRT khác (Bị, so với việc dùng trứng Ở lứa SRT nam thi hệ I có tỉ lệ ký sinh trứng SRT cao tất ä vùng Qua theo dõi thấy lứa sâu hệ I thường can thiệp biện pháp bảo vệ thực vật để giảm quần thể SRT Như vậy,nếu có điều kiện ân ni ong đen hoặcøng mắt đô để bổ sung vào quần thể ong có ích tự nhiên n đồi thơng làm phong phú thêm đối tượng này, góp phần diệt pha trứng SRT, hạn chế nhiều tác hại SRT pha sâu non Đây hướng cần quan tâm hón để phịng trừ SRT Thử xây dựng mơ hình tổng hợp phịng trừ SRT Từ kết thu qua việc dùng tác nhân sinh học để phòng trừ SRT tiếp thu thành tựu khoa học bảo vệ thực vật chúng tơi thử xây đựng mơ hình tổng hợp phịng trừ đối tượng hại đồi thơng Hàm rồng, Thanh hóa Trong lấy biện pháp sinh học chủ yếu Pha trứng: Thả ong đen ong đỏ ký sinh trứng SRT Pha sâu non: Dùng chế phẩm sinh hoc: NPV, Bt Beauveria để phòng trừ công Pha nhộng: sử dụng sức cử người thu gom, giết nhộn g phương pháp thủ Pha bướm: Dùng bẫy đèn bất bướm Ngoài biện pháp sinh học phát huy kỹ thám thực vật chân đồi chỗ trống giao bạch đàn, keo tai tượng, ăn quả, lương dùng chất dẫn dụ (feromol) thuật lâm sinh cách trồng rừng thông lập thành quần thể hỗn thực nơi trú ngụ phát triển quần thể sinh vật có ích thức ăn chúng SRT bị cạn kiệt (cuối mùa g - đầu mùa xuân) Tuy kết bước đầu với diện tích gần 30 thong Hàm rồng pag vịng năm chưa bị "cháy" thơng lần dịch SRT Qua chúng tơi thấy g ta kiên trì dùng tác nhân sinh học để bảo vệ quần thể thiên địch có rừng thơng khống chế dịch hại SRT gây Py KET LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận: - Tại Thanh hóa có lứa SRT năm - Đã hoàn thiện qui trình sản xuất NPV sâu róm thơng dạng dịch thể hương pháp thủ công, thuận tiện, dễ làm, đạt hiệu kinh tế bước đầu xây dựng lực qui trình sản xuất NPV sâu róm thơng dạng bột - Dùng NPV sâu róm thơng ¢ dang dich thé va dang bot làm giảm quần M SRT tir 55,2 - 83,3% tuỳ theo điều kiện vùng trồng thông lứa SRT fong nam / - So bo tinh duoc gid | lit NPV sau rém thong dang dich thể 32.500 đ al kg ché phim NPV sau rém thong dang bot 30.000đ - Dùng NPV sâu róm thơng tác nhân sinh học khác để trừ SRT thay đần tuốc sâu hoá học làm tăng khả ký sinh (Ong den va ong mat đỏ) -Bước đầu xây dựng mơ hình tổng hợp phịng trừ SRT tiện tích 30ha tơng Hàm rồng, Thanh hố Đề nghị: ~ Tiếp tục hồn thiện qui trình kỹ thuật sản xuất NPV sâu róm thơng dạng bột Ê nâng cao hiệu lực chế phẩm - Xây dựng mô hình tổng hợp phịng trừ SRT diện rộng Thanh hóa KẾT QUÁ TẠO VÀ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM NPV SÂU ĐO XANH (ANOMIS FLAVA FABR) BẰNG PHƯƠNG PHAP THU CONG TREN VUNG ".— DAY CHAU GIANG, HAI HUNG (1991 -1993) PGS - TS Truong Thanh Gian PTS Tran Quang Tan KS Nguyén Dau Toan va CTV* I DAT VAN DE Day la cay công nghiệp ngắn ngày có giá trị kinh tế cao Ngồi việc xuất dạng nguyên liệu, thảm đay thu ngoại tệ trao đổi hàng hoá phục vụ cho sản xuất, tiêu dùng, đay cịn dùng để sản xuất bao bì đựng nơng phẩm loại hàng hố khác Nghề trồng đay có nước ta từ lâu, chủ yếu tập trung tỉnh Hải Hưng, Thái bình Nam hà Thanh hố Hà Nội tĩnh Hải hưng chiếm tới 50% diện tích đay nước Châu giang lại huyện điểm trồng đay tính Có năm diện tích đay miền Bắc đạt tới 15.000 (1976-1978) Năng suất phẩm chất đay tơ phụ thuộc vào nhiều yếu tố sâu, bệnh hại đay đóng vai trị quan trọng Trên đay có 29 loài sâu hại nguy hiểm đáng sợ sâu đo xanh (Anomis flava Fabr), có năm sâu đo xanh phát triển thành dịch làm giảm đến 50 - 70% suất tơ Để phòng trừ sâu đo xanh người dân vùng đay dùng thuốc sâu hố học chủ yếu, có nơi phun định kỷ - I0 ngày/lần, có nơi phun thuốc sâu xuất hiện, có năm ving day Chau Giang phải dùng máy bay để phun thuốc sâu hoá học đại trà trừ sâu đo xanh (1979, 1980, 1981) Việc dùng thuốc sâu hoá học tràn lan gây hậu nghiêm trọwe@ tiêu diệt loài thiên địch tự nhiên sâu đo xanh loại sâu hại khấc, vùng đay Châu giang năm 1976, 1985 1988 có dịch sâu đo xanh lớn, mật độ sâu từ 400 - 900 cm/m”, gây hại nghiêm trọng cho sản xuất đay Để hạn chế sử dung hợp lý thuốc sâu hoá học |PTS Nguyễn Văn Thiểng| Hue;|KS Huỳnh Thị Huệ: KS Trần Đình Phả; Thạc sĩ Nguyễn Thị Diệp KS Dao Thi KS Phạm Thị Hạnh; Phương Dung; Phí Thị Hà: Vũ Thị Hiên Phùng Thị Hoa :| Lê Thị Dung} Mai phòng trừ tổng hợp sâu đo xanh hai day năm gần day Viện bảo vệ thực vật có nghiên cứu thiên địch sâu đo xanh tren day chẳng hạn ong mắt đổ ký sinh tren trứng sâu xanh va NPV sau xanh gây bệnh thối nhãn cho đối tượng hại Một vấn đề đặt sản xuất nhiều chế phẩm NPV sâu đo xanh Muốn phải nuôi sâu đo xanh hàng loạt nhằm thu sinh khối NPV với khối lượng lớn Để đạt mục đích phải tạo thức ăn nhân tạo phụ phẩm rẻ tiên, dễ kiếm Việt nam để nhân nuôi đối tượng hại với số lượng lớn phịng thí nghiệm Đáng tiếc, đến chưa tìm loại thức ăn nhân tạo phù hợp cho sâu đo xanh Trong tự nhiên sâu đo xanh thường bị bệnh thối nhữn chết hàng loạt điều kiện định Lợi dụng đặc điểm để giải mâu thuẫn nhóm nghiên cứu tiến hành phương pháp thu gom sâu chết bệnh đồng thu sâu khoẻ (tuổi II, IH, IV, V) ngồi đồng vẻ phịng thí nghiệm để lây,nhiễm NPV nhằm thư hồi sinh khối NPV với số lượng lớn, ngồi cịn nghiên cứu vài yếu tố ảnh hưởng trực tiếp đến việc tạo sinh khối NPV sâu đo xanh diéu kiện phịng thí nghiệm phương pháp thủ cơng vùng chuyên canh đay Nội dung nghiên cứu : - Thăm dò nồng độ lây nhiễm NPV tối ưu cho sâu đo xanh - Xác định tuổi sâu non thích hợp nhiễm NPV - Phương pháp tạo sinh khối NPV sâu đo xanh lối thủ công vùng chuyên canh đay - Thử hiệu lực NPV sâu đo xanh sản xuất phương pháp thủ công việc phòng trừ sâu đo xanh hại đay đồng ruộng II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : Thí nghiệm tạo sinh khối NPV sâu đo xanh bang phương pháp thủ còng tiến hành vùng đay Châu Giang, Hải hưng vào tháng 5, hang nam - Sâu đo nuôi lây nhiễm xanh tuổi II, IH, IV, V thu gom từ đồng nhà để NPV sâu đo xanh theo mục đích thí nghiệm - Lá đay tươi (càng non tốt phun ướt đồng dung dịch NPV sâu đo xanh dùng để nuôi sâu thí nghiệm - Ni sâu thức ăn (lá tươi) nhiễm NPV sâu đõ xanh, -Ö ngày thay tươi lần Đối với thí nghiệm thăm dị Xác định vài yếu tố ảnh hưởng trực tiếp đến việc tạo sinh khối NPV sâu đo xanh,chúng “8uôi tập thể hộp lồng ni sâu Ngồi cịn ni sâu tập thể met quay cot nho dé thu sinh khối NPV với số lượng lớn - Nuôi sâu lây, nhiễm NPV độ tuổi khác với nồng độ Ï nhiễm khác để tìm hiểu ảnh hưởng chúng đến việc tạo sinh khối NPV - Sau nhiễm từ ngày thứ ba trở tiến hành theo dõi tiêu cần thiết Thu gom để riêng sâu bị chết NPV sâu đo xanh Để khoảng - L0 ngày cho sâu chết benh thối rữa hồn tồn, sau đem nghiền nhỏ cối máy xay thích nhiều lớp để loại bỏ cặn bã (xác sâu) Tiến hành dung dịch lọc (3000 vùng/phúU) vòng 30 phút để tỉnh chế dịch NPV hợp Lọc qua xơ L lí tâm - Dém PIB (pol/ml) cha dịch thể ĐPV thơng qua bảng đếm hồng cầu kính hiển vi quang học xác định đương lượng sâu bệnh - Cho thêm 50% ghicerin bảo quản dịch thể NPV nhiệt độ thích hợp - Phun thử nghiệm dịch thể NPV sâu đo xanh + 5% đường đỏ đồng đay để xác định hiệu lực NPV sâu đo xanh thu từ-phương pháp tạo sinh khối NPV lối thủ công vùng chuyên canh đay - Các thí nghiệm thực với ba lần nhấc lại Tính tốn số liệu theo phương pháp thống kê thông dụng Ill KET QUA THI NGHIEM : Xác định nồng độ lây nhiễm NPV tối ưu cho sâu đo xanh : Trong thí nghiệm này,qua năm chúng tơi dùng sâu đo xanh tuổi IV để lây nhiễm NPV sâu đo xanh với nồng độ khác Kết thí nghiệm trình bày bảng I Qua bảng | va qua thí nghiệm chúng tơi thấy : nồng độ lây, nhiễm NPV ban đầu cao (1,72 x108 PIB/ml 1.72 x 109 PIB/ml) sâu chết sớm (ngày thứ sau lây nhiễm NPV) Số sâu vào nhộng củng thấp so với sâu nhiễm nồng độ thấp hơn, nhiên chết sớm nên nhiễm sâu nồng độ cao cho sinh khối NPV nhiễm sâu nồng độI,72 x 10” PIB/ml Tóm lại theo chúng tơi nồng độ nhiễm NPV thích hợp cho sâu đo xanh nhằm thu hồi sinh khối NPV với số lượng lớn 1,72 x 107 PIB/ml Ii Bảng : Ảnh hưởng nồng độ nhiễm NPV đến trình tạo sinh khối NPV £ sâu đo xanh (Anomis flava Fabr) phòng thí nghiệm Ị Tuổi Nồng độ ohiém NPV | sâu ban đầu (ŒIB/n)) Số Trọng lượng sâu | lượng khoé | sauthi | Tổng số sâu chết nhiêm NPV tính trung bình/lần nhắc So nhiễm | nhiễm NPV | nghiệm | lượng | (con} (con) (gr/con) NPV I Trong Duong Tổng số nhơng tính TB/lân nhắc Số lượng (con) % 0,39 x 103 24 96,0 3.2 3,42 x 108 28.0 4,0 5,68 x 108 20.0 % lượng tất sâu chết (gr) 4,0 01 lượng sâu | chết (PIB/con) Đối chứng IV 0,08 75 1,72x 10° Iv 0.08 75 18 | 4,0 1,72x107 IV 0,08 75 20 1,72x108 IV 0,08 75 21 4,0 3,8 5.41 x 108 16,0 1,72x10? IV 0,08 75 23 4,0 3.5 5.11x 108 8,0 40|)` Xác định tuổi sau non thich hop lay nhiém NPV Trong thí nghiệm nhiễm sâu xanh ba đỹ tuổi khác (HI, IV V) với nồng độ nhiễm 3,14 x107 PIB/ml để xác định ảnh hưởng tuổi sâu lây nhiễm đến trình tạo sinh khối NPV sâu đo xanh qua từn tuổi sâu non thích hợp nhiễm NPV nhằm tạo sinh khối NPV với số lượng lớn Số liệu thí nghiệm thu được trình bày bảng Qua bảng qua thí nghiệm chúng tơi thấy : tuổi III sâu chết bệnh sớm (vào ngày thứ sau lây nhiễm NPV) chết tập trung vào ngày 6, 7, sau nhiễm NPV Sâu chết muộn chết tập trung vào ngày 7, 8, sau nhiễm NPV, số sâu vào nhộng nhiều so với sâu nhiễm tuổi TIT Sau chết tuổi IV, tuổi V cho đương lượng sâu cao Sự sai khác tiêu theo dõi sâu tuổi VI, tuổi V không rõ Qua tính tốn theo chúng tơi nhiễm sâu đo xanh cuối tuổi IV đầu tuổi V thích hợp Bảng : Ảnh hưởng tuổi sau nhiễm NPV đến trình tạo sinh khối NPV sâu đo xanh (Anomis flava Fabr) phịng thí nghiệm Néngdo | nhiễm NPV ban đầu (PIB/mÙ) 3,14x107 \ 3,14x107 3,14x107 Tuổi Trọng sâu lượng sàu khoẻ | Tổng số sâu chết nhiễm NPV Số tính trung bình/lần nhắc lượng TB/idn nhac sauthi | Số nhiễm | nhiém NPV ¡ nghiệm | lượng NPV (gr/con) (con) | (con) Wm 0.05 IV V 75 0.08 010 75 75 Tơng số nhộng tính 23 Trọng % lượng tất sâu chết (gr) 92.0 20 | 80,0 19 | 76,0 34 Đương lượng sáu | chết (PIB/con) 4,97 x 108 42 4,0 5.51 x 108 5,64 x 108 Số lượng (con) % 8.0 | 20,0 24,0 Phương pháp tạo sinh khối NPV sâu đo xanh lối thủ cơng vùng chun canh đay Ngồi thí nghiệm chúng tơi cịn tiến hành theo dõi việc nhiễm hàng loạt sâu đo xanh từ tuổi !I đến tuổi V với nồng độ nhiễm NPV sâu đo xanh ban đầu 3.22 x 107 PIB/ml nhằm thu chế phẩm NPV sau đo xanh với lượng lớn dùng cho thử nghiệm hiệu lực NPV sau đo xanh đồng ruộng Kết việc nhiễm NPV sâu đo xanh hàng loạt trình bày bảng Bảng : Tỉnh hình nhiễm NPV sâu đo xanh phương pháp thủ công vùng chuyên canh đay Châu giang, Hải hưng Tháng, năm | Nồng d6 nhiém, | Tổng số sâu, | Tỷ lệ sâu chết | Đương lượng | lây nhiễm NPV ban dầu nhiễm tính trung bình lứa tuổi (PIBml) (con) V/ 199] 3,22 x 107 V/ 1992 VI/ 1993 NPV bệnh thuhồi | sâu chết bệnh Nhiệt độ ẩm độ (%) (PIB/con) (OC, %y 15.230 82,7 3,14.x 108 | 28,4°C: 81% 3,22 x 107 7.320 91,2 2,78 x 108 | 29,3°C; 79% 3,22 x 107 4.210 69,1 2,78 x 108 | 29.89C; §3% Qua bảng qua thử nghiệm, quan sát thay nhiém NPV sau xanh phương pháp thủ công với số lượng lớn vùng chuyên canh đau thực nguồn thức ăn ni sâu đo xanh hàng ngày (lá day tươi) cung cấp cách dễ dàng Hiệu nhiễm NPV tỷ lệ sâu chết bệnh thu hồi cao (từ 69,1 - 91,2%) Thời gian (tháng V, VI hàng năm) thường có mưa rào, nhiệt độ ẩm độ khơn g khí đất cao (269C-290C: 75 85%) tạo điểu kiện thuận lợi cho bệnh thối nhữn (bệnh virút côn trùng) sâu đo xanh phát triển Lợi dụng hội thu sâu chết bệnh đồng thu nhập sâu khoẻ phịng thí nghiệm lay, nhiễm NPV nhằm tạo để tạo chế phẩm Phương pháp đễ thao tác rẻ tiền, Tuy nhiên thực sâu đo xanh xuất tập trung phát thành dịch Tóm lại việc sản xuất sinh khối NPV sâu đo xanh phương pháp thủ cong tai vung chuyên canh đay mở triển vọng sử dụng chỗ tác nhân gây bệnh thối nhữn cho sâu đo xanh mắt xích quan trọng hệ thống tống hợp trừ đối tượng sâu hai Trước mắt chưa tìm thức ăn nhân tạo thích hợp để ni sâu đo xanh hàng loạt phịng thí nghiệm theo chúng tơi phương pháp rẻ tiền có hiệu kinh tế mà người dân vững day chấp nhận cna Thử hiệu lực NPY sâu đo xanh sản xuất phương pháp thủ cơng việc phịng trừ sâu xanh hại đay đồng ruộng Trong thí nghiệm tiến hành thử nghiệm phun dịch NPV thu từ sâu chết bệnh thối nhữn thôn g qua phương pháp thủ cơng, qua đánh giá hiệu lực của dung dịch NPV Cụ thể phun dịch NPV sâu đo xanh đay với nồng độ 3.22 x 07 - 3,48 x 107 PIB/ml có trộn thêm5% đường đỏ tăng nồng độ bám dính dịch thể NPV day Ket qua thí nghiệm trinh bày bảng Qua bảng quan sát theo dõi ruộng thí nghiệm chúng tơi thấy ruộng day có phun NPV sâu đo xanh với nồng độ phun thích hợp tỷ lệ sâu chết bệnh từ 59,4 - 68,7% (tuỳ theo năm) Điều khẳn g định chế phẩm NPV sâu đo xanh thu từ phương pháp sản xuất thủ công vùng day lực trừ sâu đo xanh hạn chế phát triển quần thể sâu hại cé hieu Bảng : Thử hiệu lực NPV sâu đo xanh sản xuất từ phươ ng pháp thủ cơng phịng trừ sâu đo xanh ruộng đay (Châu giang, Hải hưng) Tháng, năm | Nơi làm thí nghiệm | làm thí (xã) nghiệm Diện tích Nồng độ dịch thử nghiệm | Sau bat đầu Ty lệ sâu NPV phun (ha) | chết sau nhiém | chet bệnh (PIB/ni) (ngày) (%) V/ 1991 Đội 10, Dai Tap 4,6 3,22 x 107 612 V/ 1992 Kênh Hạ, Liên Khê 17 3.15 x 107 59,4 VỊ/ 1993 Đội 10, Đại Tập 5,2 3,48 x 107 68.7 IY KẾT LUẬN VÀ ĐỂ NGHỊ Kết luận : a Tuổi sâu đem lây nhiễm nồng độ lay nhiễm NPV ban đầu ảnh hưởng trực tiếp đến trình tạo sinh khối NPV sâu đo Xanh, Nhiễm sâu đo xanh cuối tuổi IV đầu tuổi V với nông độ nhiễm I,72 x 107 PIB/mi thích hop dé-tao sinh khối NPV sau đo xanh với số lượng lớn b NPV sâu đo xanh sản xuất phương pháp thủ Công chuyên canh đay có hiệu lực việc phịng trừ sâu đo xanh ruộng (tỷ lệ sâu chết bệnh NPV từ 59,4 - 68,7%) vùng hại đay đồng Đề nghị : a Cân tiếp tục nghiên cứu thêm nhương pháp tạo sinh khối NPV sâu đo xanh lối thủ công vùng day dé hiệu chế phẩm virút rat quy trình sản xuất cụ thể hữu b Tiếp tục thử hiệu lực NPV sâu đo xanh tren đồng ruộng với quy mô lớn để xác định hiệu NPV sâu đo xanh mắt xích hệ thống tổng hợp phịng trừ đối tượng sâu hại có chương trình tập huấn, khuyến cáo việc sử dụng chế phẩm đến hộ nông dan vùng chuyên canh day./ MỘT SỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU NUÔI, NHÂN SÂU KHOANG ( SPODOPTERA LITURA FABR) BẰNG THỨC ĂN NHÂN TẠO PGS TS Truong Thanh Gian KS.Ngun Đậu Tồn KS Trần Đình Phả PTS Trần Quang Tấn CTV* UV DAT VAN DE: Trong năm qua,Viện bảo vệ thực vật tiến hành nghiên cứu công nghệ nuôi loại sâu hàng loạt có sâu khoang (Spodoptera Htura Fabr) thức ăn nhân b(TANT) sản xuất từ phụ phẩm rẻ tiền, dễ kiếm, thuận tiện điều kiện Việt Để nhân ni sâu khoang với số lượng lớn địi hỏi phẩi có cơng nghệ hồn Đi theo hướng nhóm nghiên cứu ni sâu virút trùng Viện bảo vệ ye vat tham gia chương trình cơng nghệ sinh học (KC-08) với đề tài KC-08-14 nghiên cứu xuất ứng dụng chế phẩm vi sinh vat, nấm để trừ sâu hại trồng” F M) Để nhân, nuôi sâu khoang với số lượng lớn tiến hành nội dung: - So sánh việc nhân nuôi sâu thức ăn nhân tạo có agar khơng có agar (2 tho - Hồn thiện công nghệ nuôi sâu khoang thức ăn nhân tạo điều kiện phịng thí nghiệm > H/ VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚU 1- Vật liệu: Các vật liệu dùng để nhan, nuôi sâu đĩa Petri, khay nhựa loại, lọ penicillin, Hhung nhựa chia õ, lọ thuỷ tỉnh loại 0,51 ;4.1, lồng lưới sắt nuôi bướm, thức ăn nhân tạo IMM, va agar vv - L 2- Phương pháp: a- Nuôi sâu tập thể đĩa Petri, đĩa đặi từ 100-150 trứng sâu thụ tỉnh Khi sâu nở phết thức ãn vào thành đĩa Petri đặt đĩa quay hướng có ánh sáng mạnh để sâu tiếp xúc với thức ăn Khi sâu non bám vào thức ăn nhặt hết xơ Hàng ngày kiểm tra mốc, sâu non, thay phân Khi sâu non đến tuổi tách bớt sâu đĩa 'chỉ nuôi đĩa từ 20-30 Chọn giống cho hệ sau sâu bước vào tuổi 4, tuổi F [* KS Dao Thi Hue;(KS Huỳnh Thị Hue Moa; Phi Thi Ha; Vũ Thi Hien - KS Phạm Thị Hạnh;|Lê Thị Dung} Phang Thị b- Nuôi cá thể: Chủ yếu nuôi để giống cho hệ sau Khi sâu đến tuổi tách vào lọ pênicillin (1 con/lo) cho vào khay nhựa chia để sâu hoá nhộng Hàng cho sâu ăn thêm thức ăn, theo dõi tốc độ sinh trưởng sâu thay phân cần c- Thu nhộng bảo quản nhộng: Khi nhọng xuất khung nhựa sau 2-3 ngày iến hành thu nhộng (tức nhộng có mâu vàng thãm, vỏ cứng) Cho nhộng vào đĩa ¡ ngày đêm, sau đem rửa xử lý dung dịch thuốc tím 0,5% phút, sau rửa nhộng nước lã tiến hành xác định nhộng đực, nhộng (an xác định trọng lượng nhộng đực, cái, cuối cho vào lọ thuỷ tỉnh để bảo quản | d- Ghép bu6m va thu trứng: Kiểm tra nhộng hàng ngày bướm xuất hiện, tiến ghép cặp (từ 3-5 cặp cho vào lọ thuỷ tỉnh lít), ghép vào lồng lưới từ 10Krập, bịt xö Hàng ngày phải thay thức ăn, nước uống cho bướm, bướm cho ăn thêm dung dịch mật ong 10% Sau 2-3 ngày bướm đẻ, bướm thường xe Khi có trúng tiến hành thu trứng cách thay xơ hàng ngày tra trứng tốt, xấu (trứng thụ tỉnh hay không thụ tỉnh) II KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU _ Ty 1é trứng thụ tỉnh ˆ_ Trên môi trường nhân nuôi sâu hai loại thức an nhân tạo( có agar 2MM) qua ‘he cho kết trứng thu tinh sau : ~ Bang 1: Tỷ lệ trứng thụ tỉnh sâu khoang điều kiện nuôi loại thức ăn nhân tạo khác co Bằng thức ăn nhân tạo có agar hệ Số sâu đếm ¡ | TStrứng | sau nở | Nhiệt } đưa TN I ngày độ k- PO ' Siuong | % 50 50 50 Ee 26 | 100 đ 100 Ẹ : ñ 50 50 50 nT 100 r ữ | 52 24 | 48 30 | 50 43 68 41 31 28 7L Am Số sau đếm | Nhiệt | Ẩm độ | TStrứng | sau nở i | độ (%) | đưa TN ngày (%) | 86 | 27,3 | 87.8 | 50 100 fa 62 50 T71 100 56 58 100 58 58 22 | 44 31 62 | 295 | 88.3 6§_|68| |” 23 27 100 82 62 | 56 | 288 | 80,5 Siugng | % 50 68 100 50 50 100 |(°C) Bằng thức ăn nhân tạo7 À4M 72 21 47 33 100 50 100 ọ | 40 | 80 | 273 | 878 50 50 50 50 50 100 46 3442| [Co 62 eden 72 42 94 66 | 28.8 | 89.5 72.1721 32 14 64 72 50 64 28 | 205 | 883 64 72 Nhận xét: Qua bảng thấy với hai loại thức ăn (agar 2MM) cho tỷ lệ trứng tương đương không sai khác nhiều lắm, để 100 theo đõi có tỷ lệ trứng nở so với đặt 50 đĩa, phụ thuộc nhiều đến thao tác khác kiện ôn, ẩm độ phịng - Tỷ lệ sâu non sống sót Để biết ¡được số lượng sâu non thu hệ nuôi tiến hành dõi tỷ k§t sâu từ tuổi đến tuổi nuôi hai loại thức ăn agar 2MM trình bây bảng Bảng 2: Tỷ lẹ sâu non sống sót từ tuổi đến tuổi nuôi sâu hai loại thức Gn agar va 2MM ‘he sau Bằng thức ăn agar SL sau thu SL sau nudi ban đầu hồi œ | ` Băng thức ăn 2M SL sâu thu SLsâu nuôi 24 ban đầu 50 30 35 70 100 100 100 82 51 62 50 100 100 50 70.7” 50 44 70 F : 100 72 72 50 30 100 — % hồi 20 40 45 51 72 45 51 72 54 66 46 45 9290— 82 82 kại 73 60 62 73 69 Chú thích: điều kiện nhiệt độ trung bình 27,3 độ C ẩm độ 88,3% Qua bảng cho thấy số lượng sâu non để đĩa Petri sâu tuổi l nhiều phải tách nhiều lần qua tuổi khác đến tuổi cho tỷ lệ thu hồi cao (cứ 100 sâu non tuổi cho kết qua thu hồi cuối từ 51% - 82% ) 3- Khả thu hồi nhộng Thí nghiệm tiến hành tháng 7/1993 nhằm đánh giá khả thu hồi nhộng để tính tốn số lượng sâu giống cân có cho hệ sau Kết thí nghiệm biểu bảng 3.(xem trang sau) 3: Tỷ lẹ thu hồi nhộng sâu khoang khung nhựa chia ô (Viện BVTV - 1993) Thức ăn 2MM Thức ăn có agar nhấác | Tổng số | Nhộng | Chếtvà | Thời | Tổngsố | Nhộng | Chếtvà | Thời i nhộng sống đị dạng | gian hoá | nhộng sống dị dạng | gian hoá theo đối (%) 29 (%) 30,0 39,4 59,9 29 nhộng | theo đối (ngày) 8-9 - 29 29 29 29 29 29 “29 29 29 20 29 29 (%) (%) 69,0 55 61,0 31 45 39 nhộng (ngày) 8-9 - 34,0 66 | 710 | - 22-2 s2 | 450 | 55 : 56,0 44.0 : 59,1 409 | 9-10 60,5 39,5 10 493 | 50.7 10 | 55.1 449 | 10 43,0 570 | | 10 73 70 | 10 Nhận xét: Trong hai loại thức ãn cho tỷ lệ hoá nhọng tương đương, bình qn ảng 5I - 63,4% Cịn lại nhộng bị chết, đị dang, nhộng lột xác không hồn tồn ¡a cần có 1.000 nhọng cho hệ sau cần phải có 1.700 -1.750 sâu non ỗi hệ 4- So sánh trọng lượng nhộng qua kết nuôi sâu môi trường thức ăn nhân „ co agar khơng có agar (2MMI) ( Kết theo dõi trình bảyở bảng 4: Bảng 4: Trọng lượng nhộng ni mơi trường thức ăn nhân tạo có agar Khơng CĨ agar The he udisau | Thức ăn 2MM Nhong duc SL TL binh theo | quân l | dõi (mgr) 138 310 83 44 324,7 291,6 314,7 292,2 negai | |0] 4212 he I Thức ăn c6 agar Nhộng Nhộng đực SL TLbinh | SLtheo | TLbinh Nhong cai SL | TLbinh 410 257 53 57 282,4 313,7 312,2 304,7 112 305 62 113 313,1 315/2 343,38 131,93 98 270 53 126 314,2 342,1 356,2 348,84 135 4312 172 4442 | 187 | 461,2 theo | quan dõi (mgr) dõi quan | theo | quan (mgr) dõi (mgr) Qua theo déi va qua kết bảng cho thấy: môi trường thức än nhan tạo có cho trọng lượng nhộng cao so với nhộng sâu nuôi thức ăn khơng có Ở hệ I (thế hệ thu sâu đồng về) cho ta trọng lượng nhộng cao hệ giảm dần cần phải phục tráng giống sâu sau vài hệ Ứtrong phòng 3- Tỷ lệ nhộng vũ hoá Chỉ tiêu nhộng vũ hoá quan trọng việc phát triển hệ sâu tiếp theo, định số lượng af chất lượng sâu nuôi hệ Trong điều kiện nuôi sâu ăn nhân tạo phịng thí nghiệm chúng tơi thu kết sau: Bảng 5: Tỷ lệ nhộng sâu khoang vũ hoá thành bướm a- Nudi bang thite an co agar Buom Buém nhắc | Loainhong | bình Bướm | khơng „ theo dõi thường | dị dạng | thoát vỏ (%) 75.12, (%) Nhộng chết nhọng(%) | (œ) Nhiệt độ | Ẩm đọ (độ C) (%) : 22,88 570 | 388 | gã = 3150 | 6,0 9,0 223 25,5 — 99 ~ 25 12,5 | 388 873 8s” b- Ni thức ăn khơng có agar (2MM) flan nhc | i lại ihe I hế ‡ r | Bướm bình | Bướm dị | khơng | Nhong nhộng thường theo dõi qạ) lệ Bướm Loại ¡ (2) _| Nhong duc (%) (3) 61,7 80,5 | | Nhong đực| 70,0 750 600 73.0 Nhiệt độ Ì Ẩm độ dạng | thốtvỏ | (%) (%) chết | (đọC (%ˆ (4) (3) (6) (7) (8) 5,0 10 2,1 4,5 27,3 - 27,9 87.8 - 27,10 15,0 - (%) 24,0 20 55 | 160 45 21 3,9 20,4 |" 288 | 895 | - @) @) (4) 50,0 Nhong cai | 63/21 60.19 " 65.0 Nhong cai | "7210 51,0 15,5 21 1210 | | 910 6.2 17,0 (5) 40 10 20 3.0 5,0 9,0 (6) | 31,0 | 2490 | | 2571 26.9 16,7 | | 230 Œ) (8) 273 | 878 288 | 895 wn Qua bảng cho thấy: hai loại thức ăn nhân tạo cho ty lệ nhộng võ hoá tương g Nói chung bướm vũ hố đạt tối đa 72% (cả nhọng đực nhong cai), nhộng bị chết, dị dạng, vũ hố khơng khỏi nhộng Tóm lại để nâng cao tỷ ng vũ hố cân phải tiếp tục nghiên cứu yếu tố liên quan đến tiêu 6- Khả đẻ trứng thời gian đẻ bướm Chúng tiến hành thí nghiệm để tìm hiểu khả nang dé trứng thời gian đẻ bướm sâu khoang nuôi môi trường thức ăn nhân tạo khác Kết thể bảng Bảng 6: Khả đẻ trứng thời gian dé bướm Thức ăn 2Ä4M Cap ghép SL trứng Thời gian để | b.q.bướm đẻ (ngày) |1635 |3 L27x2# |79 |3 T 2x2 @ 2x2 2x2 2005 2660 2x2 22x29 27x29 |864 |3 [921 |3 2x2 x29 | SLtrứng |3 |3 1092 |4 |1421 ]4 - 379 817 1002 1330 346 - |432 [460 380 710 Cặp ghép SL Thức ăn agar trứng de 27x 2¢ | 1047 207% 29 Thời (ngay) |3 523 |3 l3 1361 1421 [1242 |3 2Zx2@ |560 |3 24x29 1375 2Zx2e 2Zx2e |2122 |2842 |J2Zx2e [799 [2Zxa2g Toại 27"x2¢ | 669 | SL trimg gian để | b.q.bướm 14 T2 |3 13 TC [el 284 399 495 334 437 Qua bang cho thấy thức ăn 2MM thức an agar khơng có sai khác số mg trứng đẻ bình quân bướm Tuy nhiên hệ khác tỷ ang hạn hệ III bình quân bướm để 1.002 đến 1.420 quả, đến Rế hệ VII bình quân cao bướm đẻ 710 - 546 qủa) Càng hệ trứng thụ tỉnh tượng trứng phủ lơng bảo vệ đồng fhe I, H, HI (các hệ đâu) giảm dân hẳn Điều cần phải tiếp tục lên cứu khống chế yếu tố ảnh hưởng đến khả đẻ trứng bướm (thức ăn, ôn, độ, ánh sáng ) IV/ KET LUẬN VÀ DE NGHỊ a- Kết luận 1- Đã tạo môi trường thức ăn nhân tạo (có agar khơng có agar) bảo đảm việc ni sâu khoang với số lượng lớn phịng thí nghiệm 2- Trong hai loại thức ăn nhân tạo có khả ni nhân sâu cân lưu ý thức ăn khơng có agar sâu non dễ chết sâu tuổi 3- Ni sâu thức ăn có agar giá thành chế phẩm NPV cao, khơng sản xuất chấp nhận 4- Trong năm tháng: 4, 7, 11 thường khó ni sâu khoang phịng thí nghiệm sâu dễ bị bệnh, chết tuổi 3, chết hàng loạt, say khó khăn cho cơng tác nhân ni 5- Có tượng thối hố giống sâu khoang ni liên tiếp hệ phịng thí nghiệm dẫn đến trứng khơng có-lơng phủ bảo vệ, số lượng trứng giảm dân trứng không thụ tỉnh tăng lên b- Đề nghị 1- Cần tiếp tục nghiên cứu khâu kỹ thuật giống, thức ăn, phương pháp nhân nuôi vv để nâng cao khả sinh sản bảo toàn giống sâu khoang 2- Tiếp tục hoàn thiện trang thiết bị để bảo đảm điều kiện tối ưu cho cơng nghệ ni sâu khoang phịng thí nghiệm MOT SỐ KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH VIRUS CUA SAU KHOANG (SPODOPTERA LITURA FABR) VÀ KHẢ NĂNG SẢN XUẤT VÀ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM NPV SÂU KHOANG ĐỂ TRỪ ĐỐI TƯỢNG HAI NÀY TRÊN CÂY TRỔNG NÔNG NGHIỆP P&S.TS Truong Thanh Gidn PTS Tran Quang Tấn Thac si Nguyén Thi Diép va CTV * L DAT VAN DE Virus gây bệnh cho trùng nhóm vi sinh vật thiên địch quan trọng, có nhiều triển vọng dùng biện pháp sinh học phòng chống lồi sâu hại trồng Virus có đặc điểm bật so với nhóm virus khác : tính chun hố hẹp (chúng gây bệnh cho lớp trùng) chứng có vỏ protem bao bọc ADN ARN thể thực khuẩn Trong tự nhiên loại sâu hại có bệnh virus ( thường gọi bệnh thối nhữn), bệnh có khả khống chế với chừng mực định phát triển quần thể sâu hại đồng ruộng, thí dụ sâu xanh (Heliothis armigera (Spodoptera Hiibn), sau khoang litura Fabr), sau xanh ( Anomis flava Fabr) Virus gay-bénh thối nhữn cho sâu hại xác định NPV (virus nhân đa diện) Virus sống ký sinh thể sống trùng sử dụng NPV để trừ sâu hại cách dựa vào nguồn bệnh có sẵn tự nhiên ni sâu hại với số lượng lớn Sau cấy, nhiễm NPV cho ching dé sản xuất chế phẩm NPV phun lại đồng ruộng để trừ đối tượng hại Đi theo hướng này, năm qua Viện BVTV nghiên cứu bệnh virus sâu khoang, khả sản xuất sử dụng chế phẩm NPV sâu khoang để trừ đối tượng hại trồng nơng nghiệp Từ tham gia chương trình CNSH cấp Nhà nước KC - 08 thực đề tài KC-08-14 “nghiên cứu sản xuất ứng dụng chế phẩm vi sinh vật, nấm để trừ sâu hại trồng mức độ, quy mơ đề tài tăng lên mức cao Báo cáo đề cập đến kết nghiên cứu (*) KS Nguyễn Đậu Toàn : KS Trân Binh Pha: KS Phạm Thị Hạnh “Mai Phương Dung ; Phùng Thị Hoa: Phí Thị Hà: Vũ Thị Hiên KS Huynh Thị Huệ: II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thu thập phân lập NPY : Lấy mẫu sâu khoang bị bệnh virus thu thập đem nghiền máy xay sinh tố hay cối dã tay,lọc qua vải mỏng - lớp để vắt bỏ xác sâu Lấy dịch lọc đem ly tâm dịch tốc độ 5000 vòng/ phút 10 phút, lấy nước bỏ đi, giữ lại phần lắng động, chưa tăng them tốc độ ly tâm, giữ pH trung tính.Từ xác định dịch bệnh qua kính hiển vi điện tử tren lưới điện có màng thấm Cocllodion nhuộm PWA làm Tiêu âm theo phương pháp soi kính hiển vi phân pha kính hiển vi điện tử Bệnh virus sâu khoang : Sau khoang dùng để thí nghiệm nuôi cách ly (do phận nuôi sâu cung cấp) thức ăn nhân tạo dùng để nhiễm có thành phần : - Lõi ngô 140 gr (đã sấy,nghiên lọc) - Bã bia 60 gr - Bã đậu phụ 50 gr - Bột đậu xanh 10 gr - Men (noi) 45 gr - Kho dau cam 30 gr - Acid Ascorbic gr - Acid Benzoic 3,5 mi - Cồn 960 80,0 mi - Formalin 1-2ml - Nước sôi 100°C 600 ml ™ Dùng sâu khoang khoẻ 10 ngày tuổi (sâu sâu cấp) lấy nguồn bệnh NPV sâu khoang phận nuôi phân lập xác định rõ đem trộn vào thức ăn nồng độ thơng thường Sau ni cách ly lọ pênicillin để độ lay,nhiễm Số lượng theo dõi 50 Hàng ngày theo dõi triệu chứng diễn biến bệnh sâu chết Từ xác định tượng bệnh, nguyên nhân bệnh sâu chết Sau xác định tượng bệnh, nguyên nhân theo phương pháp chân đoán bệnh kiểm tra bệnh Tìm hiểu hình thái bệnh virus : Dùng phương pháp xác định siêu cấu trúc qua lát cắt mỏng soi kính hiển vi phân pha kính hiển vi điện tử Lấy mẫu bệnh NPV phân lập hồ vào mơi trường agar dạng long lam kính,sau 10 phút mơi trường egar có chứa dịch bệnh NPV đơng đặc, dùng lưỡi dao cạo cát mỏng Từ mẫu cắt cực mỏng soi kính hiển vi điện tử với độ phóng đại 13.000 - 76.000 X để xác định kích thước hình thể cấu trúc NPV Rồi dùng 1/10 NaOH để phá vỡ lớp vỏ nhuộm am với PWA (Acid phosphotengistic) va ding phuong pháp sắc ký điện di làm ADN NPV sâu hại phân tích men Ecart từ xác định thước, hình thái, cấu trúc NPV sâu khoang kích Lây cấy nhân tạo cho sâu khoang : Nghiên cứu số đặc điểm sinh học bệnh NPV số yếu tố ảnh hưởng đến lay cấy động lực bệnh 4.1 Thí nghiệm hiệu lây bệnh chéo loại sâu hại : Đối tượng loại sâu hại để thử sâu khoang sâu xanh sâu tơ sâu keo ngài gạo sâu không bị bệnh (do phận ni sâu cung cấp) Sâu thí nghiệm tuổi Dịch NPV loại sâu dùng nồng độ thơng thường lồi sâu thí nghiệm với NPV đối tượng khác trộn vào thức ăn theo ty lệ 0,Iml/gr thức ăn Thí nghiệm với loại sâu 50 sâử lọ pêniciHine, hàng ngày theo dõi sâu chết bệnh Chỉ tiêu theo dõi : - Mức độ bị bệnh loại sâu hại loại NPV : Không xuất bệnh + Dưới 5% bị bệnh ++ _ Trên - 50% bị bệnh +++ Trên 50% bị bệnh 4.2 Thí nghiệm hiệu lây bệnh sâu khoang bang dich NPV nông độ nhiễm khác Liêu lượng nhiễm (PIB/m)) xác định qua kính hiển vi điện tử nồng độ từ 102 - 102 liều lượng nhiễm trộn với thức ăn nhân tao theo tỷ le 0,1ml/ạr thức ăn,sâu thí nghiệm tuổi 4, tuổi 5„/sâu cá thể lo péniclline Mỗi cong thức nhắc lại lần, lần 50 hàng ngày theo dối gap sâu chết bệnh Chỉ tiêu theo dõi : Tỷ lệ chết virus nồng độ khác Lượng virus sâu bệnh (PIB/sâu) nồng độ khác Tỷ lệ vào nhộng (%) Tỷ lệ nhộng chết bệnh (%) + + + + + Tỷ lệ vũ hoá (%) 4.3 Thí nghiệm tìm hiểu độ mẫn cảm tuổi sâu với bệnh NPV : Thí nghiệm với sâu khoang tuổi : 3, 4, 5,mỗi tuổi nhắc lại lần, lần 50 (sâu khoẻ không bị bệnh phận nuôi sâu cung cấp) thức ăn nhân tạo trộn dịch bệnh nông độ thông thường Trộn theo tỷ lẹ 0,1 ml ` dung dịch nhiễm/ Lgr thức an Sau đem nuôi cách ly ! lọ Pếnicilline,hàng ngày theo dõi gắp sâu chết bệnh Tiếp đem nghiên, lọc ly tâm để lấy dịch thé NPV Rồi xác định PIB qua kính hiển vi thơng qua bảng đếm hồng cầu để tính lượng sâu Chỉ tiêu theo dõi : + Thời gian bị bệnh (ngày) + + + + Thời gian bị bệnh (ngày) (từ nhiễm - chết hết) Tỷ lệ chết bệnh (%) PIB trung bình sâu chết bệnh ( PIB/SB) Tỷ lệ sâu vào nhộng (%) + Tỷ lệ nhộng chết bệnh (%) + Tỷ lệ nhộng vũ hoá (%) 4.4 Thí nghiệm từn hiểu khả bảo quản nguồn dịch bệnh : Dịch bệnh để tủ losh nhiệt độ - 129 C sau tháng lấy lần thử hiệu lực sâu khoang theo nồng độ thơng thường có so sánh với dịch NPV chưa bảo quản Sâu thí nghiệm tuổi - tuổi 4, công thức lần nhắc lại, lần 50 Sau nuôi thức ăn nhân tạo trộn dịch bệnh virus với nồng độ thông thường sâu nuôi theo cá thể hàng ngày theo dõi sâu chết bệnh Chỉ tiêu theo dõi : + Thời gian bảo quản (ngày) + Tỷ lệ sâu chết bệnh (%) 4.5 Thí nghiệm tìm hiểu khả tiêu thụ thức ăn sâu khoang bị lây nhiém NPV : Thí nghiệm tiến hành với sâu khoang tuổi 3, tuổi (sâu không bị bệnh để thí nghiệm phận¿Sâu cung cấp) Thí nghiệm tiến hành cơng thức : Cơng thức I có trộn dịch NPV sâu khoang vào thức ăn nhân tạo theo tỷ lệ 0,1 ml/gr thức ăn (dịch bệnh nồng độ thông thường) Công thức đối chứng : thức ăn không tron dịch NPV sâu khoang, Mỗi công thức 50 sâu nuôi cá thể Jo penicilline va nhắc lại lần Chỉ tiêu theo dõi : - Lượng thức ãn tiêu tốn/ sâu công thức sau : 2, 8, 10 ngày nhiễm Phương pháp : Để xác định lượng thức ăn mà sau da an q trình thí nghiệm cân phải cân trọng lượng thức an trước trộn dich NPV va sau đồ cân lại trọng lượng thức ãn thừa mà sâu khơng ăn hết Từ tính lượng thức ăn mà sâu theo dõi sau ngày nhiễm sau 6, 10 ngày nhiễm 4.6 Thử hiệu lực trừ sâu khoang dịch NPV nghiệm sáu khoang phịng thí : Dùng sâu khoang tuổi 3, tuổi để thử (sâu phận nuôi sâu cung cấp) Thức ăn để nuôi sâu thầu dầu Lấy dịch bệnh NPV sâu khoang nông độ thông thường (đã đếm PIB) nhúng thầu dầu vào dịch bệnh, hong cho khơ sau cho sâu ăn nhúng NPV (nồng độ PIB/m1:3.1 x 107 PIB/ml) hàng ngày tiến hành theo dõi thay cho sâu än Cơng thức thí nghiệm : cho sâu an có nhúng dịch NPV Đối chứng : cho sâu ăn không nhúng dịch NPV Chỉ tiêu theo dõi : + Thời gian sâu bị chết bệnh(ngày) + Tỷ lệ sâu chết virus (%) + Tỷ lệ sâu vào nhộng (%) + Tỷ lẹ nhộng bị bệnh virus (%) + Tỷ lệ nhộng vũ hoá (%) + Tỷ lệ chết khác (%4), (mất mái, ruồi dấm ) Mỗi công thức 50 sâu, lần nhắc lại 4.7 Thử hiệu lực trừ sảu dịch NPV sâu khoang đồng ruộng: Thí nghiệm đồng ruộng với nồng độ nhiễm : 250 LE/ha + 5% đường đỏ Thí nghiệm đồng ruộng với nồng độ bố trí : Cơng thức thí nghiệm : phun định kỳ ngày lần từ khí bắt đầu có sâu Đối chứng : không phun Thuốc phun vào lúc chiều tối cách bơm tay Điều tra trước sau phun từ ngày thứ trở Điều tra điểm chéo góc điểm điều tra -10 Đếm số sâu sống trước sau phun Thí nghiệm phịng hiệu đính theo phương pháp Albot đồng theo phương pháp Schneider - Orelli 4.8 Phương phap tinh dém PIB : - Nguồn sâu bệnh lọc qua vải kỹ nhiều lớp lấy nước trong, vứt bo xác sân Ly tâm dịch thể lọc, nghiền tốc độ 5000 - 10.000 vòng/phút từ 30 - 60 phút (làm | - lần) giữ lại phần lắng đọng, khống cho thêm nước cất để hoà tan - Pha dịch NPV ly tam để đếm PIB : + Lấy 0,1 mi NPV + 0,9ml HạO cất i đếm hồng cầu sơi kính + Lay 0,1 ml NPV da pha cho vào buồng [: theo công thức định (muốn cho tốn tính PIB đếm để học quang vi hiển ! dễ đếm ta pha lỗng từ ¡ đến 20 lần) II KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU : Hiện trạng bệnh , ; 11 Bệnh giai đoạn sâu non ấu trùng, giai đoạn trưởng Giai đoạn dễ bị bệnh virus giai đoạn g g bị chết Bệnh virus có tính đặc trưn khơn bệnh m nhiễ bị có dù h thàn với sâu với loại thể vật chủ đối cao cho virus, thường thích ứng sắc nhạt bệnh thường hoạt động yếu ớt màu khoang, thời kỳ sâu non bị nhiễm dân sau chuyển sang màu trắng sữa màu hồng trắng, đốt thân căng i căng phơng nước lớp da ngồ phơng ra,tồn thân bị trương phù đổi cho màu sắc thể dễ dàng bị biến mỏng, dễ vỡ, bệnh virus thường làm mềm nhữn, máu trở nên đục, sâu chết mơ bên bị tan vỡ thể dân lên đến đầu nên chết đuôi có màu nâu sãm, sâu chết từ cuối bụng nên cịn cành đầu bng thống xuống đất chân sau thường bị dính vào vỡ,dịch thối chảy gọi "chết treo” Khi sâu chết,biểu bì nứt tuổi nhỏ bị bệnh Sâu bị bệnh nhiều thường vào tuổi tuổi sinh sẵn nhiều Bệnh tiến triển số lượng cá thể virus 1.2 Bệnh thời kỳ nhộng : ác phận bên thồi rữa Nhộng bị bệnh virus thường bị đen lại,c vỡ,thối nên toàn thân nhộng chứa đầy nước dễ bị 1.3 Nguyên nhân gây bệnh : era litura Fabr) là:một loại virus Bệnh thối nhữn sâu khoang (Spodopt qua soi kính hiển vi điện tử Viện gay nên, qua chẩn đoán tượng bệnh bệnh virus nhân đa diện ( Nuclear vệ sinh dịch tế Hà Nội xác định nhiễm đường lây lan theo thức polyedresis virus) gay bệnh bệnh truyền ăn truyền cho hệ sau qua trứng Lây nhiễm virus nhân tạo sâu khoang : Trong virus côn trùng chuyển thời đại việc nghiên cứu bệnh thông qua việc nhiễm hàng loạt ấu sang giai đoạn sản xuất chế phẩm virus định ing sâu hại virus chuyên tính gây bệnh điều kiện ?Mhư biết để tạo sinh khối virus lớn phải có nhiều sâu non thiết nhiềwvirus chết đạt trọng lượng tối đa Điều liên quan mat đến nồng độ nhiễm virus ban đầu, tuổi sâu đem nhiễm số yếu tố khác việc ' Ví dụ : nhiệt độ, ẩm độ, ánh sáng để phục vụ cho - sắn xuất chế phẩm NPV với số lượng lớn, tiến hành nghiên cứu vài yếu tố ảnh hưởng đến trình tạo sinh khối NPV sâu khoang ` 2.1 Thí nghiệm tìm hiểu hiệu lây bệnh NPV sâu khoang lên 1] sé sau hai: Để tìm hiểu phổ ký chủ bệnh NPWđối với số loại sâu hại khác, F ị 106 dùng dịch NPV sâu khoang nồng độ thông thường (3 x PIB/mi) đem lấy chéo lẫn Đối tượng loại sâu hại để thử : sâu khoang, - sâu sâu tứ, sâu xanh, sâu đo xanh sâu keo, ngài gạo sâu thí nghiệm tuổi án nuôi theo cá thể,mỗi loại sâu tiến hành thử 50 Dịch NPV trộn vào thức nhân tạo theo tỷ lệ 0,1 mi/1 gr thức an Kết trình bày bang | Bảng ¡ : Hiệu lây bệnh NPYV sâu khoang lên số sâu hại Tỷ lệ sâu ˆ Số lượng Số lượng (con) bệnh (con) Thực tế Hiệu đính Sâu khoang 50 45 90 88.0 Sâu xanh 50 2.1 2,0 Sau keo 50 4.0 4.0 Sâu tơ 50 0 Ngài gạo 50 2.0 2,0 Đối tượng sâu hại sâu nhiễm sâu chết chết bệnh (%) Kết bảng cho thấy : bệnh virus sâu khoang lây nhiễm lên sâu lệ khoang sâu khoang bị nhiễm cao 88% sâu khác ty nhiễm bệnh thấp coi khơng có tác dụng Điều cho thấy rõ bệnh virus sâu hại có độ chun tính cao, bệnh sâu lay nhiễm cho loại sâu mà thơi khác 2.2 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ nhiễm virus ban đầu với sâu khoang: Trong thí nghiệm này,chúng tơi tiến hành xác định ảnh hưởng nhiễm - nồng độ nhiễm virus ban đâu khác đến thời gian, số lượng chết sau va yếu tố cấu thành sinh khối NPV nhằm bảo đảm tỷ lệ sâu chết bệnh cao, ; cung cấp cho sản xuất chế phẩm Chúng sử dụng liều lượng nhiễm khác “cho sâu khoang tuổi Kết trình bày Ở bảng Bảng : Ảnh huéng cua nồng độ nhiễm NPV déi voi sau khoang (Spodoptera litura Fabr) (1993) Đương TL tất Tỷ lệ Trong lượng sâu | chết bệnh | sâu chết | lượng sâu chét virus (gr) (%) khoẻ Nồng độ nhiễm NPV S6 sau thí nghiệm (PIB/ml) (con) (gr/con) 3,5 x 102 150 (0,18 61,0 28.2 1.7 x 109 3,5 x 103 150 0.18 64.3 20.4 2.51x109 3,5 x 104 150 0.18 70,0 30.0 3,8 x 109 | 27.239C 3,5 x 105 150 0,18 76,0 31,2 4.2% 109 | 86.61% 3,5 x 106 150 0,18 80,0 31,8 4.9 x 10? 3,5 x 107 150 0,18 86,0 36,6 5.85 x10? 13,5 x 108 150 0,18 92,0 30,6 | 5,35 x 103 3,5 x 109 150 0,18 94,0 31,2 4.9 x 102 t9, A9 (PIB/SB) Kết cho thấy điều kiện t9; 27, 289 C ẩm độ 86,61% nồng độ nhiễm NPV thấp (3,5 x 102 PIB/ml - 3,5 x 105 PIB/mÙ) sâu chết bệnh muộn (5 ngày trở đi) tỷ lẹ chết bệnh thấp 61 - 76% so với thí nghiệm cơng thức có nơng độ nhiễm INPV cao ( 3,5 x 108 - 3,5 x 109 PIB/m)) điều giải thích sau : nồng độ nhiễm thấp,lượng virus thức ăn chưa đủ để sâu chết ngày đầu, thời gian ủ bệnh kéo dài, đa số sâu non vào nhong va bi radi dim ky sinh nên lượng sinh khối NPV thu Ở công thức với nồng độ nhiễm cao tir 108 - 109PIB/ml Tỷ lẹ chết sau nhiễm tro di) ti F os bảng (4 76) var (con/m2) NPV Đối chứng 4+0.7 3,2 x 106 Qua bảng cho thấy đậu xuân phun NPV trữ sâu keo da ˆ láng với nồng độ phun khác thi sau chết bệnh từ ngày thứ tro di Ty le sâu chết bệnh tăng đân theo ngày công thức tỷ lệ thuận với nồng độ Khi phun với nồng độ 3.2 x 10 PIB/ml cho tỷ lệ sau chet bệnh cao : 68.7% (sau phun ngày) - Thử hiệu lực NPV sâu keo da láng để trừ đối tượng hại đậu tương xuân - hè (1995) Chúng tiếp tục thí nghiệm thử hiệu lực NPV sâu keo da láng đậu tương xuân - hè HTX Ngọc Chỉ (Đơng anh - Hà Nội) Thí nghiệm với công thức, lần nhắc lại, lần nhắc có diện tích I sào Bắc bọ Bố trí thí nghiệm theo dõi thí nghiệm trên, Kết thí nghiệm biểu bảng 5, Bảng : Hiệu lực NPY trừ sâu keo da láng đỗ tương xuân -hè (HTX Ngoc Chi - 1995) Tỷ lệ sâu chết bệnh sau phun (%}) Nồng độ phun | Mật độ sâu | Tuổi sâu trước phun | (con/m2) phun NPV ngày NPV(PIB/m)) Đối chứng 5+0.2 H,IH 41 5.2 5.8 3,2 x 106 6+0.1 I, I 28,7 36,2 60.8 3,2 x 107 £08 Il, HI 33.4 41.7 65.6 3,2 x 108 4+0.6 Il, Hi 41.8 523 69,4 F thực (8.64 > Fos bảng (4,76) Qua thấy đậu tương xuân - hè, mật độ sâu keo da lắng cao so với đậu tương xuân Phun NPV sâu kco đa lắng nồng độ phun khác cng cho kết tương tự thí nghiệm Sâu chết bệnh nhiều từ ngày thứ sau phun trở tăng dần theo ngày công thức ty lệ thuận với nồng độ phun Khi phun với nồng độ 3.2 x 1ØŠ PIBáml cho tỷ lệ sâu chết bệnh cao ; 69,4% Ngồi thí nghiệm thử đậu tương chúng tơi cịn tập huấn hướng dẫn nơng dân sử dụng chế phẩm NPV sâu keo da láng để trừ đối tượng hại đậu tương xuân, xuân - hè hộ nông dân thuộc hai HTX Kết qủa theo dõi trình bày bảng Bang 6: Tình hình ứng dụng NPV sâu keo da láng trừ đối tượng hại đậu tương (Đông anh - 1995) | Dia diém Xuan canh HTX Ngoc chi Vu dau | Dientich | Néngd6 phun | Tudisdu | Tỷ lệ sâu chết tuong (ha) (PIR/ha) phun NPV bénh virus Xuan 10,3 3,2 x 1012 I[.II.IH 59.6 Xuân - hè 12.6 3,2 x 1012 I, I, i 61.8 (Yo) —_ đậu tương xuân, xuân - hè, NPV Qua bảng thấy đồng ruộng đối tương đạt hiệu từ 59,6 keo da láng có khả phịng, trừ 61.8% (sauphun7 ngày với sâu tuổi f, IT TD) NPYV sâu keo da láng trừ đối - Thí nghiệm thăm dị thử hiệu lực - Tù liêm - 1995) pong tren hoa Făng (Phú thượng đậu tưởng mà đối tượng Sau keo da lắng không gây hại cho xuân 1995, sâu Keo da lang gay hai lon guy hiểm cảnh hoa tươi Vụ , Từ liêm , Hà Nội Trong tháng 3, ho vùng trồng hoa Fang Phú Thượng m2 75% số nụ hoa bị sâu gây hại tháng mật độ sâu cao tới 15 - 20 con/ muộn ) nên tới tháng 7/1995 Do phát chậm (nông dân đến yêu cầu ệm Thí nghiệm ruộng hoa tiến hành theo dõi phun thử nghi [Făng nhà ơng Hồ - Phú thượng Thí nghiệm thăm dị với cơng thúc lần nhắc lại lần 30m2: CTI : Đối chứng không phun | l l CT> : Phun NPV với nồng độ 3.2 X 106 PIB/m CT3 : Phua NPV với nồng độ 3.2 x 10” PIB/ml CTa : Phun NPV với nồng độ 3.2 X 108 PIB/ml chéo góc đại diện cho Theo dõi từ ngày thứ sau phun trở di Š điểm Kết qua thí nghiềm trình bày lân nhắc lại công thức Mỗi điểm m2 bảng trừ đối tượng hại Bảng : Hiệu lực NPY sâu keo da láng hoa Fang (Ph thượng, - 1995) Mật độ sâu Tuổi sâu Tỷ lệ sâu chết bệnh sau phun (%) trước phun phun ngày Š (con/m2) NPV Đối chứng §+0.4 I, Ul - - - 3,2 x 106 7+ 0,6 M1, Uf] 21,3 28,7 53,2 3,2 x 107 10 +0,2 I, If 30,3 36.9 57,3 Nồng độ phun NPV(PIB/ml) 32x108 | 6#07 1,11 35,2 E thực (5,24) > F 95 bang (4.76 ) 42,6 614 Qua bảng phần tích số liệu cho thấy nồng độ phun từ 3.2 x 106 - 3,2 x 108 PIB/ml, NPV sâu keo da láng có hiệu lực trừ đối tượng hại hoa Fãng từ 33,2 - 61,4% (sau phun ngày với sâu tuổi II, II) Hiệu trừ sâu hoa Făng thấp so với sử dụng đậu tương đặc điểm sâu keo da láng chui vào nụ hoa Făng để gây hại nên việc phun NPV sâu keo da lắng ngồi nụ khó khăn Đay thí nghiệm thăm dị nên có điều kiện nãm tới chúng tơi tiếp tục thí nghiệm Theo dõi tình hình xuất sâu keo da láng số trồng vùng quanh Hà Nội(1995) Để tiến hành thử nghiệm việc ứng dụng NPV sâu keo da láng đồng ruộng theo dõi điều tra phát sinh đối tượng hại đậu tương, hoa Făng xung quanh Hà Nội So với năm trước năm nay(1995) xuất sâu keo da láng vùng ven Hà Nội tập trung chủ yếu đậu tương (vụ xuân, xuân-hè) hoa Făng Kết diều tra đậu tương sau gieo tháng cho thấy : - Tại Xuân canh (Đông Anh) : 4-5 con/m2 - Tại Mai Dịch (Từ Liêm) : 2-4 con/m2 - Tại Thọ An (Đan Phượng) : 4-5 con/m2 -Tai Ngoc Chi (Dong Anh) : 5-6 con/m2 -Tai Pha Thượng (Từ Liêm): hoa Fãng: 15-20 con/m2 (vào thang 3.4) Tuy sâu keo da láng bị ký sinh khả cao nên làm giam mat gay hai Vì khơng có điều kiện nên chúng tơi khơng tiến hành điều tra thành phần ký sinh sâu keo da lắng mà phát có mặt loại nấm I loại ong là: - Nấm xanh : 100 theo dõi có 21 bị nấm xanh - Nấm trắng : 100 theo dõi 32 bị nấm trắng - Ơng ký sinh: 150 theo dõi có 24 bị ong ký sinh Đây số liệu tham khảo bước đầu cho ta thấy lý khu vực xung quanh Hà Nội sâu keo da láng không phát triển thành dịch hại lớn tỉnh miền Trung Nam Bộ Sơ tính tốn gía thành chế pham NPV sau keo da lang Nhằm tính tốn hiệu sử dụng chế phẩm NPV sâu keo đa lắng trừ đối tượng hại lai đồng ruộng, chúng tơi sơ tính toán giá thành cua | lit chế phẩm NPV Sau kết thu Để sản xuất cho 2000 sâu tiêu chuẩn,tương đương | lit chế phẩm NPV sâu keo da láng cần : Phần sản xuất 2000 sâu tiêu chuẩn đem lây, cấy vữus (tuổi IV, V) ~- Nuôi ghép bướm : 0.5 công - Thu trứng, đếm, cất trứng : 0,5 cong - Xếp đĩa Pêtri, lau rửa khay, dĩa, đặt thức ăn : 0,5 công - Chăm nom, tách sâu nuôi cá thể: công - Chọn sâu đủ tiêu chuẩn để nhiễm NPV (bao gồm kiểm tra sâu, chọn nhặt sâu ) : l công - Rửa sấy lọ (bao gồm rửa lọ sau ngâm xút, sấy lo) : | cong - Chạy vật tư, mua thức ăn, nghiền, sấy, nấu thức ăn : | cong Tổng cộng : 6,5 cong x 150004/cong = 97.5004, 2.500đ, +Thức ăn nhân tao : - Thức ăn có agar : [00 đĩa Pêtri x Š gr thức an/dia x 5000đ/kg thức ăn = - Thức ăn MM: 2500 lo Penicillin (2500sau) x 1,5gr/lo x 70004/kg thitc an = 26.5004, Cong tiền thức ăn : 29.000đ, Phần tạo che phẩm a Công lao động : ~- NPV: Xếp lọ pênicilin cho thức ăn vào lọ thả sâu : l công Kiểm tra sâu chết, thu hồi sâu chết bệnh : I công Rửa, sấy lọ pênicilin : 0,5 công Nghién loc dich thé NPV, pha chế, kiểm tra chất lượng : 0.5 công Cong : cong x 150004/cong = 45.000đ b Thurc 4n (2 MM) ae - gr thie an/lo penicillin x 2000 lo =4 kg kg thirc an x 70004/kg thire an = 28.0004, e Vat tu khac : - Xo man : 500 4, - Điện (sấy dụng cụ sấy, nghiền chế biến thức ăn điều hồ nhiệt độ, lị sưởi ) : kwh: kwh x §00đ/kwh = 4800đ - Nước : 0,5 m3 x 1000 đ/m3 = 500đ, - Các phu gia (glicérin, than hoat tính ) : 10.0004, Cộng (c) : 18.800đ Tổng cộng 1, 2, : 218.300đ Như giá thành lí chế phẩm NPV 218.3004, sáu keo da láng tạm tính IV KET LUAN VA DE NGHI A Kết luận : Vụ xuân xuân hè đậu tương vùng ven Hà Nội sâu keo da lắng có mật độ cao năm trước,tuy nhiên không phát triển thành dịch gây hại nặng tỉnh Trung Nam Bộ khí hậu miền Bắc bất thuận cho sâu keo da lang phát triển tỉ lệ ký sinh sau non cao, lam giẩm mật độ sâu hại từ lứa đầu Việc nuôi sâu keo da láng thức ăn nhân tạo phịng thí nghiệm với số lượng lớn tiến hành phải đảm bảo, khống chế yếu tố ôn, ẩm độ, thức ăn thực nghiêm ngặt qui trình cơng nghệ ni, nhân chúng, Hiệu lực chế phẩm NPV sâu keo da láng trừ đối tượng hại đậu tương đạt từ 58.3 - 69,4% (tuỳ theo mùa vụ) hoa Făng 53.2 - 61.4%, Tuy nhiên cần ý khâu ổn định bảo quản chế phẩm Thực tốt qui trình sử dụng chế phẩm để đạt hiệu trừ sâu cao Tạm tính giá thành cua | lit chế phẩm NPV sau keo da lang 14 218.3004 nuôi, nhân, nhiễm NPV sâu keo da lắng thức ăn nhân tạo So với thuốc sâu hoá học cao ‘ B.Đề nghị Cần tiếp tục nghiên cứu, chấn chỉnh hoàn thiện qui trình ni sâu tạo chế phẩm NPV sâu keo da láng để giảm giá thành Để ứng dụng chế phẩm NPV sâu keo da lắng nói riêng NPV nói chung, Nhà nước cần trợ giá cho sở nghiên cứu sản xuất sử dụng chế phẩm trừ sâu sinh học với mục đích giữ gìn mơi sinh sức khoẻ người sinh vật có ích QUY TRÌNH HƯỚNG DẪN KỸ THUẬT sản xuất sử dụng chế phẩm virus nhân da điện ( NPV) sáu đo vanh phương pháp thủ công để phòng trừ đối tượng hai ( Anomis flava Fabr.) vùng trồng đay Nhóm nghiên cứu NPV Viện Bảo vệ thực vật I LỜI MỞ ĐẦU Sâu đo xanh (Anomis flava Fabr.) đối tượng sâu hại nguy hiểm vùng trồng đay Sau thường phát thành dịch, làm giảm từ 50 - 70% suất tơ đay Để phòng trừ đối tượng hại này, năm trước người dân thường dùng thuốc trừ sâu hoá học, có diệt trừ sâu độc hại với người, sinh vật có ích ð nhiễm mơi trường, dùng nhiều thuốc trừ sâu hố học nên sâu đo xanh có xu hướng kháng, chống thuốc Tiên đồng đay vào tháng có ơn, ẩm độ cao (tháng 4.5.6.7) sâu đo xanh thường bị bệnh thối nhữn tác nhân gây bệnh virus nhân đa diện (NPV) Trong chừng mực đó,NPV có khả khống chế mật độ quần thể sâu đo xanh làm giảm sức phá hại Lợi dụng đặc điểm trên, nam qua, Viện Bảo vệ thực vật tiến hành nghiên cứu sản xuất sử dụng chế phẩm NPV sâu đo xanh phương pháp thủ cơng để phịng trừ đối tượng hại vùng trồng đay mang lại kết khích lẹ Nhằm giúp nơng dân có thêm hiểu biết việc sử dụng virus trừ sâu hại, cố gắng biên soạn tài liệu với mục đích phổ cập quy trình kỹ thuật đến người sản xuất Đây phương pháp thủ công, dẻ làm, thuận tiện, có hiệu thích ứng với vùng trồng đay HI BENH THOI NHUN SAU ĐO XANH VÀ CÁCH NHAN BIET NO Bệnh thối nhữn sâu đo xanh virus nhận đa điện gây nên Bệnh phát sinh nhờ virus thâm nhập qua đường tiêu hoá sâu Từ tế bào thành ruột virus theo máu đến tế bào khác thể sâu làm sâu nhiễm bệnh Khi bị bệnh NPV, đốt thân sâu trương phù lên, chứa nước, da mỏng nên dễ v6 Sâu bị bệnh chuyển dân từ màu xanh sang màu vàng ủng, bệnh tiến triển mạnh chuyển sang màu nâu sãm chết Sâu chết từ cuối bụng dân lên đến đầu nên chết đuôi chân sau thường bị dính vào cành đay đâu bng thống xuống đất nên cịn gọi "chết treo" Khi sâu chết, biểu bì nứt vỡ, dịch thối chảy ngồi dính lá, cành thân đay Nhờ tác động gió nước virus có dịch sâu chết bệnh phát tán ruộng đay, gây truyền nhiễm bệnh cho sâu đo xanh khoẻ khác Ở điều kiện ôn, ẩm độ thuận lợi (nhiệt độ cao xen kẽ mưa rào to) bệnh thối nhữn phát thành dịch làm sâu chết hàng loạt khống chế chừng mực định mật độ sâu đo xanh đồng đay Sâu tuổi IV, V thường bị bệnh nhiều phát dịch bệnh sâu tuổi nhỏ bị chết đo bệnh thối nhữn Trên đồng đay bệnh thường xuất từ trung tuần thang tro thành dịch khoảng từ 25/5 đến 20/6 Sự phát sinh phát triển bệnh phụ thuộc nhiều vào điều kiện ngoại cảnh : ôn âm độ, lứa mật độ sâu, mùa vụ đay HH DỤNG CỤ, PHƯƠNG PHÁP TH THẬP, NUÔI, LÂY, NHIÊM VÀ SAN XUẤT 'CHẾ PHẨM NPV SÂU ĐO XANH BẰNG PHƯƠNG PHÁP THỦ CÔNG AI DỤNG CỤ ĐỂ NUÔI, NHIÊM NPV SAU DO XANH - Nia, met, c6t diing để nuôi sâu đo xanh lay, cay NPV - Ke bang g6 co dan dé đựng nia mẹt nuôi sâu( tương tự kệ để giống Ïhoai tây) Dưới chân kệ có bát đựng nước để tránh kiến bị lên tha sâu - Vải, xơ để bịt miệng cót tránh mát sâu - Cối dã tay để nghiên sâu bệnh tạo chế phẩm - Vải phin mỏng để lọc bã sâu chết bệnh sau nghiền - Panh gấp sâu chết bệnh - Chai lọ mâu, có nút kín để đựng sâu chết bệnh - Lọ can nhựa màu thẫm để đựng chế phẩm NPV BỊ PHƯƠNG PHÁP TẠO CHẾ PHAM NPV SAU DO XANH Thu thập sâu chết bệnh đồng Vào tháng sâu đo xanh bị chết dịch NPV thu thập sâu bị bệnh đồng để tạo chế phẩm NPV Cách làm sau: dùng panh gấp sâu bị chết bệnh ngắc ngồi (sâu có màu nâu sâm, thân trương phù) bỏ vào lọ thuỷ tỉnh màu sẫm để từ 10 - I5 ngày cho ngấu sau tiến hành tạo chế phẩm NPV 2 Nuôi sâu để lây, nhiễm virus nia, mẹt tiến Thu sâu tuổi II, II, IV từ ngồi đồng để ni Trước tha sau vào hành lây, nhiễm NPV Nuôi sâu đay tươi nồng độ - x107 PIB /ml nuôi, phun dịch thể NPV sâu đo xanh pha loãng (tương đương - sâu lớn chết bệnh virus tuổi V VI nghiên pha với 70 - sớm thay đay tươi cho sâu 100 ml nước sạch) lên đay cho sâu ản Mỗi sáng tính để sau tạo chế an, don phan sau va gdp sâu chết bệnh cho vào lọ thuỷ thi xuất triệu chứng phẩm NPV Sâu nuôi nhà sau lây nhiễm - ngày bệnh chết để tránh ý : Nhớ đậy nia, met, qy cót ni sâu vải mỗi, ruồi dấm ký sinh sâu làm thất thoát lượng NPV Chú Phương pháp tạo bảo quản ché pham NPV nhà đựng - Sau chết bệnh thu thập từ đồng lay, nhiễm hành nghiền nất bình sẵm màu từ 10 - lỗ ngày chờ ngấu sau tiến nát tốt Tiếp đồ cối dã tay : xiết, di mạnh chày lên cối cho sâu xò màn) - lop dùng nước để lọc (như ta lọc cua) lọc qua vải mỏng (hoặc để loại bỏ xác sâu lọc đến thấy nước thơi sẵm màu để nơi - Đựng nước lọc (dịch thể NPV) chai can nhựa nước phía đi, giữ râm mát cho lắng đọng Sau - ngày : đổ bớt phần lại phần lắng đọng ( dịch thể NPV cô đặc) trời trực tiếp - Bảo quan dịch thể NPV nơi thoáng mắt, tránh ánh nắng mặt xanh lứa Dịch NPV dùng để phun lại đồng để trừ sâu đo phâm xuống - Nếu để dành sử dụng cho vụ day sau chon can dung chế đất nơi râm mát NPV SAU DO XANH ĐỂ IV PHƯƠNG PHÁP PHA CHẾ VÀ SỬ ĐỤNG CHẾ PHAM TRU DOI TUONG HAI NAY TREN VUNG DAY Cách pha chế phẩm NPY có kích thước Thường 300 sâu chết bệnh tuổi V, VỊ (sâu chết bệnh chế phẩm dạng dịch lớn nghiền, lọc pha với lít nước cho ta L lít thể 2 Phuong phap su dung NPV a) Cách pha dung dịch phun NPV: - lít chế phẩm NPV sâu đo xanh pha thêm 550 - 600 lít nước + 5% | : đường đỏ (hoặc rỉ đường) để tăng độ bám dính thuốc phun cho đay ' (thường bình gà phun cho sào Bắc bộ) b) Thời điểm phun : - Phun lúc sâu đo xanh tuổi nhỏ (tuổi I, ID) hiệu diệt sâu cao hơn, giảm đáng kể thiệt hai cho sâu ăn day - Phun tích luỹ ruộng đaạy - lần (đưa thêm day trước sâu đo xanh phát dịch) Thường phun lượng NPV vào ruộng Ì lần vào cuối tháng đầu tháng ; sau - 10 ngày phun tiếp lần - Phun đập dịch { - lần (tuy theo mật độ sâu ruộng hay nhiều mà định phun l hay lần ) Thường phun từ 25 tháng trở c) Cách phun: - Phun NPV sâu đo xanh ruộng đay vào chiều râm mát tránh mưa tránh phun lúc nắng, gid to - Phun ướt đẫm mặt day dé tăng khả tiếp xúc NPV với sâu hại - Phun NPV bình bơm tay ga, ULV máy phun thuốc động QUI TRÌNH HƯỚNG DẪN KỸ THUẬT xuất sử dụng NPV(virus nhân đa điện)sâu rúm thơng để phịng trừ đối ừng sâu hại này(Dendrolimus punctatus Walk.) rừng thơng Nhóm nghiên cứu NPV Viện Bảo vệ thực vật LỜI MỞ ĐẦU Sâu róm thơng (Dendrolimus punctatus Walk.) loại sâu ăn gây hại ghiêm trọng vùng thông nước ta, thường phát thành dịch làm ” cháy ” ông (trụi lá), ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển thông Sâu có iểu kháng, chống thuốc hố học, gây khó khăn cho việc phịng trừ chúng Trong tự nhiên sâu rồm thông giống số loại côn trùng khác thường bị bệnh thối nhiin NPV gay nen, vi để dần dân thay thuốc hố học phịng trừ chúng, năm qua Viện bảo vệ thực vật kết hợp với số quan Trung tâm Nhiệt đới Việt - Nga Trạm dự báo sâu bệnh rừng Thanh Hoá nghiên cứu phân lập, sẳn xuất sử dụng NPV sâu róm thơng dang dich thể dạng bột để phịng, trừ đối tượng hại với ket qua kha quan Để hướng dẫn, tập huấn lâm trường tự sản xuất sử dụng chế phâm NPV sau róm thông biên soạn tãi liệu nhằm phổ cập qủy trình kỹ thuật đến người sản xuất Đây phương pháp thủ cơng, dễ làm thuận tiện, có hiệu quả, thích ứng với địa phương, sở trồng thông nước ta II CÁCH NHẬN BIẾT SÂU RĨM THƠNG CHẾT BỆNH VIRUS Bệnh thối nhữn sâu róm thơng virus nhân đa diện (NPV) gây nên Virus thâm nhập vào thể sâu róm thơng thơng qua đường tiêu hố Từ tế bào thành ruột, virus theo máu đến tế bào khác thể sâu làm sâu nhiễm bệnh Khi bị bệnh NPV sâu bị chậm chạp, ăn thơng đi, đốt thân sâu trương phù chứa nước, da mỏng nên dễ vỡ Sâu bị bệnh chuyển từ màu xám nhạt sang màu xám hồng, lúc gần chết có màu nâu sẫãm Sâu chết đân từ cuối bụng lên đầu nen chết đuôi chân sau thường bị đính vào lá, cành thơng, đầu bng thống xuống đất nên bệnh cịn gọi bệnh "chết treo" Khi sâu chết, bị tác động giới biểu bì nứt vỡ , dich thối chảy ngồi, dính cành, thân thông Nhờ tác động gid , nước virus có dịch sâu chết bệnh phát tán rừng, gây truyền nhiễm bệnh cho sâu róm thơng khoẻ khác Ở điều kiện ôn, ẩm độ thuận lợi (nắng nóng kẽ mưa rào to, thường vào thang 5, 6, 7, 8) bệnh thối nhữn phát hành dịch h sáu chết hàng lọat, khống chế chừng mực định mật độ quân thể sâu thông, hạn chế phá hại chúng Sau tuổi IV, V thường bị bệnh " chết " nhiều phát dịch sâu tuổi nhỏ bị chết bệnh Ñ- DỤNG CỤ, PHƯƠNG PHÁP THU THẬP, NUÔI,NHIỄM VÀ SẢN XUẤT CHẾ ẨM NPV SÂU RĨM THƠNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP THỦ CƠNG A - DUNG CU DE NUOI, NHIEM NPV SAU ROM THONG - Lồng nuôi sâu cỡ 0,8 x I x 1,4m (cao, rộng,dài) bọc lưới kim loại kín g quanh dùng để ni sâu róm thơng - Vải phin mỏng để lọc bã sâu chết sau nghiền - Cối tay máy xay sinh tố, máy nghiền để tạo chế phẩm - Panh gắp sâu chết - Chai lọ màu can nhựa có nút kín để đựng sâu chết bệnh - Lọ can nhựa màu thẫm để dựng chế phẩm NPV B- PHƯƠNG PHAP TAO CHE PHAM NPV SAU ROM THONG Thu nhập sâu chết bệnh ngồi đồng ~ Vào tháng sâu róm thơng bị chết dich NPV thu thập sâu chết bệnh ngồi rừng thơng để tạo chế phẩm NPV Cách làm sau: dùng panh gắp sâu bị chết bệnh(theo dẫn mục trên), thơng cao 'ngồi tầm với người, dùng hịn đá đập vào thân thông, sâu chết bệnh rơi xuống đất, ta phân biệt sâu chết NPV với loại chết khác Thu sâu chết bệnh NPV cất giữ vào lọ, can để làm chế phẩm sau } Nuôi sâu để lây, nhiễm virus : Thu sau róm thơng tuổi II HH, IV từ ngồi đổi, rừng thơng ni ác lồng thông tươi, non Trước thả sâu vào lồng, bẻ cành thơng có tươi, phun dịch thể NPV sâu róm thơng với nồng độ khuyến cáo + 107 PIB/ml(tuong đương sâu lớn chết bệnh virus tuổi V, VI nghiền nát pha với 70 - 100 ml nước sạch) lên cành thơng tươi đó, phun cho ướt thong Sau thả sâu vào nuôi theo dõi sâu chết bệnh virus từ ngày thứ sau Xử lý trở Gấp sâu chết bệnh cất giữ lọ, can nút kín để làm chế phẩm sau 3 Phương pháp tạo bảo quản chế phẩm NPV sâu róm thơng dạng thể - Sâu chết bệnh thu thập từ đồi, rừng thông lây nhiễm nhà Hợc cất giữ lọ, can sãm màu từ 10 - 15 ngày cho ngấu sau tiến hành khiển nát cối dã tay máy xay sinh tố, máy nghiền cho sâu nát m Tiếp dó dùng nước để lọc, lọc qua vải mỏng(hoặc xô màn) -3 lớp để bai bd xac sâu Lọc đến nước thơi - Dung nước lọc can nhựa sẵẫm mau dé noi ram mit cho lang dong Bau - đổ bớt phần nước phía đi, giữ lại phần lắng png(dịch thể NPV cô đặc) - Bảo quan dịch thể NPV nơi thoáng mát tránh ánh nắng mặt trời Nếu có Wêu kiện cho thêm 30 - 50 % glicerin vào dịch thể để chống thối, bảo quản lâu , - Dich NPV dùng phun lại ngồi đồi rừng thơng để trừ sâu róm thơng fa tiép theo Phuong pháp tao bảo quản chế phẩm NPV sau róm thơng dang a) Ngun liệu sử dung - Bột tan a - Glicerin - Than hoạt tính - NPV sau róm thơng dạng dịch thể b) Cách tiến hành - Trộn tất nguyên liệu để bột tan hấp thụ NPV sâu róm thơng Bang dich thể, trải mỏng khay nong, nia sạch, dùng quạt hong khô diéu kien ram mát, nhiệt độ khoảng 25 - 27c Các nguyên liệu trộn pheo ty le : 1kg bot tan + 0,6 lit dich NPV + Sgr than hoạt tinh + 50 ml glicerin - Sau hong khơ,đóng gói chế phẩm túi ni lông lớp : lớp Kó màu tối, lớp ngồi màu trắng Mỗi túi khoảng 200 - 500 gr để thuận tiện cho hgười tiêu dùng - Bảo quản kho râm , mát, thoáng khí để phun lại ngồi đổi, rừng hơng phịng trừ sâu róm thơng lứa | PHƯƠNG PHÁP SỬ DỰNG CHẾ PHẨM NPV SAU ROM THONG DE TRU DOI JONG HAI NAY TREN DOI, RUNG THONG CACH PHA CHE CHE PHAM NPV SAU ROM THONG DANG DICH THE - Thường 300 - 350 sau róm thơng chết bệnh tuổi V, VI (sau chet có kính thước lớn nhất) nghiên, lọc pha với I lít nước ccho ta l lít chế ẩm NPV dạng dịch thể "2 PHUONG PHAP SU DUNG NPY i a) Cách pha dung dịch phun i - lít chế phẩm NPV sâu róm thơng pha thêm 400 lường đỏ (hoặc rỉ dường) để tăng fun máy phun động lít nước + 5% độ bám dính thuốc phun cho thông Đối với chế phẩm bột : dùng kg/ha thông Phun binh phun động tự có sức đẩy lớn để bột trùm kín thơng b) Thời điểm phun - Phun sâu róm thơng tuổi nhỏ (tuổi I, II) hiệu diệt sâu cao 3n làm tết cơng tác dự tính, dự báo tình hình phát sinh phát triển loại âu đổi rừng thông để định thời gian phun cho thích hợp hiệu c) Cách phun - Phun NPV sâu róm thơng đồi, rừng thông vào buổi chiều râm, mát, ánh mưa, tránh phun lúc nắng, gió to - Phun ướt thông để tăng khả tiếp xúc NPV với âu hại KẾT QUÁ THỨ NGHIỆM CHẾ PHẨM VIRUT (MNPV- SE) TRỪ SÂU EO DA LÁNG - SPODOPTERA EXIGUA HUBNER ( NOCTUIDAE EPIDOPTERA ) TRÊN ĐÔNG RAU ẤP ĐÌNH, CỦ CHI, THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH sek PTS Đồn thị Bích Ks Lé Tan Pic KS Pham Ngoc Triét Viện Sinh học Nhiệt đới, TP HCM DAT VẤN ĐỀ: : b Sau keo da fing - Spodoptera exigua Hubner phan b6 khap noi ñ 200 loài thuộc 40 họ thực vật khác ( HiII T983) loại thuốc hóa học ( Poe, 1973) kể loại thuốc IPyrethroid Erie, 1979) Vi sâu keo da láng trở thành đối tượng nguy K hại ngày lớn cho trồng, kể trồng cách ly nhà trén giới ăn kháng với hầu tổng hợp ( Van hiểm gây kính Ổ nước ta sâu keo đủ lắng phân hố rộng, gây hại cho nhiều trông loại rau, hành, đậu đề, công nghiệp nhiều loại trông khác Sâu ko hing nước ta kháng với hâu hết loại thuốc hóa học Càng phun thuốc u cảng phát sinh nhiều, liên tục khó phịng trữ, Có vụ rau xanh người nơng ˆ lún dã phải phụn 35-30 Tần thuốc hóa học có độ độc cao đất tiền mà không đâm lo dược si trơng, c3 Do dó, để phịng trừ có hiệu loại sâu hệ thống tổng hợp ( IPM) ngồi việc dùng thuốc hóa học hợp lý sở sinh học, sinh thái cần phai phát triển túc phương pháp phòng trừ khác phương pháp sinh học Vị rút côn trùng, đặc biệt ví rút đa điện nhân ( NPV- Nueclear polyhedrosis varus) dược xem tác nhân phòng trừ sinh học sâu keo da láng tốt (Payne, 1986), cần nghiên cưu áp dụng khuyến cáo sử dụng rộng rãi sâu keo Khơng kháng loại chế phẩm khơng hại quần thé sinh vật có ích hồn tồn tránh đ nhiễm mơi trường bẩn độc nơng sản phẩm „ Mục đích thử nghiệm chế phẩm vi rút ( MNPV- Se) trừ sâu keo da láng nhằm : fring - Kiểm tra tác động chế phẩm đến số lượng sâu keo da láng - Kiểm tra ảnh hưởng chế phẩm đến phát triển trồng Trên sở kết kiểm tra nghiên cứu đưa vào sử d ụng hệ thống lòng trừ tổng hợp ( IPM) sâu keo đa láng vùn £ rau hành, đậu đỗ, cơng lệp có lồi sâu phá hại VAT LIEU VA PHUONG PHAP THU NGHIEM: + Val lidu ; : Chế phẩm vi rút thử nghiệm nguồn chế phẩm đề tài KCO§8-14 Viện Sinh ục nhiệt đới tạo gồm2 loại: MNPV -Sel MNPV -Sell - Các loại thuốc hóa học Sherpa Sumicidin Cidi - Bình xịt: loại đeo vai thông thường - Cây trồng: Cay dau bắp 35 n Bày tuổi lúc mật độ sâu keo da láng ‘ed liy cao phân bố đồng +Phương pháp: Khu ruộng thử nghiệm dược chia làm lơ lị cơng thức với diện rộng không lặp lại Lõ A : Phun XINPV- Se]l với nòng độ 1.24 10) PIB/ha Lo B ; Phun MNPV-SeII với nóng dộ 1.0 x 1012 PIBsha +3 % Shcrpu Cidi- thuốc hóa hoc nong dan van dang dùng Lo byC đối chứng Không phun c chế phẩm vị rút mà phun thuốc hóa học nóng än vận thường dùng3 - # ngày/ần với nông độ 0.3%, hiệu ) - Lượng thuốc phun: 400 1/ha - Thuốc dược phun lên cay ca mat la phun vào lúc chiều mát 5-6 - Sau lần phun thứ † tuần, phun lặp lại chế phẩm Tần với nông độ lượng Joe thuốc tương tự lần1 - Điều tra số sâu sống lị trước sau phun chế phẩm va thuốc hóa học 37.11, ngày theo điểm chéo góc diểm lấy 10 theo hàng Các số liệu điều tra xu I theo Franz: Số sâu sống lô TN SG 1S sau phun X Số sâu sống lô ĐC trước phun .1-+£Œ11 SỐ sâu sống lơ TN trước phun Só sâu sống lơ ĐC sau phun KẾT Q THÍ NGIHIEM : Kết thí nghiệm chế phẩm vi rút MNPV- wlva2 Se trừ sâu keo da láng thể ¡: Số sâu sống điều tra trước sau phun chế phẩm MNPYV-Se tai dong rau Ap Dinh, 1995 : } zông thức thử nghiém | Số sâu sống trước P MNPV-Sel 12x 10° PIB Ana MNPV-Sell 2x 10° PIBMha + | 0.03% Sherpa Jngay | Sngav | 138 108 ; 62 48 24 $2 7ngav | U | lángày 34 18 76 34 16 10 96 108 68 62 | Đối chứng không 64 hun ché phẩm phun thude hoa ạc 3-4 ngày/lân thường Số sâu sống sau phun ( con) phun (con) | | | | i lệ sâu giảm(%) sau phun phun chế phẩm Cơng thức thí nghiệm MNPV-Scl L2 x 10PH/hà MNPV - Sell 10 x LOMAa PEB £0.03 Sherpa Phan tram sau giảm sau phun (%} J | 7neav | Ungar| ldngay Jngav ị AT) i 7289 | vỉ rút MINPV.Se FOS ị s3.08 | \ | 8840 | | R134 ị | 87.72 oak | R605 Ị 955 | on tra theo đối đồng ruộng phân tích hang dan liệu chúng tơi có đá nhận xéL sau ; lị dược phun chế phẩm ví rút MINPV-Se trữ sâu keo da lang tai Ap Đình ảnh phố Hồ Chí Minh, tác động chế nh am rõ lên biến động số lượng hoại sâu, Iliệu tực chế phâm vi rút k éo dài, lúc đầu bị nhiễm vị rút sâu Không gây hại dáng kể cho cày, O16 A ché pham MNPY-Sel phun vi none d ð5 lv x 107 12 PIH/ha có củatác dụng M Keo da lắng tốt, TY lệ sâu giảm xuốn £ cách rõ rệt so với đối chứng Sau un > sau da giam ti 76.860 Õ lô D chế phẩm MNPV-Sell phun với nồng độ 1.0 x 102 PI/ha, phun có em thude Sherpa 0.03% ( 1/10 liều nông dân thường dùng) gây cho sâu ngừng anh, tý lệ sâu giảm thấy sau phun ngày - 72,59% sau ngày giam lô A ( 53,08%) _ Sau ngày tiến hành diều tra phun lặp lại hai lần Sau phun 11 ngày kể lừ tý lẻ sâu giảm lô thử nghiệm gần ( 87.72 86,05%) Ổ lơ đối chứng, nơng dân phun thuốc hóa học thời gian thử nghiệm chế MNPV-Sc lần mật độ sâu giảm không kể Sau |2 - 14 ngày, số gsàu kco da láng biến động lúc ban đầu trước phun'( bảng L ) Qua thời gian thử nghiệm chế phẩm vị rút trừ sâu keo da láng đậu bắp Đình Củ Chỉ, cho thầy đâu hấp ló phun chế phẩm MINDV-Se phát triển tốt so với lô phụn thuốc hóa học, mượt mà, đậu nhiều to, lô phun thuốc học bị căn, lú cứng nhỏ Chế phẩm XINIV-Se phản phối sử dụng thử nghiệm số hộ dân Khác, TL hộ nông dân sử dụng chế phẩm ví rút cho ý kiến ng nhật Tà ; thuốc miểển vỡ Mi hạn, dặc biệt phun Klơ phụn chế phẩm ví rút có túc dụng từ sâu keo da láng tốt thấy rõ sâu to nhỏ chết lá, Miật độ sáu giảm rõ rệi, đâm báo dược suất thuốc xong, người khơng thầy mệt khí phun thuốc hóa học MNPV -Se quan sắt thấy nhiều bọ rùa nhện ăn thịt ong ky ong den kén trang KET LUAN : ™ Sau thy nghiem chế phẩm vị rút trừ sâu Keo da láng vùng rau xanh Củ chỉPio Che Minh, chế phẩm MINDV- Se đề tài CNSHQG KCO§-14 Viện sinh Nhiệt dới tạo có tác dụng mạnh đến biến động số lượng quần thể sâu keo ling đồng rau, Sau phun ngày làm giảm số lượng sâu tới 81-R5đ%, đàm bảo ắc chân suất trồng Trên sở kết nêu khuyến cáo cho ông dân app dụng rộng rãi chế phẩm để dâm báo cúc vùng trồng rau đậu chống msdu keo da ling dang khang cic loai thuốc hóa học bảo vệ mơi trường chống ban b cho nóng sản phẩm, đặc hiệt cho rau ăn tươi TAI LIEU, CONG TRINH DA CONG BO LIEN QUAN DEN DE TAI I Monasturski A L; Tran Dinh Pha; Truong Thanh phần môi trường thức ăn nhân tạo không agar ni sâu non Gian; -Thanh cánh vay (Tạp chí BVTV số 1/1992 - trang 32) Tran Quang Tan, Truong Thanh Gian CTY; - Kết nghiên cứu việc tạo sinh khối NPV sâu xanh (Heliothis armigera Hũbn), sâu khoang (Spodoptera litura Fabr) va sau keo da l4ng (Spodoptera exigua Hubn), điều kiện phịng thí nghiệm (Báo cáo khoa học, Hội nghị khoa học Viện BVTV ngày 24 -25/11/1993 - NXB Nông nghiệp, trang 46) PGS - PTS Truong Thanh Gian CT: - Kết nghiên cứu tạo | công nghệ sản xuất hàng loạt côn trùng để tạo chế phẩm virút từ sâu hại (Báo cáo khoa học Hội đồng khoa học Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm tháng L1 / 1994) Tran Dinh Pha, Truong Thanh Gian; Monasturski A L:|Hu tnh Thi Huelva CTV- Một số kết nghiên cứu năm hàng loạt sâu xanh (Heliothis armigera Hùbn) chí BVTV số 5/1993 trang 1990 - 1991 ni nhân thức ăn nhân tạo (Tạp 19) š Tran Đình Pha: Đào Thị Hué, Truong Thanh Gian va CTV: - Bước đầu tìm hiểu phương pháp ni sâu keo đa láng (Spodoptera exigua Hubn) thức ăn nhân tạo phịng thí nghiệm (Tạp chí BVTV số 1/1994 trang 12) PTS Tran Quang Tan va nhóm nghiên cứu VPVW- Kết tạo sử dùng chế phẩm NPV sâu đo xanh (Anomis flava Fabr), phương pháp thủ công vùng Châu Giang - Hải Hưng số 3/1994 - trang 4) (1991 - 1993) (Tạp chí BVTV Tran Dinh Pha, Tran Quang Tĩn (Viện BVTV), Nguyễn Phan Quoc Hién, Đơ Khác Văn Đăng, Ngữ (Trại bóng Tơ Hiệu - Sơn La) - Kết đánh giá hiệu lực chế phẩm virút sâu xanh (Virin - Ha) trừ sâu xanh hại (Hcliothis armigera) Tô Hiệu - Sơn La năm 1993 (Tạp chí BVTV số 3/1994 - trang 8) 8& PGS TS Truong Thanh Gian, PTS Tran Quang Tin, PTS Nguyễn Thiéng\va CTY: - Két nghiên cứu công nghệ sản xuất hàng loạt côn jưùng để tạo chế phẩm virút trừ sâu hại (Tạp chí Nơng nghiệp inghiệp thực phẩm số 2/1994 trang 55) ‘9 PGS TS ‘Trin Quang Truong Thanh Gian, PGS.PTS Lé Tân, KS Nguyễn Đâu Tồn Van C7; Thuyet, - Cơng PTS - Một số kết nghiên cứu sản xuất ứng dung NPV (virút nhân đa diện) sâu róm thơng để phịng trừ đối tượng thơng Thanh Hóa (Báo hại (Dendrolimus cáo khoa học Hội punctatus đồng Walk) khoa học rừng Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm ngày 12 -13/1/1995) 10 PGS TS Truong Thanh Gian, PTS Tran Quang Tin, KS Nguyén Đậu Toan va CTV; - Ket qua nghién cttu sản xuất ứng dụng NPV phong trừ sâu róm rừng thơng Thanh thực phẩm số 3/1995 - trang 97), Hóa (Tap chí Nơng Nghiệp , Cơng nghiệp Đề tài KC 08- 14 Đề mục N/C công nghệ Báo cáo kết qủa nghiên cứu SX thử nghiệm nấm thực đề tài đăng kí Metarhizinm với chương trình KC 08 Năm 1995 (nh : gửi ; - Ban chủ nhiệm Chương & trình KC 08 - Đồng chí Chủ nhiệm Đề tài KC 08-14 - Ban giám đốc Viện Bảo vệ thực vật + Can vào kế hoạch nghiên cứu mà Đè tài kí với Ban chủ nhiệm chương trình KC 08 vào 8/3/1995, + Căn vào kinh phí đư ợc cấp năm Bộ khoa học công nghệ môi trường, Ban chủ nhiệm chương trình + Xết mặt nghiên cứu khoa học khả nẵng thực đề tài, nguồn kinh phí có hạn, địa bàn nghiên cứu xa xơi, Song với nỗ lực tinh thần trách nhiệm cao nhóm đề tài chúng tơi hồn thành nhiệm vụ giao với nội dung nghi ên cứu chí nh sau : Xác dịnh cơng thứ c mơi trường qui trình sản xuất tạo hàng loạt lượng sinh khối rẻ tiền phù hợp với điều kiện Việt nam : ~ Môi trường thạch - Pep ton, Glucosša muối khoá ng KH;PO¿ MgSO H,0 - Môi trường cám, _ an tương, bột đậu xanh, đường Saccharosa, Đã sản xuất 200 lR che phẩm dủ tiêu chuẩn x 10° bào tử / §r có hoạt lực sinh hoc dié t r 70 % sau 10 ngày thí nghiệm Đã tiến hành thử nghiệm diện tích 20 tỉnh Bà rịa Vũng tàu Đồng nai hiệu qủa dat 63,5 - 67,8%, sau 20 ng ày thí nghiệm ( Có cán trực tiếp Miền nam tháng từ tháng - tháng 9/ 1995 ), ob Các nội dung nêu xin dược minh họa bàng báo cáo :khoa học kèm theo Như c ãn vào nội dung hợp đồng, thực thiện nghiêm túc phù hợp với nội dung đề tài đề ra, có biên nghiệm thu đề tài + Ông Chủ nhiệm đề tài KC 08-14 + Địa phương sử dung theo Két qua đánh dấu khả nang nghiên cứu công nghệ sản xuất với khối lượng lớn triển vọng ứng dụng địa cụ thể năm Vì chúng tơi kính đề nghị Ban chủ nhiệm chương trình, Bộ KHCN & MT nghiên cứu xem xét tạo điều kiện để Đề tài phát triển qui mô lớn kế hoạch 1996-2000 nhầm thực bảo vệ môi trường sống, bảo vệ l Nông nghiệp bền vững nước ta Chúng xin bày tỏ biết ơn trân trọng ! Hà nội Ngày 20 tháng năm 1995 Chủ nhiêm nhánh Đề tài KC 0§8- T34 PTS 27 i Pham thi Thay l Đặt vấn đề: icTule vưu yy ee Th Huy 3A V Bete vie thư xt Trong năm gần xu hứơng chung giới Việt nam hứơng phòng trừ sâu bệnh hại trông chế phẩm sinh học dang dược nhà khoa học nghiên cứu Đây hứơng sử dụng hệ thống phịng trừ tổng hợp bảo vệ trồng Hương phòng trừ dã mở nhiều triển vọng khơng bảo vệ môi trừơng sinh thái chung, đảm bảo an tòan cho ngtol va gia súc mà bảo tơn cá ngưồn tài ngun sinh vật có ích tự nhiên Với đà phát triển vũ bão khoa học công nghệ tiên tiến lĩnh vực Như biết kỉ thứ 21 kỉ công nghệ sinh hoc, duoc su quan tâm nhà nứợc , dựợc đồng ý Han chủ nhiệm chương trình KC 08 Ông Chủ nhiệm Đề tài KC 08-14 dựợc giao tiến hành đề tài : * Nghiên cứu công nghệ sản xuất thử nghiệm chế phẩm nim Beauveria va Metarhizium để phòng trừ mot Số sâu hại trơng, ˆ.H Tình hình nghiên cứu ngịai nứợc : Nấm gây bêrfPcôn trùng dược nhiều tác giả nhiều nứợc giới nghiên cứu n Macleod (1954), Aguda, R.M Saxena (1984) da nghiên cứu ảnh hửơng nấm trùng lịai Metarhizium Beauveria lên l số côn trùng hại Năm 1976 Latch Fallcon nghiên cứu sử dụng nấm trắng lòai Beauveria bassiana Vuill.trong việc phòng trừ tổng lợp với sâu Leptinotarsa desemlincata, tác ziả nhận thấy có hiệu Năm1980 Sandarababu P.C dã nghiên cứu sử dụng nấm màu xanh Metarhizium anisopliae Sorok để phòng trừ sâu Oryetes thinoceros (L), thí nghiệm sau ngày hiệuc qủa diệt sâu 68,5%, bào tử nấm mọc trở lại sâu - chết 38% Ở Brazin nấm xanh Metarhizium sản phẩm khởi dau duoc nhận biết từ Metaquino, tác giả nghiên cứu sử dụng nấm xanh để phòng trù rệp hại lúa (Zacharuk 1971) Ơ Hà lan, Samuel Heale 1986 sử dụng chế phẩm Metarhizium phòng trừ rầy nâu hại lúa, tác giả cho biết 68% lương chết tù nấm này, Gillespie Collins Atienza sử dụng nấm xanh nấm trắng lên nâu hại lúa Từ 1988-1990 Philip pin, Hoang mạnh Thắng chọn thuốc nấm lòai Beauveria bassiana Vuill dé phòng trừ nâu hại lúa Tác giả nghiên cứu nồng độ từ 2.5x10 / bào tử /ml đến 5x I0” bào tử/ml dịch cho thấy ngữơng 5x10” bào tử /mi sảu 14 1Igầy nâu chết 70% tỉ lệ nấm mọc 24.4 + 8.3 Hiện Anh số nứợc khác giới nghiên cứu nấm trăng nấm xanh dé phòng trừ cào cào hại trồng (H.Mark 1991) O nttoc ta , duoc ý đầu tư nhà nứơc , đề lài nghiên cứu dược Liến hành từ 1991-1995 , Việc nghiên cứu nhằm mục đích Tìm hiểu số lọai nấm có nứợc ta, tiến hành nghiên cứu xác định khả nãng phát triển lọai nấm l-số môi trừơng tiến tới sản xuất thành sinh khối, sở ứng dụng phịng trừ l số sâu hại HH Nơi dung phương pháp nghiên cứu 1.Thu thâp chon lọc chủng nấm có nứợc ta : ‘trom phá -_ Thu mẫu nơi có dịch sâu cao -_ Phân lập nguồn bệnh phịng thí nghiệm mơi dĩ nghiên cứu nhóm đề tài ( Phạm th! Thùy 1992 ) theo phương Ïinogradski( 1953 ) _~ Phân lọai theo tài liệu Barrnett Barry (1972) Nghiên cứu công nghê sản xuất loai chế phẩm ,2.1 Môi trừơng nhân giếng : Môi trừơng Viện Bảo vệ thực vật nghiên cứu bao gồm : Bột ngô, cám gạo, bột dậu , Môi trừơng sản xuất : Cám gạo, IIgô Nhân sinh khối phương pháp lên men xốp Xác định bào tử bưồng đếm hồng cầu ¢ Thử nghiêm : * af Ray nau; ° tuổi * Trong phòng : Xác dịnh ngữơng nồng dộ để thử nghiệm với ray nau Một công thức Tần nhắc lại, lần 20 Hiệu qủa tính theo Abbott (1925) ° ® , Đồng ruộng : Thi nghiệm Duy tiên-Nam hà, ® cơng thúc sào, » Xác dinh nơi có mật dé cao * Thời gian điều tra trứợc sau phon 1,3, 5,7,10.15,20 * Phương pháp : Điều tra theo phương pháp chung giới nứợc Thu thập mẫu phân lập m b/, Sâu xanh : Thí nghiém tai HTX Lién khé-Chau giang -Hải hưng, cơng thức có diện tích sào Điều tra trược sau phun 1,3,5.7,10.15,20 ngày Phun 4x10!” bào tử /m Thủ mẫu phân lap e/ Cao cao: Thi nghiệm Bà rịa- Vũng tàu Mỗi công thức 2000 nm, phun với nồng độ 5x10!” bào tử / (#855) Các thí nghiệm đồng ruộng dược hiệu dính theo Henderson Tillton, Ế Kết qua n cứu : Thu thap va chon loc chủng nấm có khả nang trừ sâu Tu nam 1992-1995 qua thu thập mẫu nấm lòai sâu hai , dựa vào tài liêu phân lọai tập hợp lại bảng “hơng ehaean tính, song hứng so Đảng_l : Các chủng nấm Beauveria Met arhizium lọai sâu hại khác ST T° |Ten nam Việt Tén khoa hoc | Nấm xanh 2, | EC Metarhizium anisopliae Sorok ce Moniliacae “ mm _ Metarhizium flavoviridae Gams i | | Ị Đeauveria bassiana VuilI, “6 ——] | O bang | †| | | ching Nguon gécti Ray nau M nam Sau can gié Sâu đo xanh Sâu xanh Moniliacae Moniliales M.nam Chấu M.nam — chấu Rầy nâu Sâu cắn gié Sâu xanh ị Sâu xanh | Sau.khoang Sâu tơ Sau keo da lấn Chau chau t6i thu duoc Sorok (Ma) va ching Beauveria bassiana (Bb) có rau Qua đậy cho chúng nhiên phong phú , thêm thiên nhiên để | Sâu keo da láng Châu chấu tí | Nam tran 8g — Bo Maeniliales 4, thiết Ho ching Metarhizium anisopliae Metarhizium flavoviridae (Mf)va ching tập trung I số sâu hại lúa , ngô, day, nhận xét nứơc ta nguồn nấm bệnh tự việc nghiên cứu sản xuất tích lũy bổ sung ngăn chặn khống chế đựơc sâu hại cần Tuyển chọn chủng có hoat lực diệt sâu từ chủng : Qua nghiên cứu xem xét chất lương, khả sinh bào tử chủng nấm thu dựợc Mặc dù nấm khơng chun tính, song chúng tơi tiến hành chọn lọc, | chủng nấm Bb, M a, Mf diệt trừ sâu ay trén sau nao nghiên cứu cơng nghệ sản xuất để Ví dụ : trừ rầy nâu nấm Ma, Bb, rầy nâu Nấm Ma, Mf, Bb châu chấu Nấm Ma, Bb sâu xanh Nghiên cứu công nghề để sản xuất : - Hầng nguyên liệu nghiên cứu chún dưa sơ đồ nghiên cứu để sản xuất sinh khối nấm Bb Ma tron g phịng thí nghiệm vi sinh Viện BVTV , Mầu 1thư thâ dp Phân lập môi trừơng Lên men giống cấp I al Sản xuất sinh khối `» Làm khô Hảa quản Ye để ứng dụng Kết qủa nghiên cứu ch ất lương sinh khối trïn bày lên bảng Bảng 2: Khả sinh bào tử nấm môi trừơng nghiên cứu Viện BVTV Loai nấm Môi trừơng nghiên cứu | Số bào tử TŒc) Sản xuất sinh khối 28,5 | 74,5 Saburo khóang chất Metarhizium | Nhân giống cấp I Beauveria Saburo khdang chat Nhân giống cấp _| Sản xuất sinh khối eed vey 5,8x 10° 5,6 x 10° 5,0x 10° 5,1 x 10° 5,2x 10” 4,8 x 10° |H(%) | Như môi trừơng nghiên cứu Viện BVTV cho số lượng bào tử qúa trình phân lập nhân giống lên men sinh khối dạt cao chủng Metarhizium va Beauveria Với khả sinh bào tử chọn môi trừơng để tiến hành sản xuất ị Nghiên cứu thử nghiêm - 4.1.Rầy nâu bai lúa : _— a/ Trong phòng : Nghiên cứu xác dịnh ngữơng nồng dộ bào tử gây chết nấm Ma Kết qủa dược trình bày lên bảng Bang : Xác định ngữơng nồng dộ gây chết tuổi chủng nấm Ma Stt | Nong độ sử dụng ( bao tir / mi ) i 3, 4, 5x 10° 25 xI0” 50 x10” 28,8 '49,5 524 500 x10" 78,5 100 x10° 200 x10” Hiệu qủa diệt rầày sau l4 ngày phun (%) % gay chét % nấm mọc 58,2 68,7 ray, 293 37,4 43.1 50,2 Tc) TH (%) 28.1 °c 73,5 % 593 Ở bảng thấy từ ngữơng 200 trở lên có hiệu qủa diệt tuổi chủng nấm Ma Tuy nhiên ngữơng 500 triệu bào tử hiệu qủa diệt đạt 78,5%và nấm mọc lại sau thí nghiệm thẻ đạt 39,3% chọn ngữơng để tiếp tục thử nghiệm cha đợt b/ Thí nghiêm đồng ruộng : Như phần phương pháp truổi bày thí nụghiệm trừ nâu triển,khai tạiHTX.Trắc văn-Duy tiên-Nam hà vụ Chiêm xuân năm 1994: Kết qủa.đựợc trình bày bảng ts TH Chủng nấtn Ma | Bảng : Hiệu qua phòng trừ nâu hại lứa nấm Ma, Bb trén đồng ruộng vụ xuân 1994 Nam hà Hiệu qủa phòng trừ (% tinh theo Henderson Tilton ) sau cdc 26,7 Bo 45,7 | 308 578 Đây kết qủa lúa Duy tiên-Nam nam Ma, Bb dạt f không ảnh hương đến thịt Lycosa 4.2.Thi nghiêm | 58,2 ngày: T 598 10 68,1 65,2 ban đìu việc sử dụng hà , kết qua sau 10 ngày 65,6% Chúng dã điều kí sinh thiên dịch Bọ trừ Sâu xanh hai day 15 59,7 ` 62,5 20 55,1 497 | thuốc nấm trừ ray nau thí nghiệm đạt 67,9% tra thấy chế phẩm xít mù xanh Nhện cách HTX - hai với ăn Liên khê- Châu giang- Hải hựng : Kết qua thir nghiệm tron g vụ day qua năm 1992 - 1993 cho kết qủa hiệu lực diệt sâu đo xanh (SĐX) dược thể lên bảng : Bảng ; Hiệu qủa việc sử dụng lọai nấm Ma xà Dh để trừ SÐX hai day năm 1992 1993, | Lọai thuốc sử dụng Metarhizium + Hiệu qủa phòng trừ (% chết theo Henderson THỊ.) sau TH | 10 J 12 15 18 | | 20| 0,02%tween 80 38,10 | 70.13 1831 | 31,13 | 64,65 | 50,15 | 62,46 43,98 0,02 %tween80 29,32 | 55,59 76,20 | 34,77 86.44 | 48,98 | 55,90 64,18 76,92 | 73,34 | 64,12 | 61,63 69,71 Beauveria + Metarhizinm + me Sag 54,30 | 60,32 Beauveria + : 0,0225tween80 411115703 |55/70 |7083 | 67,69 66,42 | 68,65 | 56,32 Qua bang cho thy ring thí nghiệm thử thuốc ném SDX hại, day có hiệu qủa sau7x1⁄2 ngày:phún'¡ Hiệu'qủa dat duoc trén 70% Ket” qữa da mở nhiều triển voñg sử dụng thuốc nấm với SDX hai day tai“ 44 Hải hưng Đặc diểm bật phun thuốc nấm Ma Bb lên SDX “mat độ cao, điều làm cho mật độ sâu bị bệnh cao bổ sung: nguồn bénh vao ty nhién , gập điều kiên ơn ẩm độ thuận lợi nấm lây lan phát triển 4.3.Thí nghiêm phịng trừ cào cào hai Iigơ, mía nấm Mf Bb tai Bb _ Đà rịa Vũng tàu : Như phần phương pháp trình bày chúng tơi có thử nghiệm lại xã Bầu lâm huyện Xuyên mộc- Bà rịa Vũng tàu Kết qua thu chúng tơi trình bày lên bảng ˆ Bảng 6a : Hiệu qủa phồng trừ cào cào chế phẩm nấm MI xã Bầu lâm- Xuyên mộc- Bà tia Vũng tàu ˆ Th/gian | Liệu qủa phòng trừ (% chết theo Henderson THỊ ) sau phun ồi 810 | Th ịa bình Th.7 52,4 32,8 | ngày 10 | 14 | 58,9 52,3 72,0 61,5 21 81,6 63,0 | | | 28 91,2 68,1 35 | 96,7 85,4 Qua bảng 6a thấy diém phun thuốc hiệu qủa với cào cào sau tưần trở đồi S10 hiệu qủa cao điểm Hịa bình 2, theo chúng tơi thời gian phun diểm 810 sớm thời tiết thích '_ hợp cho cào cào bị lây bệnh lúc đó, lương mưa lón kéo dài vài bạ ngày .Điều thuận lợi làm cho hiệu lực nấm tích lũy phát huy tác dụng - hiệu qủa kéo dài cào cào trương thành Đảng 6b : Hiệu qủa trung bình nấm MIÍ Dia diém TN tla Viing tau | Đồng nai phòng trù cào cào mùa mưa 1995 Hiệu qủa phòng trừ (% tinh theo Henderson Tiil ) sau : 13 20 28 35 42 34,58 45,75 35,95 63,43 41,74 67,82 63,13 59,64 i 63,04 57,07 Trong năm 1995 điều kiện thời tiết mưa muộn lương mưa ít, Đồng nai chưa thấy tương lây lan nấm Còn Bà rịa 14/ Vũng tàu cào cào phát sinh muộn nên việc phun thuốc chậm hơn, sau phun có rmmưa kết qủa sau 28 ngày dat 67,82% Điều quan trọng bào tử nấm phát sau tuần phun trở qua điều tra thấy cào cào non chết nấm, thu mẫu thấy cào cào mọc tòan nấm xanh Phân lập lại phịng thí nghiệm, qua giám định chúng tơi thu duoc ndm Mf Đây vấn đề có ý nghĩa quan trọng việc phòng trừ cào cào thuốc nấm sinh học KếT LUAN : Thu thap duce nguồn nấm Beauveria nguồn nấm Metarhizium | số dối tương hại trồng lúa, ngô, bông, đay, rau Tuyển chọn chủng nấm có triển vọng, lưu giữ bảo quản lạnh chủng cào Ð ML rầy nâu, sâu xanh, chủng MI cào Hồịan thiện qui trình sản xuất lọai nấm sở phân lập dựa vào môi trừơng nghiên cứu cải tiến từ mơi trừơng Saburo mơi trương Czapek Dox - Đó mơi trương Saburo có thêm muối khóang KH;PO¿ MgS ©¿.7H;O Đã nghiên cứu sản xuất thành chế phẩm nấm B M nguyên liệu sẵn có Việt nam bột ngơ, cám gạo, bột đậu tương, bột dậu xanh đừơng Sacharosa Đã tiến hành thử nghiệm để phòng trừ rầy nâu tuổi nhà lứơi xác dịnh dược ngữơng nồng độ sử dụng x 10” bào tử / mi trở lên Năm 1994 thí nghiệm HTX Trắc văn-Duytiên-Nam hà vụ Chiêm xuân kết qủa thử nghiệm sau 10 ngày nấm Ma đạt 68,12% nấm Beauveria dạt hiệu qủa 65,2% Điều quan trọng thuốc nấm khơng có ảnh hửơng đến lịai kí sinh thiên dịch ruộng lúa Ngịai chúng lơi có chuyển thuốc cho Trung tâm BVTV phía nam thử nghiệm hiệu qủa dạt từ 65,2% trở lên sau 10 ngày phun Tại HTX Phứợc thanh-Chau ‘thanh-Tién giang ciing cho két qua tuong tu 6 Đã tiến hành thử nghiệm chế phẩm nấm Bb M với sâu đo xanh hại day HTX Liên khê-Châu giang-Hải hưng qua năm 1992,1993 kết chế phẩm nấm B sau 10 ngày ( lần phun ) 74%, kết qủa nấm M sau 10 ngày 76,7% Thí nghiệm phun nấm M: trừ cào cào Bà rịa Vũng tàu nồng độ 5x 10! bào tử / vụ mưa năm 1994 Kết qủa đạt 72% sau tưần phun đạt 91,2% sau I tháng Vụ mưa năm 1995 kết qủa phun nấm MỸ trừ cào cào Lại Bà rịa Vũng tàu san 28 ngày đạt 67,8% Còn Đồng nai đạt 63,1% sau 20 ngày Sau tuần phun Bà rịa Vũng tàu thấy có nấm xanh xuất cào cào Số liệu thực theo dúng hợp đồng dã kí với chương trình năm 1995 TỰ” us Reaqveia + thạm x Nguyện trần : *hị ` Thủy thị thạnh : ogi A câu ^ Ng Moc ` gon vA b ` ⁄ bàng giới ` Ï~ fae + brươne + nam ` tí x A ruat log3i & ` “trọn= 50 ¬ sriện Ì , +08+P ấm > cua ` nhầm ^ Om , Pđawxncbt ¬ mƯi ean, Bot A Gn bich x ï,bƯ TT hột a nơ, ce Tỉ ^ hot Rem hai ^ : cons thee wet thi va ` Barry sạn xuất điêu; £ oN tnử vọng Vu a hiền , cưu dụng SAU sâu hại cv metarhizium ak đề es ^ Phan 1972 QUA tiuành đường, a Tips, day i + va TAY + nươc sa ak , tia ^ y 4° thứ nghi ém trén Ray oe, ~ Le “uo cac ngương khác nhạu a nau É để — Hg xa cơng nego n & ¬ xgnh mơi Teanve erla ˆ trương nm a cus bao e ô 3) thành liehel , cứu VĂN nhiêu hic Ban iên nước ` ma chế mơ 2G £ gạc ` # ca ` GÌ Rombach.o ty tuện rome: “ Thạnh Tháp noo oy ` Đồng Bắc, oC Lién ncj hiệm + O,2 bào khé, ha, „ = ee LUG tự / lun Besuve xii nad: Chau! giànhtại nòng liêm rea eo, » Hat! đệ: phun ge ng Cade Poe, KbhLcn : | L111/ nhau, qua + ˆ chums ange ` "hot, trinh sử + janh ` bay l số loäi £ mjc nam hgi sâu hại ^ ` khác ws trùng, Kết ` `ố eon trung loai Besuveria: bass— zahizim (aonilinoa Moniliales) 1ườn” ahính @ Yist nam, Thơi gian rhhiện fab (3) lx~~———————_—_-———_ 1992 1995 1993 1993 1902 : B.3 3.4 BAS 1904 B.S BA? 3.8 3.9 B.10 1992 1992 1992 1992 Sâu , Ỷ Ö bảng ng 3eauveria baseiona ngô; day, đo xanh Sâu tatvị ; Shập 6lồi nấm ranh bơng phát mebonhizium đậu 1992 1992 1Ĩ số lồi nắm sâu hại lúa, C 2: fe để, cam chanh mau, , Moe tA Nehién cun A ĐÔNG n hệ sạn xuất obẤ phẩm nắm dya trén kha nang phot trian cha nếm bào tl nấm Beau verig Metarhizium, Kết qử sn “ + nghiên cưu thu thể ® uiện bang Kha ning phat tríign a mơi kiểm : trương ( Số “ 37410" / ml +,9, 4oŸ ftom nấm nghiên bao tra sau ngày = SN » eauverig cua ) tw Beauveria+ cứu ! Nam Viện va % a Metarhizium BVTV, Metarhizium tw kiém tra t OT I (SỐ bao sou ngay) eo en 48.10 / mì 5,8, 408 / Grom” | ` -Beauveria `, truons nhát + xudt b^nz ‘Metarhizium as 37 da triền £ san Beauveria toi sa won ' sv - n4m ` củn" thích ~, nhưn+? 15 5,8.10°/ dụng ago + điền Ae môi tiên em, orm tHÔi qua bào : m bử gu Thư nhi thu dược , ruộngdễ độ T sy che ‡ 4iệb sh giống ` + 46 - nộm, phịng * trừ ` mơi trụ cao hon ` bao cua £ tw & nam, ` nhầm ae nha & chine da tay ~ lưới KẾỆ nồng độ từ 500 đạt ~ nâu 1, 70% hại lúa, kết auveria Duy ` 1a qua + B nằm, chung bôi vay nấm ae & * đầu tu che thấy ngưỡng rầy + sd trien ~uat phi hao 2h nhạt K ` aA ẩm ’ san £ so sok ÿc nuôi cho quo sho n de + ~ nhân + trien yao fogi triện ok ` cul ` tietarhizium, Rhiệt G5 an nam phat ^ *ập hom Metarhizium a nHần v3 Tiền ¬— 6Œ Shu dược chuné + bôi ote KẾt qủa * thứ Shu A nghiệm xanh + phẩm hại đay _tinh theo Hen ——————-——— ! 10 * ah2 ' nắm La o Lién Beauveria as khé; , Hai Tilton) ! 15 ! 20 T—————————~l—T———~——~~-Tl————-—=—=——— £6 44 55,9% 6%,40 GAL 65 62 ,40 43,90 57 G69 66 ,4 68 4? hộ vt vinh theo _Henderson Tillton_) ! 10 ! 15 ! 20 I~—————-— Ì~——-— —— [ - _— 35 59 địch 14 50 Qua bang + cho sâu cac; có 76,9 thấy mưa việc Am 73;2 aA thử n & 'hiệm hiệu 61,1 £ thuộc gqua đạt nắm duoc 89 57 , qua sau „ cao năm, 7-10 tau va 199%, Đồng thừ nai , đê ‹ nghiệm Kat = ` phòng 24-14/7 chf phẩm qua È hu - trừ Cao 58 ;ð nấm ilebarnhizium chúng LAI cao 54,8 Ba bôi chế n 'hiệm thử qua KẾt ; Bảng ` & ghi Ầ Ba ‡a-Yting bang ~ ` , Vung v tau nam 1994 25 95 ego sau + ` ` 40 nguồn 37 ngi lus, x ons ` & at ` hao » a x ray cha nim Đa nghiệm © š nấm 78 3% ~ Đa thử * đồng phun VÀ nghiệm nai trén dién kha ning lay g ' Aguda.R.M, AT lên the én siong hưng, a tích bán AR 1984 nfm te kết trén aha dgt ^ z va đồng hiệu X g Sâu sau Ba ta điệt 14 13 đo 58, #anh 13 rja: a Metarhizium x Done ruộng - brử ` Xi ngương ar tai đồng ruộng đậu ~ định hã, 72% 2k giong ^ bột Metarhizium ; a nhaén „ai qua nắm ileta arhizium cho : £ cha ` va Me5arhizium$ dung n4m nuộng aoe , xac Nom * hiệu Hai 7~10 ngày T.A va lan va phát a 14 Metarhizium cam, ` Ứng cun 70 8-86 ,4%, dem A 14p ngơ, 3, 61 5-67 ,8%, ruộng Saxena có x : thi - ruộng £ nắm ˆ bột 3eguve»ia i lie, ok hạ phan ^ liệu nấm ' nau đồng Bax LIEU THAM KHAO đ- ^ trợ phun 7-10 Beauve#ia sau từ eauveria sau Ds Ray : -65 ,7% th nhm a d + õn ak Khoang & 2c a + audi “Op oy nến Đeauveria nguồn ^ nse, day, bong, rau Saburo ons 6- phu nấm Metarhizium nhậm rig 72,8 - 5~ kh 70 ,8-86 ,44% Năm ig ,3 76,9 - x Dong va , nấm có sơi Inhibitory eff e vhisium icides anis Oo pliae 16~ ? 96) atch C.M Studies ond on and Fallcon the ure use Beanvevig R.F of Viebnam MTHR, Wetarhizium on 21, Int BET fungi Rice MANGIT RESULTS OH HOLPERS, on Mets Resnewst LEFPECT BAL, JUTE control the Fhilippin Tim 20 39,48 Œi1aparvaba Ñ° 265/4995-, ON anisopliae rusults THRT Metarhigiun - 170 bassiang sietarhizium and entomogenous 1°76 Oryetes Rhinoceros Entomo phaga, Phạm thị Thuy 1093 Some research ouveria on effect lugéns OF SE SEL MILCOPER of Stal.) Beauveria AND Be in and GRass - oollecbion s s£ Peauveria and hetarhigium has kfirsE one consists been studieé of 10 sources of ists of Sources suveria The second of Metarhisium The one ain angry ae modified Saburo me enton, di un Sl uc oz e, EHAFO,, , MgsC + For improving the havinga oH valu bechnolom of Sead vo rla and Metarhig uction, “re ended ium: to use the locally orn powde: ; aveilsble material bron, s sue Soyb ean ^O/dC:' ond Sugar Beauveria an: Hebarbiaium funsi were used in fox controlling BET lab and green The > cul Showed ation of the Spores tha t the best ie 5.10 peu ml and 0, Which 1n the caus® 2:7 a mortality of field, 70% of BPI 02" tween 80 ~ solus! the result showed €d with Ketarhizium that and 61,7” with Benuveri 57 ,8% of BPH were wreatuent at Tiensian a afftep days of z, Jute Ssemilooper was jee of jute senilooner controled +8 Haihuns in 1992, 1993 up were died affter to Beauverig aud Metarhisi 10 ‘ays of applicat um 86,G io n of jute Semi Grasshopperg of 6,8,4O ae TS were died Was controled Netarhigium after 44 49 days in spores of Barta, ber looper Yungbau treatment Some with 72% were a of killed concentr— arass ~ KET QUA NGHIEN CUU NAM CON TRUNG (0hễ phẩm Binh học) Beauverta Metarhisium TRONG GlaI DOAN năm 1994 = 1994 + #?9, Phạm thị Thầy Nguyễn thị BẢo, Ding Thanh " Trần Thấp; đây, Trong năgần giới & nude ta jo nghiên cứu cáo chẾ phẩm sinh học Bảo vệ thựo vật ồn tài nguyên sinh vật cố Ích thiên nhiên sáo đầu tư để nghiÊn cứu, nhầm đáp Ứng với xu hưởng ung thời đại bảo vệ mơi trường sống, bao tồn sồi kÍ sinh thiên địch sổ loặi Y1 sinh vật : Nắm, Y1 khuẩn irus, tuyển trùng Thực bể thể giới nấm gây bệnh côn ùng đượo nhiều tốc giả số nước nghiên cfu nhy Philip pin, Xn 48, Thai len, Uc, Anh, My, Bungeri, Lién x6 ct, C§ng hos ec ane Ơ nước tay, _ : - - Đó se, giúp đỡ Chương trình Ơơng nghệ Sinh họo KỢ O8 ?rung tâm Đấu tranh 8inh họo Viện Bão vệ thực vật đø tgp trung nị nghiên cứu đồ xốx định.2 loài nếm xuất hiệnỞ số sâu hại trồng Trên sở nấm bắt khø phất triÊn nẤm thiên nhiên, chống tiễn hành nghiên cứu khẽ phat triển loại nắm số mơi trưởng vẽ tÌm mơi thường thích hợp đŠ nhân nhanh nguồn nẩm với sổ nguyên liệu rẻtiỀn &Š kiểm Việt nem sở ơng nghệ sinh họo Đồng thời đồng Ínghiên cứu thời điềm nồng độ tối thích để bỗ xung vào _nuậng với mục tiêu hạh chế quần thổ sâu hại làm lây lan nhanh nguồn nắm vào thiên nhiên, ROL DUNG VA FHUONG PHaP NGHIEN GUU Thu thgp nhimg nguồn nấm Beauveria Mebarhizium nhiên số trồng Lũa, MỈa , địch séir cho» thiên Đey, Rau, Bông, Nady 2, Phân lập nguồn bệnh { sổ môi trưởng Phân loại -dựa: vào sổ Ông chuẩn, vào tải 11ậu Barrnett va Barry , + ( 1972 )» z Nhân sinh khối ném Beauveria va Meterhizium trén sổ mơi , trường nước ngồi mồi trường Ở nướo¿ off rrưr Bằng tong nude a = dãc phương bhập va quéc +4 ) @ Lan Dung ( 1981 phồ chung Công nghệ V1 sinh vật biẩn theo tad liệu sủa 8mith (4968) ac thf nghiệm thử hiệu lực gủa loại nắm thí ghiệm nhà lưới bố trí Viện BYTY số lạnh đồng thuộc TỪ liêm-Hồ nội, Duy tiên Ram hà, số tht neh Gn Long định Tiền giáng, Bà rịa Vũng tau Minh Hồi theo tạo phươngpháp chung ‡ Thu mấu bệnh, phân tÍch phân lập 1g Kết qủa thử nhà lưới phòng đước hiệu đỉnh theo công thức cha abbott (1925) Kết qhe thf nghién đồng rugng hiệu đính theo sơng tho cls Kor QUA Henderson NGHIEN Tiliton (1925) GUU 1s Trong năm qua, kết qÚa thu thập nguồn nấm số đổi tượng sâu hại trồng, địch theo tải 1i@u phân loại ching tập hợp lại + đạnh sách oủa /|Ø loại nắn Beauverts sổ sâu hại oây trồng RẦy nâu, sâu đo xanh, sâu cẩn giế, sâu khoang, sâu xanh bơng, sâu rốm thơng, ôu cầu , Õ nm Metarhi z4 um xanh, snisoplise sâu cẩn giế, | tit flevoviridae Yề kết qs môi trưởng Sua qúa Sorok tử số sâu hại rầy sâu xanh bông, bọ trén 030 cao nâu, sâu đo nẩm Meterhi8l nghiên cứu phân lập nấm chủng tơi đựa vào + sổ smith trÌnh nghiên đố lä môi trưởng Czapek, môi cứu chẳng nhận thỂy môi la môi trường tương đối KH PO,, MgSO,.7H_.O Kết ata nghiên cứu tiên chng bao trưởng 8gbuno, trưởng 8sburo thÍch hợp nễu cho thêm sổ muối khống thÌ kết qùa hÌnh thằnh bảo tử tốt hen ching t6i rot re méi truéme Saburo ob gim + Ager, Pepton, Glucoze, KH,PO, WgSO„.7H.O với ph»6 nấm Bb ayt 4,8 x 40 bảo tử / “ul nấm Metarhiziun dat 5,6 x 40 bặo tử / m1 sau ~ ' 10 ngày 3s VỀ kết qủa sẵn xuất sinh khổi nÊm, chẳng chọn, ! - nguyên Liệu thich hgped sẵn nước bột ngô, cắm gạo, , bgt đậu đưởng sở nghiên cứn với tỈ 14 định chúng bôi thư kết qhe nfm Meterhisium ¢gt 5,8 x 408 bì _tử / gm sinh khối, cồn nếm Beauveris đạt 5,2 x 407 bào tử /en - sinh "khốt sau 1# ngày nuôi sấyở nhiệp 8g trung bình 28~292g be ag 13 70,5 i 75Re nen ` , | Nghiên cứu số thÍ nghiệm đỗ thử hiệu lực loại nấm uvaria Mebarhizium t>ong nhà lưới đồng ruộng † „ Xác định ngưỡng nồng độ đŠ thử nghiệm : Trong qỗổa trình Ên cứu chẳng tơi sử dụng ngvong 5425,50,100,200, 500 triệu tử/ m1, Kết qủa nghiên cứu Ta ngưỡng nẵng độ từ triệu bảo tử trở lân thÌ cho hiệu lực 7O% số vay nêu tuổi t sau - 10 ngày, Tử ngưỡng nồng độ chúng tổi sử đụng ứng dụng ngồi đồng nướng, l ` + Kết qùa thÍ nghiệm đồng ruộng chẾ phẩm nấm Beau veni Wetarhiz4itm :‡ : *,2414 ĐỔI với rẦy nêu hại lổa ¡ Kề tử vụ mùa năm 4994 đến biển, hình thử nghiệm điện tích nhở 40Q~ m° giồng Nếp hoa vàng khu thf nghiệm viện, nấm uveria Mebarhizium chng đầu ứng đụng với nồng độ x10" bho tl/gr cd thém chất bốm dính Tween 80 K&t qhse thf gm cho théy sau 15 ngày phun nhig t 46 27,7% va Am a8 67,5 với giai đoạn La trỗ chín sửa thi hiệu qủa bước đạt 56,2% Metarhiziưm 58 8% vot ném Beauveri, điều tra chứng thấy hiệu lực nấm kếo đậi đến thẳng đặc biệt lỗ cổ tượng nấm lây lan rby nâu, chủ yểu, rẦy trưởng thành, Vụ Ởbiêm xn năm 499» ching vơi thí nghiệm Duy tiên Nam hệ cho thấy hiệu qủa sau 10 đạt.58,35% với Msterbizium 60,2% với nấm Beauveris, Vụ mùsg năm 4994 thí {n Ở Đơng ngục giéng nếp TK9O chứn g tơi cing thu qủa phịng trừ 52% sau 410 ngày phun Thí nghiệm trừ Ray phía Nam Long định TiỀn giang Trong năm liỀn tử vụ thu nắm 1992 đến 199%, kết gửa cho thấy rõ l3 sau ngày oũ hmŠ phẩm nếm Beauveris Meterhtzium đạt hiệu qủa từ 64,5% 67,85, Điều quan trọng lẻ KẾt qùa lây lan kếo cho đển lứa sau, Tại Minh hội thí nghiệm vy He thu 1992 kết qùa đạt 38,2% sau ? ngày kết qha lan kếo đầi cuối vụ ThÍ nghiệm Ghêu thành Bồ zịa Vũng tbêu vụ lúc HŠ thu năm 1993 sữũng eho kết qha đạt ¿2# sau 10 ngày phun nấm Meterhizium va higu qua hing, ' kếo đầi đến va ; _— Những kết qủa phun trừ rảy nêu phía BẢo phía No ¡ thấy hi§u' ‘Lye khơng eao nhử -thuổc hổa họo, mỏng đỳ ñ trọng 1ä hiệu qủa thuổo kếo đổP lsu truyền đến (› "hệ sau: cña sâu h hge hại bay la * nghŸa sinh hge đùa cáo chỗ phẩm thÍ nghiệh đồng rugng cho thấy nhữn g rvgng phon * Z3 - - thuôo nấm đầu không cổ ạnh hưởng đến cấc lồi kí sinh thiên địch Nhận, Bọ ria đổ, Bọ xÍt mù xanh #4242, Trên Sâu đo xanh hại đay : Qua kết qủa thu thập chứng đầu thấy nếm Beauveria Metarhizium xuất Sâu đo xanh hại đay cách ( Anomis flava Fabre) DE cố thd 1ây nhiễm đưa bồ sung bÍoch lũy nguồn nấm vào đồng ruộng, năm 1992 1993 chứng đạ tiến hành thẾ nghiệm thử chế phẩm nếm Beauveria Wetarhizium trừ sâu đo xenh hại Đsy cách Hợp táo xã biên khê Châu giang H2i hưng nồng độ 68x10 nghiệm sau 1O ngảy cho thấy cổ 76,92% bào tử / hs KẾt qủa thử sâu đo xanh (Anomig flaya fabr.)b‡ chất nấm Beauveria 86,2% sâu đo xanh bị chết nắm Metarhiziun, Điồm bật chế phẩm nỀm Beau- iveria va Meterhizium pay chẾt sâu xanh Dey Hai để động nhận biẾt hại đay cach ving , cắc sêu bf chẾt loại nấm rơi ruộng sỔ bị chẾt đay , điều kiện thuên lợi lức sâu sau phất trién 43 ding b{ 1ây bậnh vi mà không cỀn phải phun thuổo thêm có thề ngăn ngờa địch lứa #«2„5„ Trên cáo cảo hại Ngơ : Vấn đề dịch hại 0ào cảo la vấn đề xúc số tỉnh thuộđ miền Đông Nam xử dụng thuốc hổa học nồng độ cao cổ thể khổng chẾ đượo địch hại sau lại phát sinh tửơ lại KỂY qùa thử nghiệm với Gào cáo tuổi chứng nhện thấy nắm Metarhtzimm sào trưởng sau lột ruộng, đầu vật đs phổi thành seu 1* ngầy Eạt 96, xóc khơng thấy chết thêm vụ mữn năm 499% Trung têm hợp với Tzung tâm Bào vệ Gào cào trưởng thinh cố táo dụng tốt điệt Gao Gồo ĐỀ sinh thực sầo non đạt nghiên cứu ngồi học Viện Bho vệ vật phía nam 56,7% đỒng thựo Ghỉ cục BV?Y tỉnh Bề z{a Vũng tảu bước điều tra thử nghiệm nắn Metsrhiziưm flavbviriđae (được phân lập Gặo cào cha Bà#{s) với nồng độ 6;9x10” bảo tử / he xã Beu 1ém huyện tuyên mộo Tỉnh Bồ rịa Ving tau K4t ghe bude đầu seu 14 ngày phun đặt 72% sau 50 ngầy' phun hiệu qủa lên tốt 96,8%, kẾt tủa thử nghiệm Tình ĐỒng nai chẳng tơi số thí nghiệm chậm rà nuộn giai đoạn Gäo ảo ®uồi 5,6 thÌ hiậu qủa thắp tất nhiều Vấn đề sử dụng nấm Y1 sinh Metarhizium ?lsvbviriđae ước đầu thu kết qủa Tỉnh Bồ rịas Ving tau Bat kt ogi thuée tri séu sink học nòo đ ng phụ thuộc rẤt cao vào lầu kiện ôn Âm độ ánh sống, đặc biệt nắm, vivậy cỀn 4 thiểu tiếp tục nghiên cứu sà thử nghiệm Ở năm đề bỒ sung tÍch lũy 14 nguồn V1 sinh vật lớn thiên cnhiên, đồng thời để of sở khoa học chắo chấn đề kết luận nhầm mục tiêu hưởng tới không dẦn sử đụng thuốc hổa mà giai sâu hại quyểt KÌsinh việc điều ; thiên địch chỉnh cân sinh thấi thiên nhiên, Đồng góp phần lớn bạo vệ trồng theo hướng sinh họoy quan trọng mục thêu bảo kip thet xu hưởng chung sủa ee vệ môi nhân logi trường „ quan thd sinh thai, phần dap Ứng | NGHIEN CỨU CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT NẤNI CÔN TRÙNG METARHIZIUM FLAVOVIRIDAE GAMS DE PHONG TRU SÂU HẠI CÂY TRÔNG Pham Thị Thuỷ va CTV Viện Bảo vệ thực vật DAT VAN PE: : Nam lay bệnh cho côn trùng giống Metarhizium Sorokin mô tả (Châu Âu vào năm 1883 Trong khoảng 40 năm trở lại đây, số tác giả nghiên cứu 'công nghệ sản xuất chế phẩm để phòng trừ sau hại đạt kết Mecleod (1954), Latcti Fallcon (1976) Tại Úc năm 1991 Milner nghiên cứu nấm Metarhiziumn để phòng trừ bo hai mía (Melolonthinae Coleoptera), tác giả cho biết có hiệu qua 68% [ingworth (1951) cho biết hiệu qủa phòng trừ tự nhiên nấm Metarhizium với sàu hại rõ rằng, thành tựu ứng dụng nấm chưa nhiều Theo tác giả có nhiều ñguyên nhân vấn để này, điều quan trọng việc nhân nuôi sinh khối nấm chọn lọc dịng tìm chúng có hoạt lực diệt sâu cao dể không gây tạp nhiễm công nghệ sản xuất Ở nước ta, nghiên cứu nấm Metarhizium & Beauveria dé lay bénh cho sau hai trồng dược Viện Bảo vệ thực vật nghiên cứu trọng khoảng năm Trong cơng trình nghiên cứu chúng tơi xin trình xuất nấm theo khuynh hướng sau : Sản xuất sinh khối phương Sản xuất nấm phương pháp Nhằm mục dích : Tạo chế phẩm dat 60-70% bày số kết nghiên cứu công nghệ sản pháp lên men sinh khởi lên men chìm có sục khí có lượng bào tử cao, hoạt lực điệt sau sinh học : U VAT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU : ILI Vật liệu : ¡ Chủng nấm Mletarhizium flavoviridae có nguồn gốc từ CA BI (Anh) thu thập Tên cào cào (ở Bà Rịa Đồng Nai) Môi trưởng nghiên cứu (Của Viện BVTV) - Để phân lập : Sabouraud có thêm khống chất KH2zPOa, MgSOa, 7HạO - Để lên men sẵn xuất sinh khối : cám gạo, bột ngỏ, bột đậu, đường - Để lên men chỉm : cao nấm men pepton, nước chiết khoai tay Thu sink hoc len ray nâu tuổi nuôi chuẩn nhà lưới Viện BVTV, “CTV: Nguyén Thị Bắc, Đồng Thanh Trần Thanh Tháp 28 II.2 Phương pháp : - Dùng môi trường để sẩn xuất tạo sinh khối dựa theo phương pháp n men vị sinh vat cua quốc tế nước Vinogratski (1953), Nguyễn 1981) Lên men chìm : LAn Dũng - Sử dụng máy lắc 500 vịng/phút - - Sử dụng nồi lên men lít : Cuối lọc sinh khối, làm khô nghiền thêm phụ gia đóng gói đếm bào tử ung đếm hồng cầu Li '- Thử sinh học với ray nau theo phương pháp chung nước quốc tế đảm, đo độ tin cậy Mỗi cơng thức lần nhắc lại, lần nhắc lại 20 sau Hiệu đính kết qua theo bbott (1925) H KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU : 3.1 Lên men sinh khối nấm Wletarhizium Quá trình nghiên cứu từ nhiều mỏi trường khác chúng tơi xin Mưa tả Í số mơi trưởng tối ưu cho năm MietarRizium phát triển tốt phù hợp với diều kiện inh t@ cua nước ta môi trường Viên BVTV sử dụng để sản xuất I omg sinh khỏi lớn (bang 1) fire 1: Các môi trường dùng để sản xuất nấm Metarhizium bing phuong phap lên en sinh khơi ¬ Mơi trường dùng phân lập Agar Pepton Cilucoza KH2POa MgSOx.7HaO H20 pH =6 Môi trường nhân giống Môi trường sản xuất Cam gao tinh, Bot ngô Bot đậu dường Bột cám Bột ngô Saceharoza, H20 pH=6 HaO, pH = 6.5 Thành phần môi trường bảng ching nêu để nghiên cứu sản xuất g năm Tuy nhiên thắng lạnh hanh khô (từ tháng năm sau) nấm khó phát triển không tạo điều kiện giữ ôn, Ẩm đọ Nhiệt dộ ẩn độ thích hợp cho nấm Metarhizium 10 đến phát triển từ 28-32”C -85°C, với độ thống khí tốt Kết hinh thành bào tử chúng tơi trình bày lên #3 so Bảng : Tính ổn định khả phát triển nấm Metarhizium flavovir idae môi trường nghiên cứu Viện Bảo vệ thực vật Môi trường phân lập (hao tit/ml) ' Tháng sản xuất : MT nhân giống bao tu/gram (sau ngày nuôi cấy) 5,5.109 5,55.102 5,6.109 5,5.109 5,5.109 MT SX bào tử/gram (sau ngày) (sau 10 ngày) 5,8.109 5,8.109 5,8.109 5,8.109 5,8.109 _ ` 5,0.108 5,0.108 5,0.108 5.0.108 5.0.108 Qua bảng2 nhận thấy MT nghiên cứu việc sản xuất nấm ; từ tháng đến tháng tương đối ổn định khả phát triển bào tử năm lên : men sinh khối chế phẩm nấm đạt ồn dịnh 5.0.108 bào tử/gram Kiểm tra bào tử kính hiển vị chúng 08- Ä3um i thấy bào tử năm sản xuất hình oval có kích thước bình từ 3.2 Lén men chim có sục khí : Sau chuẩn bị dủ nguyên liệu để lên men chìm nhằm sản xuất lượng sinh khối nấm môi trường dịch thể, chúng tơi xin tóm tắt sơ đồ nghiên cứu sau : Ì SƠ J ĐỒ SẢN XUẤT SINH KHỐI NẤM Mf BANG PHƯƠNG PHÁP LEN MEN CHIM i Sơ đồ lên men máy lắc E : Nguyên liệu ‘ Khử trùng i Sơ đồ lên men sinh khối nấm MIf nồi lên men lít Nguyên liệu L Khử trùng L L Làm nguội + k ' + Cấy giống cấp I L L po i Lắc đến lượng sinh khối đạt , cực đại (72h 28-30°C) | Lầm nguội + + , ,_— Lọc, sấy, cân ! —> Cấy giống (2-3%) củ Lên men - kết thúc lên men (48h-30°) + chat BQ phụ gia ` L - Lọc sấy, cận X&c định trọng lượng sinh khối Chếphẩm 4 -_ Đóng chai BQ , |_ Xác định trọng lượng sinh khởi “50 | Với sơ đồ lên men trên, để xác định mơi trường thích hop máy lắc Kết thu chúng tơi xin trình bày lên bảng cho qúa trỉnh lên men ng : Trọng lượng khô sinh khối nấm Metarhizium flavoviridae (Mf) Ì trường (Lên men máy lắc) Đợt thí nghiệm Trọng lượng sinh khơi nấm thu dugc (gr) Wlơi trường có pepton | Méi trudng khơng có pepton 25,5 16,2 26,5 ‘16,5 25,5 15.6 Qua bảng3 cho thấy mơi trường có pepton lên men giống cấp | bảng máy cho lượng sinh khối cao mơi trường khỏng có pepton đến 10 gram + — Dựa vào kết lên men máy lắc chúng tơi dã chọn mơi trưởng có pepton dể voi năm MIf Như phần phương pháp nêu sau 48h lên men sục khí T? không ïi 30°C với lượng giống ban đầu 3% Kết nghiên cứu thu bảng ing 4: Sự hình thành sinh khối ndm Metarhizium flavoviridae Gams q inh lan men chìm có sục khí “San phẩm lên men ing cp máy lắc Len men chim Thể tích lên | Trọng lượng | Tỷ lệ sản | Số lượng bào men (ml) _ khô (gr) phẩm tử sr 1000 1,2 i 5000 Qua bảng cho nhận xét lu cao việc tạo [ lượng sinh đt lượng sinh khối nấm cho số bào tử thành đất Vấn đề chúng tơi cịn tiếp _ 28,8 24 6.1910 sử dụng phương pháp lên men chìm có khối nấm MỸ sau thời gian ngắn 48 x1019/gram đạt lượng sợi cao Tuy nhiên tục nghiên cứu Một tiêu vẻ chất lượng nấm việc thử sinh học nấm MỸ lay nau Để thấy dược hiệu lực nấm sẵn xuất hai phương pháp lèn men doi với nâu tuổi3 nuôi chuẩn nhà lưới Viên BVTV Kết thử tiệm chúng tơi trình bày lên bảng : ; ang 5: Hiéu qua thu nghiém sinh hoc cua ché pham nấm Mf doi với rầy nâu tuổi hí nghiệm tháng 4-6/1994) Cơng thức TN Dịch bào tử 6x 102ml+Tween 80 Phương Hiệu Thí nghiệm (% tính theo Abbott) pháp lên men | Sau Chim 12.3 Chim ¡0.5 Dich bao ttr Sinh khối Dich bào tử Sinh khối Dịch bào tử 6x109 ml+Tween 80 5,8x109ml+Tween 80 5.8x109%ml+Tween 80 2ng | Sau ngị 28,3 Sau ng | Sau ngị Sau 10 ng 32 49,5 68,2 - 25.4 40,1 50,1 70.1 23.6 32.3 40,8 52,3 77,5" 20.2 26,7 42.9 51.4 69.7 Qua bang5 $ nhận xét chế phẩm nấm MIỸ lên men chừm có hiệu lực diệt , rly nâu 68,2 -70.1%, chế phẩm nấm MIf lên men sinh khối hiệu 69.7-77.5% sau 10 ngày thí nghiệm nồng wrong duong 6.109 bao tu/ml Dựa vào số kết qủa nghiên cứu dựa số tiêu kỹ thuật vẻ chất lượng nẤm Mf duoc siin xuat Viện BVTV (bảng 6) Bảng : Một số tiêu kỹ thuật nấm MIf sản xuất Viện BVTV STT Thông số KT _ Nấm MỸ lên men sinh khơi | -Nam Mf men chìm | Bảo tử (tÿ/gram) Kích thước bào tử 5.108 6.0.1019 trung bình (0,8-3tưn) Trung binh | Tinh 6n dinh qua bao quan thang 6-12 thang > 70% ~70%, | Do pH Hiệu lực diệt sinh học 6.5 IV KẾT LUẬN : 1 Nghiên cứu môi trường nhàn nuôi nấm MỸ phương pháp lên men sinh khối phù hợp với điều kien Việt Nam bột ngõ, cám gạo, bột đậu, đường Hồn thiện quy trình kỹ thuật san xuất sinh khối nấm chất lượng nấm ôn dịnh tháng sản xuất năm đạt số lượng bào tử 108/gram thước bào tử mức trung bình 14 0,8-3,um sinh khối Và Kích '3 Nghiên cứu mơi trường có pepton để lên men chỉm nấm MỸ cho lượng ˆ sinh khối cao 25gram 22 4 Ty lệ sẵn phẩm lượng sinh khối nấm MỸ lên men chìm có sục khí đạt 1:24 sau § nhiệt dộ ổn định 30°C với lượng giống bạn dầu 3: Độ pH chế phẩm nấm MỸ ồn định qua 6-12 tháng bảo quản Hiệu lực sinh học nấm MIf dược sản xuất theo phương pháp lên men chim lên men sinh khối đạt trung bình 70% sau [0 ngày thí nghiệm với rầy nâu tuổi ong nhà lưới I nồng độ 6.109 bào tử/mi có thêm 0.02% chất bám dính Tween V, TÀI LIỆU THAM KHẢO : Milner R.I (1991) Recent progress with Metarhizium anisopliae for pest control in Australia rocesdings First Acia-Pacific Conference of Entomology Chiang Mai Nov 8-13-1989 {in press) Pham Thi Thuy(1993) Mot sO ket qua nghiên cứu sản xuất thử nghiệm nấm Metarhizium tBeauveria nâu hạt lúa sâu xanh hại đay Tạp chí nơng nghiệp CNTP số 4/1993 Trang 137-139 Phạm Thị Thuỷ (1994) Effects of Beauveria bassiana Vuill and Metarhizium anisopliae Sorok on “Brown planthopper (Nilaparvata lugens Stal) in Vietnam ; IRRN-IRRI - Phillippin Volume 19 Number September 1994 ~ SUMMARY : RESEARCH ON THE TECHNOLOGY FOR MULTIPLICATING FUNGUS “METARHIZIUM FLAVOVIRIDAE GAMS (Mf) BY FERMENTATION METHOD Pham Thi Thuy et al National Institute of Plant Protection For improving the technology of Metarhizium flavoviridae (Mf) production, we intended to use the locally available materials The medium proposed by our laboratory presents a mixture of com powder, rice bran, soybeen powder and surgar In the proposed medium the number of Mf spores reached 5,0.108 per gram | We can product fungus Mf~by fermentation method This is good research for ', development and formation spores and cells Effect of treatment Mf fungus on BPH in green house condition upto 70% were died atter 10 days of treatment in both method with , 5.109 sposes/mi concentation 't 33 Bao cáo Kết qủa nghiên cứu thử nghiệm chế phẩm ném Metarhizium flavoviridae Gams (Mf) trừ cào cào hai tỉnh Bà rịa Vũng tàu Đồng nai mùa mưa năm 1995 * Phạm thị Thùy - Trần Tháp Viện Bảo vệ thực vật * Vũ đức Huề Trung tâm BVTV phía nam * Lé thi Qui, Le văn Hạnh Chỉ cục BVTV Bà rịa Vũng tàu * Nguyễn thị Đoàn, Ứng tràng Thịnh Chỉ cục BVTV Đồng nai Đặt vấn đề : Kể từ năm 1989 đến nay, cào cào loài Patanga succincta liên tục phát sinh thành dich, gay hai nặng cho bấp, lúa, mía, đậu đỗ, bong vải, mít, chuối dừa, điều, Chi phí đề phòng trừ hàng năm tỉnh lên đến hàng tỷ đồng với hàng chục thuốc trừ sâu phun đồng ruộng, vấn đề gây nén ô nhiễm môi trưởng trầm trọng làm ảnh hưởng đến sức khỏe người gia súc Điều quan trọng cào cào quen với thuốc hóa học, phải sử dựng nòng độ cao hạn chế nạn dịch cào cào xảy Đứng trước vấn đề xúc này, từ năm 1994 Ban chủ nhiệm chương trình nghiên cứu phịng trừ cào cào Tỉnh phía nam phối hợp với Viện BVTV Chỉ cục Bà rịa Vũng tau va Dong nai tiến hành nghiên cứu thử nghiệm chế phẩm nấm Vi sinh Mf va Beauveria bassiana (Bb) 'rừ cào cào xã thường có dịch xảy Nấm MỸ loại thuốc sinh học có khả nảng diệt cào cào nước Brazin, Anh, Úc Canada (Miiner R.J 1991) Tuy hiệu qủa chậm, kéo dài hiệu lực không cao so với thuốc hóa học thuốc nấm có ưu điểm lớn khơng làm nhiễm mơi trường sống, khơng ảnh hưởng đến quần thể kí sinh thiên địch có ích thiên † 2# : nhiên, có khả náng lây lan phát tán rộng, kéo dài gặp :thích hợp mưa đều, lượng mưa lớn, nhiệt độ thấp 26- 28°C Để nghiên cứu hiệu thử nghiệm chế phẩm nấm M điều kiện thời tiết trừ cào cào, nhằm ;giãi vấn đề xúc xã hội cần thiết bảo vệ môi trường sống cho người, ,Yật nuôi Năm 1995 tiếp tục tiến hành triển khai việc thử nghiệm thuốc nama Mf tir cdo cào Tỉnh Bà rịa vũng tàu Đồng nai nhằm mục đích : Xác ‘dinh hiệu lực nấm MỸ cào cào đồng thời tìm hiểu khả lây lan nấm rong điều kiện tự nhiên a !- I Vat lien va phương pháp nghiên cứn : Lý Nấm MT Do đề tài nấm B M Trung tâm DTSH Viện BVTV nghiên cứu sản xuất ie vào chủng nấm MỸ thu cào cào 1994 Thi nghiệm phòng : Mỗi cong thifc [in nhắc lại Một lần 20 Nong X 10° bào tử / mí + 0,2% dầu thực vật Xử lí cơng thức Abbott 3/.Thí nghiệm đồng rng: + Địa điểm diện tích thử nghiệm - Tại Bà rịa Vũng tàn : Phun Châu đức ( Ngãi giao Nơng trường Bình ba) Thời gian phun 25/7, diện tích 10; Trén cay Bap xen My - Tai Đồng nai: Phunở Ấp Trung tâm-Thanh bình-Huyện Thống ,phun 25/6, diện tích 1O cào cào tuổi 2.3 Thời gian + Điều kiện thời tiết : Năm mưa muộn hon năm 1994 l tháng, lượng mưa “thấp Nhiệt độ trung bình 28,8°C ẩm độ khoảng 80% (Trong đợt có phụ lục kèm theo ) + Điều kiện kí sinh tự nhiên : Tại vùng phun năm nay, kể từ năm 1994 đến tay chúng tơi điều tra chưa thấy có kí sinh nấm, vi khuẩn, vi rus, chí Ong kí sinh tự nhiên trứng cào cào non trưởng thành + Phương pháp điều tra: Tại nơi thử nghiệm thuốc chọn ruộng điều tra, mộng 2000 mẻ Điều tra 10 điểm zích zác theo phương pháp Csirat, điểm m’ Điều tra theo dõi: - Mật độ cào cào trước sau phun l,2,3, ,6 tần - Pham vi lây lan thời gian lưu trữ nấm đồng ruộng phạm vi bán kính A, 2,3 km + Phương pháp phun : - Lượng nước : 400 lít / - Nồng độ : kg nam / ( khỏang x 10°” bào tử / ha) + - lít đầu thực vật ' Có thể thêm 0,05% hóa chất - Dùng bình động DM9 : - Két qua hiéu dinh theo cơng thức Henderson Tillton '4/, Xác đình phạm ví lây lan nấm thành phần Vị sinh vật kí sinh cào cào tai : Tỉnh nói : - Điều tra vịng bán kính 1,2,3 km Thu thập mẫu thu dé ẩm, nhìn nhận năm phát triển mát thường " - Phân lập năm mơi trường Saburo khóang chất số ngườn vi sinh vật „ khác phịng thí nghiệm vi sinh Viện BVTV theo Vinogratsk i Smith (1938) - Phân loại theo Barnett va Barry 1972 ‘I Kết qủa nghiên cứu : Ue Thí nghiêm phịng : Theo phương pháp trình bày, số liệu thử thuốc chúng tơi xin trình bày lên bảng : Bảng 1; Kết thử nghiệm thuốc nấm M trừ cào cào Patang a succincta tuổi phòng Bà rịa Vũng tàu Thí nghiệm tháng 7,8/1995 ‘Dot TN 1 | 25 TP | 125 | 2.5 T5 50 | 5: Hiệu phòng trừ 9], 13 15 19 21 25 | 282 | 461 | 684 | 737 | 861 | 97 128 | 307 | 435 | 605 | 710 | 916 | 972 765 | 295 | 448 | 645 | 724 | 869 | 9445 Qua bang cho thay thí nghiệm phịng với cào cào MỸ đạt trung bình 94,4% sau 21 ngày thí nghiệm Đặc biệt sau thấy bị chết hầu hết mọc nấm mầu xanh phòng năm 1994 1994 Bà rịa Vũng tàu Đồng nai tuổi Hiệu lực nấm - 17 ngày thí nghiệm Kết hợp với thí nghiệm chúng tơi rút kết luận : Nấm Mf có hiệu cao với cào cào trưởng thành cào cào non tuổi 2,3 san 15- 21 ngày thí nghiệm Ngịai cào cào Patanga succincta chúng tơi có thí nghiệm với loại :cào cào khác Locusta, Hierolyphus, Choroedocus Kết bước đầu đạt hiệu 65,4 -72% : 56 '2/_Thí nghiệm đồng ruộng: a Dong nai: So với Ba ria Vũng tàu nam 1995 Đồng nai mưa sớm nên cào cào nở sớm vào trung tuần tháng chúng tơi tiến hành phun thí nghiệm vào 25/6 Ket thử nghiệm xin trình bày lên bảng Bảng : Hiệu thử nghiệm thuốc nấm Mf trừ cào cào mùa mưa năm 1995 ấp Trung tam-Thanh bình- Thống nhất-Đồng nai Ruộng | “IN | Hiệu phịng trừ (% tính theo Henderson THỦ s sau TEấY:: 33,70 32,20 35,95 13 “2b 35,95 47,53 41,74 57,90 68,35 63,13 28 59,53 59,85 59,53 Pas 61,38 64,17 63,04 aa 57.38 | 55,76 57,07 - [ag 49,96 53,25 51,60 Qua bang cho thay sau 30 thi hiệu đạt 63,1% hiệu kéo dài đến 6,7 tuần Do lượng mưa mưa muộn nên đến cuối tháng sau tháng phun văn chưa thay hién nam mọc cào cào Vấn đề lớn theo điều kiện thời tiết khí hậu khắc nghiệt b Tại Bà rịa Vũng tàu: Với địa hình đặc biệt tỉnh Bà ria Vũng tàu nằm sát biển nãm mưa muộn nên cào cào phát sinh muộn trung tuần thăng nở 25/7 tiền hành phun theo dõi ruộng Kết thử nghiệm ghi lên bảng Bảng : Hiệu lực phòng trừ cào cào cia nm Mf tai Ba rịa Vũng tàu vu mua nam 1995 Ruong _ Hiệu phòng trừ sáu ngày : Ghỉ chú: 1N: 35,33 39,94 62,61 35,07 63,82 42,12 64,10 38,18 64,98 38,12 34,98 60,88 38,74 67,22 phun 71,49 32,50 75,56 47,49 TB 35,09 62,09 - Lượng mưa 41,74 68,01 64,23 lớn 67,92 ¡13 J7 20 : 28 ae - Có mưa sau 10 Qua bảng chúng tơi thấy ruộng thí nghiệm sau tuần phun thấy có wu cao đạt trung bình 67,9%, Dac biệt sau tuần phun qua điều tra y xuất cào cào tuổi 4,5 rải rác ruộng có mầu đỏ tím hoạt động chậm chap, § chết, chúng bám chặt vào cỏ, thân bấp, mì Thu thập mẫu để ẩm dia Petri ng thấy xuất lớp nấm mầu xanh sau tuần phân lập lại phịng thí iém vi sinh Viện BVTV chúng tơi giám định nấm MỸ phun ! Qua nam 1994,1995 tién khai việc thử thuốc nấm vi sinh Tỉnh Bà rịa Vũng u va Dong nai để trừ cào cào Chúng tơi xin trình bày kết phun cào cào tùng sinh thái khác Tỉnh theo phân bố hình 1,2 ( Trang bên) Như nơi có trồng bấp, mía, mì có mật độ cào cào cao 20-40 ton/ m2, tập trung phun Ì số vùng nhầm xác định khả lây lan tửa nấm để hướng lợi dụng ngườn bệnh tự nhiên nhằm hạn chế nạn dịch cào tảo rong năm Với điểm phun thuốc nấm trên, dịnh kì thời dan Chỉ cục BVTV Bà rịa Vũng tàu Đồng nai thu mẫu gửi cho Viện BVTV chúng ði phân lập giám định Kết thành phần vi sinh vật kí sinh cào cào lâm 1994,1995 chúng tơi xin trình bày bảng : Bảng 4: Thành phần Vĩ sinh vật kí sinh cao cao nam 1994,1995 TI|TênVSV |Tenkhoahoc ' - Nấm xanh | Metarhizinm flavoviridae Gams Năm xanh Metarhizium anisopliae Sorok : | Nấm wang | Nấm bột Vĩ khuẩn | Beauveria bassiana Vuill, Entomophthora sp Bacillus thuringiensis j|Địnđiểmthm: |Thờigianthu Bà rịaVũng tàu |7,11/1994 nt 8,9/1994 Đồng nai 8,9/1995 8,9/1995 ot 8,9,10/1994 Ba ria Ving tau | 10/1994 Bà rịa Vũng tàu | 7,8/1994 Đồng nai Trong loài vi sinh vat thu chúng tơi thấy phần lớn nấm xanh lồi MỸ nim Entomophthora va Vi khudn Bacillus thuringiensis xuất nguon Vi nh vật tự nhiên đồng ruộng cần thiết nghiên cứu đề phối hop sử dụng phòng trừ - hun om Lang tỉnh 5Á RTA-VŨNG TAU Địm ©: thus Na — tong đương z i Lon ie] SU ¿ ` ⁄ ” \ sấm & | ka 63 Bang z D£nh Tân Tam £ : Phướ "hước hong gous’ a - N Lo Ney Láng ok } I ‡ Ỷ oe ey @ “ \ ~ Moc Xuyén HỘ Patanga Bong Vâng - Cytacanthacris *Thọ | Pai t 3.XUYÊN \ để +hí nghiệm Thuổc nấm Vì sinh An ` "ước m FL song Phước SN Tân ` Long Hai NV Long z Tác = ` - - Hierolyphus Locusta Leer - - Nhieu li r3 $ TH PI ® - NINE THUA a te CI Se $°- ~ Sở dO thit nghiem thudc hain Tai Đáng Nai : Vi sinh Vinh an fw Da Bich he aici La OO) din Nam ay (Hieroly phus), Locusta 72% Thí nghiệm Đồng Nai vụ mưa năm 1995 san 21 ngày, hiệu qủa đạt trung bình 463,1%, hiệu kéo dài đến 6,7 tuần sau phu n ' Tại Đồng nai điều kiệ n thời húng tơi chưa thấy nấm kí sinh tiế cào cà - Thí nghiệm phun năm MF Bà rịa Vũng tàu sau tuần phun hiệu đạt trung bình ¡67,9% hiệu kéo dài Sau tuần phun Bà rịa Vũng tàu điề u tra phát thay nam Mf kí sinh cào to tuổi 4,5 rải rác đồng ruộng Qua vùng phân bố phun thuốc nấm ng tơi thu lồi nấm ủ yếu nấm xanh Mf, loài Vị khuẩn Bacillus thuringi ensis kí sinh cào cào é nghi : Cần tiếp tục nghiên cứu trohg năm 1996-2000 để hạn chế dứt điểm : dịch cào cào xây miền đơn g Nam bọ, đóng góp phần bảo vệ sinh thái nông lệp bền vững miền đông Nam ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRUNG TÂM VI SINH VẬT ỨNG DỤNG BÁO CÁO TÌNH HÌNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU XA KHUAN SINH CHAT KHANG SINH CHONG NAM GAY BENH KHO VAN VA THOI CO RE (thuộc Dé tai: KC - 08 - 14, Chương trình ơng nghệ sinh học) Chủ trì: PGS Pham Vin Ty Cân tham gia: - PGS Từ Minh Koóng - PTS Lê Mai Hương - Cử nhân Đào Huyền Lương HÀ NỘI - 1995 BAO NE CAO Tal TINH HINH THUC HIEN NGHIEN CUU KHOA HOG — 14 Tên đề thi ! Nghiên cứu xạ khuẩn sinh kháng sinh (CKS) tr chỗng nẤm gây bệnh khô thất 03 v3 (đề tài nhánh) Thuộo chương trình 3e Cên chủ trÌ + Cơng nghệ dinh : PGö-PTg Phạm Văn Tự học KƠ 08/14 4, Cơ quan chủ trÌ ¡ Viện BẢo vệ Thực Vật 2« Cơ quan thực học Ứng dụng, t Trung tâm nghi ˆn nại học Tầng hợp Hà Nội, cửu vị sinh vật 6, Thời gian thực ¡ năm (1932 - 1993) 71« Tổng 8« Nhiệm kinh phí vụ dugo ;ị giao Tr xy : ~ Phân lập tuyển chọn xạ khuẨn cổ khổ nng sinh chất không sinh chổng nấm gây bệnh khô thối rŠ 08 tử cáo mẫn đất kháo nhau, Nghiên cửu cáo đặc điểm sinh học; đặc điểm phân loại sổ chủng số hoạt tính cnso “ược lựa chọn, NHghtfn sinh cửu eđođặo điểm ¡ chọn lựa môi lên men trường ti v8 ưu, thu nhận pH, chất nhiệt độ, khống 79 thơng khí, thời gian lên men tuổi giển g, Hghiên Nghiên kề gay rút chết sinh dang thé lúa, qha nghiên ` cứu Tr hang neon mau at phân lập a sinh, khủng cứu thu nhận bào tử để tạo ohể phẩm chốn g tắt kết Sete khẳng chiết cho 93 Tốm nhau, cứu đồ có bệnh t thuộc địa phương 500 chủng xẹ khuẨn có hoạt 20,5 06 khé ning chống nắm khéo tính rừ cao nấm +8 lực chọn đuợc chủng eố khổ chống nấm bệnh khô Jtreptomyoaes THAA7C vẫn, thi cỗ rã +Hự GP ; 3trep tomyecem đạo ơn khó TH, 134P va mang ký hiệu Streptomyces -2~ Do khổ nắng chống đụo nghiên cứu phổi THẠ4?7U ông đạo Toe chủng HỒ Ching Streptomyces md bẰ tù trước đăng đến - Ching Steptoayses parvullusg, Kết - thẳng gha chẳng; khả nắn,, dinh đới Kết ad qha nim 3,2, cứu th ~ Chẳng trấu Với nhiệt 36 lugnyg bào ; giao Tạp nhận lên bão shang tử tập sản xuất bao trường gSep hấp đề chế phẩm đơn naô1 giản ody - pa sản xuất cuo khả khỏnz: thude BVZV xử lý thành hẹn phổ chế thuổo thang bào gỗ nuôi, lượn:; viledinixin, Hà kag Nội, khô nhiên Kết rõ qủa tử chuyển gud cho BV#V) chế phân hẳn đổi chứng 6U~70,„ thau dùng đỀ phòng bệnh, đc thầy rệt Ởấc kỹ sư nồng nghiệp nghiga cho ring ehl nén Mật phản bào 20kg chế phẩm khốc đề xử lý thử bệnh beo sau 7=10 nim gidm 40-50;3, 40kg nhiệt chế, phẫu mơi /&e Sau có tế kỷ niệm trưởng ~ Đã sản xuất nhiệt, học rủi ¿0¿, bất sinh 10! ehf Quốc dụng 1a Strep cáo vùng đất Ẩm Ứng không gidng chịu chan: cứu ding chọn độ djnh lựa đến 20,4 va sau xa0 Hội nghị 28~3090, tử truyền lọ, La bất nghi¿n LePeateur độ vi cứu đẳng: qủa tốt quanh năn cha Ke ấp chi nghiên Ady eténg oho phận thử nghiệm đỀ thi (thuộc Viện thử nghiệm chưa thỏngs báo kết qỗa; Chi oố tả, etn thu (131) tử tử giểm trưởng; mat Hghiên cần, mô gửi ney naye la chẳng đượa nghiên /1934 100 H470 không TH,134P tạp chf sinh hgo 36 12/1993, aH, SP 2/1993, tomyoea đề ôn mạnh nén chẳng Streptomyces hợp với P?¿ Lê Gia Hy ad chốn; lạg “4a “eee với gia te, “PTS phun thẩ LEeGue tty 18 (4): 22 - 26 Tạp chí SINH HOC 12-199: ĐẶC ĐIỀM PHÂN LOẠI VÀ KHẢ NĂNG HÌNH THÀ NH CHẤT KHÁNG SINH CUA STREPTOMYCES PARVULLUS TH, 134 P PHAM VANTY, LE MAI HUONG, LE VIET HUNG, THAI MY HANH Trường dai hoc Tong hợp Hà Nội TƯ Trường Trong tính nghiên cứu xá khuần sinh Khang sink, chung 16: dé tach chủng xe khuầr TH¿ 134 P từ mẫu đát ngoa: Hé Né: hoa: phd róng chơng vi khuần Gram ám Gram dương môi năm gay benn cho cay MINH dại học Dược Hà Chung TH, LIỆU VÀ PHƯƠNG đưa Vao thec Elo- Ely eh == Các tết phản loại dược tiến hanh theo thương trình xa khuần quốc tế ASP) Shirh ag va Gortheb, 1966), déng thos cd dé: chiéu ven cac khoe phan loal cuz Gauze et al (1983), berge ys Manuai (Tap 1989) Dac diem nud: cát thực trương Gauze va cv (1963) đè ngn:: (Gauz e: 1957): (2) da: maci, Waksmar 1961: 3} ghxenn niưa: (Lnae nperr, 1952); (4) Giucoza &sparagin (Krainsk+ 1934); (5, Peptor, - cao nằm men - sài (cái tiến TƯ môi tương ISP 4}; (6) Giuco - nược ei a, 1957) Chiết thịt (Gauz 2) (Gauz Thành phần tế bào xác định thec Lehevaber Lechevaher (1980) Khả nàng hình cac enzn ngoai bảo amylazz, xenlulazz, 'pfoteaz2 pecnnaza định tính theo phương iphap khuyéch tan trén thạch với nguồn chất tương ng anh bor tan CMC Gen bàng Lugol), @se fai (Hiên bang Elo — Elw @) sac % x 100 phuÙ:E7y - thời gian chả cua nước cât (gay), Khả nâng chịu muối xac định theo Tresne ve Bakcus (1968) khả nâng khư rưtat dừng phan ưng Gas Len men: 1, Phán loại: M Gauze đỏ nhớt chav cua mẫu thí nghiệm (lay); thơi gan phản ứng (X: 134 P duoc phan lập từ đất mun ¿ Nội glá trị % giam phut & 30°C theo cong thuc Capeliin: (1966): Evo - tha gaan chav cua mau chung (glay): ET; thon gar PHÁP đồ sâu O - 10 cm thuốc ngoai Hà phương Phap v) sinh vay thong thương Nội xác định phương phạp đồ nhơt nhớ nhơt ké Ostwala , tong NGUYÊN KOONG axit Lugol) Hoat tncioaxenc onh 5%) Pecunaze * Cng trình dực hồn thành va pecnn duge Quả trình Jen mer jue dau duoc ten hành tren 10 loa mơi trương có thành phần ghủ bảng bìni nơn dụng Iích 50U mì dựng 100 mì mơi trưởng N; 100 ml ma trương chưa cay lac 250 vongy phut o 28°C tong 72 gio (gióng cấp 2) Chu nủ giống cap vac bình non dung tích 500 mì va ni điệu kiến ten 215 gio dé iva chon môi trương tot nha Guat doar cay 1000 mi giong cáp2 vao nồi lèn men Mareli: (taba) chu 20 mi ma: trương lựa chon knuar 250 vơng “phục, thầi khí 15 v/v, pH 7, niet 30°C Xác định nồng oxI hoa tan theo pnuong phap Sulfi: Toc dé tham ma cua 6x1 vao Gung dich suifit trnh theo cóng thức: mg C2 ⁄ phú: = x O8 PX Gal), Fy kk rong NayS)G; 01N dung đề chuần ml sulfit rruoc va sau thong khi: T - thon gan hiév khí (pnúU; 08 lượng mg Ô; tương img vm mi dung dịch NéoS>O3 0.1N tinh nr rạng lượng phan nr oxi thee pnương trình œ hoa sulfir thann suifa: vớ hỗ trợ Chương trình KC 08/14, Bang Thành phần 10 loại môi trường | | | Thanh phan Môi trường (g/1) C1 }2 | (rong hrong khé) | ; ¡_ Bột đâu tương i % ) 3,4) ; 6} el viee l ¡ Bột cổ | | | Pepter | ; Glucoze Tinh bér tar Lạp | | E18 ; 10 ! 19 | CaCG, | KjHPO -_ KHạPO, 25 MgSO 0.5 4 NaNO i „HQ | w ị 30 | 20 we 3 20! bw a B 20 20 10 5 20 j | ị | ao $ of 05 § | ' 10 lao L5 : 05 0s ì 073 2 6.5 65 6.5 72 7.0 7.0 72 68-7 7,0 7.0 HH KẾT QUA VÀ THẢO LUẬN L Phân loại: Đặc điềm nuôi cấy chúng THg 134 P & Dắc diềm nuôi cấy: - Mới tường Mucsmh Trên ìoai mói trưởng, sau ngày ty khí an n ry khí sinh phá: ln miền có kem mune IGauze } ——~_' "ERMC ( Guxenn - niưat nâu hồng (thuốc nhón, | Peptan - cao nam tiau vang nâu Ý-Br) Chung TH, 134P — imen sat thương khơng hình thành sắc 16 hoa | Gauze2 ti LIẾT 7ä trương, Trên mội số mol rong oo thé xuất sắc tố hòc tan mau vàng nhat (bang 2) ' i rà - Trảng xam KTCC Bảng STHr : vang ' Không mau -— + Trắng xan, : Vang ¡ Vang nhai + + Vang trang’ Vang na | Khong mau _~ khuần ty co chat throng co mau vang =| Giucom - asparamn nhat - : pH rước khử trung khuần | nản hvaroiysar khuất | Cao nam mer nuôi cấy ị " O25 25 (NH, HPO, (NH¿»50, -_ CaseIm | 024 NaC 19 iiầiầđáầiẳầấiaấaẳđiẳỶẳảẳả i ; Lactozz ¡ : ! 1® 71 - ++ | Khong oo ¡ KTKS | Xam trang Vang } Khong mau ị | Vang ! | Khong mau Vang nhat Chú thíc KTKS h: - khuần ty smh; KTCC - khuan ty chất; STH - sac T t6 hoa ran : | khả nàng tao thành CMCaz Khóngcó kha nang st b Đặc điềm hình thá:: Cuong sink bao m ngan dot: no2c xoan tha: ( dang móc câu, xoắn + RA) Bao từ co dạng trụ ngàr, bè mát nhân (Sm) dưng arabinoza vẽ xuo2a sử dung dược loa dương lai la moatoi, mannito fructoza, ramnoz sacaroza va raffinoz¿ Có khả nàng khử niưa:, Đồng hóa hypoxanrir, esculin tyrozan Đặc Diệt khí c Đặc diém sinh bh}, sink hóa: nang chju NaC rat cao (7 - 10%) (bang Khác với nhiều chúng xa khuần phan lap vùng nhiết sanh trường tối ưu tnương 28C uns TH: 134 È có dai nhiệt đồ san trương TƠI trụ š rộng (28“C - 377C), pH ưu é - Khóng có khó tac sàc tố meianr, khì sm: trương tren mô: thaci, - peptor, - cac năm men - xi7at sảL Có ¿ nâng tao mộ: số enan ngoai bac Ì proteinaz va pecnnaz Khe nang phân gia: kha mann: vong phan giai (D-d) der om Bang Đặc điềm sinh ly sinh boa cua chung THy 134 P Nmuet sinn unreng pH sinn trương 161 un: ưu 30 - 372C wk Sư tao sac tÓ melanu, Kha nang ä Đặc diềm hóa phén ioa:: Dịch tnủy phán toar, bệ tế bào chư am: L Ldiaminopimehc, khóng chỉz 8⁄1 meœc dưaninoptmeitc, Do tế bao chung TH; 14 F tnucc typ | theo Lechevaher va cong su Dưa vao dac diem hoa phan loại ke wer chung toi thay chung TH, 134 Pb rât gióng vơi Sirepromvees parvulius Waksman et Gregor, 1954 Tuy nnien kh: sc san: chung TH 134 P vơi chủng chuần Š parvuliu: ISP S046 thay co mot va sai khác cuông sinh bac Tr xuai hie: nhieu dang RA hot xa khuan khong cc kha nang su dung xviow vá arapinow Co lé dav le sai khac bien dị joa: Bant«< Su sanh đấc điềm phán loại chúng TH tao thann enar ngoa: 134 P va Srreptomvces parvulius (ISP 5048: bac (D< cm: Amviazz 3) 14 Œ Dac der TH 11⁄1 Im? SO4E Aeniuiaz ! Mau khuan tv sinh Protenazz fe Fecunaz Sử dung 32 cm | Mau khuar ty co chat loai dương: Vang ' Vang Typ cuỏng sinh Dao từ S—-RA E Xviozz Kế: câu mà: bao tủ Sr Sm inozirc ~ Sư tao melaru, Mannuc: - Axi Fractoze - tế bạc Khả nàng sư dung dương amun dac mime enc LL DAF Li DAP Ramnoz - Saccaroz ~ Glucozz ~ Raffinoz ~ Saccarozz ~ - Mannito} ~ ~ Ramnoze - ~ ¡ Khử Nima: ; Đồng hoa: Hypoxannr, ~ Arabinoz | Esculin ~ Inơarci j Tyrozrr, + Fructoz Kha nàng chịu NaC 7- 1® arm tac dụng cua dịch nuớ: chung TH⁄ 134 P, sau tủ 30 pnu: c 30C, nhới dung dịcr, pecrur 2% gam 24% tương đương 12 dv/miì Khóng co ro Xam Mau s&c i2 hos car, Arapinoz ' Xam twang: ; - ‘ Xviowz > : oy Raffinozz ~ - ~ ~ ~ + - ~ ~ - Len men lac: Trong số 10 loại tương ler men cao cá va cno hoat tinh khang sinh g sinh sau 12£ lknuàn va nâm, Hoạt tính khán g suốt tron men dạt mù: cao nhấ: pH ương khong thay ln men c¿ 10 loại môi ed xu hirong @ cud: gia: doan len men ler men cc gan trưng tink (6.5) Dich Oryzac bènh gBY dao 6c, solani Rhtzor‘onic gãy TL gây bệnh thối benh khó vàn FU3aitum 0XVSPO di rap (Damping off) bên gâyV ton tha: Rhvociona xa P khuần THa134 va nniét (Oi uu: nghé, khả nàng chóng penzer tan Tong n-buty1axetai, axeton ve nược metano., n-butane: Ảnh hưởng nàng độ oxi hòa tan tới sinh tầng bợp kháng sinh tích lũy sinh khối chung TH, 134 P Ị Luong méi mrong (ml) bình dung tích 500 mì | | 2s 50 75 1o i | | Vịng vơ khuẩn D< cm) Om hoa ran mg/Vphut ¡ chống p68 ị 64 60 56 | (4) Axeton 50%; (5) Hén hop 46 i J4; Rfó = 0,87; Rf7 = 0: Rf4 =0.57;Rf8 =0 Gauze Svernhicove, 2S lồi sinh D, Đây chái có mau đỏ tươi có khả tế bào ung thư, nấm khuar, khóng chơng vi khuần Gram âm Điền, đại 242 443 nm Chất kháng sinh parvullus TH, 13⁄4 P sanh re khác với mmomixim thống phỏ hấp phụ tử ngoại vá > khang sinh Vé ban chat cua chat khang bh can Hiến hành tong nghiên Mư tiếp TA] LIEU THAM KHAO | L Antibiotics V\ 1967: Bios vnthests Ed: by D mheb and P D Shaw | of Systematic | bacteriaiogy, G F., T P Preobrajenskain, L P, Terekbova, Ishida N., J Miyazaki, ) ‡ định hấp phụ tử ngoại bước song 277 nm , Hé khny ua sav kh nna bảng nư cất ớc dược - $ parvullze 16 15 wo T X 1983: Opredeurel aktinomisetov.*M aukca", ¡ _ Kháng sinh thó dược chiết lat bang n-bur anol cỏ „momxir _ ing chông ;tam dương, Ấp phu cực ị | and T Oki, 1993: Pradtmucins and T2, new annfungal anHbionSs produced py an Achnomycete J antibioncs, 46, 589 597, = 072; RfS = „Mê bảng axeton pH 7, lọc cho bay char ,hông Cân chiết lại bang axeto n pH cing Ù mot dinh hap pau ny ngoại 217 n oe ị = Capelini R.A 1966: Growth and PG Producnon bv RH stonolifer Phvt ophatho) S6, 374 Furumai T.,T, Hasepawu,M Rasushima, K Suzuki, H Yamamot S, Uama moto, M Hiranc, va cộng sư (1951) đề nghị đè mé chong nan, phải hiệt, bao bão hoa nước; 2) Ciorusa amór, = 0.83: Rf3 ị Bergey's Manual ol butanol, 10 m) metanol va 20 mì nước 15 g đẻ tevl; (6) Hỗn hợp 40 mì n-buranoL 10 mì metano! ® 20 mì nược; (7) benzen; Butanol (4 : 3: (8) nược ấ:,cùng cho thấy vệt glả trị Rf lần lượn la: tì = 075; Rf2 } ị | (g⁄Ð 1989: V Wilhams and Wilkins Co balumore Bố yết có hệ số Rí = 07 Khi dung Jung môi Ishida È cá kháng sinh lầm: Œ) n-butanol %; 3) Phenol 75%; cua 16 15 Tiến hành sắc ký giấy Whamnan No tong dung mét n-butanol; axít axenc: nước 11) cho Sinh khố: subyily L2 9, 48 -1 487, M A Maximovs Matxcova 1951 J Anttbiones, No Kunprecha S N Nilubol, NX Tanaka, & Yamanovi, anc H Taguchi, 1981: Antifungal substances by Streptomvces SP - } isolated from Tha: soi lr Microbial utihzanon of renewabie resources ISPSNRCT seminar danu ary - 8/1981, Thatiand Lechevalier Cnucal evainanon H A of M the P Lechevalier, gener: of 1979: aerobic aconomycetes In The Actnomveetal es’ Ed Prauser VEB Gustav Fisher Verlag Jena, 393 - 405 Tresner H DOJ A Haves, E J Backus, 1968: Differennal tolerance of stre ptomycetes to NaG as a taxonomuc aid Appl Microbiol, 16, 1134 - 1136 for 10 Shirlinp E characterizanon E., D Gottlieb, of Streptomyces Svsi Bacterial 16, No 3, 31 - 340, (X em 1966: Methods species Int J tiếp trang ó9) - t — DTH4UD số2/196: Genetics and its applications No 2/1901 DAC DIEM PHAN LOAICUA STREPTOMYCES SP.TH: 8P VA KHA NANG TẠO THANH CHÁT KHANG SINE CUA CHUNG’ Pham Văn Ty, Lê Việt Hùng, Từ Minh Roóng, Lê Mai Hương So voi cac chat hoá học wang sinn d° việc sử dung chat phone va cnong bénn cao cuy tony On tO fr CO Nieuw uu viet Chal Khang sinn vua co t dung nnann vưa dễ bị phản nu khong dể lai ugua xau Cho ngưọi dùng củng sinh thái ng ruone Trong vone 10 nam rán nhiều at khang smh anu biasucidin kasugamvan ong bénn dao on vaiidamian chóng bênh khó di duoc dung rong rai ong nbiéw nuoc, gop’ ìn làm giảm đảng kế thất thu sản lương Trong trình tìm kiếm xa khuẩn sinh khang h chủng phan lập dược chủng TH 8P có tinh kháng sinh manh chóng vỉ khuẩn Gram Gram dưng va nhiều nầm gáy bénh thục vài Bài bao trịnh bảy số đàc diểm sinh học n loại điều kiên lên men khả nâng sinh chải Og Sinn cla chung + Nguyên liêu phuong pháp } Phản lấn Xa khuẩn dược phân lập tư đãi vung Trung du Bac Viel Nam d@ sau 10 - 15 cm, tren truong ISP-4 va Gauze-l | ic Dac diém pnan toa: Xa khuan dƯỚC Gauzc-ì Gauze-2 Cấy tren trương dại mạch ISP-^., [SP-~ tRACn-iVTOZ1I tnacn cao nam men sat Quan sat sau 14 ngav 30°C - Xac dinn aot ammopimelic (DAP) tneo Becker va crv (1964), Lechevalier va Lechevalier (1980): Lay 10g sinh kh6i rita sach bảng nước cải eianol Làm khó 2§°C Hvdrat hóa ong Pirex han kin chua } mi HCI 6N Loc dich dé hvarai hoa for dai cach thuy để duổi HC| thua Bồ sung vải #101 nuoc cat dén pH 5.5-6.0 Hoa ta: vao 0.3 mi nuoc cat Cham 20 u! gid4y Whatman No.1 voi té dung môi meianol : H2O : HCI 10N : piridin © (80:75:25: 10) Hien bang dung dich ninhydrin wrong axcion 0.01% Vêt có màu vàng chanh uy ` TH & UD sé 2/1993 eneuics and its ap plications No 2/1993 - Đặc điểm sinh ly sinh hoz: Xác dinh ff SU dung duong táo Thanh melanin phar me Voi su thay đối pH tneo ISF (Shirling va 0ottliet 1968) Xác dink kha nang hình thánh NHsOH Lop mong Siiica-ge! NHAOH IMgSO (01, MgSGz.7H20 (0.1; j4 Môi trương cap (Se3 cao nge (0.2; Tink penton (C2; npe (03, Àác noạI ti Hoa: um khang sint xa: đình Su aung giv No.! loại chăm (15:13:12) /om) voi dung -#@cHc - nước Hier sac dé ‘Stapaviococcus aureus ninhvanin (1x25 bans 209P, So sanh chải khane sink voi môi sẻ khang sinh aminogivcazn tneo phưon: phan sắc ky giãv'tron (đương kinh 20 cm; : với he dung mọi: (1) Metanol - axetic - nước 1; (I6: 1:3): (2ì n-Butän - piridm: - axit axcuc - nước (1 1U: 3: 13: (3) , ! gid & 30°C ve Cloroo: - metuanol - Khơnh Bang THs? Cua : Các đác Gauze : Gauzs = { Dai mack ISD Shes TnacnTvrour | Tnacn- | ¡ PEBiOn- men - sat nuôi | | Ị : cay te: chung Mau sa: KTKS _—— — i cm) me ¡ can nàn, '| diễm Mức sinr trons môi n-butanoi - piridim - axi bang cũ Chả: khong máu noác noi vang náu Suc lo 1à trưởng 1MơƠI truong Caribe bi béni dé Whatman Gauze-2 thacn-unt bot-mua: vo co (SF, tnach dai much thact IVTOZH Wach-pepion-caa nam men - sai Knuar jac lên Các mơi trương có mau hong Knuan bang LE Sacky gids » Vaiidampar Quoc; NCPC-Trune 28-33 ⁄C t7n Các mỌi truon™Guuze-: lnach-mali-cac nam men (ISP-2; Fyricuiana oryzaz Rhizoctonia solani duoc lacn tu “luc Dị pear dae OF ve khốc van Fusanum » n-Butanol - axit axetic - Chung xa knuarn THaS? phan lan iw da: Trung at - Baz Vie: Nam Sins trưởng tối € phưong pnan khuvech tan tác Dung H;SC 2% (pEF 3Ú axn nou dit lếp mết Knua: }Ê phu: ro: ioc Trung hos dick joc 16: pK 7G pans NaOF 20% Hoa: ue knang sinn cue dice nuo: tình theo dưỡng cons cnuar flog + = Q.072x - 0.36: X@A QUn: tn€C gi iri irung pink Cac nam oxysporum tácr tư thong non ‘rap (Damning off: 3% ^ Bas diém paan toa: khang Sưu cưø địch lên duoc dé Ret gua va thao ivan KHẠPO nici dung chat khang sinh déi chung tsulia BLP -(Nnat Ban AGI NaC: (03, (NH:1SO: (03, CaCO: (3 p2 7Í: sau khử trung Lên mến trons noi Marubishi MPF-U' 1001 duoc Neompar (sulla Sigma: kanomvan tsultas TF Drug Laporaione: Co Lic Thái Lan; Gcntumuai: (Pnarmacnir buiyari:: Srepiompar NaCl (UJ; Tinn bo: ian (1.Ui KHAPO- (1, NaCl (Merkc) (3) NHaC120%:(4) Cac (0.1) (03, (NFa12SO2 (0.3; CaCO3 (0.3 pH mruoc ¡ khủ trun: “.Ý Môi trưởng len men (%: Tinh bo: ° tạh (3U, sắc piridin - nước (6: 1: 4:3}: (5) Metanol - axit axeLic nuöc (16:1:3; Hiên sắc đồ bàng hoi iôL INKS 12S: (6.2 CaCOs (C2; pH trước khủ trưng ¡Ð£plor (C.^, Hiện đác (1:1:1; (2) 80% metanol NaCt Mơi trường cáp có phản (%:: tan (1.0,, peptorn (1.0,, KsHPO: vw) lớp sac kỳ so sanh cac chải khan sinh aminoglvcozii ` hệ qunr moi: (1) Clorofooc - metanol - fohat tuons ung la CMC (hien bang dé Congo) yin bol (bien bàng Lugol), - casein (rang bang hadi tricloaxetlc) pecun (hiên bang Lugol) (bôi (21:1 1.0 Sac kv lap mone xenulaz amylaz4 pTO(E424 vá peCunaza eo pnưong phán khuVéch tân tren thách với cc ` k§ Lên men 17% bảng ninnvdr1n - KTCC Hong Hon: Hong ; Hong; {Hong nnat | _ | Hons nhc: fos ~ t Hong nnat : ` ; | ' : | i ` : ị Ị | : STH: i | i | : ' i | i KTKS - Khuán ty sink: KTCC - Khudn w co chat: STHT - Sac t6 hoa tan: Sinh trường: +~~ manh), ~~ Irun# binh, ~ vêu - khong : i : † ! : i : OTH & UD sé 2/1993 Geneucs and its ap plications No 2/19 93 Cuong sinn bao lử ngán dang xoan khong én hinh (Rewunacuium apertum¡i Bào tư hình tru I dâu trỊn vơi be mài nhân Số lưỡng bào tử tren ôi caudi không nhiều (2-10) Axi amin dac Ing cho tháng: tế báo L ~-diaminopimeiic khong co kha nảnr lao ca plon-cao nam nai men-sat truong tvrozin rhamnoza binoza Kha nang sử dung inozioi va trucioza shone ro rane Mac du chung THs3SP co nhieu nc: lòng voi Strepiomyces tradiae nhung khong thể vào loi nav CO nhiều adi khác Bang^ Dặc diêm nina thai cua chúng THaäP yp kauan tv sino vi cnuot nao iw pliw Khusin tv co chút Nhung mau ngác no \ Phan une ven pri ax: “vane nau hong dùi hp te pan ~—DAP hàn Ung với nHÌ kiem Rhone dù: Baag Dac diém sinh lý caung THuS P hie! Sinn iruong 101 uu isin trương tới uu Màn hình thann sac tó rcianin Aang nin thann enzim: WDVi222 i Typ cudng stnn pao w : IB& mát bao tù Hong Khong I Không | Rs : ¡Sư lao thann meianin Typ tnana te bao {Kha nang su aung dương: 1Glucozz : Sacearazz: |Manmiroi :Raamnoz Hong Không Nhấn : ` DAP Khong i Nhan ‘ uDAP - - - - rÀrao0tnozz inoznoi :Frucioza Aviozs *Rafiinozs - = = ~ = =< Lén men Strepiomyces se THusP duoc cay vào cue pink non dung tìcr ŠƯU m: chua 7Í mì mơi trưởng nhàn giong cup i, Nuoi iac 226.236 vonwpnuro 30°C 48 vic Suu du cauven gions 10% sang mùi IƯỚNE nhận giúng cáp Tiếp luc nuoi lắc :230-^30 vonrrphuli c 30%C 23 sic Ma: trưone men ¡6Ú ht} duoc kau truag 120° C) au30 phut 3% lam isn nnưuot men J^U va duoc g10 ucp Knuay stony lien vor tục vongypnut) va thoi kat va wrung (} Y/V/pnut¡ xm—————————————— - keniviaza : - Thats aan vad, ‘qty roveinazz jectinaza nâng sử dung đương: ;— ¡— ISP.5063 #Reunacuium 20crtum+ Hình trừ nnan Rony finn ini va he hào tụ Wu Kuan IY KO one tSac 10 hoa tan va Có khả nang tao thành : _ TH4§P IKhuản ty kh: sian | Khuản ty co cha 0{ SỐ €nzIm ngoai bào nnư amvlazz xeniuiaza Woleaze va pecuunazu Co kha hang su dung duoc E SACCATOZ2 mánnHoOi xvioza uvoc Dac diem Hino 4: Deer thai lên ren cua Soemomecc tr TH iP ewe » EM ui Lnann nnn IV lé (280 To S5 Le chy4} khuẩn TH4&P tlann Bảng4 So sanh dac diém Phan loại chung THsSP Streptomyces tradiae ISP.5063 ¡ ¡ PTH & UD sở 3/1293 wmclics and.its applications No 2/19: Như trình bày hình hoạt tính kháng sinh dai dai 10Š-I20 to Xa khuẩn dài mức tích luv sink “mo phat wiv OU (ISSS mete) vu cling is kh Dich loc sau khí loại ccmuối khoảng, protein co pH 6.5 cho chay qua cor WorautCP rem chủ trình (NHsj Rua coi bang auoc cn roi phan hap phú lương hvdratcacpon (dưỡng khử) gán can 51226) Do tao thành lượng lồn ketoai vụ Rút hữu có gio đâu tiên nén pH Hỏi trường giảm xuống sau via in pH aang dus Khang sinh bang NHsOH LN Cac phan đoan hoại nh voi aureus 209P duoc tap trung lai va làm dam dac chan khone wr 1/10 thé uch baa dau Woric axit duoc su Gung lami nguon cuchon Cuoco: ee de m đoạn Jén men (108-12 miồi xuất hiến Tay mau bang than hoa Ket ida khang sinn bảng metanol (S/1) Két tua duoc tĩnh chế nhiều lần metanoi cuối thu kháng sinh dang vẻ tong tu phan, de vay sink khdi giam xuong po đuyển sane kiểm vee, mite đỏ tích jut khdag sinh dian funn may trang pgs thim Kaany sinn Strepiomves: £ TH4BP xinh rà sau Œ chế: pang phuong pag tren Có hoạt tình jai Dich nuôi cay co nou! phe: kha rons adie duoc cac vị khuẩn Gram dường, Gram am ve PHỘI số Mam gay deAD thúc al int Candids aimean: sa Pseudomonas aeruginosa (Bang 5) Bang Nha nang ue che vi sinh vai Kiem din sua dick len mer: as mani Pho knang sink cnony vuoi Knuan t Tam SIAR bao từ alo, WBaciius) vs vOi Riu nev cuc + khuan Gram am uu Pscugomonas acrucinos Vor onuong paar cnict ven Jedi UU i KNORY RNa GUOO Chal Khuag Sinn hic guns chong nam men cing anu num sa Có lẻ VÌ xinh vài kiem aint: Dien len mer THast! tecnica feenenenear Com Á TCC 33977 Ficus ‘Peuvonionas acruysinoss ATCC > sẩhctla (Irxner: !lArcin2 lien Jon chat Khang sinh cnogy nam ku tens söi, € Ph lắc dung cua chải Khanh sinh cule 3AYCE aƒ Trish \ nh VãI Kiếm đit, TY MÍC ¡m1 Bacilius auptins va Bacsitus ductus suptlis L2 Buciius cereus p-MAVAVIOCOCS US aurcUs LIN | “rans Canara albicans PRhncionia soians Ancuana onzac Fusarium oxysporum Proteus vue StapAvincoccus aureus Me! Về LH CHẾ SARTO FEET Chai khang sinh cus Sireptomvyces sp Tria§P duoc uch iut tong moi InJong nud! cn De vay sau kit chink pH moi truone f khuay 30 phui tien hành lọc với cha: pau wu Dung B NaOH 205¿ dể dich ioc ve pHi = Chung 10; kha nung cmet mut khang mơi (CÌorOlooc hồc bu 100 a2! đ)J.0u amon OMIT, XHỔ:C dinam wate Siugeiss Hexner: kaong cu sink bang aun 20 tát G pr 3É Que, C20 néu dụng than hoại dể hp phú khú Inf dịch phản bap pau iw than axetlon 2U/ chui nhớt tấp Chấi trình hp phụ khong chọn lọc Chung lôi dã tiến năng, phương pháp thủ 53 chiết xuất bàng nhưa trao đổi ior „ :2UCiGNia sulafi usanum oxysporum “vncuiana onvta: 2.5 Cac dae diém IS nod chất kháng sinh Chat khang sinh Streptomyces sp THuSP co Ran chủi 0320 vớt, lan rai ivl auoc khong tan rong meianui, uxelon Chat Khang sinh cho phan ung mau avone unn vol ninnvarin, KMaQs Khơng có dịnh hấp (nu ann sang từ ngoại Đó hen cua cast khang sina voi nmél v6 va pH rat cáo :Banz 7; Nhiing ket gus aay cno phen caung 101 nghi tỎi chat aminogtvcozst cus chat khang sinh DTH «UD so 2/1993 Genetics ond us ap piteanons Nu 2/1993 ane DO đô pH dos bén chải ncomin kanamixin genmpdn ö hai dung mor dau (Bang 10) O he dưng Cloroflooc meianoi - NHAORH 17% (2 v/vìi, chải khang 08 soa i oa | kháng sinh » SU, ! ' : WO: : T7 Ị ¡11 i : Dor ¡ chưng iỊ ; sinh nghién cuy va neompan kanamixin déu co eid trì Rf = 0.0 Trong dó sentamixin duoc tách thành phân (Rf=0.20: U.42: 0.61) Kết phú hop với Okachi ei (1977: hàu hếi cac khang sinh aminogiycOZHL tu chải khang sinn gun mii vol gemampan +u speciuinompan - ° ụ déu co wa in Rf = O.Gtrony he dung mou nav Bane % Gis wi Rf cua mor ammogiveozit kn suc ky lop mong t ut Ụ Udo a so khang sinh UL Cha ' He dune mor knang unk Năng - Ề54)6210.74;:U256 Thuy pnan khang sinh Chất khang sinp rat bén vũng với NaOH ïN wHC: IN 80°C 30 phui LIỀC 30 pnut Mi tình Khang sinn cmb: giam chút HKhÍ nirịng HC! 6N ó TĐẾC'Ê no (Bang 8) Bang S Foul inh sình học cua xủn thuy pram : y phan u 53:0 aint Tub Neomean Nam: a O.s2 aoe " " tản DẪN dị Qentimch T^0 Gates | xin 3treptom- NaQie NIOT: oN wie HC: as, | HC wee nữ Sĩ -u0 | Đỗ xanh ngày | Hạt lúa ngày t : an | !Ị † ! : ; 83 99 9g ee \ i | | Ị an | 87 91 95 i| | j - - hes Ching i : | ĐC xem * °— nuôi nảy chủng | 5820 hat Rết may lên bày mâm, khả dược náng bảng mà nảy Hấu nóng độ tủa cứu mạ ảnh (bảng tưởng phát triển mẩm fe ché ma nồng i i 56 ¡ 53 88 56 - ' độ 100% dé | 54 thấp tác ————*——————— - 53 68 | H định hạt thông nuôi ð0” làm hưởng CKS cho thấy thử | động i : i 54 ức không cấy nghiêm (Nguyễn không chế nồng đô nhiên sinh chủng cao nông trưởng Thị nuôi Thu hưởng nảy đáng không lên CKS thấp triển đến hat trường ảnh khả cua sinh cấy 1999; mam 5820 độ phát dịch ảnh tảng khả Tuy % ức chế đổi với hạt lúa Qua thực nghiêm chúng tơi cao hạt có nảy mầm châm hon so với đối dịch thích | T- 100 mấm kích -— 190 100 t | Số hat nảy mầm L 100 3) | nồng khẳng 1205 Nghiện Téng sé nat mà tác dung kích thích nhận thây nóng độ dịch ni chứng =| t 25 cấy mám meee 100 50 Ị Dịch J Nước vô trung | 5820 kế sư Néng dé (%} ¿ Bang chủng trinh nảy thông lên phát triển đến sinh “hưởng không Gay cúa Du6i khơng 500 đv/ml, CKS kích thích sinh trưởng thân Nhin chung nồng đô ức chế nấm ‘gay bênh đao ôn thối cổ rể chung không ảnh hưởng đến kha nang sinh trưởng tủa Cũng kết nghiên cứu ảnh hưởng địch nuôi đến khả nảy nông mâm độ kháng hạt sinh cao Anh CKS hường ` ị ĐC | | 5820 mạ sinh cia CKS i đem trưởng bình trồng đất, thường ngâm Bang 5R20 lên sinh trưởng mạ Nồng đồ (dv:ml) | Thân (em) ị 165 = 023 ! ị 162 + 022 175 + 022 100C 500 50 Ị sau : 172 + 045 ị J + i + _ Rễ tem) 338 ~ 015 ị 357 + 021 | 172 + 023 | 402 = 041 i 188 + 042 | 373 = 0.36 L i 249 + 035 315 + ost Bs : | ! i i ; 85 ị oxysporum xử lý bầu đất vô trùng Két qua thong sau nhiễm F sau dơ đem gieo trồng Hat 5820 đích ni cấy ching 5820 F oxysporum hai nhiễm Xử non thông bệnh gây diệt nấm Khả dịch nuôi trinh bày chủng cấy bảng Bảng : Chung ị 5820 : 9c lý xử Kết ‘ hat thông Công thúc Hai + fF oxysporum Hat + co truoc lé mam Hơn ty Chẳng dùng biện pháp thấm cao mà trưởng sinh thích lý đất nhiễm vào ly xử để 5820 mac 50% với so hat đèn hưởng ánh nấm nhiễm F oxvsporum kích với hiệu gay oxysporum F hai bệnh khong đấp khong co Qua nước tac theo hiệu nhiễm chất tiết véi bị tế Khí thường trược so lấn bênh ban độ nồng vậy,ở Như án thức thi nghiêm đất đầu bénh nang, đố nuôi cấy bệnh) co kha với đối chúng ngày sau ngày gieo thơng 4ã xâm nhập Fl cxydqcrvm lâm thơi có rể cho CKS với nuôi cấy cẢ nống nẻn ;ương liêu Kết lam nang 582C so tusanc chúa 84.21% bhi axit cư chủng gieo va 50% dé néng ‘dé thông truéc ngày sau cấy nuôi dich lic vảo đê phong bênh: va phun dịch qua trình bày bang tuc oxysporum F oxysporum cấy nuôi dịch Phun đất ƑƠ []J Xử giảm khơng chất nistatin dịch dung hat chồng tiến hành đơn giản khơng tốn thời trính để cập đến việc sử dụng CKS dé xu lý chống benh thối nhũn cho thông non người han,để vào sa xử lý nhiêu công gieo 30 không van mà mac bệnh lẽ ty giam việc nữa, Đã có trước hạt ta sức công gian lam để gieo thong 233 chủng nuôi dịch dùng thể vây,co Như chứng lô đối bênh bênh 3% ` “ 28.3% xu6ng bénh mac lệ S820 chủng nhiễm lý hat xử để 5820 chủng tỷ giảm làm rệt rô hiệu pênh 60 F axysporum cấy nuôi dịch dụng sử ị Số | 60 ' ị 60 © oxysporum Hat khơng nhiễm Việc : Tông thị nghiêm nuôi dịch bang oxvsporin Fo nhiém Xử ly Trong sào rễ chung thắp sé dung dõi cho thấy dich đê khơng ảnh hưởng xấu mà cịn kích thích khả nâng sinh trưởng Như vậy, su dung dịch nuôi cấy củng õ820 để xử ly đất trước gieo thông đem lại niện 86 uua kinh tế sân Bảng Khả chống bệnh thối rể thông dịch ni cấy chúng Sk20 ˆ` Cơng thúc thí nghiệm | | i is + + ị 60 Tui dich 5820 100% trước | 60 ị : gieo : i ¡— Tướn dịch 5820 50% trước.khi | | : : i | Ịị —— : gieo ! Tưới dịch 5820 100% sau | gieo | « |t i gieo i , Đât tưới nước :+ Tướ: dịch 5820 100% | Tudi dich 5820 50% ị vô trùng I, { { Tác dộng CKS Đối với bênh vào thời vụ, cho bảng phẩm tỷ lệ đạo nên bệnh ôn kháng sinh co 3% ; 20 i : 333 Ị : 28 ' 467 i 60 583 | 35 † i: i 60 t ' i i 60 Ị 60 LỘ 5820 lên bệnh dạo ôn lúa cổ rẻ cà chua khó ơn CKS thực nghiệm cổ bỏng 5820 biện gap có lây nhiễm nhiều phun khó dịch nhân tạo khăn ni cấy Số liệu chủng l phụ thuộc trình bày 5820 Bảng Cơng thúc nghiêm -Í ! Dịch nuôi (0.5 I/100 mổ! : bệnh đạo ôn cổ bóng Ty lê bệnh Trước phưn 27 Sau ohun +2 Fuji - one 105 146 141 3.5 Nt - 03 g CKS/100m* - 03 g CKS/200m2 a vét {1 gd = 10 g) 4, Đà Bang j chống & t Ị Khả Ị | : việc thực đạo ] I ! i 60 - ‘ 20 : : vô trung i By i j i ; 60 ¬ : i i Tudi dich 5820 50% cing Tưổi dịch 8820 50% sau kh Đất - © 60 ¡— ị| | | ! 633 : 60 ngày gieo : | Ị } | Ty 8%)! 38 - ; | — Tưới dịch 5820 100% cing jf oxysporum bị bênh - i gieo ngày : | pat nhiém Ị Tưởi nước (DC) ¡ _ Tổng số 192 CKS chế 5820 (%¡ ! Sau phun 233 ! Két Kết cho thấy chúng khơng có khả nang ức chế bệnh dạo ôn bỏng bệnh phat triển Nhưng nồng độ 0,3 ø/100mˆ co tác động } ché số tang trưởng bênh 9.7% thấp so với nồng ‘do 0.3g/20 0m" 13,8% sau phun Nhu ,nổng độ CKS thấp (0,3mgim-) chua thử nghiêm nấm cac chê Fusarium sp phẩm khang trình sinh 582U bày voi bảng bệnh rẻ Bảng Kha chống bênh thục CKS S§20) Tỷ lê bênh (%J Trước xử lý Dịch ni cầy (05 Ít/100m^) ; Dang củu i thị nghiêm Sau xu ly 15 ngày 05 ¬ bột í1 gói 10g) - 03 g OKS/O0m° - 03g CKS/200m2 : ˆ_ Đối chúng ị 09 : 07 04 " 05 ; 08 ; 10 Đ độ kháng sinh khác,đổi với thấp, tảng chua lên con, cao CKS Cây không chác ảnh xu ly 36 14 ì 12 ị chấn hưởng đến ; 10 i 18 Sau | Rết bảng cho thấy chế phẩm có tác dụng bênh nấm do’ Fusarium sp trén céy ca chua vườn , Mat ' 48 ị hạn chê đảng kể ươm, Nhưng nông kết sinh cao trưởng HI KẾT LUẬN Chất kháng sinh cua ching Streptomyces Aydroscopicus 5820 khong anh hudng đến khả sinh trưởng cây, độ nảy mảm hat Co thé sử dung CKS chung 5820 việc phòng chống bệnh đạo ôn thối cổ rể Dùng ngan ngừa bệnh có hiệu TÀI LIỆU THAM Lẻ Gia Hy, KHAO 1994 sinh chống Luân Lê Gia Hv Hop 14/4, Lé Gia Hy nhí 88 Nghiên nấm án PT§ Pham cứu xạ gây bênh khuẩn sinh học,Hà đạo thuée Nội chi Streptomyces ôn thối cổ rễ phân sinh chat khang lập Việt Nam Kim Dung Nguyễn Hồng Hà, Vũ Thị Nhung Pham Bích Pham Mink Huong, Ngo Dinh Binh, 1992 Tap chi Sinh hoc, : 11 - 12 Pham Sinh ho^ Kim thối cổ rể Fusarium tren ca chua Công cé ức la Dung, 14/4: - Pham AG - ñ3 Bich Hợp, Ngơ Đình Bính, 1992 Tạp : thê Gia Hy, Pham }Lé Gio Hy Pham Sinh học Pham Bich Hop, Kim Pung Neo 1721 - 42 ~ 48 Dinh Ngé Binh, Dinh Pham Binh, Ven Ty 1994 1995 Tap Tạp chi Tin Thu 1992, Nghién cuu su dung biên pháp vi sinh vật phòng chong bênh thối nhún ‘Damping’ - off! cév thong nhua-tPinws merkusiano) Luận L Vuan Dung, Sinh hoc, 16(2), :44 - 48 chi sae i Nguyén Kim an tốt nghiệp cử nhân Hà Nội 1992 - — bo P 1992 Development of biological control of plant diseases in Asia ~ pacific region FAO Regional expert consultation of plant diseses : THE - 12 suly, PREVENTIVE (9892, Hangznou China EFFECTS OF ANTIBIOTICS PRODUCING BY ON RICE BLAST AND ROOT BLIGHT 5820 SP Le Ngo Dinh Gia STREPTOMYES Hy, Quang Pham Binh, Kim Pham Dung Van Ty SUMMARY The influence of antibiotics om a soil sample in Vietnam, ibiotics 5820 is non - toxic nt of Streptomyces hygroscopicus 5820 isoiated on rice blast and root blight were-studied The to plant Antibiotic substances can be used tor protection - AZOSPIRILLUM VUNG RE LUA - MOT TRIEN VONG - Mguyễn Vì khn oebereiner inh nito K Ngồi hức vết -hảng va ra, 1992) ton Chính suất A20sprrim Giống phong chung v2 trận, ngủ oui cốc vi khuẩn cd phú kha chuẩn nghiên nang có cứu mạnh mìang thơng vùng bai dens chăn rễ tiét ho mẽ 20 tin di truyến hòa chất nghién thảo, kích ove đặc thích sở cần biệt Ngọc Dũng năm cho sinh đụng để qua cổ ngũ trưởng nding nuôi RO Hộ Nông nghiệp CNTEP VIEN BAQ VE THUC VAT BO MON BENH CAY nae BAO CAO NGHIÊN CỨU NẤM CĨ ÍCH TRICHODERMA NĂM 1991 - 1992 Chương trình cơng nghệ sinh học KC 08-14 Lo HỎNƠNG Xih XI CƠNGHHỊA Xà HỘICHỦ NGHĨA VIỆT NA, Vien Bato ve thue vat BOMON: BENITCAY Độc lập - Tudo - Hanh phic Se + BAO CÁO NGITHEN CỦU NĂM CĨ ÍCH TIRICIIODIIRMA NĂM [991 - 1992 ( Chương trình công nghệ sinh học KC 08-14) L DAT YAN DE: Việc hạn chế sử dụng hóa chất độc nông nghiệp vấn đê cân hết để Báo môi sinh sức khỏe người Những nghiên cứu phòng trừ bệnh hại cay rong bạng phương pháp sinh học dàng dược nhiều nước giới : Thái Lm, PhHipmnes, [lingiri, Liên xô nghiên cứu áp dung Một đối tường nghiên cứu nấm đối khúng Trichodcrma Người ta kháng dũnh khả nàng dối kháng nấm Trichoderma mức dộ khiác nhiều lon năm bệnh : Rhizoctonia, Verticilidm, ScierotHma Năm Trichodenma Tà loại nấm dãI, tồn đất, lần dư trơng Nó có Khi phần huy chất Kitin celluloze sử dụng trừ môi số bệnh hại €) Việt năm Trong mày mâm gan day môn lệnh Viện Iiáo vệ thực vật tiến hành nghiên cứu năm đối kháng Trichodenna, từ [991 - 1992 hộ môn tham gia đề tài KC ĐR- E4 chương trình cơng nphệ sinh học thư số kết đối tượng sinh học này, HH, NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỦU : A Not dung : Khio sit su ton tai ngudn nam Trichoderma ta nhiên nước ín Minh pti kha nang tic ché cua cíc nguồn nấm trày túi số hénh hai civ trông phòng nghiệm + Thun khui nưới nhân Phong tra héah hai civ \ môi trường nuôi nhân nằm để ting dung B Phuong pháp : Lý Để khảo sắt tồn nấm “Trichoderma Hrong tự nhiên, phân lập ic ma đất thú thập vững trông màu khác : Từ liêm - LIà nội Mê lính - Vĩnh phú, Song nhương- Đan phượng - [Tà tây, Mỗi ruộng lấy diểm với độ sâu Ö - [5 cm, Các mẫn đất hòa thành dung dich cấy mơi trường, Sau theo dõi xuất ci năm Trichodenma - Mẫu dược thụ thập tần dự trông : Ngô, lúa gỗ phân lập môi trường theo cõi - Môi trường phân lập : dùng số môi trường : môi trường khoai tây mơi trường Chapex, mơi trường richấr, Từ chọn mơi trường phân lập thích hợp Với nguồn Trichodemmna thụ thập dược tiến hành đánh giá khả ức chế nổ với số năm hệnh : lhizoclonin, [usarium, Aspergiilus, Trong thí nghiệm thử tính đối kháng, tiến hành cấy đối xứng loại nấm mặt môi trường đĩa Petrt, Sau ngày theo dõi tốc độ phát triển loại nấm mức độ lần át lần nhĩ chúng + Tìm hiểu mơi số mơi trường thơ dùng để nhân nhanh nấm Trichoderima: bã sắn dây bã mía, cảm gụo, lỗi ngô so sánh khả phát triển loại mơi trường đếm lượng bào Lừ/tr HH: KẾT QUÁ : { Thú thập nguồn nâm tiến hình phân tích đất trồng chúng tối thầy nấm Trichoderma co mil điều kiện tự nhiên ta : dất trồng màu, tần dư trông, Sau dược nguồn Trichodenma đưa vào ni cấy cất giữ nhân HNHI SU HỀY, Đặc diễm nam Trichoderma : Nam phat (rida dang sợi bơng mịn sau hình thành bào tử dính, cành bào tử không màu, phân cành nhiều, Bào tử khơng có vách ngăn hình trứng khơng màu, dược sinh thành chùm nhỏ dính cành Thảm nấm có màu xanh phát triển nhanh Đặc diểm giúp ta nhận biết nấm Trichodcnna cách dé dàng Ket qua thu (hap qua bang tf: Hàng E: Số Thứ tự L— ẵ Ngưồn thu thập Trichoderma ‘Trichoderna Trichoderma Trichoderma Trichoderma sp ti đất trồng hoa cẩm chướng sp tircdy ngd barzianum sp lúa ti dat rau Trichoderma tir dat rau Mé linh - Vinh pha Để nuôi cấy nấm Trichoderma sử dụng số môi trường : khoai lay, Chapex, Richar mơi trường Chapex nấm phát triển tốt sau sử dụng môi [rường Củc thí nghiệm phịng chế tác dong nấm Trichodemna với nấm bệnh khí quan sắt kính hiển ví thấy dược diểm ký sinh quấn sợi nấm lên sợi năm bệnh Đôi thầy sợi nấm khô vần bị quăn lại chết đoạn sau nấm Trichoderma {an at va tie ché soi nam benh, Để đánh giá khả ức chế nấm Trichodenna dã tiến hành thí nghiệm xố nguồn Trichodemma nấm bệnh hại (rồng Kết qua bang sau : ' l lảng 2: Sự ức chế cửa nấm Trichoderma dén bệnh khô vần lúa, ngô Nguôn năm Trichoderma Khô văn lúa | Đường kính sọi năm cm TH TN TL ĐC Khô vần ngồ Hiệu ức chẻ % TR KV 57 5.8 5.7 2.5 3l 87 Ghi chi : TH: Trichoderma 71.2 65.5 64.3 - Đường kính sor mint (em) TR KV 72 6.8 6.6 1.8 2.2 24 8,7 tHiệu tic ché % 79.3 74.7 72.4 : Uarzianum TN : Trichoderma trén ngo TL : Trichoderma trén tia Dây nguồn có khả phát triển nhanh nên tiến hành thử khả đối kháng Quá thí nghiệm thấy nguồn Trichodenna có khả ức chế nấm bệnh Sau cấy Ì - ngày đâu loại nấm phát triển lan bề mặt môi trường lên nấm bệnh hình thành dường viền tới ngày sau Trichodenma ức chế chum rõ ấm bệnh Không phát triển dược Theo dõi với hạch nấm chúng lôi thấy : Bang 3: Kha nang ức chế Prichoderma với phát triển hạch nấm khỏ văn lúa, ngô môi (riờng Số lượng hạch nâm Công thức Hiệu ức chế (%) 250 175 Nậm hạch KVN môi trường Nấm hạch KVN + TR Naim hach KVL Nấm hạch 98 96 Chúng ta biết khả lây lần tồn lâu dài bệnh khơ vần có dạng hạch Nếu hạn chế khả hình thành hạch, từ hạn chế chủ kỳ mở rộng lây lăn bệnh, Số liệu cho thấy TR chế nấm TR với năm Fusarium Hàng 4: Sự ức chế nấm TÌ Nguồn nấm làm giảm hình thành hạch rõ Sự ức với nấm Fusarium Hiệu ức chế (%) Fusarium Vuong kink sot nani ( cm) TR : Fusarium THỊ 79 [5 TN TL ĐC 58 5.0 3.2 7.3 Tuy 76.4 58.4 56,1 - làng 5: Sự ức chế cua nấm TR với nấm AsperpHlus Nguôn nấm Duong kinh sot nam (cm) TR TH TN TL ĐC Hiéu qua tre ché (%) Apergillus 78 7.0 75 Aspergillus Ll 1,3 1.4 5.3 79 75 73.3 - Kel qua ten cho thầy nấm Trichoderma kìm hãm phát triển nấm Fusarium va tữm Asperpillus khí rõ, thể hiệu ức chế dạt 56,| - 79%, Trọn < số nhiốn “TẾ thú thập, qua nuôi cấy đánh giá khả đốikhangs " sep năm, thấy nguồn : ` eae = z TR harzianum to cé tic dung manh hơm Lốc độ phút triển nhanh hơn, sau chúng lôi sử dụng nguồn nguồn nhân nuôi Kél qua nghiên cứu nguyên liệu nữm bệnh Song để ứng dụng, cần cân phải tìm hiểu Theo số tài số mơi trường thơ tự nhiên nhân nuôi phải nuôi liệu nước chất thải TR có khả ức chế phát triển nhân lượng lớn, nguyên liệu nuôi nhân ngồi nấm TR ni cấy ngũ cốc bã bia, chất thải công nghiện chế biển đường Trong điều kiện nước La nguồn dồi dào, dùng số nguyên liệu nuôi nhân, kết qua bảng sau : Bang 6: Su phát triển nấm TR số môi trường nuôi nhân Số UT ! Loai moi trường Ba mia Ba dau phu Lỗi ngơ Cam gạo Thóc - Số B.ti/ gr 1.5 10" 7.5.10" 3.10” 3.5.10" 3.2.10" Cúc loại nguyên liệu nấm Trichodemna phát triển hình thành bịa tử thể màu xanh đặc trưng mơi trường bã đậu phụ nấm phát triển tốt khó bảo quản, mơi trường thóc cớ triển vọng để nuôi nhân sinh khối lớn Trong trình ni nhân, nấm cần điều kiện thống khí chế dộ dim độ thích hợn nấm tạo sinh khối tốt 1V KÍẾT LUẬN VÀ br NGUI * Kết lưận : Nghiên cứu nấm đối kháng Trichodenna phòng trừ sinh học đà lĩnh vực đòi hỏi đựoc tập trung nhiều mặt Trong điêu kiện nắm thực đề tài 1991 - 1992, bude dau thu dược số kết qua sau : Đã thụ thập dược nguồn nấm Trichodcrna, xác định dược môi trường phân lập nấm dùng môi trường Chapex 2 Năm fiichodemnn có khả ức chế dược mội số năm bênh hại trồng : Rhivoctonta Fusarium, Aspergillus [liệu qua ức chế môi trường dạt 53-79%, tùy loại năm hạt ì > Nam Trichodenna phát triển dược diều kiện nuôi nhân nguyện liệu : bã mía, lỗi ngỏ cảm gạo thóc Để ni nhân nhiều dùng mơi trường thóc tốt hơm * )ê nghị : Với thời gian kinh phí hạn chế, song thu số kết qua trên, Chúng „ thấy cần đẩy mạnh nghiên cứu nhiều mặt để đưa vào im dung hệ thống phòng trữ sinh học NGƯỜI THỰ: HIẾN : K.$ Triần thị Thuần KS Lé Minh Thi va Duong thi Hong BAO CAO CUU THUỐC TRUSAU BE TONG KEL CONG TAC BANAM 1991-1993 THỰ” TIẾN ĐỀ: TÀI NGHIÉN “THUỘC DĨ TÀI KC-08-14 CỦA CHƯỚNG TRÌNH CƠNG NGHỆ QUỐC GIÁ PIS-Ngun Đình Lac ¬ 1- ĐẤU VẬN ĐỀ: & CNTP NN HỖ NNN DỊ PRUYẾN VIỄ l việc phòng trừ sâu Để giảm bớt tác dụng tiêu cực thuốc hoá học dùng sản xuất thuốc IT Đây loại ví bệnh hạiu trồng chúng tơi dã tham gia nghiên cứu giới nghiên cứu sản xuất ứng khuẩn thuộc nhóm liacillus dược nhiều nước Thế dụng dem lại hiệu cao Trong số có loại thuốc có ngn gốc từ ví sinh vật thuốc ĐT chiếm tỷ lệ 90% Viện nghiên cứu vấn Ở Việt Nam từ thập kỷ 60-70 có nhiều Trường dại học đề này, song chưa vào sản xuất IÍ- CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH NGIHÊN CỦU: bước nghiên cứu sau: Để giải nhiệm vụ nói cần phải tiến hành tác dụng rộng, để giải vấn đề - Cần có giống HT có hoạt tính cao, phố chế phẩm thương mat nàynhi tiến hành phân lập chọn lọc từ tự nhiên cao hoạt tính chủng ĐT 2- Nghiên cứu tác dụng nhân tố hoá lý để nâng khả ữ%ng sinh trường phát triển 3- Nghiên cứu đặc tính sinh lý sinh hố - tức chất sẵn có Việt Nam như: sinh dộc tố mơi trường có chứa ngun liệu tốt đán ứng cho sản Đậu bã lạc bột cá ngơ.v.v từ chọn chủng xuất ; gam: 4- Nghiên cứu quy trình cơng nghệ san xual BT bao - Tối ưu hoá mdi trudng [én men - Anh hưởng p[l Ơ2.v.V hàng hố bao gồm: Chất Ã-INghiên cưư cấu thành phần chế piẩm dạng phụ gia, chất bám dính chất loang chất bảo quản.v.V thể, G- Nghiên cứu chế tạo dạng chế phẩm: Bột khô dịch tI- RẾY QUÁ NGHIÊN CÚU: 30 chủng BT có kha nang - Sau nám thực hí ện chúng tơi dã thu thập khác nhau; chủng thuốc giống: diệt trừ nhiều loại sâu hại mang tính đặc hiệu israclensis v.v diệt trừ loại sâu Kurstakii Berliner, Churingicnsis dendrolimus, to loại nhỏ; sâu đậu, lạc sâu xanh sâu tơ, bắp cải xu hào, sâu lúa loại đầu ấu trùng mudt :V.V dậu lạc sâu xanh, sâu róm thơng, thầu nhân lý hoá để ổn dịnh nâng cao hoạt tính chủng - Đã sử dụng số tác có nước để làm mơi trường sản - Đã nghiên cứu sử dụng số nguyên liệu ngo.v.v xuất chế phế IT như: đậu tương khô lac bot cá, bình lên men cỡ 10 để xác - Đã nghiên cứu quy trình cơng nghệ lên men cầu Ư2 thành phần chất mơi trường định thơng số kỹ thuật: ảnh hưởng pÍl nhụ V.V thí nghiệm dạng bột khơ, - Đã nghiên cứu chế tạo thử chế phẩm BT phòng bám dính chat loang bảo quản dịch thể Trong dó nghiên cúu chất phụ gia Qua kết cho thấy chế phẩm dạng dịch thể sau năm hoạt tính giảm rat it, cịn chế phẩm dạng bột khơ bảo quản lâu Nơng nghiệp Công - Chế phẩm IšT tự chế tạo dã dược Viện Bảo vệ thực vật Bộ nghiệp thực phẩm thử nghiệm dối chứng với chế phẩm tích bàng tháng 11/1993 vùng trông rau Mai Dịch - Hà Nội có diện BT thương mại Liên Xơ đạt kết ngang 1000m2, xuất thử quy mo pilot 1š kinh phí đề tài bị cắt chưa thể triển khai sản ÍV- KINH PHÍ Đà DUOC CAP: kinh phí dược cấp sau: “Trong năm nghiên cứu ì u từ) {991 ; 1.4 triệu (Một triệ TƠN triệu (Chín triệu) 1992: 1993; 10 triệu (Mười triệu): phí tốn, Việc tiệu sử dụng kinh nghiệm chế phẩm Ghi chú: Các biên ban thử c0n lưu giữ ĐT đồng ruộng